Gastroprotektiver Wirkung von Johannisbrotbaum (siliqua L. Ceratonia) gegen Ethanol-induzierten oxidativen Stress in rat

Gastroprotektiver Wirkung von Johannisbrotbaum (Johannisbrotbaum
L.) gegen Ethanol-induzierten oxidativen Stress in Ratten
Zusammenfassung
Hintergrund
Wir wollten in der vorliegenden Studie bei der Wirkung von gastroprotektiver Johannisbrotbaum Schoten Untersuchung wässriger Extrakt (CPAE) gegen Ethanol-induzierten oxidativen Stress bei Ratten sowie den betroffenen Mechanismus.
Methoden
Erwachsene männliche Wistar-Ratten verwendet und geteilt in sechs Gruppen von jeweils zehn: Kontrolle, EtOH (80% v /v, 4 g /kg bw
), EtOH 80% + verschiedenen Dosen von CPAE (500, 1000 und 2000 mg /kg, bw
) und EtOH + Famotidin (10 mg /kg, po) Die Tiere wurden peroral (po
) vorbehandelt mit CPAE im Laufe von 15 Tagen und berauscht mit einer einzigen oralen Verabreichung von EtOH (4 g /kg kG
) für zwei Stunden.
Ergebnisse | die farbmetrische Analyse zeigte, dass die CPAE eine Bedeutung in vitro
antioxidative Aktivität gegen ABTS und DPPH Radikale ausgestellt. Wir fanden heraus, dass CPAE Vorbehandlung in vivo
, EtOH-induzierten makroskopischen und histologischen Veränderungen geschützt gegen in Magenschleimhaut induziert. Carob-Extrakt Verabreichung auch geschützt gegen alkoholbedingte Volumenmagensaft abnehmen. Noch wichtiger ist, haben wir gezeigt, dass CPAE EtOH-induzierten Magen Lipoperoxydation entgegengewirkt, umgekehrt die Abnahme der Sulfhydrylgruppen (-SH), um ein Wasserstoffperoxid (H 2 O 2) Ebenen und verhindert den Abbau von Antioxidantien Enzymaktivität von Superoxid -Dismutase (SOD), Katalase (CAT) und Glutathion-Peroxidase (GPx).
Schlussfolgerungen
Diese Ergebnisse legen nahe, dass ein Potential CPAE gastro-protektiven Effekt gegen EtOH-induzierten Ratten in oxidativen Stress ausgeübt, was zum Teil auf ihre Antioxidantien Eigenschaften.
Schlüsselwörter Magengeschwür Carob Schoten Oxidativer Stress antioxidative Kapazität Ratte Hintergrund
In Magen-Darm-Erkrankungen, ist Geschwür eine häufige Erkrankung mit mehreren Ursachen. Diese Krankheit, durch Schädigung der Schleimhaut gekennzeichnet, wird überwiegend durch Helicobacter pylori verursacht
, Thrombozytenaggregationshemmer wie Acetylsalicylsäure [1], nichtsteroidale entzündungshemmende Medikamente (NSAIDs) wie orale Bisphosphonate, Kaliumchlorid, immunsuppressive Medikamente [2, 3 ], Serotonin-Wiederaufnahme-Hemmer [4], Rauchen und Alkoholkonsum [5]. Die Pathophysiologie der Magengeschwür hat Ungleichgewicht zwischen aggressiven und Schutzfaktoren im Magen, wie Säure-Pepsin-Sekretion, Schleimhaut-Barriere, Schleimabsonderung, Blutfluss, die Zellregeneration, Prostaglandine und epidermale Wachstumsfaktoren im Allgemeinen konzentriert [6]. Ethanol-induzierte Magenläsionen im Wesentlichen intensive Infiltration in der Unterschleimhaut zusammen, daß die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) fördert, verminderter Schleim, Abreicherung von Sulfhydrylgruppen und verringerte Durchblutung, was zu einer Schädigung der Magenschleimhaut [7]. ROS insbesondere Hydroxyl-Radikal spielen die Hauptrolle oxidative Schädigung der Schleimhaut bei allen Arten von Geschwüren bei der Entstehung von [8]. Um den möglichen Mechanismus bestimmen, durch die Substanzen wirken können Magenschutz, mehrere Antioxidantien Moleküle wie Quercetin [9] und Curcumin [10] wurden bisher untersuchten fördern.
Carob (Johannisbrotbaum L.
) ist ein langsam Wachstum immergrünen Baum seit Jahren in den Mittelmeerländern angebaut. Der Johannisbrotfrucht, braun pod 10-25 cm in der Länge enthalten viele bioaktive Substanzen wie süße Kohlenhydrate, Ballaststoffe, Tannine und Polyphenole [11]. Viele der positiven Auswirkungen auf die Gesundheit zu Konsum von phenolreichen Lebensmitteln verbunden sind, sind im Wesentlichen aufgrund ihrer antioxidativen Aktivitäten [12, 13]. Für Johannisbrotbaum Extrakt wurde diese Eigenschaft wurde in in vivo und in vitro

Studien zuvor berichtet [14, 15]. Vor kurzem haben wir entdeckt, und andere, dass tunesische Blatt Johannisbrotbaum Extrakt stellt einige verbessernde Wirkung gegen Alkohol oder CCl 4-induzierte oxidative Schäden in Ratten Gewebe [16, 17]. Darüber hinaus weisen Johannisbrotbaum Faser hohe antioxidative Kapazität durch die Radikalfänger Test DPPH bestimmt, dh höher als viele andere Nahrungsmittel, die reich an Polyphenolen, wie Heidelbeeren, Trauben oder Rotwein [18, 19].
Dementsprechend ist die vorliegende Studie wurde von akuten Ethanolexposition und den Mechanismus in einen solchen Schutz beteiligt induziert die putative gastroprotektive Rolle des wässrigen Extraktes aus Johannisbrot- Schoten (CPAE) (15 Tage) vor oxidativem Stress zu bewerten.
Methoden
Ethik Aussage
die erforderlichen Genehmigungen für den Feldstudien und Sammlung von Johannisbrotschoten Proben wurden durch das Ministerium für Landwirtschaft in Tunesien hergestellt worden ist und die von Frau Mouhiba Ben-Naceur, Professor für Taxonomie in der Höheren Institut für Biotechnologie von Beja, Tunesien. Die Gutschein Proben wurden mit dem Herbarium der Höheren Institut für Biotechnologie der Béja und auch in der Abteilung für Biologische Wissenschaften, Fakultät für Naturwissenschaften, Tunesien hinterlegt.
Herstellung von Johannisbrotextrakt
Die reifen Johannisbrotschoten aus der gesammelt wurden, Region von Tabarka (Nordwesten von Tunesien) während 2013 kurz Oktober wurde das Pflanzenmaterial später in einem Inkubator bei 72 h und pulverisierte in einem elektrischen Mixer (Moulinex Ovatio 2, FR) bei 50 ° C getrocknet. Pulvergemisch, das Johannisbrotpulpe (90%) und Samen (10%) wurde in doppelt destilliertem Wasser und durch ein Sieb (0,5 mm Maschenweite) gelöst. Schließlich wurde die Johannisbrotbaum Schoten wässriger Extrakt sofort für die in vitro und in vivo

Experimente verwendet.
Radikalfänger Aktivitäten auf DPPH
Die antioxidative Kapazität des wässrigen Extrakt aus Johannisbrotschoten wurde unter Verwendung von 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) -Radikal-Bindungsaktivität, wie zuvor von Grzegorczyk et al. [20]. Kurz gesagt, wurden während 30 min bei 27 ° C bis 1 ml 0,1 mM methanolische Lösung von DPPH und inkubiert verschiedenen Konzentrationen von CPAE (20, 50, 100, 150 und 200 ug /ml) zugegeben. Die optische Dichte der Probe wurde bei 517 nm quantifiziert. DPPH Radikalfängeraktivität (RSA), ausgedrückt als Prozentsatz, geschätzt wurde die folgende Formel verwendet: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\ ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 $$ Ascorbinsäure wurde als Referenzmolekül in der gleichen Konzentration wie der Testextrakt verwendet.
Alle Analysen in dreifacher Ausfertigung ausgeführt wurden. Die Wirksamkeit Konzentration 50 (EG 50) Wert als die Konzentration bestimmt (in ug /ml) der Verbindung benötigt, um 50% des DPPH radikalen abfängt.
Radikalfänger Aktivitäten auf ABTS
Die antioxidative Kapazität der Johannisbrot- Schoten wässrigen Extrakt wurden unter Verwendung der 2,2'-Azino-bis ausgewertet [3-ethylbenzthiazolin-6-sulfonsäure] (ABTS) Methode [21]. Kurz gesagt, wurde zu 3 ml 7 mM ABTS Radikallösung (ABTS • +) 1 ml des verdünnten Extraktes gegeben und in der Dunkelheit bei Raumtemperatur für 60 min gehalten. Die Extinktion wurde bei 734 nm gemessen. Die Bindungskapazität wurde berechnet als ((1 - Ab /A0) × 100%) (Ab und A0 sind die Extinktion der Proben sowie die ABTS • + Lösung bei 734 nm
Tiere und Behandlung Gesunde erwachsene männliche Wistar-Ratten (mit einem Gewicht von 220-250 g; beherbergte fünf pro Käfig) und erwachsenen männlichen Swiss Albino-Mäuse (mit einem Gewicht von ca. 25 g, zehn pro Käfig untergebracht) wurden von der Society of Pharmaceutical Industries von Tunesien (SIPHAT, Ben-Arours gekauft , TN). Experimentelle Protokolle mit den Richtlinien der Ethikkommission der Fakultät für Tunis, Tunesien genehmigt wurden. der Test wurde in Übereinstimmung mit der Kommission die Richtlinie 2000/32 /EG und der OECD-Richtlinie 474 [22] durchgeführt. Sie wurden zur Verfügung gestellt mit Standardnahrung (Standard Pellet Diät- Badr Utique-TN) und Wasser ad libitum
und in Tierhaus bei kontrollierter Temperatur (22 ± 2 ° C) mit einem 12 h Hell-dunkel-Zyklus. Die Ratten waren geteilt in die Hälfte beibehalten ein Dutzend Gruppen. Gruppe 1 und 2 wurden, dienten als Kontrolle und hatte Wasser (5 ml /kg, bw
, po
) bidest. Gruppen 3, 4 und 5 wurden mit verschiedenen Dosen von CPAE (500, 1000 und 2000 mg /kg, bwpo
) vorbehandelt, während Gruppe 6 vorbehandelt war jeweils mit Famotidin (10 mg /kg, bwpo
) 15 Tage. Die Ratten wurden für 24 Stunden vor der letzten Verabreichung von CPAE oder Referenzmoleküle gefastet. Nach 60 min, jedes Tier, mit Ausnahme der Gruppe 1 erhielt EtOH (4 g /kg, Körpergewicht
) durch orale Verabreichung. Zwei Stunden später wurden die Ratten getötet.
Studie der akuten Toxizität
Der Johannisbrotbaum Schoten wässriger Extrakt in einem Dosisbereich von 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 und 200 g /kg oral zu verschiedenen verwaltet Gruppen von Mäusen (n
= 10). Die Tiere wurden alle 30 min während 4 h untersucht und dann gelegentlich für zusätzlichen Zeitraum von 8 h. 24 h danach wurde die Mortalität aufgezeichnet. Die Mäuse wurden auch für andere Anzeichen von Toxizität, wie motorische Koordination, Aufrichtreflex und respiratorischen Veränderungen beobachtet.
Bewertung der Schäden der Magenschleimhaut
den Magen jedes Tieres wurde entlang seiner größeren Krümmung entfernt und geöffnet. Das Gewebe wurde in NaCl 0,9% sanft gespült. Die Läsionen in der Magenschleimhaut wurden makroskopisch untersucht, und die Fotografien von hämorrhagischen Erosionen wurden mit einer Photometrics Quantix Digitalkamera erfasst. Ulcus Indizes wurden als die Summe der Längen der gesamten Magenläsionen (in mm 2) bestimmt [23]. Zwei unabhängige, verblindete Beobachter führten die Messungen von Läsionslängen. Magenvolumen Saft Bestimmung
Magensaft wurde bei 3000 g während 5 min gesammelt und zentrifugiert, um unlösliche Materialien zu entfernen. Der Überstand wurde nach gemessen graduate Rohre mit [24].
Histopathologische Analyse
Unmittelbar nach der Tötung kleine Stücke von Magen wurden mit eiskalter Kochsalzlösung geerntet und gewaschen. Gewebefragmente wurden dann in einer 10% neutral gepuffertem Formalin-Lösung, in Paraffin eingebettet und für die histopathologische Untersuchung verwendet. 5 &​​mgr; m dicke Schnitte wurden geschnitten, entparaffiniert, mit Feuchtigkeit versorgt und mit Hämatoxylin und Eosin (HE) gefärbt. Die Magen-Schnitte wurden in blind bei allen Behandlungen [25] untersucht.
Lipidperoxidation Messung
Magenschleimhaut Lipidperoxidation durch MDA-Messung nach dem Doppel Heizmethode [26] bestimmt. Kurz gesagt, Aliquots von Magenschleimhaut Homogenate wurden mit BHT-Trichloressigsäure (TCA) gemischt, in 20% TCA-Lösung gelöst, die 1% BHT (w /v
) (w /v
) und bei 1000 × g zentrifugiert
5 min bei 4 ° C. Überstand wurde mit einer Lösung vermischt, die (0,5 N HCl, 120 mM TBA in 26 mM Tris gepuffert) und dann 10 min bei 80 ° C erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde die Extinktion des resultierenden Chromophors bei 532 nm bestimmt. MDA-Spiegel wurden unter Verwendung eines Extinktionskoeffizienten für MDA-TBA-Komplex von 1,56 bestimmt × 10 5 M -1 · cm -1.
Thiolgruppe Messung
die Gesamtkonzentration an Thiol Gruppen (-SH) wurde nach Ellman-Verfahren durchgeführt [27]. Kurz gesagt, Aliquots von Magenschleimhaut mit 100 ul 10% SDS und 800 &mgr; l von 10 mM Phosphatpuffer (pH 8) wurden gemischt, und die optische Dichte wurde bei 412 nm (A 0) gemessen. Nach der Zugabe von 100 &mgr; l 5,5'-Dithiobis (2-nitrobenzoesäure) (DTNB) wurde das Reaktionsgemisch bei 37 ° C während 60 min und einen neuen Wert (A 1) wurde bestimmt inkubiert. Die Thiolgruppen-Konzentration wurde von A berechnet 1 bis A 0 Subtraktion einen molaren Extinktionskoeffizienten von 13,6 x 10 mit 3 M -1 · cm -1. Die Ergebnisse wurden als nmol Thiolgruppen pro
ausgedrückt mg Protein.
H2O2 Bestimmung
der Magenschleimhaut H 2 O 2-Ebene wurde nach Dingeon ausgeführt et al. [28]. Kurz gesagt, das Wasserstoffperoxid reagiert mit p-Hydroxybenzoesäure und 4-Aminoantipyrin in Gegenwart von Peroxidase zur Bildung von Chinonimin führt, die eine rosa Farbe bei 505 nm detektiert hat.
Die Aktivität von SOD Antioxidant Enzymaktivitätsassays
wurde unter Verwendung von modifizierten Epinephrin-Assays [29] bestimmt. Bei alkalischem pH-Wert, Superoxidanion O 2 - bewirkt, dass die Autoxidation von Epinephrin zu Adrenochrom; während bei dieser Reaktion im Wettbewerb, verringerte SOD die Adrenochrom Bildung. Eine Einheit der SOD wird als die Menge des Extraktes definiert, die die Rate der Adrenochrom Bildung um 50% hemmt. Enzymextrakt wurde in 2 ml Reaktionsmischung, enthaltend 10 &mgr; l Rinder Katalase (0,4 U /&mgr; l), 20 &mgr; l Epinephrin (5 mg /ml) und 62,5 mM Natriumcarbonat /Bicarbonat-Puffer pH 10,2 zugegeben. Änderungen in der Absorption wurden bei 480 nm aufgezeichnet.
Die Aktivität von CAT wurde bewertet, indem die Anfangsgeschwindigkeit der H Messung 2 O 2 Verschwinden bei 240 nm [30]. Das Reaktionsgemisch enthielt 33 mM H 2 O 2 in 50 mM Phosphatpuffer pH 7,0 und die Aktivität von CAT wurde unter Verwendung des Extinktionskoeffizienten von 40 mM -1 cm -1 für H berechnet 2 O 2.
die Aktivität von GPx wurde durch das Verfahren von Flohé und Günzler quantifiziert [31]. Kurz gesagt, 1 ml Reaktionsgemisch, enthaltend 0,2 ml Magenschleimhaut Überstand, 0,2 ml Phosphatpuffer 0,1 M pH 7,4, 0,2 ml GSH (4 mM) und 0,4 ml H 2 O 2 (5 mM) inkubiert wurde, wurde durch die Zugabe von 0,5 ml TCA (5%, w /v) bei 37 ° C für 1 min, und die Reaktion gestoppt. Nach Zentrifugation bei 1500 g für 5 min
, Aliquot (0,2 ml) aus dem Überstand wurde mit 0,5 ml Phosphatpuffer 0,1 M pH 7,4 und 0,5 ml DTNB (10 mM) versetzt und die Extinktion wurde bei 412 nm abgelesen. Die Aktivität von GPx wurde als nmol von GSH verbraucht /min /mg Protein ausgedrückt.
Statistical analysis
Die Daten durch Einwegvarianzanalyse (ANOVA) und wurden ausgedrückt analysiert wurden als Mittelwert ± Standardfehler des Mittelwertes (SEM). Die Daten sind repräsentativ für 10 unabhängige Experimente. Alle statistischen Tests wurden zweiseitig und ap
Wert von 0,05 oder weniger wurde als signifikant angesehen.
Ergebnisse | Akute orale Toxizität von CPAE
In der akuten oralen Toxizität weder abnormales Verhalten noch war die Mortalität während der Beobachtungsperiode festgestellt. Somit betrug die LD50-Wert größer als 20 g /kg b.w. für die wässrige Extrakt von Johannisbrothülsen.
In vitro DPPH und Radikalfänger Aktivitäten ABTS
Mehrere Konzentrationen im Bereich von 0 bis 200 &mgr; g /ml des CPAE wurden in verschiedenen in vitro
Modelle für ihre antioxidative Aktivitäten getestet. Wir haben herausgefunden, dass die Radikalfängeraktivität von CPAE gegen DPPH und ABTS Radikale signifikant erhöht in einer dosisabhängigen Weise. Die EG 50 Werte aus dem Diagramm berechnet gezeigt, dass die RSA von CPAE (EG 50 = 228,22 ± 5,27 g /ml und 184,41 ± 3,95 ug /ml für DPPH und ABTS Radikalfängeraktivität) erschien ähnlich wie dass der Ascorbinsäure (EG 50 = 190,47 ± 1,2 und 174,13 ± 0,9 ug /ml) als auch bekannte Referenzmolekül (Tabelle 1) .Tabelle 1 EC50-Werte von DPPH und ABTS Radikalfängeraktivität Johannisbrotbaum Schoten wässriger Extrakt (CPAE ). EC50: die wirksame Konzentration der Probe, die DPPH oder ABTS-Konzentration um 50%
EC50 von DPPH Radikalfängeraktivität (ug /ml)
EC50 von ABTS Radikalfänger Aktivität verringern können (ug /ml)
CPAE
228,22 ± 5,27
184,41 ± 3,95
190,47 ± 1,2
174,13 ± 0,9
Wirkung von CPAE auf EtOH-induzierten
Askorbinsäure akut makroskopische Schädigung des Magens und Volumenänderung
der makroskopischen Untersuchung der Magenschleimhaut ist in Abb. 1. Wie erwartet, zeigte EtOH Verabreichung Verletzungen, einschließlich Blutungen und Hyperämie. CPAE und Famotidin Behandlung zeigte eine dosisabhängige Abnahme in allen makroskopischen Vergiftungserscheinungen im Vergleich mit der behandelten Gruppe EtOH. Darüber hinaus zeigte die quantitative Analyse, dass Johannisbrotbaum Extrakt oder Referenzmolekül Vorbehandlung signifikant und dosisabhängig das Geschwür Index reduziert, geschützt gegen das Magenvolumen Saft zu verringern, und verbessert den Schutz Prozentsatz der Schädigung induziert durch EtOH Verabreichung (Tabelle 2). Feige. 1 Subakute Wirkung caob Hülsen wässrigen Extrakt (CPAE) und Famotidin (FAM) auf makroskopische Veränderungen, induziert durch Ethanol (EtOH) in Ratten. Die Tiere wurden mit verschiedenen Dosen von CPAE vorbehandelt (500, 1000 und 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) oder Bi-destilliertes Wasser, in Frage gestellt mit eine einzelne orale Verabreichung von EtOH (4 g /kg, bw, po
) oder NaCl 9 ‰ für zwei Stunden. a: Kontrolle; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 und f: EtOH + FAM)
Tabelle 2 Subakute Wirkung von Johannisbrotschoten wässriger Extrakt (CPAE), Famotidin (FAM) und Ascorbinsäure (AA) auf makroskopische quantitative Veränderungen durch EtOH bei Ratten: Geschwür Schleim Volumen, Ulcusfläche und Prozentschutz. Die Tiere wurden mit verschiedenen Dosen von CPAE vorbehandelt (500, 1000 und 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) oder Bi-destilliertes Wasser, in Frage gestellt mit eine einzelne orale Verabreichung von EtOH (4 g /kg, bw, po
) oder NaCl 9 ‰ zwei Stunden
Gruppe
Mucus Volumen (ml)
Ulcer-Index ( mm2)
Schutz Prozent (%)
Kontrolle
4,3 ± 0,20
---- ----

EtOH
1,9 ± 0,3 *
86,2 ± 2,6 *
00
EtOH + CPAE-500
2,9 ± 0
67,0 ± 3,6 #
23,4
EtOH + CPAE-1000
3,4 ± 0,2 #
16,6 ± 1,4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3,9 ± 0,3 #
06.4 ± 0,9 #
92,2
EtOH + FAM
3,8 ± 0,2 #
26,2 ± 3,3 #
68,1
*: p
< 0,05 im Vergleich zu Kontrollgruppe und #: p
< 0,05 im Vergleich zu Gruppe EtOH
Wirkung von CPAE auf EtOH-induzierten Magen mikroskopischer Verletzungen kaufen Wir auch die Wirkung von EtOH und CPAE auf Magenschleimhaut Histologie und die Ergebnisse untersucht, sind in Fig. 2. EtOH 80% eine deutliche erosive Läsion im Magengewebe induziert. CPAE oder Famotidin Vorbehandlung stark reduziert die histopathologische durch akute Alkoholintoxikation induzierten Veränderungen. Feige. 2 Subakute Wirkung caob Hülsen wässrigen Extrakt (CPAE) und Famotidin (FAM) auf histologische Veränderungen, induziert durch Ethanol (EtOH) in Ratten. Die Tiere wurden mit verschiedenen Dosen von CPAE vorbehandelt (500, 1000 und 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) oder Bi-destilliertes Wasser, in Frage gestellt mit eine einzelne orale Verabreichung von EtOH (4 g /kg, bw, po
) oder NaCl 9 ‰ für zwei Stunden. a: Kontrolle; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 und f: EtOH + FAM)
Wirkung von CPAE auf EtOH-induzierten Magen Lipoperoxydation und Wasserstoffperoxid Erhöhung
auf oxidativen Stress Zustand über die Wirkung von EtOH und CPAE Lager, untersuchten wir zunächst die Magen Lipoperoxydation und Wasserstoffperoxid-Gehalt (Abb. 3a). EtOH Rausch drastisch erhöht die Magen-MDA und H 2 O 2 Ebenen (Abb. 3b). CPAE Vorbehandlung signifikant und dosisabhängig umgekehrt Lipoperoxidation und Wasserstoff durch Intoxikation EtOH induziert Peroxids zu erhöhen. Feige. 3 Subakute Wirkung caob Schoten wässrigen Extrakt (CPAE) und Famotidin (FAM), Ethanol (EtOH) -induzierten Veränderungen der Magenschleimhaut MDA a und b H2O2 Spiegel in Ratten. in Ratten. Die Tiere wurden mit verschiedenen Dosen von CPAE vorbehandelt (500, 1000 und 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) oder Bi-destilliertes Wasser, in Frage gestellt mit eine einzelne orale Verabreichung von EtOH (4 g /kg, bw, po
) oder NaCl 9 ‰ für zwei Stunden. *: P
< 0,05 im Vergleich zu Kontrollgruppe und #: p
< 0,05 im Vergleich zu EtOH Gruppe
Wirkung der von CPAE auf EtOH-induzierten verringern Magen-SH-Gruppen kaufen Wir zeigten auch, dass Thiolgruppen Ebene deutlich in der Magenschleimhaut von Alkohol behandelten Ratten reduziert wurde. Jedoch CPAE (500, 1000 und 2000 mg /kg, b.w. p.o.
) oder Famotidin (10 mg /kg, b.w. p.o.
) Vorbehandlung signifikant gegen diese Abnahme geschützt im Vergleich zu EtOH Gruppe (Fig. 4). Feige. 4 Subakute Wirkung caob Hülsen wässrigen Extrakt (CPAE) und Famotidin (FAM), Ethanol (EtOH) -induzierten Veränderungen der Magenschleimhaut SH- Gruppen in Ratten nivellieren. in Ratten. Die Tiere wurden mit verschiedenen Dosen von CPAE vorbehandelt (500, 1000 und 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) oder Bi-destilliertes Wasser, in Frage gestellt mit eine einzelne orale Verabreichung von EtOH (4 g /kg, bw, po
) oder NaCl 9 ‰ für zwei Stunden. *: P
< 0,05 im Vergleich zu Kontrollgruppe und #: p
< 0,05 im Vergleich zu Gruppe EtOH
Wirkung von CPAE auf EtOH-induzierten Antioxidans Enzymaktivitäten Verarmungs kaufen Wir weiter bei der Wirkung von EtOH und CPAE betrachtete antioxidative Enzyme Aktivitäten in der Magenschleimhaut (Fig. 5). EtOH 80% signifikant erhöht Magenschleimhaut antioxidative Enzymaktivitäten als SOD (A) und CAT (B), aber es verringert signifikant die GPx-Aktivität (C). Allerdings subakute Vorbehandlung mit Johannisbrotbaum Extrakt oder Famotidin signifikant reduziert die EtOH-induzierte Zunahme und eine Abnahme des Antioxidans Enzymaktivitäten in der Nähe von Kontrollebenen mit der höchsten Dosis. Feige. 5 Subakute Wirkung caob Schoten wässrigen Extrakt (CPAE) und Famotidin (FAM), Ethanol (EtOH) -induzierten Veränderungen der Magenschleimhaut Antioxidans Enzymaktivitäten: SOD a, b und CAT GPx c in Ratten .. in Ratten. Die Tiere wurden mit verschiedenen Dosen von CPAE vorbehandelt (500, 1000 und 2000 mg /kg, bw, po), FAM (10 mg /kg, bw, po) oder Bi-destilliertes Wasser, in Frage gestellt mit einer einzigen oralen Verabreichung von EtOH (4 g /kg, bw, po
) oder NaCl 9 ‰ für zwei Stunden. *: P
< 0,05 im Vergleich zu Kontrollgruppe und #: p
< 0,05 im Vergleich zu EtOH Gruppe
Diskussion
Der Magen ist ein empfindliches Verdauungsorgan in erster Linie auf exogene Erreger aus der Nahrung ausgesetzt. In Reaktion auf diese Erreger erzeugt das Magengewebe ROS wie Hydroxylradikal ein Superoxidanion, die zur Entwicklung von Magen organischen Störungen wie Gastritis, Magengeschwüre und Magenkrebs, sowie funktionelle Störungen wie funktionellen Dyspepsie [Zusammenhang könnte ,,,0],32]. Ethanol wird als einer der Agenten, die Magengeschwüre auslösen. Die Wirkungen von Ethanol auf die Magenschleimhaut sind kompliziert und vielfältig, die mit einer Störung des Gleichgewichts zwischen der Magenschleimhaut schützende und aggressive Faktoren [33] verbunden sein können. Ethanol verursacht schädigt in den vaskulären endothelialen Zellen der Magenschleimhaut und induziert mikrozirkulatorische Störungen und Hypoxie, die Anbindung an die Überproduktion von Sauerstoffradikalen [34]. ROS sind innerhalb des Magen-Darm-Trakt produziert, aber ihre Rolle in der Pathophysiologie und Pathogenese der Erkrankung nicht gut untersucht worden.
Viele Heilpflanzen zeigen in ihrer chemischen Konstitution, Flavonoide, Triterpene und Tannine, die die Magenschleimhaut durch die Induktion von magen schützen Mechanismen oder die als natürliche Antioxidantien [35-37]. Flavonoide und Gerbstoffe die große Gruppe von phenolischen Verbindungen, die als primäre Antioxidantien oder Radikalfänger wirken [38].
Unsere phytochemical Studie zum einen gezeigt, dass sein Reichtum Polyphenole, insgesamt Flavonoide, und kondensierte Tannine [14]. Auf der anderen Seite, die DPPH und ABTS Radikalfänger Assay unter Verwendung fanden wir, dass CPAE eine hohe Entfernungsvermögen zeigt, wenn auch weniger als Ascorbinsäure, die als Referenzmolekül verwendet wurde. Die antioxidative Kapazität von Johannisbrotbaum ist hauptsächlich auf die höheren Phenol compouds in dieser Fraktion [14]. Allerdings sind diese Moleküle sind die Hauptquelle für ihre Fähigkeit, freie Radikale wie Superoxid-Anion (O 2 .) Und Hydroxyl-Radikal (OH .) Der Spülung [39].
In vivo
wir zeigten zunächst, dass Alkohol Verwaltung eine klare makroskopischen Verletzungen provoziert, einschließlich Blutungen und Hyperämie sowie histopatological Veränderungen wie erosive Läsionen. CPAE Vorbehandlung signifikant EtOH-induzierter Magenschleimhaut makro- und mikroskopisch kleine Läsionen auf dosisabhängige Weise umgekehrt. Jedoch wurde Magenschleimhaut zuvor eine wichtige Rolle beim Schutz der Magen-Barrieren zu spielen gezeigt [40]. Es ist die erste Verteidigungslinie gegen Säure und hält sich zusammen mit Bicarbonat durch das Epithel sezerniert als Barriere gegen Selbstverdauung zu dienen [41]. Darüber hinaus ist Magenschleimhaut ein wichtiger Schutzfaktor für die Magenschleimhaut und ist in der Lage als Antioxidans wirken und Schädigung der Schleimhaut durch ROS vermittelte Verringerung [42]. Tanninen könnte Ulkus Entwicklung entweder über vasokonstriktorischen Effekte oder aufgrund ihrer Proteine ​​kondensierender wo es fördert die Ausfällung von Mikroproteine ​​in der Ulzeration Ort, bildet eine undurchlässige Schicht, die über der Auskleidung zu verhindern, dass die darunter liegende Schleimhaut von Reizdarmsekreten und schützt verhindert [43]. Außerdem haben Flavonoide Anti-Ulkus und gastroprotektive Eigenschaften [44]. Jedoch wurde EtOH-induzierten Magengeschwürbildung zuvor von vielen Pflanzen extrahiert
Aqeratum conyzoides zu dämpfenden gezeigt [45], Bacopa monniera und Azadirachta indica
[46], Hippocratea
zeichnet [47] und Azadirachta indica
[48]. Aber soweit wir wissen, unser Bericht ist der erste mit Fruchtextrakt von Ceratonia siliqua beschäftigen
(Johannisbrotbaum) schützende Wirkung auf akute EtOH-induzierten Ulzera bei Ratten Magenschleimhaut.
Wir haben auch in der Gegenwart zeigte Studie, dass EtOH Intoxikation Lipidperoxidation induziert, Verringerung der Thiolgruppen nivellieren, Erhöhung der Wasserstoffperoxidgehalt sowie Erschöpfung antioxidative Enzymaktivitäten wie SOD, CAT und GPx. Akute alkoholbedingtem oxidativen Stress wurde in der Magenschleimhaut [49], der Leber [50], Niere [51], Herz [52] und Gehirn [53] ausführlich dokumentiert. Ethanol Verabreichung provoziert oxidative Ungleichgewicht durch eine Anzahl von Wegen, einschließlich der Erzeugung von reaktiven Sauerstoffspezies [54]. Lipidperoxidation Ebene ist ein Indikator für die Erzeugung von ROS im Gewebe. Jedoch SOD wandelt die reaktive Superoxidradikal zu H 2 O 2, die in der Magenschleimhaut erhöht wurde und wenn sie nicht von CAT gespülten es von selbst kann Lipidperoxidation durch die Erzeugung von Hydroxylradikalen führen [55].
Noch wichtiger ist, zeigten wir, dass Johannisbrotextrakt Vorbehandlung acute EtOH-induzierten oxidativen Stress in der Magenschleimhaut abgeschafft. Diese Daten vollständig alle zuvor berichtet erhärtet in vivo
[17] und in vitro
[15] Antioxidans und entzündungshemmenden Eigenschaften von Johannisbrotbaum. Wir haben auch in unserem früheren Bericht von Sebai et al. [14], dass die wässrige Extrakt aus Johannisbrotschoten eine gute Menge an Polyphenole enthält, insgesamt Flavonoide und kondensierten Tanninen. Diese Moleküle sind die Urquelle des Antioxidans Fähigkeit dieser Pflanze, die durch freie Radikale als Hydroxyl-Radikale (OH •), die die Hauptursache für die Lipidperoxidation ist [56]. Darüber hinaus ist es bekannt, dass Sulfhydrylgruppen in Teil in magen Zytoprotektion beteiligt sind [57] und auch in der Schleimhautbarriere Integrität beibehalten und freie Radikale gebildet durch Einwirkung von Noxen [58] fangen.
Schlussfolgerung
Abschließend zeigen unsere Daten deutlich, dass CPAE schützende Wirkung gegen akute Ethanol-induzierten Ulzera bei Ratten Magenschleimhaut, teilweise dank seiner antioxidativen Eigenschaften
Abkürzungen
CPAE ausübt.
Carob Schoten wässriger Extrakt
Carob500:
Carob 500 mg /kg
Carob1000:
Carob 1000 mg /kg

Carob2000:
Carob 2000 mg /kg
CAT:
Katalase
GPx:
Glutathionperoxidase
H2O2:
Wasserstoffperoxyd
MDA:
Malondialdehyd
Prot:
Proeins
SHs:
Sulfhydrylgruppen
SOD:
Superoxid-Dismutase

Erklärungen
Acknowledgments
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• Korrelation von HK6 Expression mit Tumorrezidiv und Prognose bei fortgeschrittenem Magen cancer
• Lebensqualität, Immunmodulation und die Sicherheit der adjuvanten Misteltherapie bei Patienten mit Magenkarzinom - eine randomisierte, kontrollierte Pilotstudie