gastritas poveikio saldžiavaisio pupmedžio (saldžioji ceratonija
L.) nuo etanolio sukeliamo oksidacinio streso žiurkių
tezės
Fono
siekėme šioje tyrimo metu tiriant gastritas poveikį saldžiavaisio pupmedžio ankštys vandeninis ekstraktas (CPAE) prieš etanolio sukeliamo oksidacinio streso žiurkių, taip pat mechanizmą susijusį.
metodai
Suaugusiųjų Wistar žiurkių patinėlių buvo naudojami ir suskirstyti į šešias grupes po dešimt kiekvienas: kontrolės, EtOH (80% v /v, 4 g /kg kūno svorio
), EtOH 80% + įvairios dozės CPAE (500, 1000 ir 2000 mg /kg kūno svorio, kūno svorio
) ir EtOH + famotidino (10 mg /kg, PO) Gyvūnai buvo peroraliai (PO
) anksto gydomi CPAE per 15 dienų, ir apsvaigęs nuo vieno išgėrus EtOH (4 g /kg kūno svorio pervežimas) dviems valandas.
rezultatai Viesbutis The kolorimetrinę analizė parodė, kad CPAE eksponuojami in vitro pervežimas antioksidacinis aktyvumas prieš ABTS ir DPPH radikalų svarbą. Mes nustatėme, kad CPAE išankstinis gydymas in vivo
, apsaugotas nuo EtOH sukeltos makroskopinių ir histologinių pokyčių sukeltų skrandžio gleivinę. Saldžiavaisio pupmedžio ekstraktas administracija taip pat apsaugoti nuo alkoholio sukelto garso skrandžio sulčių sumažėjimas. Dar svarbiau, Mes parodėme, kad CPAE neutralizuoti EtOH sukelta skrandžio lipoperoxidation, atstatomi į sulfhidrilo grupių sumažėjo (-SH) žinutę vandenilio peroksido (H
2O 2) lygį ir užkirto kelią antioksidantų fermentų aktyvumo superoksido išeikvojimas dismutazė (SOD), Katalazė (CAT) ir glutationas peroksidazės (GPX).
Išvados
Šie rezultatai rodo, kad CPAE darė galimą virškinimo apsauginį poveikį prieš EtOH sukeltas oksidacinis stresas žiurkių, iš dalies dėl to, kad jos antioksidantai savybės.
Raktiniai žodžiai
Skrandžio opa Saldžiavaisio pupmedžio ankštys oksidacinis stresas Antioksidantas talpa Žiurkė faktai
virškinimo trakto sutrikimų, opa yra dažna liga su keliais etiologies. Ši liga, būdingas gleivinės pažeidimas, yra daugiausia sukelia Helicobacter pylori
, antitrombocitinio agentų, tokių kaip acetilsalicilo rūgšties [1], nesteroidiniais priešuždegiminiais vaistais (NVNU), pvz geriamųjų bisfosfonatų, kalio chloridas, imunosupresinius vaistus [2, 3 ], serotonino reabsorbcijos inhibitorių [4], rūkymas ir alkoholio vartojimas [5]. Skrandžio opa patofiziologija apskritai sutelktas į disbalansą tarp agresyvių ir apsauginius veiksnius, skrandžio, pavyzdžiui, rūgščių-pepsino sekrecijos, gleivinės barjerą, gleivės sekrecija, kraujo tėkmės, ląstelių regeneracija, prostaglandinų ir epidermio augimo faktorių [6]. Etanolis sukelta skrandžio pažeidimai daugiausia susiję su intensyvaus infiltracija į pietus gleivinės, kuri skatina susidaryti reaktyvių deguonies formų (ROS), sumažėjo gleives, išeikvojimas sulfhidrilo grupių ir sumažėjęs kraujo tekėjimą, todėl žalą skrandžio gleivinės [7]. ROS ypač hidroksilo radikalus žaisti pagrindinis vaidmuo sukelia oksidacinį žalą gleivinės visų opos tipų [8]. Norėdami nustatyti galimą mechanizmą, pagal kurį medžiagos gali veikti skatinti gastroprotection, keli antioksidantai molekules, pavyzdžiui, kvercetino [9] ir Kurkuminas [10] anksčiau buvo tiriami.
Saldžiavaisio pupmedžio (saldžioji ceratonija L.
) yra lėtas augimo vis žalia medis auginamas metų Viduržemio jūros regiono šalyse. Saldžiavaisio pupmedžio vaisiai, ruda Pod 10-25 cm ilgio, yra daug biologiškai aktyvių medžiagų, pavyzdžiui, saldus angliavandenių, skaidulinių medžiagų, taninų ir polifenolių [11]. Daugelis naudą sveikatai, susijusių su vartojimu fenolio turtingas maistas yra iš esmės dėl jų antioksidantų veiklą [12, 13]. Dėl saldžiavaisio pupmedžio ekstrakto, šis turtas buvo pranešta anksčiau in vivo, parsisiųsti ir vitro
tyrimų [14, 15]. Neseniai, mes ir kiti atrado, kad Tuniso lapų saldžiavaisio pupmedžio ekstraktas pristato keletą Uzlabojošs poveikį prieš alkoholio ar CCL 4 sukeltas oksidacinis žalą žiurkėmis audiniuose [16, 17]. Be to, saldžiavaisio pupmedžio pluošto pasižymi aukštą antioksidacinį nustatytus pajėgumus pagal DPPH radikalų sugavimo testas, ty didesnis nei daugelio kitų maisto, kuriame gausu polifenolių, tokių kaip mėlynės, vynuogių arba raudono vyno [18, 19].
Todėl šioje studijoje buvo sukurta siekiant įvertinti spėjamą gastritas vaidmenį vandeninio ekstrakto saldžiavaisio pupmedžio ankštys (CPAE) (15 dienų) nuo oksidacinio streso sukeltos ūminės etanolio poveikio ir mechanizmo dalyvauja tokios apsaugos.
metodai
Etika pareiškimas
būtinų leidimų lauko tyrimus ir renkant saldžiavaisio pupmedžio ankštys mėginių buvo gautas Žemės ūkio ministerijos Tunise ir nustatė ponia Mouhiba Ben-Naceur profesoriaus taksonomijos aukštojo biotechnologijos institutas Beja, Tunisas. Kvitas egzemplioriai buvo deponuojami Aukštojo Biotechnologijos institutas Beja herbariumo taip pat ir biologijos mokslų katedros fakulteto mokslo, Tunisas.
Paruošimas saldžiavaisio pupmedžio ekstrakto
brandus saldžiavaisio pupmedžio ankštys buvo renkami iš regionas Tabarka (Šiaurės Vakarų Tunisas) nuo spalio 2013 m trumpai, augalinė medžiaga vėliau buvo džiovinami inkubatoriuje 50 ° C temperatūroje per 72 val ir milteliais, elektros maišytuvą ( "Moulinex Ovatio 2, FR). Miltelių mišinys, kurių sudėtyje yra saldžiavaisio pupmedžio plaušiena (90%) ir sėklų (10%) buvo ištirpinta dvigubo distiliuotu vandeniu ir filtruotas per kiaurasamtis (0,5 mm skersmens sietelio dydžio). Galiausiai, saldžiavaisio pupmedžio ankštys vandeninis ekstraktas iš karto buvo naudojamas in vitro parsisiųsti ir in vivo
eksperimentams. Waptrick Nemokama radikalų prapūtimo veiklą DPPH Viesbutis The antioksidantas talpa vandeninio ekstrakto saldžiavaisio pupmedžio ankštys buvo atliekama naudojant 2,2-difenil-1-picrylhydrazyl (DPPH) radikalas-prapūtimo veikla kaip buvo aprašyta anksčiau pagal Grzegorczyk et al. [20]. Trumpai, įvairios koncentracijos CPAE (20, 50, 100, 150, ir 200 mikrogramų /ml) buvo pridėta į 1 ml 0,1 mM metanolio tirpalo DPPH ir inkubuojami 27 ° C per 30 min. Optinis tankis mėginio buvo įvertintas ne 517 nm bangos ilgiui. DPPH radikalų prapūtimo veikla (PAR), išreikštas procentine dalimi, buvo apskaičiuota, naudojant šią formulę: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\
ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\
ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 $$ Askorbo rūgštis buvo naudojamas kaip atskaitos molekulės su ta pačia koncentracija, kaip ir bandymo ekstrakto.
Visi analizė buvo vykdomas tris kartus. Veiksmingumas koncentracija 50 (EB 50) vertė buvo nustatyta kaip koncentracija (g /ml) junginio reikia knistis 50% DPPH radikalų. Waptrick Nemokama radikalų prapūtimo veiklą ABTS
antioksidantų pajėgumai saldžiavaisio pupmedžio ankštys vandeninio ekstrakto buvo įvertintas naudojant 2,2'-azino-bis [3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonrūgštis] (ABTS) metodas [21]. Trumpai, 1 ml atskiesto ekstrakto buvo įtraukta į 3 ml 7 mm ABTS radikalų tirpalo (ABTS • +) ir buvo laikomi tamsoje, esant kambario temperatūroje 60 min. Absorbcija buvo matuojamas 734 nm. Dvėseliena talpa buvo skaičiuojama kaip ((1 - AB /A0) × 100%) (AB ir A0 yra bandinių optinis tankis, taip pat ABTS • + tirpalas 734 nm
Gyvūnai ir gydymas sveikų suaugusių vyrų Wistar žiurkių (sveria 220-250 g; laikomi, penkių vienam narve) ir suaugusiųjų Vyriška Šveicarijos Albino pelėms (sveriantiems maždaug 25 g; veikė dešimt vienam narve) buvo nupirkta iš draugijos farmacijos pramonės Tuniso (SIPHAT, Ben-Arours TN). eksperimentinių protokolai buvo patvirtintas su etikos komiteto mokslų fakultetą Tunisas, Tunisas gaires. Bandymas buvo atliekamas laikantis Komisijos direktyva 2000/32 /EB ir EBPO gairių 474 [22]. Jos buvo numatytos su standartinio maisto (Standard granulių diet- Badr Utique-TN) ir vandens iki soties
ir prižiūrimi gyvūnų namuose kontroliuojamoje temperatūroje (22 ± 2 ° C) 12 h šviesos ir tamsos ciklo. žiurkės buvo suskirstyti į pusmetį keliolika grupių. 1 ir 2 grupės buvo įteikti kaip kontrolę ir bidistilled vandens (5 ml /kg kūno svorio, svorio
, PO
). 5 grupės 3, 4, ir buvo apdorojamas įvairiomis dozėmis CPAE (500, 1000 ir 2000 mg /kg, bwpo pervežimas), o 6 grupė buvo iš anksto aptariamos atitinkamai su famotidino (10 mg /kg, bwpo
) per 15 dienų. Žiurkės buvo badavusios 24 h iki paskutinio administravimo CPAE arba palyginamųjų molekulių. Po 60 min, kiekvieno gyvūno, išskyrus 1 grupėje, gavo EtOH (4 g /kg, sv
) per burną. Po dviejų valandų, žiurkės buvo paaukotos.
ūminio toksiškumo tyrimų
saldžiavaisio pupmedžio ankštys vandeninio ekstrakto dozės svyravo nuo 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 ir 200 g /kg kūno svorio, žodžiu administruoja skirtingos grupės pelių (n
= 10). Gyvūnai buvo ištirti kas 30 min per 4 valandas, tada, kartais už papildomą laikotarpį 8 h. Po 24 valandų, buvo įrašytas mirtingumas. Pelėms taip pat buvo pastebėta, kad kiti toksiškumo požymius, kaip antai variklio koordinavimą, atstatomojo refleksas ir kvėpavimo pokyčius.
Vertinimas skrandžio gleivinės pažeidimų Viesbutis The kiekvieno gyvūno skrandžio buvo pašalintas ir atidarė kartu didesniu kreivumo. Audinių buvo švelniai perplaunamos NaCl 0,9%. Į skrandžio gleivinės pakitimai buvo makroskopinis išnagrinėjo ir hemoraginio erozijos nuotraukos buvo įsigytas su Photometrics Quantix skaitmeninio fotoaparato. Opa indeksus nustatoma kaip visos skrandžio pakitimų ilgių suma (mm 2) [23]. Du nepriklausomi, apakinti stebėtojai atliko įvairių tipų pakenkimais ilgių matavimus.
Skrandžio tūrio sulčių ryžtą
Skrandžio sultys buvo surinkta ir centrifuguojamas 3000 g per 5 min pašalinti netirpius medžiagas. Virš nuosėdų buvo po matuojamas pakopos vamzdžiai [24].
Histopatologinis analizė
Iškart po auką, maži skrandžio buvo surinktos ir nuplauti icecold fiziologiniu tirpalu. tada audinio fragmentai buvo nustatytas 10% neutralus buferiniame formalino tirpalu, įterptųjų parafinu ir naudojama histopatologiniams tyrimams. 5 mkm storio sekcijos buvo sumažinti, deparaffinized, hidratuotas ir tamsintas hematoksilinu ir eozinu (HE). Skrandžio skyriai buvo nagrinėjamas aklas mados visose gydymo [25].
Lipidų peroksidacijos matavimas
Skrandžio gleivinė lipidų peroksidacijos nulėmė MDA matavimo pagal dvigubo kaitinimo metodas [26]. Trumpai, mėginiai iš skrandžio gleivinės homogenatai buvo sumaišyti su BHT-trichloracto rūgšties (TCA) tirpalas, kuriame yra 1% BHT (m /v
), ištirpinto 20% TBS (m /v
) ir centrifuguojamas 1000 × g
5 min, esant 4 ° C temperatūroje. Supernatantas buvo sumaišytas su tirpalu, turinčiu (0,5 N HCl, 120 mM TBA buferiniame 26 mM Tris) ir tada į pašildytą iki 80 ° C temperatūroje 10 min. Po aušinimo, gauto chromoforo absorbcija buvo nustatomas 532 nm bangos ilgiui. MDA koncentracija buvo nustatoma naudojant ekstinkcijos koeficientą MDA-TBA komplekso 1,56 × 10 5 m -1 · cm -1.
Tiolio grupės matavimas
bendras koncentracijos tioliu grupės (-SH) buvo atliekamas pagal Ellman metodu [27]. Trumpai, mėginiai iš skrandžio gleivinės buvo sumaišyti su 100 pL 10% SDS ir 800 pL 10 mM fosfato buferio (pH 8), ir optinis tankis buvo matuojamas 412 nm bangos ilgiui (A 0). Po to, kai pridedant 100 pL 5,5'-dithiobis- (2-nitrobenzoinė rūgšties) (DTNB), reakcijos mišinys buvo inkubuojamas 37 ° C per 60 min ir naujos vertė buvo nustatyta (A 1). Tiolis grupės koncentracija buvo apskaičiuojamas nuo A 1 A 0 atimtis naudojantis molinis ekstinkcijos koeficientą 13,6 × 10 3 m -1 · cm -1. Rezultatai buvo išreikštas nmol tiolio grupių per
mg baltymo.
H2O2 nustatymas
skrandžio gleivinės O 2O 2 lygis buvo atlikta pagal Dingeon et al. [28]. Trumpai tariant, vandenilio peroksidas reaguoja su p-hidroksibenzenkarboksirūgšties ir 4-aminoantipyrine atsižvelgiant į peroksidazės pirmaujančių į quinoneimine kad turi rausvą spalvą Aptikta 505 nm formavimo akivaizdoje.
Antioksidantas fermentinio aktyvumo tyrimus, atliekamus
SOD aktyvumo buvo nustatomas naudojant modifikuotus epinefrino tyrimus, atliekamus [29]. Tuo šarminės pH, superoksido anijonų O 2 - sukelia epinefrino į adenochrome autoxidation; o konkuruoti su šios reakcijos, SOD sumažėjo adenochrome išsidėstymą. Vienas vienetas SOD yra apibrėžiamas kaip ekstrakto, kad slopina adenochrome susidarymo greitį 50% sumos. Fermentas ekstraktas buvo įtraukta į 2 ml reakcijos mišinio, kuriame yra 10 pL galvijų katalazės (0,4 U /mikrol), 20 mikrol, epinefrino (5 mg /ml) ir 62,5 mM natrio karbonatas /bikarbonatas buferinio tirpalo pH 10.2. Pokyčiai absorbcijos buvo užregistruoti 480 nm.
Kačių veikla buvo vertinama matuojant pradinį greitį H 2O 2 dingimo 240 nm [30]. Reakcijos mišinys pateikta 33 mm H 2O 2 iš 50 mM fosfatinis buferis pH 7,0 ir kačių aktyvumas buvo apskaičiuotos naudojant ekstinkcijos koeficientą 40 mm -1 cm, -1 H 2O 2.
GPX veiklą buvo įvertintas pagal Flohé ir Günzler [31] nustatyta tvarka. Trumpai, 1 ml reakcijos mišinio, turinčio 0,2 ml skrandžio gleivinės supernatanto, 0.2 ml fosfatinio buferio 0,1 M pH 7,4, 0,2 mL GSH (4 mm) ir 0,4 ml iš H 2O 2 (5 mM) buvo inkubuojamos 37 ° C temperatūroje 1 min ir reakcija buvo sustabdytas 0,5 ml TBS to (5%, m /v). Po to, kai centrifuguojant 1500 g
5 min, alikvotinė (0,2 ml) iš supematanto kartu su 0,5 ml fosfatinio buferio 0,1 M pH 7,4 ir 0,5 ml DTNB (10 mM) ir absorbcija buvo skaityti 412 nm bangos ilgiui. Iš GPx veikla buvo išreikštas nmol GSH suvartojo /min /mg baltymo.
Statistinė analizė Bendrovės duomenys buvo analizuojami vieną pusę dispersinė analizė (ANOVA) ir buvo išreikštas reiškia ± standartinė paklaida vidurkio (SEM). Duomenys yra atstovas 10 nepriklausomų eksperimentų. Visi statistiniai bandymai buvo du-tailed ir AP
vertė 0,05 ar mažiau buvo laikoma reikšminga.
Rezultatai
Ūmus oralinis toksiškumas CPAE
ūmaus oralinio toksiškumo tyrimą, nei nenormalus elgesys, nei mirtingumas buvo aptikta per stebėjimo laikotarpį. Tokiu būdu, kad LD50 vertė buvo didesnis nei 20 g /kg sv už vandeninio ekstrakto saldžiavaisio pupmedžio ankštys.
in vitro DPPH ir ABTS radikalus neutralizuojančių veiklą
Keletas koncentracija svyruoja nuo 0-200 g /ml CPAE buvo analizuotos jų antioksidantų veiklą įvairiose in vitro
modelių. Mes nustatėme, kad radikalas-prapūtimo veikla CPAE prieš DPPH ir ABTS radikalų žymiai didėjo priklausomai nuo dozės priklausomu būdu. EB 50 vertės apskaičiuotos iš diagramoje parodyta, kad CPAE RSA (EB 50 = 228,22 ± 5,27 g /ml ir 184,41 ± 3,95 g /ml atitinkamai DPPH ir ABTS radikalų oro kondicionavimo veiklos) pasirodė panašus į kad askorbo rūgšties (EB 50 = 190,47 ± 1,2 ir 174,13 ± 0,9 g /ml), taip pat žinomas nuoroda molekulė (1 lentelė) .table 1 EC50 vertės DPPH ir ABTS radikalų oro kondicionavimo veikla saldžiavaisio pupmedžio ankštys vandeninio ekstrakto (CPAE ). EK50: veiksminga koncentracija mėginyje, kad gali sumažėti DPPH arba ABTS koncentraciją iki 50%
EC50 DPPH radikalų oro kondicionavimo veiklos (g /ml)
EC50 ABTS radikalų oro kondicionavimo veiklos (mikrogramų /ml),
CPAE
228,22 5,27
3.95
± 184,41 ± askorbo rūgštis
190,47 ± 1,2
174,13 ± 0,9
poveikis CPAE ant EtOH sukeltas ūminis makroskopinis skrandžio žalos ir apimtis pokytis
makroskopinis tyrimas skrandžio gleivinės parodyta pav. 1. Kaip ir tikėtasi, EtOH administracija eksponuojami sužalojimų, įskaitant kraujavimo ir hiperemija. CPAE ir famotidino gydymas buvo nuo dozės priklausomas sumažėjimą visose Makroskopinių toksinių požymių, palyginti su EtOH gydytoje grupėje. Be to, kiekybinė analizė parodė, kad saldžiavaisio pupmedžio ekstraktas arba nuoroda molekulė paruošiamasis apdorojimas, žymiai ir priklausomai nuo dozės sumažino opa indeksą, apsaugoti nuo skrandžio tūrio sulčių sumažėjimo, ir pagerės apsaugos procentą traumų sukeltų EtOH administravimo (2 lentelė). Pav. 1 Poūmė poveikis caob ankščių vandeninis ekstraktas (CPAE) ir famotidino (FAM) dėl makroskopinių pokyčių sukeliamų etanolio (EtOH) žiurkėms. Gyvūnai iš anksto buvo gydomi įvairių dozių CPAE (mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
500, 1000 ir 2000), FAM (10 mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
) arba bi-distiliuoto vandens, skundžiamoji su vienas išgėrus EtOH (po 4 g /kg kūno svorio, kūno svorio, PO pervežimas) arba NaCl 9 ‰ dvi valandas. A: kontrolė; b: EtOH; C: EtOH + CPAE-500; D: EtOH + CPAE-1000; E: EtOH + CPAE-2000 ir f: EtOH + FAM)
2 lentelė Poūmė efektas iš saldžiavaisio pupmedžio ankštys vandeninis ekstraktas (CPAE), famotidino (FAM) ir askorbo rūgšties (AA) dėl makroskopinių kiekybinių pokyčių sukeliamų EtOH žiurkėms: opa gleivių tūris, opa plotas ir apsauga procentas. Gyvūnai iš anksto buvo gydomi įvairių dozių CPAE (mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
500, 1000 ir 2000), FAM (10 mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
) arba bi-distiliuoto vandens, skundžiamoji su vienas išgėrus EtOH (po 4 g /kg kūno svorio, kūno svorio, PO pervežimas) arba NaCl 9 ‰ dvi valandas
grupė
gleivių kiekio (ml)
opa indekso ( mm2)
apsauga procentinė dalis (%)
Valdymo
4.3 ± 0,20
----
----
EtOH
1,9 ± 0,3 *
86,2 ± 2,6 * pervežimas 00
EtOH + CPAE-500
2,9 ± 0
67,0 ± 3,6 # pervežimas 23,4
EtOH + CPAE-1000
3.4 ± 0.2 #
16,6 ± 1,4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3,9 ± 0,3 #
06.4 ± 0.9 #
92,2 pervežimas EtOH + FAM
3.8 ± 0.2 #
26,2 ± 3,3 # pervežimas 68,1 pervežimas *: p
< 0,05 palyginus su kontroline grupe ir #: P
< 0,05, palyginti su EtOH GROUP UAB Poveikis CPAE apie EtOH sukelta skrandžio mikroskopinių traumos
Mes taip pat nagrinėjo EtOH ir CPAE poveikį skrandžio gleivinės histologiją ir rezultatai yra parodyta pav. 2. EtOH 80% sukeltas gerokai erozinio pažeidimas skrandžio audinio. CPAE arba famotidino anksto gydymas labai sumažino histopatologinių pokyčius, kuriuos sukelia ūminio apsinuodijimo alkoholiu. Pav. 2 Poūmė poveikis caob ankščių vandeninis ekstraktas (CPAE) ir famotidino (FAM) dėl histologinių pokyčių sukeliamų etanolio (EtOH) žiurkėms. Gyvūnai iš anksto buvo gydomi įvairių dozių CPAE (mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
500, 1000 ir 2000), FAM (10 mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
) arba bi-distiliuoto vandens, skundžiamoji su vienas išgėrus EtOH (po 4 g /kg kūno svorio, kūno svorio, PO pervežimas) arba NaCl 9 ‰ dvi valandas. A: kontrolė; b: EtOH; C: EtOH + CPAE-500; D: EtOH + CPAE-1000; E: EtOH + CPAE-2000 ir f punktai: EtOH + FAM)
poveikis CPAE ant EtOH sukelta skrandžio lipoperoxidation ir vandenilio peroksido padidinti
darę poveikį EtOH ir CPAE poveikio oksidacinio streso būklės, mes pirmiausia studijavo skrandžio lipoperoxidation ir vandenilio peroksido kiekis (3a pav.). EtOH intoksikacija drastiškai padidėjo skrandžio MDA ir H 2O 2 lygis (pav 3b.). CPAE gerokai prieš gydymą ir priklausomai nuo dozės atstatomi lipoperoxidation ir vandenilio peroksidas padidėjimas sukelia EtOH intoksikacijos. Pav. 3 Poūmė poveikis caob ankščių vandeninis ekstraktas (CPAE) ir famotidino (FAM) etanolio (EtOH) indukuotų pokyčių skrandžio gleivinės MDA A ir H2O2 b lygių žiurkėms. žiurkėms. Gyvūnai iš anksto buvo gydomi įvairių dozių CPAE (mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
500, 1000 ir 2000), FAM (10 mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
) arba bi-distiliuoto vandens, skundžiamoji su vienas išgėrus EtOH (po 4 g /kg kūno svorio, kūno svorio, PO pervežimas) arba NaCl 9 ‰ dvi valandas. *: P
< 0,05 palyginus su kontroline grupe ir #: P
< 0,05, palyginti su EtOH GROUP UAB Effect d CPAE apie EtOH sukelta skrandžio -SH grupių sumažinti
Mes taip pat parodė, kad tiolio grupės lygis buvo žymiai sumažintas skrandžio gleivinės alkoholio vartojusiems žiurkių. Tačiau CPAE (500, 1000 ir 2000 mg /kg kūno svorio, sv P.O.
) arba famotidino (10 mg /kg kūno svorio, sv P.O.
) iš anksto apdoroti žymiai apsaugoti nuo šio sumažėjimo, palyginti su EtOH grupės (4 pav.). Pav. 4 Poūmė poveikis caob ankščių vandeninis ekstraktas (CPAE) ir famotidino (FAM) etanolio (EtOH) indukuotų pokyčiai skrandžio gleivinėje SH- grupių lygį žiurkėms. žiurkėms. Gyvūnai iš anksto buvo gydomi įvairių dozių CPAE (mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
500, 1000 ir 2000), FAM (10 mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO
) arba bi-distiliuoto vandens, skundžiamoji su vienas išgėrus EtOH (po 4 g /kg kūno svorio, kūno svorio, PO pervežimas) arba NaCl 9 ‰ dvi valandas. *: P
< 0,05 palyginus su kontroline grupe ir #: P
< 0,05, palyginti su EtOH GROUP UAB Poveikis CPAE apie EtOH sukeltos antioksidantų fermentų aktyvumo sumažėjimo
Mes taip pat pažvelgė į EtOH ir CPAE efekto antioksidantinių fermentų veiklą skrandžio gleivinės (5 pav.). EtOH 80% žymiai padidėjo skrandžio gleivinė yra antioksidantas fermentų aktyvumas, kaip SOD (A) ir CAT (B), bet GPX veiklą (c) ji žymiai sumažėjo. Tačiau poūmis paruošiamąjį apdorojimą saldžiavaisio pupmedžio ekstrakto arba famotidino žymiai sumažino EtOH sukeltas padidėjimas ir antioksidacinių fermentų veiklą sumažinant šalia kontrolės lygius su aukščiausiu dozę. Pav. 5 Poūmė poveikis caob ankščių vandeninis ekstraktas (CPAE) ir famotidino (FAM) etanolio (EtOH) indukuotų pokyčius skrandžio gleivinėje antioksidacinių fermentų veikla: SOD A, B kat ir GPx C žiurkių .. žiurkėms. Gyvūnai iš anksto buvo gydomi įvairių dozių CPAE (500, 1000 ir 2000 mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO), FAM (10 mg /kg kūno svorio, kūno svorio, PO) arba bi-distiliuoto vandens, ginčijo su vienu geriamosios EtOH (4 g /kg, kūno svorio, PO
) arba NaCl 9 ‰ dvi valandas. *: P
< 0,05 palyginus su kontroline grupe ir #: P
< 0,05, palyginti su EtOH GROUP UAB Diskusija Viesbutis The skrandžio yra jautri virškinimo organų daugiausia veikiami išorinių patogenų iš dietos. Reaguojant į šių patogenų, skrandžio audinio gamina ROS, pavyzdžiui, hidroksilo radikalas, superoksido anijono, kuris gali būti susijęs su skrandžio organinių sutrikimų, pavyzdžiui, gastritas, skrandžio opos, ir skrandžio vėžio, o taip pat funkcinių sutrikimų, tokius kaip funkcinės dispepsijos [ ,,,0],32]. Etanolis yra laikomas vienu iš veiksnių, skatinančių skrandžio opos. Etanolio poveikis skrandžio gleivinės yra sudėtinga ir daugialypė, kurie gali būti susiję su laikotarpiu tarp skrandžio gleivinės apsaugos ir agresyvių veiksnių [33] pusiausvyros sutrikdymo. Etanolis sukelia žaizdos į kraujagyslių endotelio ląstelių, skrandžio gleivinės ir sukelia mikrocirkuliacijos sutrikimams ir hipoksiją, susiejant su deguonies radikalų perprodukcija [34]. ROS gaminami per virškinimo traktą, tačiau jų vaidmenys patofiziologija ir ligų patogenezės nebuvo gerai mokėsi.
Daugelis vaistinių augalų parodyti savo cheminės sudėties, flavonoidų, triterpenoids ir taninų, kurie saugo skrandžio gleivinę per gastroprotektinio indukcijos mechanizmus ar veikia kaip natūralūs antioksidantai [35-37]. Flavonoidai ir taninai yra pagrindinė grupė fenolinių junginių, kurie veikia kaip pirminių antioksidantų ir laisvųjų radikalų žalingo [38].
Mūsų phytochemical tyrimą, pirma, atskleidė, kad jos turtingumą viso polifenoliai, iš viso flavonoidai, taninai ir kondensuotas [14]. Kita vertus, naudojant DPPH ir ABTS radikalas-prapūtimo tyrimą, mes nustatėme, kad CPAE pristato aukšto sujungimo geba, nors ir mažesnį nei askorbo rūgšties, kuri buvo naudojama kaip atskaitos molekulės. Antioksidantas talpa saldžiavaisio pupmedžio yra daugiausia susijęs su aukštesnio lygio fenolio compouds šioje frakcijoje [14]. Tačiau šie molekulės yra pagrindinis šaltinis jų talpa prapūtimo laisvuosius radikalus, tokių kaip superoksido anijono (O 2 .) Ir hidroksilo radikalus (OH .) [39].
In vivo,
mes pirmiausia parodė, kad alkoholio administracija išprovokavo aiškius makroskopinių sužalojimų, įskaitant kraujavimo ir hiperemija, taip pat histopatologiniai pokyčių, pavyzdžiui, erozinių pažeidimų. CPAE paruošiamasis apdorojimas, žymiai pasikeitė EtOH sukeltas skrandžio gleivinės makrolygio ir mikroskopinių pakitimų dozės priklausomu būdu. Tačiau, skrandžio gleivinės anksčiau buvo įrodyta, kad vaidina svarbų vaidmenį skrandžio kliūčių [40] apsaugos. Tai pirmoji gynybos linija prieš rūgšties ir laikosi kartu su bikarbonato iš epitelio išskiriami tarnauti kaip barjerą nuo savęs virškinimo [41]. Be to, skrandžio gleivinės yra svarbus apsauginis veiksnys skrandžio gleivinės ir yra galintis veikti kaip antioksidanto ir sumažinti gleivinės pažeidimas, medijuoto ROS [42]. Taninai galėtų užkirsti kelią opa plėtrą arba per vazokonstrikcinius poveikio, ar dėl jų baltymai-nusodinti kur ji skatina nusėdimą microproteins į opalige svetainėje, formavimas nepralaidų sluoksnį virš pamušalas, kad trukdo žarnų išskyras ir apsaugo pagrindinį gleivinę nuo dirgiklių [43]. Be to, flavonoidai turi anti-opos ir gastritas savybes [44]. Tačiau EtOH sukeltos skrandžio opos anksčiau buvo įrodyta, kad būti sumažintos daugelyje augalų ekstraktai Aqeratum conyzoides
[45], Bacopa monniera ir Azadirachta indica
[46], Hippocratea pasižymi
[47] ir Azadirachta indica
[48]. Tačiau kiek žinome, mūsų ataskaita yra pirmasis susidoroti su vaisių ekstrakto saldžioji ceratonija
(saldžiavaisio pupmedžio) apsauginis poveikis ūminio EtOH sukeltos opų žiurkių skrandžio gleivinę.
Mes taip pat parodė, dabartyje mokytis, kad EtOH intoksikacija sukeltos lipidų peroksidacijos, sumažėjimas tiolio grupių lygmeniu padidinti vandenilio peroksido kiekio bei skurdinti antioksidantas fermentų veiklą, pavyzdžiui, SOD, katė ir GPx. Ūmus alkoholio sukeltas oksidacinis stresas buvo plačiai dokumentais skrandžio gleivinės [49], kepenų [50], inkstų [51], širdies [52] ir smegenų [53]. Etanolis administracija išprovokavo oksidacinį disbalansą per kelius skaičiaus įskaitant reaktyviųjų deguonies formų [54] generacija. Lipidų peroksidacijos lygis yra apie ROS kartos rodiklis audinyje. Tačiau, SOD konvertuoja reaktyvioji radikalas H 2O 2, kuris buvo padidintas skrandžio gleivinės ir jei ne scavenged pagal CAT, ji gali savaime sukelti lipidų peroksidacijos generuojamas hidroksilo radikalų [55].
Dar svarbiau, mes parodė, kad saldžiavaisio pupmedžio ekstraktas iš anksto apdoroti panaikinta ūmų EtOH-sukeltas oksidacinis stresas skrandžio gleivinės. Šie duomenys visiškai patvirtina pranešta apie visus anksčiau vivo
[17] ir in vitro
[15] antioksidantas ir anti-uždegiminių savybių ceratonijos. Mes taip pat parodė mūsų ankstesniame pranešime Sebai et al. [14], kad vandeninis ekstraktas saldžiavaisio pupmedžio ankštys yra gera suma viso polifenolių, visų flavonoidų ir kondensuotas taninų. Šios molekulės yra pirminis šaltinis antioksidanto gebėjimo šio augalo, pagal prapūtimo laisvuosius radikalus, kaip hidroksilo radikalas (OH •), kuris yra pagrindinė priežastis, lipidų peroksidacijos [56]. Be to, ji yra gerai žinoma, kad sulfhydryls yra iš dalies dalyvauja skrandžio ląstelių apsaugą [57], taip pat į išlaikyti gleivinės barjero vientisumas ir prapūtimas laisvuosius radikalus susidaro dėl to, kad kenksmingų medžiagų [58] veiksmų.
Išvada
Taigi, mūsų duomenys aiškiai rodo, kad CPAE daro apsauginį poveikį prieš ūminį etanolio sukeliamo išopėjimo žiurkės skrandžio gleivinę, iš dalies dėka savo antioksidacinių savybių
Santrumpos
CPAE:.
Saldžiavaisio pupmedžio ankštys vandeninis ekstraktas
Carob500: Rīga, saldžiavaisio pupmedžio 500 mg /kg,
Carob1000: Rīga, saldžiavaisio pupmedžio 1000 mg /kg,
Carob2000: Rīga, saldžiavaisio pupmedžio 2000 mg /kg,
CAT: Rīga, Katalazė
GPx:
glutationas peroksidazės
H2O2: Rīga, Hydrogenperoxide
MDA: Rīga, malondialdehido
Prot: Rīga, Proeins
SHS: Rīga, sulfhidrilines grupių
SOD: Rīga, Superoksido dismutazė
deklaracijų
Padėka
finansinę paramą Tuniso ministerijos "enseignement superieur et Recherche Scientifique" yra appreciatively pripažino.
atviros prieigos Šis straipsnis yra platinamas pagal Creative Commons Attribution 4.0 sąlygų Tarptautinis licencija ( "http: //creativecommons org /licencijos /BY /4 0 /.), kuris leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi, bet kokioje laikmenoje, jei jūs suteikiate atitinkamą kreditą pirminio autoriaus (-ai) ir šaltinį, pateikti nuorodą į Creative Commons "licenciją, ir nurodykite, ar buvo padaryta pakeitimų. Creative Commons Public Domain, Dedikacija atsisakymas ( "http: //. Creativecommons org /viešo naudojimo režimas /nulinio /1. 0 /) taikoma duomenys, pateikiami šiame straipsnyje, jeigu nenurodyta kitaip
konkuravimas. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.