Gastroprotektiivinen vaikutus johanneksenleipäpuu (JOHANNEKSENLEIPÄPUU L.) vastaan ​​etanolin aiheuttamia oksidatiivisen stressin rotan

Gastroprotektiivinen vaikutus johanneksenleipäpuu (JOHANNEKSENLEIPÄPUU
L.) vastaan ​​etanolin aiheuttamia oksidatiivisen stressin rotan
tiivistelmä
tausta
Tavoitteenamme tässä tutkimuksessa, oli selvittää gastroprotektiivinen vaikutus johanneksenleipäpuun palot vesiuutteisiin ( CPAE) vastaan ​​etanolin aiheuttamia oksidatiivisen stressin rotilla sekä mekanismi osallisina.
menetelmät
Aikuisia urospuolisia Wistar-rottia käytettiin ja jaettu kuuteen kymmenen kunkin: kontrolli, EtOH: ta (80% v /v, 4 g /kg
), EtOH 80% + erilaisten annosten CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, bw
) ja EtOH + Famotidine (10 mg /kg, po) Eläimet olivat peroraalisesti (po
) esikäsitellä CPAE 15 päivän aikana ja päihtynyt yhdellä suun kautta EtOH (4 g /painokilo
) kaksi tuntia.
tulokset
kolorimetrinen analyysi osoitti, että CPAE näytteillä merkitys in vitro
antioksidantti vastaan ​​ABTS ja DPPH radikaaleja. Huomasimme, että CPAE esikäsittely in vivo
, suojattu EtOH aiheuttamaa makroskooppiset ja histologiset muutokset indusoituu mahalaukun limakalvon. Johanneksen uute hallinto suojattu myös alkoholin aiheuttama tilavuuden mahanesteessä laskua. Vielä tärkeämpää on, Osoitimme, että CPAE torjua EtOH aiheuttamaa mahalaukun lipoperoksidaatiota, käänteinen lasku sulfhydryyliryhmien (-SH) vetyperoksidia (H 2O 2) tasossa, ja esti ehtyminen antioksidantti-entsyymin aktiivisuutta superoksidi dismutase (SOD), katalaasin (CAT) ja glutationiperoksidaasi (GPX).
Johtopäätökset
Nämä havainnot viittaavat siihen, että CPAE kohdistama mahdollinen maha-suojaava vaikutus EtOH aiheuttamaa oksidatiivista stressiä rotilla, mikä johtuu osittain sen antioksidantteja ominaisuuksia.
avainsanat
mahahaava Johanneksenleipäpuun palot oksidatiivista stressiä antioksidantit kapasiteetti Rat Taustaa
ruoansulatuskanavan häiriöt, mahahaava on yleinen sairaus, jossa on useita etiologies. Tämä sairaus, jolle on ominaista limakalvon vaurio, on pääasiallisesti aiheutunut Helicobacter pylori
, verihiutaleita estävien aineiden kuten asetyylisalisyylihappoa [1], steroideihin kuulumattomien tulehduskipulääkkeiden (NSAID) kuten suun kautta bisfosfonaatteja, kaliumkloridi, immunosuppressiivinen lääkitys [2, 3 ], serotoniinin takaisinoton estäjät [4], tupakointi ja alkoholin kulutus [5]. Patofysiologiaan mahahaava on yleensä keskittynyt väliseen epätasapainoon aggressiivinen ja suojaavia tekijöitä mahassa, kuten happo-pepsiinin erittymistä, limakalvoja, liman eritys, veren virtaus, solujen uudistumista, prostaglandiinit ja orvaskeden kasvutekijät [6]. Etanoli aiheuttama mahavaurioita liittyy lähinnä intensiivistä tunkeutuminen Saharan limakalvon joka edistää reaktiivisten happiradikaalien (ROS), laski limaa, ehtyminen sulfhydryyliryhmien ja vähentynyt verenvirtaus ja vaurioita mahalaukun limakalvon [7]. ROS erityisesti hydroksyyliradikaalin pelata merkittävä rooli aiheuttaa hapettumista limakalvon kaikentyyppisissä haavaumat [8]. Voit selvittää mahdollinen mekanismi, joilla aineet voivat toimia edistää gastroprotection useita antioksidantteja molekyylit, kuten quercetin [9] ja curcumin [10] aiemmin tutkittu.
Johanneksen (JOHANNEKSENLEIPÄPUU L.
) on hitaan kasvun yhä vihreä puu viljelty vuosia Välimeren maissa. Johanneksen hedelmä, ruskea pod 10-25 cm pitkä, sisältävät monia bioaktiivisia aineita, kuten makea hiilihydraatti, ravintokuitu, tanniinit, ja polyfenolit [11]. Monet positiivisia terveysvaikutuksia liittyvät kulutuksen fenolisia runsaasti elintarvikkeita ovat olennaisesti niiden antioksidantti toimintaa [12, 13]. Sillä johanneksen uute, tämä ominaisuus on aiemmin raportoitu in vivo
ja in vitro
tutkimuksissa [14, 15]. Viime aikoina olemme ja muut havaitsivat, että Tunisian lehtien johanneksen uute esitellään joitakin lievittäviä vaikutuksia vastaan ​​alkoholin tai CCI 4 aiheuttamaa oksidatiivista vaurioita rotilla kudoksissa [16, 17]. Lisäksi, johanneksenleipäpuun kuitu osoittavat suurta antioksidantteja määräytyy DPPH radikaaleja testi, eli korkeampi kuin monet muut elintarvikkeet runsaasti polyfenoleja, kuten mustikka, viinirypäleet tai punaviiniä [18, 19].
Näin ollen, esillä olevassa tutkimuksessa suunniteltiin arvioimaan otaksuttu gastroprotektiivinen roolia vesiuutteen johanneksenleipäpuun palot (CPAE) (15 päivää) vastaan ​​oksidatiivisen stressin aiheuttama akuutti etanolin altistumista ja mekanismi, joka osallistuu tällaisen suojelun. Tool Menetelmät
Ethics selvitys
tarvittavat luvat alan tutkimuksia ja kokoelma johanneksenleipäpuun palot näytteistä saatiin maa- Tunisiassa ja tunnistaa rouva Mouhiba Ben-Naceur, professori taksonomia Higher Biotekniikan instituutti of Béja, Tunisia. Tositteen yksilöt on talletettu kasvio korkeamman biotekniikan instituutin Béja ja myös bio- tieteet, Faculty of Science, Tunisia.
Valmistaminen johanneksenleipäpuun uutetta
kypsä johanneksenleipäpuun palot kerättiin alueella Tabarka (North-West of Tunisia) lokakuussa 2013. Lyhyesti, kasvimateriaali myöhemmin kuivataan lämpökaapissa 50 ° C: ssa 72 h ja jauhettu sähköinen sekoitin (Moulinex Ovatio 2, FR). Jauheseos, joka sisältää johanneksen massaa (90%) ja siemenet (10%) liuotettiin kahdesti tislattuun veteen ja suodatetaan siivilä (0,5 mm silmäkoko). Lopuksi johanneksenleipäpuun palot Vesiuutteessa heti käytettiin in vitro
ja in vivo
kokeita.
Vapaiden radikaalien poistavaa toimintaa DPPH
antioksidantti kapasiteetti vesiuutteen johanneksenleipäpuun palot suoritettiin käyttäen 2,2-difenyyli-1-pikryylihydratsyylin (DPPH) radikaali poistavaa aktiivisuutta, kuten aiemmin on kuvattu Grzegorczyk et al. [20]. Lyhyesti, eri pitoisuuksia CPAE (20, 50, 100, 150, ja 200 ug /ml) lisättiin 1 ml: aan 0,1 mM metanoliliuosta DPPH ja inkuboitiin 27 ° C: ssa 30 minuutin aikana. Optinen tiheys näytteen kvantitoitiin 517 nm: ssä. DPPH radikaaleja poistavaa aktiivisuutta (RSA), joka ilmaistaan ​​prosentteina, arvioitiin käyttäen seuraavaa kaavaa: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\ ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 $$ Askorbiinihappo käytettiin referenssinä molekyylin samassa pitoisuudessa kuin testiuutteen.
Kaikki analyysit toteutettiin kolmena kappaleena. Tehoa pitoisuus 50 (EY 50) arvo määritettiin konsentraatio (ug /ml) yhdistettä tarvitaan kaivella 50% DPPH radikaali.
Vapaiden radikaalien poistavaa toimintaa ABTS
antioksidantti kapasiteettia johanneksenleipäpuun palot vesiuute arvioitiin käyttäen 2,2'atsino-bis [3-etyylibentstiatsoliini-6-sulfonihappo] (ABTS) menetelmä [21]. Lyhyesti, 1 ml laimennettua uutetta lisättiin 3 ml 7 mM ABTS radikaalia ratkaisua (ABTS • +) ja pidettiin pimeässä huoneen lämpötilassa 60 min. Absorbanssi mitattiin 734 nm: ssä. Huuhteluilman kapasiteetti laskettiin ((1 - Ab /A0) x 100%) (Ab ja A0 ovat absorbanssi näytteiden sekä ABTS • + liuoksen 734 nm.
Eläimet ja käsittely
Terveet aikuiset Wistar rottia (paino 220-250 g; säilytetään niin viisi häkkiä kohden) ja aikuinen mies Swiss Albino hiiriä (paino noin 25 g; sijoitettu kymmenen häkkiä kohti) ostettiin Society of Pharmaceutical Industries Tunisian (SIPHAT, Ben-Arours , TN). Kokeelliset protokollat ​​hyväksyttiin suuntaviivojen kanssa eettisen komitean Science tiedekunta Tunis. testi suoritettiin noudattaen komission direktiivi 2000/32 /EY ja OECD Guideline 474 [22]. Ne ovat osa standardin ruokaa (vakio pelletti ruokavalioon Badr Utique-TN) ja vettä mielin määrin
ja ylläpidetään eläinten talossa valvotussa lämpötilassa (22 ± 2 ° C), jossa on 12 tunnin valo-pimeä sykli. rotat jaettiin puoli tusina ryhmät. Ryhmä 1 ja 2 toimivat kontrolleina ja oli kahdesti tislatussa vedessä (5 ml /kg, kohti
, po
). Ryhmät 3, 4, ja 5 esi-käsiteltiin erilaisilla annoksilla CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, bwpo
), kun taas ryhmässä 6 esikäsiteltiin vastaavasti famotidiinin (10 mg /kg, bwpo
) 15 päivän ajan. Rottia pidettiin paastolla 24 tuntia ennen viimeistä antoa CPAE tai viittaus molekyylejä. 60 minuutin jälkeen, kunkin eläimen, paitsi ryhmässä 1, sai EtOH: ssa (4 g /kg, ruumiinpainoa
) suun kautta. Kaksi tuntia myöhemmin, rotat tapettiin.
Akuutti toksisuustutkimus
johanneksenleipäpuun palot vesiuute annosvälillä 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 ja 200 g /kg oraalisesti eri hiiriryhmää (n
= 10). Eläimiä tarkasteltiin 30 minuutin välein 4 tunnin ajan, ja sitten, silloin tällöin jaksoksi 8 h. 24 h jälkeen, kuolleisuus kirjattiin. Hiiriä tarkkailtiin myös muita merkkejä myrkyllisyydestä, kuten motorista koordinaatiota, oikaisevan refleksi ja hengitysteiden muutoksia.
Arviointi mahalaukun limakalvon vaurio
mahassa jokaisen eläimen poistettiin ja avattiin pitkin suurempaa kaarta. Kudos huuhdottiin varovasti NaCl 0,9%. Vauriot mahalaukun limakalvon olivat makroskooppisesti tutkittiin ja valokuvat hemorraginen eroosioita hankittiin kanssa Photometrics Quantix digitaalikamera. Haava indeksit määritettiin summana pituuksien koko mahavaurioita (mm 2) [23]. Kaksi itsenäistä, sokeita tarkkailijoiden suoritetaan mittauksia vaurion pituus.
Mahalaukun tilavuus mehua määrittämiseksi
Mahalaukun mehu kerättiin ja sentrifugoitiin 3000 g: 5 minuutin aikana liukenemattoman materiaalin poistamiseksi. Supernatantti jälkeen mitattiin käyttämällä jatko putkia [24].
Histopatologisten analyysi
heti eläinten lopettamisen jälkeen, pieniä vatsa kerättiin ja pestiin jääkylmässä suolaliuoksella. Tissue fragmentit kiinnitettiin sitten 10% neutraaliin puskuroituun formaliiniliuokseen, upotettiin parafiiniin ja käytetään histopatologista tutkimusta varten. 5 pm paksu leikattiin, parafiini, sammutettua ja värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla (HE). Mahalaukun leikkeet tutkittiin vuonna sokkotavalla kaikissa käsittelyissä [25].
Lipidiperoksidaatiossa mittaus
Mahalaukun limakalvon lipidiperoksidaatiossa määritettiin MDA mittauksen mukaan kaksinkertaisen lämmitystapa [26]. Lyhyesti, alikvootit mahan limakalvon homogenaatteja sekoitettiin BHT-trikloorietikkahappoa (TCA), joka sisälsi 1% BHT: tä (w /v
) liuotetaan 20% TCA (w /v
) ja sentrifugoitiin 1000 x g
5 minuutin ajan 4 ° C: ssa. Supernatantti sekoitettiin liuos, joka sisälsi (0,5 N HCl: lla, 120 mM TBA puskuroitu 26 mM Tris), ja sitten kuumennettiin 80 ° C: ssa 10 min. Jäähdytyksen jälkeen absorbanssi tuloksena kromofori määritettiin 532 nm: ssä. MDA-tasot määritettiin käyttäen ekstinktiokerrointa MDA-TBA kompleksi 1,56 x 10 5 M -1 · cm -1.
Tioliryhmä mittaus
yhteenlaskettu pitoisuus tiolin ryhmät (-SH) suoritettiin Ellmanin menetelmän [27]. Lyhyesti, alikvootit mahan limakalvon sekoitettiin 100 ui 10% SDS: ää ja 800 ui 10 mM fosfaattipuskuria (pH 8), ja optinen tiheys mitattiin 412 nm: ssä (A 0). Kun oli lisätty 100 ui 5,5'-ditiobis (2-nitrobentsoehappo) (DTNB), reaktioseosta inkuboitiin 37 ° C: ssa 60 min ja uusi arvo (A 1) määritettiin. Tioliryhmät pitoisuus laskettiin A 1 A 0 vähennyslaskua käyttämällä molaarista ekstinktiokerrointa 13,6 x 10 3 M -1 · cm -1. Tulokset ilmaistiin nmol tioliryhmien per
mg proteiinia.
H2O2 määritys
mahalaukun limakalvon H 2O 2 tasolla suoritettiin Dingeon et ai. [28]. Lyhyesti, vetyperoksidi reagoi p-hydroksibentsoehapon ja 4-aminoantipyriini, että peroksidaasin läsnä ollessa johtaa muodostumiseen quinoneimine joka on vaaleanpunainen väri havaitaan 505 nm: ssä.
Antioxidant entsyymiaktiivisuuden määrityksiä
aktiivisuus SOD määritettiin käyttämällä muunnettua epinefriini määrityksiä [29]. Emäksisessä pH: ssa, superoksidianionia O 2 - aiheuttaa Itsehapetusprosessissa adrenaliinin ja adenochrome; kun kilpailevat tämän reaktion, SOD pienensi adenochrome muodostumista. Yksi yksikkö SOD on määritelty määrä uutteen, joka inhiboi määrä adenochrome muodostumista 50%. Entsyymi uute lisättiin 2 ml reaktioseosta, joka sisälsi 10 ui naudan katalaasia (0,4 U /ul), 20 ui epinefriini (5 mg /ml) ja 62,5 mM natriumkarbonaatti /bikarbonaatti-puskurissa, pH 10,2. Absorbanssimuutokset rekisteröitiin 480 nm.
Aktiivisuus CAT arvioitiin mittaamalla alkunopeus H 2O 2 katoaminen 240 nm [30]. Reaktioseos sisälsi 33 mM H 2O 2 50 mM fosfaattipuskurissa pH 7,0 ja aktiivisuus CAT laskettiin käyttäen ekstinktiokerrointa 40 mM -1 cm -1 H 2O 2.
aktiivisuus GPX kvantifioitiin menetelmällä Flohé ja Günzler [31]. Lyhyesti, 1 ml reaktioseosta, joka sisälsi 0,2 ml mahalaukun limakalvon supernatanttia, 0,2 ml: aan fosfaattipuskuria 0,1 M, pH 7,4, 0,2 ml GSH (4 mM) ja 0,4 ml: ssa H 2O 2 (5 mM) inkuboitiin 37 ° C: ssa 1 minuutin ajan ja reaktio pysäytettiin lisäämällä 0,5 ml TCA: ta (5%, paino /tilavuus). Kun oli sentrifugoitu 1500 g
5 min, alikvootti (0,2 ml) välille supernatantti yhdistettiin 0,5 ml: lla fosfaattipuskuria 0,1 M, pH 7,4, ja 0,5 ml DTNB (10 mM), ja absorbanssi luettiin 412 nm: ssä. Aktiivisuus GPX ilmaistiin nmol GSH kulutettu /min /mg proteiinia.
Tilastollinen analyysi
tiedot analysoitiin yksisuuntaisella varianssianalyysillä (ANOVA) ja ilmaistiin keskiarvoina ± keskivirhe keskiarvon (SEM). Tiedot edustavat 10 toisistaan ​​riippumatonta koetta. Kaikki tilastolliset testit kaksisuuntaisia, ja ap
arvon 0,05 tai vähemmän pidettiin merkittävänä.
Tulokset
Välitön myrkyllisyys suun kautta CPAE
akuutti myrkyllisyys suun kautta tutkimuksessa ei epänormaalia käyttäytymistä eikä kuolleisuus oli havaittu havainnointijakson aikana. Siten LD50-arvo oli yli 20 g /kg ruumiinpainoa varten vesiuute johanneksenleipäpuun palot.
In vitro DPPH ja ABTS radikaaleja toimia
Useita pitoisuudet vaihtelevat 0-200 ug /ml CPAE testattiin niiden hapettumisenestoaine toimintaa eri in vitro
malleissa. Olemme havainneet, että radikaali-poistavaa aktiivisuutta CPAE vastaan ​​DPPH ja ABTS radikaalien lisääntynyt merkittävästi annoksesta riippuvalla tavalla. N 50-arvot lasketaan kuvaajan osoittivat, että RSA on CPAE (EY 50 = 228,22 ± 5,27 ug /ml, ja 184,41 ± 3,95 pg /ml vastaavasti DPPH ja ABTS radikaaleja poistava aktiivisuus) ilmestyi samanlaisia että askorbiinihappoa (EY 50 = 190,47 ± 1,2 ja 174,13 ± 0,9 mikrog /ml) sekä tunnettuja viitemolekyylillä (taulukko 1) .table 1 EC50-arvot DPPH ja ABTS radikaaleja poistavaa aktiivisuutta johanneksenleipäpuun palot vesiuute (CPAE ). EC50: tehokas näytteen pitoisuus, joka voi pienentää DPPH tai ABTS pitoisuus 50%
EC50 DPPH radikaaleja poistavaa aktiivisuutta (ug /ml)
EC50 ABTS radikaaleja poistavaa aktiivisuutta (ug /ml)
CPAE
228,22 ± 5,27
184,41 ± 3,95
Askorbiinihappo
190,47 ± 1,2
174,13 ± 0,9
vaikutus CPAE on EtOH aiheuttama akuutti makroskooppinen mahalaukun vahinkoa ja tilavuuden muutos
makroskooppinen tutkimus mahan limakalvon on esitetty kuviossa. 1. Kuten odotettua, EtOH hallinto näytteillä vammat, myös verenvuoto ja hyperemia. CPAE ja famotidiini käsittely osoitti annoksesta riippuvaista pieneneminen kaikkien makroskooppisten toksisten oireiden verrattuna EtOH: lla käsitellyssä ryhmässä. Lisäksi kvantitatiivinen analyysi osoitti, että johanneksen uute tai viitemolekyylillä esikäsittelyyn merkittävästi ja annoksesta riippuen vähensi haavaindeksi, suojattu mahan tilavuus mehu laskua, ja lievittää suojelu prosenttiosuus vamman aiheuttama EtOH hallinto (taulukko 2). Kuva. 1 Subakuutti vaikutus caob palkoja vesiuutteisiin (CPAE) ja famotidiini (FAM) on makroskooppinen aiheuttamien muutosten etanolia (EtOH) rotilla. Eläimet esikäsiteltiin erilaisilla annoksilla CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) tai bi-tislattua vettä, altistettiin suun kautta kerta-annon EtOH: ssa (4 g /kg, bw, po
) tai NaCl: 9 ‰ kaksi tuntia. a: kontrolli; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 ja f: EtOH + FAM) B Taulukko 2 Subakuutit vaikutus johanneksenleipäpuun palot vesiuutteisiin (CPAE), famotidiini (FAM) ja askorbiinihapon (AA) on makroskooppiset kvantitatiivinen aiheuttamien muutosten EtOH rotilla: haavauma lima tilavuus, haavauman ja prosenttiosuus suojaa. Eläimet esikäsiteltiin erilaisilla annoksilla CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) tai bi-tislattua vettä, altistettiin yhden suun kautta EtOH (4 g /kg, kohti, po
) tai NaCl 9 ‰ kaksi tuntia
Ryhmä
Limaa tilavuus (ml)
haavauma-indeksi ( mm2)
Protection prosenttiosuus (%)
Ohjaus
4,3 ± 0,20
----
----
EtOH
1,9 ± 0,3 *
86,2 ± 2,6 *
00
EtOH + CPAE-500
2,9 ± 0
67.0 ± 3.6 #
23,4
EtOH + CPAE-1000
3,4 ± 0.2 #
16.6 ± 1.4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3,9 ± 0,3 #
06,4 ± 0,9 #
92,2
EtOH + FAM
3,8 ± 0.2 #
26.2 ± 3.3 #
68,1
*: p
< 0,05 verrattuna kontrolliryhmässä ja #: p
< 0,05 verrattuna EtOH ryhmä
vaikutus CPAE on EtOH aiheuttaman mahalaukun mikroskooppisen vahinkoa
myös tutkittiin, mikä vaikutus EtOH ja CPAE mahalaukun limakalvon histologian ja tulokset on esitetty kuviossa. 2. EtOH 80% indusoi merkittävästi syövyttävän vaurio mahan kudoksessa. CPAE tai famotidiinin esikäsittelyyn vähentänyt histopatologisia muutoksia aiheuttama akuutti alkoholimyrkytys. Kuva. 2 Subakuutti vaikutus caob palkoja vesiuutteisiin (CPAE) ja famotidiini (FAM) histologisen aiheuttamien muutosten etanolia (EtOH) rotilla. Eläimet esikäsiteltiin erilaisilla annoksilla CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) tai bi-tislattua vettä, altistettiin suun kautta kerta-annon EtOH: ssa (4 g /kg, bw, po
) tai NaCl: 9 ‰ kaksi tuntia. a: kontrolli; b: EtOH; c: EtOH + CPAE-500; d: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 ja f: EtOH + FAM) B vaikutus CPAE on EtOH aiheuttamaa mahalaukun lipoperoksidaatiota ja vetyperoksidin lisäys
Laakeri vaikutuksesta EtOH ja CPAE oksidatiivista stressiä kunnossa, me ensin tutkittu mahan lipoperoksidaatiota ja vetyperoksidipitoisuus (kuvio. 3a). EtOH myrkytyksen voimakkaasti kohonneet mahalaukun MDA ja H 2O 2 tasossa (Fig. 3b). CPAE esikäsittelyn merkittävästi ja annoksesta riippuen käänteinen lipoperoksidaatiota ja vetyperoksidin lisäys aiheuttama EtOH myrkytys. Kuva. 3 Subakuutti vaikutus caob palkoja vesiuutteisiin (CPAE) ja famotidiini (FAM) etanoli (EtOH) aiheuttaman muutokset mahalaukun limakalvon MDA A ja H2O2 b tasoilla rotilla. rotilla. Eläimet esikäsiteltiin erilaisilla annoksilla CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) tai bi-tislattua vettä, altistettiin suun kautta kerta-annon EtOH: ssa (4 g /kg, bw, po
) tai NaCl: 9 ‰ kaksi tuntia. *: P
< 0,05 verrattuna kontrolliryhmässä ja #: p
< 0,05 verrattuna EtOH ryhmään
vaikutus on CPAE on EtOH aiheuttamaa mahalaukun -SH-ryhmien pienentää
Osoitimme myös, että tioliryhmät taso väheni merkittävästi mahalaukun limakalvon alkoholin saaneilla rotilla. Kuitenkin CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, ruumiinpainoa p.o.
) tai famotidiinin (10 mg /kg, ruumiinpainoa p.o.
) esikäsittely merkitsevästi suojattu tätä laskua verrattuna EtOH ryhmään (Fig. 4). Kuva. 4 Subakuutti vaikutus caob palkoja vesiuutteisiin (CPAE) ja famotidiini (FAM) etanoli (EtOH) aiheuttama muutokset mahalaukun limakalvon SH- ryhmien tasolle rotilla. rotilla. Eläimet esikäsiteltiin erilaisilla annoksilla CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, bw, po
), FAM (10 mg /kg, bw, po
) tai bi-tislattua vettä, altistettiin suun kautta kerta-annon EtOH: ssa (4 g /kg, bw, po
) tai NaCl: 9 ‰ kaksi tuntia. *: P
< 0,05 verrattuna kontrolliryhmässä ja #: p
< 0,05 verrattuna EtOH ryhmään
vaikutus CPAE on EtOH aiheuttama antioksidantti-entsyymin toimintaa ehtyminen
Olemme edelleen tarkasteltiin vaikutusta EtOH ja CPAE päälle antioksidanttientsyymejä toimintaa mahan limakalvon (Fig. 5). EtOH 80% kasvanut merkittävästi mahalaukun limakalvon antioksidantti-entsyymin toimintaa SOD (A) ja CAT (B), mutta se vähensi GPX aktiivisuus (C). Kuitenkin subakuutin esikäsittelyä johanneksen uute tai famotidiini vähensi EtOH aiheuttama nousu ja lasku antioksidantti-entsyymin toimintaa lähellä valvonnan tasolle suurimmalla annoksella. Kuva. 5 Subakuutti vaikutus caob palkoja vesiuutteisiin (CPAE) ja famotidiini (FAM) etanoli (EtOH) aiheuttaman muutokset mahalaukun limakalvon antioksidantti-entsyymin toimintaa: SOD a, CAT b ja GPX c rotilla .. rotilla. Eläimet esikäsiteltiin erilaisilla annoksilla CPAE (500, 1000 ja 2000 mg /kg, bw, po), FAM (10 mg /kg, bw, po) tai bi-tislattua vettä, altistettiin yhden suun kautta EtOH (4 g /kg, bw, po
) tai NaCl: 9 ‰ kaksi tuntia. *: P
< 0,05 verrattuna kontrolliryhmässä ja #: p
< 0,05 verrattuna EtOH ryhmään
Keskustelu
Vatsa on herkkä ruoansulatuskanavan elin pääasiallisesti altistunut eksogeenisen taudinaiheuttajia ruokavaliosta. Vastauksena näihin taudinaiheuttajia, vatsa kudos tuottaa ROS kuten hydroksyyli radikaali superoksidianionia, mikä saattaa johtua kehittämiseen mahalaukun orgaanisen häiriöt kuten gastriitti, mahalaukun haavaumia, ja mahasyövän sekä toiminnallisia häiriöitä, kuten toiminnallinen dyspepsia [ ,,,0],32]. Etanoli pidetään yksi tekijöistä, jotka aiheuttavat mahahaavan. Vaikutukset etanolin mahalaukun limakalvon ovat monimutkaisia ​​ja monitahoisia, jotka voivat liittyä häiriön välisen tasapainon mahalaukun limakalvon suojaavia ja aggressiiviset tekijät [33]. Etanoli saa vahingoittaa verisuonen endoteelisolujen mahalaukun limakalvon ja indusoi mikroverenkierron häiriöt ja hypoksiaa, linkittää ylituotannon happiradikaalien [34]. ROS tuotetaan sisällä ruoansulatuskanavassa, mutta heidän roolinsa patofysiologiaan ja sairauksien synnyssä ei ole hyvin tutkittu.
Monet lääkekasveja osoittavat niiden kemiallisen koostumuksen, flavonoideja, triterpenoids ja tanniinit, jotka suojaavat mahalaukun limakalvon läpi induktion gastroprotective mekanismien välityksellä tai luonnon antioksidantteja [35-37]. Flavonoidit ja tanniinit ovat pääryhmä fenoliyhdisteiden jotka toimivat ensisijaisena antioksidantteja tai vapaiden radikaalien poistajat [38].
Meidän phytochemical tutkimuksessa ensinnäkin, paljasti, että sen rikkaus yhteensä polyfenolit, yhteensä flavonoideja ja tanniineilla [14]. Toisaalta, käyttämällä DPPH ja ABTS radikaaleja poistava määritystä havaitsimme, että CPAE muodostaa suuren puhdistusjärjestelmä kapasiteetti, vaikkakin vähäisempi kuin askorbiini- happoa, jota käytettiin referenssinä molekyyli. Antioksidantti kapasiteetti johanneksenleipäpuu liittyy lähinnä korkeamman fenolisten compouds tällä osa [14]. Nämä molekyylit ovat merkittävä lähde niiden kapasiteetin huuhteluilman vapaiden radikaalien kuten superoksidianionia (O 2 .) Ja hydroksyyli radikaali (OH .) [39].
Vivo,
me ensinnäkin osoitti, että alkoholi hallinto aiheutti selvän makroskooppinen vammat, myös verenvuoto ja hyperemia sekä histopatologisia muutoksia, kuten erosive vaurioita. CPAE esikäsittely merkittävästi käänteinen EtOH aiheuttamaa mahan limakalvoa makro- ja mikroskooppisia vaurioita annoksesta riippuvalla tavalla. Kuitenkin mahalaukun limakalvo oli aiemmin osoitettu olevan kriittinen rooli suojaamaan mahan esteet [40]. Se on ensimmäinen puolustuslinja happoa ja tarttuu yhdessä bikarbonaatti erittämät epiteelin toimia esteenä vastaan ​​itsestään ruoansulatusta [41]. Lisäksi, mahalaukun limakalvo on tärkeä suojaava tekijä mahalaukun limakalvon ja pystyy toimimaan antioksidanttina aineena ja vähentämään limakalvon vaurioita välittämien ROS [42]. Tanniinit voivat estää haavauma kehitystä joko vasokonstriktiivisia vaikutuksia, tai johtuen niiden proteiinien saostamalla missä se edistää saostumista microproteins on haavaumia sivuston, joka muodostaa läpäisemättömän kerroksen päälle vuori, joka estää suolen eritteet ja suojaa alla olevaa limakalvon ärsyttävät [43]. Lisäksi flavonoideja on mahahaavan ja mahaa suojaava ominaisuuksia [44]. Kuitenkin, EtOH aiheuttama mahahaava on aiemmin osoitettu olevan heikennetty monet kasvit uutteet Aqeratum conyzoides
[45], pikkubakopa ja neempuu
[46], Hippocratea loistaa
[47] ja neempuu
[48]. Kuitenkin sikäli kuin tiedämme, meidän raportti on ensimmäinen käsitellä hedelmäuute of JOHANNEKSENLEIPÄPUU
(johanneksenleipäpuu) suojaava vaikutus akuuttia EtOH aiheuttama haavauma rotan mahan limakalvoa.
Myös osoitti esillä tutkia että EtOH päihtymyksen aiheuttama lipidiperoksidaation laskua tioliryhmiä tasolla, kasvua vetyperoksidipitoisuus sekä ehtyminen antioksidantti-entsyymin toimintaa, kuten SOD, CAT ja GPX. Akuutti alkoholin aiheuttama oksidatiivisen stressin laajasti dokumentoitu mahan limakalvoa [49], maksa [50], munuaisen [51], sydän [52] ja aivoissa [53]. Etanoli hallinto provosoi oksidatiivisen epätasapaino läpi useita reittejä kuten sukupolvi reaktiivisia happiradikaaleja [54]. Lipidiperoksidaatiota taso on osoitus sukupolven ROS kudoksessa. Kuitenkin SOD muuntaa reaktiivinen superoksidiradikaali H 2O 2, joka nostettiin mahalaukun limakalvon ja jos ei scavenged CAT, se voi itsessään aiheuttaa lipidiperoksidaatiossa synnyttämällä hydroksyylitähdettä [55].
Mikä tärkeintä, osoitimme että johanneksen uute esikäsittely poisti akuutin EtOH aiheuttamaa oksidatiivista stressiä mahalaukun limakalvon. Nämä tiedot täysin tukee kaikkia aiemmin raportoitu in vivo
[17] ja in vitro
[15] antioksidantti ja anti-inflammatorisia ominaisuuksia johanneksenleipäpuun. Olemme myös osoittaneet edellisessä raportissa Sebai et al. [14], että vesiuute johanneksenleipäpuun palot sisältää hyvän määrän koko polyfenolit, yhteensä flavonoideja ja tiivistetyn tanniinit. Nämä molekyylit ovat Primal lähde antioksidantti kyky tämän kasvin, sieppaamalla vapaita radikaaleja hydroksyyliradikaalin (OH •), joka on suurin syy lipidiperoksidaation [56]. Lisäksi on yleisesti tunnettua, että sulfhydryylien ovat osittain mukana mahalaukun solusuojaus [57] ja myös ylläpitää ja limakalvon eheyden ja sieppaavat vapaita radikaaleja muodostuu johtuen toiminnan haitallisten aineiden [58].
Johtopäätös
Lopuksi tuloksemme osoittavat selvästi, että CPAE kiinnostavuus suojaavia vaikutuksia akuuttia etanolin aiheuttamia haavaumia rotilla mahalaukun limakalvon, osittain kiitos sen antioksidantin ominaisuuksia.
lyhenteet
CPAE:
Johanneksenleipäpuun palot vesiuute
Carob500:
johanneksenleipäalalla 500 mg /kg
Carob1000:
johanneksenleipäalalla 1000 mg /kg


Carob2000:
johanneksenleipäalalla 2000 mg /kg
CAT:
Catalase
GPX:
glutationiperoksidaasi-
H2O2:
vetyperoksidia
MDA:
Malonidialdehydi
Prot:
Proeins
SHS:
sulfhydryyliryhmät
SOD:
Superoksididismutaasi

julistukset
Kiitokset
Taloudellinen tuki Tunisian ministeriön "Enseignement supérieur et Recherche scientifique" on arvostavasti tunnustettu.
Open Access Tämä artikkeli on jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä 4.0 International License (http: //creativecommons. org /lisenssejä /by /4 0 /), joka mahdollistaa rajoittamattoman käytön, jakelun, ja lisääntyminen tahansa mediassa, kunhan annat asianmukaiset luottoa alkuperäisen tekijän (t) ja lähde, antaa linkin Creative Commons lisenssin, ja ilmoittaa, jos muutoksia on tehty. Creative Commons Public Domain Dedication luopuminen (http: //creativecommons. Org /public domain /nolla /1 0 /) sovelletaan toimitetut tiedot tässä artikkelissa, ellei toisin mainita.
Kilpailevat Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Korrelaatio hK6 ilmaisutapoja kasvaimen uusiutumisen ja ennusteeseen edenneen mahasyövän cancer
• Elämänlaatu, immuunimodulaatio ja turvallisuutta adjuvanttia misteli potilailla mahalaukun syöpä - satunnaistettu, kontrolloitu pilotti study