Dynamiskt uttryck av CEACAM7 i prekursor lesioner av magcancer och dess prognostiskt värde i kombination med CEA

Dynamiskt uttryck av CEACAM7 i prekursor lesioner av magsäckscancer och dess prognostiskt värde i kombination med CEA Bild Sammanfattning
Bakgrund
Betydelsen av karcinoembryonalt antigen relaterade celladhesionsmolekyl 7 (CEACAM7) uttryck i magcancer och precancerous lesions och dess korrelation med CEA uttryck har sällan tidigare undersökts.
Metoder
CEACAM7 och CEA uttryck detekterades genom immunhistokemi i konsekutiva sektioner av 345 patienter med magsäckscancer och precancerous lesions. Laser konfokal analys utfördes för att bestämma CEACAM7 och CEA lokalisering. Korrelation mellan CEACAM7 och CEA uttryck med kliniskt patologiska parametrar analyserades statistiskt.
Resultat
CEACAM7 uttryck korrelerade med patologiska betygs (P = 0,006), Lauren klassificering (P = 0,023), och CEA uttryck (Spearman R = 0,605, P < 0,001) i magcancer. CEACAM7 samlokaliserad med CEA övervägande i det cytoplasmiska membranet av cancerceller. CEA uttryck korrelerade med lymfkörtelmetastaser (P = 0,031). CEACAM7 och CEA uttryck ökas successivt från ursprungs skador till gastric karcinom. En kombination av CEACAM7 och CEA uttryck bestämdes att vara en oberoende prediktor för patienter med magsäckscancer av multivariat analys (P = 0,001).
Slutsatser
CEACAM7 uttryck korrelerar med tumördifferentiering och CEA uttryck i magcancer. CEACAM7 och CEA uttryck kan synergistiskt främja gastric cancer. Kombinerat CEACAM7 och CEA expressionsanalys kan vara en användbar postoperativ prediktor för patienter med magsäckscancer.
Nyckelord
CEACAM7 magcancer föregångar lesioner prognos CEA Bakgrund
Fördjupad kunskap om genotypiska och fenotypiska egenskaper magcancer och precancerösa lesioner är oerhört viktigt för att förhindra deras utveckling, förkortar deras utveckling till en högre grad tumör när de utvecklas och ge prognostisk information. Gastriska karcinom har i allmänhet delas in i intestinal-typ och diffus-typ av Lauren [1]. Cancern intestinal-typ tänktes att visa en övervägande intestinal fenotyp eftersom det föregås av en precancerös stadium som kännetecknas av de sekventiella stegen av atrofisk gastrit, intestinal metaplasi, intraepitelial neoplasi (GIN), och intramucosal karcinom [2, 3]. GIN erkänns som en viktig precancerous lesion, och kategoriseras som antingen hög eller låg kvalitet enligt både Wien [4] och WHO [5] klassificeringar. Det har rapporterats att den dominerande histologiska typ kan ändras från den differentierade till odifferentierad typ som tumörerna framsteg [6]. Ohkura et al rapporterade också att histologisk mångfald ökat mag karcinom växte eller invaderade submukosa [7]. Den senaste tidens framsteg inom molekylärbiologi har visat att den fenotypiska mångfald av tumörer är associerad med en motsvarande mångfald i genuttryck [8-10]. Förändringar i uttryck av tumörspecifika biomarkörer i precancerous lesions och olika differentierade gastriska karcinom kan hjälpa oss att förstå omvandlingen till histologiska heterogenitet och den underliggande molekylära mekanismen.
Karcinoembryonalt antigen (CEA) familj av gener har visat sig uttryckas i en olika epitelceller härledda neoplasmer [11], och deras funktionella avreglering har visat att främja metastaser i djurmodeller [12]. En särskild CEA-genen familjemedlem, CEA cellulär adhesionsmolekyl-7 (CEACAM-7), reglerar normal celldifferentiering [11]. har visats avreglering av CEACAM-7 uttryck förekommer i början av kolorektal onkogenes; minskade CEACAM-7 expression visades i adenom, hyperplastiska polyper, och avvikande crypt foci [11, 13]. CEA, en annan medlem av karcinoembryonalt antigen familj representerar en tumörmarkör som ofta används vid behandling av kolorektal cancer [14-16]. Ökade CEA-nivåer var den första identifierade indikator på återkommande sjukdom i 81% [17] och 89% [18] av kolorektala cancerpatienter. Både mesenteriska och perifera nivåer av CEA var högre i tumörer med venös engagemang, stor diameter, och avancerade stadier av kolorektal cancer [19]. Ökade CEA värden har också rapporterats för andra epitelceller maligniteter, såsom de i bröst, lunga, och pankreas [20].
Hittills finns på CEACAM7 uttryck i mag icke-neoplastisk och neoplastiska lesioner lite information. En studie rapporterar att CEACAM7 mRNA nivåer uppreglerade i cancer gastric epitelceller [21]. Emellertid är betydelsen av CEA och CEACAM7 expression i precancerösa lesioner av magkarcinom dåligt kända. Dessutom är förhållandet mellan CEACAM7 och CEA oklar, även om de tillhör samma CEACAM familj.
I denna studie undersökte vi sambandet mellan CEACAM7 och CEA uttryck, och deras förhållande till olika kliniskt patologiska funktioner i magcancer, inklusive patienten överlevnad. Vi jämförde uttrycksmönster CEACAM7 och CEA systematiskt normal slemhinna, kronisk atrofisk gastrit, intraepitelial neoplasi (GIN) och karcinom i magen med vävnadsmicroarray rad (TMA) sektioner. Såvitt vi vet är detta den första immunohistokemisk studie av CEACAM7 uttryck i magcancer och precancerous lesions.
Metoder
Patienter
I studien ingick 345 patienter, däribland 145 patienter med magsäckscancer som genomgick primär kirurgisk resektion mellan 2006 och 2009 vid Xijing Hospital of Forth militära Medical University (Xi'an, Kina), 100 patienter med intraepitelial tumörer (55 lågvärdiga och 45 hög kvalitet), 50 patienter med kronisk atrofisk gastrit, och 50 patienter med normal magslemhinna . De 200 patienter med icke-neoplastisk och precancerous lesions hade fått en gastric endoskopisk kontroll och biopsi mellan 2008 och 2010 vid Xijing-sjukhuset. Alla diagnoser, inklusive differentieringsstatus gjordes baserat på patologi och genetik Tumörer i matsmältningsorganen av tre patologer [22]. GIN kategoriseras som antingen hög eller låg kvalitet enligt både Wien [4] klassificeringar. Uppföljning utfördes på 145 patienter med magsäckscancer för överlevnadsanalys. Dessa patienter genomgick delsumma gastrektomi med D2 lymfkörtel dissektion vid Xijing-sjukhuset från 2006 till 2009. Medelåldern var 56,4 år (intervall, 32-74 år). Alla patienter fick postoperativ kemoterapi med hjälp av en fluorouracil baserad regim. Inga patienter fick preoperativ kemoterapi eller gick strålbehandling. Uppföljning utfördes på patienter från dagen för kirurgi tills antingen dödsdatum eller 30 mars 2011, vilket resulterar i uppföljnings perioder som sträcker sig från 5 till 67 månader (medelvärde, 31 månader). Dessa fall förlorade mot uppföljning eller de som dog av en annan än magcancer orsak ansågs censurerade uppgifter för analys av överlevnad. I samtliga fall har informerat samtycke erhållits för användning av utskurna tumörprover. Studien godkändes av moralisk och etisk kommitté Xijing Hospital of Forth militära Medical University.
Vävnads Microarrays
Vävnader av magcancer eller precancerösa lesioner gjordes i vävnadsmikro arrayer av vävnads Microarrayer (Beecher Instruments, Silver Spring, USA ™), enligt tekniken av Kononen et al [23]. I korthet innebar detta kärn vävnadsbiopsier (2 mm i diameter) tagen från enskilda paraffininbäddade vävnader (donor block) och anordnade i en ny mottagare paraffinblock (vävnadsuppsättning block) med användning av en trefin apparat. Färgnings Resultaten av de olika områdena i dessa vävnadsmatrisblock visade utmärkt överensstämmelse. En kärna valdes från varje enskilt fall för analys. Vi definierade en tillräcklig fall som en tumör som upptog 10% av kärnområdet.
Primära antikroppar för immunohistokemi
Mus-anti-human CEACAM7 antikropp [BAC2] (ab26281) och kanin-anti-human-CEA-antikropp (ab-15157 ) var alla köptes från Abcam plc. (Cambridge, UK).
Immunhistokemi
Immunhistokemi utfördes på 4-lm-tjocka, rutinmässigt bearbetade, paraffinsektioner i serie. Kortfattat, efter gräddning på en panel vid 60 ° C under en timme, den paraffininbäddad ades formalin fasta vävnadsprover avparaffinerades med xylen och rehydratiserades genom gradient etanol nedsänkning. Endogen peroxidasaktivitet släcktes genom 3% (vol /vol) väteperoxid i metanol under 10 minuter, följt av tre 3-minuters tvättningar med fosfatbuffrad saltlösning (PBS). Detta följdes av ett steg för antigenåtervinning. Objektglasen nedsänktes i 0,01 mol /l citrat-buffertlösning (pH 6,0) och placerades i en mikrovågsugn under 30 min. Efter en tvätt i 0,01 mol /l av fosfatbuffrad saltlösning (PBS, pH 7,4), Snitten blockerades sedan med 10% (vol /vol) normalt getserum i PBS under 30 minuter följt av inkubering i en fuktig kammare vid 4 över natten med den primära antikroppen till CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam) eller CEA 01:10, ab-15157, Abcam) utspätt i PBS innehållande 1% (vikt /volym) bovint serumalbumin (BSA). Negativa kontroller utfördes genom att ersätta den primära antikroppen med för-immun musserum. Efter tre 3-minuters tvättningar med PBS, var sektionerna behandlades med andra anti-mus-antikropp (PV-6002, Santa Cruz) under 30 minuter vid rumstemperatur följt av tre ytterligare tre-minuters tvättningar med PBS. Reaktionsprodukten visualiserades med diaminobensidin (DAB, ZLI-9032, ZSGB. Beijing, Kina) vid rumstemperatur under 2 min. Efter att ha blivit motfärgades med Harris hematoxylin (ZLI-9039, ZSGB. Beijing, Kina) under 3 min, och sköljdes med kranvatten, varvid sektionerna var omedelbart dehydratiserades genom sekventiell nedsänkning i gradient etanol och xylen, och monterades med pernount och täckglas. Bilder erhölls under ett ljusmikroskop (Olympus BX51, Olympus, Japan) utrustad med en DP70 digitalkamera.
Utvärdering av Färgning Hus Till utvärdering av cellfärgning, var avsnitt granskas av två oberoende patologer utan förkunskaper i klinisk-patologisk status av proverna. Expression av CEACAM7 och CEA utvärderades i enlighet med förhållandet mellan positiva celler per prov (R) och färgningsintensitet (I). Förhållandet mellan positiva celler per prov bedömdes 0 för färgning av < 1%, en för färgning av 2 till 25%, två för missfärgning på 26 till 50%, 3 för färgning av 51-75%, och 4 för färgning > 75% av de undersökta cellerna. Intensitet graderades enligt följande: 0, ingen signal; 1, svag; 2, måttlig; och 3, stark färgning. En totalpoäng (R × I) 0-12 slutligen beräknades och graderades som negativ (-score: 0-2). Och positiv (+, 3-12) katalog Immunofluorescens och laser konfokal scanning
Efter gräddningen på en panel vid 60 ° C under en timme, var sektionerna avparaffinerades med xylen och rehydratiserades genom gradient etanol nedsänkning. Detta följdes av ett steg för antigenåtervinning. Objektglasen nedsänktes i 0,01 mol /l citrat-buffertlösning (pH 6,0) och placerades i en mikrovågsugn under 30 min. Efter en tvätt i 0,01 mol /l av fosfatbuffrad saltlösning (PBS, pH 7,4), proverna inkuberades med blockeringsbuffert (5% normalt getserum, 1% bovint serumalbumin och 0,1% Triton X-100) under en timme vid rumstemperatur. Proverna inkuberades sedan med primära antikroppar utspädda i blockeringsbuffert vid 4 ° C över natten, följt av 3 tvättar i PBS under 10 minuter vardera. Slutligen togs prover färgades med sekundära antikroppar utspädda i blockeringsbuffert under 30 minuter följt av 3 tvättar i PBS. Täck monterades på objektglas med Förläng antifade (Invitrogen). Antikroppar som användes för immunfärgning inkluderar mus-anti-CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam), kanin-anti-CEA (01:10, ab-15157, Abcam), sekundära antikroppar som användes var get-anti-mus-IgG-Alexa 549 (1: 300 , Invitrogen), get-anti-kanin-IgG Alexa 488 (1: 300, Invitrogen), DAPI (1: 1000, Molecular Probes). Intilliggande normala vävnader användes som negativa kontroller (20 mm bort från cancervävnad). Immun vävnader visualiserades och bilder fångades med FlUOVIEW (FVLIOi,
OLYMPUS.
Statistisk analys Alla statistiska analyser genomfördes med hjälp av IBM SPSS 19,0 programvara. Mätdata analyserades med Students t eller envägs ANOVA-test, medan kategoridata studerades med hjälp av theχ2 eller icke-parametrisk test. Överlevnadskurvor kurvor~~POS=HEADCOMP uppskattades med Kaplan-Meier-metoden, och log-rank test användes för att beräkna skillnader mellan kurvorna. multivariat analys med hjälp av Cox proportional hazards regressionsmodell utfördes för att utvärdera . prognostiska värden för proteinuttryck korrelations~~POS=TRUNC koefficient~~POS=HEADCOMP mellan uttryck av CEACAM7 och CEA uppskattades med hjälp av Spearman korrelationsmetoden Statistisk signifikans fastställdes till P <.. 0.05
Resultat
Samuttryck av CEACAM7 och CEA i magcancer
Immunohistokemi utfördes på varandra följande avsnitt av 145 gastric karcinom med hjälp av antingen anti-CEACAM7 eller anti-CEA-antikropp (Figur 1). Immunhistokemisk analys visar att 100 av 145 (69,0%) prover kategoriseras som CEACAM7-negativa (Figur 1A), och 45 av 145 (31,0%) prover kategoriseras som CEACAM7-positiva (Figur 1C, 1E). CEACAM7 uttryck var samstämmiga med CEA uttryck i 80,0% (116 av 145) av gastric fall cancer (Spearman R = 0,605, P < 0,001). CEACAM7 och CEA dubbel positivitet observerades i 40 fall, var dubbel-negativitet observerats i 76 fall, och 29 fall befanns vara antingen CEACAM7-positiva eller CEA-positiva endast. Uttrycket korrelationskoefficient uppskattades med hjälp av Spearman Rank Correlation metod. Spearman R-värdet var 0,605 (P < 0,001), vilket tyder på ett nära samband mellan CEACAM7 och CEA uttryck i mag karcinom. Eftersom det är obekvämt och onödigt att kontrollera lokaliseringen av de två antigenerna genom immunofluorescens i alla de 40 karcinomvävnader som är positiva för både CEACAM7 och CEA, undersökte vi deras lokalisering i sju vävnadssektioner som var slumpmässigt valda från de 40 karcinomvävnader sektioner. Laser konfokal mikroskopi-analys visade att de samlokaliserade i membranet och cytoplasman av cancerceller (Figur 2A, B, C, D). Figur 1 Samuttryck av CEACAM7 och CEA i mag karcinom. A & B, Negativ färgning för CEACAM7 (A) och CEA (D) i en väl differentierad magkarcinom. C &D, CEACAM7 (C) och CEA (D) färgning var negativ i brunnen differentierad område (cancerceller är varierade i körtel-liknande form) och positiva i den dåligt differentierad område (brun färg) av en gastrisk carcinom. E & F, Positiv färgning för CEACAM7 (E) och CEA (F) i en dåligt differentierad magkarcinom. A & B, C &D och E &. F är intilliggande seriesnitt, respektive (DAB som kromogen, motfärgades med Harris hematoxylin, 50X) Review figur 2 Co-lokalisering av CEACAM7 och CEA i vävnaden av magcancer. (Laser konfokalmikroskopi analys i en representativ sektion). Positivt uttryck för CEACAM7 (A, röd) eller CEA (B, grön) i membranet och cytoplasman av cancerceller (röda). C, sammanslagna bilden utan kärnfärgning; samexpression av CEACAM7 och CEA observeras (gul). D, sammanslagna bilden med kärnan färgas av DAPI (blå). (200X).
Korrelation av CEACAM7 och CEA uttryck med kliniskt patologiska egenskaper hos magcancer
Förhållandet mellan CEACAM7 och CEA uttryck och olika kliniskt patologiska egenskaper hos gastriska karcinom sammanfattas i tabell 1. CEACAM7 var oftare uttryck i dåligt differentierade tumörer än väl och måttligt differentierade gastriska karcinom (41,3% jämfört med 20,0%, P = 0,006). CEACAM7 positivitet var signifikant högre i diffus-typ gastriska karcinom än i intestinal-typ gastriska karcinom, (39,7% mot 22,2%, P = 0,023). CEA uttryck signifikant korrelerade med lymfkörtelmetastaser (P = 0,031) .table en Korrelation av CEACAM 7 och CEA uttryck med kliniskt patologiska egenskaper magcancer.
Variabler
CEACAM 7
P-värde
CEA
P-värde

Negativ
(n = 100)
Positiv
(n = 45)
vid Negativ
(n = 81)
Positiv
(n = 64)
vid Gender
Male
74(67.3%)
36(32.7%)
0.437
58(52.7%)
52(47.3%)
0.178
Female
26(74.3%)
9 (25,7%) Review 23 (65,7%) Review 12 (34,3%) Review Ålder (år) katalog (medel ± SD) katalog 59,8 ± 10,4
58,1 ± 13,3
0,608
60,3 ± 9,4
58,9 ± 12,9
0,512
placering av tumör
Övre
12 (60,0%) Review 8 (40,0%) Review 0,601
9 (45,0%) Review 11 (55,0%) katalog 0,544
USA
49 (69,0%) Review 22 (31,0%) Review 40 (56,3%) Review 31 ( 43,7%) katalog Lower
39 (72,2%) Review 15 (27,8%) Review 32 (59,3%) Review 22 (40,7%) Review histologi †
Well och Moderate
56(80.0%)
14(20.0%)
0.006
43(61.4%)
27(38.6%)
0.741
Undifferentiated
44(58.7%)
31(41.3%)
38 (50,7%) Review 37 (49,3%) Review Laurens klassificering
Intestinal
56(77.8%)
16(22.2%)
0.023
39(54.2%)
33(45.8%)
0.683
Diffuse
44(60.3%)
29(39.7%)
42 (57,5%) Review 31 (42,5%) Review Djup tumör
T1-T2
28 (75,7%) katalog 9 (24,3%) Review 0,307
20 ( 54,1%) Review 17 (45,9%) Review 0,797
T3-T4
72 (66,7%) Review 36 (33,3%) Review 61 (56,5%) Review 47 ( 43,5%) katalog nod metastaser
Negative
59(72.8%)
22(27.2%)
0.257
37(67.3%)
18(32.7%)
0.031
Positive
41(64.1%)
23(35.9%)
44 (48,9%) Review 46 (51,1%) Review lymfatiska invasion
Negative
44(75.9%)
14(24.1%)
0.143
35(60.3%)
23(39.7%)
0.375
Positive
56(64.4%)
31(35.6%)
46 (52,9%) Review 41 (47,1%) katalog Venös invasion
Negative
52(70.3%)
22(29.7%)
0.729
43(58.1%)
31(41.9%)
0.578
Positive
48(67.6%)
23(32.4%)
38 (53,5%) Review 33 (46,5%) Review tumörstadium
I- II
40 (62,5%) Review 24 (37,5%) Review 0,135
34 (53,1 %) Review 30 (46,9%) katalog 0,555
III IV
60 (74,1%) Review 21 (25,9%) Review 47 (58,0%) Review 34 (42,0 %) Review OBS: Pearson X2-test gjordes för att få P-värde, förutom att åldrar jämfördes genom Student-t-test. † Väl = väl differentierad cancer; måttligt = måttligt differentierad cancer; odifferentierad = dåligt differentierad cancer, signetring cellscancer, eller mucinöst carcinoma.
dynamiskt uttryck av CEACAM7 och CEA i normal slemhinna och precancerous lesions
Resultaten av CEACAM7 och CEA uttryck i normal slemhinna och precancerösa lesioner sammanfattades i tabell 2. Positivitet för CEACAM7 uttryck återfanns i kronisk atrofisk gastrit (12%, 6/50), låggradig GIN (29,1%, 16/55), och höggradig GIN (28,9%, 13/45). CEACAM7 uttryck hittades inte i normal slemhinna (0/50). Positivitet för CEACAM7 uttryck i lågvärdiga gin var betydligt högre än för kronisk atrofisk gastrit (P = 0,032), och CEACAM7 var oftare uttryck i atrofisk kronisk gastrit än vid normal magslemhinna (P = 0,012), men det fanns ingen signifikant skillnad i CEACAM7 uttryck mellan låggradig Gin och höggradig GIN (P = 0,982). CEA-positivitet hittades i normal slemhinna (6%; 3/50), kronisk atrofisk gastrit (8%; 4/50), låggradig GIN (57,1%; 13/55), och höggradig GIN (60%; 20/45). CEA-positivitet för låggradig GIN var signifikant högre än för kronisk atrofisk gastrit (P = 0,030), men var lägre än den för höggradig GIN (P = 0,028). Det fanns ingen signifikant skillnad i CEA-positivitet mellan normal slemhinna och kronisk atrofisk gastrit (P = 0,500). CEACAM7 expression var lokaliserad till den luminala ytan av kronisk atrofisk gastrit och gin (figur 3C, E, och 3G) ades ingen immunoreaktion detekterades i normal slemhinna (figur 3A). CEA var lokaliserad på den luminala ytan av normal slemhinna, kronisk atrofisk gastrit, låggradig GIN, och höggradig GIN (figur 3B, D, F, och 3H), medan både CEA och CEACAM7 expression var lokaliserad till hela ytan av gastric cancerceller (Figur 3i och 3J) Tabell 2 Relation mellan CEACAM7 och CEA uttryck med olika gastriska vävnader
vävnader
vid N
CEACAM7
vid vid CEA
vid
negativ
Positiv
P-värde *
negativ
Positiv
P-värde *
Normal slemhinna
50
50 (100%) Review 0 (0%) Review 0,0121
47 (94%) Review 3 (6%) Review NS4
Kronisk atrofisk gastrit
50
44 (88,0%) Review 6 (12,0%) Review 0,0322
46 (92%) Review 4 (8%) Review 0,0305
Låg klass GIN
55
39 (70,9%) Review 16 (29,1%) katalog NS3
42 (76,4%) Review 13 (23,6%) Review 0,0286
Högkvalitativt GIN
45
32 (71,1%) Review 13 (28,9%) Review 25 (55,6%) Review 20 (44,4%) Review * χ2 test. N-antal fall, Gin-gastric intraepitelial neoplasi. NS-ingen betydelse (P > 0,05). 1 Jämfört med normal slemhinna, CEACAM7 positivitet var betydligt högre i kronisk atrofisk gastrit (P = 0,012); 2 jämfört med kronisk atrofisk gastrit, var CEACAM7 oftare uttrycks i låg klass GIN (P = 0,032); 3There fanns ingen signifikant skillnad i CEACAM7 expression mellan Låg grad GIN och High grade GIN (P = 0,982); 4There fanns ingen signifikant skillnad av CEA expression mellan normal slemhinna och kronisk atrofisk gastrit (P = 0,500); 5Compared med kronisk atrofisk gastrit, var CEA oftare uttrycks i låggradig GIN (P = 0,030); 6 Jämfört med låg kvalitet GIN var CEA oftare uttrycks i hög kvalitet GIN (P = 0,028).
Figur 3 Olika uttrycksmönster CEACAM7 och CEA i gastriska icke-neoplastiska lesioner och gastriska karcinom. På varandra följande sektioner användes för analys. Ingen immunoreaktion för CEACAM7 detekterades i normal slemhinna (A). CEACAM7 var lokaliserad på den apikala ytan av kronisk atrofisk gastrit (C), låg grad GIN (E) och höggradig GIN (G). CEA var lokaliserad på den apikala luminala ytan av normal slemhinna (B), kronisk atrofisk gastrit (D), låggradig GIN (F) och höggradig GIN (H). Både CEACAM7 (I) och CEA (J) var lokaliserad på hela ytan av gastriska cancerceller. (DAB som kromogen, motfärgades med Harris hematoxylin, 200X).
Överlevnadsanalys
Ett års och tre-årsöverlevnaden var 92,0% och 54,1%, respektive, för CEACAM7 och CEA dubbel negativa patienter, 98,3% och 45,1%, respektive, för CEACAM 7 och CEA enda positiva (antingen CEACAM7 positiv eller CEA positiva) patienter och 64,0% och 8,5% för CEACAM7 och CEA dubbel positiva patienter. Signifikant skillnad observerades mellan överlevnadsgraden för dubbelnegativa och dubbelpositiva patienter (Figur 4, P = 0,001). Dock ingen signifikant skillnad mellan dubbelnegativa och enkel positiva patienter (Figur 4, P = 0,391). Multivariat analys visade att dubbel positivitet för CEACAM7 och CEA-uttryck (P = 0,004) och tumörstadium (P = 0,001) var faktorer oberoende associerad med sämre patientens prognos (tabell 3). Figur 4 Kaplan-Meier kurvor för postoperativ överlevnad. Medianöverlevnadstiden hos patienter med CEACAM7 och CEA dubbel positivitet var kortare än den hos patienter med dubbel negativitet (log-rank test: P = 0,001). Men det fanns ingen signifikant skillnad mellan medianöverlevnadstiden för patienter med enkel positivitet och dubbel negativitet (P = 0,391).
Tabell 3 multivariat analys baserad på Cox proportionella faror modell
Variabel
Hazard Ratio (95%
konfidensintervall)
P-värde
tumörstadium III, IV vs I, II
2.240 ( 1,501-3,343) katalog 0,001
CEACAM7 (+) CEA (+) vs CEACAM7 (-) CEA (-) katalog 1,545 (1,153-2,069) Review 0,004
Diskussion
CEA är en av de mest användbara tumörmarkörer för cancer [24], och dess uttryck befanns vara korrelerade med kliniskt patologiska funktioner, såsom venös inblandning, större diameter, och avancerade stadier av kolorektala karcinom [25, 26]. I tjocktarmscancer är CEA uppregleras, men CEACAM7 rapporterades att nedregleras [11], är det intressant att de båda uppregleras i magcancer, och co-uttrycks i de flesta vävnader. vilket tyder på att CEACAM7 kan spela olika roller i olika cancerformer. Som CEACAM7 uttryck befanns vara nära korrelerad med CEA uttryck i magcancer i denna studie, Vi kontrollerade dess korrelation med olika kliniskt patologiska egenskaper, och fann att CEACAM7 uttryck var mer frekvent i dåligt differentierade gastric karcinom än väl och måttligt differentierade karcinom (P = 0,006), och var också korrelerad med Laurens klassificering (P = 0,023). Det har rapporterats att den dominerande histologiska typ kan ändras från den differentierade till odifferentierad typ som tumörerna framsteg [6], Ohkura, et al [17] rapporterade också att histologiska mångfald ökar när gastriska karcinom växa eller invadera submucosa. Således, hypotes vi att CEACAM7 skulle främja aggressivitet och progression av magcancer via reglering av tumörcelldifferentiering, och detta kräver ytterligare utredning.
Som intestinal-typ cancer tros föregås av en precancerös stadium kännetecknas av de sekventiella stegen av atrofisk gastrit, intestinal metaplasi, gins, och intramucosal karcinom, skulle det vara av stor betydelse för att klargöra den dynamiska uttryck av CEACAM7 och CEA i normal magslemhinna, kronisk atrofisk gastrit, gins, och gastrisk carcinom. Vi fann att, jämfört med gastric normal slemhinna var CEACAM7 uttryck signifikant ökad i kronisk atrofisk gastrit och alla andra skador, och CEA uttryck ökade signifikant i gin och magcancer. Dessa resultat indikerar att CEACAM7 kan spela en roll vid gastrisk karcinogenes på ett tidigt stadium, specifikt kronisk atrofisk gastrit skede. Dessutom kan CEA samarbeta med CEACAM7 vid gin skede. I överensstämmelse med våra resultat, CEA transgena möss visade massivt förstorade kolon innefattande en kontinuerlig mosaik av svår hyperplasi, dysplasi, och tandade adenomatös morfologi, vilket tyder på att uppreglering av CEA skulle vara ett avgörande steg i human cancer progression [27]. Det verkar som uppreglering av CEACAM7 eller CEA uttryck kan vara ett tidigt molekylär händelse i tumörbildning, och båda proteinerna kan användas som screening biomarkörer i precancerous lesions för att identifiera patienter med hög risk för malignt omvandlingen. Däremot minskade uttrycket av CEACAM-7 har visat sig förekomma i början av kolorektal onkogenes, med minskat uttryck i adenom, hyperplasi polyper, och även avvikande kryptan foci.11,13 Den kontrasterande uttryck av CEACAM7 i mag- och kolorektal cancer innebär att dess funktionen är kontextberoende.
Patienter med avancerad cancer ofta vill veta hur länge de har kvar att leva [28], men kliniker inte är säker på att uppskatta prognos [29]. Därför biomarkörer för prognosen är ett potentiellt verktyg för att hjälpa kliniker med patientvård. Under det senaste decenniet har ett stort antal proteiner som är förmodat viktiga i cancer och cancerbiologi studerats för deras prognostiska värde i magcancer, men ingen har visat sig vara tillräckligt användbara i klinisk förutsägelse. Det är högst osannolikt att en enda proteinmarkör kommer att ge den känslighet och specificitet som krävs för prognos. Således har tonvikten förskjutits till upptäckten av kombinationer av biomarkörer direkt relaterade till sjukdomsprocesser [30]. I denna studie, endast avancerad tumörstadium och CEACAM7 och CEA dubbel positivitet identifierades med hjälp av Cox proportional hazards modell som oberoende prognostiska prediktorer för överlevnad av patienter med resectable gastric cancer, oberoende av ålder, kön, differentiering, patologiska TNM stadium, lymfa nod metastasering, lymfatiska och venösa invasion av patienterna.
slutsatser
Såvitt vi vet är detta den första jämförande immunohistokemisk studie av CEACAM7 och CEA uttryck i magcancer och precancerous lesions. De två proteinerna samuttrycktes och samlokaliserade i magcancer. CEACAM7 expression befanns vara signifikant korrelerad med differentieringen av gastrisk carcinom. Uttrycket av CEACAM7 och CEA befanns öka gradvis under utvecklingen av magcancer. CEACAM7 och CEA dubbel positivitet kan vara en användbar postoperativ prognos prediktor för patienter med magsäckscancer.
Förklaringar
Tack
Detta arbete stöddes av National 973 Projekt Kina (No.2010CB529300, 02, 05, 06) och National Natural Science Foundation i Kina (nr 81.030.044).
Authors 'ursprungliga inlämnade handlingarna Images of Nedan finns länkar till författarnas ursprungliga inlämnade filer för bilder. 12957_2011_914_MOESM1_ESM.tiff Författaroriginalfilen för figur 1 12957_2011_914_MOESM2_ESM.tiff Författaroriginalfilen för figur 2 12957_2011_914_MOESM3_ESM.tiff Författaroriginalfilen för figur 3 12957_2011_914_MOESM4_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 4 Konkurrerande intressen
Författarna förklarar att de har inga konkurrerande intressen.

• Är protonpumpshämmare det första valet för akut behandling av magsår? En metaanalys av randomiserade kliniska trials
• Samtidig komposit adrenal feokromocytom, multipla gastric stromacellstumörer och pseudohermaphrodism hos en patient med von Recklinghausens disease