Dinaminis išraiška CEACAM7 į prekursorių pakitimų skrandžio karcinoma ir jo prognostinė vertė kartu su CEA

Dinaminis išraiška CEACAM7 į prekursorių pakitimų skrandžio karcinoma ir jo prognostinė vertė kartu su CEA
Anotacija
Background
iš karcinoembrioninius antigeno susijusių ląstelių adhezijos molekulės reikšmės 7 (CEACAM7) išraišką skrandžio karcinoma ir ikivėžinius pakitimus ir jo koreliacija su CEA išraiška retai anksčiau buvo tiriami.
metodai
CEACAM7 ir CEA išraiška buvo aptiktas imunohistocheminiu paeiliui skyriuose 345 asmenų, sergančių skrandžio karcinoma ir ikivėžinius pakitimus. Lazerinis Confocal analizė buvo atlikta siekiant nustatyti CEACAM7 ir CEA lokalizacija. Koreliacija tarp CEACAM7 ir CEA išraiškos su klinikos parametrų statistiškai analizuojami.
Rezultatai
CEACAM7 išraiška koreliuoja su patologinio rūšiavimo (p = 0,006), Lauren klasifikacija (p = 0,023), ir CEA išraiškos (Ietininkas R = 0,605, p < 0,001) skrandžio karcinoma. CEACAM7 bendrai lokalizuota su CEA daugiausia citoplazmos membranos vėžinių ląstelių. CEA išraiška koreliavo su limfmazgių metastazių (p = 0,031). CEACAM7 ir CEA išraiška palaipsniui išaugo iš pirminių pažeidimų skrandžio karcinoma. Iš CEACAM7 ir CEA išraiškos derinys lėmė būti nepriklausoma prognozuoti pacientams, sergantiems skrandžio karcinoma pagal Dispersinės analizės (p = 0,001).
Išvadas
CEACAM7 išraiška koreliuoja su naviko diferenciacijos ir CEA raiškos skrandžio karcinoma. CEACAM7 ir CEA išraiška gali sinergiškai skatina skrandžio kancerogenezės. Kombinuoti CEACAM7 ir CEA išraiška analizė gali būti naudinga pooperacinis prognozuoti pacientams, sergantiems skrandžio karcinoma.
Raktiniai žodžiai
CEACAM7 skrandžio karcinoma pirmtakų pažeidimai prognozė CEA faktai
išsamių žinių apie genotipiniais ir fenotipo savybes skrandžio karcinoma, ikivėžinių pakitimų labai svarbu užkirsti kelią jų vystymuisi, apribodami jų progresavimą į aukštesnį lygį naviko, kai jie parengti ir teikti prognostinę informaciją. Skrandžio karcinomos esmės buvo suskirstyti į žarnyno tipo ir difuzinio tipo Lauren [1]. Žarnyno tipo vėžys buvo manoma, kad būtų rodomas daugiausia žarnyno fenotipą, nes jis prieš tai ikivėžinių etape būdingas eilės žingsnių atrofinį gastritu, žarnyno metaplazijos, intraepitelinei neoplazija (GIN) ir intramucosal karcinoma [2, 3]. Gin yra pripažintas svarbiu ikivėžinių pažeidimo, ir priskiriamos arba didelio arba mažo laipsnio pagal tiek Vienoje [4] ir PSO [5] klasifikacijos. Buvo pranešta, kad dominuojantis histologinę tipas gali keistis diferencijuotas į nediferencijuotos tipo augliai pažangą [6]. Ohkura et al pat pranešė, kad histologinis įvairovė padidėjo skrandžio karcinomos augo arba įsiveržė į submucosa [7]. Pastaruoju metu padarytos molekulinės biologijos parodė, kad fenotipo įvairovė navikų yra susijęs su atitinkamu įvairovės genų ekspresijos [8-10]. Pokyčiai išraiška naviko konkrečių biologinių žymenų į ikivėžinius pakitimus ir įvairių diferencijuotų skrandžio karcinoma gali padėti mums suprasti, perėjimą prie histologinio heterogeniškumo ir pagrindinės molekulinės mechanizmą.
Karcinoembrioninius antigenas (CEA) šeimos genai buvo įrodyta, kad būti išreikšta įvairovė epitelio kilęs navikų [11], ir jų funkcinės dereguliavimo buvo įrodyta, kad skatinti metastazes gyvūnų modelius [12]. Vienas CEA genų šeimos narys, CEA ląstelių sulipimas molekulė-7 (CEACAM-7), reguliuoja normalų ląstelių diferenciaciją [11]. Dereguliavimas CEACAM-7 išraiška buvo įrodyta, kad atsiranda anksti storosios žarnos onkogenezėje; sumažėjo CEACAM-7 išraiška buvo parodyta adenomų, hiperplazinių polipai, ir nukrypusiu nuo normos kriptų židinių [11, 13]. CEA, dar vienas karcinoembrioninį antigeno šeimos narys, reiškia naviko požymių, buvo naudojama plačiai gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžio [14-16] valdymo. Padidėjęs CEA koncentracija buvo pirmasis nustatė rodiklis pasikartojančių ligos 81% [17], ir storosios žarnos vėžiu sergančių pacientų 89% [18]. Tiek pasaito ir periferinių lygiai CEA buvo didesnis navikų su venų dalyvavimo, didelio skersmens ir stadijose storosios žarnos karcinoma [19]. Taip pat buvo pranešta Padidėjęs CEA vertės kitų epitelinių navikų, kaip antai iš krūties, plaučių ir kasos [20].
Iki šiol mažai informacijos apie CEACAM7 raiškos skrandžio nonneoplastic ir navikinių. Vienas tyrimas praneša, kad CEACAM7 iRNR koncentracija buvo iki-reguliuojami vėžinių skrandžio epitelinių ląstelių [21]. Tačiau CEA ir CEACAM7 raiškos ikivėžinius pakitimus skrandžio karcinoma reikšmė yra menkai suprantamas. Be to, tarp CEACAM7 ir CEA santykiai yra neaiški, nors jie priklauso tai pačiai CEACAM šeimos.
Šiame tyrime mes ištirti ryšį tarp CEACAM7 ir CEA išraiška, ir jų ryšį su įvairių klinikos funkcijų skrandžio karcinoma, įskaitant paciento koreliaciją išlikimo. Mes palygino raiškos modelius CEACAM7 ir CEA sistemingai normaliai gleivinės, lėtinė atrofinį gastritas, skrandžio intraepitelinei neoplazija (GIN) ir karcinoma, skrandžio su eilės audinių microarray (PMA) skyriuose. Mūsų žiniomis, tai pirmas imunohistocheminis tyrimas CEACAM7 išraiškos skrandžio karcinoma ir ikivėžinius pakitimus.
Metodai
Pacientai
Tyrime dalyvavo 345 pacientų, įskaitant 145 pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu, kuriems buvo atlikta pirminė chirurginės rezekcija nuo 2006 ir 2009 prie Xijing ligoninės Forth Karo medicinos universitetas (Sianas, Kinija), 100 pacientai, sergantys intraepitelinei navikais (55 žemos kokybės 45 aukštos kokybės), 50 pacientai, sergantys lėtiniu atrofinį gastritas ir 50 pacientai su normalia skrandžio gleivinės , Apie 200 pacientai, sergantys nonneoplastic ir ikivėžinius pakitimus gavo skrandžio endoskopinės čekį ir biopsiją tarp 2008 ir 2010 metu Xijing ligoninėje. Visi diagnozės, įskaitant diferenciacijos statuso, buvo priimtas remiantis patologijos ir genetikos navikų Virškinimo sistemą trijų patologai [22]. Gin yra priskiriamos arba didelio arba mažo laipsnio pagal abiejų Vienos [4] klasifikacijų. Tolesni buvo atliktas 145 pacientams, sergantiems skrandžio karcinoma dėl išlikimo analizė. Šie pacientai patyrė tarpinės sumos pašalintas skrandis su D2 limfmazgių skrodimo metu Xijing ligoninėje nuo 2006 iki 2009 m, vidutinis amžius buvo 56,4 metų (klasės, 32-74 metų). Visi pacientai gavo pooperacinį chemoterapija naudojant fluorouracilu pagrindu režimas. Nėra pacientai gavo priešoperacinė chemoterapija arba atlikta spindulinė terapija. Tolesni buvo atliekama pacientams nuo operacijos dienos iki abiejų mirties ar kovo 30, 2011 dieną, todėl tolesnių laikotarpių svyruoja nuo 5 iki 67 mėnesių (vidutinė, 31 mėnesių). Šios bylos pralaimėjo tolesnių arba tiems, kurie mirė nuo, išskyrus skrandžio vėžio priežastis buvo laikomi cenzūruojamos duomenų apie išgyvenimo analizė. Visais atvejais, informuoti sutikimą buvo gautas už rezekcijos naviko pavyzdžių naudojimo. Šis tyrimas patvirtino moralės ir etikos komiteto Xijing ligoninės Forth Karo medicinos universitete.
Audinių Mikrogardelių
audinių skrandžio karcinoma ar ikivėžinius pakitimus buvo pagamintos audinių mikro masyvų pagal audinių Microarrayer (Beecher įrankiai, Silver spyruoklė, JAV ™), atsižvelgiant į Kononen et al [23] techniką. Trumpai tariant, pagrindinės audinių biopsijos (2 mm skersmens) buvo paimti iš atskirų parafino įterptųjų audinių (donorės blokų) ir išdėstyti nauja gavėjas parafino blokas (audinių masyvo bloko), naudojant trephine aparatą. Dažymo rezultatai įvairiose srityse šių audinių masyvo blokų parodė puikų sutikimą. Vienas branduolys buvo pasirinktas iš kiekvienos bylos analizei. Mes nustatėme tinkamą bylą kaip auglys, kad okupuotoje 10% pagrindinio srityje.
Pirminiai antikūnai imunohistocheminiu
Pelės anti-žmogaus CEACAM7 antikūnų [BAC2] (ab26281) ir triušio prieš žmogaus CEA antikūnų (AB-15157 ) buvo viskas perkama iš Abcam plc. (Cambridge, Jungtinė Karalystė).
Imunohistocheminis
imunohistocheminis buvo atliktas 4-LM storio, paprastai tvarkomi, parafino skyriuose nuosekliai. Trumpai tariant, po kepimo ant skydelio esant 60 ° C temperatūroje vieną valandą, parafino įterptųjų, formalino fiksuoto audinio mėginiai buvo deparaffinized su ksileno ir rehidrataciją per gradiento etanolio pakrovimas. Endogeninės peroksidazės aktyvumo mišinys skaldomas 3% (tūris /tūris) vandenilio peroksido metanolį, 10 minučių, po to tris 3-minutės plovyklose su fosfatinio buferio druskų tirpalu (PBS). Tai buvo po kurio antigenų paieškos žingsnio. Skaidres buvo panardintas į 0,01 mol /l citratas buferinio tirpalo (pH 6,0) ir įdedamas į mikrobangų krosnelėje 30 min. Po į 0,01 mol /l fosfato-buferio druskų tirpalu plauti (PBS, pH 7,4), sekcijos buvo blokuojamos 10% (tūris /tūris) normalus ožkos serumo PBS 30 minučių po inkubacijos drėgnoje kameroje 4 naktį su pirminiais antikūnais į CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam) arba CEA 1:10, AB 15157, Abcam) praskiesto PBS su 1% (masės /tūrio) galvijų serumo albumino (BSA). Neigiama kontrolė buvo atliktas pakeičiant pirminį antikūną su iš anksto-imuninės pelės serumo. Po trijų 3 minutės plovimų su PBS, sekcijos buvo gydomi antrąjį anti-pelės antikūnas (PV-6002, Santa Cruz) 30 minučių kambario temperatūroje, po to dar tris 3 minučių plovyklose su PBS. Reakcijos produktas buvo ryškinamos su diaminobenzidinas (DAB, ZLI-9032, ZSGB. Pekinas, Kinija) kambario temperatūroje 2 min. Po to, kai counterstained su Harris hematoksilinu (ZLI-9039, ZSGB. Pekinas, Kinija) 3 min ir nuplauti vandeniu iš čiaupo, sekcijos buvo iš karto dehidratuoti iki eilės panardinant į gradiento etanolio ir ksileno ir montuojamos pernount ir padengti lapeliai. Vaizdai buvo gauti pagal šviesos mikroskopu ( "Olympus BX51," Olympus ", Japonija) įrengta DP70 skaitmeninio fotoaparato.
Vertinimas Dažymo
Siekiant įvertinti ląstelių dažymosi, skyriai buvo nagrinėjamas dviejų nepriklausomų patologai be išankstinių žinių apie klinikos statusas egzempliorių. Išraiška CEACAM7 ir CEA buvo įvertintas pagal prie teigiamų ląstelių santykis per pavyzdį (R) ir dažymo intensyvumo (I). Teigiamų ląstelių viename bandinyje santykis pelnytas 0 dažymui < 1%, 1 už dažymo nuo 2 iki 25%, 2 už dažymo 26 d iki 50%, 3 dažymui 51-75%, ir 4 dažymo > 75% ląstelių įvertinamų. Intensyvumas buvo įvertintas kaip taip: 0, nėra signalo; 1, silpnas; 2, vidutinio sunkumo; ir 3, stipri dėmių. Iš viso balas (R × I) 0 iki 12 pagaliau buvo apskaičiuotas ir įvertintas kaip neigiamas (-score: 0-2). Ir teigiamu (+, 3-12)
Imunofluorescentinis ir lazerinių Confocal nuskaitymo
Iškepusi ant 60 ° C skydelio valandą, skyriai buvo deparaffinized su ksileno ir rehidrataciją per gradiento etanolio pakrovimas. Tai buvo po kurio antigenų paieškos žingsnio. Skaidres buvo panardintas į 0,01 mol /l citratas buferinio tirpalo (pH 6,0) ir įdedamas į mikrobangų krosnelėje 30 min. Po į 0,01 mol /l fosfato-buferio druskų tirpalu plauti (PBS, pH 7,4), mėginiai buvo inkubuojamos su blokuojančiu buferiu (5% normalaus ožkų serume, 1% galvijų serumo albumino ir 0,1% Triton X-100) vieną valandą kambario temperatūra. tada mėginiai buvo inkubuojamos su pirminių antikūnų, praskiesti blokuojančiu buferiu, esant 4 ° C temperatūroje per naktį, po to 3 kartus skalbiama PBS 10 minučių kiekvienas. Galiausiai, mėginiai buvo tamsintas su antriniais antikūnais, praskiesto blokuojančiu buferiu 30 minučių, po to 3 plovimų PBS. Coverslips buvo montuojamas ant skaidres su prailginti Antifade (Invitrogen). Antikūnai naudojami imunodažymu apima pelės anti-CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam), triušių anti-CEA (1:10, AB 15157, Abcam), antriniai antikūnai naudojamas buvo ožkos anti-pelės IgG Alexa 549 (1: 300 , Invitrogen), ožka prieš triušio IgG Alexa 488 (1: 300, Invitrogen), DAPI (1: 1000, molekuliniai zondai). Gretimuose normaliuose audiniuose buvo naudojami kaip neigiamos kontrolės (20 mm atstumu nuo vėžio audinio). Immunostained audiniai buvo ryškinamos ir vaizdai buvo užfiksuoti naudojant FlUOVIEW (FVLIOi, OLYMPUS.
Statistinė analizė
Visi statistinės analizės buvo atliekamos naudojant IBM SPSS 19.0 programinę įrangą. Matavimo duomenys buvo analizuojami naudojant Stjudento t arba ANOVA testą, o kategoriški duomenys buvo tiriami naudojant theχ2 arba neparametrinį testą. Išgyvenimo kreivės buvo apskaičiuota naudojant Kaplan-Meier metodu, o log-rank testas buvo naudojamas apskaičiuojant skirtumus tarp kreivių. buvo atliktas siekiant įvertinti daugiamatė analizė, naudojant Cox proporcinės rizikos regresijos modelį . prognostiniai vertės baltymų ekspresijos koreliacijos koeficientas tarp išraiškos CEACAM7 ir CEA buvo nustatyta naudojant Spearman koreliacijos metodą Statistinis reikšmingumas buvo nustatytas P <.. 0,05
rezultatai
bendradarbiavimo išraiška CEACAM7 ir CEA skrandžio karcinoma
imunohistocheminis buvo atliktas iš eilės skyriuose 145 skrandžio karcinoma, naudojant arba anti-CEACAM7 arba anti-CEA antikūno (1 paveikslas). Imunohistocheminis analizė rodo, kad 100 145 (69,0%) mėginiai buvo klasifikuojama kaip CEACAM7-neigiamas (1a pav), ir 45 145 (31,0%) mėginiai buvo klasifikuojama kaip CEACAM7-teigiamas (1c pav, 1e). CEACAM7 išraiška buvo sutinkantis su CEA raiškos 80,0% (116 145) skrandžio karcinoma atvejais (Ietininkas r = 0.605, p < 0,001). CEACAM7 ir CEA dukart pozityvumo buvo stebimas 40 atvejų, dukart negatyvumo buvo stebimas 76 atvejų, ir buvo nustatyta 29 atvejų, kad būtų arba CEACAM7 teigiamas arba CEA-teigiamas tik. Sąvoka koreliacijos koeficientas buvo apskaičiuotas naudojant Ietininkas rango koreliacijos metodą. Ietininkas R vertė buvo 0,605 (p < 0,001), kas rodo glaudų ryšį tarp CEACAM7 ir CEA išraiškos skrandžio karcinoma. Kadangi tai yra nepatogu ir nereikalingas patikrinti dviejų antigenų lokalizacija imr.rnofluorescencija visose 40 karcinoma audiniuose, kurios yra teigiamas tiek CEACAM7 ir CEA, mes ištirti jų lokalizacijos septynių audinių skyriuose, kurie buvo atsitiktinai atrinktų iš 40 karcinoma audinių skyriuose. Lazerio konfokaliniais mikroskopija analizė parodė, kad jie bendrai lokalizuota membranoje ir citoplazmos vėžinių ląstelių (pav 2A, B, C, D). 1 paveikslas Bendras išraiška CEACAM7 ir CEA skrandžio karcinoma. "A & B Neigiama dažymo už CEACAM7 (A) ir CEA (D) gerai diferencijuoto skrandžio karcinoma. K & D, CEACAM7 (C) ir CEA (D) dažymo buvo neigiamas gerai diferencijuota srityje (vėžio ląstelės yra svyravo liaukos-kaip forma) ir teigiamas prastai diferencijuotos srityje (rudos spalvos) iš skrandžio karcinoma. E & M, Teigiamas dažymo už CEACAM7 (E) ir CEA (F) prastai diferencijuotai skrandžio karcinoma. "A & B, C & D ir E & f., Yra gretimų serijos skyriai, atitinkamai (TBP kaip chromogeną, counterstained su Harris hematoksilinu, 50x)
pav 2 CO-lokalizacijos CEACAM7 ir CEA į skrandžio karcinoma audinio. (Lazeriniai Confocal mikroskopija analizė reprezentatyvios skyriuje). Teigiamas išraiška CEACAM7 (A, raudona) arba CEA (B, žalia) membranos ir citoplazmos vėžinių ląstelių (raudona). C Sujungtas vaizdas be branduolinės dažymą; bendro išraiška CEACAM7 ir CEA yra stebimas (geltona). D Sujungtas vaizdas su branduolio dažytas DAPI (mėlyna). (200X).
Koreliacija CEACAM7 ir CEA išraiškos su klinikos ypatybių skrandžio karcinoma
Sąryšis tarp CEACAM7 ir CEA raiškos ir įvairių klinikos ypatybių skrandžio karcinoma yra apibendrinti 1 lentelėje CEACAM7 buvo dažniau išreiškė prastai diferencijuotus navikai nei gerai ir vidutiniškai diferencijuoti skrandžio karcinoma (41,3% vs 20,0%, p = 0,006). CEACAM7 pozityvumo buvo reikšmingai didesnis difuzinis tipo skrandžio karcinoma nei žarnyno tipo skrandžio karcinoma, (39,7% vs 22,2%, p = 0,023). CEA išraiška labai koreliuoja su limfmazgių metastazių (p = 0,031) .table 1 koreliacija CEACAM 7 ir CEA išraiškos su klinikos ypatybių skrandžio karcinoma.
Kintamieji
CEACAM 7
P vertę
CEA
P vertę

Neigiamas
(n = 100)
Teigiamas
(n = 45)

Neigiama
(n = 81)
Teigiamas
(n = 64)

lyčių
Male
74(67.3%)
36(32.7%)
0.437
58(52.7%)
52(47.3%)
0.178
Female
26(74.3%)
9 (25,7%)
23 (65,7%)
12 (34,3%)
Amžius (metai)
(priemonė ± SN)
59,8 ± 10,4
58,1 ± 13,3
0,608
60,3 ± 9,4
12,9
0,512
58,9 ± Vieta naviko
Aukštutinė
12 (60,0%)
8 (40,0%)
0,601
9 (45,0%)
11 (55,0%)
0.544
MIDDLE
49 (69,0%)
22 (31,0%)
40 (56,3%)
31 ( 43,7%)
mažesnis
39 (72,2%)
15 (27,8%)
32 (59,3%)
22 (40,7%)
Histologija †
gerai ir Moderate
56(80.0%)
14(20.0%)
0.006
43(61.4%)
27(38.6%)
0.741
Undifferentiated
44(58.7%)
31(41.3%)
38 (50,7%)
37 (49,3%)
Lauren klasifikacinė
Intestinal
56(77.8%)
16(22.2%)
0.023
39(54.2%)
33(45.8%)
0.683
Diffuse
44(60.3%)
29(39.7%)
42 (57,5%)
31 (42,5%)
naviko gylis
T1-T2
28 (75,7%)
9 (24,3%)
0.307
20 ( 54,1%)
17 (45,9%)
0,797
T3-T4
72 (66,7%)
36 (33,3%)
61 (56,5%)
47 ( 43,5%)
node metastazių
Negative
59(72.8%)
22(27.2%)
0.257
37(67.3%)
18(32.7%)
0.031
Positive
41(64.1%)
23(35.9%)
44 (48,9%)
46 (51,1%)
limfinės invazija
Negative
44(75.9%)
14(24.1%)
0.143
35(60.3%)
23(39.7%)
0.375
Positive
56(64.4%)
31(35.6%)
46 (52,9%)
41 (47,1%)
venų invazija
Negative
52(70.3%)
22(29.7%)
0.729
43(58.1%)
31(41.9%)
0.578
Positive
48(67.6%)
23(32.4%)
38 (53,5%)
33 (46,5%)
auglio Stage
I-II
40 (62,5%)
24 (37,5%)
0,135
34 (53,1 %)
30 (46,9%)
0.555
III-IV
60 (74,1%)
21 (25,9%)
47 (58.0%)
34 (42,0 %)
PASTABA: Pearson X2 testas buvo padaryta siekiant gauti p reikšmė išskyrus tai, kad Amžius buvo lyginamas studento-T testą. † Na = gerai diferencijuotas karcinoma; saikingai = vidutiniškai diferencijuoti karcinoma; nediferencijuota = menkai diferencijuotas vėžys, antspaudo žiedas ląstelių karcinoma arba mucinous karcinoma.
Dinaminis išraiška CEACAM7 ir CEA normaliai gleivinės ir ikivėžinius pakitimus
iš CEACAM7 ir CEA išraiškos rezultatų normalus gleivinės ir ikivėžinių pakitimų buvo apibendrinti lentelėje 2. Pozityvumas už CEACAM7 išraiška buvo rastas lėtinio atrofinį gastritas (12%; 6/50), žemos kokybės džinas (29,1%; 16/55), ir aukštos kokybės džinas (28,9%; 13/45). CEACAM7 išraiška nerastas normaliai gleivinės (0/50). Pozityvumas už CEACAM7 išraiškos žemo rango kilpos buvo gerokai didesnis nei lėtinio atrofinį gastritas (p = 0,032), ir CEACAM7 buvo dažniau išreiškiamas atrofinį lėtiniu gastritu negu įprastos skrandžio gleivinės (p = 0,012), tačiau nebuvo reikšmingo skirtumo CEACAM7 išraiška tarp žemos kokybės Džinai ir aukštos kokybės džinas (p = 0,982). CEA pozityvumo buvo rastas normalus gleivinės (6%; 3/50), lėtine atrofinį gastritas (8%; 4/50), žemos kokybės GIN (57,1%; 13/55), ir aukštos kokybės džinas (60%; 20/45). CEA pozityvumo žemos kokybės džinas buvo gerokai didesnis nei lėtinio atrofinį gastritas (p = 0,030), tačiau buvo mažesnė nei už aukštos kokybės džinas (p = 0,028). Nebuvo didelio skirtumo CEA pozityvumo tarp normalaus gleivinės ir lėtinio atrofinį gastritas (p = 0,500). CEACAM7 išraiška buvo lokalizuotas prie luminal paviršiaus lėtinio atrofinį gastritas ir kilpos (pav 3C, E, ir 3G), ne imuninė reakcija buvo aptiktas normalus gleivinės (3a pav.) CEA buvo lokalizuotas ant luminal paviršiaus normalios gleivinės, chroniško atrofinio gastrito, žemos kokybės Gin, ir aukštos kokybės Gin (Fig.3B, D, F, ir 3H), kadangi tiek CEA ir CEACAM7 išraiška buvo lokalizuota į visą paviršių skrandžio vėžinės ląstelės (3I pav ir 3J) 2 lentelė Santykis tarp CEACAM7 ir CEA išraiškos su įvairių skrandžio audinių

N
CEACAM7


CEA


Neigiama

teigiamą
p reikšmė *
Neigiama

teigiamą
p reikšmė *
Normalus gleivinė
50
50 (100%)
0 (0%)
0,0121
47 (94%)
3 (6%)
NS4
Lėtinis gastritas atrofinė
50
44 (88,0%)
6 (12,0%)
0.0322
46 (92%)
4 (8%)
0.0305
žemos kokybės Gin
55
39 (70,9%)
16 (29,1%)
ns3
42 (76,4%)
13 (23,6%)
0.0286 Viesbutis High grade Gin
45
32 (71,1%)
13 (28,9%)
25 (55,6%)
20 (44,4%)
* χ2 testas. N atvejų, džinas-skrandžio intraepitelinei neoplazija. NS-ne reikšmė (p > 0,05). 1, lyginant su įprasto gleivinę, CEACAM7 pozityvumo buvo reikšmingai didesnis lėtinio atrofinį gastritas (p = 0,012); 2, palyginti su lėtiniu atrofinį gastritas, CEACAM7 buvo dažniau išreiškiamas žemos kokybės džinas (p = 0,032); 3There reikšmingai nesiskyrė nuo CEACAM7 išraiškos tarp žemos kokybės Džinai ir aukštos kokybės džinas (p = 0,982); 4There reikšmingai nesiskyrė CEA išraiškos tarp normalaus gleivinės ir lėtinio atrofinį gastritas (p = 0,500); 5Compared su lėtiniu atrofinį gastritas CEA buvo dažniau išreiškiamas žemos kokybės džinas (p = 0,030); 6 Palyginti su žemos kokybės džinas, CEA buvo dažniau išreiškiamas aukštos kokybės džinas (p = 0,028).
Pav 3 skirtingų raiškos modelius CEACAM7 ir CEA skrandžio ne navikinių ir skrandžio karcinoma. Iš eilės dalys buvo naudojamas analizei. Ne imuninė reakcija dėl CEACAM7 buvo aptikta įprastą gleivinės (A). CEACAM7 buvo lokalizuotas ant viršūnės paviršiaus lėtinio atrofinio gastrito (C), žemos kokybės Gin (E) ir aukštos kokybės Gin (G). CEA buvo lokalizuotas ant viršūnės luminal paviršiaus normalios gleivinės (B), lėtinis atrofinio gastritas (D), žemos kokybės Gin (F), ir aukštos kokybės Gin (H). Tiek CEACAM7 (I) formulėje ir CEA (J) buvo lokalizuotas ant viso paviršiaus skrandžio vėžinių ląstelių. (TBP kaip chromogeną, counterstained su Harris hematoksilinu, 200X).
Išgyvenamumo analizė
vienerių metų ir trijų metų išgyvenamumas buvo 92,0% ir 54,1%, atitinkamai, už CEACAM7 ir CEA dukart neigiamų pacientų, 98,3% ir 45,1%, atitinkamai, už CEACAM 7 ir CEA vieno teigiamas (arba CEACAM7 teigiamas arba CEA teigiami) pacientų, o 64,0% ir 8,5% už CEACAM7 ir CEA dukart teigiamiems pacientams. Reikšmingas skirtumas buvo pastebėtas tarp išgyvenimo rodiklis dukart neigiamas ir dukart teigiamiems pacientams (4 pav, p = 0,001). Tačiau jokio reikšmingo skirtumo nerasta tarp dvigubų neigiami ir pavienių teigiamų pacientų (4 pav, p = 0,391). Daugiamatė analizė parodė, kad dukart pozityvumo už CEACAM7 ir CEA išraiškos (p = 0,004) ir naviko stadijos (p = 0,001) buvo veiksniai, nepriklausomai susijęs su prastesne pacientų prognozei (3 lentelė). 4 pav Kaplan-Meier kreivėmis pooperacinio išlikimui. Išgyvenamumo mediana laikas pacientams, sergantiems CEACAM7 ir CEA dukart pozityvumo buvo trumpesnis negu pacientams, sergantiems dvigubo negatyvumo (log-rank testas: p = 0,001). Bet nebuvo reikšmingo skirtumo tarp išgyvenamumo mediana metu pacientams, sergantiems vieno pozityvumo ir dukart negatyvumo (p = 0,391).
3 lentelė daugiamatė analizė, pagrįsta Cox proporcinės rizikos modelio
kintamasis

rizikos santykis (95% pasikliautinasis intervalas
)
P vertė
auglio III etapas IV vs I, II
2.240 ( 1,501-3,343)
0,001
CEACAM7 (+), CEA (+) vs CEACAM7 (-) CEA (-)
1,545 (1,153-2,069)
0,004
Diskusijos
CEA yra buvo rastas vienas iš naudingiausių naviko žymenų karcinoma [24], ir jo išraiška turi būti susietas su klinikos funkcijų, tokių kaip venų dalyvavimo, didesnio diametro ir stadijose storosios žarnos karcinomos [25, 26]. Gaubtinės žarnos vėžiui gydyti, CEA yra aktyvinama, bet CEACAM7 buvo pranešė, kad turi būti downregulated [11], ji yra įdomus, kad jie abu aktyvinama į skrandžio vėžio, ir bendrai išreikštas dauguma audiniuose. tai rodo, kad CEACAM7 gali vaidinti skirtingus vaidmenis skirtingose ​​vėžio. Kaip buvo nustatyta CEACAM7 išraiška turi būti glaudžiai susietas su CEA raiškos skrandžio karcinoma šiame tyrime mes patikrinti jos ryšį su įvairiomis klinikos ypatybių, ir nustatė, kad CEACAM7 išraiška buvo dažnesnės blogai diferencijuotų skrandžio karcinoma, nei gerai ir vidutiniškai diferencijuoti karcinoma (p = 0,006), ir taip pat buvo susietas su Lauren klasifikaciją (P = 0.023). Buvo pranešta, kad dominuojantis histologinę tipas gali keistis diferencijuotas į nediferencijuotos tipo augliai pažangą [6], Ohkura et al [17] taip pat pranešė, kad histologinio įvairovė didėja, kaip skrandžio karcinoma auga ar įsiveržti į submucosa. Taigi, mes iškėlė hipotezę, kad CEACAM7 gali skatinti agresyvumą ir progresavimą skrandžio karcinoma per reguliavimo naviko ląstelių diferenciaciją, ir tai reikia atlikti papildomus tyrimus.
Kaip žarnyno tipo vėžiu yra manoma, kad būti prieš tai ikivėžinių etape būdingas eilės žingsnių atrofijos gastritas, žarnyno metaplazija, kilpos ir intramucosal karcinoma, tai būtų labai svarbi siekiant išsiaiškinti dinamišką išraišką CEACAM7 ir CEA normaliai skrandžio gleivinės, lėtinė atrofinį gastritas, kilpos, ir skrandžio karcinoma. Mes nustatėme, kad, palyginti su skrandžio normalus gleivinę, CEACAM7 išraiška buvo žymiai padidėjęs lėtinis atrofinį gastritas ir visų kitų pakitimų, ir CEA išraiška buvo gerokai padidėjo kilpos ir skrandžio karcinoma. Šie rezultatai rodo, kad CEACAM7 gali vaidinti svarbų vaidmenį skrandžio kancerogenezėje nuo ankstyvo etapo, konkrečiai lėtinio atrofinį gastritas etape. Be to, CEA gali bendradarbiauti su CEACAM7 tuo kilpos etape. Suderinamas su mūsų rezultatus, CEA transgeninių pelių parodė masiškai išsiplėtusios dvitaškiai, apimanti nuolatinį mozaiką sunkus hiperplazija, displazija, ir dantytas adenomatozinės morfologijos, tai rodo, kad iki-reguliavimo CEA gali būti instrumentinė žingsnis žmogaus vėžio progresavimą [27]. Atrodo, kad iki-reguliavimo CEACAM7 arba CEA išraiška gali būti ankstyvas molekulinės renginys Tumorigenesis ir abu baltymai gali būti naudojamas kaip atrankos biologiniai žymekliai ikivėžinius pakitimus identifikuoti pacientus su didelio piktybiškumo rizikos konvertavimo. Priešingai, sumažėjo išraiška CEACAM-7 buvo įrodyta, kad atsiranda anksti storosios žarnos onkogenezėje, su sumažėjusiu išraišką adenoma, hiperplazinių polipai, ir net nenormalaus kripta foci.11,13 kontrastingos išraišką CEACAM7 skrandžio ir storosios žarnos kancerogenezėje reiškia, kad jos funkcija yra kontekstas priklauso.
pacientams, sergantiems pažengusia vėžio dažnai nori žinoti, kaip ilgai jie liko gyventi [28], tačiau gydytojai nesate tikri, ne vertinant prognozę [29]. Todėl biologiniai žymenys skirti prognozės yra potencialus įrankis, kad padėtų gydytojams su pacientų priežiūra. Per pastarąjį dešimtmetį, daug baltymų, kurie yra putatively svarbus kancerogenezėje ir vėžio biologijos buvo tiriamas jų prognostinė vertė skrandžio vėžio, tačiau nė vienas buvo įrodyta, kad būti pakankamai naudinga klinikinėje prognozavimas. Ji yra labai mažai tikėtina, kad vienas baltymas žymeklis pateikti jautrumą ir specifiškumą, reikalingą prognozė. Taigi, dėmesio perėjo prie derinius biologinių žymenų, tiesiogiai susijusias su ligų procesų [30] atradimas. Šiame tyrime, tik pažangios naviko stadijos ir CEACAM7 ir CEA dvigubo pozityvumo buvo nustatyti naudojant Cox proporcinės rizikos modelį, kaip nepriklausomų prognostinių faktorių, dėl pacientų rezektabilus skrandžio karcinoma išlikimo, nepriklausomai nuo jų amžiaus, lyties, diferenciacija, patologinis TNM etape, limfos mazgas metastazėmis limfinės ir venų invazija pacientams.
Išvados
mūsų žiniomis, tai pirmas lyginamoji imunohistocheminis tyrimas CEACAM7 ir CEA išraiškos skrandžio karcinoma ir ikivėžinius pakitimus. Du baltymai buvo bendrai išreiškė ir bendro lokalizuotas skrandžio karcinoma. Buvo nustatyta, CEACAM7 išraiška būti žymiai koreliuoja su skrandžio karcinoma diferenciaciją. Nustatyta, kad CEACAM7 ir CEA išraiška palaipsniui didinti per skrandžio vėžio vystymosi. CEACAM7 ir CEA dukart pozityvumo gali būti naudinga pooperacinis prognostinė prognozuoti pacientams, sergantiems skrandžio karcinoma.
Deklaracijų
Padėka
šis darbas parėmė Nacionalinis 973 Projekto Kinijos (No.2010CB529300, 02, 05, 06) ir Nacionalinis gamtos mokslo fondas Kinijos (Nėra 81.030.044).
Autoriai "originalas pateiktas failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalių pateiktų failų vaizdų. 12957_2011_914_MOESM1_ESM.tiff autorių originalų failą 1 pav 12957_2011_914_MOESM2_ESM.tiff autorių originalų failą 2 pav 12957_2011_914_MOESM3_ESM.tiff Autorių originalaus failo 3 pav 12957_2011_914_MOESM4_ESM.pdf Autorių originalus failas 4 paveiksle konkuruojančių interesų
autoriai deklaruoja, kad jie neturi konkuruojančius interesus.

• Ar protonų siurblio inhibitoriai pirmasis pasirinkimas gydant ūminį skrandžio opos? Meta analizė randomizuotų klinikinių trials
• Kartu sudėtinis antinksčių feochromocitoma, daug skrandžio stromos navikai ir pseudohermaphrodism pacientui su von Recklinghausens disease