expressão dinâmica da CEACAM7 em lesões precursoras do carcinoma gástrico e seu valor prognóstico em combinação com CEA

expressão dinâmica da CEACAM7 em lesões precursoras do carcinoma gástrico e seu valor prognóstico em combinação com CEA
Abstract
A importância da molécula de adesão celular relacionados com antígeno carcinoembrionário 7 expressão (CEACAM7) no carcinoma gástrico e lesões pré-cancerosas e sua correlação com a expressão CEA raramente tem sido previamente investigado.
Métodos
expressão CEACAM7 e CEA foi detectada por imuno-histoquímica em secções consecutivas de 345 indivíduos com carcinoma gástrico e lesões pré-cancerosas. Análise laser confocal foi realizada para determinar a localização CEACAM7 e CEA. Correlação entre CEACAM7 e expressão CEA com os parâmetros clínico foram analisados ​​estatisticamente.
Resultados
expressão CEACAM7 correlacionada com a classificação patológica (P = 0,006), a classificação de Lauren (P = 0,023), e expressão CEA (Spearman R = 0,605, P < 0,001) no carcinoma gástrico. co-localizada com o CEA predominantemente na membrana citoplasmática de células cancerosas CEACAM7. expressão CEA foi correlacionada com metástases em linfonodos (P = 0,031). CEACAM7 e expressão CEA aumentou progressivamente de lesões precursoras de carcinomas gástricos. Uma combinação de expressão CEACAM7 e CEA foi determinado ser um preditor independente para pacientes com carcinoma gástrico por meio de análise multivariada (P = 0,001).
Conclusões
expressão CEACAM7 correlaciona-se com a diferenciação do tumor e expressão CEA no carcinoma gástrico. expressão CEACAM7 e CEA podem sinergicamente promover a carcinogênese gástrica. A análise da expressão CEACAM7 e CEA combinada pode ser um preditor de pós-operatório útil para pacientes com carcinoma gástrico.
Palavras-chave
CEACAM7 gástrica carcinoma precursoras lesões prognóstico CEA fundo
conhecimento profundo das características genotípicas e fenotípicas de carcinoma gástrico e lesões pré-cancerosas é extremamente importante para prevenir o seu desenvolvimento, reduzindo a sua progressão para um tumor mais elevado grau uma vez que elas se desenvolvem, e fornecer informação de prognóstico. carcinomas gástricos foram geralmente divididos em intestinal-tipo e do tipo difuso por Lauren [1]. O cancro do tipo intestinal foi pensado para exibir um fenótipo predominantemente intestinal porque é precedida por uma fase de pré-canceroso caracterizado por compreender os passos sequenciais de gastrite atrófica, metaplasia intestinal, neoplasia intra-epitelial (GIM), e carcinoma intramucosal [2, 3]. GIN é reconhecido como lesão pré-cancerosa importante, e é categorizada como de alta ou de baixa qualidade de acordo com tanto a Viena [4] e da OMS [5] classificações. Tem sido relatado que o tipo histológico predominante pode mudar desde a diferenciada para o tipo indiferenciado como os tumores progridem [6]. Ohkura, et al também relataram que a diversidade histológica aumentou à medida que os carcinomas gástricos cresceu ou invadiu a submucosa [7]. Os progressos recentes em biologia molecular demonstrou que a diversidade fenotípica dos tumores está associado com uma correspondente diversidade na expressão do gene [8-10]. Alterações na expressão de marcadores específicos de tumor em lesões pré-cancerosas e de vários carcinomas gástricos diferenciadas podem ajudar a compreender a transformação de heterogeneidade histológica e o mecanismo molecular subjacente.
O antigénio carcinoembrionário (CEA) da família de genes tem sido mostrado para ser expresso numa variedade de neoplasias epiteliais derivado [11], e a sua desregulação funcional foi mostrado para promover metástases em modelos animais [12]. Um particular membro da família gene CEA, o CEA adesão celular molécula-7 (CEACAM-7), regula a diferenciação celular normal [11]. A desregulação da expressão CEACAM-7 tem sido demonstrado que ocorrem precocemente na oncogénese colo-rectal; diminuição da expressão CEACAM-7 foi mostrado em adenomas, pólipos hiperplásicos, e focos de criptas aberrantes [11, 13]. CEA, outro membro da família de antigénio carcinoembrionário, representa um marcador tumoral amplamente utilizado no tratamento de cancro colo-rectal [14-16]. Aumento dos níveis de CEA foram o primeiro indicador identificados da doença recorrente em 81% [17] e 89% [18], de pacientes com câncer colorretal. Ambos mesentérica e os níveis periféricos da CEA foram maiores em neoplasias com envolvimento venoso, de grande diâmetro, e estágios avançados de carcinoma colorectal [19]. valores elevados de CEA também foram relatados para outros tumores epiteliais, tais como os da mama, pulmão, pâncreas e [20].
Até à data, existe pouca informação disponível sobre a expressão CEACAM7 em lesões não-neoplásicas e neoplásicas gástricas. Um estudo relata que os níveis de mRNA CEACAM7 foram regulados positivamente em células epiteliais gástricas cancerosas [21]. No entanto, o significado da expressão de CEA e CEACAM7 em lesões pré-cancerosas do carcinoma gástrico é mal compreendida. Além disso, a relação entre CEACAM7 e CEA não é clara, embora eles pertencem à mesma família de CEACAM.
Neste estudo, investigou-se a correlação entre CEACAM7 e expressão de CEA, e a sua relação com várias características clinicopatológicas no carcinoma gástrico, incluindo pacientes sobrevivência. Foram comparados os padrões de CEACAM7 e CEA expressão sistematicamente na mucosa normal, gastrite atrófica crônica, neoplasias intra-epiteliais gástricas (GIN) e carcinomas do estômago com tissue microarray consecutivo seções (TMA). Para nosso conhecimento, este é o primeiro estudo imuno-histoquímico de expressão CEACAM7 no carcinoma gástrico e lesões pré-cancerosas.
Métodos
Pacientes
O estudo incluiu 345 pacientes, incluindo 145 pacientes com carcinoma gástrico submetidos à ressecção cirúrgica primária entre 2006 e 2009 no Hospital Xijing of Forth Universidade médica Militar (Xi'an, China), 100 pacientes com neoplasias intra-epiteliais (55 de baixo grau e 45 de alto grau), 50 pacientes com gastrite atrófica crônica, e 50 pacientes com mucosa gástrica normal, . Os 200 pacientes com lesões não neoplásicas e pré-cancerosas tinha recebido um cheque endoscópica gástrica e biópsia entre 2008 e 2010 no Hospital Xijing. Todos os diagnósticos, incluindo o estado de diferenciação, foram feitas com base na Patologia e Genética Tumores do Aparelho Digestivo por três patologistas [22]. GIN é categorizada como de alta ou de baixa qualidade de acordo com ambos os Viena [4] classificações. O acompanhamento foi realizado em 145 pacientes com carcinoma gástrico para análise de sobrevida. Estes pacientes foram submetidos a gastrectomia subtotal com D2 linfonodo dissecação na Xijing Hospital entre 2006 e 2009. A idade média foi de 56,4 anos (variação, 32-74 anos). Todos os pacientes receberam quimioterapia pós-operatório usando um regime à base de fluorouracilo. Nenhum paciente recebeu quimioterapia pré-operatória ou radioterapia foram submetidos. O acompanhamento foi realizado em pacientes a partir da data da cirurgia até que a data da morte ou 30 de março de 2011, resultando em períodos de seguimento variando de 5 a 67 meses (média de 31 meses). Nesses casos perdidos para follow-up ou aqueles que morreu de uma causa diferente de câncer gástrico foram considerados como dados censurados para a análise de taxas de sobrevivência. Em todos os casos, foi obtido consentimento informado para a utilização de amostras de tumores ressecados. Este estudo foi aprovado pela moral e pela Comissão de Ética do Hospital Xijing of Forth Universidade Médica Militar.
Tissue microarrays
tecidos de lesões de carcinoma ou pré-cancerosas gástricas foram feitas em tecido micro-matrizes por tecido microarrayer (Beecher Instruments, Prata Primavera, EUA ™), de acordo com a técnica de Kononen et al [23]. Resumidamente, as biópsias de tecidos do núcleo (2 mm de diâmetro) foram tomadas a partir de tecidos embebidos em parafina (blocos dadores individuais) e dispostos num novo bloco de parafina receptor (bloco de arranjo de tecido), utilizando um aparelho de trefina. Os resultados da coloração das diferentes áreas nesses blocos de matriz de tecido mostraram excelente concordância. Um núcleo foi escolhido a partir de cada caso, para análise. Nós definimos um caso adequado como um tumor que ocupava 10% da superfície do núcleo.
Anticorpos primários para imuno-histoquímica
anticorpo de CEA de murganho anti-humano CEACAM7 [BAC2] (ab26281) e de coelho anti-humano (AB-15157 ) foi todos adquiridos a partir de Abcam PLC. (Cambridge, Reino Unido). A imuno-histoquímica

A imuno-histoquímica foi realizada em 4-lm de espessura, secções de parafina rotineiramente processadas em série. Resumidamente, após a cozedura num painel a 60 ° C durante uma hora, a embebido em parafina, amostras de tecido fixado em formalina foram desparafinadas com xileno e re-hidratadas através de imersão em etanol gradiente. A actividade da peroxidase endógena foi extinta por 3% (vol /vol) de peróxido de hidrogénio em metanol durante 10 minutos, seguido por três lavagens de 3 minutos com solução salina tamponada com fosfato (PBS). Isto foi seguido por um passo de recuperação de antigénios. As lâminas foram imersas em 0,01 mol /l de solução tampão de citrato (pH 6,0) e colocado num forno de micro-ondas durante 30 min. Depois de uma lavagem em 0,01 mol /L de solução salina tamponada com fosfato (PBS, pH 7,4), as secções foram então bloqueadas com 10% (vol /vol) de soro normal de cabra em PBS durante 30 minutos seguido de incubação numa câmara húmida a 4 durante a noite com o anticorpo primário a CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam) ou CEA 01:10, AB-15157, Abcam) diluído em PBS contendo 1% (peso /vol) de albumina de soro bovino (BSA). Os controlos negativos foram realizados substituindo o anticorpo primário com soro de murganho pré-imune. Depois de três lavagens de 3 minutos com PBS, as secções foram tratadas com anticorpo secundário anti-ratinho (PV-6002, Santa Cruz) durante 30 minutos à temperatura ambiente seguido de três lavagens adicionais de 3 minutos com PBS. produto da reacção foi visualizada com diaminobenzidina (DAB, ZLI-9032, ZSGB. Pequim, China) à temperatura ambiente durante 2 min. Depois de ser contrastadas com hematoxilina de Harris (ZLI-9039, ZSGB. Beijing, China) por 3 min, e enxaguada com água da torneira, as seções foram imediatamente desidratadas por imersão sequencial em etanol gradiente e xileno, e montadas com pernount e cobertura deslizamentos. As imagens foram obtidas em microscópio de luz (Olympus BX51, Olympus, Japão) equipado com uma câmera digital DP70.
Avaliação da coloração
Para a avaliação da coloração de células, os cortes foram examinados por dois patologistas independentes, sem conhecimento prévio do clínico-patológico estatuto dos espécimes. A expressão de CEA CEACAM7 e foi avaliada de acordo com a proporção de células positivas por espécime (R) e a intensidade da coloração (I). A proporção de células positivas por espécime foi marcado para a coloração de 0 < 1%, 1 para a coloração de 2 a 25%, 2 para a coloração, de 26 a 50%, 3 para a coloração de 51 a 75%, e 4 para a coloração de > 75% das células examinadas. A intensidade foi classificada como se segue: 0, nenhum sinal; 1, fraco; 2, moderada; e 3, de coloração forte. A pontuação total (R × I) de 0 a 12 foi finalmente calculada e classificado como negativo (-Score: 0-2). E positivo (+, 3-12)
imunofluorescência e confocal de varredura a laser
Após o cozimento num painel a 60 ° C durante uma hora, os cortes foram desparafinados em xileno e re-hidratadas através de imersão em etanol gradiente. Isto foi seguido por um passo de recuperação de antigénios. As lâminas foram imersas em 0,01 mol /l de solução tampão de citrato (pH 6,0) e colocado num forno de micro-ondas durante 30 min. Depois de uma lavagem em 0,01 mol /L de solução salina tamponada com fosfato (PBS, pH 7,4), as amostras foram incubadas com tampão de bloqueio (5% de soro normal de cabra, 1% de albumina de soro bovino e 0,1% de Triton X-100) durante uma hora a temperatura do quarto. As amostras foram, então, incubadas com anticorpos primários diluídos no tampão de bloqueamento, a 4 ° C durante a noite, seguido por 3 lavagens em PBS, durante 10 minutos cada. Finalmente, as amostras foram coradas com anticorpos secundários diluídos em tampão durante 30 minutos, seguido por 3 lavagens em PBS de bloqueio. As lamelas foram montadas em lâminas com Prolong Antifade (Invitrogen). Os anticorpos usados ​​para a imunocoloração incluem ratinho anti-CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam), de coelho anti-CEA (01:10, AB-15157, Abcam), anticorpos secundários foram utilizados anticorpos de cabra anti-rato IgG Alexa 549 (1: 300 , Invitrogen), de cabra anti-IgG de coelho Alexa 488 (1: 300, Invitrogen), DAPI (1: 1000, Molecular Probes). tecidos adjacentes normais foram utilizados como controlos negativos (20 mm de distância do tecido de cancro). tecidos imunomarcadas foram visualizados e imagens foram capturadas usando FluoView (FVLIOi, OLYMPUS.
Análise Estatística
Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando o IBM SPSS 19.0 software. Os dados de medição foram analisados ​​utilizando t de Student ou one-way ANOVA, enquanto os dados categóricos foram estudadas usando theχ2 ou o teste não paramétrico. as curvas de sobrevida foram estimadas pelo método de Kaplan-Meier, eo teste de log-rank foi utilizado para calcular as diferenças entre as curvas. a análise multivariada pelo modelo de regressão de riscos proporcionais de Cox foi realizada para avaliar a . os valores prognósticos de expressão de proteína coeficiente de correlação entre a expressão de CEACAM7 e CEA foi estimada utilizando o método de correlação de Spearman significância estatística foi estabelecido em P <.. 0,05
resultados
Co-expressão de CEACAM7 e CEA no carcinoma gástrico
a imuno-histoquímica foi realizada em secções consecutivas de 145 carcinomas gástricos, utilizando anticorpos anti-CEACAM7 ou anticorpo anti-CEA (Figura 1). A análise imunohistoquímica mostra que 100 dos 145 (69,0%) amostras foram categorizados como CEACAM7-negativos (Figura 1A), e 45 de 145 (31,0%) amostras foram categorizados como CEACAM7-positivo (Figura 1C, 1E). expressão CEACAM7 foi concordante com a expressão CEA em 80,0% (116 de 145) dos casos de carcinoma gástrico (Spearman R = 0,605, P < 0,001). CEACAM7 e CEA double-positividade foi observada em 40 casos, double-negatividade foi observada em 76 casos e 29 casos foram encontrados para ser CEACAM7-positivo ou CEA-positivos apenas. O coeficiente de correlação de expressão foi estimada utilizando o método de Correlação Spearman Rank. O valor Spearman R foi 0,605 (P < 0,001), indicando uma estreita correlação entre a expressão CEACAM7 e CEA em carcinomas gástricos. Como é inconveniente e desnecessária para verificar a localização de um dos dois antigénios por imunofluorescência em todos os 40 tecidos de carcinoma que são positivas tanto para CEACAM7 e CEA, foi investigada a sua localização em sete secções de tecidos que foram seleccionados aleatoriamente a partir dos tecidos secções 40 de carcinoma. análise laser microscopia confocal mostraram que eles co-localizado na membrana e no citoplasma de células cancerosas (figura 2A, B, C, D). Figura 1 Co-expressão de CEACAM7 e CEA em carcinomas gástricos. A & B, coloração negativa para CEACAM7 (A) e CEA (D) em um carcinoma gástrico bem diferenciada. C & D, CEACAM7 (C) e CEA coloração (D) foi negativo em área bem diferenciadas (células cancerosas são variou em forma glândula-like) e positiva na área pouco diferenciado (cor marrom) de um carcinoma gástrico. E & F, A coloração positiva para CEACAM7 (E) e CEA (F) em um carcinoma gástrico pouco diferenciado. A & B, C & D, e E &. F são secções em série adjacentes, respectivamente (DAB como cromogénio, contra-coradas com hematoxilina de Harris, 50X)
Figura 2 co-localização de CEACAM7 e CEA no tecido de carcinoma gástrico. (análise de microscopia confocal laser em uma seção representativa). A expressão positiva para CEACAM7 (A, vermelho) ou CEA (B, verde) na membrana e no citoplasma das células cancerosas (vermelho). C, imagem mesclada sem coloração nuclear; co-expressão de CEA CEACAM7 e é observada (amarelo). D, imagem mesclada com núcleo corado pelo DAPI (azul). (200X).
Correlação de expressão CEACAM7 e CEA com características clinicopatológicas de carcinoma gástrico
relação entre a expressão CEACAM7 e CEA e várias características clinicopatológicas de carcinoma gástrico está resumida na Tabela 1. CEACAM7 foi mais frequentemente expressos em tumores pouco diferenciados de carcinomas gástricos no bem e moderadamente diferenciados (41,3% vs 20,0%, P = 0,006). CEACAM7 positividade era significativamente maior nos carcinomas gástricos do tipo difuso do que em carcinomas gástricos do tipo intestinal, (39,7% versus 22,2%, P = 0,023). expressão CEA significativamente correlacionada com metástases em linfonodos (P = 0,031) .table 1 Correlação de CEACAM 7 e expressão CEA com características clinicopatológicas de carcinoma gástrico.
Variáveis ​​
CEACAM 7
valor P
CEA
valor P

negativo
(n = 100)
positiva (n = 45)

negativo
(n = 81)
positiva
(n = 64)

Sexo
Male
74(67.3%)
36(32.7%)
0.437
58(52.7%)
52(47.3%)
0.178
Female
26(74.3%)
9 (25,7%)
23 (65,7%)
12 (34,3%)
idade (anos)
(média ± SD)
59,8 ± 10,4
58,1 ± 13,3
0,608
60,3 ± 9,4
58,9 ± 12,9
0,512
Localização de tumor
superior
12 (60,0%)
8 (40,0%)
0,601
9 (45,0%)
11 (55,0%)
0,544
meio
49 (69,0%)
22 (31,0%)
40 (56,3%)
31 ( 43,7%)
Lower
39 (72,2%)
15 (27,8%)
32 (59,3%)
22 (40,7%)
Histologia †
Bem e Moderate
56(80.0%)
14(20.0%)
0.006
43(61.4%)
27(38.6%)
0.741
Undifferentiated
44(58.7%)
31(41.3%)
38 (50,7%)
37 (49,3%)
classificação de Lauren
Intestinal
56(77.8%)
16(22.2%)
0.023
39(54.2%)
33(45.8%)
0.683
Diffuse
44(60.3%)
29(39.7%)
42 (57,5%)
31 (42,5%)
Profundidade do tumor
28 (75,7%) T1-T2
9 (24,3%)
0,307
20 ( 54,1%)
17 (45,9%)
0,797
T3-T4
72 (66,7%)
36 (33,3%)
61 (56,5%)
47 ( 43,5%)
metástase
Negative
59(72.8%)
22(27.2%)
0.257
37(67.3%)
18(32.7%)
0.031
Positive
41(64.1%)
23(35.9%)
44 (48,9%)
46 (51,1%)
linfática invasão
Negative
44(75.9%)
14(24.1%)
0.143
35(60.3%)
23(39.7%)
0.375
Positive
56(64.4%)
31(35.6%)
46 (52,9%)
41 (47,1%)
venoso invasão
Negative
52(70.3%)
22(29.7%)
0.729
43(58.1%)
31(41.9%)
0.578
Positive
48(67.6%)
23(32.4%)
38 (53,5%)
33 (46,5%)
estágio do tumor
I- II
40 (62,5%)
24 (37,5%)
0,135
34 (53,1 %)
30 (46,9%)
0,555
III- IV
60 (74,1%)
21 (25,9%)
47 (58,0%)
34 (42,0 %)
NOTA: teste X2 de Pearson foi feito para obter o valor P exceto que Idade foi comparada pelo teste de Student-T. † Bem = bem carcinoma diferenciado; moderadamente = moderadamente diferenciado carcinoma; indiferenciado = pouco diferenciado carcinoma, carcinoma de células anel de sinete, ou carcinoma mucinoso. expressão
dinâmica de CEACAM7 e CEA na mucosa normal e lesões pré-cancerosas
Os resultados de expressão CEACAM7 e CEA na mucosa normal e lesões pré-cancerosas foram resumidos na Tabela 2. a positividade para a expressão CEACAM7 foi encontrado em gastrite crónica atrófica (12%; 6/50), GIN de baixo grau (29,1%; 16/55) e GIN de alto grau (28,9%; 13/45). expressão CEACAM7 não foi encontrado na mucosa normal (0/50). Positividade para a expressão CEACAM7 em gins de baixo grau foi significativamente maior do que para gastrite atrófica crônica (P = 0,032), e CEACAM7 foi mais frequentemente expressa em gastrite crónica atrófica do que na mucosa gástrica normal (P = 0,012), mas não houve diferença significativa na expressão CEACAM7 entre GIN de baixo grau e GIN de alto grau (P = 0,982). CEA positividade foi encontrada na mucosa normal (6%; 3/50), gastrite atrófica crónica (8%; 4/50), de baixo grau GIN (57,1%; 13/55), e GIN de grau elevado (60%; 20/45). A positividade CEA para GIN baixo grau foi significativamente maior do que para gastrite atrófica crônica (P = 0,030), mas foi menor do que para GIN alto grau (P = 0,028). Não houve diferença significativa no CEA positividade entre a mucosa normal e gastrite atrófica crónica (P = 0,500). CEACAM7 expressão estava localizada à superfície luminal da gastrite atrófica crónica e Gin (Figura 3C, E, e 3G), não imunorreacção foi detectado na mucosa normal (Figura 3A). CEA foi localizada sobre a superfície luminal da mucosa normal, gastrite atrófica crónica, Gin de baixo grau, e GIN de alto grau (Figura 3B, D, F, e 3H), ao passo que tanto o CEA e expressão CEACAM7 foi localizada em toda a superfície de células cancerosas gástricas (Figura 3I e 3J) Tabela 2 Relação entre a expressão CEACAM7 e CEA com diferentes tecidos gástricos
N
CEACAM7


CEA


negativo
positiva
valor
P *
negativo
positiva
valor
P *
mucosa normal
50
50 (100%)
0 (0%)
0,0121
47 (94%) Sims 3 (6%)
NS4
gastrite atrófica crônica
50
44 (88,0%)
6 (12,0%)
0,0322
46 (92%) página 4 (8%)
0,0305
GIN baixo grau
55
39 (70,9%)
16 (29,1%)
NS3
42 (76,4%)
13 (23,6%)
0,0286
Alto grau GIN
45
32 (71,1%)
13 (28,9%)
25 (55,6%)
20 (44,4%)
* teste de χ2. N-número de casos, neoplasia intra-epitelial Gin-gástrico. NS-sem significância (P > 0,05). 1 Comparado com mucosa normal, CEACAM7 positividade foi significativamente maior em gastrite atrófica crônica (P = 0,012); 2, em comparação com gastrite atrófica crônica, CEACAM7 foi mais frequentemente expressa em GIN baixo grau (P = 0,032); 3There houve diferença significativa de expressão CEACAM7 entre GIN baixo grau e GIN Alto grau (P = 0,982); 4There houve diferença significativa da expressão de CEA entre a mucosa normal e gastrite atrófica crónica (P = 0,500); 5Compared com gastrite atrófica crônica, CEA foi mais frequentemente expressa em GIN de baixo grau (P = 0,030); 6 Comparado com GIN baixo grau, CEA foi mais frequentemente expressa em GIN grau alta (P = 0,028).
Figura 3 padrões de expressão diferentes de CEACAM7 e CEA em lesões não neoplásicas gástricas e carcinomas gástricos. secções consecutivas foram usadas para análise. Nenhuma imunorreacção para CEACAM7 foi detectado na mucosa normal (A). CEACAM7 foi localizada na superfície apical da gastrite crónica atrófica (C), baixa GIN série (E) e GIN alto grau (G). CEA foi localizada na superfície luminal apical da mucosa normal (B), gastrite atrófica crônica (D), GIN de baixo grau (F), e GIN de grau elevado (H). Ambos CEACAM7 (I) e CEA (J) foi localizada sobre a totalidade da superfície de células cancerosas gástricas. (DAB como cromógeno, contrastadas com hematoxilina de Harris, 200X).
Análise de Sobrevivência
Um ano e três anos as taxas de sobrevivência foram 92,0% e 54,1%, respectivamente, para CEACAM7 e CEA pacientes double-negativos, 98,3% e 45,1%, respectivamente, para CEACAM 7 e CEA single-positivo (ou CEACAM7 positivo ou CEA positivos) pacientes, e 64,0% e 8,5% para os pacientes CEACAM7 e CEA double-positivos. foi observada diferença significativa entre a taxa de sobrevivência de pacientes dupla negativa e dê um duplo-positivos (Figura 4, P = 0,001). No entanto, não houve diferença significativa entre os pacientes dupla negativa e individuais positivo (Figura 4, P = 0,391). A análise multivariada demonstrou que a dupla positividade para CEACAM7 e expressão CEA (P = 0,004) e estágio do tumor (P = 0,001) foram fatores independentemente associados com pior prognóstico do paciente (Tabela 3). Figura 4 as curvas de Kaplan-Meier para a sobrevivência pós-operatória. O tempo médio de sobrevivência de pacientes com CEACAM7 e CEA double-positividade foi menor do que a de pacientes com double-negatividade (teste log-rank: P = 0,001). Mas, não houve diferença significativa entre o tempo médio de sobrevivência de pacientes com single-positividade e negatividade duplo (P = 0,391).
Análise Tabela 3 multivariada baseada em riscos modelo proporcional de Cox
variável
Risco Relativo (95%
Intervalo de confiança)
P-valor
Tumor Stage III, IV vs I, II
2.240 ( 1,501-3,343)
0,001
CEACAM7 (+) CEA (+) vs CEACAM7 (-) CEA (-)
1.545 (1,153-2,069)
0,004
Discussão
CEA é um dos marcadores tumorais mais úteis para o carcinoma [24], e sua expressão foi encontrado para ser correlacionada com características clinicopatológicas, tais como o envolvimento venosa, de maior diâmetro e estágios avançados de carcinomas colo-rectal [25, 26]. No cancro do cólon, o CEA é regulada positivamente, mas CEACAM7 foi relatado para ser regulada negativamente [11], é interessante notar que ambos foram regulados positivamente em cancro gástrico, e co-expressa na maioria dos tecidos. sugerindo que CEACAM7 podem desempenhar papéis diferentes em diferentes tipos de câncer. Como expressão CEACAM7 foi encontrado para ser estreitamente correlacionada com a expressão CEA no carcinoma gástrico neste estudo, verificamos a sua correlação com várias características clinicopatológicas, e descobriram que a expressão CEACAM7 foi mais frequente nos carcinomas gástricos pouco diferenciados de carcinomas no bem e moderadamente diferenciados (P = 0,006), e também foi correlacionada com a classificação de Laurén (P = 0,023). Tem sido relatado que o tipo histológico predominante pode mudar desde a diferenciada para o tipo indiferenciado como os tumores progridem [6], Ohkura, et al [17] relataram que também histológicos diversidade aumenta como carcinomas gástricos crescer ou invadir a submucosa. Assim, a hipótese de que CEACAM7 pode promover agressividade e progressão do carcinoma gástrico via que regula a diferenciação de células tumorais, e isso precisa ser melhor investigada.
Como o câncer tipo intestinal é pensado para ser precedida de uma fase pré-cancerosa caracterizada por os passos sequenciais de atrófica gastrite, metaplasia intestinal, Gin, e carcinoma intramucosal, seria de grande importância para clarificar a expressão dinâmica de CEACAM7 e CEA em mucosa normal gástrica, gastrite atrófica crónica, Gin, e carcinoma gástrico. Descobrimos que, em comparação com mucosa normal gástrica, expressão CEACAM7 foi significativamente aumentada em gastrite atrófica crônica e todas as outras lesões, e expressão CEA foi significativamente aumentada no gins e carcinoma gástrico. Estes resultados indicam que CEACAM7 pode desempenhar um papel na carcinogénese gástrica a partir de uma fase precoce, a fase especificamente gastrite atrófica crónica. Além disso, o CEA pode cooperar com CEACAM7 na fase gins. Consistente com os nossos resultados, os ratinhos transgénicos de CEA mostrou dois pontos massivamente alargada compreendendo um mosaico contínuo de hiperplasia severa, displasia, e morfologia adenomatosa serrilhada, o que sugere que a sobre-regulação de CEA pode ser um passo fundamental na progressão do cancro humano [27]. Afigura-se que a sobre-regulação da expressão de CEA CEACAM7 ou pode ser um evento molecular cedo na tumorigénese, e ambas as proteínas podem ser utilizadas como biomarcadores rastreio em lesões pré-cancerosas para identificar pacientes com um elevado risco de conversão maligna. Em contraste, a diminuição da expressão de CEACAM-7 foi demonstrado que ocorrem cedo na oncogénese colorrectal, com a diminuição da expressão nos adenomas, pólipos hiperplásicas, e até mesmo de criptas aberrantes foci.11,13 A expressão de contraste de CEACAM7 na carcinogénese gástrico e colorrectal implica que a sua função é dependente do contexto.
doentes com cancro avançado muitas vezes querem saber quanto tempo eles deixaram de viver [28], mas os médicos não estão confiantes em estimar o prognóstico [29]. Portanto, biomarcadores para prognóstico são uma potencial ferramenta para ajudar os clínicos no tratamento do paciente. Durante a última década, um grande número de proteínas que são supostamente importante na carcinogênese e biologia do câncer foram estudados para determinar seu valor prognóstico no câncer gástrico, mas nenhum deles foi provado ser bastante útil na predição clínica. É altamente improvável que um único marcador de proteína proporcionará a sensibilidade e a especificidade requerida para o prognóstico. Assim, a ênfase foi deslocada para a descoberta de combinações de biomarcadores directamente relacionados com processos de doença [30]. Neste estudo, apenas o estágio do tumor avançado e CEACAM7 e CEA double-positividade foram identificados utilizando o modelo de riscos proporcionais de Cox como preditores prognósticos independentes para a sobrevida de pacientes com carcinoma gástrico ressecável, independente da idade, sexo, diferenciação, estádio TNM patológica, linfa metástase, linfáticos e invasão venosa dos pacientes.
Conclusões
Para nosso conhecimento, este é o primeiro estudo imuno-histoquímico comparativo de expressão CEACAM7 e CEA no carcinoma gástrico e lesões pré-cancerosas. As duas proteínas foram co-expressos e co-localizado no carcinoma gástrico. CEACAM7 expressão foi encontrado para ser significativamente correlacionadas com a diferenciação de carcinoma gástrico. A expressão de CEA CEACAM7 e verificou-se aumentar gradualmente durante o desenvolvimento de carcinoma gástrico. CEACAM7 e CEA double-positividade pode ser um preditor prognóstico pós-operatório útil para pacientes com carcinoma gástrico.
Declarações
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pelo Projeto Nacional 973 de China (No.2010CB529300, 02, 05, 06) ea National Science Foundation Natural da China (Sem 81.030.044).
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Os autores declaram que têm interesses conflitantes.

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