Dynamisk udtryk for CEACAM7 i forstadielæsioner af gastrisk karcinom og dens prognostisk værdi i kombination med CEA

Dynamisk udtryk for CEACAM7 i precursor læsioner af gastrisk karcinom og dens prognostisk værdi i kombination med CEA
Abstrakt
Baggrund
Betydningen af ​​carcinoembryonisk antigen-relateret celleadhæsionsmolekyle 7 (CEACAM7) udtryk i gastrisk karcinom og forstadier til kræft og dets overensstemmelse med CEA udtryk har sjældent været tidligere undersøgt.
Metoder
CEACAM7 og CEA-ekspression blev påvist ved immunhistokemi i træk sektioner af 345 forsøgspersoner med gastrisk karcinom og forstadier til kræft. Laser konfokal analyse blev udført for at bestemme CEACAM7 og CEA lokalisering. Sammenhæng mellem CEACAM7 og CEA udtryk med klinisk-patologiske parametre blev statistisk analyseret.
Resultater
CEACAM7 udtryk korreleret med patologisk grading (P = 0,006), Laurens klassifikation (P = 0,023), og CEA udtryk (Spearman R = 0,605, P < 0,001) i gastrisk karcinom. CEACAM7 co-lokaliseret med CEA, overvejende den cytoplasmatiske membran af kræftceller. CEA-ekspression blev korreleret med lymfeknudemetastaser (P = 0,031). CEACAM7 og CEA udtryk steget progressivt fra prækursor læsioner til gastriske carcinomer. En kombination af CEACAM7 og CEA-ekspression blev bestemt til at være en uafhængig prædiktor for patienter med gastrisk karcinom ved multivariat analyse (P = 0,001).
Konklusioner
CEACAM7 ekspression korrelerer med tumor differentiering og CEA-ekspression i gastrisk karcinom. CEACAM7 og CEA ekspression kan synergistisk fremme gastrisk carcinogenese. Kombineret CEACAM7 og CEA udtryk analyse kan være et nyttigt postoperativ prædiktor for patienter med gastrisk karcinom.
Nøgleord
CEACAM7 gastrisk karcinom forstadielæsioner prognose CEA Baggrund Salg In-indgående kendskab til genotypiske og fænotypiske karakteristika for gastrisk karcinom og forstadier til kræft er yderst vigtig for at forhindre deres udvikling, begrænse deres progression til en højere lønklasse tumor, når de udvikler og leverer prognostisk information. Gastriske carcinomer er generelt blevet opdelt i tarm-typen og diffus-typen af ​​Lauren [1]. Tarmens-typen cancer blev anset for at vise en overvejende intestinal fænotype, fordi den er forudgået af en præcancerøse fase karakteriseret ved de sekventielle trin atrofisk gastritis, intestinal metaplasi, intraepitelialneoplasi (GIN), og intramucosal carcinom [2, 3]. GIN er anerkendt som en vigtig præcancer læsion, og er kategoriseret som enten høj eller lav karakter efter både Wien [4] og WHO [5] klassifikationer. Det er blevet rapporteret, at den fremherskende histologiske type kan ændres fra den differentierede til den udifferentierede type som tumorerne fremskridt [6]. Ohkura et al rapporterede også, at histologisk mangfoldighed forøget som de gastriske carcinomer voksede eller invaderet submucosa [7]. Nylige fremskridt inden for molekylærbiologi har vist, at den fænotypiske mangfoldighed af tumorer er forbundet med en tilsvarende mangfoldighed i genekspression [8-10]. Ændringer i ekspressionen af ​​tumorspecifikke biomarkører i præcancerøse læsioner og forskellige differentierede gastriske carcinomer kan hjælpe os til at forstå omdannelsen til histologisk heterogenitet og det underliggende molekylære mekanisme.
Carcinoembryonisk antigen (CEA) familie af gener er blevet vist at blive udtrykt i en forskellige epiteliale afledte neoplasmer [11], og deres funktionelle deregulering har vist sig at fremme metastaser i dyremodeller [12]. En særlig CEA gen familiemedlem, CEA cellulære adhæsionsmolekyle-7 (CEACAM-7), regulerer normal cellulær differentiering [11]. Deregulering af CEACAM-7-ekspression er blevet vist at forekomme tidligt i colorektal onkogenese; faldt CEACAM-7-ekspression blev vist i adenomer, hyperplastiske polypper, og kryptfoci [11, 13]. CEA, et andet medlem af carcinoembryonisk antigen familien, repræsenterer en tumormarkør anvendes bredt i forvaltningen af ​​kolorektal cancer [14-16]. Forhøjede CEA niveauer var den første identificerede indikator for tilbagevendende sygdom i 81% [17] og 89% [18] af patienter med tarmkræft. Både mesenteriske og perifere niveauer af CEA var højere i neoplasmer med venøs engagement, stor diameter, og fremskredne stadier af kolorektal cancer [19]. Øget CEA-værdier er også rapporteret for andre epitelial maligniteter, såsom dem af bryst-, lunge-, og bugspytkirtel [20].
Til dato, lidt information er tilgængelig på CEACAM7 udtryk i gastrisk nonneoplastic og neoplastiske læsioner. En undersøgelse rapporterer, at CEACAM7 mRNA niveauer blev opreguleret i kræft gastriske epitelceller [21]. Imidlertid er betydningen af ​​CEA og CEACAM7 udtryk i forstadier til kræft af gastrisk karcinom dårligt forstået. Desuden er forholdet mellem CEACAM7 og CEA er uklart, selv om de tilhører samme CEACAM familie.
I denne undersøgelse undersøgte vi sammenhængen mellem CEACAM7 og CEA udtryk, og deres forhold til forskellige klinisk-patologiske træk i gastrisk karcinom, herunder patient overlevelse. Vi sammenlignede ekspressionsmønstre af CEACAM7 og CEA systematisk i normal slimhinde, kronisk atrofisk gastritis, gastriske intraepitelialneoplasi (GIN), og karcinomer i maven med fortløbende væv microarray (TMA) sektioner. Så vidt vi ved, er dette den første immunhistokemisk undersøgelse af CEACAM7 udtryk i gastrisk karcinom og forstadier til kræft.
Metoder
Patienter
Undersøgelsen omfattede 345 patienter, herunder 145 patienter med gastrisk karcinom, som gennemgik primær kirurgisk resektion mellem 2006 og 2009 på Xijing Hospital of Forth Military Medical University (Xi'an, Kina), 100 patienter med intraepithelial neoplasmer (55 lav kvalitet og 45 high-grade), 50 patienter med kronisk atrofisk gastritis, og 50 patienter med normal gastrisk mucosa . De 200 patienter med nonneoplastic og forstadier til kræft havde modtaget en gastrisk endoskopisk kontrol og biopsi mellem 2008 og 2010 på Xijing Hospital. Alle diagnoser, herunder differentiering status, blev foretaget på grundlag af Patologi og Genetik Tumorer i fordøjelsessystemet af tre patologer [22]. GIN er kategoriseret som enten høj eller lav karakter efter både Wien [4] klassifikationer. Opfølgning blev udført på de 145 patienter med gastrisk karcinom for overlevelse analyse. Disse patienter gennemgik subtotal gastrektomi med D2 lymfeknude dissektion ved Xijing Hospital fra 2006 til 2009. Den gennemsnitlige alder var 56,4 år (range, 32-74 år). Alle patienter fik postoperativ kemoterapi ved hjælp af en fluorouracil-baserede regime. Ingen patienter fik præoperativ kemoterapi eller strålebehandling gennemgik. Opfølgning blev udført på patienter fra datoen for operationen indtil enten dødsdagen eller marts 30, 2011, hvilket resulterer i opfølgende perioder fra 5 til 67 måneder (gennemsnit, 31 måneder). Disse sager tabte til opfølgning eller dem, der døde af en anden end mavekræft årsag blev betragtet som censurerede data til analyse af overlevelse. I alle tilfælde blev informeret samtykke opnået for brugen af ​​resektion tumorprøver. Denne undersøgelse blev godkendt af moralske og etiske Komité Xijing Hospital of Forth Military Medical University.
Tissue Microarrays
Væv af gastrisk karcinom eller forstadier til kræft blev foretaget i tissue micro-arrays ved Tissue Microarrayer (Beecher Instruments, Sølv Spring, USA ™), ifølge teknikken af ​​Kononen et al [23]. Kort fortalt blev core vævsbiopsier (2 mm i diameter) taget fra individuelle paraffinindlejrede væv (donorblokke) og anbragt i en ny modtager paraffinblok (vævsarray blok) under anvendelse af en trepan apparat. De farvning Resultaterne af de forskellige områder i disse væv array-blokke viste fremragende aftale. En kerne blev valgt fra hver enkelt sag til analyse. Vi definerede en passende tilfælde som en tumor, der besatte 10% af kerneområdet.
Primære antistoffer til immunhistokemi
Mouse anti-human CEACAM7 antistof [BAC2] (ab26281) og kanin-anti-humant CEA-antistof (Ab-15157 ) blev alle anskaffet fra Abcam plc. (Cambridge, UK).
Immunhistokemi
Immunhistokemi blev udført på 4-lm-tykke, rutinemæssigt forarbejdet, paraffinsnit i serie. Kort fortalt, efter bagning på et panel ved 60 ° C i en time, paraffinen indlejret, blev fikseret i formalin vævsprøver afparaffiniseret med xylen og rehydreret gennem gradient nedsænkning ethanol. Endogen peroxidaseaktivitet blev standset med 3% (vol /vol) hydrogenperoxid i methanol i 10 minutter, efterfulgt af tre 3-minutters vask med phosphatpufret saltvand (PBS). Dette blev efterfulgt af et trin med antigen-genvinding. Objektglassene blev neddyppet i 0,01 mol /l citratbufferopløsning (pH 6,0) og anbringes i en mikrobølgeovn i 30 minutter. Efter en vask i 0,01 mol /l phosphatbufret saltvand (PBS, pH 7,4), Snittene blev derefter blokeret med 10% (vol /vol) normalt gedeserum i PBS i 30 minutter efterfulgt af inkubation i et fugtigt kammer ved 4 natten over med det primære antistof til CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam) eller CEA 1:10, ab-15157, Abcam) fortyndet i PBS indeholdende 1% (vægt /volumen) bovint serumalbumin (BSA). Negative kontroller blev udført ved at erstatte det primære antistof med præ-immunt museserum. Efter tre 3-minutters vask med PBS blev snittene behandlet med andet anti-muse-antistof (PV-6002, Santa Cruz) i 30 minutter ved stuetemperatur efterfulgt af yderligere tre 3-minutters vask med PBS. Reaktionsprodukt blev visualiseret med diaminobenzidin (DAB, ZLI-9032, ZSGB. Beijing, Kina) ved stuetemperatur i 2 minutter. Efter at være blevet modfarvet med Harris hematoxylin (ZLI-9039, ZSGB. Beijing, Kina) i 3 minutter, og skylles med ledningsvand, sektionerne blev straks dehydreret ved sekventiel nedsænkning i gradient ethanol og xylen og monteret med pernount og dækglas. Billeder blev opnået under et lysmikroskop (Olympus BX51, Olympus, Japan) udstyret med en DP70 digitalkamera.
Evaluering af Farvning Hus Til evaluering af cellefarvning blev snit undersøgt af to uafhængige patologer uden forudgående kendskab til det klinisk-patologisk status af prøverne. Ekspression af CEACAM7 og CEA blev evalueret i overensstemmelse med forholdet mellem positive celler pr prøve (R) og farvningsintensitet (I). Forholdet mellem positive celler pr prøve blev scoret 0 til farvning af < 1%, 1 til farvning af 2 til 25%, 2 til farvning på 26 til 50%, 3 for farvning på 51 til 75%, og 4 til farvning > 75% af de undersøgte celler. Intensitet blev bedømt som følgende: 0, intet signal; 1, svag; 2, moderat; og 3, stærk farvning. En samlet score (R × I) fra 0 til 12 blev endeligt opgjort og klassificeret som negativ (-Score: 0-2). Og positive (+, 3-12)
Immunofluorescens og laser konfokal scanning
Efter bagning på et panel ved 60 ° C i en time blev snittene afparaffiniseret med xylen og rehydreret gennem gradient nedsænkning ethanol. Dette blev efterfulgt af et trin med antigen-genvinding. Objektglassene blev neddyppet i 0,01 mol /l citratbufferopløsning (pH 6,0) og anbringes i en mikrobølgeovn i 30 minutter. Efter en vask i 0,01 mol /l phosphatbufret saltvand (PBS, pH 7,4), prøver blev inkuberet med blokeringsbuffer (5% normalt gedeserum, 1% bovint serumalbumin og 0,1% Triton X-100) i en time ved stuetemperatur. Prøver blev derefter inkuberet med primære antistoffer fortyndet i blokerende buffer ved 4 ° C natten over, efterfulgt af 3 vaske i PBS i 10 minutter hver. Endelig blev prøver farvet med sekundære antistoffer fortyndet i blokeringsbuffer i 30 minutter efterfulgt af 3 vaske i PBS. Dækglas blev monteret på lysbilleder med Prolong antifade (Invitrogen). Antistoffer, der anvendes til immunfarvning indbefatter muse-anti-CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam), kanin-anti-CEA (1:10, AB-15157, Abcam), sekundære antistoffer anvendes var gede-anti-muse-IgG Alexa 549 (1: 300 , Invitrogen), ged anti-kanin IgG Alexa 488 (1: 300, Invitrogen), DAPI (1: 1000, Molecular Probes). Tilstødende normale væv blev anvendt som negative kontroller (20 mm væk fra cancervæv). Immunofarvede væv blev visualiseret og billeder blev fanget ved anvendelse FluoView (FVLIOi, OLYMPUS.
Statistiske analyser
Alle statistiske analyser blev udført ved anvendelse af IBM SPSS 19.0 software. Måledata blev analyseret under anvendelse af Students t eller envejs ANOVA-test, mens kategoriske data blev undersøgt under anvendelse theχ2 eller parametriske test. Overlevelseskurver blev estimeret ved anvendelse af Kaplan-Meier-metoden, og log-rank testen blev anvendt til at beregne forskelle mellem kurver. Multivariate analyse under anvendelse af Cox proportional hazard regressionsmodel blev udført for at vurdere . prognostiske værdier af protein-ekspression Korrelationskoefficient mellem udtryk for CEACAM7 og CEA blev anslået ved hjælp af Spearman korrelation metode Statistisk signifikans blev fastsat til P <.. 0,05
Resultater
Co-ekspressionen af ​​CEACAM7 og CEA i gastrisk karcinom
Immunhistokemi blev udført på hinanden følgende sektioner af 145 gastriske carcinomer anvendelse af enten anti-CEACAM7 eller anti-CEA-antistof (figur 1). Immunhistokemisk analyse viser, at 100 af 145 (69,0%) prøver blev kategoriseret som CEACAM7-negative (figur 1A), og 45 ud af 145 (31,0%) prøver blev kategoriseret som CEACAM7-positive (figur 1C, 1E). CEACAM7 udtryk var overensstemmende med CEA udtryk i 80,0% (116 af 145) af gastrisk karcinom tilfælde (Spearman R = 0,605, P < 0,001). CEACAM7 og CEA dobbelt-positivitet blev observeret i 40 tilfælde blev dobbelt negativitet observeret i 76 tilfælde, og 29 sager blev fundet at være enten CEACAM7-positiv eller CEA-positive alene. Udtrykket korrelationskoefficient blev estimeret ved anvendelse af Spearman Rank Correlation metode. Den Spearman R-værdi var 0,605 (P < 0,001), hvilket indikerer en tæt sammenhæng mellem CEACAM7 og CEA udtryk i gastriske carcinomer. Som det er besværligt og unødvendigt at kontrollere lokaliseringen af ​​de to antigener ved immunofluorescens i alle de 40 carcinoma væv, der er positive for både CEACAM7 og CEA, undersøgte vi deres lokalisering i syv vævssnit, der blev tilfældigt udvalgt fra de 40 carcinoma væv sektioner. Laser konfokal mikroskopi-analyse viste, at de co-lokaliseret i membranen og cytoplasma kræftceller (figur 2A, B, C, D). Figur 1 Co-ekspressionen af ​​CEACAM7 og CEA i gastriske carcinomer. A & B, negativ farvning for CEACAM7 (A) og CEA (D) i et godt differentieret gastrisk carcinom. C &D, CEACAM7 (C) og CEA (D) farvning var negativ i brønden differentieret område (cancerceller varierede i kirtel-lignende form) og positive i dårligt differentieret område (brun farve) af en gastrisk carcinom. E & F, Positiv farvning for CEACAM7 (E) og CEA (F) i et dårligt differentieret gastrisk karcinom. A & B, C &D, og ​​E &. F er hosliggende serielle sektioner, henholdsvis (DAB som chromogen, modfarvet med Harris hematoxylin, 50X)
Figur 2 Co-lokalisering af CEACAM7 og CEA i vævet af gastrisk karcinom. (Laser konfokal mikroskopi analyse i et repræsentativt udsnit). Positiv ekspression for CEACAM7 (A, rød) eller CEA (B, grøn) i membranen og cytoplasma kræftceller (rød). C, Flettet billede uden nukleare farvning; co-ekspression af CEACAM7 og CEA observeres (gul). D, Flettet billede med kerne plettet af DAPI (blå). (200X).
Korrelation af CEACAM7 og CEA udtryk med klinisk-patologiske træk af gastrisk karcinom
Forholdet mellem CEACAM7 og CEA udtryk og diverse klinisk-patologiske træk af gastriske carcinomer er opsummeret i tabel 1. CEACAM7 blev oftere udtrykt i dårligt differentierede tumorer end i godt og moderat differentierede gastriske carcinomer (41,3% vs. 20,0%, P = 0,006). CEACAM7 positivitet var signifikant højere i diffust-gastriske carcinomer end i intestinal gastriske carcinomer, (39,7% vs. 22,2%, P = 0,023). CEA udtryk signifikant korreleret med lymfeknude metastaser (P = 0,031) .table 1 Korrelation af CEACAM 7 og CEA udtryk med klinisk-patologiske karakteristika gastrisk karcinom.
Variabler
CEACAM 7
P-værdi
CEA
P-værdi

Negativ
(n = 100)
Positiv
(n = 45)

Negative
(n = 81)
Positiv Hotel (n = 64)

Gender
Male
74(67.3%)
36(32.7%)
0.437
58(52.7%)
52(47.3%)
0.178
Female
26(74.3%)
9 (25,7%)
23 (65,7%)
12 (34,3%)
Alder (år) Salg (middel ± SD)
59,8 ± 10,4
58,1 ± 13,3
0,608
60,3 ± 9,4
58,9 ± 12,9
0,512
Placering af tumor
Øvre
12 (60,0%)
8 (40,0%)
0,601
9 (45,0%)
11 (55,0%)
0,544
Mellemøsten
49 (69,0%)
22 (31,0%)
40 (56,3%)
31 ( 43,7%)
Lavere
39 (72,2%)
15 (27,8%)
32 (59,3%)
22 (40,7%)
Histologi †
Well og Moderate
56(80.0%)
14(20.0%)
0.006
43(61.4%)
27(38.6%)
0.741
Undifferentiated
44(58.7%)
31(41.3%)
38 (50,7%)
37 (49,3%)
Laurens klassifikation
Intestinal
56(77.8%)
16(22.2%)
0.023
39(54.2%)
33(45.8%)
0.683
Diffuse
44(60.3%)
29(39.7%)
42 (57,5%)
31 (42,5%)
dybde tumor
T1-T2
28 (75,7%)
9 (24,3%)
0,307
20 ( 54,1%)
17 (45,9%)
0,797
T3-T4
72 (66,7%)
36 (33,3%)
61 (56,5%)
47 ( 43,5%)
Node metastaser
Negative
59(72.8%)
22(27.2%)
0.257
37(67.3%)
18(32.7%)
0.031
Positive
41(64.1%)
23(35.9%)
44 (48,9%)
46 (51,1%)
lymfatisk invasion
Negative
44(75.9%)
14(24.1%)
0.143
35(60.3%)
23(39.7%)
0.375
Positive
56(64.4%)
31(35.6%)
46 (52,9%)
41 (47,1%)
Venøs invasion
Negative
52(70.3%)
22(29.7%)
0.729
43(58.1%)
31(41.9%)
0.578
Positive
48(67.6%)
23(32.4%)
38 (53,5%)
33 (46,5%)
Tumor Stage
I- II
40 (62,5%)
24 (37,5%)
0,135
34 (53,1 %)
30 (46,9%)
0,555
III IV
60 (74,1%)
21 (25,9%)
47 (58,0%)
34 (42,0 %)
BEMÆRK: Pearsons X2 test blev gjort for at få P-værdi, bortset fra at Ages blev sammenlignet ved Student-T-test. † Nå = godt differentieret karcinom; moderat = moderat differentieret carcinom; udifferentieret = dårligt differentieret karcinom, signetring celle karcinom, eller mucinøs carcinoma.
Dynamisk udtryk for CEACAM7 og CEA i normal slimhinde og forstadier til kræft
Resultaterne af CEACAM7 og CEA udtryk i normal slimhinde og forstadier til kræft blev opsummeret i tabel 2. Positivitet for CEACAM7 ekspression blev fundet i kronisk atrofisk gastritis (12%, 6/50), low-grade GIN (29,1%, 16/55), og high-grade GIN (28,9%; 13/45). CEACAM7 udtryk blev ikke fundet i normal slimhinde (0/50). Positivitet for CEACAM7 ekspression i lav kvalitet gin var signifikant højere end for kronisk atrofisk gastritis (P = 0,032), og CEACAM7 blev hyppigere udtrykt i atrofisk kronisk gastritis end i normalt gastrisk mucosa (P = 0,012), men der var ingen signifikant forskel i CEACAM7 udtryk mellem lav kvalitet GIN og høj kvalitet GIN (P = 0,982). CEA positivitet blev fundet i normale slimhinde (6%, 3/50), kronisk atrofisk gastritis (8%, 4/50), low-grade GIN (57,1%, 13/55), og high-grade GIN (60%; 20/45). CEA positivitet for lav kvalitet GIN var signifikant højere end for kronisk atrofisk gastritis (P = 0,030), men var lavere end for høj kvalitet GIN (P = 0,028). Der var ingen signifikant forskel i CEA positivitet mellem normal slimhinde og kronisk atrofisk gastritis (P = 0,500). CEACAM7 ekspression blev lokaliseret til den luminale overflade af kronisk atrofisk gastritis og gin (figur 3C, E, og 3G), blev der ikke immunreaktion detekteret i normal slimhinde (figur 3A). CEA blev lokaliseret på den luminale overflade af normal slimhinde, kronisk atrofisk gastritis, lav kvalitet GIN, og high-grade GIN (figur 3B, D, F, og 3H), mens både CEA og CEACAM7 ekspression blev lokaliseret til hele overfladen af gastriske kræftceller (figur 3i og 3J) tabel 2 Sammenhæng mellem CEACAM7 og CEA udtryk med forskellige gastrisk væv
væv

N
CEACAM7


CEA


Negativ
Positiv
P-værdi *
Negativ
Positiv
P-værdi *
Normal slimhinde
50
50 (100%)
0 (0%)
0,0121
47 (94%)
3 (6%)
NS4
Kronisk atrofisk gastritis
50
44 (88,0%)
6 (12,0%)
0,0322
46 (92%)
4 (8%)
0,0305
lav grad GIN
55
39 (70,9%)
16 (29,1%)
NS3
42 (76,4%)
13 (23,6%)
0,0286
høj kvalitet GIN
45
32 (71,1%)
13 (28,9%)
25 (55,6%)
20 (44,4%)
* χ2 test. N-antal tilfælde, gin-gastrisk intraepitelialneoplasi. NS-ingen betydning (P > 0,05). 1 Sammenlignet med normal slimhinde, CEACAM7 positivitet var signifikant højere i kronisk atrofisk gastritis (P = 0,012); 2 i forhold til kronisk atrofisk gastritis, blev CEACAM7 oftere udtrykt i Lav grad GIN (P = 0,032); 3Der var ingen signifikant forskel på CEACAM7 udtryk mellem Lav grad GIN og Høj kvalitet GIN (P = 0,982); 4There var ingen signifikant forskel af CEA-ekspression mellem normal slimhinde og kronisk atrofisk gastritis (P = 0,500); 5Compared med kronisk atrofisk gastritis, blev CEA oftere udtrykt i Low-grade GIN (P = 0,030); 6 Sammenlignet med Lav grad GIN blev CEA oftere udtrykt i Høj kvalitet GIN (P = 0,028).
Figur 3 forskellige ekspressionsmønstre af CEACAM7 og CEA i gastrisk ikke-neoplastiske læsioner og gastriske carcinomer. Konsekutive snit blev anvendt til analyse. Nr immunreaktion for CEACAM7 blev detekteret i normal slimhinde (A). CEACAM7 blev lokaliseret på den apikale overflade af kronisk atrofisk gastritis (C), lav kvalitet GIN (E) og høj kvalitet GIN (G). CEA blev lokaliseret på den apikale luminale overflade af normal mucosa (B), kronisk atrofisk gastritis (D), low-grade GIN (F), og high-grade GIN (H). Både CEACAM7 (I) og CEA (J) blev lokaliseret på hele overfladen af ​​gastriske kræftceller. (DAB som kromogen, kontrastfarvet med Harris hematoxylin, 200X).
Survival analyser
One-årige og tre-årige overlevelsesrater var 92,0% og 54,1%, henholdsvis for CEACAM7 og CEA dobbelt-negative patienter, 98,3% og 45,1%, henholdsvis for CEACAM 7 og CEA single-positive (enten CEACAM7 positiv eller CEA positive) patienter, og 64,0% og 8,5% for CEACAM7 og CEA dobbelt-positive patienter. blev observeret signifikant forskel mellem overlevelsesraten for dobbelt-negative og dobbelt-positive patienter (figur 4, P = 0,001). Imidlertid blev ingen signifikant forskel mellem dobbelt-negative og single-positive patienter (figur 4, P = 0,391). Multivariat analyse viste, at dobbelt-positivitet for CEACAM7 og CEA-ekspression (P = 0,004) og tumor fase (P = 0,001) blev faktorer uafhængigt associeret med dårligere patient prognose (tabel 3). Figur 4 Kaplan-Meier kurver for postoperativ overlevelse. Den mediane overlevelse af patienter med CEACAM7 og CEA dobbelt-positivitet var kortere end for patienter med dobbelt-negativitet (log-rank test: P = 0,001). Men der var ingen signifikant forskel mellem den mediane overlevelse for patienter med single-positivitet og dobbelt-negativitet (P = 0,391)
Tabel 3 Multivariat analyse. Baseret på Cox 'proportionale farer model
Variabel
Hazard Ratio (95%
konfidensinterval)
P-værdi
Tumor Trin III, IV vs I, II
2,240 ( 1,501-3,343)
0,001
CEACAM7 (+) CEA (+) vs CEACAM7 (-) CEA (-)
1,545 (1,153-2,069)
0,004
diskussion
CEA er en af ​​de mest nyttige tumormarkører for carcinom [24], og dets ekspression viste sig at være korreleret med klinisk-patologiske træk, såsom venøs engagement, større diameter, og fremskredne stadier af colorektale carcinomer [25, 26]. I tyktarmskræft, er CEA opreguleres, men CEACAM7 blev rapporteret at være nedreguleret [11], er det interessant, at de begge blev opreguleret i mavekræft, og co-udtrykt i de fleste væv. hvilket antyder, at CEACAM7 kan spille forskellige roller i forskellige cancerformer. Som det blev fundet CEACAM7 udtryk for at være nært korreleret med CEA udtryk i gastrisk karcinom i denne undersøgelse, Vi kontrolleret sin sammenhæng med forskellige klinisk-patologiske træk, og fandt, at CEACAM7 udtryk var hyppigere i dårligt differentierede gastriske carcinomer end i godt og moderat differentierede karcinomer (P = 0,006), og blev også korreleret med Laurens klassifikation (P = 0,023). Det er blevet rapporteret, at den fremherskende histologiske type kan ændres fra den differentierede til den udifferentierede type som tumorerne fremskridt [6], Ohkura, et al [17] også rapporteret, at histologiske mangfoldighed stiger som gastriske carcinomer vokse eller invadere submucosa. Således har vi den hypotese, at CEACAM7 kunne fremme aggressivitet og progression af gastrisk karcinom via regulering tumorcelledifferentiering, og dette kræver yderligere undersøgelse.
Som intestinal type cancer menes at der foreligge et præcancerøse fase kendetegnet ved de sekventielle trin atrofisk gastritis, intestinal metaplasi, gin, og intramucosal carcinom, ville det være af stor betydning at afklare dynamisk udtryk for CEACAM7 og CEA i normal gastrisk mucosa, kronisk atrofisk gastritis, gin, og gastrisk carcinoma. Vi fandt, at sammenlignet med gastrisk normal slimhinde blev CEACAM7 udtryk steget betydeligt i kronisk atrofisk gastritis og alle andre læsioner, og CEA udtryk blev øget betydeligt i gin og gastrisk karcinom. Disse resultater indikerer, at CEACAM7 kan spille en rolle i gastrisk carcinogenese fra et tidligt tidspunkt, specifikt kronisk atrofisk gastritis fase. Endvidere kan CEA samarbejde med CEACAM7 på gin stadium. I overensstemmelse med vores resultater, viste CEA transgene mus massivt forstørrede koloner omfatter en kontinuerlig mosaik af svær hyperplasi, dysplasi, og savtakket adenomatøs morfologi, hvilket antyder, at opregulering af CEA kunne være en instrumental skridt i human cancer progression [27]. Det fremgår, at opregulering af CEACAM7 eller CEA-ekspression kan være et tidligt molekylær begivenhed i tumorgenese, og begge proteiner kunne anvendes som screening biomarkører i præcancerøse læsioner til at identificere patienter med høj risiko for malign omdannelse. I modsætning hertil faldt ekspression af CEACAM-7 har vist sig at forekomme tidligt i colorektal onkogenese, med reduceret ekspression i adenomer, hyperplastiske polypper, og endda afvigende krypt foci.11,13 Den kontrasterende ekspression af CEACAM7 i mave- og colorektal carcinogenese indebærer, at dens funktion er kontekstafhængig.
Patienter med fremskreden kræft ofte ønsker at vide, hvor længe de har tilbage at leve [28], men klinikere er ikke sikker på at estimere prognose [29]. Derfor biomarkører for prognose er et potentielt værktøj til at hjælpe klinikere med patientpleje. I det seneste årti har et stort antal proteiner, der er formodet vigtige i carcinogenese og kræft biologi blevet undersøgt for deres prognostiske værdi i gastrisk kræft, men ingen har vist sig at være tilstrækkelig anvendelig i klinisk forudsigelse. Det er højst usandsynligt, at et enkelt protein markør vil give følsomhed og specificitet kræves til prognose. Således har vægten flyttet til opdagelsen af ​​kombinationer af biomarkører direkte relateret til sygdomsprocesser [30]. I denne undersøgelse kun avanceret tumor scenen og CEACAM7 og CEA dobbelt positivitet blev identificeret ved hjælp af Cox proportional hazard model som selvstændige prognostiske prædiktorer for overlevelse af patienter med resektabel gastrisk karcinom, uafhængigt af alder, køn, differentiering, patologisk TNM stadie, lymfe node metastase, lymfe, og venøs invasion af patienterne.
konklusioner Salg Så vidt vi ved, er dette den første sammenlignende immunhistokemisk undersøgelse af CEACAM7 og CEA-ekspression i gastrisk karcinom og forstadier til kræft. De to proteiner blev co-udtrykt og co-lokaliseret i gastrisk karcinom. CEACAM7 ekspression viste sig at være signifikant korreleret med differentieringen af ​​gastrisk karcinom. Udtrykket af CEACAM7 og CEA blev fundet at stige gradvist under udviklingen af ​​gastrisk karcinom. CEACAM7 og CEA dobbelt positivitet kan være en nyttig postoperativ prognostisk indikator for patienter med gastrisk karcinom.
Erklæringer
Tak
Dette arbejde blev støttet af National 973 Project Kina (No.2010CB529300, 02, 05, 06) og National Natural Science Foundation of China (nr 81.030.044).
Forfattere 'oprindelige indsendt filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 12957_2011_914_MOESM1_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 1 12957_2011_914_MOESM2_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 2 12957_2011_914_MOESM3_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 3 12957_2011_914_MOESM4_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 4 konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer, at de har ingen konkurrerende interesser.

• Er protonpumpehæmmere det første valg for akut behandling af mavesår? En meta-analyse af randomiserede kliniske trials
• Samtidig komposit adrenal fæokromocytom, flere gastriske stromale tumorer og pseudohermaphrodism hos en patient med von Recklinghausens disease