Dynamic izraz CEACAM7 v predhodnikov lezij karcinoma želodca in njeno prognostično vrednost v kombinaciji s CEA

Dynamic izraz CEACAM7 v predhodnikov lezij želodčnega raka in njegovega prognostično vrednost v kombinaciji s CEA
Povzetek
Ozadje
pomena karcinoembrionski povezanih z antigenom celične adhezije molekule 7 (CEACAM7) izraz v želodcu raka in predrakavih sprememb in njegova korelacija z CEA izražanja je redko prej raziskana.
metod
CEACAM7 in CEA izraz bil odkrit z imunohistokemijo v zaporednih delih 345 osebah s želodca raka in predrakavih sprememb. Laserska konfokalna analiza je bila opravljena za določitev CEACAM7 in CEA lokalizacijo. Korelacija med CEACAM7 in CEA izražanja z clinicopathological parametrov, je statistično obdelali.
Rezultati
CEACAM7 izraz povezana s patološko razvrščanja (P = 0,006), Lauren razvrščanja (P = 0,023), in CEA izražanja (Spearman R = 0,605, P < 0,001) v raka želodca. CEACAM7 co-lokalizirani s CEA pretežno v citoplazemski membrani rakavih celic. CEA izraz je v korelaciji s bezgavkah metastaze (P = 0,031). CEACAM7 in CEA izraz postopno povečala iz predhodnikov poškodb na želodcu karcinomov. Kombinacija CEACAM7 in CEA izražanja bil odločen, da je neodvisen napovednik za bolnike z želodčnega raka, ki ga multivariatne analize (P = 0,001).
Sklepe
CEACAM7 izraz povezana z diferenciacijo tumorja ter CEA izražanja v raka želodca. CEACAM7 in CEA izraz lahko sinergijsko spodbuja želodčne rakotvornost. Kombinirani CEACAM7 in CEA analiza izraz je lahko koristen postoperativni napovednik za bolnike s karcinomom želodca.
Ključne besede
CEACAM7 želodčni rak njihove predhodne poškodbe prognoza CEA Ozadje
in poglobljeno poznavanje značilnosti genotipa in fenotipa s karcinomom želodca in predrakavih sprememb je zelo pomembno za preprečevanje njihovega razvoja, skrajšanje njihovega napredovanja v višji razred tumor, ko se razvijajo, in zagotavljanje napovedni informacij. Želodčni karcinomi so bili na splošno delijo v črevesni tipa in razpršenega tipa, ki ga Lauren [1]. rak črevesno tipa so mislili, da se prikaže pretežno črevesne fenotip, ker je sledilo predrakavih fazi značilen po zaporednih korakih atrofičnega gastritisa, intestinalno metaplazijo, intraepitelijske neoplazije (Gin) in intramucosal karcinom [2, 3]. GIN je priznan kot pomemben predrakave lezije, in spada v kategorijo bodisi visoko ali nizko stopnjo glede na tako Dunaja [4] in WHO [5] klasifikacije. Ugotovljeno je bilo, da je lahko prevladujoča histološka vrsta spremeni iz diferencirana na nediferencirane tipom, napredovanja tumorjev [6]. Ohkura, et al tudi poročali, da povečana histološko raznovrstnost kot so želodčni karcinomi rasla ali napadel submucosa [7]. Nedavni napredek v molekularni biologiji je pokazala, da je fenotipa raznolikost tumorji povezan z ustreznim raznolikosti genske ekspresije [8-10]. Spremembe v izražanju tumor specifičnih biomarkerjev v predrakavih sprememb in različnih diferenciranih želodčnega karcinoma nam lahko pomaga razumeti preoblikovanje na histološko heterogenosti in osnovnega molekularni mehanizem.
Karcinoembrionski antigen (CEA) družina genov je bilo dokazano, da se izrazi na različnih epitelijskih izhaja novotvorb [11], in njihove funkcionalne deregulacije dokazano je, da pospeševanje metastaze v živalskih modelih [12]. Ena zlasti CEA gen družinski član, CEA celične adhezijske molekule-7 (CEACAM-7), ureja normalno celično diferenciacijo [11]. Deregulacija CEACAM-7 izražanja Dokazano je, da se pojavi v zgodnjem debelega onkogenezo; zmanjšala CEACAM-7 izraz je prikazan v adenomov, hiperplastičnih polipov in odklonskega kripta žarišč [11, 13]. CEA, en član karcinoembrionski družine antigen, predstavlja oznako tumorja pogosto uporablja pri zdravljenju kolorektalnega raka [14-16]. Povečane koncentracije CEA sta prva opredelila pokazatelj ponavljajočih se bolezni v 81% [17] in 89% [18] Pri bolnikih z rakom debelega črevesa. Oba mezenterična in periferni ravni CEA so bile višje v novotvorbe z vensko vpletenosti velikega premera, in poznejših fazah kolorektalnega raka [19]. Povečane vrednosti CEA so poročali tudi iz drugih epitelijskih malignih bolezni, kot so tiste iz dojke, pljuč in trebušne slinavke [20].
Do danes je malo informacij je na voljo na CEACAM7 izražanja v želodcu nonneoplastic in neoplastične lezije. Ena od študij poroča, da so bile ravni CEACAM7 mRNA up-urejena v rakavih želodčne epitelijskih celic [21]. Vendar pa je pomen CEA in CEACAM7 izražanja v predrakavih lezij karcinoma želodca slabo razumemo. Poleg tega je razmerje med CEACAM7 in CEA je jasno, čeprav pripadata isti CEACAM družino.
V tej študiji smo raziskovali povezavo med CEACAM7 in CEA izražanja, in njihovem odnosu do različnih clinicopathological funkcij v karcinom želodca, vključno z bolnika preživetje. Smo primerjali izražanje vzorce CEACAM7 in CEA sistematično v normalni sluznici, kronični atrofični gastritis, želodčne intraepitelijske neoplazije (gin), in karcinomov želodca z zaporedno tkivo mikromrež (TMA) odsekih. Za naše znanje, to je prva imunohistokemični študija CEACAM7 izražanja želodčnega raka in predrakavih sprememb.
Metode
Bolniki
študijo je bilo vključenih 345 bolnikov, vključno z 145 bolniki z rakom želodca in ki so doživeli primarno kirurško resekcijo med letoma 2006 in leta 2009 v bolnišnici Xijing of Forth Military Medical University (Xi'an, Kitajska), 100 bolnikov z intraepitelijskih novotvorbe (55 nižji razred in 45 visoke stopnje), 50 bolnikov s kronično atrofični gastritis in 50 bolnikov z normalnim želodčne sluznice . Med 200 bolniki z nonneoplastic in predrakavih sprememb so prejeli želodčne endoskopsko kontrolo in biopsija med letoma 2008 in 2010 v bolnišnici Xijing. Vse diagnoze, vključno s statusom diferenciacije, so bile narejene na podlagi patologijo in Genetics tumorji prebavnega sistema za tri patologov [22]. GIN spada v kategorijo bodisi visoko ali nizko stopnjo po obeh Dunajskih [4] klasifikacije. Spremljanje smo izvedli na 145 bolnikov z rakom želodca za analizo preživetja. Ti bolniki doživel delne vsote želodca z D2 bezgavk seciranje v bolnišnici Xijing od leta 2006 do leta 2009. Povprečna starost je bila 56,4 let (razpon, 32-74 let). Vsi bolniki so prejeli pooperativno kemoterapijo z uporabo režim, ki temelji fluorouracil. Noben bolnik ni prejel preoperativno kemoterapijo ali bile predmet radioterapijo. Nadaljnje so opravili pri bolnikih z dnem operacijo, dokler bodisi datum smrti ali 30. marca 2011, ki izhajajo iz nadaljnjih obdobjih od 5 do 67 mesecev (pomeni, 31 mesecev). Ti primeri izgubil spremljanje ali tisti, ki je umrl, razen raka želodca vzrok so se šteli za okrnjene podatke za analizo preživetja. V vseh primerih je bila privolitev pridobljena za uporabo odstranjenimi tumorskih osebkov. Ta študija je bila odobrena s moralni in etični odbor bolnišnice Xijing v Forth Military Medical University.
Tkiva Mikromreže
tkiva želodčne karcinoma ali predrakavih sprememb so bile narejene v tkivo mikro nizi z tkiv Microarrayer (Beecher Instruments, Silver vzmet, ZDA ™), v skladu s tehniko Kononen et al [23]. Na kratko, so bili jedro biopsije tkiva (2 mm v premeru) iz posameznih, parafinski vgrajeni tkiv (donatorske blokih) in razporejen v novi prejemnika parafinsko blok (tkiv diod bloku) s pomočjo aparata trephine. Rezultati barvanje različnih področjih v teh nizov blokov tkiva je pokazala odlično pogodbo. Eno jedro je izbran izmed vsakokrat za analizo. Opredelili smo ustrezno zadevo, kot je tumor, ki zaseda 10% temeljnega področja.
Primarna protitelesa za imunohistokemijo
Mouse CEACAM7 protitelesa anti-človeški [BAC2] (ab26281) in Rabbit proti človeškim CEA protiteles (ab-15157 ) je bila vsa kupljena od Abcam plc. (Cambridge, UK).
Imunohistokemija
Imunohistokemija smo izvedli na 4-lm-debelimi, redno obdelujejo, parafinske oddelkov v seriji. Na kratko, po peki na plošči pri 60 ° C za eno uro, parafina vgrajeni, so formalinom vzorci fiksna tkiva deparaffinized z ksilena in rehidracija z gradientom etanola potopitvijo. Endogene peroksidaze aktivnost pogasimo s 3% (vol /vol) vodikovega peroksida v metanolu za 10 minut, čemur sledi tri 3-minutnih pranj z fosfatnim pufrom (PBS). Temu je sledil korak pridobivanje antigena. Drsniki potopimo v 0,01 mol /l citrat pufrske raztopine (pH 6,0), in damo v mikrovalovni pečici 30 min. Po pranju v 0,01 mol /l-fosfatnim pufrom (PBS, pH 7,4), Sekcije smo nato blokirali z 10% (vol /vol) običajno koza serumu v PBS 30 minut sledila inkubacijo v vlažni komori pri 4 noči s primarnim protitelesom do CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam) ali CEA 1:10, ab-15157, Abcam), razredčene v PBS, ki vsebuje 1% (mas /vol), goveji serumski albumin (BSA). Negativne kontrole smo izvedli z zamenjavo primarnega protitelesa s predhodno imunskega seruma miške. Po treh 3-minutnih pranj z PBS, so odseki obdelamo z drugim protitelesom proti mišjim (PV-6002, v Santa Cruz) 30 minut pri sobni temperaturi, nato pa dodatna tri 3-minutnih pranj z PBS. Reakcijski produkt smo vizualizirali s diaminobenzidine (DAB, Zli-9032, ZSGB. Peking, Kitajska) pri sobni temperaturi za 2 min. Potem ko so jih nasprotno s Harris hematoksilinom (Zli-9039, ZSGB. Peking, Kitajska), za 3 minute in speremo z vodo iz pipe, oddelki so takoj suši zaporedno potopitvijo v gradient etanolu in ksilen, in vgrajeni z pernount in zajemajo zdrsi. Slike so bile pridobljene v skladu s svetlobnim mikroskopom (Olympus BX51, Olympus, Japonska), ki je opremljen z digitalnim fotoaparatom DP70.
Ocena barvanjem
Za oceno barvanje celic, so odseki pregledala dva neodvisna patologi brez predhodnega znanja od clinicopathological status osebkov. Izraz CEACAM7 in CEA smo ocenili glede na razmerje pozitivnih celic na osebek (R) in barvanja intenzitete (I). Razmerje pozitivnih celic na vzorcu, je dosegel 0 za barvanje < 1% 1 za obarvanje od 2 do 25%, 2 za barvanje 26 do 50%, 3 za obarvanje 51 do 75% in 4 za obarvanje > 75% celic pregledanih. Intenzivnost je bila ocenjena na naslednji način: 0, brez signala; 1, šibek; 2, zmerna; in 3, močno obarvanje. Skupna ocena (R × I), od 0 do 12 je bil na koncu izračuna in ocenjena kot negativna (-score: 0-2). In pozitivnim (+, 3-12)
Imunofluorescenčni in laser konfokalna skeniranje
Po peki na plošči pri 60 ° C za eno uro, so odseki deparaffinized s ksilenom in hidracijo z gradientom etanola potopitvijo. Temu je sledil korak pridobivanje antigena. Drsniki potopimo v 0,01 mol /l citrat pufrske raztopine (pH 6,0), in damo v mikrovalovni pečici 30 min. Po pranju v 0,01 mol /l-fosfatnim pufrom (PBS, pH 7,4), vzorce inkubiramo z pufra za blokiranje (5% normalne koze seruma, 1% goveji serumski albumin in 0,1% Triton X-100) za eno uro pri sobna temperatura. Vzorce smo nato inkubirali s primarnimi protitelesi, razredčenimi v zaporni pufru pri 4 ° C čez noč, nato pa 3 izpiranjih v PBS za vsakih 10 minut. Na koncu so bili vzorci obarvali s sekundarnimi protitelesi razredčiti v pufru za 30 minut, nato pa 3 opere v PBS blokiranje. Coverslips so nameščeni na diapozitive z podaljšati Antifade (Invitrogen). Protitelesa, ki se uporabljajo za imunskim barvanjem vključujejo miške anti-CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam), kunčjega anti-CEA (1:10, ab-15157, Abcam), sekundarna protitelesa uporabijo bili kozji anti-mišji IgG Alexa 549 (1: 300 , Invitrogen), kozji anti-rabbit IgG Alexa 488 (1: 300, Invitrogen), DAPI (1: 1000, Molekularna sonde). Sosednji normalne tkiva smo uporabili kot negativni kontroli (20 mm od tkiva raka). Imunoreaktivnosti tkiva smo prikazali in slike so bile posnete s pomočjo FlUOVIEW (FVLIOi, OLYMPUS.
Statistična analiza
Vse statistične analize smo izvedli s pomočjo IBM SPSS 19,0 programske opreme. Merilni podatki so bili analizirani s pomočjo Studentov t ali enosmerno testom ANOVA, medtem ko kategorične podatke smo proučevali s theχ2 ali neparametricnim test. Preživetje krivulje so bile ocenjene po metodi Kaplan-Meier, in test log-rank je bila uporabljena za izračun razlike med krivuljami. Multivariatna analiza z uporabo Cox sorazmernih tveganj regresijski model je bila izvedena za oceno . prognostične vrednosti beljakovin izraz korelacijskim koeficientom med izražanja CEACAM7 in CEA je bila ocenjena po metodi Spearman korelacijsko Statistična značilnost je bila določena pri P <.. 0.05
Rezultati
Co-izražanja CEACAM7 in CEA karcinoma želodca
Imunohistokemija je bila izvedena na zaporednih delih 145 želodčnega karcinoma ali z uporabo anti-CEACAM7 ali anti-CEA protitelesa (Slika 1). Imunohistokemijsko analiza kaže, da je bilo 100 od 145 (69,0%) vzorcev v kategorijo CEACAM7-negativna (slika 1A), in 45 od 145 (31,0%) vzorci so bili kategorizirani kot CEACAM7 pozitivni (slika 1C, 1E). CEACAM7 izraz je skladnih s CEA izražanja v 80,0% (116 od 145) primerov želodčnega karcinoma (Spearman R = 0.605, P < 0,001). CEACAM7 in CEA dvojno pozitivnost opazili v 40 primerih je bil dvakrat negativnosti ugotovili v 76 primerih pa so ugotovili, da je bodisi CEACAM7 pozitivni ali CEA-pozitivna le 29 primerov. Koeficient izraz korelacija je bila ocenjena po metodi Spearman Rank korelacija. Vrednost Spearman R je 0,605 (P < 0,001), kar kaže na tesno povezavo med CEACAM7 in CEA izražanja v želodcu karcinomov. Ker je neprijetno in ni treba preveriti lokalizacijo dveh antigenov imunofluorescencno v vseh 40 karcinomom tkiv, ki so na pozitiven tako za CEACAM7 in CEA, smo raziskovali njihovo lokalizacijo v sedmih poglavjih tkiva, ki so bili naključno izbrani iz tkiv odsekih 40 karcinoma. Analiza laserska konfokalna mikroskopija je pokazala, da sta sočasno lokaliziran v membrano in citoplazmo rakavih celic (slika 2A, B, C, D). Slika 1 Sočasno izraz CEACAM7 in CEA v želodčnih karcinomov. A & B Negativno obarvanje za CEACAM7 (A) in CEA (D) v dobro diferenciranega karcinoma želodca. C &D, CEACAM7 (C) in CEA (D) obarvanje bil negativen dobro diferenciranega prostoru (rakave celice gibala v obliki žleze podobno) in pozitivno na slabo diferencirano območju (rjava barva) za raka želodca. E & F, Positive obarvanje za CEACAM7 (E) in CEA (F) v slabo diferenciran karcinom želodca. A & B, C & D in E &. F sta sosednja serijske profili, oziroma (DAB kot kromogena, jih nasprotno z Harris hematoksilinom, 50x)
Slika 2 Co-lokalizacijo CEACAM7 in CEA v tkivu raka želodca. (Laser konfokalna analiza mikroskopijo na reprezentativnem oddelku). Pozitivna izraz za CEACAM7 (A, rdeča) ali CEA (B, zelena) v membrano in citoplazmo rakavih celic (rdečih). C, združenega slika brez jedrskega kamna; co-izraz CEACAM7 in CEA se opazi (rumena). D, združenega slike z jedrom, ki ga DAPI (modra) obarvajo. (200X).
Korelacija CEACAM7 in CEA izražanja z clinicopathological značilnosti želodčnega karcinoma
Povezava med CEACAM7 in CEA izražanja in različnih clinicopathological značilnosti želodca karcinomov je povzeta v tabeli je 1. CEACAM7 pogosteje izražena v slabo diferencirane tumorje kot dobro in zmerno diferenciranimi želodčnega karcinoma (41,3% v primerjavi z 20,0%, P = 0,006). CEACAM7 pozitivnost bil razpršen tipa želodčnega karcinoma bistveno višja kot v črevesnega tipa želodca karcinomi, (39,7% v primerjavi z 22,2%, P = 0,023). CEA izraz bistveno povezana z bezgavkah metastaze (P = 0,031) .table 1 korelacija CEACAM 7 in CEA izražanja z clinicopathological značilnosti raka želodca.
Spremenljivke
CEACAM 7
P vrednost
CEA
P vrednost

Negativno
(n = 100)
Pozitivna
(n = 45)

Negativno
(n = 81)
Positive
(n = 64)

spolov
Male
74(67.3%)
36(32.7%)
0.437
58(52.7%)
52(47.3%)
0.178
Female
26(74.3%)
9 (25,7%)
23 (65,7%)
12 (34,3%)
Starost (leta)
(sredstva ± SD)
59,8 ± 10,4
58,1 ± 13,3
0,608
60.3 ± 9.4
58,9 ± 12,9
0,512
Lokacija tumorja
Zgornja
12 (60,0%)
8 (40,0%)
0,601
9 (45,0%)
11 (55,0%)
0,544
Bližnji
49 (69,0%)
22 (31,0%)
40 (56,3%)
31 ( 43,7%)
nižja
39 (72,2%)
15 (27,8%)
32 (59,3%)
22 (40,7%)
Histologija †
No in Moderate
56(80.0%)
14(20.0%)
0.006
43(61.4%)
27(38.6%)
0.741
Undifferentiated
44(58.7%)
31(41.3%)
38 (50,7%)
37 (49,3%)
Lauren je klasifikacijski
Intestinal
56(77.8%)
16(22.2%)
0.023
39(54.2%)
33(45.8%)
0.683
Diffuse
44(60.3%)
29(39.7%)
42 (57,5%)
31 (42,5%)
Globina tumorja
T1-T2
28 (75,7%)
9 (24,3%)
0,307
20 ( 54,1%)
17 (45,9%)
0,797
T3-T4
72 (66,7%)
36 (33,3%)
61 (56,5%)
47 ( 43,5%)
Node metastaz
Negative
59(72.8%)
22(27.2%)
0.257
37(67.3%)
18(32.7%)
0.031
Positive
41(64.1%)
23(35.9%)
44 (48,9%)
46 (51,1%)
limfatičnega invazijo
Negative
44(75.9%)
14(24.1%)
0.143
35(60.3%)
23(39.7%)
0.375
Positive
56(64.4%)
31(35.6%)
46 (52,9%)
41 (47,1%)
venske invazijo
Negative
52(70.3%)
22(29.7%)
0.729
43(58.1%)
31(41.9%)
0.578
Positive
48(67.6%)
23(32.4%)
38 (53,5%)
tumor fazi
33 (46,5%)
I- II
40 (62,5%)
24 (37,5%)
0.135
34 (53.1 %)
30 (46,9%)
0,555
III-IV
60 (74,1%)
21 (25,9%)
47 (58,0%)
34 (42,0 %)
OPOMBA: preizkus X2 Pearsonov je bilo storjeno, da bi dobili vrednost P, le da je bil vek primerjali s testom Student-T. † No = dobro diferencirani karcinom; zmerno = zmerno razlikuje raka; nediferencirani = slabo diferencirani karcinom, pečat karcinom obroč celic ali mucinozni karcinom.
Dynamic izraz CEACAM7 in CEA v normalni sluznici in predrakavih sprememb
Rezultati CEACAM7 in CEA izražanja v normalni sluznici in predrakave lezije so bile povzete v tabeli 2. pozitivnosti za CEACAM7 izražanje je bilo v kronični atrofični gastritis (12%; 6/50), slabe kakovosti, gin (29,1%, 16/55), in visoke stopnje gin (28,9%; 13/45). CEACAM7 izraz ni bilo mogoče najti v normalni sluznici (0/50). Pozitivnost za CEACAM7 izražanja v nizkih razreda gins je bila bistveno višja kot pri kronični atrofični gastritis (P = 0,032), in CEACAM7 je pogosteje izražena v atrofični kronični gastritis, kot v normalnem želodčne sluznice (P = 0,012), vendar ni bilo bistvene razlike v CEACAM7 izraz med slabe kakovosti, gin in visoke stopnje gin (P = 0,982). CEA pozitivnost je bilo v normalni sluznici (6%; 3/50), kronični atrofični gastritis (8%; 4/50), z nizko stopnjo GIN (57,1%, 13/55), in visoke stopnje gin (60%; 20/45). CEA pozitivnost za nizke kakovosti gin je bila bistveno višja kot pri kronični atrofični gastritis (P = 0,030), vendar je bila nižja kot za visoko stopnjo Gin (P = 0,028). Ni bilo bistvene razlike v CEA pozitivnosti med normalno sluznico in kronični atrofični gastritis (P = 0,500). CEACAM7 izraz je lokalizirana na luminalno površino kroničnega atrofičnega gastritisa in gins (slika 3C, E in 3G), ni bila odkrita imunoreakcija v normalnem sluznice (slika 3A). CEA je lokalizirana na luminalno površino normalne sluznice, kronični atrofični gastritis z nizko razreda Gin in visoke stopnje Gin (slika 3B, D, F in 3H), medtem ko je hkrati CEA in CEACAM7 izraz lokalizirani na celotno površino želodčne rakave celice (Slika 3I in 3J) Tabela 2 razmerje med CEACAM7 in CEA izražanja z različnimi želodčnih tkiv
Robčki

N
CEACAM7


CEA


Negativno
pozitivno
vrednost P *
negativen
pozitivno
vrednost P *
Normal sluznice
50
50 (100%)
0 (0%)
0,0121
47 (94%)
3 (6%)
NS4
Kronični atrofični gastritis
50
44 (88,0%)
6 (12,0%)
0.0322
46 (92%)
4 (8%)
0.0305
nizko stopnjo gin
55
39 (70,9%)
16 (29,1%)
NS3
42 (76,4%)
13 (23,6%)
0.0286
visoke stopnje gin
45
32 (71,1%)
13 (28,9%)
25 (55,6%)
20 (44,4%)
* Test χ2. N-število primerov, Gin-želodca intraepitelna neoplazije. NS-no pomena (P > 0,05). 1 V primerjavi z normalno sluznico, je CEACAM7 pozitivnost bistveno višja pri kronični atrofični gastritis (P = 0,012); 2 v primerjavi s kronično atrofični gastritis, je CEACAM7 pogosteje izražena v nizko stopnjo Gin (P = 0,032); 3There bilo bistvene razlike v CEACAM7 izražanja med nizko stopnjo Gin in visoki razred Gin (P = 0,982); 4There bilo bistvene razlike v CEA izraza med normalno sluznico in kronični atrofični gastritis (P = 0,500); 5Compared s kronično atrofični gastritis, je CEA pogosteje izražena v Low razreda gin (P = 0,030); 6 V primerjavi z nizko stopnjo Gin je bil CEA pogosteje izražena v visoki razred Gin (P = 0,028).
Slika 3 različne izrazne vzorce CEACAM7 in CEA v želodčnih ne-neoplastične lezije in želodca karcinomov. Zaporedni odseki so bili uporabljeni za analizo. Ne imunoreakcija za CEACAM7 je bila odkrita v normalni sluznici (A). CEACAM7 je lokalizirana na apical površini kronični atrofični gastritis (C), nizko stopnjo GIN (E) in visoke stopnje Gin (G). CEA je lokalizirana na koničnem luminalno površino normalne sluznice (B), kronični atrofični gastritis (D) z nizko razreda Gin (F), in visoke stopnje Gin (H). Tako CEACAM7 (I) in CEA (J) je lokalizirana na celotni površini želodčnih rakavih celic. (DAB kot kromogena, jih nasprotno z Harris hematoksilinom, 200X).
Survival Analysis
Enoletna in triletni stopnja preživetja je bila 92,0% in 54,1%, v tem zaporedju, za CEACAM7 in CEA double-negativnih bolnikih, 98,3% in 45,1%, v tem zaporedju, za CEACAM 7 in CEA z eno pozitivno (bodisi CEACAM7 pozitivni ali pozitivni CEA) bolnikov, in 64,0% in 8,5% za CEACAM7 in CEA double-pozitivnih bolnikih. Občutne razlike so opazili med stopnjo preživetja dvojno negativno in double-pozitivnih bolnikov (slika 4, P = 0,001). Vendar pa je bilo ugotovljeno, ni bistvene razlike med bolniki z zakonsko negativnih in posameznih pozitivnih (slika 4, P = 0,391). Multivariatna analiza je pokazala, da so bile dvojno pozitivnost za CEACAM7 in CEA izražanja (P = 0,004) in stopnjo tumorja (P = 0,001) dejavniki neodvisno povezana s slabšo prognozo bolnikov (tabela 3). Slika 4 Kaplan-Meier krivulje za pooperativno preživetje. Mediana časa preživetja bolnikov z CEACAM7 in CEA dvojno pozitivnost je bil krajši, kot je bolnikov z dvojno negativnosti (log-rank test: P = 0,001). Vendar pa ni bilo bistvene razlike med časom srednjo preživetja bolnikov z enim pozitivnosti in dvojno negativnosti (P ​​= 0,391).
Tabela 3 Multivariatna analiza temelji na Cox proporcionalnega modela nevarnosti
spremenljivka

Razmerje ogroženosti (95%
Confidence Interval)
P-vrednost
tumor stopnje III, IV vs I, II
2.240 ( 1,501-3,343)
0.001
CEACAM7 (+) CEA (+) vs CEACAM7 (-) CEA (-)
1,545 (1,153-2,069)
0.004
Razprava
CEA je eden od najbolj uporabnih markerjev tumorskih za raka [24], in njegovo ekspresijo je ugotovljeno, da je povezana z clinicopathological funkcijami, kot venski vpletenosti večjega premera, in naprednih fazah kolorektalnih karcinomov [25, 26]. Pri raku na debelem črevesu, ki je CEA molekul, vendar CEACAM7 so poročali, da se navzdol reguliranih [11], je zanimivo, da sta bila povečana pri raka želodca in sodelovanje izražena v večini tkiv. kar pomeni, da lahko CEACAM7 igrajo različne vloge v različnih rakavih obolenj. Kot je bilo ugotovljeno CEACAM7 izraz, ki se tesno povezana s CEA izražanja v raka želodca v tej študiji, smo preverili njeno skladnost z različnimi clinicopathological funkcij, in ugotovil, da je CEACAM7 izraz pogostejši v slabo diferenciranih želodčnih karcinoma kot dobro in zmerno diferenciranimi karcinomi (P = 0,006), in je bila povezana tudi z razvrstitvijo Lauren (P = 0,023). Ugotovljeno je bilo, da je lahko prevladujoča histološka vrsta spremeni iz diferencirana na nediferencirane vrste, kot so tumorji napredujejo [6], Ohkura, et al [17] tudi poročali, da histološke povečanje raznolikosti kot želodca karcinomov rastejo ali napadejo submucosa. Tako smo predpostavili, da bi CEACAM7 spodbujajo agresivnost in napredovanje raka želodca preko urejanja diferenciacijo tumorskih celic, to pa je treba dodatno raziskati.
Kot raka črevesnih tipa je mislil, da bo sledilo predrakavih fazi značilen po zaporednih korakih atrofični gastritis, črevesne metaplazija, gins in intramucosal karcinom, bi bilo zelo pomembno, da se pojasni dinamično ekspresijo CEACAM7 in CEA v normalnem želodčne sluznice, kronični atrofični gastritis, gins in raka želodca. Ugotovili smo, da je v primerjavi z želodčno normalno sluznico, CEACAM7 izražanje je bistveno pri kronični atrofični gastritis in vseh drugih poškodb povečalo, in CEA izraz je bil v gins in raka želodca znatno povečal. Ti rezultati kažejo, da lahko CEACAM7 vlogo v želodcu rakotvornost že v zgodnji fazi, natančneje kronični atrofični fazi gastritis. Poleg tega lahko CEA sodeluje z CEACAM7 fazi gins. Skladne z našimi rezultati, CEA transgenih miših so pokazali močno razširjene dvopičjem, ki obsegajo stalno mozaik hudo hiperplazijo, displazije in nazobčanim adenomatozne morfologijo, kar kaže, da bi se lahko up-regulacijo CEA instrumentalni korak v napredovanju človeškega raka [27]. Zdi se, da se lahko up-regulacijo CEACAM7 ali CEA izražanja zgodaj molekularni dogodek v tumorigeneze, in obe beljakovine se lahko uporablja kot presejalni biomarkerjev v predrakavih sprememb odkriti bolnike z visokim tveganjem za maligne pretvorbe. V nasprotju s tem, zmanjšano izražanje CEACAM-7 Dokazano je, da se pojavi v zgodnjem debelega onkogenezo, z zmanjšano ekspresijo v adenomov, hiperplastičnih polipov, in celo zmotna kripta foci.11,13 kontrastni izražanje CEACAM7 v želodcu in debelem rakotvornost pomeni, da je njena funkcija je odvisna od konteksta.
Bolniki z napredovalim rakom pogosto želijo vedeti, kako dolgo so pustili živeti [28], vendar zdravniki niso prepričani pri ocenjevanju napovedi [29]. Zato biomarkerjev za prognozo so potencialno orodje za pomoč zdravnikom pri oskrbi bolnika. V zadnjem desetletju je bilo veliko število proteinov, ki so domnevno pomembni pri kancerogenosti in raka biologije študiral za njihovo prognostično vrednost raka želodca, vendar nobena ni bilo dokazano, da je dovolj uporabna v klinični napoved. To je zelo verjetno, da bo en sam protein dvojno podajo zagotavlja občutljivost in specifičnost, potrebne za prognozo. Tako je pozornost preusmerila na odkritje kombinacij biomarkerjev, neposredno povezanih s bolezenskih procesov [30]. V tej študiji, samo fazi tumorja in CEACAM7 in CEA dvojno pozitivnosti smo identificirali z uporabo Cox sorazmernih tveganj model kot neodvisnih napovednih kazalcev za preživetje bolnikov z odstranljivega raka želodca, ne glede na starost, spol, diferenciacije, patološko fazi TNM, limfne Node metastaze, limfatično in vensko invazije bolnikov.
Sklepi
Kolikor nam je znano, je to prvi primerjalna imunohistokemični študija CEACAM7 in CEA izražanja želodčnega raka in predrakavih sprememb. Obe Proteine ​​smo sočasno izraženi in sodelovanje lokaliziran v karcinoma želodca. CEACAM7 izraz je bilo ugotovljeno, da je pomembno povezana z diferenciacijo raka želodca. Ugotovljeno je bilo izražanje CEACAM7 in CEA postopno zviševanje pri razvoju raka želodca. CEACAM7 in CEA dvojno pozitivnosti lahko koristno postoperativni prognostični napovednik za bolnike s karcinomom želodca.
Deklaracij
Zahvala
To delo je podprl Nacionalni 973 projekt Kitajske (No.2010CB529300, 02, 05, 06) in National Natural Science Foundation of China (št 81030044).
Avtorji "prvotna predložiti datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev izvirnih predloženih spisov za slike. Prvotno datoteko za sliko 1 12957_2011_914_MOESM2_ESM.tiff avtorjev 12957_2011_914_MOESM1_ESM.tiff avtorjev izvirno datoteko številka 2 12957_2011_914_MOESM3_ESM.tiff avtorjev prvotne datoteke za sliko 3 12957_2011_914_MOESM4_ESM.pdf avtorjev izvirna datoteka za sliki 4 Konkurenčni interesi
Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov.

• So zaviralci protonske črpalke prva izbira za akutno zdravljenje želodčnih razjed? Meta analiza randomiziranih kliničnih trials
• Sočasno kompozitni nadledvične feokromocitoma, več želodca stromalni tumorji in pseudohermaphrodism pri bolniku z von Recklinghausens disease