expression dynamique de CEACAM7 dans les lésions précurseurs du cancer de l'estomac et sa valeur pronostique en combinaison avec le CEA

expression dynamique de CEACAM7 dans les lésions précurseurs du cancer de l'estomac et sa valeur pronostique en combinaison avec le CEA
Résumé
Contexte
La signification de carcinoembryonnaire molécule d'adhésion cellulaire liés antigène-7 (CEACAM7) expression dans le cancer gastrique et des lésions précancéreuses et sa corrélation avec l'expression du CEA a rarement été étudié auparavant
. CEACAM7 et CEA expression de méthodes a été détectée par immunohistochimie dans des sections consécutives de 345 sujets atteints de cancer de l'estomac et des lésions précancéreuses. Analyse confocale au laser a été effectuée afin de déterminer la localisation et le CEA CEACAM7. Corrélation entre CEACAM7 et d'expression de CEA avec des paramètres clinicopathologiques a été statistiquement analysé CEACAM7 l'expression de. Résultats en corrélation avec le classement anatomopathologique (P = 0,006), la classification de Lauren (P = 0,023), et l'expression CEA (Spearman R = 0,605, P < 0,001) dans le carcinome gastrique. CEACAM7 colocalisé avec le CEA se situe principalement dans la membrane cytoplasmique des cellules cancéreuses. expression CEA a été corrélée avec métastases ganglionnaires (P = 0,031). CEACAM7 et d'expression CEA ont augmenté progressivement à partir de lésions précurseurs de carcinomes gastriques. Une combinaison de CEACAM7 et CEA expression a été déterminé à être un facteur prédictif indépendant pour les patients atteints de cancer de l'estomac par une analyse multivariée (P = 0,001).
Conclusions
expression CEACAM7 est en corrélation avec la différenciation de la tumeur et l'expression CEA dans le carcinome gastrique. CEACAM7 et CEA expression peut synergétique favoriser la carcinogenèse gastrique. Combiné CEACAM7 et CEA analyse de l'expression peut être un prédicteur postopératoire utile pour les patients atteints de cancer de l'estomac.
Mots-clés
CEACAM7 gastrique carcinome lésions précurseurs pronostic CEA Contexte
connaissance approfondie des caractéristiques génotypiques et phénotypiques de carcinome gastrique et des lésions précancéreuses est extrêmement important pour prévenir leur développement, limitant leur progression à une tumeur de grade supérieur, une fois qu'ils se développent, et de fournir des informations pronostiques. Les carcinomes gastriques sont généralement divisés en intestinal de type et de type diffus par Lauren [1]. Le cancer de type intestinal a été pensé pour afficher un phénotype principalement intestinal, car elle est précédée d'un stade précancéreux, caractérisé par les étapes successives de la gastrite atrophique, une métaplasie intestinale, une néoplasie intraépithéliale (GIN) et un carcinome intra-muqueuse [2, 3]. GIN est reconnue comme une lésion précancéreuse importante, et est classé comme étant soit haute ou basse qualité à la fois selon la Vienne [4] et de l'OMS [5] classifications. Il a été rapporté que le type histologique prédominant peut être modifié à partir de la différenciation du type indifférencié que les tumeurs progressent [6]. Ohkura, et autres ont également rapporté que la diversité histologique a augmenté comme les carcinomes gastriques ont augmenté ou envahi la sous-muqueuse [7]. les progrès récents en biologie moléculaire ont montré que la diversité phénotypique des tumeurs est associée à une diversité correspondante de l'expression génique [8-10]. Les changements dans l'expression de biomarqueurs spécifiques de tumeurs dans les lésions précancéreuses et divers carcinomes gastriques différenciés peuvent nous aider à comprendre la transformation à l'hétérogénéité histologique et le mécanisme moléculaire sous-jacent.
L'antigène carcinoembryonnaire (CEA) famille de gènes a été montré pour être exprimé dans un variété de néoplasmes épithéliaux dérivé [11] et leur dérégulation fonctionnelle a été montré pour favoriser des métastases dans les modèles animaux [12]. Un membre particulier CEA de famille de gènes, le CEA adhésion cellulaire molécule-7 (CEACAM-7), régule la différenciation cellulaire normale [11]. La déréglementation du CEACAM-7 expression a été montré pour se produire au début de l'oncogenèse colorectal; diminué CEACAM-7 expression a été montré dans les adénomes, les polypes hyperplasiques et foyers de cryptes aberrantes [11, 13]. Le CEA, un autre membre de la famille de l'antigène carcinoembryonnaire, représente un marqueur tumoral largement utilisé dans le traitement du cancer colo-rectal [14-16]. L'augmentation des taux d'ACE le premier indicateur identifié d'une maladie récidivante chez 81% [17] et 89% [18] des patients atteints d'un cancer colorectal. Les deux mésentérique et périphérique du CEA ont été plus élevés dans les néoplasmes avec atteinte veineuse, de grand diamètre, et des stades avancés de cancer colorectal [19]. Les valeurs CEA accrues ont également été signalés pour d'autres tumeurs malignes épithéliales, tels que ceux du sein, du poumon et du pancréas [20].
À ce jour, peu d'informations sont disponibles sur l'expression CEACAM7 dans les lésions non néoplasiques et néoplasiques gastriques. Une étude indique que les niveaux d'ARNm de CEACAM7 ont été régulés à la hausse dans les cellules épithéliales gastriques cancéreuses [21]. Toutefois, l'importance du CEA et de l'expression CEACAM7 dans les lésions précancéreuses du cancer de l'estomac est mal comprise. En outre, la relation entre CEACAM7 et le CEA ne sait pas, bien qu'ils appartiennent à la même famille de CEACAM.
Dans cette étude, nous avons étudié la corrélation entre CEACAM7 et l'expression du CEA, et leur relation avec diverses caractéristiques clinico dans le carcinome gastrique, y compris des patients survie. Nous avons comparé les profils d'expression de CEACAM7 et le CEA systématiquement dans la muqueuse normale, gastrite atrophique chronique, néoplasie intraépithéliale gastriques (GIN), et les carcinomes de l'estomac avec microréseau tissulaire consécutive (TMA) sections. Méthodes de A notre connaissance, ceci est la première étude immunohistochimique de l'expression CEACAM7 dans le carcinome gastrique et des lésions précancéreuses.
Patients
L'étude a inclus 345 patients, dont 145 patients atteints d'un carcinome gastrique ayant subi une résection chirurgicale primaire entre 2006 et 2009 à l'hôpital Xijing de Forth Université médicale militaire (Xi'an, Chine), 100 patients atteints de néoplasies intraépithéliales (55 de bas grade et 45 de haute qualité), 50 patients souffrant de gastrite atrophique chronique, et 50 patients atteints de la muqueuse gastrique normale . Les 200 patients présentant des lésions non néoplasiques et précancéreuses avaient reçu un chèque endoscopique gastrique et la biopsie entre 2008 et 2010 à l'hôpital Xijing. Tous les diagnostics, y compris l'état de différenciation, ont été faites sur la base du Pathologie et de Génétique Tumeurs du système digestif par trois pathologistes [22]. GIN est classé comme étant soit haute ou basse qualité selon les deux de Vienne [4] classifications. Le suivi a été effectué sur les 145 patients atteints de carcinome gastrique pour l'analyse de survie. Ces patients ont subi une gastrectomie subtotale avec D2 dissection des ganglions lymphatiques à l'hôpital Xijing de 2006 à 2009. L'âge moyen était de 56,4 ans (extrêmes, 32-74 ans). Tous les patients ont reçu une chimiothérapie postopératoire à l'aide d'un traitement à base de fluorouracil. Aucun patient n'a reçu de la chimiothérapie préopératoire ou la radiothérapie a subi. Le suivi a été effectuée sur des patients à partir de la date de l'opération jusqu'à ce que soit la date du décès ou de 30 Mars 2011, entraînant des périodes de suivi allant de 5 à 67 mois (moyenne, 31 mois). Ces cas perdus de vue ou ceux qui sont morts d'une cause autre que le cancer gastrique ont été considérés comme des données censurées pour l'analyse des taux de survie. Dans tous les cas, le consentement éclairé a été obtenu pour l'utilisation d'échantillons de tumeurs réséquées. Cette étude a été approuvée par le moral et le Comité d'éthique de l'hôpital Xijing de Forth Université médicale militaire. Microréseaux de tissus
tissus de carcinome ou précancéreuses lésions gastriques ont été faites en tissu micro-réseaux par Tissue microarrayer (Instruments Beecher, Argent printemps, USA ™), selon la technique de Kononen et al [23]. En bref, des biopsies de tissus centraux (2 mm de diamètre) ont été prélevés à partir de tissus inclus dans la paraffine individuels (blocs donneurs) et disposés dans un nouveau bloc de paraffine récepteur (bloc de matrices de tissus) à l'aide d'un appareil de trépan. Les résultats de la coloration des différentes zones dans ces blocs de réseau de tissus ont montré un excellent accord. Un noyau a été choisi dans chaque cas pour l'analyse. Nous avons défini un cas adéquat comme une tumeur qui occupait 10% de la superficie de base. Anticorps
primaires pour immunohistochimie
anticorps CEA Souris anticorps CEACAM7 anti-humaine [BAC2] (de ab26281) et lapin anti-humain (ab-15157 ) a été tous achetés chez Abcam plc. (Cambridge, UK).
Immunohistochimie
immunohistochimie a été réalisée sur des coupes de paraffine 4-lm-épaisses, couramment traitées en série. En bref, après la cuisson sur une plaque à 60 ° C pendant une heure, le inclus dans la paraffine, des échantillons de tissus fixés au formol ont été déparaffinées avec du xylene et réhydratées par immersion dans l'éthanol à gradient. une activité de peroxydase endogène a été stoppée par 3% (volume /volume) de peroxyde d'hydrogène dans du methanol pendant 10 minutes, suivi par trois lavages de 3 minutes avec du tampon phosphate salin (PBS). Ceci a été suivi par une étape d'extraction de l'antigène. Les lames ont été immergées dans une solution tampon de citrate 0,01 mol /l (pH 6,0) et placés dans un four à micro-ondes pendant 30 min. Après un lavage à 0,01 mol /l de solution saline tamponnée au phosphate (PBS, pH 7,4), les sections ont ensuite été bloquées avec 10% (vol /vol) de sérum de chèvre normal dans du PBS pendant 30 minutes, suivie d'une incubation dans une chambre humide à 4 pendant une nuit avec l'anticorps primaire à CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam) ou le CEA 01:10 ab-15157, Abcam) dilué dans du PBS contenant 1% (poids /volume) d'albumine de sérum bovin (BSA). Des témoins négatifs ont été effectués en remplaçant l'anticorps primaire avec du sérum de souris pré-immun. Après trois lavages de 3 minutes avec PBS, les coupes ont été traitées avec un second anticorps anti-souris (PV-6002, Santa Cruz) pendant 30 minutes à température ambiante, suivie de trois lavages supplémentaires de 3 minutes avec du PBS. Le produit de réaction a été visualisée avec de la diaminobenzidine (DAB, ZLI-9032, ZSGB. Beijing, Chine) à la température ambiante pendant 2 min. Après avoir été de contraste avec Harris hématoxyline (ZLI-9039, ZSGB. Beijing, Chine) pendant 3 min, et on rince avec de l'eau du robinet, les sections ont été immédiatement déshydratées par immersion séquentielle dans l'éthanol gradient et le xylène, et montés avec pernount et des lamelles. Les images ont été obtenues sous un microscope optique (Olympus BX51, Olympus, Japon) équipé d'un appareil photo numérique DP70.
Évaluation de Coloration
Pour l'évaluation de la coloration des cellules, sections ont été examinées par deux pathologistes indépendants sans connaissance préalable de l'clinicopathologique l'état des échantillons. L'expression de CEACAM7 et le CEA a été évaluée selon le rapport des cellules positives par échantillon (R) et l'intensité de coloration (I). Le rapport de cellules positives par échantillon a été marqué 0 pour la coloration de < 1%, 1 pour la coloration de 2 à 25%, 2 pour la coloration de 26 à 50%, 3 pour la coloration 51 à 75%, et 4 pour la coloration > 75% des cellules étudiées. Intensité a été classé comme suit: 0, aucun signal; 1, faible; 2, modérée; et 3, une forte coloration. Un score total (R × I) de 0 à 12 a finalement été calculé et classé comme négatif (-Score: 0-2). Et positive (+, 3-12)
immunofluorescence et confocal à balayage laser
Après la cuisson sur un panneau à 60 ° C pendant une heure, les coupes ont été déparaffinées avec du xylene et réhydratées par immersion dans l'éthanol à gradient. Ceci a été suivi par une étape d'extraction de l'antigène. Les lames ont été immergées dans une solution tampon de citrate 0,01 mol /l (pH 6,0) et placés dans un four à micro-ondes pendant 30 min. Après un lavage à 0,01 mol /l de solution saline tamponnée au phosphate (PBS, pH 7,4), les échantillons ont été incubés avec un tampon de blocage (5% de sérum normal de chèvre 1% d'albumine de sérum bovin et 0,1% de triton X-100) pendant une heure à température ambiante. Les échantillons ont ensuite été incubées avec des anticorps primaires dilués dans le tampon de blocage à 4 ° C pendant une nuit, puis 3 lavages en PBS pendant 10 minutes à chaque fois. Enfin, les échantillons ont été colorés avec des anticorps secondaires dilués dans du tampon de blocage pendant 30 minutes, suivi par 3 lavages dans du PBS. Lamelles ont été montées sur des lames avec Prolonger Antifade (Invitrogen). Les anticorps utilisés pour la coloration immunologique comprennent des anticorps de souris anti-CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam), de lapin anti-CEA (01:10 ab-15157, Abcam), des anticorps secondaires utilisés étaient de chèvre anti-IgG de souris Alexa 549 (1: 300 Invitrogen), de chèvre IgG anti-lapin Alexa 488 (1: 300, Invitrogen), DAPI (1: 1000, Molecular Probes). les tissus adjacents normaux ont été utilisés comme témoins négatifs (20 mm du tissu cancéreux). tissus immunocolorée ont été visualisées et les images ont été capturées en utilisant FluoView (FVLIOi, OLYMPUS. de l'analyse statistique
Toutes les analyses statistiques ont été effectuées en utilisant IBM SPSS 19.0 logiciel. Les données de mesure ont été analysées à l'aide de t de Student ou unidirectionnel test ANOVA, tandis que les données catégorielles ont été étudiés en utilisant theχ2 ou un test non paramétrique. les courbes de survie ont été estimées en utilisant la méthode de Kaplan-Meier, et le test du log-rank a été utilisé pour calculer les différences entre les courbes. l'analyse multivariée utilisant le modèle des risques proportionnels de régression de Cox a été réalisée pour évaluer la . les valeurs pronostiques de coefficient de corrélation expression de la protéine entre l'expression de CEACAM7 et le CEA a été estimée selon la méthode de corrélation de Spearman la signification statistique a été fixé à P <.. 0.05: Résultats
Co-expression de CEACAM7 et le CEA dans le carcinome gastrique
immunohistochimie a été effectuée sur des coupes consécutives de 145 carcinomes gastriques en utilisant un anticorps anti-CEACAM7 ou un anticorps anti-CEA (figure 1). L'analyse immunohistochimique montre que 100 sur 145 (69,0%), les échantillons ont été classés comme CEACAM7 négatif (figure 1A) et de 45 145 (31,0%), les échantillons ont été classés comme CEACAM7 positif (figure 1C, 1E). expression CEACAM7 était concordant avec l'expression du CEA à 80,0% (116 145) des cas de carcinome gastrique (Spearman R = 0,605, P < 0,001). CEACAM7 et CEA double positivité a été observée dans 40 cas, double-négativité a été observée dans 76 cas et 29 cas ont été jugés soit CEACAM7 positif ou CEA-positif seulement. Le coefficient de corrélation expression a été estimée en utilisant la méthode de corrélation de Spearman Rank. La valeur Spearman R était 0,605 (P < 0,001), ce qui indique une corrélation étroite entre CEACAM7 et CEA expression dans les carcinomes gastriques. Comme il est incommode et inutile de vérifier la localisation des deux antigènes par immunofluorescence dans tous les tissus 40 de carcinome qui sont positifs pour les deux CEACAM7 et le CEA, nous avons étudié leur localisation dans sept coupes de tissus qui ont été choisis au hasard parmi les tissus sections 40 de carcinome. Analyse laser microscopie confocale a montré qu'ils co-localisés dans la membrane et le cytoplasme des cellules cancéreuses (figure 2A, B, C, D). Figure 1 Co-expression de CEACAM7 et le CEA dans les carcinomes gastriques. A & B, coloration négative pour CEACAM7 (A) et le CEA (D) dans un cancer de l'estomac bien différencié. C & D, CEACAM7 (C) et le CEA (D) coloration a été négative dans la zone bien différenciées (cellules cancéreuses sont rangés sous forme de glande-like) et positive dans la zone peu différenciés (couleur marron) d'un cancer de l'estomac. E & F, coloration positive pour CEACAM7 (E) et le CEA (F) dans un carcinome gastrique peu différencié. A & B, C & D, et E &. F sont des coupes en série adjacents, respectivement (DAB comme chromogène, de contraste avec Harris hématoxyline, 50X)
Figure 2 Co-localisation de CEACAM7 et le CEA dans le tissu du carcinome gastrique. (Laser confocal analyse par microscopie dans une section représentative). expression positive pour CEACAM7 (A, rouge) ou de CEA (B, vert) dans la membrane et le cytoplasme des cellules cancéreuses (rouge). C, l'image Fusionné sans coloration nucléaire; co-expression de CEACAM7 et le CEA est observée (jaune). D, l'image Fusionné avec noyau coloré par DAPI (bleu). (200X).
Corrélation des CEACAM7 et CEA expression avec des caractéristiques clinico de la relation de carcinome gastrique entre CEACAM7 et CEA expression et diverses caractéristiques clinicopathologiques des carcinomes gastriques est résumée dans le tableau 1. CEACAM7 a été plus fréquemment exprimée dans les tumeurs peu différenciées que les carcinomes gastriques dans le bien et modérément différenciés (41,3% vs 20,0%, P = 0,006). CEACAM7 positivité était significativement plus élevée dans les carcinomes gastriques de type diffus que dans les carcinomes gastriques de type intestinal (39,7% contre 22,2%, p = 0,023). expression CEA significativement corrélée avec métastases ganglionnaires (P = 0,031) .Table 1 Corrélation de CEACAM 7 et de l'expression de CEA avec des caractéristiques clinico de carcinome gastrique.
Variables
CEACAM 7
valeur P
CEA
P valeur

négatif
(n = 100)
positif (n = 45)

négatif (n = 81)
positif
(n = 64)

Sexe
Male
74(67.3%)
36(32.7%)
0.437
58(52.7%)
52(47.3%)
0.178
Female
26(74.3%)
9 (25,7%)
23 (65,7%)
12 (34,3%)
âge (années)
(moyenne ± SD)
59,8 ± 10,4 58,1 ± 13,3

0,608
60,3 ± 9,4
58,9 ± 12,9
0,512
Localisation de la tumeur
Upper
12 (60,0%)
8 (40,0%)
0,601
9 (45,0%)
11 (55,0%)
49 (69,0%) de 0,544
Moyen
22 (31,0%)
40 (56,3%)
31 ( 43,7%)
39 (72,2% de la Basse)
15 (27,8%)
32 (59,3%)
22 (40,7%)
histologie †
bien et Moderate
56(80.0%)
14(20.0%)
0.006
43(61.4%)
27(38.6%)
0.741
Undifferentiated
44(58.7%)
31(41.3%)
38 (50,7%)
37 (49,3%)
classification de
Lauren Intestinal
56(77.8%)
16(22.2%)
0.023
39(54.2%)
33(45.8%)
0.683
Diffuse
44(60.3%)
29(39.7%)
42 (57,5%)
31 (42,5%)
Profondeur de la tumeur
T1-T2
28 (75,7%)
9 (24,3%)
0,307
20 ( 54,1%)
17 (45,9%)
0,797
T3-T4 72 (66,7%
)
36 (33,3%)
61 (56,5%)
47 ( 43,5%)
Node métastase
Negative
59(72.8%)
22(27.2%)
0.257
37(67.3%)
18(32.7%)
0.031
Positive
41(64.1%)
23(35.9%)
44 (48,9%)
46 (51,1%)
Lymphatique invasion
Negative
44(75.9%)
14(24.1%)
0.143
35(60.3%)
23(39.7%)
0.375
Positive
56(64.4%)
31(35.6%)
46 (52,9%)
41 (47,1%)
Venous invasion
Negative
52(70.3%)
22(29.7%)
0.729
43(58.1%)
31(41.9%)
0.578
Positive
48(67.6%)
23(32.4%)
38 (53,5%)
33 (46,5%)
stade des tumeurs
I- II
40 (62,5%)
24 (37,5%)
0,135
34 (53,1 %)
30 (46,9%)
0,555
III- IV
60 (74,1%)
21 (25,9%)
47 (58,0%)
34 (42,0 REMARQUE%): le test X2 de Pearson a été fait pour obtenir la valeur P, sauf que Age a été comparée par le test de Student-T. † Eh bien = bien carcinome différencié; modérément = modérément différencié carcinome; indifférenciée = peu différencié carcinome, carcinome chevalière, ou d'un carcinome mucineux. expression
dynamique des CEACAM7 et le CEA dans la muqueuse normale et des lésions précancéreuses
Les résultats de CEACAM7 et CEA expression dans la muqueuse normale et des lésions précancéreuses ont été résumés dans le tableau 2. Positivity pour l'expression de CEACAM7 a été trouvé dans la gastrite atrophique chronique (12%; 6/50), GIN bas grade (29,1%; 16/55), et GIN de haute qualité (28,9%; 13/45). expression CEACAM7 n'a pas été trouvé dans la muqueuse normale (0/50). Positivity pour l'expression de CEACAM7 dans GINs bas grade était significativement plus élevée que pour la gastrite atrophique chronique (P = 0,032), et CEACAM7 était plus fréquemment exprimée dans la gastrite atrophique chronique que dans la muqueuse gastrique normale (P = 0,012), mais il n'y avait pas de différence significative expression CEACAM7 entre GIN bas grade et GIN de haute qualité (P = 0,982). CEA positivité a été trouvé dans la muqueuse normale (6%; 3/50), la gastrite atrophique chronique (8%; 4/50), GIN bas grade (57,1%; 13/55), et GIN de haute qualité (60%; 20/45). La positivité du CEA pour GIN bas grade était significativement plus élevée que pour la gastrite atrophique chronique (P = 0,030), mais était inférieur à celui des GIN de haut grade (P = 0,028). Il n'y avait pas de différence significative entre la positivité du CEA muqueuse normale et la gastrite atrophique chronique (p = 0,500). l'expression CEACAM7 a été localisée à la surface luminale de la gastrite et GIN (figure 3C, E et 3G) atrophique chronique, aucune réaction immunologique a été détectée dans la muqueuse normale (figure 3A). CEA a été localisé sur la surface luminale de la muqueuse normale, gastrite atrophique chronique, GIN bas grade, et GIN de haut grade (figure 3B, D, F, et 3H), alors que les deux CEA et de l'expression CEACAM7 a été localisée à la surface de les cellules cancéreuses gastriques (Figure 3I et 3J) Tableau 2 Relation entre CEACAM7 et CEA expression avec différents tissus gastriques
Tissues
N
CEACAM7


CEA



négatif

P la valeur positive *
négatif

la valeur P positive *
muqueuse normale
50
50 (100%)
0 (0%)
0,0121
47 (94%)
3 (6%)
NS4 de gastrite atrophique chronique
50
44 (88,0%)
6 (12,0%)
0,0322
46 (92%)
4 (8%)
0,0305
bas grade GIN
55
39 (70,9%)
16 (29,1%)
42 (76,4%) de NS3
13 (23,6%)
0,0286
haute qualité GIN
45
32 (71,1%)
13 (28,9%)
25 (55,6%)
20 (44,4%)
* test de χ2. N-nombre de cas, la néoplasie intraépithéliale GIN-gastrique. NS-pas de signification (P > 0,05). Par rapport à une muqueuse normale, CEACAM7 positivité était significativement plus élevée dans la gastrite atrophique chronique (p = 0,012); 2 par rapport à la gastrite atrophique chronique, CEACAM7 a été plus fréquemment exprimée en GIN de qualité inférieure (P = 0,032); 3Il avait pas de différence significative d'expression CEACAM7 entre GIN de qualité inférieure et GIN de haut grade (P = 0,982); 4Il avait pas de différence significative d'expression CEA entre la muqueuse normale et la gastrite atrophique chronique (P = 0,500); 5Compared avec gastrite atrophique chronique, le CEA a été plus fréquemment exprimée en GIN de bas grade (P = 0,030); 6 Par rapport à GIN de bas grade, le CEA a été plus fréquemment exprimée en GIN de qualité élevée (P = 0,028).
Figure 3 profils d'expression différents de CEACAM7 et le CEA dans les lésions non néoplasiques gastriques et des carcinomes gastriques. sections consécutives ont été utilisés pour l'analyse. Aucune réaction immunologique pour CEACAM7 a été détectée dans la muqueuse normale (A). CEACAM7 a été localisé sur la surface apicale de la gastrite atrophique chronique (C), à faible GIN grade (E) et GIN de haut grade (G). CEA a été localisé sur la surface luminale apicale de la muqueuse normale (B), gastrite chronique atrophique (D), GIN bas grade (F), et GIN de haute qualité (H). Deux CEACAM7 (I) et CEA (J) a été localisé sur la totalité de la surface des cellules cancéreuses gastriques. (DAB comme chromogène, de contraste avec Harris hématoxyline, 200X).
Analyse de survie
un an et de trois ans les taux de survie étaient de 92,0% et 54,1%, respectivement, pour CEACAM7 et CEA patients double négatif, 98,3% et 45,1%, respectivement, pour CEACAM 7 et le CEA simple positif (soit positif CEA CEACAM7 positif ou) patients, et 64,0% et 8,5% pour les patients positifs à double CEACAM7 et du CEA. différence significative a été observée entre le taux de patients à double négatif et double-positives (Figure 4, P = 0,001) survie. Cependant, aucune différence significative n'a été observée entre les patients à double négatif et simple positif (figure 4, P = 0,391). L'analyse multivariée a montré que la double positivité pour CEACAM7 et d'expression CEA (P = 0,004) et le stade tumoral (P = 0,001) étaient des facteurs indépendamment associés à un pronostic des patients pauvres (tableau 3). Figure 4 courbes de Kaplan-Meier pour la survie postopératoire. La durée médiane de survie des patients atteints de CEACAM7 et le CEA à double positivité était plus courte que celle des patients avec double-négativité (test log-rank: P = 0,001). Mais, il n'y avait pas de différence significative entre la durée médiane de survie des patients atteints d'une seule positivité et double-négativité (P = 0,391).
Tableau 3 analyse multivariée sur la base proportionnelle des risques modèle de Cox

variable de la Hazard Ratio (le de confiance de 95% Intervalle)
P-valeur
tumeur de stade III, IV vs I, II
2.240 ( 1,501 à 3,343) 0,001

CEACAM7 (+) CEA (+) vs CEACAM7 (-) CEA (-)
1,545 (1,153 à 2,069) 0,004

Discussion
CEA est l'un des marqueurs tumoraux les plus utiles pour le carcinome [24], et son expression a été trouvé à être en corrélation avec les caractéristiques clinico, comme la participation veineuse, plus grand diamètre, et des stades avancés de carcinomes colorectaux [25, 26]. Dans le cancer du côlon, le CEA est régulée à la hausse, mais CEACAM7 a été signalé à être régulée à la baisse [11], il est intéressant de noter que tous deux ont été surexprimés dans le cancer gastrique, et co-exprimés dans la plupart des tissus. ce qui suggère que CEACAM7 peut jouer des rôles différents dans différents cancers. Comme expression CEACAM7 a été trouvé à être étroitement corrélée avec l'expression du CEA dans le carcinome gastrique dans cette étude, nous avons vérifié sa corrélation avec diverses caractéristiques clinicopathologiques, et a constaté que l'expression CEACAM7 était plus fréquente dans les carcinomes gastriques différenciés mal que les carcinomes du bien et modérément différenciés (P = 0,006), et a également été corrélée avec la classification de Lauren (P = 0,023). Il a été rapporté que le type histologique prédominant peut changer de la différenciation du type indifférencié que les tumeurs progressent [6], Ohkura, et al [17] ont également signalé que l'augmentation de la diversité histologiques que les carcinomes gastriques se développent ou envahissent la sous-muqueuse. Ainsi, nous avons supposé que CEACAM7 pourrait favoriser l'agressivité et la progression du cancer de l'estomac par l'intermédiaire de la régulation de la différenciation des cellules tumorales, ce qui a besoin d'une enquête plus approfondie.
Comme type intestinal cancer est pensé pour être précédé d'un stade précancéreux caractérisé par les étapes successives de atrophique gastrite, métaplasie intestinale, GINs, et le carcinome intramuqueux, il serait d'une grande importance pour clarifier l'expression dynamique de CEACAM7 et le CEA dans la muqueuse normale gastrique, gastrite atrophique chronique, GINs et cancer de l'estomac. Nous avons constaté que, par rapport à la muqueuse normale gastrique, expression CEACAM7 a été augmenté de façon significative dans la gastrite atrophique chronique et toutes les autres lésions, et l'expression du CEA a été significativement augmentée dans GINs et cancer de l'estomac. Ces résultats indiquent que CEACAM7 peut jouer un rôle dans la carcinogenèse gastrique à un stade précoce, en particulier au stade de la gastrite atrophique chronique. Par ailleurs, le CEA peut coopérer avec CEACAM7 au stade de GINs. Conformément à nos résultats, les souris transgéniques CEA ont montré massivement côlons élargie comprenant une mosaïque continue d'hyperplasie sévère, dysplasie, et la morphologie adénomateuse dentelée, ce qui suggère que la régulation du CEA pourrait être une étape instrumentale dans la progression du cancer chez l'homme [27]. Il semble que la régulation du CEACAM7 ou CEA expression peut être un événement moléculaire au début de la tumorigenèse, et les deux protéines pourrait être utilisé comme dépistage des biomarqueurs dans les lésions précancéreuses pour identifier les patients présentant un risque élevé de conversion maligne. À l'inverse, une diminution de l'expression de CEACAM-7 a été montré pour se produire au début de la cancérogenèse colorectale, avec une expression diminuée chez les adénomes, les polypes hyperplasiques, et même de cryptes aberrantes foci.11,13 L'expression contrastée CEACAM7 dans la carcinogenèse gastrique et colorectal implique que son fonction dépend du contexte.
Les patients atteints de cancer avancé veulent souvent savoir combien de temps ils ont laissé vivre [28], mais les cliniciens ne sont pas confiants à estimer le pronostic [29]. Par conséquent, les biomarqueurs pour le pronostic sont un outil potentiel pour aider les cliniciens avec les soins aux patients. Au cours de la dernière décennie, un grand nombre de protéines qui sont présumément important dans la carcinogenèse et la biologie du cancer ont été étudiés pour leur valeur pronostique dans le cancer gastrique, mais aucun n'a été prouvé pour être suffisamment utile dans la prédiction clinique. Il est très peu probable qu'un marqueur protéique unique fournira la sensibilité et la spécificité requise pour le pronostic. Ainsi, on est passé à la découverte de combinaisons de biomarqueurs directement liés aux processus pathologiques [30]. Dans cette étude, seul le stade tumoral avancé et CEACAM7 et le CEA double positivité ont été identifiés à l'aide du risques proportionnels de Cox modèle comme prédicteurs pronostiques indépendants pour la survie des patients atteints de carcinome gastrique résécable, indépendamment de l'âge, le sexe, la différenciation, le stade TNM histopathologique, la lymphe Conclusions de noeud métastases, lymphatiques et invasion veineuse des patients.
à notre connaissance, ceci est la première étude immunohistochimique comparative des CEACAM7 et CEA expression dans le carcinome gastrique et des lésions précancéreuses. Les deux protéines ont été co-exprimées et co-localisés dans le carcinome gastrique. expression CEACAM7 a été jugée significativement corrélée avec la différenciation d'un carcinome gastrique. L'expression de la CEACAM7 et le CEA a été trouvée augmenter progressivement au cours du développement d'un carcinome gastrique. CEACAM7 et CEA double positivité peut être un facteur prédictif de pronostic postopératoire utile pour les patients atteints de cancer de l'estomac.
Déclarations Remerciements
Ce travail a été soutenu par le projet de la Chine (No.2010CB529300, 02, 05 National 973, 06) et la national Natural science Foundation de Chine (n ° 81030044).
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