Dynamisk uttrykk for CEACAM7 i forstadier av magekreft og dens prognostisk verdi i kombinasjon med CEA

Dynamisk uttrykk for CEACAM7 i forstadier av magekreft og dens prognostisk verdi i kombinasjon med CEA
Abstract
Bakgrunn
betydningen av carcinoembryonic antigen relaterte celleadhesjonsmolekyl 7 (CEACAM7) uttrykk i magekreft og forstadier til kreft og dens korrelasjon med CEA uttrykket har sjelden vært tidligere undersøkt
. Metoder
CEACAM7 og CEA uttrykk ble oppdaget av immunhistokjemi i påfølgende deler av 345 pasienter med magekreft og forstadier til kreft. Laser konfokal analyse ble utført for å bestemme CEACAM7 og CEA lokalisering. Sammenheng mellom CEACAM7 og CEA uttrykk med clinicopathological parametrene ble statistisk analysert.
Resultater
CEACAM7 uttrykk korrelert med patologiske gradering (P = 0,006), Lauren klassifisering (P = 0,023), og CEA uttrykk (Spearman R = 0,605, P < 0,001) i magekreft. CEACAM7 samlokalisert med CEA hovedsakelig cytoplasmamembranen av kreftceller. CEA uttrykk var korrelert med lymfeknutemetastase (P = 0,031). CEACAM7 og CEA uttrykk økt gradvis fra forstadier til mage karsinom. En kombinasjon av CEACAM7 og CEA ekspresjon ble bestemt til å være en uavhengig prediktor for pasienter med gastrisk karsinom ved multivariat analyse (P = 0,001)
. Konklusjoner
CEACAM7 uttrykk korrelerer med tumor differensiering og CEA-ekspresjon i gastrisk karsinom. CEACAM7 og CEA uttrykk kan synergi fremme magekreftutvikling. Kombinert CEACAM7 og CEA uttrykk analyse kan være en nyttig postoperativ prediktor for pasienter med magekreft.
Nøkkelord
CEACAM7 magekarsinom forstadier prognose CEA Bakgrunn
I inngående kunnskap om de genotypiske og fenotypiske egenskaper ved gastrisk karsinom og forstadier til kreft er svært viktig for å forebygge deres utvikling, begrense deres progresjon til en høyere karakter tumor når de utvikler, og gir prognostisk informasjon. Gastric karsinomer har vanligvis blitt delt inn i intestinal-type og diffuse-type av Lauren [1]. Intestinal-type kreft ble antatt å vise en overveiende intestinal fenotype fordi det kommer etter en forstadier stadium karakterisert ved de følgende trinn atrofisk gastritt, intestinal metaplasi, intraepitelial neoplasi (GIN), og intramucosal karsinom [2, 3]. GIN er anerkjent som en viktig forstadier lesjon, og er kategorisert som enten høy eller lav grad i henhold til både Vienna [4] og WHO [5] klassifikasjoner. Det har blitt rapportert at den overveiende histologiske type kan endres fra den differensierte til udifferensiert type som tumorene fremgang [6]. Ohkura, et al rapporterte også at histologisk mangfold økt som mage karsinom vokste eller invaderte submucosa [7]. Nyere fremskritt innen molekylær biologi har vist at den fenotypiske mangfoldet av tumorer er forbundet med en tilsvarende variasjon i gen-ekspresjon [8-10]. Endringer i uttrykket av tumorspesifikke biomarkører i forstadier til kreft og ulike differensierte mage Kreftsvulster kan hjelpe oss å forstå overgangen til histologisk heterogenitet og den underliggende molekylære mekanismen.
Carcinoembryonic antigen (CEA) familie av gener har vist seg å være uttrykt i en rekke epiteliale avledet neoplasmer [11], og deres funksjonelle dereguleringen har vist seg å fremme metastaser i dyremodeller [12]. En spesiell CEA gen familiemedlem, CEA cellulært adhesjonsmolekyl-7 (CEACAM-7), regulerer normal cellulær differensiering [11]. Deregulering av CEACAM-7 uttrykk har vist seg å oppstå tidlig i kolorektal onkogenesen; redusert CEACAM-7 uttrykk ble vist i adenomer, hyperplastiske polypper, og avvikende krypten foci [11, 13]. CEA, et annet medlem av carcinoembryonic antigen familien, representerer en svulst markør som brukes mye i behandling av tykktarmskreft [14-16]. Økte CEA nivåer var den første identifiserte indikator på tilbakevendende sykdom i 81% [17] og 89% [18] av pasienter med kolorektal kreft. Både mesenteric og perifere nivåer av CEA var høyere i svulster med venøs engasjement, stor diameter, og avanserte stadier av tykktarmskreft [19]. Økte CEA verdier har også blitt rapportert for andre epiteliale kreftformer, slik som de i bryst, lunge, og bukspyttkjertel [20].
Hittil er lite informasjon tilgjengelig på CEACAM7 uttrykk i mage nonneoplastic og neoplastiske lesjoner. En studie rapporterer at CEACAM7 mRNA nivåer ble oppregulert i kreft mage epitelceller [21]. Imidlertid er betydningen av CEA og CEACAM7 uttrykk i forstadier til kreft magekarsinom dårlig forstått. Dessuten er forholdet mellom CEACAM7 og CEA uklart, selv om de tilhører samme CEACAM familien.
I denne studien undersøkte vi sammenhengen mellom CEACAM7 og CEA uttrykk, og deres forhold til ulike clinicopathological funksjoner i magekreft, inkludert pasient overlevelse. Vi sammenlignet uttrykk mønstre av CEACAM7 og CEA systematisk i normal slimhinne, kronisk atrofisk gastritt, intraepitelial neoplasi (GIN), og karsinomer i magen med påfølgende vev microarray (TMA) seksjoner. Så vidt vi vet, er dette den første immunhistokjemiske studier av CEACAM7 uttrykk i magekreft og forstadier til kreft.
Metoder
Pasienter
Studien inkluderte 345 pasienter, inkludert 145 pasienter med magekreft som gjennomgikk primær kirurgisk reseksjon mellom 2006 og 2009 på Xijing Hospital of Forth Military Medical University (Xi'an, Kina), 100 pasienter med intraepitelial svulster (55 lavgradig og 45 high-end), 50 pasienter med kronisk atrofisk gastritt, og 50 pasienter med normal mageslimhinnen . De 200 pasienter med nonneoplastic og forstadier til kreft hadde fått en mage endoskopisk sjekk og biopsi mellom 2008 og 2010 på Xijing Hospital. Alle diagnoser, inkludert differensiering status ble gjort basert på patologi og genetikk Svulster i fordøyelsessystemet av tre patologer [22]. GIN er kategorisert som enten høy eller lav grad i henhold til både Vienna [4] klassifikasjoner. Oppfølging ble utført på 145 pasienter med magekreft for overlevelsesanalyse. Disse pasientene gjennomgikk delsum gastrektomi med D2 lymfeknute disseksjon på Xijing Hospital fra 2006 til 2009. Gjennomsnittsalderen var 56,4 år (spredning, 32-74 år). Alle pasientene fikk postoperativ kjemoterapi ved hjelp av et FU-basert regime. Ingen pasienter fikk preoperativ kjemoterapi eller gikk strålebehandling. Oppfølging ble utført på pasienter fra datoen for operasjonen til enten dødsdato eller 30 mars 2011, noe som resulterer i oppfølgings perioder fra 5 til 67 måneder (gjennomsnitt, 31 måneder). De tilfeller man ikke å følge opp eller de som døde av en annen enn magekreftsaken ble ansett som sensurerte data for analyse av overlevelse. I alle tilfeller ble informert samtykke oppnådd for bruk av resekterte vevsprøver. Denne studien ble godkjent av moralsk og etisk komité i Xijing Hospital of Forth Military Medical University.
Microarray
vev av magekreft eller forstadier til kreft ble gjort i vev mikro-matriser av Tissue Microarrayer (Beecher Instruments, Silver Spring, USA ™), i henhold til teknikken fra Kononen et al [23]. Kort sagt ble kjerne vevsbiopsier (2 mm diameter) som er hentet fra individuelle parafininnstøpte vev (donor blokker) og anordnet i en ny mottaker parafinblokk (tissue matrise blokk) ved hjelp av en trephine apparat. De farge resultatene av de ulike områdene i disse vev array-blokkene viste utmerket avtale. En kjerne ble valgt fra hvert tilfelle for analyse. Vi definerte en tilstrekkelig tilfelle som en svulst som okkuperte 10% av kjerneområdet.
Primære antistoffer for immunohistokjemi
av mus anti-human-antistoff CEACAM7 [BAC2] (ab26281) og kanin-anti-humant CEA antistoff (ab-15 157 ) ble alle kjøpt fra Abcam plc. (Cambridge, UK).
Immunohistochemistry
Immunohistokjemi ble utført på 4-lm-tykke, rutinemessig behandlet, parafinsnitt i serien. I korthet, etter baking på et panel ved 60 ° C i en time, parafininnebygd, ble formalinfikserte vevsprøver deparaffinized med xylen og rehydrert gjennom gradient etanol nedsenking. Endogen peroksidaseaktivitet ble stoppet med 3% (vol /vol) hydrogenperoksyd i metanol i 10 minutter, etterfulgt av tre 3-minutters vaskinger med fosfatbufret saltvann (PBS). Dette ble etterfulgt av et trinn for antigen henting. Platene ble nedsenket i 0,01 mol /l citrat-bufferoppløsning (pH 6,0) og plassert i en mikrobølgeovn i 30 min. Etter en vask i 0,01 mol /l fosfat-bufret saltvann (PBS, pH 7,4), Snittene ble deretter blokkert med 10% (volum /volum) normalt geiteserum i PBS i 30 minutter, fulgt av inkubering i et fuktig kammer ved 4 over natten med det primære antistoff til CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam) eller CEA 01:10, ab-15157, Abcam) fortynnet i PBS inneholdende 1% (vekt /volum) bovint serumalbumin (BSA). Negative kontroller ble utført ved å erstatte det primære antistoff med pre-immun museserum. Etter tre 3-minutters vaskinger med PBS, ble delene behandlet med andre anti-mus-antistoff (PV-6002, Santa Cruz) i 30 minutter ved romtemperatur, etterfulgt av ytterligere tre 3-minutters vaskinger med PBS. Reaksjonsproduktet ble visualisert med diaminobenzidin (DAB, ZLI-9032, ZSGB. Beijing, Kina) ved romtemperatur i 2 min. Etter å ha blitt kontra med Harris hematoxylin (ZLI-9039, ZSGB. Beijing, Kina) for 3 min, og skylles med vann fra springen, seksjonene ble umiddelbart dehydrert ved sekvensiell nedsenking i gradient etanol og xylen, og montert med pernount og dekkglass. Bilder ble oppnådd under et lysmikroskop (Olympus BX51, Olympus, Japan) er utstyrt med en DP70 digitalkamera.
Evaluering av Farging
For vurdering av cellefarging, Seksjonene ble undersøkt av to uavhengige patologer uten forutgående kunnskap om clinicopathological status av prøvene. Ekspresjon av CEACAM7 og CEA ble evaluert i henhold til forholdet mellom positive celler per prøve (R) og fargeintensitet (I). Forholdet mellom positive celler per eksemplar ble scoret 0 til farging av < 1%, en for farging av 2 til 25%, 2 til farging av 26 til 50%, 3 til farging av 51 til 75%, og 4 for farging > 75% av cellene ble undersøkt. Intensitet ble gradert som følger: 0, ingen signal; 1, svak; 2, moderat; og 3, sterk farging. En total poengsum (R × I) fra 0 til 12 ble endelig beregnet og vurdert som negative (-score: 0-2). Og positive (+, 3-12)
immunfluorescens og laser confocal scanning
Etter steking på et panel ved 60 ° C i en time, ble seksjonene deparaffinized med xylen og rehydrert gjennom gradient etanol nedsenking. Dette ble etterfulgt av et trinn for antigen henting. Platene ble nedsenket i 0,01 mol /l citrat-bufferoppløsning (pH 6,0) og plassert i en mikrobølgeovn i 30 min. Etter en vask i 0,01 mol /l fosfat-bufret saltvann (PBS, pH 7,4), prøvene ble inkubert med blokkeringsbuffer (5% normalt geiteserum, 1% bovint serumalbumin og 0,1% triton X-100) i en time ved romtemperatur. Prøvene ble deretter inkubert med primære antistoffer fortynnet i blokkeringsbuffer ved 4 ° C over natten, etterfulgt av 3 vaskinger i PBS i 10 minutter hver. Til slutt ble prøver ble farget med sekundære antistoffer fortynnet i blokkeringsbuffer i 30 minutter etterfulgt av 3 vaskinger i PBS. Dekk ble montert på lysbilder med Forleng Antifade (Invitrogen). Antistoffer anvendt for farging omfatter mus anti-CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam), kanin-anti-CEA (01:10, ab-15157, Abcam), sekundære antistoffer som ble anvendt var geit-anti-mus-IgG Alexa 549 (1: 300 , Invitrogen), geite-anti-kanin-IgG Alexa 488 (1: 300, Invitrogen), DAPI (1: 1000, Molecular Probes). Tilstøtende normale vev ble anvendt som negative kontroller (20 mm bort fra kreftvev). Immunostained vev ble visualisert og bildene ble tatt ved hjelp FlUOVIEW (FVLIOi, Statistiske analyser OLYMPUS.
Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av IBM SPSS 19,0 programvare. Måledata ble analysert ved hjelp av Student t eller enveis ANOVA test, mens kategoriske data ble studert ved hjelp theχ2 eller parametrisk test. Overlevelseskurver kurver~~POS=HEADCOMP ble beregnet ved hjelp av Kaplan-Meier-metoden, og den log-rank test ble brukt til å beregne forskjeller mellom kurvene. multivariatanalyse hjelp av Cox regresjonsmodell ble utført for å vurdere . prognostiske verdier av protein uttrykk Korrelasjonskoeffisient mellom uttrykk for CEACAM7 og CEA ble estimert ved hjelp av Spearman korrelasjonsmetoden Statistisk signifikans ble satt til p <.. 0.05
Resultater
Co-uttrykk for CEACAM7 og CEA i magekreft
Immunhistokjemi ble utført på hverandre følgende deler av 145 gastriske karsinomer ved hjelp av enten anti-CEACAM7 eller anti-CEA-antistoff (figur 1). Immunhistokjemisk analyse viser at 100 av 145 (69,0%) prøver ble kategorisert som CEACAM7-negative (figur 1A), og 45 av 145 (31,0%) prøver ble kategorisert som CEACAM7-positive (figur 1C, 1E). CEACAM7 uttrykk var konkordant med CEA uttrykk i 80,0% (116 av 145) av magekreft tilfeller (Spearman R = 0,605, P < 0,001). CEACAM7 og CEA dobbel-positivitet ble observert i 40 tilfeller, ble dobbelt-negativitet observert i 76 tilfeller, og 29 tilfeller ble funnet å være enten CEACAM7-positive eller CEA-positive bare. Uttrykket korrelasjonskoeffisient ble estimert ved hjelp av Spearman Rank korrelasjonsmetode. Den Spearman R verdien var 0,605 (P < 0,001), noe som indikerer en nær sammenheng mellom CEACAM7 og CEA uttrykk i mage karsinom. Som det er upraktisk og unødvendig å sjekke lokalisering av de to antigener ved immunfluorescens i alle de 40 karsinom vev som er positive for både CEACAM7 og CEA, undersøkte vi deres lokalisering i syv vevssnitt som ble tilfeldig valgt fra de 40 carcinoma vev seksjoner. Laser konfokal mikroskopi-analyse viste at de samtidig er lokalisert i membranen og cytoplasma av kreftceller (figur 2A, B, C, D). Figur 1 Co-uttrykk for CEACAM7 og CEA i mage karsinom. A og B, Negativ farging for CEACAM7 (A) og CEA (D) i en godt differensiert gastrisk karsinom. C &D, CEACAM7 (C) og CEA (D) farging var negativ i godt differensiert området (kreftceller blir varierte i kjertel-lignende form), og positive i den dårlig differensiert området (brun farge) av en gastrisk karsinom. E & F, positiv farging for CEACAM7 (E) og CEA (F) i en dårlig differensiert gastrisk karsinom. A og B, C &D, og ​​E &. F er tilstøtende seriesnitt, henholdsvis (DAB som kromogen, motfarget med Harris hematoksylin, 50X)
Figur 2 co-lokalisering av CEACAM7 og CEA i vevet av gastrisk karsinom. (Laser konfokalmikroskopi analyse i et representativt snitt). Positiv uttrykk for CEACAM7 (A, rød) eller CEA (B, grønn) i membranen og cytoplasma av kreftceller (røde). C, Sammenslåtte bilde uten kjernefysiske farging; co-uttrykk for CEACAM7 og CEA er observert (gul). D, Sammenslåtte bilde med kjerne farget av DAPI (blå). (200X).
Korrelasjonen av CEACAM7 og CEA uttrykk med clinicopathological funksjoner i magekreft
Forholdet mellom CEACAM7 og CEA uttrykk og ulike clinicopathological funksjoner i mage karsinom er oppsummert i tabell 1. CEACAM7 ble oftere uttrykt i dårlig differensierte svulster enn i godt og moderat differensierte mage karsinom (41,3% vs. 20,0%, p = 0,006). CEACAM7 positivitet var signifikant høyere i diffust-type gastriske karsinomer enn i intestinal-type gastriske karsinomer, (39,7% vs. 22,2%, p = 0,023). CEA uttrykk signifikant korrelert med lymfeknutemetastase (P = 0,031) .table en korrelasjon av CEACAM 7 og CEA uttrykk med clinicopathological karakteristikker av magekreft.
variabler
CEACAM 7
P-verdi
CEA
P-verdi

Negative
(n = 100)
Positive product: (n = 45)

Negativ product: (n = 81)
Positive product: (n = 64)

Kjønn
Male
74(67.3%)
36(32.7%)
0.437
58(52.7%)
52(47.3%)
0.178
Female
26(74.3%)
9 (25,7%)
23 (65,7%)
12 (34,3%)
Alder (år)
(gjennomsnitt ± SD)
59,8 ± 10,4
58,1 ± 13,3
0,608
60,3 ± 9,4
58,9 ± 12,9
0,512
plassering av svulst
Øvre
12 (60,0%)
8 (40,0%)
0,601
9 (45,0%)
11 (55,0%)
0,544
Middle
49 (69,0%)
22 (31,0%)
40 (56,3%)
31 ( 43,7%)
Nedre
39 (72,2%)
15 (27,8%)
32 (59,3%)
22 (40,7%)
Histologi †
Vel og Moderate
56(80.0%)
14(20.0%)
0.006
43(61.4%)
27(38.6%)
0.741
Undifferentiated
44(58.7%)
31(41.3%)
38 (50,7%)
37 (49,3%)
Lauren klassifikasjon
Intestinal
56(77.8%)
16(22.2%)
0.023
39(54.2%)
33(45.8%)
0.683
Diffuse
44(60.3%)
29(39.7%)
42 (57,5%)
31 (42,5%)
Dybde svulst
T1-T2
28 (75,7%)
9 (24,3%)
0,307
20 ( 54,1%)
17 (45,9%)
0,797
T3-T4
72 (66,7%)
36 (33,3%)
61 (56,5%)
47 ( 43,5%)
Node metastase
Negative
59(72.8%)
22(27.2%)
0.257
37(67.3%)
18(32.7%)
0.031
Positive
41(64.1%)
23(35.9%)
44 (48,9%)
46 (51,1%)
Lymphatic invasjon
Negative
44(75.9%)
14(24.1%)
0.143
35(60.3%)
23(39.7%)
0.375
Positive
56(64.4%)
31(35.6%)
46 (52,9%)
41 (47,1%)
venøs invasjon
Negative
52(70.3%)
22(29.7%)
0.729
43(58.1%)
31(41.9%)
0.578
Positive
48(67.6%)
23(32.4%)
38 (53,5%)
33 (46,5%)
Tumor Stage
I- II
40 (62,5%)
24 (37,5%)
0,135
34 (53,1 %)
30 (46,9%)
0,555
III- IV
60 (74,1%)
21 (25,9%)
47 (58,0%)
34 (42,0 %)
MERK: Pearsons X2 testen ble gjort for å få P-verdi, bortsett fra at middelalderen ble sammenlignet med Student-T test. † Vel = godt differensiert karsinom; moderat = moderat differensiert karsinom; udifferensiert = dårlig differensiert karsinom, signetring cellekreft, eller mucinous carcinoma.
Dynamisk uttrykk for CEACAM7 og CEA i normal slimhinne og forstadier til kreft
Resultatene av CEACAM7 og CEA uttrykk i normal slimhinne og forstadier til kreft ble oppsummert i tabell 2. Positivitet for CEACAM7 uttrykk ble funnet i kronisk atrofisk gastritt (12%, 6/50), lavgradig GIN (29,1%, 16/55), og høyverdig GIN (28,9%; 13/45). CEACAM7 uttrykk ble ikke funnet i normal slimhinne (0/50). Positivitet for CEACAM7 uttrykk i lav karakter gin var betydelig høyere enn for kronisk atrofisk gastritt (P = 0,032), og CEACAM7 ble oftere uttrykt i atrofisk kronisk gastritt enn i normal mageslimhinnen (P = 0,012), men det var ingen signifikant forskjell i CEACAM7 uttrykk mellom lav grad av gIN og høyverdig gIN (P = 0,982). CEA positivitet ble funnet i normal slimhinne (6%, 3/50), kronisk atrofisk gastritt (8%, 4/50), lavgradig GIN (57,1%, 13/55), og høyverdig GIN (60%; 20/45). CEA positivitet for lav grad av GIN var signifikant høyere enn for kronisk atrofisk gastritt (P = 0,030), men var lavere enn det for høy grad Gin (P = 0,028). Det var ingen signifikant forskjell i CEA positivitet mellom normal slimhinne og kronisk atrofisk gastritt (P = 0,500). CEACAM7 ekspresjon ble lokalisert til den luminale overflate av kronisk atrofisk gastritt og gin (figur 3C, E, og 3G), ble det ikke immunoreaksjon detektert i normal slimhinne (figur 3A). CEA var lokalisert på den luminale overflaten til normal slimhinne, kronisk atrofisk gastritt, lav grad av GIN, og høy grad av GIN (figur 3B, D, F, og 3H), mens både CEA og CEACAM7 ekspresjon ble lokalisert til hele overflaten av mage kreftceller (figur 3i og 3J) Tabell 2 Sammenheng mellom CEACAM7 og CEA uttrykk med ulike mage vev
vev <.no> N
CEACAM7


CEA


negativ
Positiv
P-verdi *
negativ
Positiv
P-verdi *
Normal slimhinnen
50
50 (100%)
0 (0%)
0,0121
47 (94%)
3 (6%)
NS4
Kronisk atrofisk gastritt
50
44 (88,0%)
6 (12,0%)
0,0322
46 (92%)
4 (8%)
0,0305
lav grad GIN
55
39 (70,9%)
16 (29,1%)
NS3
42 (76,4%)
13 (23,6%)
0,0286
Høy klasse GIN
45
32 (71,1%)
13 (28,9%)
25 (55,6%)
20 (44,4%) product: * χ2 test. N-antall tilfeller, gin-mage intraepitelial neoplasi. NS-ingen betydning (P > 0,05). 1 Sammenlignet med normal slimhinne, CEACAM7 positivitet var signifikant høyere i kronisk atrofisk gastritt (P = 0,012); 2 sammenlignet med kronisk atrofisk gastritt, ble CEACAM7 oftere uttrykt i Lav grad GIN (P = 0,032); 3There var ingen signifikant forskjell på CEACAM7 uttrykk mellom Lav grad GIN og høy grad av GIN (P = 0,982); 4There var ingen signifikant forskjell fra CEA uttrykk mellom normal slimhinne og kronisk atrofisk gastritt (P = 0,500); 5Compared med kronisk atrofisk gastritt, ble CEA oftere uttrykt i Low-grade GIN (P = 0,030); 6 Sammenlignet med Lav grad GIN, ble CEA oftere uttrykt i høy grad GIN (P = 0,028).
Figur 3 forskjellige uttrykk mønstre av CEACAM7 og CEA i mage ikke-neoplastiske lesjoner og mage karsinom. Påfølgende snitt ble anvendt for analyse. Ingen immunoreaksjon for CEACAM7 ble detektert i normal slimhinne (A). CEACAM7 ble lokalisert til den apikale overflate av kronisk atrofisk gastritt (C), lav grad GIN (E) og høy grad GIN (G). CEA var lokalisert på den apikale luminale overflaten til normal slimhinne (B), kronisk atrofisk gastritt (D), lavgradig GIN (F), og høy grad av GIN (H). Både CEACAM7 (I) og CEA (J) ble lokalisert på hele overflaten av magekreftceller. (DAB som kromogen, kontra med Harris hematoxylin, 200X).
Survival Analysis
Ett år og tre-års overlevelse var 92,0% og 54,1%, henholdsvis for CEACAM7 og CEA dobbel-negative pasienter, 98,3% og 45,1%, henholdsvis, for CEACAM 7 og CEA enkelt-positive (enten positiv eller CEACAM7 CEA-positive pasienter), og 64,0% og 8,5% for CEACAM7 og CEA dobbel-positive pasienter. Det ble ikke observert signifikant forskjell mellom overlevelsesraten av dobbelt-negative og dobbel-positive pasienter (figur 4, p = 0,001). Men ingen signifikant forskjell ble funnet mellom dobbel-negative og enkelt-positive pasienter (figur 4, P = 0,391). Multivariat analyse viste at dobbelt-positivitet for CEACAM7 og CEA uttrykket (P = 0,004) og tumorstadium (P = 0,001), ble faktorer uavhengig assosiert med dårligere prognose pasient (tabell 3). Figur 4 Kaplan-Meier kurver for postoperativ overlevelse. Median overlevelsestid for pasienter med CEACAM7 og CEA dobbel-positivitet var kortere enn den til pasienter med dobbelt-negativitet (log-rank-test: p = 0,001). Men, det var ingen signifikant forskjell mellom median overlevelse av pasienter med single-positivitet og dobbel-negativitet (P = 0,391)
Tabell 3 multivariabel analyse. Basert på Cox proporsjonal farer modell
Variabel
Hazard Ratio (95%
konfidensintervall)
P-verdi
Tumor Stage III, IV vs I, II
2.240 ( 1,501 til 3,343)
0,001
CEACAM7 (+) CEA (+) vs CEACAM7 (-) CEA (-)
1,545 (1,153 til 2,069)
0,004
diskusjon
CEA er en av de mest nyttige tumor markører for kreft [24], og dens uttrykk ble funnet å være korrelert med clinicopathological funksjoner, for eksempel venøs engasjement, større diameter, og avanserte stadier av kolorektal karsinom [25, 26]. I tykktarmskreft, er CEA oppregulert, men CEACAM7 ble rapportert å være nedregulert [11], er det interessant at de ble begge oppregulert i magekreft, og co-uttrykt i de fleste vev. som tyder på at CEACAM7 kan spille ulike roller i ulike kreftformer. Som CEACAM7 uttrykk ble funnet å være sterkt korrelert med CEA uttrykk i magekreft i denne studien, Vi sjekket sin sammenheng med ulike clinicopathological funksjoner, og funnet ut at CEACAM7 uttrykk var hyppigere i dårlig differensierte mage karsinom enn i godt og moderat differensierte karsinomer (P = 0,006), og ble også korrelert med Lauren klassifikasjon (P = 0,023). Det har blitt rapportert at den overveiende histologiske type kan endres fra den differensierte til udifferensiert type som tumorene fremgang [6], Ohkura, et al [17] har også rapportert at histologiske diversitets øker etter hvert som gastriske karsinomer vokse eller invaderer submucosa. Således hypotese vi at CEACAM7 kan fremme aggressivitet og progresjon av gastrisk karsinom via reguleringstumorcelledifferensiering, og dette må videre undersøkelser.
Som intestinal-type cancer antas å bli innledet av et forstadier stadium karakterisert ved de følgende trinn atrofisk gastritt, intestinal metaplasi, gin, og intramucosal karsinom, vil det være av stor betydning for å klargjøre den dynamiske uttrykk for CEACAM7 og CEA i normal mageslimhinnen, kronisk atrofisk gastritt, gin, og magekreft. Vi fant ut at, sammenlignet med mage normal slimhinne, ble CEACAM7 uttrykk betydelig økt i kronisk atrofisk gastritt og alle andre lesjoner, og CEA uttrykk ble betydelig økt i gin og magekreft. Disse resultatene indikerer at CEACAM7 kan spille en rolle i mave karsinogenese fra et tidlig stadium, spesielt kronisk atrofisk gastritt stadium. Videre kan CEA samarbeide med CEACAM7 på gin scenen. I overensstemmelse med våre resultater, CEA-transgene mus viste massivt forstørrede kolon omfattende et sammenhengende mosaikk av alvorlig hyperplasi, dysplasi, og taggete adenomatøs morfologi, noe som tyder på at oppregulering av CEA kan være en medvirkende skritt i kreft progresjon human [27]. Det ser ut til at opp-regulering av CEACAM7 eller CEA ekspresjonen kan være en tidlig molekylær hendelse i tumorgenese, og begge proteiner kunne anvendes som screening biomarkører i forstadier for å identifisere pasienter med en høy risiko for ondartet omdannelse. I motsetning til dette, redusert ekspresjon av CEACAM-7 er blitt vist å oppstå tidlig i kolorektal onkogenese, med redusert ekspresjon i adenomer, hyperplastiske polypper, og til og med avvikende krypt foci.11,13 Den kontrast ekspresjon av CEACAM7 i mage og kolorektal kreft medfører at dens funksjonen er kontekstavhengig.
Pasienter med fremskreden kreft ofte ønsker å vite hvor lenge de har igjen å leve [28], men leger ikke er trygg på å estimere prognose [29]. Derfor biomarkører for prognose er en potensiell verktøy for å hjelpe klinikere med pasientbehandling. I løpet av det siste tiåret, har et stort antall proteiner som er putatively viktig i kreftutvikling og kreft biologi blitt studert for deres prognostisk verdi i magekreft, men ingen har vist seg å være tilstrekkelig nyttig i klinisk prediksjon. Det er høyst usannsynlig at en enkelt protein markør vil gi sensitivitet og spesifisitet som kreves for prognose. Således, har lagt vekt forskjøvet til oppdagelsen av kombinasjoner av biomarkører som er direkte relatert til sykdomsprosesser [30]. I denne studien bare avansert tumor stadium og CEACAM7 og CEA dobbelt positivitet ble identifisert ved hjelp av Cox modell som uavhengige prognostiske prediktorer for overlevelse av pasienter med resectable magekreft, uavhengig av alder, kjønn, differensiering, patologisk TNM stadium, lymfe node metastase, lymfatisk og venøs invasjon av pasientene.
Konklusjoner
Så vidt vi vet, er dette den første komparative immunhistokjemiske studier av CEACAM7 og CEA uttrykk i magekreft og forstadier til kreft. De to proteinene ble co-uttrykt og samlokalisert i gastrisk karsinom. CEACAM7 ekspresjon ble funnet å være signifikant korrelert med differensiering av gastrisk karsinom. Ekspresjonen av CEACAM7 og CEA ble funnet å øke gradvis i løpet av utvikling av gastrisk karsinom. CEACAM7 og CEA dobbelt positivitet kan være en nyttig postoperativ prognostisk prediktor for pasienter med magekreft.
Erklæringer
Takk
Dette arbeidet ble støttet av National 973 Prosjekt of China (No.2010CB529300, 02, 05, 06) og Natural Science Foundation National of China (No 81030044).
Forfattere 'originale legges filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes originale innsendte filer for bilder. 12957_2011_914_MOESM1_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 1 12957_2011_914_MOESM2_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 2 12957_2011_914_MOESM3_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 3 12957_2011_914_MOESM4_ESM.pdf Forfatteroriginalfilen for figur 4 Konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer at de har ingen konkurrerende interesser.

• Er protonpumpehemmere førstevalget for akutt behandling av magesår? En metaanalyse av randomiserte kliniske trials
• Samtidig kompositt adrenal pheochromocytoma, flere mage stromal tumor og pseudohermaphrodism hos en pasient med von Recklinghausens disease