Association mellan Helicobacter pylori genotyper och svårighetsgraden av kronisk gastrit, magsår och gastrointestinala interleukin-8 nivåer: Bevis från en studie i USA East

sambandet mellan Helicobacter pylori
genotyper och svårighetsgraden av kronisk gastrit, magsår och gastrointestinala interleukin-8 nivåer: Bevis från en studie i Mellanöstern Bild Sammanfattning
bakgrund sälja The olika kliniska presentationer av Helicobacter pylori
(H. pylori
) infektion är mest sannolikt på grund av skillnader i virulensen av individuella stammar, som bestämmer dess förmåga att inducera produktion av interleukin-8 (IL-8) i magslemhinnan. Syftet med denna studie var att undersöka samband mellan cagA, vacA-
s1 och vacA-
s2 genotyper av H. pylori Mössor och svårighetsgraden av kronisk gastrit och förekomst av magsår (PUD), och korrelera dessa med IL-8-nivåer i magslemhinnan.
metoder
gastrointestinala biopsier erhölls från patienter under gastroskopi. Svårighetsgraden av kronisk gastrit dokumenterades med den uppdaterade Sydney systemet. H. pylori cagA
och Vaca
genotyper påvisades med PCR. . IL-8-nivåer i magslemhinnan mättes med ELISA
Resultat
H.pylori cagA
och /eller VacA
genotyper detekterades i 99 patienter (medelålder 38,4 till 12,9; 72 hanar ), varav 52,5% var positiva för cagA
, 44,4% för vacA
-s1 och 39,4% för vacA
-S2; och 70,7% av patienterna hade PUD. Svårighetsgraden av inflammation i magslemhinnan ökade med vacA
-s1 (p = 0,017) och minskade med vacA
-S2 (p = 0,025), medan cagA
hade något samband. Graden av neutrofila aktivitet förknippades inte med antingen cagA
eller vacA
-s1, medan vacA
-S2 var signifikant associerad med minskad neutrofil aktivitet (p = 0,027). PUD var signifikant ökad hos patienter med cagA
(p = 0,002) och vacA
-s1 (p = 0,031), och minskade de med vacA
-S2 (p = 0,011). Nivån av IL-8 var signifikant ökad hos patienter med cagA
(p = 0,011) och vacA
-s1 (p = 0,024), och lägre med vacA
-S2 (p = 0,004). Högre nivåer av IL-8 hittades också i patienter med en allvarligare kronisk inflammation (p = 0,001), neutrofil aktivitet (p = 0,007) och de med PUD (p = 0,001).
Slutsatser
Närvaro av vacA
-s1 genotyp av H. pylori
är associerad med mer allvarlig kronisk inflammation och högre nivåer av IL-8 i magslemhinnan, samt högre frekvens av PUD. Patienter med vacA
-S2 har mindre allvarlig gastrit, lägre nivåer av IL-8, samt lägre PUD. Närvaron av cagA
genotyp är inte förknippat med svårighetsgraden av gastrit eller IL-8 induktion i magslemhinnan. Föreningen av cagA hotell med PUD kan vara en återspegling av sin närvaro med vacA
-s1 genotyp.
Nyckelord
Helicobacter pylori cagA vacA-s1 vacA-s2 gastrit Interleukin-8 Magsår Bakgrund
Helicobacter (H. pylori
) pylori
koloniserar slemhinnan i den mänskliga magen och upprättar en långvarig infektion [1]. Det leder till utveckling av kronisk gastrit, magsår (PUD), mucosal associerade lymfoid vävnad (MALT) lymfom och magcancer [2], [3]. Omfattningen och svårighetsgraden av dessa föreningar beror på flera faktorer, såsom bakterie virulensfaktorer, ålder värd, genetisk känslighet, immunsvar och miljöfaktorer [4-6].
De två viktigaste virulens markörer för H. pylori
är cytotoxinet associerad A (cagA
) och vakuoliserande cytotoxin A (VacA
) gener [6], [7]. Den cagA
genen inte förekommer i varje H. pylori
stam, men är associerad med mer allvarliga kliniska resultat som mer allvarlig inflammation i magslemhinnan, liksom högre förekomst av PUD och magcancer [8- 10]. Vaca
genen är närvarande i alla H. pylori
stammar och är associerad med PUD [11]. Vaca
genen innehåller minst tre variabla regioner, signalen (s) region, mellan (i) region och mitten (m) region. S-regionen existerar som S1 och S2 Typer [12], [13]. Vaca
-s1 stammar i samband med allvarligare gastric inflammation och PUD oberoende av cagA
medan VacA
-S2 stammar är förknippade med lägre sår förekomst och mindre allvarlig inflammation [14].
H . pylori
infektion resulterar i rekrytering av neutrofiler, lymfocyter och makrofager in i magslemhinnan genom induktion av flera cytokiner såsom TNF-a ?, IL-6 och IL-8 [15-17]. IL-8 är en viktig mediator i immunpatogenes av kronisk gastrit orsakas av H. pylori
[16]. Det har visats att cagA
och VacA
-S1 positiva stammar av H. pylori
inducera produktion av IL-8 i magslemhinnan, både in vivo och in vitro [16], [18], [19]. Vaca
-S2 gen är inte förknippat med IL-8 induktion [18]. Dessutom har ett samband mellan de mukosala nivåer av IL-8 och svårighetsgraden av gastrit och närvaro av PUD också rapporterats [19]. De flesta studier av samband mellan genotyper av H. pylori
och kronisk gastrit, magsår och IL-8 nivåer har genomförts i västra befolkningar, och ingen tidigare studie har undersökt dessa föreningar i Mellanöstern. Dessutom har de flesta av publicerade studier endast undersökt antingen en enda eller några av dessa föreningar.
Syftet med denna studie var att fastställa sambandet mellan förekomsten av cagA
, vacA
-s1 och vacA
-S2 genotyper i H. pylori Mössor och svårighetsgraden av gastrit och PUD, och att korrelera dessa med halterna av IL-8 i en grupp av patienter från Mellanöstern. Vi har också försökt att gå igenom alla dessa sammanhängande föreningar i samma grupp av patienter för att validera den biologiska rimligheten att de bakteriella virulensfaktorer leder till induktion av cytokin IL-8, vilket i sin tur leder till mer allvarlig inflammation eller utveckling av PUD .
Resultat
gastroskopi och gastriska biopsier utfördes på 120 vuxna patienter. H. pylori
sågs på histopatologi i 98 av dessa patienter, varav alla var positiva för vacA
cagA Mössor och /eller. En patient hade vacA
PCR men var inte positivt för H. pylori
histopatologi ingick också i analysen. Därför var ytterligare analys utförd i dessa 99 patienter (72,7% män, 27,3% kvinnor, medelålder 38,4 år) (tabell 1). En historia av PUD var närvarande i 27,3% av patienterna, och den vanligaste indikationen för remiss var dyspepsi (84,8%). Tabell 1 Socio demografiska och kliniska egenskaperna hos 99 patienter med H. pylori-infektion i Kuwait
Karaktäristisk

ålder vid diagnos (år) katalog Medelvärde ± SD
38,4 ± 12,9
Median
35,5
Range
18-75
kön
n
(%) Review Man
72
(72,7) Review Kvinna
27
(27,3) Review nationalitet
Kuwait
52
(52,5) Review Bangladesh
15
(15,2) Review Egypten
8
(8,1) Review stats mindre araber
5
( 5,1) Review Syrien
5
(5,1) Review Othera
14
(14,1) Review tidigare historia av magsår
27
(27,3)
Tidigare historia av H. pylori
infektion 4
(4,0) Review historia cigarettrökning
38
(38,4) Review historia alkoholkonsumtion
6
(6,1) Review Indikation för gastroskopi
Dyspepsia
84
(84,8) Review Övre gastrointestinal blödning
6
(6,1) Review halsbränna
5
(5,1) Review Anemi 2
(2,0) Review Ihållande kräkningar 2
(2,0) Review aIndia (4), Iran (2), Pakistan ( 2), Saudiarabien (2), Afghanistan (1), Jordanien (1), Somalia (1), Jemen (1).
vanligaste abnormitet sett på endoskopi var PUD (70,7%) (tabell 2). Endoskopisk tecken på slemhinneinflammation i magsäcken och tolvfingertarmen observerades hos 57,6% och 29,3% av patienterna. Kronisk inflammation var "Inga-Mild" i 22,2% av patienterna, och "måttlig-märkta" i 77,8%. Neutrofil aktivitet var "Inga-Mild" i 60,6%, och "måttlig-märkta" i 39,4% av patients.Table 2 Resultat av endoskopisk, histologiska, H. pylori genotyp, och IL-8 nivå hos patienter med H. pylori-infektion i Kuwait
Karakteristiskt
n
%
gastroskopi findingsa
Duodenalsår
61
(61,6)
gastrit
57
(57,6) Review Duodenit
29
(29,3) Review magsår
13
(13,1) Review Esofagit
10
(10,1) Review Magcancer 1
(1,0) katalog Histologisk findingsb
H. pylori
närvarande
98
(99,0) Review Inga -Mild
44
(44,4) Review Medel-märkta
54
(54,5) Review Kronisk inflammation
ingen-Mild
22
(22,2)
Medel-märkta
77
(77,8) Review Neutrofil aktivitet
ingen-Mild
60
(60,6) Review Medel-märkta
39
( 39,4) Review Glandulär atrofi
ingen-Mild
65
(65,7) Review Medel-märkta
34
(34,3) katalog Intestinal metaplasi
ingen-Mild
94
(94,9) Review Medel-märkta
5
(5,1) Review H. pylori
genotyp
cagA
52
(52,5) katalog vacA
-s1
44
(44,4) katalog vacA
-S2
39
(39,4) Review vacA
-s1? +? s2
10
(10,1) Review cagA
? +? vacA
-s1 31
(31,3) Review cagA
+ vacA
-S2
8
(8,1) Review cagA
+ vacA
? - s1? +? s2
7
(7,1) Review IL-8 Nivå (pg /mg protein) Review Medelvärde ± SD 1891,5 ± 1526,8
Median (IQR)
1567,4 (1566,3) Review asome patienter hade mer än ett konstaterande på endoskopi.
bAccording till Uppdaterad Sydney systemet [40].
närvaron av cagA
, vacA
-s1 och vacA
-S2 gener hittades i 52,5%, 44,4% och 39,4% av patienterna, medan 10,1% var positiva för både vacA
-s1 vacA-
s2. Den cagA
genen hittades i kombination med vacA
-s1 (cagA
? +? VacA
-s1) i 31,3% av patienterna, med vacA
-S2 (cagA
? +? vacA
-S2) i 8,1% och med både vacA
-s1 och vacA
-S2 (cagA
? +? vacA
-s1? +? s2) i 7,1% av patienterna. IL-8 nivåer fanns i 77 patienter med ett medianvärde på 1567,4 (IQR 1566,3) pg /mg protein.
Tabell 3 visar sambandet mellan H. pylori
genotyper och svårighetsgraden av kronisk inflammation, neutrofil aktivitet och närvaro av PUD. Patienter som var infekterade med H. pylori
innehåller både cagA Mössor och Vaca
-s1 gener var mest benägna att ha "Medel-märkt" graden av kronisk inflammation (OR = 6,7, 95% CI?: 1,4-31,4; p = 0,016)?. Patienter med vacA
-s1 gen ensam hade också en betydligt mer "måttlig-märkt" graden av kronisk inflammation (OR = 3,9, 95% CI:? 1,2-12,0, p = 0,017), medan de med vacA
-S2 hade signifikant mindre kronisk inflammation (OR = 0,3, 95% CI: 0,1 till 0,8; p = 0,025?). Närvaron av cagA
eller Vaca
-s1 gener antingen självständigt eller tillsammans inte påverkar svårighetsgraden av neutrofila aktivitet i mag biopsier. Patienter med vacA
-S2 gen hade en betydligt mindre "Medel-märkt" graden av neutrofil aktivitet (OR = 0,3, 95% CI: 0,1 till 0,8; p = 0,027?). Andelen patienter med PUD var störst i de med cagA
genen (OR = 4,8, 95% CI:? 1,8-12,5, p = 0,002), följt av de med Vaca
-s1 gen ( OR = 2,8, 95% CI:? 1,1-7,4, p = 0,031), medan de med vacA
-S2 hade den lägsta andelen PUD (OR = 0,3, 95% CI: 0,1 till 0,7; p = ? 0,011). Närvaron av både cagA Mössor och vacA
-s1 genen ökade risken för PUD mer än närvaron av dessa genotyper individuellt (OR = 6,3, 95% CI: 1,6 till 23,4; p = 0,006?) .table 3 associering mellan H. pylori genotyper och kronisk inflammation, neutrofila aktivitet och ulcussjukdom
H. pylorigenotypea (n)
kronisk inflammationb
neutrofila activityb
magsår sjukdom
ingen-Mild
Medel-märkta
OR (95% cI) c
p-värde
ingen-Mild
Medel-märkta
OR (95% cI) c
p-värde
Saknas
Present

OR (95% cI) c
p-värde
(n 22)
(n 77)
(n 60) Review
(n 39)
(n 29)
(n 70)
n (%)
n (%) Review
n (%)
n (%)
n (%)
n (%)

cagA
Positiv (52) Review 8 (15,4) Review 44 (84,6) Review 2,4 (0,9-6,7) Review 0,074
29 (55,8) Review 23 (44,2) Review 1,5 (0,6-3,4) Review 0,325
8 (15,4) Review 44 (84,6) Review 4,8 (1,8-12,5)
0,002 *
Negativ (47) Review 14 (29,8) Review 33 (70,2) Review Referens
31 (66,0) Review 16 (34,0) Review Referens
21 (44,7) Review 26 (55,3) Review Referens
vacA
-s1
Positiv (44) Review 5 (11,4) Review 39 (88,6) Review 3,9 ( 1,2-12,0) katalog 0,017 *
22 (50,0) Review 22 (50,0) Review 2,2 (0,9-5,2) Review 0,057
8 (18,2) Review 36 (81,8)
2,8 (1,1-7,4) katalog 0,031 *
Negativ (55) Review 17 (30,9) Review 38 (69,1) Review Referens
38 (69,1) Review 17 (30,9) Review Referens
21 (38,2) Review 34 (61,8) Review Referens
vacA
-S2
Positiv (39) Review 13 (33,3)
26 (66,7) Review 0,3 (0,1-0,8) Review 0,025 *
29 (74,4) Review 10 (25,6) Review 0,3 (0,1-0,8) Review 0,027 *
17 (43,6) Review 22 (56,4) Review 0,3 (0,1-0,7) katalog 0,011 *
Negativ (60) Review 9 (15,0) Review 51 (85,0) Review Referens
31 (51,7) Review 29 (48,3) katalog Referens
12 (20,0) Review 48 (80,0) Review Referens
vacA
-s1 +? S2 Positiv (10) Review 3 (30,0) Review 7 (70,0) Review 0,5 (0,1-2,2) Review 0,445
8 (80,0) Review 2 (20,0) Review 0,3 (0,0-1,7) Review 0,191
2 (20,0) Review 8 (80,0) Review 1,8 (0,3-9,1) Review 0,478
Negativ (89) Review 19 (21,3 ) Review 70 (78,7) Review Referens
52 (58,4) Review 37 (41,6) Review Referens
27 (30,3) Review 62 (69,7) Review Referens
cagA
? +? vacA
-s1
Positiv (31) Review 2 (6,5) Review 29 (93,5) Review 6,7 (1,4-31,4) Review 0,016 *
18 (58,1) Review 13 (41,9) Review 0,9 (0,9-1,0) Review 0,737
3 (9,7) Review 28 (90,3) Review 6,3 (1,6-23,4)
0,006 *
Negativ (68) Review 20 (20,9) Review 48 (70,6) Review Referens
42 (61,8) Review 26 (38,2) Review Referens
26 (38,2) Review 42 (61,8) Review Referens
cagA
? +? vacA
-S2
Positiv (8) Review 3 (37,5) Review 5 ( 62,5) Review 0,4 (0,1-2,2) Review 0,337
5 (62,5) Review 3 (37,5) Review 0,9 (0,2-4,3) Review 0,959
2 (25,0)
6 (75,0) Review 1,2 (0,2-6,5) Review 0.810
Negativ (91) Review 19 (20,9) Review 72 (79,1) Review Referens
55 (60,4 ) Review 36 (39,6) Review Referens
27 (29,7) Review 64 (70,3) Review Referens
cagA
? +? vacA
-s1? +? s2
Positiv (7) Review 2 (28,6) Review 5 (71,4) Review 0,9 (0,9-1,0) Review 0,255
5 (71,4) Review 2 (39,4)
0,5 (0,1-3,2) Review 0,537
en (14,3) Review 6 (85,7) Review 2,7 (0,3-24,5) Review 0,359
Negativ (92) Review 20 ( 21,7) Review 72 (78,3) Review Referens
55 (59,8) Review 37 (40,2) Review Referens
28 (30,4) Review 64 (69,6) Review Referens
Aall patienter var positiva för antingen cagA
vacA
eller båda.
bAccording till Uppdaterad Sydney-systemet [40].
bur och köns justerade oddskvoten,.
* Statistiskt signifikant.
Tabell 4 visar sambandet mellan nivån av IL-8 i magslemhinnan och H. pylori
genotyper och histologiska funktioner och PUD. Medianvärdet för IL-8 var signifikant högre hos patienter infekterade med H. pylori hotell med cagA
(p = 0,011?) Och Vaca
-s1 gener (p = 0,011 och 0,024 respektive?); och betydligt lägre hos dem med vacA
-S2 gen (p = 0,004) (Figur 1). De högsta nivåerna av IL-8 konstaterades hos patienter som var positiva för både cagA Mössor och vacA
-s1 (Figur 2). Korrelation av gastrointestinala IL-8 nivåer med svårighetsgraden av kronisk inflammation visade att patienter som hade "måttlig-märkt" kronisk inflammation hade signifikant högre median IL-8 nivå jämfört med dem som hade "Inga-Mild" inflammation (p = 0,001 ) (Figur 3). Patienter med "måttlig-märkt" neutrofila aktivitet på gastric biopsi hade också signifikant högre median IL-8 nivåer jämfört med dem som hade "Inga-Mild" aktivitet (p = 0,007). Median nivåer av IL-8 var också signifikant förhöjd i magsäckens biopsier från patienter med PUD jämfört med dem som inte har sår (p = 0,001). Det fanns ingen signifikant skillnad i densiteten av H. pylori
eller graden av glandulär atrofi eller intestinal metaplasi med IL-8-nivå i den gastriska biopsies.Table 4 Samband mellan interleukin-8 och H. pylori genotyper, kronisk inflammation, neutrofila aktivitet och ulcussjukdom
H. pylorigenotypea
interleukin-8 levelb
p-värdeC
Median (IQR)
cagA
vid Frånvarande
1090,3 (1310,8) katalog 0,011 *
Present
1885,7 (1281,6) katalog vacA
-s1
Frånvarande
1245,8 (1550,2)
0,024 *
Present
1840,0 (1098,6) katalog vacA
-S2
Frånvarande
1840,0 (1597,5) Review 0,004 *
Present
965,6 (1205,1 ) Review vacA
-s1? +? s2
Frånvarande
1541,1 (1566,3) Review 0,818
Presentera
1711,8 (1928,7) Review cagA
? +? vacA
-s1
Frånvarande
1311,8 (1814,9) Review 0,021 *
Present
1901,7 (915,3) Review cagA
? +? vacA
-S2
Frånvarande
1577,5 (1548,6) Review 0,713
Presentera
1331,7
cagA (?) Review? +? +? s2
Frånvarande vacA
s1
1541,1 (1625,9) Review 0,807
Presentera
1711,8 (1803,6) katalog Histologisk findingsd
Kronisk inflammation
ingen-Mild
689,2 (1420,6) Review 0,001 *
Medel-märkta
1835,7 (1345,3) Review Neutrofil aktivitet
ingen-Mild
1449,0 (1342,1) katalog 0,007 *
Medel-märkta
1917,8 (2703,6) Review magsår
Frånvarande
919,3 (1153,3)
0,001 *
Present
1890,6 (1638,4) Review Aall patienter var positiva för antingen cagA
, vacA
eller båda.
bpg /mg protein.
cMann-Whitney U
test.
dAccording till Uppdaterad Sydney-systemet [40].
* Statistiskt signifikant
Figur 1 Nivåer av interleukin-8 i magslemhinnan hos patienter med H. pylori med och utan genotyper cagA, vacA -s1 och vacA -S2. Dessa uttrycks som lådagram. Ändarna av stängerna indikerar den 25: e och 75: e percentilen. Den 50: e percentilen indikeras med en linje, och den 10: e och 90: e percentilerna visas med felstaplar. P-värden beräknades med användning av Mann-Whitney U
test. * Indikerar att p-värdet är statistiskt säkerställd.
Figur 2 nivåer av interleukin-8 i magslemhinnan hos patienter med H. pylori med och utan genotyper cagA? +? VacA -s1, cagA +? VacA -S2? och cagA? +? vacA -s1? +? vacA -S2. Dessa uttrycks som lådagram. Ändarna av stängerna indikerar den 25: e och 75: e percentilen. Den 50: e percentilen indikeras med en linje, och den 10: e och 90: e percentilerna visas med felstaplar. P-värden beräknades med användning av Mann-Whitney U
test. * Indikerar att p-värdet är statistiskt säkerställd.
Figur 3 nivåer av interleukin-8 i magslemhinnan hos patienter med H. pylori och svårighetsgraden av kronisk inflammation, neutrofila aktivitet och magsår. Dessa uttrycks som lådagram. Ändarna av stängerna indikerar den 25: e och 75: e percentilen. Den 50: e percentilen indikeras med en linje, och den 10: e och 90: e percentilerna visas med felstaplar. P-värden beräknades med användning av Mann-Whitney U
test. * Indikerar att p-värdet är statistiskt säkerställd. Review, en totalt 58 (75,3%) patienter som hade "måttlig-märkta" kronisk inflammation i magslemhinnan hade PUD, jämfört med 12 (54,5%) med "ingen- mild ", medan 31 (79,5%) patienter med" måttlig-märkt "neutrofila aktivitet hade PUD, jämfört med 39 (65,0%) av dem med" Inga-mild "aktivitet. Men dessa skillnader var inte statistiskt signifikanta. Det fanns inte heller något samband mellan förekomsten av PUD och svårighetsgraden av körtel atrofi, intestinal metaplasi eller H. pylori
densitet på gastriska biopsier.
Diskussion
Såvitt vi vet är detta den första studien att undersöka föreningen mellan förekomsten av cagA
, vacA
-s1 och Vaca
-S2 genotyper i H. pylori Köpa och svårighetsgraden av kronisk gastrit och PUD i en grupp av patienter från Mellanöstern. Vi har också visat sambandet av dessa faktorer med de nivåer av IL-8 i magslemhinnan validera den biologiska rimligheten att dessa bakteriella virulensfaktorer leda till induktion av cytokinet IL-8, vilket i sin tur leder till mer allvarlig inflammation och /eller utveckling av PUD. Review det verkar finnas en geografisk variation i sambandet mellan H. pylori
genotyper och gastric inflammatoriskt svar. Infektion med CagA
positiva stammar av H. pylori
i västvärlden har rapporterats orsaka allvarligare gastric inflammation jämfört med asiatiska länder, där resultaten har varit inkonsekvent [7], [20-24]. I vår studie både graden av kronisk inflammation och neutrofil aktivitet i magslemhinnan var allvarligare hos patienter som var infekterade med H. pylori
innehållande och Vaca
-s1 gener i cagA
. Närvaron av både cagA
och vacA
-s1 verkade ha en synergistisk roll för att öka svårighetsgraden av inflammationen i våra patienter. Å andra sidan, närvaron av vacA
-S2 verkade förbättras svårighetsgraden av kronisk inflammation samt neutrofil aktivitet oberoende av närvaron av cagA
, vacA
-s1 eller båda. Dessa resultat överensstämmer med tidigare publicerade studier där VacA
-S2 stammar befanns vara associerade med mindre inflammation [25]. Både cagA
och VacA
-S1 gener också oberoende associerat med en ökad risk för PUD, medan vacA
-S2 genen föreföll att ha en mindre effekt. Patienter som hade både cagA Mössor och Vaca
-s1 gen hade den högsta risken för PUD. Å andra sidan, närvaron av vacA
-S2 minskade risken för PUD, oavsett om det var närvarande ensamt eller med cagA
, vacA
-s1, eller båda. Dessa resultat liknar de som rapporterats från västländerna [20], [21], [24], trots att majoriteten av patienterna i vår studie var från Mellanöstern och den indiska subkontinenten [26]. En färsk studie utförd att bestämma genetiska tillhörighet av H. pylori
isolat från etniska araber i Kuwait fann att dessa stammar är nära besläktade med indoeuropeiska grupp av organismen och tydligt skiljer sig från öst asiatiska stammar [27]. Detta kan vara anledningen till att föreningen för cagA
verkar vacA
-s1 och vacA
-S2 och gastrit och PUD i våra patienter att vara liknande den som rapporterats från västländerna.
pro-inflammatoriska cytokinen IL-8 spelar en viktig roll vid regleringen av mukosalt neutrofil migration och aktivering. Våra resultat visar att nivån av IL-8 i magslemhinnan ökades i närvaro av cagA
och VacA
-S1 genotyper av H.pylori
och de högsta nivåerna observerades i patienter som var positiva med avseende båda dessa gener. Närvaron av vacA
-S2 var associerat med lägre nivåer av IL-8. Betydligt högre nivåer av IL-8 i magslemhinnan sågs också hos patienter som hade allvarligare grad av kronisk inflammation och neutrofil aktivitet i mag biopsier, liksom de som hade PUD. Dessa resultat överensstämmer med tidigare rapporter där nivåerna av gastrointestinala IL-8 nivåer har satts i samband med förekomsten av virulens H. pylori
gener såsom cagA Mössor och is A [28], [29]. Men vissa forskare rapporterade ingen skillnad i IL-8 nivåer hos patienter med H. pylori
infektioner med och utan PUD [30], medan andra har högre nivåer hos patienter med PUD då de endast gastrit [31]. Denna inkonsekvens i resultaten av IL-8-produktion kan bero på skillnader i de metoder som används för att mäta nivån av cytokin i magslemhinnan. Vi har använt en ELISA baserad teknik, som kan vara en känsligare metod för cytokin kvantifiering.
Med hänvisning till andra faktorer, fann vi ingen skillnad i svårighetsgrad av gastrit, förekomst av PUD eller nivåer av IL-8 mellan patienter med eller utan historia av rökning eller alkoholkonsumtion. Närvaron av PUD var dock vanligare i denna grupp av patienter än vad som tidigare från Kuwait liksom på andra ställen [32] har rapporterats. De störande effekter av läkemedel minimerades genom att endast välja de patienter som inte hade varit på någon av de nämnda mediciner under minst 4 veckor före endoskopi. Flera andra H. pylori
faktorer såsom VacA
-S1 subtyper (S1A och S1B), VacA
mittområde subtyper (M1 och M2), ICEA och Dupa gener kan också påverka virulensen hos denna organism och dess effekter på magslemhinnan [33]. Men vår studie inte utformad för att bestämma dessa virulensfaktorer, och detta skulle kunna betraktas som en begränsning av denna rapport. Förutom bakteriella faktorer, värd genetik bidrar också till patogenesen av gastroduodenala sjukdomar [34], [35]. Dessutom har många cytokin gen polymorfismer visar olika risk i mag- och duodenalsårspatienter [36], [37].
Slutsatser
Denna studie som inkluderade patienter från Mellanöstern visar att förekomsten av H. pylori cagA
och Vaca
-s1 gener resulterar i induktion av högre nivåer av pro-inflammatoriska cytokinen IL-8 i magslemhinnan, vilket inte bara resulterar i en mer markerad intensitet av kronisk inflammation och neutrofil aktivitet i magslemhinnan utan också en högre förekomst av PUD. Närvaron av VacA
-S2 resulterar i lägre nivåer av IL-8, såväl som mindre allvarlig inflammation och mindre PUD. Dessutom närvaro av vacA
-S2 tycks minska virulens effekterna av cagA Mössor och /eller VacA
-S1 gener.
Patienter och metoder
Patienter och prover
Studien befolkning och metoden för biopsi samlingen har beskrivits tidigare [26], [32]. I korthet hänvisade 120 i följd, oselekterade vuxna patienter för gastroskopi inbjöds att delta i studien. Patienter med koagulationsavvikelser har tidigare gastro-duodenal operation uteslöts från studien. Patienter som hade tagit histamin typ 2-receptorantagonister, protonpumpshämmare, antibiotika, vismutsalter, acetylsalicylsyra eller icke-steroida antiinflammatoriska medel i de föregående fyra veckor uteslöts också. Förekomsten av cagA Mössor och Vaca
genotyper hos dessa patienter har tidigare rapporterats [26].
Övre gastrointestinal endoskopi utfördes på ett standardiserat sätt. Alla endoskop genomgick en rengöring och desinfektion process med en automatiserad diskdesinfektor före varje förfarande enligt riktlinjerna från European Society of Gastrointestinal Endoscopy [38]. För varje patient har fyra biopsier tagna från gastric antrum, inom 2 cm från pylorus, med hjälp av steriliserade biopsitänger
Två biopsiprover fixerades i formalin, bearbetas för att paraffin, snittades och färgades med H &. E och HPSS [39]. Alla biopsier undersöktes individuellt av en äldre gastrointestinal patolog som var blind för klinisk information om patienterna. En biopsi gjordes positivt för H. pylori
om organismer sågs på ljusmikroskop. Det uppdaterade Sydney-systemet användes för att göra mål tätheten av H. pylori Mössor och graden av kronisk inflammation, neutrofil aktivitet, körtel atrofi och intestinal metaplasi på biopsier [40]. Patienter som inte hade någon eller mild kronisk inflammation i magsäcks biopsi kombinerades i en grupp (None-Mild grupp), medan de med måttlig eller markant graden av inflammation ingick i den andra gruppen (Medel-Marked grupp). På samma sätt fick patienterna delas in i två grupper (dvs. Ingen mild och måttlig-märkta) för neutrofila aktivitet, liksom för intestinal metaplasi och körtel atrofi.
QIA "DNA Mini Kit (Qiagen, Hilden, Tyskland) användes för att extrahera DNA från de biopsier. Renheten av DNA bedömdes beräkna förhållandet mellan optisk densitet (OD) vid 260 till 280 nm och utbytet kvantifierades genom absorbans vid 260 nm.
PCR-amplifiering av mål-DNA
Tabell 5 visar de primrar som används i detta läsa på. Den cagA
F och CagA
R primers genererar ett fragment av 183 baspar (bp) för detektering av cagA
, medan primers VA1F och VA1XRA ge ett 176 bp stort fragment för vacA
-s1 och 203 bp för VacA
-S2 varianter [41], [42]. En pre-alikvoteras PCR Master Mix (Abgene, Surrey, UK) användes för PCR-amplifiering av mål-DNA. Den slutliga reaktionsvolymen var 50 L och innehöll 25pmol av varje primer och 50 ng DNA [43]. PCR utfördes efter förinkubation vid 94 ° C under 5 minuter, följt av 35 cykler vid 94 ° C, 50 ° C och 74 ° C under en minut vardera följt av en 5 minuter slutlig förlängningssteg vid 74 ° C. De amplifierade proverna analyserades genom elektrofores på 2% med hög upplösning agarosgel i Tris-acetat-EDTA (TAE) buffert, vilken därefter färgades med etidiumbromid vid 0,5 pg /ml [44]. Ultraviolett ljus användes för att visualisera banden av amplifierat DNA, som var därefter photographed.Table 5 Primrar som användes i PCR för amplifiering av cagA, vacA -s1 och VacA -S2 sekvenser
DNA-regionen amplifierade
Primer

primersekvens
PCR-produkt (BPA)
cagA
cagA
F
5? -TTGACCAACAACCACAAACCGAAG-3
183
cagA
R
5?-CTTCCCTTAATTGCGAGATTCC-3?
vacA
-s1
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
176
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
vacA
-s2
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
203
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
Ett p-värde på < 0,05 ansågs statistiskt signifikant.

• DNA-kopia antal profiler för magcancer prekursor skador
• Ultraljuds sax hjälp kan förkorta tiden konsolen i robot gastrektomi för magcancer tidig