Zveza med Helicobacter pylori genotipov in resnosti kronični gastritis, peptični ulkus in interlevkin-8 nivojev želodčni sluznici: Dokazi iz študije na Bližnjem vzhodu

Zveza med Helicobacter pylori
genotipov in resnosti kronični gastritis, peptični ulkus in interlevkin-8 nivojev želodčni sluznici: Dokazi iz študije, na Bližnjem vzhodu
Abstract
Ozadje
različnih kliničnih slik Helicobacter pylori
(H. pylori
) okužba najverjetneje zaradi razlik v virulence posameznih sevov, ki določa njeno sposobnost, da povzroči nastajanje interlevkin-8 (IL-8) v želodčni sluznici. Cilj te raziskave je bil preučiti povezavo med cagA, vacA-
s1 in vacA-
s2 genotipov H. pylori
in resnosti kroničnega gastritisa in prisotnosti peptičnega (PUD), in na povezati teh 8 IL-ravneh želodčne sluznice.
Metode
želodcu biopsije sluznice so bili pridobljeni iz bolnikov med esophagogastroduodenoscopy. Resnost kroničnega gastritisa bila dokumentirana s posodobljenim sistemom Sydney. H. pylori cagA
in Vaca
genotipov so odkrili s PCR. . V 8 IL-ravni v želodčne sluznice so bile izmerjene z ELISA
Rezultati
H. pylori cagA
in /ali Vaca
genotipov so odkrili pri 99 bolnikih (povprečna starost 38.4-12.9, 72 samcev ), od tega je bilo 52,5% pozitiven cagA
, 44,4% za vaca
-s1 in 39,4% za vaca
-s2; in 70.7% bolnikov je imelo PUD. Resnost vnetja v želodčne sluznice je povečal z Vaca
-s1 (p = 0,017) in se zmanjšuje z Vaca
-s2 (p = 0,025), medtem ko cagA
imela nobene povezave. Stopnja nevtrofilcev dejavnost ni bila povezana z nobeno cagA
ali Vaca
-s1, medtem ko je bil Vaca
-s2 bistveno povezana z zmanjšanim nevtrofilcev dejavnosti (p = 0,027). PUD je bila pri bolnikih z cagA
(p = 0,002) in Váca
-s1 (p = 0,031) znatno povečal, in se je v tistih z Vaca
-s2 (p = 0,011). Raven IL-8 je bil pri bolnikih z cagA
(p = 0,011) in Váca
-s1 (p = 0,024) znatno povečal, in manj s Vaca
-s2 (p = 0,004). Višje ravni IL-8 so našli tudi pri bolnikih s hujšo obliko kroničnega vnetja (p = 0,001), nevtrofilcev dejavnosti (p = 0,007), in tiste, ki imajo PUD (p = 0,001).
Sklepe
Prisotnost vaca
-s1 genotip H. pylori
je povezan s težjo kroničnega vnetja in višjo raven IL-8 v želodčni sluznici, kot tudi višjo frekvenco PUD. Bolniki z Vaca
-s2 imajo manj hudo gastritis, nižje ravni IL-8, in nižje stopnje PUD. Prisotnost cagA
genotipa ni povezana z resnostjo gastritisa ali IL-8 indukcije v želodčni sluznici. Združenje cagA
s PUD lahko odraz njegove prisotnosti z Vaca
-s1 genotip.
Ključne besede
Helicobacter pylori cagA Váca-S1 Váca-s2 gastritis interlevkin-8 peptični Ozadje razjeda bolezni
Helicobacter pylori
(H. pylori
) colonizes sluznico človeškega želodca in vzpostavlja dolgoročno okužbe [1]. To vodi k razvoju kroničnega gastritisa, peptičnega ulkusa (PUD),-sluznični povezan limfoidni tkivni (MALT) limfomi in gastrični karcinom [2] [3]. Obseg in resnost teh združenj je odvisna od več elementov, kot so bakterijske dejavnikov virulence, starost gostitelja, genetsko predispozicijo, imunski odziv in okoljskih dejavnikov [4-6].
Dve ključni virulence označevalcev H. pylori
sta citotoksin povezana A (cagA
) in vacuolating citotoksin A (Váca
) geni [6] [7]. V cagA
gen ni prisoten v vseh H. pylori
seva, vendar je povezano s hujšimi klinične rezultate kot bolj hudo vnetje želodčne sluznice, kot tudi večje razširjenosti PUD in rakom želodca [8- 10]. V Vaca
gen prisoten v vseh H. pylori
sevov in je povezana s PUD [11]. V Vaca
gen vsebuje vsaj tri variabilne regije, signal (-e) regijo, vmesna (i) regijo in srednja (m) regija. S-regija obstaja kot S1 in S2 vrst [12], [13]. V Vaca
-s1 sevi so povezani s hujšo želodčnega vnetja in PUD neodvisno cagA
pa Váca
-s2 sevi povezana z manjšo razjedo razširjenosti in manj hudo vnetje [14].
H . pylori
rezultate okužbe pri zaposlovanju nevtrofilcev, limfocitov in makrofagov v želodčne sluznice z indukcijo več citokinov, kot so TNF ?, IL-6 in IL-8 [15-17]. IL-8 je pomemben posrednik pri immunopathogenesis kroničnega gastritisa s H. pylori
[16] je povzročil. Dokazano je, da cagA
in Vaca
-s1 pozitivni sevi H. pylori
inducira produkcijo IL-8 v želodčni sluznici, in vivo in in vitro [16], [18], [19]. V Vaca
-s2 gen ni povezana z IL-8 indukcijo [18]. Poleg tega so poročali tudi povezava med stopnjami sluzničnih IL-8 in resnosti gastritis in prisotnosti PUD [19]. Večina raziskav o povezanosti med genotipi H. pylori
in kronični gastritis, peptični ulkus in ravni IL-8 so bile izvedene na Zahodnem prebivalstva, in ne Prejšnja študija je preučila te asociacije na Bližnjem vzhodu. Poleg tega je večina objavljenih študij samo obravnava, bodisi ena ali nekatere od teh organizacij.
Cilj te raziskave je bil ugotoviti povezavo med prisotnostjo cagA
, vaca
-s1 in Vaca
-s2 genotipi v H. pylori
in resnosti gastritis in PUD in povezati te z ravni IL-8 v skupini bolnikov z Bližnjega vzhoda. Prav tako smo poskušali preučiti vse te medsebojno povezane združenja v isti skupini bolnikov potrditi biološko verodostojnost, da so bakterijske virulence dejavniki vodijo do indukcije citokinov IL-8, ki se posredno tudi na hujše vnetje ali razvoj PUD .
Rezultati
Esophagogastroduodenoscopy in želodca biopsije so bile izvedene v 120 odraslih bolnikih. H. pylori
so opazili na histopatologijo v 98 od teh bolnikov, ki so vsi bili pozitivni za cagA
in /ali Vaca
. En bolnik je imel Váca
na PCR, vendar ni bil pozitiven na H. pylori
na histopatologijo je bila vključena tudi v analizo. Zato je nadaljnja analiza opravljena v teh 99 bolnikov (72,7% moških in 27,3% žensk, povprečna starost 38,4 let) (tabela 1). Zgodovina PUD je bil prisoten pri 27,3% bolnikov, in najpogostejša indikacija za napotitev je dispepsija (84,8%). Tabela 1 Socio-demografske in klinične značilnosti 99 bolnikih, okuženih s H. pylori v Kuvajt
Tipičen

Starost ob diagnozi (let)
povprečje ± SD
38,4 ± 12,9
Mediana
35,5
Območje
18-75
Spol
n
(%)
Male
72
(72,7)
ženska
27
(27,3)
Državljanstvo
Kuvajt
52
(52,5)
Bangladesh
15
(15,2)
Egipta
8
(8.1)
država manj Arabci
5
( 5.1)
Sirije
5
(5.1)
Othera
14
(14,1)
anamnezi peptičnega
27
(27,3)
Pretekla zgodovina H. pylori
okužbe
4
(4.0)
zgodovino kajenja cigaret
38
(38,4)
zgodovino uživanja alkohola
6
(6.1)
Navedba za esophagogastroduodenoscopy
dispepsija
84
(84,8)
Zgornja krvavitve iz prebavil
6
(6.1)
Zgaga
5
(5.1)
Anemija
2
(2.0)
stalno bruhanje
2
(2.0)
aIndia (4), Iran (2), Pakistanu ( 2), Savdska Arabija (2), Afganistan (1), Jordan (1), Somalija (1), Jemen (1).
najpogostejših anomalij vidimo na endoskopijo je PUD (70,7%) (tabela 2). Opazili endoskopski dokaz sluznice vnetja želodca in dvanajstnika pri 57,6% in 29,3% bolnikov, oz. Kronično vnetje je bil "Ni-Mild" pri 22,2% bolnikov, in "Zmerno-Marked" v 77,8%. Nevtrofilcev aktivnost je bila "Nobena-Mild" na 60,6%, in "Zmerno-Marked" pri 39,4% od patients.Table 2 Rezultati endoskopski, histološki, H. pylori genotip, in ravni IL-8 pri bolnikih s H. pylori okužbe v Kuvajtu
Značilni

n
%
Esophagogastroduodenoscopy findingsa
razjeda na dvanajstniku
61
(61,6)
gastritis
57
(57,6)
duodenitis
29
(29,3)
Želodčna razjeda
13
(13.1)
ezofagitisom
10
(10.1)
rak želodca
1
(1.0)
histološki findingsb
H. pylori
prisotna
98
(99,0)
Noben -Mild
44
(44,4)
Zmerna-Marked
54
(54,5)
kronično vnetje
Brez-Mild
22
(22,2)
Zmerno-Marked
77
(77,8)
dejavnosti Neutrophil
Brez-Mild
60
(60,6)
Zmerno-Marked
39
( 39,4)
žleznega atrofija
Brez-Mild
65
(65,7)
Zmerna-Marked
34
(34,3)
intestinalno metaplazijo
Ni-Blag
94
(94,9)
Zmerna-Marked
5
(5.1)
H. pylori
genotip
cagA
52
(52,5)
Váca
-s1
44
(44,4)
Vaca
-s2
39
(39,4)
Váca
-s1? +? s2
10
(10.1)
cagA
? +? Váca
-s1 31
(31,3)
cagA
+ Váca
-s2
8
(8.1)
cagA
+ Váca
? - s1? +? s2
7
(7.1)
IL-8 ravni (pg /mg beljakovin)
povprečje ± SD
1891,5 ± 1.526,8
Mediana (IQR)
1567,4 (1566,3)
bolniki aSome imel več kot en sklep v zvezi z endoskopijo.
bAccording za Posodobljeno sistem Sydney [40].
prisotnost cagA
, vaca
-s1 in Vaca
-s2 geni je bila najdena v 52,5%, 44,4% in 39,4% bolnikov, medtem ko je bilo 10,1% pozitiven tako za vaca
-s1 vacA-
s2. V cagA
gen je bil na voljo v kombinaciji z Vaca
-s1 (cagA
? +? Váca
-s1) pri 31,3% bolnikov, z Vaca
-s2 (cagA
? +? Váca
-s2) v 8,1% in tako Vaca
-s1 in Váca
-s2 (cagA
? +? Váca
-s1? +? s2) v 7,1% bolnikov. Ravni IL-8 so na voljo v 77 bolnikih s srednjo vrednostjo 1567.4 (IQR 1566.3) pg /mg beljakovin.
Tabela 3 prikazuje povezavo med H. pylori
genotipov in resnost kroničnega vnetja, nevtrofilcev dejavnosti in prisotnost PUD. Bolniki, ki so bili okuženi s H. pylori PODJETJA
vsebuje tako cagA
in so bili Vaca
-s1 geni najbolj verjetno, da imajo "Zmerno-Marked" stopnjo kroničnega vnetja (OR = 6,7, 95% CI?: 1,4-31,4; p = 0,016)?. Bolniki z Vaca
-s1 gena sam imel tudi precej bolj "Zmerno-Marked" stopnjo kroničnega vnetja (OR = 3,9, 95% IZ:? 1,2-12,0; p = 0,017), medtem ko se tisti z Vaca
-s2, bistveno manj kronična vnetja (OR = 0,3, 95% IZ: 0.1-0.8; p = 0,025?). Prisotnost cagA
ali Váca
-s1 genov, bodisi samostojno ali skupaj ni vplivalo resnosti nevtrofilcev aktivnosti v želodcu biopsije. Bolniki z Vaca
-s2 gena imela bistveno manj "Zmerno-Marked" raven nevtrofilcev dejavnosti (OR = 0,3, 95% CI: 0,1-0,8; p = 0,027?). Delež bolnikov, ki imajo PUD je bila najvišja pri tistih z cagA
gena (OR = 4,8, 95% IZ:? 1,8-12,5; p = 0,002), sledijo tisti, ki imajo v Vaca
-s1 gena ( OR = 2,8, 95% iZ:? 1,1-7,4; p = 0,031), medtem ko se tisti z Vaca
-s2 imeli najmanjši delež PUD (OR = 0,3, 95% CI: 0,1-0,7; p = ? 0,011). Prisotnost obeh cagA
in Váca
-s1 gena poveča tveganje za PUD več kot prisotnost teh genotipov posebej (OR = 6,3, 95% IZ: 1,6-23,4; p = 0,006?) .table 3. zveza med H. pylori genotipov in kronično vnetje, nevtrofilcev dejavnosti in peptičnega
H. pylorigenotypea (n)
kronična inflammationb
nevtrofilcev activityb
peptične razjede bolezen
nobeden-Mild
Zmerna-Marked
ALI (95% CI) c
p-vrednost
Ni-Blag
Zmerno-Marked
OR (95% CI) c
p-vrednost
Odsoten
Present

OR (95% CI) c
p-vrednost
(n 22)
(n 77)
(n 60)

(n 39)
(n 29)
(n 70)
n (%)
n (%)

n (%)
n (%)

n (%)
n (%)

cagA
Positive (52)
8 (15,4)
44 (84,6)
2,4 (0,9-6,7)
0,074
29 (55,8)
23 (44,2)
1.5 (0.6-3.4)
0,325
8 (15,4)
44 (84,6)
4.8 (1.8-12.5)
0,002 *
Negativno (47)
14 (29,8)
33 (70,2)
referenčne
31 (66,0)
16 (34,0)
Reference
21 (44,7)
26 (55,3)
Reference
Váca
-s1
Positive (44)
5 (11,4)
39 (88,6)
3,9 ( 1,2-12,0)
0,017 *
22 (50,0)
22 (50.0)
2.2 (0.9-5.2)
0,057
8 (18.2)
36 (81,8)
2,8 (1,1-7,4)
0,031 *
Negativno (55)
17 (30,9)
38 (69,1)
Reference
38 (69,1)
17 (30.9)
Reference
21 (38,2)
34 (61,8)
Reference
Váca
-s2
Positive (39)
13 (33,3)
26 (66,7)
0,3 (0,1-0,8)
0,025 *
29 (74,4)
10 (25,6)
0,3 (0,1-0,8)
0,027 *
17 (43,6)
22 (56,4)
0,3 (0,1-0,7)
0,011 *
Negativno (60)
9 (15,0)
51 (85,0)
Reference
31 (51,7)
29 (48,3)
Reference
12 (20,0)
48 (80,0)
referenčne
Váca
-s1? +? S2
Pozitivna (10)
3 (30,0)
7 (70,0)
0,5 (0,1-2,2)
0,445
8 (80,0)
2 (20,0)
0,3 (0,0-1,7)
0,191
2 (20,0)
8 (80,0)
1,8 (0,3-9,1)
0,478
Negativno (89)
19 (21,3 )
70 (78,7)
Reference
52 (58,4)
37 (41,6)
Reference
27 (30,3)
62 (69,7)
Reference
cagA
? +? Váca
-s1
Positive (31)
2 (6.5)
29 (93,5)
6,7 (1,4-31,4)
0,016 *
18 (58,1)
13 (41,9)
0,9 (0,9-1,0)
0.737
3 (9,7)
28 (90,3)
6.3 (1.6-23.4)
0,006 *
Negativno (68)
20 (20,9)
48 (70,6)
referenčne
42 (61,8)
26 (38,2)
Reference
26 (38,2)
42 (61,8)
Reference
cagA
? +? Váca
-s2
Positive (8)
3 (37,5)
5 ( 62.5)
0,4 ​​(0,1-2,2)
0,337
5 (62,5)
3 (37,5)
0,9 (0,2-4,3)
0,959
2 (25,0)
6 (75,0)
1.2 (0.2-6.5)
0.810
Negativno (91)
19 (20,9)
72 (79,1)
Reference
55 (60.4 )
36 (39,6)
Reference
27 (29,7)
64 (70,3)
Reference
cagA
? +? Váca
-s1? +? s2
Positive (7)
2 (28,6)
5 (71,4)
0,9 (0,9-1,0)
0,255
5 (71,4)
2 (39,4)
0,5 (0,1-3,2)
0,537
1 (14,3)
6 (85,7)
2,7 (0,3-24,5)
0,359
Negativno (92)
20 ( 21.7)
72 (78,3)
Reference
55 (59,8)
37 (40,2)
Reference
28 (30,4)
64 (69,6)
Reference
bolnikov Vvsi so bili pozitivni bodisi cagA
, Vaca
ali oboje.
bAccording za Posodobljeno sistem Sydney [40]. razmerje
kletko in prilagodi spola kvote.
* Statistično pomembno.
Tabela 4 prikazuje korelacijo med stopnjo IL-8 v želodčni sluznici in H. pylori
genotipov in histološke značilnosti in PUD. Mediana vrednost za IL-8 je bila bistveno višja pri bolnikih, okuženih s H. pylori
z cagA
(p = 0,011?) In Váca
-s1 genov (p = 0,011 in 0,024, oziroma?); in bistveno manjše pri tistih z Vaca
-s2 gena (p =? 0,004) (Slika 1). Najvišje ravni IL-8 so bile ugotovljene pri bolnikih, ki so bili pozitivni tako za cagA
in Váca
-s1 (slika 2). Korelacija želodčni sluznici IL-8 ravni z resnostjo kroničnega vnetja je pokazala, da imajo bolniki, ki so imeli "Zmerno-Marked" kronično vnetje imela raven bistveno višji srednji IL-8 v primerjavi s tistimi, ki so imeli "Ni-Mild" vnetje (p =? 0.001 ) (slika 3). Bolniki z "zmerno znamenju" nevtrofilci dejavnosti na želodcu biopsijo imeli tudi bistveno višje srednje ravni IL-8 v primerjavi s tistimi, ki so imeli "Ni-Mild" dejavnost (p =? 0,007). Mediane ravni IL-8 je bilo tudi precej povišano želodca biopsije bolnikov z PUD v primerjavi s tistimi, ki niso imeli razjede (p =? 0,001). Ni bilo bistvene razlike v gostoti H. pylori
ali stopnja žleznega atrofije ali intestinalno metaplazijo z ravni IL-8 v želodčni biopsies.Table 4. Korelacija med interlevkin-8 in H. pylori genotipov, kronično vnetje, nevtrofilcev dejavnost, in peptični ulkus
H. pylorigenotypea
interlevkin-8 levelb
p-valuec
Mediana (IQR)
cagA

Odsoten
1090,3 (1310,8)
0,011 *
Present
1885,7 (1281,6)
Váca
-s1
Odsoten
1245.8 (1550.2)
0,024 *
Present
1840,0 (1098,6)
Váca
-s2
Odsoten
1840,0 (1597,5)
0,004 *
Present
965,6 (1205,1 )
Vaca
-s1? +? s2
odsoten
1541,1 (1566,3)
0,818
Predstavite
1711,8 (1928,7)
cagA
? +? vaca
-s1
Odsoten
1311,8 (1814,9)
0,021 *
Present
1901,7 (915,3)
cagA
? +? Váca
-s2
odsoten
1577,5 (1548,6)
0,713
Predstavite
1331.7 (?)
cagA
? +? Váca
s1? +? s2
odsoten
1541,1 (1625,9)
0,807
Predstavite
1711.8 (1803.6)
histološki findingsd
kronično vnetje
Brez-Blaga
689,2 (1420,6)
0.001 *
Zmerno-Marked
1835.7 (1345.3)
nevtrofilcev dejavnost
Brez-Blaga
1449,0 (1342,1)
0,007 *
Zmerna-Marked
1917.8 (2703.6)
želodčne razjede
Odsoten
919,3 (1153,3)
0.001 *
Present
1890.6 (1638.4)
bolnikov Vvsi so bili pozitivni bodisi cagA
, vaca
ali oboje.
BPG /mg proteina.
cMann-Whitney U
test.
dAccording za Posodobljeno sistem Sydney [40].
* statistično značilna
Slika 1 Ravni interlevkin-8 v želodčne sluznice pri bolnikih s H. pylori, z ali brez genotipov cagA, vaca -s1 in Vaca -s2. Ti so izraženi kot polje ploskev. Konci palic kažejo, 25. in 75. percentilo. 50. percentil je označena s črto, ter 10. in 90. percentila so označeni z bari napak. V p-vrednosti so bile izračunane s testom
Mann-Whitney U. * Označuje, da je p-vrednost statistično značilne.
Slika 2 Ravni interlevkin-8 v želodčni sluznici pri bolnikih s H. pylori, z ali brez genotipov cagA? +? Vaca -s1, cagA? +? Vaca -s2 in cagA? +? Váca -s1? +? Vaca -s2. Ti so izraženi kot polje ploskev. Konci palic kažejo, 25. in 75. percentilo. 50. percentil je označena s črto, ter 10. in 90. percentila so označeni z bari napak. V p-vrednosti so bile izračunane s testom
Mann-Whitney U. * Označuje, da je vrednost p statistično značilne.
Slika 3 Ravni interlevkin-8 v želodčni sluznici pri bolnikih s H. pylori in resnosti kroničnega vnetja, nevtrofilno aktivnost in peptični ulkus. Ti so izraženi kot polje ploskev. Konci palic kažejo, 25. in 75. percentilo. 50. percentil je označena s črto, ter 10. in 90. percentila so označeni z bari napak. V p-vrednosti so bile izračunane s testom
Mann-Whitney U. * Označuje, da je p-vrednost statistično značilne.
Skupaj 58 (75,3%) bolnikov, ki so imeli "Zmerno-Marked" kronično vnetje želodčne sluznice imel PUD, v primerjavi z 12 (54,5%), z "None- blagi ", medtem ko 31 (79,5%) bolnikov z '' imeli nevtrofilcev dejavnosti PUD, v primerjavi z 39 (65,0%) tistih z" zmerne-Marked "dejavnosti Noben-blag. Vendar te razlike niso bile statistično značilne. Prav tako ni bilo povezave med prisotnostjo PUD in resnosti žleznega atrofije, intestinalno metaplazijo ali H. pylori
gostote na želodcu biopsij.
Razprava
Kolikor nam je znano, da je to prva študija, naj preuči združenje med prisotnostjo cagA
, vaca
-s1 in Váca
-s2 genotipov v H. pylori
in resnost kroničnega gastritisa in PUD v skupini bolnikov z Bližnjega vzhoda. Pokazali smo tudi razmerje teh faktorjev s stopnjami IL-8 v želodčni sluznici za potrditev biološko verodostojnosti da ti bakterijskih virulenčni dejavniki vodijo do indukcije citokinov IL-8, kar ima za posledico hujšo vnetjem in /ali .
zdi se, da je geografski razlike v povezavi med H. pylori
genotipov in želodca vnetnega odziva razvoj PUD. Okužba z cagA
pozitivnih sevov H. pylori
v zahodnih državah so poročali, da povzroča več hudo vnetje želodca v primerjavi z azijskimi državami, kjer so bili rezultati [7] v neskladju, [20-24]. V naši raziskavi je bila tako stopnja kroničnega vnetja in nevtrofilcev aktivnosti v želodčni sluznici hujši pri bolnikih, ki so okuženi s H. pylori
vsebuje cagA
in Vaca
-s1 geni. Prisotnost obeh cagA
in Váca
-s1 zdelo, da ima sinergističen vlogo pri povečevanju resnosti vnetja pri naših bolnikov. Po drugi strani pa je prisotnost Váca
-s2 pojavil izboljšati resnosti kroničnega vnetja, kot tudi nevtrofilno aktivnost, ne glede na prisotnost cagA
, Vaca
-s1 ali oboje. Te ugotovitve so v skladu s predhodno objavljenih študijah, kjer je bilo ugotovljeno, vaca
-s2 seve, da je povezana z manj vnetja [25]. Tako cagA
in Vaca
-s1 geni so tudi neodvisno povezana s povečanim tveganjem za PUD, medtem ko je Vaca
-s2 gen je zdelo, da imajo manjši učinek. Bolniki, ki so imeli tako cagA
in Váca
-s1 gen imel največje tveganje za PUD. Po drugi strani pa je prisotnost Váca
-s2 zmanjšala nevarnost PUD, ali je bil prisoten sam ali skupaj z cagA
, Váca
-s1 ali oboje. Ti rezultati so podobni tistim iz zahodnih držav [20], [21], [24], čeprav je bila večina bolnikov v naši raziskavi z Bližnjega vzhoda in indijski podcelini [26]. Nedavna študija, izvedena za določitev genetske pripadnosti H. pylori
izolatov iz etničnih Arabci v Kuvajt je pokazala, da so ti sevi tesno povezana z indoevropski skupini organizma in jasno razlikujejo od vzhodnoazijskih sevov [27]. To bi lahko bil razlog, zakaj se zdi, da je podoben tistemu, ki poročajo iz zahodnih držav združenje cagA
Vaca
-s1 in Vaca
-s2 in gastritis in PUD v naših bolnikov.
pro-vnetnih citokinov IL-8 igra pomembno vlogo pri urejanju migracij sluznice nevtrofilcev in aktivacijo. Naši rezultati kažejo, da je bila raven IL-8 v želodčni sluznici, v prisotnosti cagA
in Vaca
-s1 genotipov H. pylori
in najvišje ravni povečala so opazili pri bolnikih, ki so bili pozitivni na obe geni. Prisotnost Váca
-s2 bila povezana z nižjo stopnjo IL-8. Občutno višji nivo IL-8 v želodčne sluznice so opazili tudi pri bolnikih, ki so imeli strožjo stopnjo kroničnega vnetja in nevtrofilcev aktivnosti v želodčnih biopsijah, kot tudi tiste, ki so imeli PUD. Ti rezultati so v skladu s predhodnimi poročili, kjer so bile ravni želodčni sluznici ravni IL-8 v korelaciji s prisotnostjo virulence H. pylori
genov kot cagA
in ledu A [28], [29]. Vendar pa so nekateri raziskovalci poročajo s H. pylori
okužb z in brez PUD [30] ni razlike v ravni IL-8 pri bolnikih, medtem ko imajo višjo stopnjo pri bolnikih s PUD nato tiste, ki imajo samo gastritis [31]. To neskladje v rezultatih IL-8 proizvodnje bi lahko zaradi razlik v metodologije za merjenje ravni citokina v želodčni sluznici. Uporabili smo tehniko ELISA, ki temelji, ki je lahko bolj občutljiva metoda citokinov kvantifikacije.
Glede drugih dejavnikov, smo ugotovili, da ni razlike v strogosti gastritis, prisotnost PUD ali ravni IL-8 med bolniki z ali brez zgodovino kajenja in alkohola porabo. Prisotnost PUD je pa bolj pogosta v tej skupini bolnikov, kot je bilo prej iz Kuvajta kot tudi drugje [32] poročali. So moteči učinki zdravil so zmanjšana le za izbiro tistih bolnikov, ki niso bili na nobenem izmed omenjenih zdravil za vsaj 4 tedne pred endoskopija. Številne druge H. pylori
dejavniki, kot so Váca
-s1 podtipi (s1a in s1b), Vaca
srednji regija podtipi (m1 in m2), lahko ICEA in dupa geni vplivajo tudi virulenco tega organizma in njegove učinke na želodčne sluznice [33]. Vendar pa naša študija ni bil zasnovan za določitev te dejavnike virulence, in to bi se lahko štelo za omejitev tega poročila. Poleg bakterijskih dejavnikov, gostiteljske genetika prav tako prispevajo k patogenezi želodcu bolezni [34], [35]. Poleg tega je veliko citokinov genski polimorfizmi razkrivajo drugačno tveganje pri bolnikih želodca in dvanajstnika [36], [37].
Sklepi
Ta študija, ki je zajela bolnike iz Bližnjega vzhoda kaže, da je prisotnost H. pylori cagA
in Vaca
-s1 geni povzroči indukcijo višjih ravneh pro-vnetnih citokinov IL-8 v želodčni sluznici, ki ne le rezultati v bolj označeno intenzivnosti kroničnega vnetja in nevtrofilcev aktivnosti v želodčni sluznici, ampak tudi večja pojav PUD. Prisotnost Váca
-s2 rezultatov na nižjih ravneh IL-8, kakor tudi manj hudo vnetje in manj PUD. Poleg tega se zdi, da prisotnost Vaca
-s2 za zmanjšanje učinkov virulence cagA
in /ali Vaca
-s1 genov.
Bolniki in metode
Bolniki in vzorci
študija populacija in metode zbiranja biopsije so bile že opisane [26], [32]. Na kratko, 120 zaporednih, neizbrani odraslih bolnikih iz saj so bili esophagogastroduodenoscopy povabljeni k sodelovanju v raziskavi. Bolniki z nepravilnostmi v strjevanju krvi, so pred želodca in dvanajstnika kirurgija izključeni iz študije. Bolniki, ki so sprejeti vrsto histamin 2 antagonisti receptorjev, zaviralci protonske črpalke, antibiotike, bizmuta soli, aspirin ali nesteroidna protivnetna agentov v zadnjih štirih tednih so bile prav tako izključene. Razširjenost cagA
in Vaca
genotipov pri teh bolnikih so poročali prej [26].
Zgornja prebavil endoskopija je bila izvedena na običajen način. Vse endoskopi šli skozi proces čiščenja in dezinfekcije z avtomatsko pralno-disinfector pred vsakim postopkom, v skladu s smernicami Evropskega društva prebavil endoskopije [38]. Za vsakega bolnika, so bili štirje biopsije vzeti iz želodca antruma, v 2 cm od pilorus uporabo sterilizirane biopsija klešče
Dva vzorci biopsije so bile določene v zastalega formalina, obdelani s kurilnim oljem, prerezana in obarvajo s H &. E in HpSS [39]. Vse biopsije bili individualno obravnavani s strani višjega prebavil patolog, ki je bil slep na klinične informacije o bolnikih. Biopsija je dosegel pozitiven H. pylori
če so organizmi videl na svetlobno mikroskopijo. Posodobljen sistem Sydney je bil uporabljen, da bi dosegel gostoto H. pylori
in stopnjo kroničnega vnetja, nevtrofilci dejavnosti, žleznega atrofijo in intestinalno metaplazijo na biopsije [40]. Bolniki, ki so brez ali z blago kronično vnetje želodčne biopsijo so bile združene v eno skupino (Ni-Mild skupine), medtem ko so tisti z zmerno ali označeno stopnjo vnetja, vključenih v drugi skupini (Moderate-Marked skupino). Podobno so bolnike razdelili v dve skupini (tj Brez-blago in zmerno-Marked) za nevtrofilcev aktivnosti, kot tudi za intestinalno metaplazijo in žleznega atrofijo.
DNA mini komplet V QIA "(Qiagen, Hilden, Nemčija) je bila uporabljena za pridobivanje DNK iz biopsije. Čistoto DNA smo ocenili izračun razmerja optične gostote (OD) pri 260-280 nm in dobitek je količinsko z absorbanco pri 260 nm.
PCR pomnoževanje ciljne DNK
Tabela 5 prikazuje primerjev, ki se uporabljajo v tem študija. CagA
F in cagA
R primerji ustvarjajo fragment 183 baznih parov (bt) za odkrivanje cagA
, medtem ko primerji VA1F in VA1XRA dobimo 176 bp fragment za vaca
-s1 in 203 bp za vaca
-s2 variante [41], [42]. Vnaprej alikvote PCR master mešanica (Abgene, Surrey, Velika Britanija) smo uporabili za pomnoževanje ciljne DNK. Končni reakcijski volumen je 50L in vsebuje 25pmol vsake temeljni premaz in 50 ng DNA [43]. PCR smo izvedli po predinkubacije pri 94 ° C za 5 minut, čemur sledi 35 ciklov pri 94 ° C, 50 ° C in 74 ° C za vsako sledilo 5 minut zadnjem koraku podaljška pri 74 ° C eno minuto. So pomnoženi Vzorce smo analizirali z elektroforezo na 2% visoke ločljivosti agaroznem gelu v tris-acetat-EDTA (TAE) pufru, ki je bil nato obarvanem z etidijevim bromidom po 0.5μg /ml [44]. Ultravijolična svetloba je bila uporabljena za vizualizacijo spone pomnožene DNA, ki so bili nato photographed.Table 5 premazi, ki se uporabljajo v PCR za pomnoževanje cagA, vaca -s1 in Váca -s2 zaporedij
DNA regija, pomnoženi
Primer

Primer zaporedja
PCR produkt (BPA)
cagA
cagA
F
5? -TTGACCAACAACCACAAACCGAAG-3?
183
cagA
R
5?-CTTCCCTTAATTGCGAGATTCC-3?
vacA
-s1
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
176
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
vacA
-s2
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
203
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
ABP. Osnovna par
Merjenje IL-8
Dve biopsijo osebkov smo takoj zamrznili v tekočem dušiku in shranili pri 80 ° C?.

• Število kopij DNA profili iz želodca predhodnika raka lesions
• Ultrasonic škarje pomoč se lahko skrajša čas konzole v robotsko želodca za zgodnje želodca cancer