Association mellem Helicobacter pylori genotyper og sværhedsgraden af ​​kronisk gastritis, mavesår sygdom og gastrisk slimhinde interleukin-8 niveauer: Beviser fra en undersøgelse i Mellemøsten

Association mellem Helicobacter pylori
genotyper og sværhedsgraden af ​​kronisk gastritis, mavesår sygdom og gastrisk slimhinde interleukin-8 niveauer: Beviser fra en undersøgelse i Mellemøsten
Abstrakt
Baggrund
Den varierede kliniske præsentationer af Helicobacter pylori
(H. pylori
) infektion er mest sandsynligt på grund af forskelle i virulens individuelle stammer, som bestemmer dens evne til at inducere produktion af interleukin-8 (IL-8) i maveslimhinden. Formålet med denne undersøgelse var at undersøge sammenhængen mellem CagA, ferieperioden
s1 og ferieperioden
s2 genotyper af H. pylori
og sværhedsgraden af ​​kronisk gastritis og tilstedeværelse af peptisk ulcussygdom (PUD), og til korrelere disse med IL-8-niveauer i maveslimhinden. Salg Metoder
maveslimhinden biopsier blev opnået fra patienter under gastroskopi. Sværhedsgraden af ​​kronisk gastritis blev dokumenteret ved hjælp af den opdaterede Sydney systemet. H. pylori CagA
og Vaca
genotyper blev påvist ved PCR. . IL-8-niveauer i maveslimhinden blev målt ved ELISA
Resultater Salg H. pylori CagA
og /eller VacA
genotyper blev påvist i 99 patienter (gennemsnitsalder 38,4 til 12,9; 72 hanner ), hvoraf 52,5% var positive for CagA
, 44,4% for Vaca
-S1 og 39,4% for Vaca
-s2; og 70,7% af patienterne havde pud. Sværhedsgraden af ​​inflammation i maveslimhinden blev øget med Vaca
-S1 (p = 0,017) og faldt med Vaca
-s2 (p = 0,025), mens CagA
havde ingen sammenhæng. Graden af ​​neutrofil aktivitet var ikke forbundet med hverken CagA
eller Vaca
-S1, mens VacA
-s2 var signifikant forbundet med nedsat neutrofil aktivitet (p = 0,027). Pud var signifikant forøget hos patienter med CagA
(p = 0,002) og Vaca
-S1 (p = 0,031), og faldt i dem med Vaca
-s2 (p = 0,011). Niveauet af IL-8 blev signifikant forøget i patienter med CagA
(p = 0,011) og VacA
-S1 (p = 0,024), og lavere med VacA
-s2 (p = 0,004). Højere niveauer af IL-8 blev også fundet hos patienter med mere alvorlig kronisk inflammation (p = 0,001), neutrofil aktivitet (p = 0,007) og dem med PUD (p = 0,001).
Konklusioner
Tilstedeværelse af VacA
-S1 genotype af H. pylori
er forbundet med mere alvorlig kronisk inflammation og højere niveauer af IL-8 i maveslimhinden, samt højere frekvens af PUD. Patienter med VacA
-s2 har mindre alvorlige gastritis, lavere niveauer af IL-8, og lavere PUD. Tilstedeværelsen af ​​CagA
genotype er ikke forbundet med sværhedsgraden af ​​gastritis eller IL-8 induktion i maveslimhinden. Foreningen af ​​CagA
med pud kan være en afspejling af sin tilstedeværelse med Vaca
-S1 genotype.
Nøgleord
Helicobacter pylori CagA Vaca-s1 Vaca-s2 Gastritis Interleukin-8 mavesår sygdom Baggrund
Helicobacter pylori Hotel (H. pylori
) koloniserer slimhinden i menneskets mave og etablerer en langsigtet infektion [1]. Det fører til udviklingen af ​​kronisk gastritis, mavesår sygdom (PUD), mucosal-associerede lymfoide væv (MALT) lymfom og gastrisk carcinoma [2], [3]. Omfanget og sværhedsgraden af ​​disse foreninger afhænger af flere elementer, såsom bakterielle virulensfaktorer, alder værten, genetisk disposition, immunrespons og miljømæssige faktorer [4-6].
De to vigtigste virulens markører for H. pylori
er cytotoksin forbundet A (CagA
) og vakuolerende cytotoksin A (Vaca
) gener [6], [7]. Den CagA
gen ikke er til stede i hver H. pylori
stamme, men er forbundet med mere alvorlige kliniske resultater såsom mere alvorlig betændelse i maveslimhinden, samt højere prævalens af pud og gastrisk karcinom [8- 10]. VacA
genet forekommer i alle H. pylori
stammer og er forbundet med PUD [11]. Den Vaca
gen indeholder mindst tre variable regioner, signalet (e) region, mellemprodukt (i) region og midterste (m) region. S-region eksisterer som S1 og S2 typer [12], [13]. Den Vaca
-S1 stammer er forbundet med mere alvorlige gastrisk betændelse og pud uafhængigt af CagA,
mens Vaca
-s2 stammer forbundet med lavere mavesår prævalens og mindre alvorlig betændelse [14].
H . pylori
infektion resulterer i rekruttering af neutrofiler, lymfocytter og makrofager i maveslimhinden gennem induktion af adskillige cytokiner såsom TNF ?, IL-6 og IL-8 [15-17]. IL-8 er en vigtig mediator i immunopatogenese af kronisk gastritis forårsaget af H. pylori
[16]. Det er blevet påvist, at CagA
og VacA
-S1 positive stammer af H. pylori
inducerer produktionen af ​​IL-8 i maveslimhinden, både in vivo og in vitro [16], [18], [19]. VacA
-s2 gen er ikke forbundet med IL-8 induktion [18]. Derudover har en associering mellem De mucosale niveauer af IL-8 og sværhedsgraden af ​​gastritis og tilstedeværelse af PUD også rapporteret [19]. De fleste undersøgelser af sammenhæng mellem genotyper af H. pylori
og kronisk gastritis, mavesår sygdom og IL-8 niveauer er blevet gennemført i de vestlige befolkninger, og ingen tidligere undersøgelse har undersøgt disse foreninger i Mellemøsten. Desuden har de fleste offentliggjorte undersøgelser kun undersøgt enten en enkelt eller nogle af disse foreninger.
Formålet med denne undersøgelse var at bestemme sammenhængen mellem tilstedeværelsen af ​​CagA
, Vaca
-S1 og Vaca
-s2 genotyper i H. pylori
og sværhedsgraden af ​​gastritis og PUD, og ​​at korrelere disse med de niveauer af IL-8 i en gruppe af patienter fra Mellemøsten. Vi har også forsøgt at undersøge alle disse indbyrdes forbundne foreninger i den samme gruppe af patienter til at validere biologiske plausibilitet, at de bakterielle virulensfaktorer medfører induktion af cytokin IL-8, hvilket igen resulterer i mere alvorlig betændelse eller udvikling af pud .
Resultater
gastroskopi og gastriske biopsier blev udført i 120 voksne patienter. H. pylori
blev set på histopatologi i 98 af disse patienter, som alle var positive for CagA
og /eller Vaca
. En patient havde Vaca
på PCR, men var ikke positiv for H. pylori
på histopatologi blev også medtaget i analysen. Derfor blev yderligere analyse i disse 99 patienter (72,7% mænd, 27,3% kvinder, gennemsnitsalder 38,4 år) (tabel 1). En historie pud var til stede i 27,3% af patienterne, og de mest almindelige indikation for indbringelsen var dyspepsi (84,8%). Tabel 1 Socio-demografiske og kliniske karakteristika for 99 patienter med H. pylori-infektion i Kuwait
Karakteristisk

Alder ved diagnose (år)
gennemsnit ± SD
38,4 ± 12,9
Median
35,5
Range
18-75
Køn
n Hotel (%)
Male
72 Hotel (72,7)
Female
27 Hotel (27.3)
nationalitet
Kuwait
52 Hotel (52,5)
Bangladesh
15 Hotel (15.2)
Egypten
8 Hotel (8.1)
State-mindre arabere
5
( 5.1)
Syrien
5
(5.1)
Othera
14 Hotel (14.1)
Past historie af mavesår sygdom
27 Hotel (27.3)
Tidligere historie af H. pylori
infektion
4
(4.0)
historie cigaretrygning
38
(38,4)
historie alkoholforbrug
6 Hotel (6.1)
Indikation for gastroskopi
Dyspepsi
84 Hotel (84,8)
øvre gastrointestinal blødning
6
(6.1)
halsbrand
5 Hotel (5.1)
anæmi
2 Hotel (2,0)
Vedvarende opkastning
2 Hotel (2,0)
aIndia (4), Iran (2), Pakistan ( 2), Saudi Arabien (2), Afghanistan (1), Jordan (1), Somalia (1), Yemen (1).
hyppigste abnormitet set på endoskopi var pud (70,7%) (tabel 2). blev observeret Endoskopisk tegn på slimhindeinflammation i maven og duodenum i 57,6% og 29,3% af patienterne. Kronisk betændelse var "Ingen-Mild 'i 22,2% af patienterne, og" Moderat-Mærket "i 77,8%. Neutrofil aktivitet var "Ingen-Mild 'i 60,6%, og" Moderat-Mærket "i 39,4% af de patients.Table 2 Resultater af endoskopisk, histologiske, H. pylori genotype, og IL-8 niveau hos patienter med H. pylori-infektion i Kuwait
Karakteristisk Vejviser n
%
gastroskopi findingsa
Duodenalsår
61 Hotel (61,6)
Gastritis
57 Hotel (57,6)
Duodenitis
29 Hotel (29,3)
mavesår
13 Hotel (13.1)
Esophagitis
10 Hotel (10.1)
Gastrisk kræft
1 Hotel (1,0)
Histologisk findingsb
H. pylori
nuværende
98 Hotel (99,0)
Ingen -Mild
44
(44,4)
Moderat-Mærket
54 Hotel (54.5)
Kronisk betændelse
Ingen-Mild
22
(22,2)
Moderat-Mærket
77
(77,8)
Neutrofil aktivitet
Ingen-Mild
60 Hotel (60,6)
Moderat-Mærket
39
( 39,4)
glandulær atrofi
Ingen-Mild
65 Hotel (65,7)
Moderat-Mærket
34 Hotel (34.3)
Intestinal metaplasi
Ingen-Mild
94 Hotel (94,9)
Moderat-Mærket
5
(5.1)
H. pylori
genotype
CagA
52 Hotel (52,5)
Vaca
-S1
44
(44,4)
Vaca
-s2
39
(39,4)
Vaca
-S1? +? s2
10 Hotel (10.1)
CagA
? +? Vaca
-S1 31 Hotel (31.3)
CagA
+ Vaca
-s2
8 Hotel (8.1)
CagA
+ Vaca
?? - s1? +? s2
7 Hotel (7.1)
IL-8 Level (pg /mg protein)
gennemsnit ± SD
1891,5 ± 1526,8
Median (IQR)
1567,4 (1566,3)
asome patienter havde mere end én konklusion på endoskopi.
bAccording til Opdateret Sydney-systemet [40].
tilstedeværelsen af ​​CagA
, Vaca
-S1 og Vaca
-s2 gener blev fundet i 52,5%, 44,4% og 39,4% af patienterne, mens 10,1% var positive for både VacA
-S1 ferieperioden
s2. Den CagA
genet blev fundet i kombination med VacA
-S1 (CagA
? +? VacA
-S1) i 31,3% af patienterne, med VacA
-s2 (CagA
? +? Vaca
-s2) i 8,1% og med både Vaca
-S1 og Vaca
-s2 (CagA
? +? Vaca
-S1? +? s2) i 7,1% af patienterne. IL-8-niveauer var tilgængelige i 77 patienter med en medianværdi på 1567,4 (IQR 1566,3) pg /mg protein.
Tabel 3 viser sammenhængen mellem H. pylori Salg genotyper og sværhedsgraden af ​​kronisk inflammation, neutrofil aktivitet og tilstedeværelse af PUD. Patienter, som blev inficeret med H. pylori
indeholder både CagA
og Vaca
-S1 gener var mest tilbøjelige til at have "Moderat-Mærket" grad af kronisk inflammation (OR = 6,7, 95% CI?: 1,4-31,4; p = 0,016)?. Patienter med VacA
-S1 gen alene havde også en betydeligt mere "Moderat-Mærket" grad af kronisk inflammation (OR = 3,9, 95% CI:?? 1,2-12,0; p = 0,017), mens dem med VacA
-s2 havde betydeligt mindre kronisk inflammation (OR = 0,3, 95% CI:? 0,1-0,8; p = 0,025?). Tilstedeværelsen af ​​CagA
eller Vaca
-S1 gener enten uafhængigt eller sammen påvirkede ikke alvoren af ​​neutrofil aktivitet i mavens biopsier. Patienter med VacA
-s2 gen havde en signifikant mindre "Moderat-Mærket" grad af neutrofil aktivitet (OR = 0,3, 95% CI:? 0,1-0,8; p = 0,027?). Andelen af ​​patienter med PUD var højest i de med CagA
genet (OR = 4,8, 95% CI:?? 1,8-12,5; p = 0,002), efterfulgt af dem med den VacA
-S1 gen ( OR = 2,8, 95% CI:?? 1,1-7,4; p = 0,031), mens dem med VacA
-s2 havde den laveste andel af PUD (OR = 0,3, 95% CI:? 0,1-0,7; p = ? 0,011). Tilstedeværelsen af ​​både CagA
og Vaca
-S1 gen øgede risikoen for pud mere end tilstedeværelsen af ​​disse genotyper individuelt (OR = 6,3, 95% CI:? 1,6-23,4; p = 0,006?) .table 3 associering mellem H. pylori genotyper og kronisk inflammation, neutrofil aktivitet og mavesår sygdom
H. pylorigenotypea (n)
kronisk inflammationb
neutrofil activityb
mavesår sygdom
Ingen-Mild
Moderat-Mærket
ELLER (95% CI) c
p-værdi
Ingen-Mild
Moderat-Mærket
ELLER (95% CI) c
p-værdi
Fraværende
Present

OR (95% CI) c
p-værdi
(n 22)
(n 77)
(n 60)
Hotel (n 39)
(n 29)
(n 70)
n (%)
n (%)

n (%)
n (%) Vejviser n (%)
n (%)

CAGA
Positiv (52)
8 (15,4)
44 (84,6)
2,4 (0,9-6,7)
0,074
29 (55,8)
23 (44,2)
1,5 (0,6-3,4)
0,325
8 (15,4)
44 (84,6)
4,8 (1,8-12,5)
0,002 *
Negativ (47)
14 (29,8)
33 (70,2)
reference
31 (66,0)
16 (34,0)
reference
21 (44,7)
26 (55,3)
reference
vaca
-S1
Positiv (44)
5 (11,4)
39 (88,6)
3,9 ( 1,2-12,0)
0,017 *
22 (50,0)
22 (50,0)
2,2 (0,9-5,2)
0,057
8 (18.2)
36 (81,8)
2,8 (1,1-7,4)
0,031 *
Negativ (55)
17 (30,9)
38 (69,1)
reference
38 (69,1)
17 (30.9)
reference
21 (38,2)
34 (61,8)
reference
vaca
-s2
Positiv (39)
13 (33,3)
26 (66,7)
0,3 (0,1-0,8)
0,025 *
29 (74,4)
10 (25,6)
0,3 (0,1-0,8)
0,027 *
17 (43,6)
22 (56,4)
0,3 (0,1-0,7)
0,011 *
Negativ (60)
9 (15,0)
51 (85,0)
reference
31 (51,7)
29 (48,3)
reference
12 (20,0)
48 (80,0)
reference
Vaca
-S1? +? S2
Positiv (10)
3 (30,0)
7 (70,0)
0,5 (0,1-2,2)
0,445
8 (80,0)
2 (20,0)
0,3 (0,0-1,7)
0,191
2 (20,0)
8 (80,0)
1,8 (0,3-9,1)
0,478
Negativ (89)
19 (21,3 )
70 (78,7)
reference
52 (58,4)
37 (41,6)
reference
27 (30,3)
62 (69,7)
reference
CagA
? +? vaca
-S1
Positiv (31)
2 (6.5)
29 (93,5)
6,7 (1,4-31,4)
0,016 *
18 (58,1)
13 (41,9)
0,9 (0,9-1,0)
0,737
3 (9.7)
28 (90,3)
6,3 (1,6-23,4)
0,006 *
Negativ (68)
20 (20,9)
48 (70,6)
reference
42 (61,8)
26 (38,2)
reference
26 (38,2)
42 (61,8)
reference
CagA
? +? vaca
-s2
Positiv (8)
3 (37,5)
5 ( 62,5)
0,4 ​​(0,1-2,2)
0,337
5 (62,5)
3 (37,5)
0,9 (0,2-4,3)
0,959
2 (25,0)
6 (75,0)
1,2 (0,2-6,5)
0.810
Negativ (91)
19 (20,9)
72 (79,1)
reference
55 (60,4 )
36 (39,6)
reference
27 (29,7)
64 (70,3)
reference
CagA
? +? Vaca
-S1? +? s2
Positiv (7)
2 (28,6)
5 (71,4)
0,9 (0,9-1,0)
0,255
5 (71,4)
2 (39,4)
0,5 (0,1-3,2)
0,537
1 (14,3)
6 (85,7)
2,7 (0,3-24,5)
0,359
Negativ (92)
20 ( 21,7)
72 (78,3)
reference
55 (59,8)
37 (40,2)
reference
28 (30,4)
64 (69,6)
reference
samtlige Alle patienter var positive for enten CagA
, Vaca
eller begge dele.
bAccording til Opdateret Sydney-systemet [40].
bur og kønsrelaterede justeret odds ratio.
* Statistisk signifikant.
tabel 4 viser sammenhængen mellem niveauet af IL-8 i maveslimhinden og H. pylori
genotyper og histologiske træk og pud. Af medianen for IL-8 var signifikant højere hos patienter inficeret med H. pylori
med CagA
(p = 0,011?) Og VacA
-S1 gener (p = 0,011 og 0,024, henholdsvis); og signifikant lavere hos patienter med VacA
-s2 gen (p =? 0,004) (figur 1). De højeste niveauer af IL-8 blev fundet i patienter, som var positive for både CagA
og VacA
-S1 (figur 2). Korrelation af gastrisk slimhinde IL-8 niveauer med sværhedsgraden af ​​kronisk inflammation viste, at patienter, som havde "Moderat-Mærket" kronisk inflammation havde signifikant højere median IL-8 niveau i forhold til dem, der havde "Ingen-Mild 'inflammation (p =? 0,001 ) (figur 3). Patienter med 'Moderat-Mærket "neutrofil aktivitet på gastrisk biopsi havde også signifikant højere median IL-8 niveauer i forhold til dem, der havde" Ingen-Mild' aktivitet (p =? 0,007). De mediane niveauer af IL-8 blev også signifikant forhøjet i de gastriske biopsier af patienter med PUD sammenlignet med dem, der ikke har sår (p =? 0,001). Der var ingen signifikant forskel i tætheden af ​​H. pylori
eller graden af ​​glandulær atrofi eller intestinal metaplasi med IL-8 niveau i det gastriske biopsies.Table 4 Sammenhæng mellem interleukin-8 og H. pylori genotyper, kronisk inflammation, neutrofil aktivitet, og mavesår sygdom
H. pylorigenotypea
Interleukin-8 levelb
p-valuec
Median (IQR)
CagA

Absent
1090,3 (1310,8)
0,011 *
Present
1885,7 (1281,6)
Vaca
-S1
Fraværende
1245,8 (1550,2)
0,024 *
Present
1840,0 (1098,6)
Vaca
-s2
Fraværende
1840,0 (1597,5)
0,004 *
Present
965,6 (1205,1 )
Vaca
-S1? +? s2
Fraværende
1541,1 (1566,3)
0,818
Præsentere
1711,8 (1928,7)
CagA
? +? Vaca
-S1
Fraværende
1311,8 (1814,9)
0,021 *
Present
1901,7 (915,3)
CagA
? +? Vaca
-s2
Fraværende
1577,5 (1548,6)
0,713
Præsenter
1331,7 (?)
CagA
? +? Vaca
s1? +? s2
Fraværende
1541,1 (1625,9)
0,807
Præsentere
1711,8 (1803,6)
Histologisk findingsd
Kronisk betændelse
Ingen-Mild
689,2 (1420,6)
0.001 *
Moderat-Mærket
1835,7 (1345,3)
Neutrofil aktivitet
Ingen-Mild
1449,0 (1342,1)
0,007 *
Moderat-Mærket
1917,8 (2703,6)
mavesår
Fraværende
919,3 (1153,3)
0,001 *
Present
1890,6 (1638,4)
samtlige Alle patienter var positive for enten CagA
, Vaca
eller begge dele.
BPG /mg protein.
cMann-Whitney U
test.
dAccording til Updated Sydney systemet [40].
* Statistisk signifikant
Figur 1 Niveauer af interleukin-8 i maveslimhinden hos patienter med H. pylori med og uden genotyper CagA, VacA -S1 og VacA -s2. Disse udtrykkes som box plots. Enderne af stængerne angiver de 25. og 75. percentiler. Den 50. percentil er angivet med en linje, og den 10. og 90. percentiler angives med fejllinjer. P-værdierne blev beregnet ved anvendelse af Mann-Whitney U
test. * Angiver, at p-værdien er statistisk signifikant.
Figur 2 niveauer af interleukin-8 i maveslimhinden hos patienter med H. pylori med og uden genotyper CagA? +? Vaca -S1, CagA? +? Vaca -s2 og CagA? +? Vaca -S1? +? Vaca -s2. Disse udtrykkes som box plots. Enderne af stængerne angiver de 25. og 75. percentiler. Den 50. percentil er angivet med en linje, og den 10. og 90. percentiler angives med fejllinjer. P-værdierne blev beregnet ved anvendelse af Mann-Whitney U
test. * Viser at p-værdien er statistisk signifikant.
Figur 3 niveauer af interleukin-8 i maveslimhinden hos patienter med H. pylori og sværhedsgraden af ​​kronisk inflammation, neutrofil aktivitet og mavesår sygdom. Disse udtrykkes som box plots. Enderne af stængerne angiver de 25. og 75. percentiler. Den 50. percentil er angivet med en linje, og den 10. og 90. percentiler angives med fejllinjer. P-værdierne blev beregnet ved anvendelse af Mann-Whitney U
test. * Angiver, at p-værdien er statistisk signifikant.
En alt 58 (75,3%) patienter, som havde "Moderat-Mærket" kronisk inflammation i maveslimhinden havde pud, sammenlignet med 12 (54,5%) med 'Ikke desto Mild 'mens 31 (79,5%) patienter med' Moderat-Mærket "neutrofil aktivitet havde pud, sammenlignet med 39 (65,0%) af dem med 'Ingen-Mild' aktivitet. Men disse forskelle var ikke statistisk signifikante. Der var også nogen sammenhæng mellem tilstedeværelsen af ​​pud og sværhedsgraden af ​​kirtel atrofi, intestinal metaplasi eller H. pylori
tæthed på mavens biopsier.
Diskussion
Til vores viden, er dette den første undersøgelse for at undersøge foreningen mellem forekomsten af ​​CagA
, Vaca
-S1 og Vaca
-s2 genotyper i H. pylori
og sværhedsgraden af ​​kronisk gastritis og pud i en gruppe af patienter fra Mellemøsten. Vi har også påvist forholdet mellem disse faktorer med niveauerne af IL-8 i maveslimhinden validering af biologiske plausibilitet at disse bakterielle virulensfaktorer føre til induktion af cytokin IL-8, hvilket igen resulterer i mere alvorlig betændelse og /eller udvikling af PUD.
Der synes at være en geografisk variation i associering mellem H. pylori
genotyper og gastrisk inflammatorisk respons. Infektion med CagA
positive stammer af H. pylori
i de vestlige lande er rapporteret at forårsage mere alvorlig gastrisk betændelse i forhold til asiatiske lande, hvor resultaterne har været inkonsekvent [7], [20-24]. I vores undersøgelse både graden af ​​kronisk inflammation og neutrofil aktivitet i maveslimhinden var mere alvorlig hos patienter, der var inficeret med H. pylori
indeholdende CagA
og VacA
-S1 gener. Tilstedeværelsen af ​​både CagA
og VacA
-S1 syntes at have en synergistisk rolle for at øge sværhedsgraden af ​​inflammation i vores patienter. På den anden side er tilstedeværelsen af ​​VacA
-s2 forbedredes tilsyneladende sværhedsgraden af ​​kronisk inflammation samt neutrofil aktivitet uanset forekomsten af ​​CagA
, VacA
-S1 eller begge. Disse resultater er i overensstemmelse med tidligere publicerede studier, hvor der blev fundet Vaca
-s2 stammer at være forbundet med mindre inflammation [25]. Både CagA
og VacA
-S1 gener blev også uafhængigt forbundet med en øget risiko for PUD, mens VacA
-s2 gen syntes at have en mindre virkning. Patienter, som havde både CagA
og Vaca
-S1 gen havde den højeste risiko for pud. På den anden side er tilstedeværelsen af ​​VacA
-s2 faldt risikoen for PUD, om det var til stede alene eller med CagA
, VacA
-S1, eller begge dele. Disse resultater svarer til dem rapporteret fra de vestlige lande [20], [21], [24], selv om de fleste af patienterne i vores undersøgelse var fra Mellemøsten og det indiske subkontinent [26]. En nylig undersøgelse udført for at bestemme de genetiske tilhørsforhold H. pylori
isolater fra etniske arabere i Kuwait fandt, at disse stammer er tæt knyttet til den indoeuropæiske gruppe af organismen og klart adskiller sig fra de østasiatiske stammer [27]. Dette kunne være grunden til, at sammenslutningen af ​​CagA
, Vaca
-S1 og Vaca
-s2 og gastritis og pud i vores patienter synes at være den samme som rapporteret fra de vestlige lande.
pro-inflammatoriske cytokin IL-8 spiller en vigtig rolle i reguleringen af ​​mucosale neutrofil migration og aktivering. Vores resultater viser, at niveauet af IL-8 i maveslimhinden var forøget i nærvær af CagA
og VacA
-S1 genotyper af H. pylori
og de højeste niveauer blev set hos patienter, som var positive for begge disse gener. Tilstedeværelsen af ​​VacA
-s2 var forbundet med lavere niveauer af IL-8. Signifikant højere niveauer af IL-8 i maveslimhinden blev også set hos patienter, som havde mere alvorlig grad af kronisk inflammation og neutrofil aktivitet i mavens biopsier, såvel som dem, der havde PUD. Disse resultater er i overensstemmelse med tidligere rapporter, hvor koncentrationen af ​​maveslimhinden IL-8 niveauer er blevet korreleret med tilstedeværelsen af ​​virulens H. pylori
gener såsom CagA
is A [28], [29]. Imidlertid har nogle forskere rapporteret nogen forskel i IL-8 niveauer hos patienter med H. pylori
infektioner med og uden pud [30], mens andre har højere niveauer hos patienter med pud så dem med kun gastritis [31]. Denne inkonsistens i resultaterne af IL-8-produktion kan være på grund af forskellene i de metoder, der anvendes til at måle niveauet af cytokin i maveslimhinden. Vi har anvendt en ELISA baseret teknik, som kan være en mere følsom metode til cytokin kvantificering.
Med henvisning til andre faktorer, fandt vi ingen forskel i sværhedsgraden af ​​gastritis, tilstedeværelse af PUD eller niveauer af IL-8 mellem patienter med eller uden historie af rygning eller alkoholforbrug. Tilstedeværelsen af ​​PUD var dog hyppigere i denne gruppe patienter end tidligere fra Kuwait og andre steder [32] er blevet rapporteret. De forstyrrende virkninger af medikamenter blev minimeret ved kun at udvælge de patienter, som ikke havde været på nogen af ​​de nævnte medikamenter i mindst 4 uger før endoskopi. Flere andre H. pylori
faktorer som Vaca
-S1 undertyper (S1A og S1b), Vaca
midterste region undertyper (M1 og M2), ICEA og Dupa gener kan også påvirke virulens af denne organisme og dens virkninger på maveslimhinden [33]. Men vores undersøgelse ikke designet til at bestemme disse virulensfaktorer, og dette kan betragtes som en begrænsning af denne rapport. Udover bakterielle faktorer, host genetik også bidrage til patogenesen af ​​gastroduodenale sygdomme [34], [35]. Desuden er mange cytokin gen polymorfier afslører forskellige risiko gastriske og duodenale ulcus patienter [36], [37].
Konklusioner
Denne undersøgelse, som omfattede patienter fra Mellemøsten viser, at tilstedeværelsen af ​​H. pylori CagA
og Vaca
-S1 gener resulterer i induktion af højere niveauer af pro-inflammatoriske cytokin IL-8 i maveslimhinden, som ikke kun giver en mere markant intensiteten af ​​kronisk inflammation og neutrofil aktivitet i maveslimhinden, men også en højere forekomst af PUD. Tilstedeværelsen af ​​VacA
-s2 resultater i lavere niveauer af IL-8, såvel som mindre alvorlig betændelse og mindre PUD. Desuden vises tilstedeværelsen af ​​Vaca
-s2 at mindske virulens virkninger af CagA
og /eller Vaca
-S1 gener.
Patienter og metoder
Patienter og prøver
Undersøgelsen befolkning og fremgangsmåden til biopsi samling er tidligere blevet beskrevet [26], [32]. Kort fortalt er nævnt 120 på hinanden følgende, umarkerede voksne patienter til gastroskopi blev inviteret til at deltage i undersøgelsen. Patienter med koagulationsabnormiteter blev forudgående gastro-duodenale kirurgi udelukkes fra undersøgelsen. Patienter, som havde taget histamin type 2-receptor-antagonister, protonpumpehæmmere, antibiotika, bismuthsalte, aspirin eller ikke-steroide anti-inflammatoriske midler i de forudgående fire uger blev også udelukket. Forekomsten af ​​CagA
og VacA
genotyper hos disse patienter er blevet rapporteret tidligere [26].
Øvre gastrointestinal endoskopi blev udført på standardmåde. Alle endoskoper undergik en rengøring og desinfektion proces med en automatiseret vaskemaskine-desinfektionsmaskinen før hver procedure i henhold til retningslinjerne fra Det Europæiske Selskab for Gastrointestinal Endoskopi [38]. For hver patient blev fire biopsier taget fra gastriske antrum, inden for 2 cm af pylorus, under anvendelse steriliserede biopsi pincet Salg To biopsiprøver blev fikseret i bufret formalin, behandlet til paraffin, snittet og farvet med H &. E og HpSS [39]. Alle biopsier blev undersøgt individuelt af en højtstående gastrointestinal patolog, der var blindet til den kliniske oplysninger om patienterne. En biopsi blev scoret positiv for H. pylori
Hvis organismer blev set i lysmikroskop. Det opdaterede Sydney system blev anvendt til at score densiteten af ​​H. pylori
og graden af ​​kronisk inflammation, neutrofil aktivitet, glandulær atrofi og intestinal metaplasi på biopsier [40]. Patienter, som havde ingen eller mild kronisk inflammation i det gastriske biopsi blev kombineret i én gruppe (None-Mild gruppe), mens dem med moderat eller markant grad af inflammation blev inkluderet i den anden gruppe (Moderat-Mærket gruppe). Tilsvarende blev patienterne opdelt i to grupper (dvs. None-mild og moderat-mærkede) for neutrofil aktivitet, såvel som for intestinal metaplasi og glandulær atrofi.
QIA 'DNA mini kit (Qiagen, Hilden, Tyskland) blev anvendt at ekstrahere DNA fra biopsier. Renheden af ​​DNA blev bedømt beregne forholdet mellem optisk densitet (OD) ved 260-280 nm, og udbyttet blev kvantificeret ved absorbans ved 260 nm.
PCR-amplifikation af mål-DNA
Tabel 5 viser primerne anvendt i denne studere. Den CagA
F og CagA
R primere genererer et fragment på 183 basepar (bp) til påvisning af CagA
, mens primerne VA1F og VA1XRA give et 176 bp fragment for VacA
-S1 og 203 bp for Vaca
-s2 varianter [41], [42]. En præ-alikvoteret PCR Master Mix (Abgene, Surrey, UK) blev anvendt til PCR-amplifikation af mål-DNA. Det endelige reaktionsvolumen var 50L og indeholdt 25 pmol af hver primer og 50 ng DNA [43]. PCR blev udført efter præinkubering ved 94 ° C i 5 minutter, efterfulgt af 35 cykler ved 94 ° C, 50 ° C og 74 ° C for hver efterfulgt af en 5 minutters endelig udvidelse ved 74 ° C et minut. De amplificerede prøver blev analyseret ved elektroforese på 2% høj opløsning agarosegel i Tris-acetat-EDTA (TAE) puffer, som derefter blev farvet med ethidiumbromid ved 0,5 ug /ml [44]. Ultraviolet lys blev brugt til at visualisere bånd amplificeret DNA, som blev derefter photographed.Table 5 Primere anvendt i PCR til forstærkning af CagA, Vaca -S1 og Vaca -s2 sekvenser
DNA-område forstærkede
Primer

Primer sekvens
PCR-produkt (BPA)
CAGA
CAGA
F
5? -TTGACCAACAACCACAAACCGAAG-3?
183
CagA
R
5?-CTTCCCTTAATTGCGAGATTCC-3?
vacA
-s1
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
176
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
vacA
-s2
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
203
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
ABP:. Base pair
Måling af IL-8
To biopsiprøver blev frosset øjeblikkeligt i flydende nitrogen og opbevaret ved 80 ° C?. En p-værdi på < 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.

• DNA-kopi nummer profiler af mavekræft forløber lesions
• Ultrasonic sakse assistance kan forkorte konsollen tid i robot gastrektomi for tidlig gastrisk cancer