Sammenheng mellom Helicobacter pylori genotyper og alvorlighetsgraden av kronisk magekatarr, magesår sykdom og mageslimhinne interleukin-8 nivåer: Bevis fra en studie i Midtøsten

Sammenheng mellom Helicobacter pylori
genotyper og alvorlighetsgraden av kronisk magekatarr, magesår sykdom og mageslimhinne interleukin-8 nivåer: Bevis fra en studie i Midtøsten
Abstract
Bakgrunn Bedrifter Den varierte kliniske presentasjoner av Helicobacter pylori
(H. pylori
) infeksjon er mest sannsynlig på grunn av forskjeller i virulens av individuelle stammer, som bestemmer dens evne til å indusere produksjon av interleukin-8 (IL-8) i mageslimhinnen. Målet med denne studien var å undersøke sammenhengen mellom CagA, vacA-
s1 og vacA-
s2 genotyper av H. pylori Hotell og alvorlighetsgraden av kronisk gastritt og tilstedeværelse av magesår (PUD), og til korrelere disse med IL-8 nivåer i mageslimhinnen.
Metoder
mage mucosal biopsier ble innhentet fra pasienter under esophagogastroduodenoscopy. Alvorlighetsgraden av kronisk gastritt ble dokumentert ved hjelp av den oppdaterte Sydney system. H. pylori CagA
og Vaca
genotyper ble påvist ved PCR. . IL-8 nivåer i mageslimhinnen ble målt med ELISA
Resultater
H. pylori CagA Hotell og /eller Vaca
genotyper ble påvist hos 99 pasienter (gjennomsnittsalder 38,4 til 12,9, 72 hanner ), hvorav 52,5% var positive for CagA
, 44,4% for Vaca
S1 og 39,4% for Vaca
-s2; og 70,7% av pasientene hadde PUD. Alvorlighetsgraden av betennelse i mageslimhinnen ble økt med Vaca
S1 (p = 0,017) og redusert med Vaca
-s2 (p = 0,025), mens CagA
hadde ingen sammenheng. Graden av nøytrofile aktivitet var ikke assosiert med enten CagA
eller Vaca
S1, mens Vaca
-s2 var signifikant assosiert med redusert nøytrofile aktivitet (p = 0,027). PUD ble betydelig økt hos pasienter med CagA product: (p = 0,002) og Vaca
S1 (p = 0,031), og redusert i de med Vaca
-s2 (p = 0,011). Nivået av IL-8 ble betydelig økt hos pasienter med CagA product: (p = 0,011) og Vaca
S1 (p = 0,024), og lavere med Vaca
-s2 (p = 0,004). Høyere nivåer av IL-8 ble også funnet hos pasienter med mer alvorlig kronisk betennelse (p = 0,001), nøytrofile aktivitet (p = 0,007) og de med PUD (p = 0,001)
. Konklusjoner
Tilstedeværelse av Vaca
-s1 genotype av H. pylori
er assosiert med mer alvorlig kronisk betennelse, og høyere nivåer av IL-8 i den gastriske mukosa, så vel som høyere frekvens av PUD. Pasienter med Vaca
-s2 har mindre alvorlig gastritt, lavere nivåer av IL-8, og lavere forekomst av PUD. Tilstedeværelsen av CagA
genotype er ikke forbundet med alvorlighetsgraden av gastritt eller IL-8 induksjon i mageslimhinnen. Foreningen av CagA
med PUD kan være en refleksjon av sin tilstedeværelse med Vaca
-s1 genotype.
Nøkkelord
Helicobacter pylori CagA Vaca-s1 Vaca-s2 gastritt Interleukin-8 mavesår Bakgrunn
Helicobacter pylori plakater (H. pylori
) koloniserer slimhinnen av den menneskelige mage og etablerer en langsiktig infeksjon [1]. Det fører til utvikling av kronisk gastritt, mavesår (PUD), slimhinne-assosiert lymfoid vev (MALT) lymfom og gastrisk karsinom [2], [3]. Omfanget og alvorligheten av disse forbindelser avhenger av flere elementer, slik som bakterielle virulensfaktorer, alder av verten, genetisk disposisjon, immunrespons og miljøfaktorer [4-6].
De to viktigste virulens markører for H. pylori
er cytotoxin forbundet A (CagA
) og vacuolating cytotoxin A (Vaca
) gener [6], [7]. Den CagA
genet ikke er til stede i hver H. pylori
belastning, men er forbundet med flere alvorlige kliniske resultater som mer alvorlig betennelse av mageslimhinnen, såvel som høyere prevalens av PUD og gastrisk karsinom [8- 10]. Vaca
genet er til stede i det hele tatt H. pylori
stammer og er assosiert med PUD [11]. Vaca
genet inneholder minst tre variable regioner, signalet (e) region, middels (i) region midt (m) region. Den s-regionen eksisterer som S1 og S2 typer [12], [13]. Vaca
S1 stammer er assosiert med mer alvorlig mage betennelse og PUD uavhengig av CagA, etter mens Vaca
-s2 stammer er forbundet med lavere sår utbredelse og mindre alvorlige betennelser [14].
H . pylori
infeksjon resulterer i rekruttering av nøytrofiler, lymfocytter og makrofager i den gastriske slimhinne ved induksjon av flere cytokiner slik som TNF-a ?, IL-6 og IL-8 [15-17]. IL-8 er en viktig mediator i den immunpatogenese av kronisk gastritt forårsaket av H. pylori product: [16]. Det har blitt vist at CagA
og Vaca
-S1 positive stammer av H. pylori
indusere produksjonen av IL-8 i den gastriske slimhinne, både in vivo og in vitro [16], [18], [19]. Vaca
-s2 genet er ikke forbundet med IL-8 induksjon [18]. I tillegg er det en sammenheng mellom de mucosale nivåer av IL-8 og alvorlighetsgraden av gastritt og nærvær av PUD også blitt rapportert [19]. De fleste studier av sammenhengen mellom genotyper av H. pylori
og kronisk magekatarr, magesår sykdom og IL-8 nivåer har vært gjennomført i de vestlige populasjoner, og ingen tidligere studie har undersøkt disse foreningene i Midtøsten. Videre, de fleste av publiserte studier har bare undersøkt enten en enkelt eller noen av disse foreningene.
Hensikten med denne studien var å fastslå sammenhengen mellom tilstedeværelsen av CagA
, Vaca
S1 og Vaca
-s2 genotyper i H. pylori Hotell og alvorlighetsgraden av gastritt og PUD, og ​​å relatere disse med nivåene av IL-8 i en gruppe av pasienter fra Midt-Østen. Vi har også forsøkt å undersøke alle disse inter-relaterte foreninger i den samme gruppen av pasienter for å validere biologisk plausibilitet at de bakterielle virulensfaktorer føre til induksjon av cytokin IL-8, som igjen resulterer i mer alvorlig betennelse eller utvikling av PUD . Search Results
esophagogastroduodenoscopy og mage biopsi ble utført på 120 voksne pasienter. H. pylori
ble sett på histopatologi i 98 av disse pasientene, som alle var positive for CagA
og /eller Vaca
. En pasient hadde Vaca
på PCR, men var ikke positivt for H. pylori
på histopatologi ble også inkludert i analysen. Derfor videre analyse ble utført i disse 99 pasienter (72,7% menn, 27,3% kvinner, gjennomsnittsalder 38,4 år) (tabell 1). En historie om PUD var til stede i 27,3% av pasientene, og den vanligste indikasjon for henvisning var dyspepsi (84,8%). Tabell 1 sosiodemografiske og kliniske kjennetegn ved 99 pasienter med H. pylori-infeksjon i Kuwait
Karakteristisk

Alder ved diagnose (år)
Mean ± SD
38,4 ± 12,9
Median
35,5
Range
18-75
Kjønn
n product: (%)
Mann fra 72 product: (72,7)
Kvinne
27 product: (27.3)
Nasjonalitet
Kuwait
52 product: (52,5)
Bangladesh
15 product: (15.2)
Egypt
8 product: (8.1)
State-mindre arabere
5 product: ( 5.1)
Syria
5 product: (5.1)
andre parten
14 plakater (14,1)
Past historie med mavesår
27 product: (27,3)
Tidligere historie med H. pylori
infeksjon
4 product: (4.0)
History of sigarettrøyking
38 product: (38,4)
History of alkoholforbruk
6 product: (6.1)
Indikasjon for esophagogastroduodenoscopy
dyspepsi
84 product: (84,8)
øvre gastrointestinal blødning
6 product: (6.1)
Halsbrann
5 product: (5.1)
Anemi
to plakater (2,0)
Vedvarende oppkast
to product: (2.0)
aIndia (4), Iran (2), Pakistan ( 2), Saudi-Arabia (2), Afghanistan (1), Jordan (1), Somalia (1), Jemen (1).
hyppigste abnormitet sett på endoskopi var PUD (70,7%) (tabell 2). Endoskopisk bevis for mukosal inflammasjon i mage og duodenum ble observert på 57,6% og 29,3% av pasientene, respektivt. Kronisk betennelse var "None-Mild" i 22,2% av pasientene, og "Moderat-Merket" i 77,8%. Nøytrofile aktivitet var 'None-Mild "i 60,6%, og" Moderat-Merket "i 39,4% av patients.Table 2 Resultater av endoskopisk, histologisk, H. pylori genotype, og IL-8-nivå hos pasienter med H. pylori infeksjon i Kuwait
Karakteristisk
n
%
esophagogastroduodenoscopy findingsa
Duodenalsår
61 product: (61,6)
Gastritt
57 product: (57,6)
duodenitt
29 product: (29.3)
magesår
13 product: (13.1)
Esophagitis
10 product: (10.1)
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP
1 (1,0)
Histologisk findingsb
H. pylori
stede
98 product: (99,0)
None -Mild
44 product: (44,4)
Moderat-Merket
54 product: (54,5)
Kronisk betennelse
None-Mild
22 product: (22,2)
Moderat-Merket
77 product: (77,8)
nøytrofile aktivitet
None-Mild
60
(60,6)
Moderat-Merket
39 product: ( 39.4)
Glandular atrofi
None-Mild
65 product: (65,7)
Moderat-Merket
34 product: (34,3)
Intestinal metaplasi
None-Mild
94 product: (94,9)
Moderat-Merket
5 product: (5.1)
H. pylori
genotype
CagA
52 product: (52,5)
Vaca
-s1
44 product: (44,4)
Vaca
-s2
39 product: (39.4)
Vaca
-s1? +? s2
10 product: (10.1)
CagA
? +? Vaca
S1 31 plakater (31,3)
CagA
+ Vaca
-s2
8 product: (8.1)
CagA
+ Vaca
? - s1? +? s2
7 product: (7.1)
IL-8 nivå (pg /mg protein)
Mean ± SD
1891,5 ± 1526,8
Median (IQR)
1567,4 (1566,3)
asome pasientene hadde mer enn ett funn på endoskopi.
bAccording til Oppdatert Sydney systemet [40].
tilstedeværelsen av CagA
, Vaca
S1 og Vaca
-s2 gener ble funnet i 52,5%, 44,4% og 39,4% av pasientene, mens 10,1% var positive for
både Vaca -s1 vacA-
s2. Den CagA
genet ble funnet i kombinasjon med Vaca
S1 (CagA
? +? Vaca
S1) i 31,3% av pasientene, med Vaca
-s2 (CagA
? +? Vaca
-s2) i 8,1% og med både Vaca
S1 og Vaca
-s2 (CagA
? +? Vaca
-s1? +? s2) i 7,1% av pasientene. IL-8 nivåer var tilgjengelig i 77 pasienter med en median verdi på 1567,4 (IQR 1566,3) pg /mg protein.
Tabell 3 viser sammenhengen mellom H. pylori
genotyper og alvorlighetsgraden av kronisk betennelse, nøytrofile aktivitet og tilstedeværelse av PUD. Pasienter som ble infisert med H. pylori
inneholder både CagA Hotell og Vaca
S1 gener var mest sannsynlig å ha "Moderat-merket 'grad av kronisk betennelse (OR = 6,7, 95% KI?: 1,4 til 31,4; p = 0,016)?. Pasienter med Vaca
-s1 genet alene hadde også en betydelig mer "Moderat-merket 'grad av kronisk betennelse (OR = 3,9, 95% KI:? 1,2 til 12,0; p = 0,017), mens de med Vaca
-s2 hadde signifikant mindre kronisk betennelse (OR = 0,3, 95% KI: 0,1-0,8; p = 0,025?). Tilstedeværelsen av CagA
eller Vaca
S1 gener enten uavhengig eller sammen ikke påvirke alvorlighetsgraden av nøytrofile aktivitet i mage biopsier. Pasienter med Vaca
-s2 genet hadde signifikant mindre Moderat-merket 'grad av nøytrofile aktivitet (OR = 0,3, 95% KI: 0,1-0,8; p = 0,027?). Andelen av pasienter med PUD var høyest i de med CagA
genet (OR = 4,8, 95% KI:? 01.08 til 12.05; p = 0,002), etterfulgt av de med Vaca
-s1 genet ( OR = 2,8, 95% KI:? 1.1 til 7.4; p = 0,031), mens de med Vaca
-s2 hadde lavest andel av PUD (OR = 0,3, 95% KI: 0,1-0,7; p = ? 0,011). Tilstedeværelsen av både CagA Hotell og Vaca
-s1 genet økte risikoen for PUD mer enn tilstedeværelsen av disse genotypene individuelt (OR = 6,3, 95% KI: 1,6 til 23,4; p = 0,006?) .table 3 Sammenheng mellom H. pylori genotyper og kronisk betennelse, nøytrofile aktivitet og mavesår
H. pylorigenotypea (n)
kronisk inflammationb
nøytrofile activityb
magesår sykdom
None-Mild
Moderat-Merket
OR (95% CI) c
p-verdi
None-Mild
Moderat-Merket
OR (95% CI) c
p-verdi
Fraværende
Present

OR (95% CI) c
p-verdi product: (n 22) product: (n 77) product: (n 60)
product: (n 39) product: (n 29) product: (n 70)
n (%)
n (%)

n (%)
n (%)
n (%)
n (%)

CagA
Positiv (52)
8 (15,4)
44 (84,6)
2,4 (0,9 til 6,7)
0,074
29 (55,8)
23 (44,2)
1,5 (0,6 til 3,4)
0,325
8 (15,4)
44 (84,6)
4.8 (01.08 til 12.05)
0,002 *
Negativ (47)
14 (29,8)
33 (70,2)
Referanse
31 (66,0)
16 (34,0)
Reference
21 (44,7)
26 (55,3)
Reference
Vaca
-s1
Positiv (44)
5 (11,4)
39 (88,6)
3,9 ( 1,2 til 12,0)
0,017 *
22 (50,0)
22 (50,0)
2,2 (0,9 til 5,2)
0,057
8 (18,2)
36 (81,8)
2.8 (1.1 til 7.4)
0,031 *
Negativ (55)
17 (30,9)
38 (69,1)
Referanse
38 (69,1)
17 (30.9)
Reference 21 (38,2)
34 (61,8)
Reference
Vaca
-s2
Positiv (39)
13 (33,3)
26 (66,7)
0,3 (0,1-0,8)
0,025 *
29 (74,4)
10 (25,6)
0,3 (0,1-0,8)
0,027 *
17 (43,6)
22 (56,4)
0,3 (0,1-0,7)
0,011 *
Negativ (60)
9 (15,0)
51 (85,0)
Reference
31 (51,7)
29 (48,3)
12 (20,0)
48 (80,0)
Reference
Vaca
-s1? +? S2 <
Reference br> Positiv (10)
3 (30,0)
7 (70,0)
0,5 (0,1 til 2,2)
0,445
8 (80,0)
2 (20,0)
0,3 (0,0 til 1,7)
0,191
2 (20,0)
8 (80,0)
1,8 (0,3 til 9,1)
0,478
Negativ (89)
19 (21,3 )
70 (78,7)
Reference
52 (58,4)
37 (41,6)
Referanse
27 (30,3)
62 (69,7)
Reference
CagA
? +? Vaca
-s1
Positiv (31)
2 (6,5)
29 (93,5)
6,7 (1,4 til 31,4)
0,016 *
18 (58,1)
13 (41,9)
0,9 (0,9-1,0)
0,737
3 (9,7)
28 (90,3)
6,3 (1,6 til 23,4)
0,006 *
Negativ (68)
20 (20,9)
48 (70,6)
Referanse
42 (61,8)
26 (38,2)
Reference
26 (38,2)
42 (61,8)
Reference
CagA
? +? Vaca
-s2
Positiv (8)
3 (37,5)
5 ( 62,5)
0,4 ​​(0,1 til 2,2)
0,337
5 (62,5)
3 (37,5)
0,9 (0,2 til 4,3)
0,959
2 (25,0)
6 (75,0)
1,2 (0,2 til 6,5)
0,810
Negativ (91)
19 (20,9)
72 (79,1)
Referanse
55 (60,4 )
36 (39,6)
Referanse
27 (29,7)
64 (70,3)
Reference
CagA
? +? Vaca
-s1? +? s2
Positiv (7)
2 (28.6)
5 (71,4)
0,9 (0,9-1,0)
0,255
5 (71,4)
2 (39.4)
0,5 (0,1 til 3,2)
0,537
1 (14,3)
6 (85,7)
2,7 (0,3 til 24,5)
0,359
Negativ (92)
20 ( 21,7)
72 (78,3)
Referanse
55 (59,8)
37 (40,2)
Referanse
28 (30,4)
64 (69,6)
Reference
Aall pasientene var positive for enten CagA
, Vaca
eller begge deler.
bAccording til Oppdatert Sydney systemet [40].
Cage og kjønnsjustert odds ratio. product: * Statistisk signifikant.
Tabell 4 viser sammenhengen mellom nivået av IL-8 i mageslimhinnen og H. pylori
genotyper og histologiske funksjoner og PUD. Medianverdien for IL-8 var signifikant høyere hos pasienter infisert med H. pylori
med CagA product: (p = 0,011?) Og Vaca
S1 gener (p = 0,011 og 0,024, henholdsvis?); og betydelig lavere i de med Vaca
-s2 genet (p = 0,004) (figur 1). De høyeste nivåene av IL-8 ble funnet hos pasienter som var positive for både CagA Hotell og Vaca
S1 (figur 2). Korrelasjon av mageslimhinne IL-8 nivåer med alvorlighetsgraden av kronisk betennelse viste at pasienter som hadde 'Moderat-merket "kronisk betennelse hadde signifikant høyere median IL-8 nivå sammenlignet med de som hadde' None-Mild" betennelse (p = 0,001 ) (figur 3). Pasienter med Moderat-merket nøytrofile aktivitet på mage biopsi hadde også signifikant høyere median IL-8 nivåer sammenlignet med de som hadde 'None-Mild "aktivitet (p = 0,007). Median nivåer av IL-8 ble også signifikant forhøyet i mage-biopsier fra pasienter med PUD sammenlignet med dem som ikke har sår (p = 0,001). Det var ingen signifikant forskjell i tettheten av H. pylori
eller graden av kjertel atrofi eller intestinal metaplasi med den IL-8-nivå i den gastriske biopsies.Table 4 Korrelasjon mellom interleukin-8 og H. pylori-genotyper, kronisk inflammasjon, nøytrofile aktivitet, og mavesår
H. pylorigenotypea
interleukin-8 levelb
p-verdiC
Median (IQR)
CagA <.no> Fraværende
1090,3 (1310,8)
0,011 *
Present
1885,7 (1281,6)
Vaca
-s1
Fraværende
1245,8 (1550,2)
0,024 *
Present
1840,0 (1098,6)
Vaca
-s2
Fraværende
1840,0 (1597,5)
0,004 *
Present
965,6 (1205,1 )
Vaca
-s1? +? s2
Fraværende
1541,1 (1566,3)
0,818
Presenter
1711,8 (1928,7)
CagA
? +? Vaca
-s1
Fraværende
1311,8 (1814,9)
0,021 *
Present
1901,7 (915,3)
CagA
? +? Vaca
-s2
Fraværende
1577,5 (1548,6)
0,713
Presenter
1331,7 (?)
CagA
? +? Vaca
s1? +? s2
Fraværende
1541,1 (1625,9)
0,807
Presenter
1711,8 (1803,6)
Histologisk findingsd
Kronisk betennelse
None-Mild
689,2 (1420,6)
0,001 *
Moderat-Merket
1835,7 (1345,3)
nøytrofile aktivitet
None-Mild
1449,0 (1342,1)
0,007 *
Moderat-Merket
1917,8 (2703,6)
magesår
Fraværende
919,3 (1153,3)
0,001 *
Present
1890,6 (1638,4)
Aall pasientene var positive for enten CagA
, Vaca
eller begge deler.
BPG /mg protein.
cMann-Whitney U
test.
dAccording til Oppdatert Sydney systemet [40]. product: * Statistisk signifikant
Figur 1 Nivåer av interleukin-8 i mageslimhinnen hos pasienter med H. pylori med og uten genotyper CagA, Vaca S1 og Vaca -s2. Disse er uttrykt som boksplott. Endene av linjene viser den 25. og 75. percentil. 50-persentilen er indikert med en linje, og den 10. og 90th persentiler er angitt med feilfelt. P-verdiene ble beregnet ved hjelp av Mann-Whitney U
test. * Viser at p-verdien er statistisk signifikant.
Figur 2 nivåer av interleukin-8 i mageslimhinnen hos pasienter med H. pylori med og uten genotyper CagA? +? Vaca S1, CagA? +? Vaca -s2 og CagA? +? Vaca -s1? +? Vaca -s2. Disse er uttrykt som boksplott. Endene av linjene viser den 25. og 75. percentil. 50-persentilen er indikert med en linje, og den 10. og 90th persentiler er angitt med feilfelt. P-verdiene ble beregnet ved hjelp av Mann-Whitney U
test. * Viser at p-verdien er statistisk signifikant.
Figur 3 nivåer av interleukin-8 i mageslimhinnen hos pasienter med H. pylori og alvorlighetsgraden av kronisk betennelse, nøytrofil aktivitet og mavesår. Disse er uttrykt som boksplott. Endene av linjene viser den 25. og 75. percentil. 50-persentilen er indikert med en linje, og den 10. og 90th persentiler er angitt med feilfelt. P-verdiene ble beregnet ved hjelp av Mann-Whitney U
test. * Viser at p-verdien er statistisk signifikant., En totalt 58 (75,3%) av pasientene som hadde "Moderat-merket" kronisk betennelse i mageslimhinnen hadde PUD, sammenlignet med 12 (54,5%) med "Ingen- mild "mens 31 (79,5%) pasienter med" Moderat-merket nøytrofile aktivitet hadde PUD, sammenlignet med 39 (65,0%) av de med "None-mild 'aktivitet. Men disse forskjellene var ikke statistisk signifikant. Det var heller ingen sammenheng mellom tilstedeværelsen av PUD og alvorlighetsgraden av kjertler atrofi, intestinal metaplasi eller H. pylori
tetthet på mage biopsier.
Diskusjon
Så vidt vi vet, er dette den første studien å undersøke sammenhengen mellom tilstedeværelsen av CagA
, Vaca
S1 og Vaca
-s2 genotyper i H. pylori Hotell og alvorlighetsgraden av kronisk gastritt og PUD i en gruppe pasienter fra Midt-Østen. Vi har også vist at forholdet av disse faktorene med nivåene av IL-8 i den gastriske slimhinne validere den biologiske troverdighet at disse bakteriell virulens faktorer fører til induksjon av cytokin IL-8, som igjen resulterer i mer alvorlig betennelse og /eller utvikling av PUD.
det synes å være en geografisk variasjon i sammenhengen mellom H. pylori
genotyper og mage inflammatorisk respons. Infeksjon med CagA
positive stammer av H. pylori
i vestlige land er rapportert å forårsake mer alvorlig mage betennelse i forhold til asiatiske land, der resultatene har vært inkonsekvent [7], [20-24]. I vår studie både graden av kronisk betennelse og nøytrofile aktivitet i mageslimhinnen var mer alvorlig hos pasienter som ble infisert med H. pylori
inneholder CagA Hotell og Vaca
S1 gener. Tilstedeværelsen av både CagA Hotell og Vaca
-s1 syntes å ha en synergistisk rolle i å øke graden av betennelse i våre pasienter. På den annen side, nærværet av Vaca
-s2 ut til å forbedre graden av kronisk inflammasjon, så vel som nøytrofil aktivitet uavhengig av tilstedeværelsen av CagA
, Vaca
-s1 eller begge deler. Disse funnene er i tråd med tidligere publiserte studier der Vaca
-s2 stammer ble funnet å være assosiert med mindre inflammasjon [25]. Både CagA Hotell og Vaca
S1 gener ble også uavhengig assosiert med økt risiko for PUD, mens Vaca
-s2 genet så ut til å ha mindre effekt. Pasienter som hadde både CagA
og Vaca
-s1 genet hadde høyest risiko for PUD. På den annen side, nærværet av Vaca
-s2 redusert risiko for PUD, enten det var til stede alene eller sammen med CagA
, Vaca
-s1, eller begge deler. Disse resultatene er lik de rapporterte fra de vestlige landene [20], [21], [24], selv om de fleste av pasientene i vår studie var fra Midtøsten og det indiske subkontinent [26]. En fersk undersøkelse utført for å bestemme de genetiske slektskap av H. pylori
isolater fra etniske arabere i Kuwait fant at disse stammene er nært knyttet til den indo-europeiske gruppen av organismen og klart atskilt fra de østasiatiske stammer [27]. Dette kan være grunnen til at foreningen av CagA
, synes Vaca
S1 og Vaca
-s2 og gastritt og PUD i våre pasienter å være lik den som er rapportert fra de vestlige landene.
pro-inflammatoriske cytokin IL-8 spiller en viktig rolle i reguleringen av slimhinne nøytrofil migrering og aktivering. Våre resultater viser at nivået av IL-8 i mageslimhinnen ble økt i nærvær av CagA Hotell og Vaca
S1 genotyper av H. pylori Hotell og de høyeste nivåene ble sett hos pasienter som var positive for begge disse genene. Tilstedeværelsen av Vaca
-s2 var assosiert med lavere nivåer av IL-8. Betydelig høyere nivåer av IL-8 i mageslimhinnen ble også sett hos pasienter som hadde mer alvorlig grad av kronisk inflammasjon og nøytrofil aktivitet i mage biopsier, så vel som de som hadde PUD. Disse resultatene er i overensstemmelse med tidligere rapporter hvor nivåene av gastrisk slimhinne IL-8 nivåer er blitt korrelert med tilstedeværelse av virulens H. pylori
gener som CagA
og is A [28], [29]. Imidlertid har enkelte forskere rapporterte ingen forskjell i IL-8 nivåer hos pasienter med H. pylori
infeksjoner med og uten PUD [30], mens andre har høyere nivåer hos pasienter med PUD da de med bare gastritt [31]. Dette avviket i resultatene av IL-8-produksjon kan være på grunn av forskjeller i de metoder som benyttes for å måle nivået av cytokin i den gastriske mucosa. Vi har benyttet en ELISA-basert teknikk, som kan være en mer følsom metode cytokin kvantifisering.
Med referanse til andre faktorer, fant vi ingen forskjell i graden av gastritt, tilstedeværelse av PUD eller nivåer av IL-8 mellom pasienter med eller uten historie med røyking eller alkohol. Tilstedeværelsen av PUD var imidlertid hyppigere i denne pasientgruppen enn det som har vært rapportert tidligere fra Kuwait, så vel som andre steder [32]. De konfunderende effekter av medisiner ble minimert ved å bare velge de pasientene som ikke hadde vært på noen av de nevnte medisiner i minst 4 uker før endoskopi. Flere andre H. pylori
faktorer som Vaca
S1 undergrupper (S1 A og s1b), Vaca
midtre region undergrupper (M1 og M2), ICEA og Dupa gener kan også påvirke virulens av denne organismen og dens virkning på den gastriske slimhinne [33]. Men vår studie var ikke designet for å bestemme disse virulensfaktorer, og dette kan anses som en begrensning av denne rapporten. Dess bakterielle faktorer, verts genetikk også bidra til patogenesen av gastroduodenale sykdommer [34], [35]. I tillegg har mange cytokingen polymorfismer avsløre ulik risiko i mage og duodenal sår pasienter [36], [37].
Konklusjoner
Denne studien som inkluderte pasienter fra Midt-Østen viser at tilstedeværelse av H. pylori CagA
og Vaca
S1 gener resulterer i induksjon av høyere nivåer av pro-inflammatoriske cytokin IL-8 i mageslimhinnen, noe som ikke bare fører til en mer markert intensitet av kronisk betennelse og nøytrofile aktivitet i mageslimhinnen, men også høyere forekomst av PUD. Tilstedeværelsen av Vaca
-s2 resulterer i lavere nivåer av IL-8, så vel som mindre alvorlig betennelse og mindre PUD. I tillegg tilstedeværelsen av Vaca
-s2 ser ut til å redusere virulens effekter av CagA Hotell og /eller Vaca
S1 gener.
Pasienter og metoder
Pasienter og prøver
studien befolkning og fremgangsmåten for biopsi samlingen er blitt beskrevet tidligere [26], [32]. Kort, 120 sammenhengende, uselekterte voksne pasienter henvist for esophagogastroduodenoscopy ble invitert til å delta i studien. Pasienter med koagulasjonsabnormaliteter, ble før gastro-duodenal kirurgi ekskludert fra studien. Pasienter som hadde tatt histamin type 2-reseptorantagonister, protonpumpehemmere, antibiotika, vismut salter, acetylsalisylsyre eller ikke-steroide antiinflammatoriske midler i de foregående fire uker ble også ekskludert. Forekomsten av CagA Hotell og Vaca
genotyper hos disse pasientene er blitt rapportert tidligere [26].
Øvre gastrointestinal endoskopi ble utført i en standard måte. Alle endoskop gikk en rengjøring og desinfeksjon prosess med en automatisert vaskedekontaminatoren før hver prosedyre i henhold til retningslinjene fra European Society of Gastrointestinal Endos [38]. For hver pasient ble fire biopsier tatt fra mage antrum, innen 2 cm av pylorus, ved hjelp av steriliserte biopsitang
To biopsiprøver ble fiksert i formalin, bearbeidet til parafin, seksjonert og farget med H &. E og HpSS [39]. Alle biopsier ble undersøkt individuelt av en senior gastrointestinal patolog som var blindet for den kliniske opplysninger om pasientene. En biopsi ble scoret positivt for H. pylori
hvis organismer ble sett på lysmikroskopi. Den oppdaterte Sydney systemet ble brukt å score tettheten av H. pylori Hotell og grad av kronisk betennelse, nøytrofile aktivitet, kjertel atrofi og intestinal metaplasi på biopsier [40]. Pasienter som hadde ingen eller mild kronisk inflammasjon i mage biopsi ble kombinert i en gruppe (Ingen Mild-gruppe), mens de med moderat til markert grad av betennelse ble inkludert i den andre gruppen (Lett-Merket gruppe). Tilsvarende pasienter ble delt inn i to grupper (dvs. ingen-mild og moderat-merket) for nøytrofile aktivitet, samt for intestinal metaplasi og kjertler atrofi.
QIA 'DNA mini kit (Qiagen, Hilden, Tyskland) ble brukt å trekke ut DNA fra biopsier. Renheten av DNA ble bestemt å beregne forholdet av optisk tetthet (OD) ved 260-280 nm, og utbyttet ble kvantifisert ved absorbans ved 260 nm.
PCR-amplifisering av mål-DNA
Tabell 5 viser primerne anvendt i denne studere. Den CagA
F og CagA
R primere generere et fragment av 183 basepar (bp) for påvisning av CagA
, mens primere VA1F og VA1XRA gi et 176 bp fragment for Vaca
S1 og 203 bp for Vaca
-s2 varianter [41], [42]. En pre-porsjonert PCR masterblanding (Abgene, Surrey, UK) ble anvendt for PCR-amplifisering av mål-DNA. Det endelige reaksjonsvolum var 50L og inneholdt 25pmol av hver primer og 50 ng DNA [43]. PCR ble utført etter preinkubering ved 94 ° C i 5 minutter, etterfulgt av 35 sykluser ved 94 ° C, 50 ° C og 74 ° C i ett minutt hver, etterfulgt av en 5 minutters avsluttende forlengelsestrinn ved 74 ° C. De amplifiserte prøver ble analysert ved elektroforese på 2% med høy oppløsning agarosegel i Tris-acetat-EDTA (TAE) -buffer, som så ble farget med etidiumbromid ved 0,5 ug /ml [44]. Ultrafiolett lys ble brukt til å visualisere bånd amplifisert DNA, som deretter ble photographed.Table 5 Primere som brukes i PCR for forsterkning av CagA, Vaca S1 og Vaca -s2 sekvenser
DNA region forsterket
Primer <.no> Primer sekvens
PCR-produkt (BPA)
CagA
CagA
F
5? -TTGACCAACAACCACAAACCGAAG-3?
183
CagA
R
5?-CTTCCCTTAATTGCGAGATTCC-3?
vacA
-s1
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
176
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
vacA
-s2
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
203
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
ABP:. basepar
Måling av IL-8
To biopsiprøver ble frosset umiddelbart i flytende nitrogen og lagret ved 80 ° C?.

• DNA kopi nummer profiler av magekreft forløper lesions
• Ultralyd saks assistanse kan forkorte konsollen tid i robot gastrektomi for tidlig magekreft