Associatie tussen Helicobacter pylori genotypen en de ernst van chronische gastritis, maagzweer en maagslijmvlies interleukine-8 niveaus: Bewijs uit een studie in het Midden-East

associatie tussen Helicobacter pylori
genotypes en de ernst van chronische gastritis, maagzweer en maagslijmvlies interleukine-8 niveaus: Bewijs uit een studie in het Midden-Oosten
Abstract achtergrond
het gevarieerde klinische presentaties van Helicobacter pylori
(H. pylori
) infectie zijn het meest waarschijnlijk te wijten aan verschillen in de virulentie van afzonderlijke stammen, waarbij onvoldoende productie van interleukine-8 (IL-8) in het maagslijmvlies induceren bepaalt. was het doel van deze studie om associatie tussen cagA, vakantiekampen
s1 en vakantiekampen
s2 genotypen van H. pylori
en de ernst van chronische gastritis en de aanwezigheid van een maagzweer (PUD), en na te gaan correleren met IL-8 niveaus in het maagslijmvlies.
Methods
maagslijmvlies biopsies werden verkregen van patiënten tijdens gastroscopie. De ernst van chronische gastritis werd gedocumenteerd met de bijgewerkte Sydney systeem. H. pylori cagA
en Vaca
genotypen werden gedetecteerd door PCR. . De IL-8 niveaus in het maagslijmvlies werden gemeten met ELISA
Resultaten
H. pylori cagA Kopen en /of VACA
genotypen werden gedetecteerd in 99 patiënten (gemiddelde leeftijd 38,4-12,9; 72 mannen ), van wie 52,5% was positief voor cagA
, 44,4% voor de Vaca
-s1 en 39,4% voor de Vaca
-s2; en 70,7% patiënten PUD. De ernst van de ontsteking in maagslijmvlies werd verhoogd met Vaca
-s1 (p = 0,017) en verminderde met Vaca
-s2 (p = 0,025), terwijl cagA
had geen associatie. De mate van neutrofielen activiteit werd niet geassocieerd met ofwel cagA golfreizen of Vaca
-s1, terwijl Vaca
-s2 was significant geassocieerd met een verminderde neutrofielen activiteit (p = 0,027). PUD was significant verhoogd bij patiënten met cagA
(p = 0,002) en Vaca
-s1 (p = 0,031) en verminderde bij patiënten met Vaca
-s2 (p = 0,011). Het niveau van IL-8 was significant verhoogd bij patiënten met cagA
(p = 0,011) en Vaca
-s1 (p = 0,024) en lager bij Vaca
-s2 (p = 0,004). Hogere niveaus van IL-8 werden ook gevonden bij patiënten met een ernstige chronische ontsteking (p = 0,001), neutrofiel activiteit (p = 0,007) en die met PUD (p = 0,001).
Conclusies
Aanwezigheid van VACA
-s1 genotype van H. pylori
geassocieerd met ernstige chronische ontsteking en hogere niveaus van IL-8 in het maagslijmvlies, alsmede hogere frequentie van PUD. Patiënten met Vaca
-s2 hebben minder ernstige gastritis, lagere niveaus van IL-8, en lagere tarieven van PUD. De aanwezigheid van cagA
genotype wordt niet geassocieerd met de ernst van gastritis of IL-8-inductie in het maagslijmvlies. De associatie van cagA hotels met PUD kan een weerspiegeling van zijn aanwezigheid bij Vaca
-s1 genotype zijn.
Sleutelwoorden
Helicobacter pylori cagA Vaca-s1 Vaca-s2 Gastritis Interleukine-8 maagzweer ziekte Achtergrond
Helicobacter pylori
(H. pylori
) koloniseert de mucosa van de humane maag en wordt een langdurige infectie [1]. Het leidt tot de ontwikkeling van chronische gastritis, maagzweer (PUD)-mucosaal lymfeweefsel (MALT) lymfomen en maagcarcinoom [2], [3]. De omvang en ernst van deze associaties afhankelijk van verschillende elementen, zoals bacteriële virulentiefactoren leeftijd van de gastheer, genetische gevoeligheid, immuunrespons en omgevingsfactoren [4-6]. Ondernemingen De twee belangrijkste virulentie markers van H. pylori
zijn de cytotoxine bijbehorende A (cagA
) en de vacuolating cytotoxine A (Vaca
) genen [6], [7]. De cagA
gen niet in alle H. pylori
stam, maar wordt geassocieerd met ernstige klinische resultaten zoals meer ernstige ontsteking van het maagslijmvlies, alsmede hogere prevalentie van PUD en maagcarcinoom [8- 10]. De Vaca
gen is aanwezig in alle H. pylori
stammen en wordt geassocieerd met PUD [11]. De Vaca
-gen bevat ten minste drie variabele gebieden, het signaal (s) regio, tussenproduct (i) regio en midden (m) regio. De s-regio bestaat als s1 en s2 types [12], [13]. De Vaca
-s1 stammen worden geassocieerd met meer ernstige maagontsteking en PUD onafhankelijk van cagA,
terwijl Vaca
-s2 stammen worden geassocieerd met een lagere zweer prevalentie en minder ernstige ontsteking [14].
H .
pylori infectie leidt tot rekrutering van neutrofielen, lymfocyten en macrofagen in het maagslijmvlies door de inductie van verscheidene cytokinen zoals TNF-a ?, IL-6 en IL-8 [15-17]. IL-8 is een belangrijke mediator in de immunopathogenese van chronische gastritis veroorzaakt door H. pylori
[16]. Aangetoond is dat cagA Kopen en VACA
-s1 positieve stammen van H. pylori
induceren de productie van IL-8 in het maagslijmvlies, zowel in vivo als in vitro [16], [18], [19]. De Vaca
-s2 gen is niet geassocieerd met IL-8-inductie [18]. Bovendien is een associatie tussen de mucosale niveaus van IL-8 en ernst van gastro aanwezigheid van PUD eveneens beschreven [19]. De meeste studies van de associatie tussen de genotypes van H. pylori
en chronische gastritis, maagzweer en IL-8 niveaus zijn uitgevoerd in de westerse bevolking, en geen eerdere studie heeft deze verenigingen in het Midden-Oosten besproken. Bovendien heeft de meerderheid van de gepubliceerde studies onderzocht alleen een enkele of een aantal van deze verenigingen.
Het doel van deze studie was om het verband tussen de aanwezigheid van cagA
, Vaca
-s1 en Vaca -s2 genotypes in H. pylori
en de ernst van gastritis en PUD, en deze met de niveaus van IL-8 te correleren in een groep van patiënten uit het Midden-Oosten. We hebben ook geprobeerd om deze onderling verbonden associaties in dezelfde groep patiënten te onderzoeken om de biologische aannemelijkheid controleren of de bacteriële virulentie factoren leiden tot inductie van de cytokine IL-8, wat resulteert in meer ernstige ontsteking of ontwikkeling van PUD .
Resultaten
gastroscopie en maag biopsieën werden uitgevoerd in 120 volwassen patiënten. H. pylori
werden gezien op histopathologie in 98 van deze patiënten, die allen positief voor cagA Kopen en /of Vaca
waren. Een patiënt had VACA
PCR maar was niet positief voor H. pylori
histopathologie werd ook opgenomen in de analyse. Daarom nieuwe analyse in deze 99 patiënten uitgevoerd (72,7% mannen, 27,3% vrouwen; gemiddelde leeftijd 38,4 jaar) (tabel 1). Een geschiedenis van PUD was aanwezig in 27,3% van de patiënten, en de meest voorkomende indicatie voor verwijzing was dyspepsie (84,8%). Tabel 1 Socio-demografische en klinische kenmerken van 99 patiënten met een H. pylori-infectie in Koeweit
Kenmerk

Leeftijd bij diagnose (jaar)
Gemiddelde ± SD
38,4 ± 12,9
Median
35.5
Range
18-75
Gender
n
(%)
Man
72
(72,7)
Female
27
(27,3)
Nationaliteit
Koeweit
52
(52,5)
Bangladesh
15
(15,2)
Egypte
8
(8.1)
State-less Arabieren
5
( 5.1)
Syrië
5
(5.1)
otherâ
14
(14.1)
voorgeschiedenis van maagzweren
27
(27.3)
verleden van H. pylori-infectie
verhuur 4
(4.0)
geschiedenis van het roken van sigaretten
38
(38,4)
geschiedenis van alcoholgebruik
6
(6.1)
Indicatie voor gastroscopie
dyspepsie
84
(84,8)
Upper maagdarmbloeding
6
(6.1)
Heartburn
5
(5.1)
Anemie 2
(2.0)
aanhoudend braken 2
(2.0)
aIndia (4), Iran (2), Pakistan ( 2), Saoedi-Arabië (2), Afghanistan (1), Jordanië (1), Somalië (1), Jemen (1). Ondernemingen De meest voorkomende abnormaliteit gezien op endoscopie was PUD (70,7%) (tabel 2). Endoscopische bewijs van ontsteking van de slijmvliezen van de maag en het duodenum werd waargenomen bij 57,6% en 29,3% van de patiënten. Chronische ontsteking was 'None-Mild' in 22,2% van de patiënten, en 'Moderate-Marked' in 77,8%. Neutrofielen activiteit 'None-Mild' in 60,6%, en 'Moderate-Marked' in 39,4% van de patients.Table 2 Resultaten van endoscopische, histologische, H. pylori genotype, en IL-8 niveau bij patiënten met een H. pylori-infectie in Koeweit
Kenmerkend
n
%
gastroscopie findingsa
Darmzweren
61
(61,6)
Gastritis
57
(57,6)
Duodenitis
29
(29,3)
Maagulcus
13
(13.1)
Oesofagitis
10
(10.1)
Maagkanker 1
(1.0)
Histologische findingsb
H. pylori
aanwezig
98
(99,0)
None -Mild
44
(44,4)
Moderate-Marked
54
(54,5)
Chronische ontsteking
Geen-Mild
22
(22.2)
Moderate-Marked
77
(77,8)
neutrofielen activiteit
Geen-Mild
60
(60,6)
Moderate-Marked
39
( 39,4)
Glandular atrofie
Geen-Mild
65
(65,7)
Moderate-Marked
34
(34,3)
Intestinale metaplasie
Geen-Mild
94
(94,9)
Moderate-Marked
5
(5.1)
H. pylori
genotype
cagA
52
(52,5)
Vaca
-s1
44
(44,4)
Vaca
-s2
39
(39,4)
Vaca
-s1? +? s2
10 | (10.1)
cagA
? +? Vaca
-s1 31
(31,3)
cagA
+ Vaca
-s2
8
(8.1)
cagA
+ Vaca
? - s1? +? s2
7
(7.1)
IL-8 niveau (pg /mg eiwit)
Gemiddelde ± SD
1.891,5 1.526,8 ±
Median (IQR)
1567,4 (1566,3)
asome patiënten hadden meer dan één bevinding op endoscopie.
bAccording om de bijgewerkte Sydney systeem [40]. Ondernemingen de aanwezigheid van cagA
, Vaca
-s1 en Vaca
-s2 genen werd gevonden in 52,5%, 44,4% en 39,4% van de patiënten, terwijl 10,1% positief voor zowel Vaca
-s1 vakantiekampen
s2 waren. De cagA
gen werd gevonden in combinatie met Vaca
-s1 (cagA
? +? Vaca
-s1) in 31,3% van de patiënten, met Vaca
-s2 (cagA
? +? Vaca
-s2) in 8,1% en met zowel Vaca
-s1 en Vaca
-s2 (cagA
? +? Vaca
-s1? +? s2) in 7,1% van de patiënten. De IL-8 niveaus waren in 77 patiënten met een mediaanwaarde van 1567,4 (IQR 1566,3) pg /mg eiwit.
Tabel 3 toont het verband tussen de H. pylori
genotypes en de ernst van chronische ontsteking, neutrofiel activiteit en de aanwezigheid van PUD. Patiënten die waren geïnfecteerd met H. pylori
die zowel de cagA Kopen en Vaca
-s1 genen waren de meeste kans te hebben 'Moderate-Marked' mate van chronische ontsteking (OR = 6.7, 95% BI?: 1,4-31,4; p = 0,016)?. Patiënten met Vaca
-s1 gen alleen had ook een significant meer 'Moderate-Marked' mate van chronische ontsteking (OR = 3,9, 95% CI:? 1,2-12,0; p = 0,017), terwijl die met Vaca
-s2 significant minder chronische ontstekingen (OR = 0.3, 95% CI: 0,1-0,8; p = 0,025?). De aanwezigheid van cagA
of VACA
-s1 genen onafhankelijk of samen beïnvloedde de ernst van neutrofiel activiteit in de gastrische biopten. Patiënten met Vaca
-s2 gen hadden een significant minder 'Moderate-Marked' mate van neutrofielen activiteit (OR = 0,3, 95% BI: 0,1-0,8; p = 0,027?). Het aandeel van de patiënten met PUD was het hoogst in die met de cagA
gen (OR = 4.8, 95% CI:? 1,8-12,5; p = 0,002), gevolgd door die met de Vaca
-s1 gen ( OR = 2,8, 95% CI:? 1,1-7,4; p = 0,031), terwijl die met Vaca
-s2 had het laagste percentage van PUD (OR = 0,3, 95% BI: 0,1-0,7; p = ? 0,011). De aanwezigheid van zowel cagA Kopen en Vaca
-s1 gen verhoogde het risico van PUD meer dan de aanwezigheid van deze genotypes individueel (OR = 6,3, 95% CI: 1,6-23,4; p = 0,006?) .table 3 Associatie tussen H. pylori genotypen en chronische ontsteking, neutrofielen activiteit en maagzweren
H. pylorigenotypea (n)
chronische inflammationb
neutrofielen activityb
maagzweer Disease
Geen-Mild
Moderate-Marked
OR (95% CI) c
p-waarde
Geen-Mild
Moderate-Marked
OR (95% CI) c
p-waarde
Afwezig
Present

OR (95% CI) c
p-waarde
(n 22)
(n 77)
(n 60)

(n 39)
(n 29)
(n 70)
n (%)
n (%)

n (%)
n (%)
n (%)
n (%)

cagA
Positief (52)
8 (15,4)
44 (84,6)
2,4 (0,9-6,7)
0,074
29 (55,8)
23 (44,2)
1,5 (0,6-3,4)
0,325
8 (15,4)
44 (84,6)
4,8 (1,8-12,5)
0.002 *
Negatieve (47)
14 (29,8)
33 (70,2)
referentie
31 (66,0)
16 (34,0)
referentie
21 (44,7)
26 (55,3)
referentie
Vaca
-s1
Positief (44)
5 (11.4)
39 (88,6)
3.9 ( 1,2-12,0)
0.017 *
22 (50,0)
22 (50,0)
2,2 (0,9-5,2)
0,057
8 (18.2)
36 (81,8)
2,8 (1,1-7,4)
0,031 *
Negatieve (55)
17 (30,9)
38 (69,1)
referentie
38 (69,1)
17 (30,9)
referentie
21 (38,2)
34 (61,8)
referentie
Vaca
-s2
Positief (39)
13 (33,3)
26 (66,7)
0,3 (0,1-0,8)
0.025 *
29 (74,4)
10 (25,6)
0,3 (0,1-0,8)
0.027 *
17 (43,6)
22 (56,4)
0,3 (0,1-0,7)
0.011 *
Negatieve (60)
9 (15,0)
51 (85,0)
Reference
31 (51,7)
29 (48,3)
referentie
12 (20,0)
48 (80,0)
referentie
Vaca
-s1? +? S2
Positief (10)
3 (30,0)
7 (70,0)
0,5 (0,1-2,2)
0,445
8 (80,0) Pagina 2 (20.0)
0,3 (0,0-1,7)
0,191 Pagina 2 (20.0)
8 (80,0)
1,8 (0,3-9,1)
0,478
Negative (89)
19 (21.3 )
70 (78,7)
referentie
52 (58,4)
37 (41,6)
referentie
27 (30,3)
62 (69,7)
Referentie
cagA
? +? Vaca
-s1
Positief (31) Pagina 2 (6.5)
29 (93,5)
6,7 (1,4-31,4)
0,016 *
18 (58,1)
13 (41,9)
0,9 (0,9-1,0)
0,737
3 (9.7)
28 (90,3)
6,3 (1,6-23,4)
0.006 *
Negatieve (68)
20 (20,9)
48 (70,6)
referentie
42 (61,8)
26 (38,2)
referentie
26 (38,2)
42 (61,8)
referentie
cagA
? +? Vaca
-s2
Positief (8)
3 (37,5)
5 ( 62,5)
0,4 ​​(0,1-2,2)
0,337
5 (62,5)
3 (37,5)
0,9 (0,2-4,3)
0,959 Pagina 2 (25.0)
6 (75,0)
1,2 (0,2-6,5)
0.810
Negative (91)
19 (20,9)
72 (79,1)
referentie
55 (60,4 )
36 (39,6)
referentie
27 (29,7)
64 (70,3)
referentie
cagA
? +? Vaca
-s1? +? s2
Positief (7) Pagina 2 (28.6)
5 (71,4)
0,9 (0,9-1,0)
0,255
5 (71,4) Pagina 2 (39.4)
0,5 (0,1-3,2)
0,537
1 (14.3)
6 (85,7)
2,7 (0,3-24,5)
0,359
Negative (92)
20 ( 21.7)
72 (78,3)
referentie
55 (59,8)
37 (40,2)
referentie
28 (30,4)
64 (69,6)
Referentie
aAlle patiënten waren positief voor beide cagA
, Vaca golfreizen of beide.
bAccording om de bijgewerkte Sydney systeem [40].
kooi en geslacht gecorrigeerde odds ratio.
* statistisch significant.
Tabel 4 toont het verband tussen de concentratie IL-8 in het maagslijmvlies en H. pylori
genotypes en histologische kenmerken en PUD. De mediaan voor IL-8 was significant hoger bij patiënten die geïnfecteerd zijn met H. pylori hotels met cagA
(p = 0,011?) En VACA
-s1 genen (p = 0,011 en 0,024 respectievelijk?); en significant lager bij patiënten met VACA
-s2 gen (p = 0,004) (figuur 1). De hoogste niveaus van IL-8 gevonden in patiënten die positief voor zowel cagA Kopen en Vaca
-s1 (figuur 2) waren. Correlatie van maagslijmvlies IL-8 niveaus met de ernst van de chronische ontsteking toonde aan dat patiënten die had 'Moderate-Marked' chronische ontsteking hadden significant hogere mediane IL-8 niveau in vergelijking met degenen die 'None-Mild' ontsteking hadden (p = 0,001 ) (Figuur 3). Patiënten met 'Moderate-Marked' neutrofielen de activiteit op de maag biopsie hadden ook significant hogere mediane IL-8 niveaus in vergelijking met degenen die 'None-Mild' activiteit hadden (p = 0,007). De mediane gehalten aan IL-8 waren ook significant verhoogd in de gastrische biopten van patiënten met PUD vergelijking met degenen die niet zweren (p = 0,001) had. Er was geen significant verschil in dichtheid van H. pylori
of mate van glandulaire atrofie of intestinale metaplasie met de IL-8 niveau in de maag biopsies.Table 4 Correlatie tussen interleukine-8 en H. pylori genotypen, chronische ontsteking, neutrofielen activiteit, en maagzweer
H. pylorigenotypea
Interleukine-8 levelb
p-valuec
Median (IQR)
cagA

Afwezig
1.090,3 (1.310,8)
0.011 *
Present
1.885,7 (1.281,6)
Vaca
-s1
Afwezig
1.245,8 (1.550,2)
0.024 *
Present
1.840,0 (1.098,6)
Vaca
-s2
Afwezig
1.840,0 (1.597,5)
0,004 *
Present
965,6 (1205,1 )
Vaca
-s1? +? s2
Afwezig
1.541,1 (1.566,3)
0,818
Presenteer
1.711,8 (1.928,7)
cagA
? +? Vaca
-s1
Afwezig
1.311,8 (1.814,9)
0.021 *
Present
1901,7 (915,3)
cagA
? +? Vaca
-s2
Afwezig
1.577,5 (1.548,6)
0,713
Presenteer
1331,7 (?)
cagA
? +? Vaca
s1? +? s2
Absent
1541,1 (1625,9)
0,807
Presenteer
1.711,8 (1.803,6)
Histologische findingsd
Chronische ontsteking
Geen-Mild
689,2 (1420,6)
0.001 *
Moderate-Marked
1.835,7 (1.345,3)
neutrofielen activiteit
Geen-Mild
1.449,0 (1.342,1)
0.007 *
Moderate-Marked
1.917,8 (2.703,6)
maagzweer
Afwezig
919,3 (1153,3)
0.001 *
Present
1.890,6 (1.638,4)
aAlle patiënten waren positief voor beide cagA
, Vaca golfreizen of beide.
bpg /mg eiwit.
cMann-Whitney U Electronics Test.
dAccording om de bijgewerkte Sydney systeem [40].
* Statistisch significante
Figuur 1 Niveaus van interleukine-8 in het maagslijmvlies bij patiënten met H. pylori met en zonder genotypes cagA, Vaca -s1 en VACA -s2. Deze worden uitgedrukt als staafdiagrammen. De uiteinden van de balken geven de 25ste en 75ste percentiel. De 50-percentiel wordt aangegeven met een lijn, en de 10e en 90e percentiel worden aangegeven met foutbalken. De p-waarden werden berekend met behulp van de Mann-Whitney U Electronics Test. * Geeft aan dat de p-waarde is statistisch significant.
Figuur 2 niveaus van interleukine-8 in het maagslijmvlies bij patiënten met H. pylori met of zonder genotypes cagA? +? VACA -s1, cagA? +? VACA -s2 en cagA? +? Vaca -s1? +? VACA -s2. Deze worden uitgedrukt als staafdiagrammen. De uiteinden van de balken geven de 25ste en 75ste percentiel. De 50-percentiel wordt aangegeven met een lijn, en de 10e en 90e percentiel worden aangegeven met foutbalken. De p-waarden werden berekend met behulp van de Mann-Whitney U Electronics Test. * Geeft aan dat de p-waarde is statistisch significant.
Figuur 3 niveaus van interleukine-8 in het maagslijmvlies bij patiënten met H. pylori en de ernst van chronische ontsteking, neutrofiele activiteit en maagzweren. Deze worden uitgedrukt als staafdiagrammen. De uiteinden van de balken geven de 25ste en 75ste percentiel. De 50-percentiel wordt aangegeven met een lijn, en de 10e en 90e percentiel worden aangegeven met foutbalken. De p-waarden werden berekend met behulp van de Mann-Whitney U Electronics Test. * Geeft aan dat de p-waarde is statistisch significant.
Totaal 58 (75,3%) patiënten "Matig vermelding" chronische ontsteking in het maagslijmvlies PUD had gehad, vergeleken met 12 (54,5%) met 'deson- mild ", terwijl 31 (79,5%) van de patiënten met een 'Moderate-Marked' neutrofielen activiteit had PUD, vergeleken met 39 (65,0%) van de mensen met 'None-mild' activiteit. Maar deze verschillen waren niet statistisch significant. Ook was er geen verband tussen de aanwezigheid van PUD en de ernst van klieren atrofie, intestinale metaplasie of H. pylori
dichtheid op de maag biopten.
Discussie
Voor zover wij weten is dit de eerste studie om de vereniging te onderzoeken tussen de aanwezigheid van cagA
, Vaca
-s1 en Vaca
-s2 genotypes in H. pylori
en de ernst van chronische gastritis en PUD in een groep van patiënten uit het Midden-Oosten. We hebben ook aangetoond dat de verhouding tussen deze factoren en de niveaus van IL-8 in het maagslijmvlies valideren van de biologische aannemelijkheid dat deze bacteriële virulentie factoren leiden tot inductie van de cytokine IL-8, wat resulteert in meer ernstige ontsteking en /of ontwikkeling van PUD.
Er blijkt een geografische variatie in de relatie tussen H. pylori
genotypes en maag-inflammatoire respons. Infectie met cagA
positieve stammen van H. pylori
in de westerse landen is naar verluidt meer ernstige maag-ontstekingen veroorzaken in vergelijking met de Aziatische landen, waar de resultaten inconsistent [7] zijn geweest, [20-24]. In onze studie zowel de mate van chronische ontsteking en neutrofielen activiteit in het maagslijmvlies waren ernstiger bij patiënten die waren geïnfecteerd met H. pylori
met de cagA Kopen en Vaca
-s1 genen. De aanwezigheid van zowel cagA Kopen en VACA
-s1 bleek een synergetische rol hieraan strengere ontsteking bij onze patiënten. Anderzijds, de aanwezigheid van VacA
-s2 bleek de ernst van chronische ontsteking en neutrofiele activiteit, ongeacht de aanwezigheid van cagA
verbeteren, VacA
-s1 of beide. Deze bevindingen zijn consistent met eerder gepubliceerde studies waarin VACA
-s2 stammen werden in verband gebracht met minder ontsteking [25]. Zowel de cagA Kopen en VACA
-s1 genen ook onafhankelijk geassocieerd met een verhoogd risico op PUD, terwijl de VacA
-s2 gen bleek minder effect hebben. Patiënten die zowel de cagA Kopen en de Vaca
-s1 gen had had het hoogste risico op PUD. Anderzijds, de aanwezigheid van VacA
-s2 verminderd risico van PUD, of het aanwezig was alleen of met cagA
, VACA
-s1, of beide. Deze resultaten zijn vergelijkbaar met die van de westerse landen [20], [21], [24], terwijl het merendeel van de patiënten in ons onderzoek waren uit het Midden-Oosten en het Indische subcontinent [26]. Een recente studie uitgevoerd om de genetische verwantschap van H. pylori
bepalen isolaten van etnische Arabieren in Koeweit bleek dat deze stammen nauw verwant aan de Indo-Europese groep van het organisme en duidelijk onderscheiden van de Oost-Aziatische stammen [27]. Dit zou de reden waarom de associatie van cagA
, Vaca
-s1 en Vaca
-s2 en gastritis en PUD in onze patiënten lijkt vergelijkbaar met die gemeld uit de westerse landen te zijn. Ondernemingen De pro-inflammatoire cytokine IL-8 speelt een belangrijke rol in de regulatie van mucosale neutrofiel migratie en activering. Onze resultaten tonen dat het niveau van IL-8 in het maagslijmvlies werd verhoogd in aanwezigheid van cagA Kopen en VACA
-s1 genotypen van H. pylori Kopen en de hoogste niveaus werden waargenomen bij patiënten die positief waren voor beide genen. De aanwezigheid van Vaca
-s2 werd geassocieerd met een lagere niveaus van IL-8. Significant hogere niveaus van IL-8 in het maagslijmvlies werden waargenomen bij patiënten die ernstiger mate van chronische ontsteking en neutrofiele activiteit in de gastrische biopten had, evenals degenen die PUD hadden. Deze resultaten zijn in overeenstemming met eerdere rapporten waarin de niveaus van maagslijmvlies IL-8 niveaus zijn gecorreleerd met de aanwezigheid van H. pylori
virulentie genen zoals cagA Kopen en ijs A [28], [29]. Echter, sommige onderzoekers geen verschil in IL-8 niveaus bij patiënten met H. pylori infecties
met en zonder PUD [30] gemeld, terwijl andere hogere niveaus in patiënten met PUD dan die met slechts gastritis [31]. Deze inconsistentie in de resultaten van IL-8 productie kan zijn vanwege de verschillen in de methoden voor het niveau van de cytokine in het maagslijmvlies te meten. We hebben een ELISA gebaseerde techniek, die een meer gevoelige methode cytokine kwantificering worden gebruikt.
Met betrekking tot andere factoren, vonden wij geen verschil in de ernst van gastritis, aanwezig PUD of niveaus van IL-8 tussen patiënten met of zonder voorgeschiedenis van roken of alcoholgebruik. De aanwezigheid van PUD was echter vaker voor bij deze groep patiënten dan eerder werd Koeweit en elders [32] beschreven. De verstorende effecten van geneesmiddelen werden geminimaliseerd door het selecteren van slechts die patiënten die niet op een van de genoemde geneesmiddelen waren gedurende ten minste 4 weken voor endoscopie. Verscheidene andere H. pylori
factoren zoals Vaca
-s1 subtypes (S1A en S1b), Vaca
midden regio subtypes (M1 en M2), ICEA en Dupa genen kunnen ook van invloed op de virulentie van dit organisme en de effecten op het maagslijmvlies [33]. Echter, ons onderzoek niet bedoeld om de virulentie factoren bepalen, en dit kan worden beschouwd als een beperking van dit rapport. Naast bacteriële factoren, samen genetica ook bijdragen aan de pathogenese van gastroduodenale ziekten [34], [35]. Daarnaast zijn veel cytokine gen polymorfismen onthullen verschillende risico bij maag- en darmzweren patiënten [36], [37].
Conclusies Inloggen Deze studie, die patiënten uit het Midden-Oosten opgenomen toont aan dat de aanwezigheid van H. pylori cagA
en VACA
-s1 genen resulteert in inductie van hogere niveaus van pro-inflammatoire cytokine IL-8 in het maagslijmvlies, die niet alleen tot een duidelijker intensiteit van chronische ontsteking en neutrofiele activiteit in het maagslijmvlies ook vaker voorkomen PUD. De aanwezigheid van Vaca
-s2 resulteert in lagere niveaus van IL-8, en minder ernstige ontsteking en minder PUD. Daarnaast is de aanwezigheid van Vaca
-s2 blijkt de virulentie effecten van cagA Kopen en /of Vaca
-s1 genen te verminderen.
Patiënten en methoden
Patiënten en monsters Ondernemingen De studie bevolking en de methode van biopsie collectie zijn eerder beschreven [26], [32]. In het kort, verwezen 120 opeenvolgende, niet-geselecteerde volwassen patiënten voor gastroscopie werden uitgenodigd om deel te nemen aan het onderzoek. Patiënten met coagulatie afwijkingen vóór gastro-duodenale operatie werden uitgesloten van de studie. Patiënten met type 2 histamine receptor antagonisten, protonpompremmers, antibiotica, bismutzouten, aspirine of niet-steroïdale anti-inflammatoire middelen in de vier voorgaande weken had plaatsgevonden werden eveneens uitgesloten. De prevalentie van cagA Kopen en Vaca
genotypes bij deze patiënten werd eerder gemeld [26].
Upper gastro-intestinale endoscopie werd uitgevoerd op een standaard manier. Alle endoscopen onderging een reiniging en desinfectie proces met een geautomatiseerde au- vóór elke procedure volgens de richtlijnen van de Europese Vereniging voor Gastro-intestinale Endoscopie [38]. Voor elke patiënt werden vier biopsies genomen van de maag antrum, binnen 2 cm van de pylorus, middels gesteriliseerde biopsietang
twee biopten werden gefixeerd in gebufferde formaline, bewerkt naar paraffine, in secties verdeeld en gekleurd met H &. E en HPSS [39]. Alle biopsies werden individueel onderzocht door een senior gastrointestinale patholoog die werd verblind om de klinische informatie over de patiënten. Een biopsie werd gescoord positief voor H. pylori
als organismen werden gezien op een lichtmicroscoop. De bijgewerkte Sydney werd gebruikt om de dichtheid van H. pylori Kopen en mate van chronische ontsteking, neutrofiele activiteit glandulaire atrofie en intestinale metaplasie scoren op de biopten [40]. Patiënten die geen of milde chronische ontsteking in de gastrische biopsie hadden werden in één groep (n-Mild groep), terwijl die met matige of duidelijke graad van ontsteking in de andere groep (Matig gemarkeerd groep) werden opgenomen. Ook werden patiënten verdeeld in twee groepen (n-ie lichte en matige-gemarkeerd) voor neutrofiel activiteit, en voor intestinale metaplasie en klieren atrofie. Ondernemingen De QIA DNA mini kit (Qiagen, Hilden, Duitsland) werd gebruikt DNA van biopten extraheren. De zuiverheid van het DNA werd bepaald berekenen van de verhouding van de optische dichtheid (OD) bij 260-280 nm en de opbrengst werd gekwantificeerd door absorptie bij 260 nm.
PCR amplificatie van doelwit DNA
Tabel 5 toont de primers die in deze studie. De cagA
F en cagA
R primers het genereren van een fragment van 183 basenparen (bp) voor de detectie van cagA
, terwijl primers VA1F en VA1XRA leveren een 176 bp fragment voor Vaca
-s1 en 203 bp voor Vaca
-s2 varianten [41], [42]. Een pre-porties PCR master mix (Abgene, Surrey, UK) werd gebruikt voor PCR amplificatie van doel-DNA. Het uiteindelijke reactievolume was 50L en bevatte 25pmol van elke primer en 50 ng DNA [43]. PCR werd uitgevoerd na voorverwarming bij 94 ° C gedurende 5 minuten, gevolgd door 35 cycli bij 94 ° C, 50 ° C en 74 ° C gedurende elk gevolgd door een 5 minuten laatste verlenging stap bij 74 ° C één minuut. De geamplificeerde monsters werden geanalyseerd door elektroforese op 2% hoge-resolutie agarosegel in Tris-acetaat-EDTA (TAE) buffer, die vervolgens werd gekleurd met ethidiumbromide bij 0,5 ug /ml [44]. Ultraviolet licht werd gebruikt om de banden van geamplificeerd DNA, dat vervolgens 5 primers in PCR toegepast voor amplificatie van cagA, Vaca -s1 en VACA -s2
sequenties geamplificeerd DNA gebied
Primer
primersequentie
PCR-product (bpa)
cagA
cagA
F
5? -TTGACCAACAACCACAAACCGAAG-3?
183
cagA
R
5?-CTTCCCTTAATTGCGAGATTCC-3?
vacA
-s1
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
176
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
vacA
-s2
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
203
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
Een p-waarde van < 0,05 werd beschouwd als statistisch significant.

• DNA copy number profielen van maagkanker precursor laesies
• Ultrasone scharen hulp kan de console verkorten in robotic gastrectomie voor de vroege maagkanker