Ассоциация между пилори генотипов и степени тяжести хронического гастрита, язвенной болезни и интерлейкин-8 уровней слизистой оболочки желудка Helicobacter: Данные из исследования, на Ближнем Востоке

Ассоциация между Helicobacter Pylori
генотипов и степени тяжести хронического гастрита, язвенной болезни и интерлейкин-8 уровней слизистой оболочки желудка: данные из исследования на Ближнем Востоке
Аннотация
Справочная информация
Разнообразный клинических проявлений Helicobacter пилори
(H. Pylori
) инфекция, скорее всего, из-за различий в вирулентности отдельных штаммов, что определяет его способность индуцировать продукцию интерлейкина-8 (IL-8) в слизистой оболочке желудка. Целью данного исследования было изучение взаимосвязи между CaGa, vaca-
s1 и s2 vaca-
генотипов хеликобактерной
и тяжесть хронического гастрита и наличие язвенной болезни (PUD), а также к соотносить их с ИЛ 8 уровней в слизистой оболочке желудка.
Методы
желудочную среду биопсии были получены у пациентов во время эзофагогастродуоденоскопии. Тяжесть хронического гастрита была документирована с использованием обновленной системы Sydney. H. пилори CagA и Вака

генотипы были обнаружены с помощью ПЦР. . В-IL 8 уровней в слизистой оболочке желудка измеряли с помощью ELISA
Результаты
H. пилори CagA
и /или Вака
генотипов были обнаружены у 99 пациентов (средний возраст 38.4-12.9; 72 мужчин ), из которых 52,5% были положительными на CaGa
, 44,4% для Вака
-s1 и 39,4% для Вака
-s2; и 70,7% пациентов имели PUD. Тяжесть воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка была увеличена с Вака
-s1 (р = 0,017) и снизился с Вака
-s2 (р = 0,025), в то время как CaGa
не было никакой связи. Степень активности нейтрофилов не было связано ни с CaGa
или Вака
-s1, в то время как Вака
-s2 была в значительной степени связано со снижением активности нейтрофилов (р = 0,027). PUD была значительно увеличена у пациентов с CaGa
(р = 0,002) и Вака
-s1 (р = 0,031) и снижение в тех с Вака
-s2 (р = 0,011). Уровень ИЛ-8 была значительно увеличена у пациентов с CaGa
(р = 0,011) и Вака
-s1 (р = 0,024), а нижняя с Вака
-s2 (р = 0,004). Более высокие уровни IL-8 были также обнаружены у пациентов с более тяжелым хроническим воспалением (р = 0,001), активности нейтрофилов (р = 0,007), а также тех, с ЯБДК (р = 0,001). Выводы

Присутствие Вака
-s1 генотип H. Pylori
ассоциируется с более тяжелым хроническим воспалением и более высокие уровни IL-8 в слизистой оболочке желудка, а также более высокой частоты ЯБ. Пациенты с Вака
-s2 имеют менее серьезные гастрит, более низкие уровни IL-8 и более низкие показатели ЯБДПК. Наличие CagA
генотипа не связано с тяжестью гастрита или IL-8 индукции в слизистой оболочке желудка. Ассоциация CaGa с услугой ЯБДПК может быть отражением его присутствия с Вака
-s1 генотипа.
Ключевые слова
хеликобактер пилори CagA Вака Вака-S1-S2 Гастрит интерлейкин-8 пептическая язва Фон болезни
хеликобактерной
(H. Pylori
) колонизирует слизистую оболочку желудка человека и устанавливает долгосрочные инфекции [1]. Это приводит к развитию хронического гастрита, язвенной болезни (PUD), через слизистую оболочку-ассоциированной лимфоидной ткани (MALT) лимфома и рак желудка [2], [3]. Степень и тяжесть этих ассоциаций зависит от нескольких элементов, таких как бактериальные факторы вирулентности, возраст хозяина, генетическая предрасположенность, иммунный ответ и факторы окружающей среды [4-6].
Двух ключевых маркеров вирулентности H. Pylori
являются цитотоксин связаны A (CagA
) и вакуолизирующий цитотоксин A (Вака
) генов [6], [7]. В CaGa
ген не присутствует в каждом H. Pylori
штамма, но связано с более тяжелыми клиническими результатами, такими как более тяжелое воспаление слизистой оболочки желудка, а также более высокой распространенности ЯБ и рака желудка [8- 10]. В Вака
ген присутствует у штаммов всех H. Pylori
и связан с ЯБДПК [11]. В Вака
ген содержит по меньшей мере три переменные области, сигнал (ы) область, промежуточное соединение (я) область и средним (м) область. S-области существует как S1 и S2 типа [12], [13]. В Вака
-s1 штаммы связаны с более тяжелым воспалением желудка и ЯБДПК независимо от CaGa, в то время как
Вака
-s2 штаммы ассоциируются с более низкими показателями распространенности язвенной болезни и менее тяжелое воспаление [14].
H , пилори
инфекция приводит к рекрутингом нейтрофилов, лимфоцитов и макрофагов в слизистой оболочке желудка через индукцию ряда цитокинов, таких как TNF-?, IL-6 и IL-8 [15-17]. IL-8 является важным посредником в иммунопатогенеза хронического гастрита, вызванного H. Pylori
[16]. Было показано, что CaGa
и Вака
-s1 положительных штаммов H. пилори
индуцируют выработку IL-8 в слизистой оболочке желудка, как в естественных условиях и в пробирке [16], [18], [19]. В Вака
-s2 ген не связан с IL-8 индукции [18]. Кроме того, связь между слизистыми уровней IL-8 и тяжести гастрита и наличие ЯБ также сообщалось [19]. Большинство исследований ассоциации между генотипами хеликобактерной
и хроническом гастрите, язвенной болезни и уровни IL-8 были проведены в западных популяциях, и ни предыдущее исследование не рассматривал эти ассоциации на Ближнем Востоке. Кроме того, большинство опубликованных исследований исследовали только либо один или некоторые из этих ассоциаций.
Цель данного исследования состояла в том, чтобы установить связь между наличием CagA
, Вака
-s1 и Вака
-s2 генотипов H. Pylori
и тяжести гастрита и ЯБ, и соотнести их с уровнем IL-8 в группе пациентов с Ближнего Востока. Кроме того, мы попытались рассмотреть все эти взаимосвязанные ассоциации в той же группе пациентов, чтобы подтвердить биологическую правдоподобность, что бактериальные факторы вирулентности приводят к индукции цитокина IL-8, который в свою очередь приводит к более тяжелым воспалением или развитием ЯБ .
Результаты
Эзофагогастродуоденоскопия и желудочных биопсий были проведены в 120 взрослых пациентов. H. пилори
были замечены на гистопатологии в 98 из этих пациентов, все из которых были положительными для CaGa
и /или Вака
. Один пациент имел Вака на ПЦР
но не был положительным для H. Pylori
на гистопатологии был также включен в анализ. Таким образом, дальнейший анализ был проведен в этих 99 пациентов (72,7% мужчин, 27,3% женщин, средний возраст 38,4 лет) (Таблица 1). История ЯБДПК присутствовала у 27,3% больных, а самым частым показанием для направления была диспепсия (84,8%). Таблица 1 Социально-демографические и клинические характеристики 99 пациентов с инфекцией H. Pylori в Кувейте
Характеристика

Возраст на момент постановки диагноза (лет)
Среднее ± SD
38,4 ± 12,9
Медиана
35,5
Диапазон
18-75
Пол
п
(%)
Мале
72
(72,7)
Женский
27
(27,3)
Национальность
Кувейт
52
(52,5)
Бангладеш
15
(15,2)
Египет
8
(8.1)
Государство-менее арабов страница 5 ( 5.1)
Сирии страница 5 (5.1)
Othera
14
(14.1)
в анамнезе язвенной болезни
27
(27,3)
Анамнез антихеликобактерной
инфекции 4
(4.0): История курения сигарет
38
(38,4): История потребления алкоголя
6
(6.1)
Индикация для эзофагогастродуоденоскопии
диспепсии
84
(84,8)
Верхняя желудочно-кишечные кровотечения
6
(6.1)
Изжога
5
(5.1)
Анемия страница 2 (2.0)
упорная рвота страница 2 (2.0)
aIndia (4), Иран (2), Пакистан ( 2), Саудовская Аравия (2), Афганистан (1), Иордания (1), Сомали (1), Йемен (1).
наиболее частая ненормальность видели на эндоскопии был ЯБДПК (70,7%) (таблица 2). Эндоскопическое свидетельство воспаление слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки наблюдалось в 57,6% и 29,3% больных соответственно. Хроническое воспаление не было 'Ни-Mild »в 22,2% больных, а" Умеренный отмеченное "в 77,8%. Нейтрофильная активность была 'None-Mild »в 60,6%, и" Умеренный отмеченное "в 39,4% от patients.Table 2 Результаты эндоскопического, гистологического, хеликобактерной генотипа и уровня IL-8 у пациентов с H. не пилорусов инфекции в Кувейте
Характеристика

н

%

эзофагогастродуоденоскопию Диагностикаа
язвенной болезни двенадцатиперстной кишки
61
(61,6)
Гастрит
57
(57,6)
дуоденит
29
(29,3)
язва желудка
13
(13.1)
эзофагит
10
(10.1)
рак желудка

1 (1,0)
Гистологическое findingsb
H. Pylori
настоящее
98
(99,0) не
None -Mild
44
(44,4)
Умеренный отмеченное
54
(54,5)
Хроническое воспаление
None-Mild
22
(22,2)
Умеренный отмеченное
77
(77,8)
активности нейтрофилов
None-Mild
60
(60,6)
Умеренный отмеченное
39
( 39,4)
Glandular атрофия
None-Mild
65
(65,7)
Умеренный отмеченное
34
(34,3)
кишечная метаплазия
ни-Mild
94
(94,9)
Умеренный отмеченное страница 5 (5.1)
H. Pylori
генотип
CaGa

52
(52,5)
Вака
-s1
44
(44,4)
Вака
-s2
39
(39,4)
Вака
-s1? +? s2
10
(10.1)
CaGa
? +? Вака
-s1 31
(31,3)
CaGa
+ Вака
-s2
8
(8.1)
CaGa
+ Вака
? - s1? +? s2
7
(7.1)
IL-8 Уровень (пг /мг белка)
Среднее ± SD
1891,5 ± 1526,8
Медиана (МКР)
1567,4 (1566,3)
пациентов aSome было больше, чем один вывод по эндоскопии.
bAccording в обновленной системе Сиднея [40].
присутствие CaGa
, Вака
-s1 и Вака
-s2 генов была обнаружена в 52,5%, 44,4% и 39,4% пациентов, в то время как 10,1% были положительными для обоих вача
-s1 vaca-
S2. В CaGa
ген был обнаружен в сочетании с Вака
-s1 (CaGa
? +? Вака
-s1) у 31,3% больных, с Вака
-s2 (CaGa <бр>? +? Вака
-s2) в 8,1% и с обоими Вака
-s1 и Вака
-s2 (CaGa
? +? Вака
-s1? +? s2) в 7,1% пациентов. Уровни IL-8 были доступны у 77 пациентов со средним значением 1567.4 (1566.3) IQR пг /мг белка.
В таблице 3 показана связь между пилори
генотипов и тяжесть хронического воспаления, активности нейтрофилов H. и наличие ЯБ. Пациенты, которые были инфицированы H. Pylori
содержащий как CagA и Вака

-s1 гены, скорее всего, иметь "Умеренный отмеченное" степень хронического воспаления (OR = 6,7, 95% ДИ: 1.4-31.4; р = 0,016)?. Пациенты с Вака
-s1 гена в одиночку также имели значительно более "Умеренный отмеченное" степень хронического воспаления (OR = 3,9, 95% ДИ:? 1.2-12.0; р = 0,017), в то время как те, с Вака <бр> -s2 имели значительно меньше хроническое воспаление (OR = 0,3, 95% ДИ: 0,1-0,8?, р = 0.025?). Присутствие CaGa
или Вака
-s1 генов либо самостоятельно, либо вместе не влияет на выраженность активности нейтрофилов в желудочном биопсий. Пациенты с Вака
-s2 гена имели значительно меньше "Умеренный отмеченное" степень активности нейтрофилов (OR = 0,3, 95% ДИ: 0,1-0,8; р = 0,027?). Доля пациентов, имеющих PUD была самой высокой в тех, с CaGa
гена (OR = 4,8, 95% ДИ:? 1.8-12.5; р = 0,002), а затем те, с Вака
-s1 гена ( OR = 2,8, 95% ДИ:? 1.1-7.4; р = 0,031), в то время как те, с Вака
-s2 имел самый низкий процент ЯБДПК (OR = 0,3, 95% ДИ: 0,1-0,7; р = ? 0,011). Присутствие обоих CaGa
и Вака
-s1 гена повышает риск ЯБ больше, чем присутствие этих генотипов в отдельности (OR = 6,3, 95% ДИ: 1.6-23.4; р = 0,006?) .table 3 Ассоциация между хеликобактерной генотипов и хроническое воспаление, активность нейтрофилов и язвенной болезни
H. pylorigenotypea (п) завод
хронический inflammationb

activityb
нейтрофилов
пептической язвой Болезнь

None-Mild

Умеренный отмеченное

OR (95% ДИ) С

р-значение

ни-Mild

Умеренный отмеченное

OR (95% CI) с

р-значение

об отсутствии

Present
<бр> OR (95% CI) с

р-значение

(п 22)

(п 77)

(п 60)

(п 39)

(N 29)

(п 70)

п (%)

п (%)

п (%)

п (%):

п (%)

п (%)

CaGa

Положительно (52)
8 (15,4)
44 (84,6)
2.4 (0.9-6.7)
0,074
29 (55,8) 23
(44,2)
1.5 (0.6-3.4)
0,325
8 (15,4)
44 (84,6)
4.8 (1.8-12.5)
0,002 *
Отрицательный (47)
14 (29,8) 33 (
70,2)
справочнике
31 (66,0)
16 (34,0)
Ссылка
21 (44,7) 26
(55,3)
Ссылка
Вака
-s1
Положительно (44)
5 (11,4)
39 (88,6)
3.9 ( 1.2-12.0)
0,017 *
22 (50,0) 22
(50.0)
2.2 (0.9-5.2)
0,057
8 (18,2)
36 (81,8)
2.8 (1.1-7.4)
0,031 *
Отрицательный (55)
17 (30,9) 38 (
69,1)
Ссылка
38 (69,1) 17
(30,9)
Ссылка
21 (38,2) 34
(61,8)
Ссылка
Вака
-s2
Положительно (39)
13 (33,3) <бр> 26 (66,7)
0,3 (0,1-0,8)
0.025 *
29 (74,4) 10
(25,6)
0,3 (0,1-0,8)
0,027 *
17 (43,6) 22
(56,4)
0,3 (0,1-0,7)
0,011 *
Отрицательный (60)
9 (15,0)
51 (85,0) онлайн справочнике
31 (51,7) 29
(48,3)
Ссылка
12 (20,0) 48 (
80,0)
справочнике
Вака
-s1? +? S2
Положительный (10)
3 (30,0)
7 (70,0)
0.5 (0.1-2.2)
0,445
8 (80,0)
2 (20,0)
0.3 (0.0-1.7)
0,191
2 (20,0)
8 (80,0)
1.8 (0.3-9.1)
0,478
Отрицательный (89) 19
(21,3 )
70 (78,7)
Ссылка
52 (58,4)
37 (41,6)
Ссылка
27 (30,3) 62
(69,7)
Ссылка <бр> CaGa
? +? Вака
-s1
Положительный (31)
2 (6.5)
29 (93,5)
6.7 (1.4-31.4)
0,016 *
18 (58,1) 13
(41,9)
0,9 (0,9-1,0)
0,737
3 (9.7)
28 (90,3)
6.3 (1.6-23.4)
0,006 *
Отрицательный (68)
20 (20,9)
48 (70,6)
справочнике
42 (61,8)
26 (38,2)
Ссылка
26 (38,2) 42
(61,8)
Reference
CaGa
? +? Вака
-s2
Положительный (8)
3 (37.5)
5 ( 62,5)
0.4 (0.1-2.2)
0,337
5 (62,5)
3 (37.5)
0.9 (0.2-4.3)
0,959
2 (25.0)
6 (75,0)
1.2 (0.2-6.5)
0.810
Отрицательный (91)
19 (20,9)
72 (79,1)
Ссылка
55 (60,4 )
36 (39,6)
Ссылка
27 (29,7)
64 (70,3)
Reference
CaGa
? +? Вака
-s1? +? s2
Положительный (7)
2 (28.6)
5 (71,4)
0,9 (0,9-1,0)
0,255
5 (71,4)
2 (39.4) <бр> 0,5 (0.1-3.2)
0,537
1 (14.3)
6 (85,7)
2.7 (0.3-24.5)
0,359
Отрицательный (92)
20 ( 21,7)
72 (78,3)
Ссылка
55 (59,8)
37 (40,2)
Ссылка
28 (30,4) 64 (
69,6)
справочнике <бр> пациенты Aall были положительными либо CaGa
, Вака
или оба.
bAccording в обновленной системе Сиднея [40]. отношения
Кейдж и гендерные скорректированы коэффициенты.
* Статистически значимое.
Таблица 4 показывает корреляцию между уровнем IL-8 в слизистой оболочке желудка и H. Pylori
генотипов и особенности гистологических и ЯБДПК. Среднее значение для IL-8 была значительно выше у пациентов, инфицированных H. Pylori
с CaGa
(р = 0,011?) И Вака
-s1 генов (р = 0,011 и 0,024, соответственно?); и значительно ниже у пациентов с Вака
-s2 гена (р =? 0,004) (рисунок 1). Самые высокие уровни IL-8 были обнаружены у пациентов, которые были положительными для обоих CaGa
и Вака
-s1 (рисунок 2). Корреляция слизистой оболочки желудка IL-8 уровней с тяжестью хронического воспаления показали, что пациенты, которые имели "Умеренный отмеченное" хроническое воспаление было значительно выше медианы IL-8 уровня по сравнению с теми, кто имел «None-Mild 'воспаление (р =? 0,001 ) (Рисунок 3). У больных с "умеренной" Отмеченный активности нейтрофилов при биопсии желудка также имели значительно более высокие уровни медианные IL-8 по сравнению с теми, кто имел 'None-Mild' активность (р =? 0,007). Средние уровни ИЛ-8 также были значительно повышены в желудочном биопсий пациентов с ЯБДК по сравнению с теми, кто не имел язв (р =? 0,001). Существовал никаких существенных различий в плотности H. не пилорусов
или степень железистой атрофии или кишечной метаплазии с уровнем IL-8 в желудочном biopsies.Table 4 Корреляция между интерлейкина-8 и генотипов H. пилори, хроническое воспаление, нейтрофилы активность, и язвенная болезнь
H. pylorigenotypea

интерлейкин-8

уровень Ъ р-valuec

Медиана (МКР)

CaGa

Absent
1090,3 (1310,8)
0,011 *
Present
1885,7 (1281,6)
Вака
-s1
Absent
1245.8 (1550.2)
0,024 *
Present
1840,0 (1098,6)
Вака
-s2
Absent
1840,0 (1597,5)
0,004 *
Present
965,6 (1205,1 )
Вака
-s1? +? s2
отсутствующего
1541,1 (1566,3)
0,818
Предъявите
1711,8 (1928,7)
CaGa
? +? Вака
-s1
об отсутствии
1311,8 (1814,9)
0,021 *
Present
1901,7 (915,3)
CaGa
? +? Вака
-s2
отсутствующего
1577,5 (1548,6)
0,713
Предъявите
1331.7 (?)
CaGa
? +? Вака
s1? +? s2
Отсутствует <бр> 1541,1 (1625,9)
0,807
Предъявите
1711.8 (1803.6)
Гистологическое findingsd
хроническое воспаление
None-Mild
689,2 (1420,6)
0,001 * <бр> Умеренный отмеченное
1835.7 (1345.3)
Нейтрофильная активность
ни-Mild
1449,0 (1342,1) не
0,007 *
Умеренный отмеченное
1917.8 (2703.6)
язвенная
об отсутствии
919,3 (1153,3)
0.001 *
Present
1890.6 (1638.4)
больных Aall были положительными либо CaGa
, Вака
или обоих.
БПГ /мг белка.
cMann-Whitney U тест
.
dAccording в обновленной системе Сиднея [40].
* Статистически значимое
Рисунок 1 Уровни интерлейкина-8 в слизистой оболочке желудка у больных с H.pylori, с и без генотипов CaGa, Вака -s1 и Вака -s2. Они выражаются в виде коробчатых участков. Концы стержней указывают на 25-й и 75-й процентили. 50-й процентиль обозначается линией, а также 10-й и 90-й процентили указаны с ошибками. P-значения были рассчитаны с использованием теста Манна-Уитни U
. * Указывает на то, что величина р является статистически значимым. Рисунок 2
Уровни интерлейкина-8 в слизистой оболочке желудка у пациентов с H. пилори и без генотипов CaGa? +? Вака -s1, CaGa? +? Вака -s2 и CaGa? +? Вака -s1? +? Вака -s2. Они выражаются в виде коробчатых участков. Концы стержней указывают на 25-й и 75-й процентили. 50-й процентиль обозначается линией, а также 10-й и 90-й процентили указаны с ошибками. P-значения были рассчитаны с использованием теста Манна-Уитни U
. * Указывает на то, что величина р является статистически значимым. Рисунок 3
Уровни интерлейкина-8 в слизистой оболочке желудка у пациентов с H. Pylori и тяжести хронического воспаления, активности нейтрофилов и язвенной болезни. Они выражаются в виде коробчатых участков. Концы стержней указывают на 25-й и 75-й процентили. 50-й процентиль обозначается линией, а также 10-й и 90-й процентили указаны с ошибками. P-значения были рассчитаны с использованием теста Манна-Уитни U
. * Указывает на то, что значение р является статистически значимым.
В общей сложности 58 (75,3%) пациентов, которые имели "Умеренный отмеченное" хроническое воспаление в слизистой оболочке желудка было PUD, по сравнению с 12 (54,5%) с 'неравно- Мягкая 'в то время как 31 (79,5%) больных с "умеренной" Отмеченный активности нейтрофилов была PUD, по сравнению с 39 (65,0%) из тех, с' 'активности None-Mild. Однако эти различия не были статистически значимыми. Там не было также никакой связи между наличием ЯБДПК и тяжести железистой атрофии, кишечной метаплазии или H. плотности пилори
на желудочных биопсий.
Обсуждение
Насколько нам известно, это первое исследование, чтобы изучить ассоциацию между наличием CagA
, Вака
-s1 и Вака
-s2 генотипов в хеликобактерной
и тяжесть хронического гастрита и ЯБ в группе пациентов с Ближнего Востока. Мы также показали взаимосвязь этих факторов с уровнем IL-8 в слизистой оболочке желудка тестирующих биологическую правдоподобие, что эти бактериальные факторы вирулентности приводят к индукции цитокина IL-8, который, в свою очередь, приводит к более тяжелым воспалением и /или развитие ЯБДПК.
Там, как представляется географическая изменчивость в ассоциации между H. генотипов пилори
и желудка воспалительного ответа. Инфицирование CagA
положительных штаммов H. Pylori
в западных странах, как сообщается, вызывают более сильное воспаление желудка по сравнению с азиатскими странами, где результаты были противоречивыми [7], [20-24]. В нашем исследовании как степень хронического воспаления и активности нейтрофилов в слизистой оболочке желудка были более тяжелыми у пациентов, которые были инфицированы H. Pylori
содержащий CagA и Вака

-s1 гены. Присутствие обоих CaGa
и Вака
-s1 появился иметь синергетический роль в повышении степени тяжести воспаления у наших пациентов. С другой стороны, присутствие вача
-s2 появилась улучшить тяжесть хронического воспаления, а также активности нейтрофилов, независимо от наличия CagA
, вача
-s1 или обоих. Эти данные согласуются с результатами ранее опубликованных исследований, в которых были найдены Вака
-s2 штаммы, которые будут связаны с меньшим воспалением [25]. И CaGa
и Вака
-s1 гены также были независимо связаны с повышенным риском развития ЯБДПК, в то время как Вака
-s2 ген появился иметь меньший эффект. Пациенты, у которых как CaGa
, а Вака
-s1 ген был самый высокий риск ЯБ. С другой стороны, присутствие вача
-s2 снижает риск ЯБ, был ли он присутствует в одиночку или с CagA
, вача
-s1, или обоих. Эти результаты аналогичны тем, которые сообщили из западных стран [20], [21], [24], несмотря на то, что большинство пациентов в нашем исследовании, были с Ближнего Востока и Индийского субконтинента [26]. Недавнее исследование, проведенное с целью определения генетического сходства антихеликобактерной
изолирует от этнических арабов в Кувейте обнаружили, что эти штаммы тесно связаны с индоевропейской группы организма и явно отличается от восточно-азиатских штаммов [27]. Это может быть причиной того, почему объединение CaGa
, Вака
-s1 и Вака
-s2 и гастрит и ЯБДПК у наших пациентов, как представляется, сходным с таковым из западных стран.
провоспалительного цитокина IL-8 играет важную роль в регуляции миграции через слизистую оболочку нейтрофилов и активации. Наши результаты показывают, что уровень IL-8 в слизистой оболочке желудка было увеличено в присутствии CaGa
и Вака
-s1 генотипов хеликобактерной
и на самом высоком уровне были замечены у пациентов, которые были положительными в отношении оба этих генов. Присутствие Вака
-s2 был связан с более низкими уровнями IL-8. Значительно более высокие уровни IL-8 в слизистой оболочке желудка, также наблюдается у пациентов, которые имели более сильную степень хронического воспаления и активности нейтрофилов в желудочном биопсий, а также тех, кто был PUD. Эти результаты согласуются с предыдущими сообщениями, где уровни слизистой оболочки желудка уровней IL-8 были коррелировала с наличием вирулентности H. Pylori
генов, таких как CagA
и лед А [28], [29]. Тем не менее, некоторые исследователи не сообщили об отсутствии различий в уровнях IL-8 у пациентов с H. Pylori
инфекций с и без ЯБ [30], в то время как другие имеют более высокие уровни у больных с ЯБДПК тогда те, только с гастритом [31]. Это несоответствие в результатах производства IL-8 может быть из-за различий в методологии, используемой для измерения уровня цитокина в слизистой оболочке желудка. Мы использовали методику, основанную ELISA, который может быть более чувствительным методом цитокина количественной оценки.
Со ссылкой на другие факторы, мы не обнаружили различий в выраженности гастрита, наличие ЯБДПК или уровней ИЛ-8 между пациентами с или без истории курения и употребления алкоголя. Присутствие ЯБДПК было, однако чаще в этой группе пациентов, чем сообщалось ранее из Кувейта, а также в других местах [32]. В искажающие эффекты лекарств были сведены к минимуму лишь отбором тех пациентов, у которых не было ни на одном из указанных препаратов, по крайней мере, за 4 недели до эндоскопии. Несколько других H. Pylori
факторы, такие как Вака
-s1 подтипов (S1A и s1b), Вака
средней области подтипы (m1 и m2), гены ICEA и DUPA могут также влиять на вирулентность этого организма и его влияние на слизистую оболочку желудка [33]. Тем не менее, наше исследование не было разработано, чтобы определить эти факторы вирулентности, и это может рассматриваться как ограничение настоящего доклада. Кроме бактериальных факторов, принимающих генетика также вносят свой вклад в патогенезе гастродуоденальных заболеваний [34], [35]. Кроме того, многие полиморфизмов генов цитокинов выявить различные факторы риска в желудка и двенадцатиперстной кишки у пациентов с язвенной болезнью [36], [37].
Выводы
Данное исследование, которое включало пациентов с Ближнего Востока показывает, что наличие хеликобактерной CaGa <бр> и Вака
-s1 генов приводит к индукции более высоких уровней провоспалительного цитокина IL-8 в слизистой оболочке желудка, что не только приводит к более заметному интенсивности хронического воспаления и активности нейтрофилов в слизистой оболочке желудка, но и более высокое возникновение ЯБ. Присутствие Вака
-s2 приводит к снижению уровня IL-8, а также менее тяжелым воспалением и менее ЯБДПК. Кроме того наличие Вака
-s2 появляется, чтобы уменьшить вирулентности эффекты CagA
и /или Вака
-s1 генов.
Пациенты и методы Пациенты
и образцы
Исследование населения и метод сбора биопсии были описаны ранее [26], [32]. Вкратце, 120 последовательных, невыбранные взрослых пациентов, направленных на эзофагогастродуоденоскопия были приглашены принять участие в исследовании. У больных с нарушениями свертывания крови, перед Гастродуоденальный хирургии были исключены из исследования. У пациентов, принимавших антагонисты гистаминовых типа 2 рецепторов, ингибиторы протонной помпы, антибиотики, соли висмута, аспирин или нестероидные противовоспалительные средства, в предыдущих четырех недель также были исключены. Распространенность CagA
и Вака
генотипов у этих пациентов сообщалось ранее [26].
Верхних отделов желудочно-эндоскопия проводили стандартным способом. Все эндоскопы прошли процесс очистки и дезинфекции с автоматической моечно-дезинфицирующей перед каждой процедурой, в соответствии с рекомендациями Европейского общества гастроинтестинальной эндоскопии [38]. Для каждого пациента, четыре биопсии были взяты из антрального отдела желудка, в пределах 2 см от привратника, с использованием стерильных биопсийных щипцов
Две биоптаты фиксировали в забуференном формалине, обработаны парафином, делали срезы и окрашивали H &Amp;. Е и ГАЭС [39]. Все биопсий были рассмотрены в индивидуальном порядке старший желудочно-кишечного тракта патологоанатомом, который был ослеплен к клинической информации о пациентах. Биопсия был забит положительным для H. Pylori, если организмы
были замечены на световой микроскопии. Обновленная система Sydney была использована, чтобы выиграть плотность хеликобактерной
и степени хронического воспаления, активности нейтрофилов, железистой атрофии и кишечной метаплазии на биопсий [40]. Пациенты, у которых нет или умеренное хроническое воспаление в биопсии желудка были объединены в одну группу (None-Mild группа), в то время как те, с умеренной или заметной степени воспаления были включены в другую группу (Умеренный отмеченное группа). Кроме того, пациенты были разделены на две группы (т.е. None-легкой и среднетяжелой отмеченное) для активности нейтрофилов, а также для кишечной метаплазии и атрофии железистой.
ДНК мини-комплект КИП '(Qiagen, Hilden, Германия) был использован для извлечения ДНК из биопсий. Чистоту ДНК оценивали вычислением отношения оптической плотности (OD) при 260-280 нм, а выход количественно оценивали по оптической плотности при длине волны 260 нм.
ПЦР-амплификации ДНК-мишени
В таблице 5 показаны праймеры, используемые в настоящем изучение. CaGa
F и CaGa
R праймеры генерируют фрагмент 183 пар оснований (п.о.) для обнаружения CaGa
, в то время как праймеры VA1F и VA1XRA дают фрагмент длиной 176 пар оснований для Вака
-s1 и 203 п.н. для Вака
-s2 вариантов [41], [42]. Предварительно аликвоты ПЦР основной смеси (Abgene, Суррей, Великобритания) использовали для ПЦР-амплификации ДНК-мишени. Конечный объем реакционной смеси был 50L и содержал 25pmol каждого праймера и 50 нг ДНК [43]. ПЦР проводили после предварительной инкубации при 94 ° С в течение 5 минут, а затем 35 циклов при 94 ° C, 50 ° C и 74 ° C в течение одной минуты каждый с последующим 5 минут заключительной стадией удлинения при 74 ° C. Усиленные образцы анализировали с помощью электрофореза на 2% агарозном геле с высокой разрешающей способностью в трис-ацетатного-ЭДТА (ТАЕ) буфер, который затем окрашивали бромистым этидием в дозе 0,5 мкг /мл [44]. Ультрафиолетовый свет был использован для визуализации полос амплифицированной ДНК, которые затем были photographed.Table 5 праймеры, используемые в ПЦР для амплификации CaGa, Вака -s1 и Вака -s2 последовательностей ДНК
область Усиленные

Primer

Праймер последовательность

ПЦР-продукта (BPA)

CaGa

CaGa
F
5? -TTGACCAACAACCACAAACCGAAG-3?
183
CaGa
R
5?-CTTCCCTTAATTGCGAGATTCC-3?
vacA
-s1
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
176
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
vacA
-s2
VA1F
5?-ATGGAAATACAACAAACACAC-3?
203
VA1XRA
5?-CCTGAAACCGTTCCTACAGC-3?
ABP:. комплементарных пар оснований
Измерение IL-8
Две биопсии были немедленно замораживали в жидком азоте и хранили при температуре 80 ° C?. Р-значение < 0,05 считалось статистически значимым.

Исследования

Исследования

Other Languages