Helande effekterna av Musa sapientum var. paradisiaca i diabetiska råttor med co förekommande magsår: cytokiner och tillväxtfaktor av PCR-förstärkning

Helande effekterna av Musa sapientum
var. paradisiaca
i diabetiska råttor med co förekommande magsår: cytokiner och tillväxtfaktor av PCR-förstärkning Bild Sammanfattning
Bakgrund
aktuella studien utvärderar effekten av extrakt av Musa sapientum
frukt (MSE) på sårindex, blodglukosnivån och gastriska mukosala cytokiner, TNF-α och IL-1β och tillväxtfaktor, TGF-α (påverkas vid diabetes och kroniskt sår) i ättiksyra (AA) -inducerad magsår (GU) i diabetiska ( DR) råtta.
metoder
MSE (100 mg /kg, oralt), omeprazol (OMZ, 2,0 mg /kg, oralt), insulin (INS, 4 U /kg, SC) eller pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg, oralt) gavs en gång dagligen under 10 dagar i 14 dagar post-streptozotocin (60 mg /kg, intraperitonealt) -inducerad diabetiska råttor medan fick de normala /diabetiska råttor CMC för samma period efter induktion av GU med AA . Sår index beräknades baserat på produktens längd och bredd (mm 2 /råtta) av sår medan TNF-α, IL-1β och TGF-α uppskattades i gastrointestinala homogenatet från den intakta /sår regionen. Phytochemical screening och HPTLC-analys av MSE gjordes enligt standardförfaranden.
Resultat
En ökning av sårindex, TNF-α och IL-1β observerades i normala (NR) -AA råtta jämfört med NR-normal saltlösning råtta , vilket ytterligare ökade i DR-AA råtta medan behandlingar av DR-AA råtta med MSE, OMZ, INS och PTX omvända dem, mer så med MSE och PTX. Betydande ökning av TGF-α hittades i NR-AA råtta som inte öka ytterligare i DR-AA råtta. MSE och PTX tenderade att öka medan, OMZ och INS visade liten eller ingen effekt på TGF-α i AA-DR råtta. Phytochemical screening av MSE visade närvaron av saponiner, flavonoider, glykosider, steroider och alkaloider och HPTLC-analysen visade närvaro av åtta aktiva föreningar.
Slutsats
MSE visade antidiabetiska och bättre läkning av magsår effekter jämfört med OMZ (antiulcus) eller INS (antidiabetika) i diabetisk råtta och kan vara mer effektiv i diabetes med samtidig magsår.
Nyckelord
Musa sapientum
diabetes sårläkning TNF-α IL- 1β TGF-α bakgrund
Omfattande undersökningar om anti-ulcerogena och sårläkning verksamhet groblad banan har utförts i vårt laboratorium under de senaste 30 åren. Anti-ulcerogena aktiviteten av torkat pulver av groblad banan fruktkött (Musa sapientum
var. Paradisiaca
, MS) mot olika experimentella gastro-duodenal har rapporterats från vårt laboratorium och på andra håll. Magsår skyddande effekter av groblad banan rapporterades på grund av ökad de defensiva faktorer nämligen. ökning av mucin utsöndring, slemhinnor glykoproteiner, ansamling av prostaglandiner E och jag 2, livslängd och celltillväxt snarare än att påverka offensiven syra pepsin sekre [1-6]. Nyligen rapporterade vi sår skyddande, groblad banan höjande antioxidanter, superoxiddismutas (SOD), katalas (CAT) och glutationperoxidas (GSH) och minska fria radikaler, lipidperoxidering (LPO) och kväveoxid (NO) nivåer i magslemhinnan homogen utan någon anti-H. pylori
aktivitet in vitro
[7]. Flera rapporter tyder på att diabetes mellitus (DM) ökar slemhinnans känslighet för ulcerogena stimuli och anlag för magsår och försämrad läkning [8, 9]. Vår tidigare redovisade arbete med streptozotocin-inducerad diabetes med co förekommande magsår gjorde indikerar medverkan av både offensivt syra pepsin sekretion och fria radikaler och defensiva faktorer som slemutsöndring, slemhinnor glykoproteiner, livslängd slemhinneceller och antioxidant status av gastric slemhinna som ökas och minskas respektive [10, 11].
Pro-inflammatoriska cytokiner såsom tumörnekrosfaktor-α (TNF-α), interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) och tillväxtfaktorer innefattande insulinliknande tillväxtfaktor-1 (IGF-1) spelar en viktig roll i patogenesen av kroniska sjukdomar som autoimmun diabetes och magsår [12, 13]. Tillväxtfaktorer såsom vaskulär endotelial tillväxtfaktor (VEGF), basisk fibroblasttillväxtfaktor, transformerande tillväxtfaktor-α (TGF-α) ska genomgå en större roll i vävnadsläkningsprocesser bland annat av magsår [9, 14]. Nyligen rapporterade vi de helande effekterna av etanolextrakt av torkad frukt av massa av MS (MSE) på ättiksyra inducerad magsår hos normala (NR) råtta och fann den roll som cytokiner, TNF-a, IL-1 p och tillväxtfaktor, TGF -α läka sår [15].
hypoglykemisk aktivitet har rapporterats från grön frukt av groblad banan. Vidare leucocyanidin, en flavonoid, isolerades från groblad banan och dess dimetoxiderivat, leucocyanidin 3-O-beta-D-galaktosyl cellobiosid, demonstrerade hypoglykemisk effekt i experimentdjur [16, 17]. Därför var den aktuella studien utvidgas för att utvärdera de helande effekterna av MSE (testläkemedel) i ättiksyra-inducerade magsår på diabetes (DR-AA) råtta och dess effekter på TNF-α, IL-1β och TGF-α. Effekterna av MSE på magsår, TNF-α, IL-1β och TGF-α jämfördes med antiulcus-droger, omeprazol (OMZ, protonpumpshämmare) och pentoxyphylline (PTX, en hämmare av TNF-α , en framstående inflammatorisk markör) och hypoglykemiska läkemedel, insulin (positiva kontroller) och CMC-behandlade (negativ kontroll) i DR-AA råtta.
Metoder
Djur
inavlade Charles-Foster albinoråttor (200-250 g ) av båda könen erhölls från den centrala djurhus av Institute of Medical Sciences, Banaras hindu University, Varanasi. De hölls i institutions djurhus vid 26 ± 2 ° C och relativ fuktighet 44-56%, ljusa och mörka cykler av 10 och 14 timmar respektive 1 vecka före och under experimenten. Djur försågs med standard rodent pelletdiet (Pashu Aahar, Ramnagar). Mat drogs tillbaka 18-24 timmar före experimentet men vatten tilläts ad libitum
. Djuren delades upp i sju grupper som innehåller 6 djur vardera. De två första grupperna hade normala råttor medan 3 rd till sjunde grupper hade diabetiska råttor. Magsår producerades med ättiksyra i alla grupper utom en st-grupp (NR + NS), där NS applicerades på magväggen i stället för ättiksyra. 1 st 3 rd grupperna erhöll CMC oralt medan 4 e till 7 th grupper fick etanolextrakt av fruktkött av Musa sapientum
(MSE), omeprazol (OMZ), insulin (INS) och pentoxyphylline (PTX) under 10 dagar respektive efter induktion av GU med ättiksyra. "Principer för försöksdjurs vård" (nr. NIH publikation 82-23, reviderad 1985) riktlinjer följdes. Godkännande från Institutional Animal etiska kommitté togs innan det experimentella arbetet (Dean 542/02 /ab /CPCSEA den 23.8.2002).
Insamling och förberedelse av extrakt
Stora storlek, omogna, grön groblad bananfrukter ( Musa sapientum Linn
. var. paradisiaca
MS) som samlats in under november månad erhölls från den lokala marknaden och identifieras av professor VK Joshi, Institutionen för Dravyaguna, fakulteten för Ayurveda, IMS, BHU. Ett prov prov (MS-09/231) bevarades vid Institutionen för Dravyaguna, IMS, BHU, Varanasi. Huden av frukten skalades av och massan skars i små bitar och torkades vid rumstemperatur. Efter nyans torkning pulver av massan framställdes av de små bitarna och används för extraktion. Det etanolextrakt (MSE) framställdes genom att tillsätta 1 liter etanol två gånger, med ett intervall på två dagar. Etanolen innehållande extrakt som erhållits varje gång blandades och senare torkas i vakuumtork. MSE ades vid -20 ° C tills vidare användning. Utbytet av extraktet var 1,6% (vikt /vikt).
Fytokemiska studie
Kemiska beståndsdelar såsom saponiner, flovonoids, glykosider, steroider och alkaloider uppskattades i MSE efter de standardförfaranden [18].
HPTLC fingeravtryck utvärdering
MSE utsattes för HPTLC (CAMAG TLC-system) fingeravtryck analys. Extrakten späddes för att få en koncentration av 1 ug /ul och tillämpas på pre- belagd silikagel G60 F 254 plattor (10x10, 2 mm tjocklek, E. Merck) med användning av LINOMAT IV spotter. Plattan framkallades sedan i CAMAG platt bottenkammaren under betingelser för partiell eller fullständig mättnad av tanken atmosfär med lösningsmedelsångor. Lösningsmedelssystemet som användes var kloroform: metanol: myrsyra (9: 1: 0,5). Plattan torkades noggrant och sprayades med anisaldehyd-svavelsyra följt av upphettning vid 110 ° C under 5-10 min. Detektering av fläckar gjordes med hjälp av Hg-lampa vid 254 nm och bilder registrerades med hjälp av CAMAG Reprostar 3. Plattan scannades genom att använda CAMAG TLC scanner 3 med WinCATS utvärderingsprogram.
Narkotika och kemikalier
Streptozotocin (St . Louis, MO, USA), omeprazol (Cipla, Bombay, Indien) och pentoxyphylline (Abbott, Bangalore, Indien) användes i föreliggande studie.
Induktion av diabetes
diabetes inducerades i vuxna råttor (200- 250 g) genom en enda intraperitoneal injektion av streptozotocin (STZ, 60 mg /kg) upplöst i citratbuffert (pH 4,5) och matades normalt därefter [19], medan erhöll kontrollråttorna endast citratbuffert. Blodprover uppsamlades från retro-orbital plexus hos råttorna och serum separerades genom centrifugering vid 3000 rpm under 3 minuter. Blodglucosenivåerna uppskattades i unhemolysed serumet genom Glukosoxidas-peroxidas (GOD-POD) metoden med användning av glukos diagnostiskt kit (Ranbaxy Laboratories Ltd, Indien). Blodsockernivå (BGL) uppskattades efter 48 timmar och två veckors streptozotocin administration och råttor visar BGL över 250 mg /dl under icke fastande tillstånd valdes för magsår studie. Kroppsvikt förändringar har observerats tidigare (0 dag), efter 14 dagar efter diabetes eller normala råttor och 10 e dagen av AA-inducerad GU efter CMC /MSE /OMZ /INS /PTX behandlingar (24 e dagen) i normala och diabetiska råttor.
Acetic framkallat magsår hos diabetiska råttor och behandlingsprotokoll
diabetiska råttor syra- sövdes med pentobarbiton (35 mg /kg, intraperitonealt). Buken skars upp med ett snitt och magen visualiserades. Ett cylindriskt glasrör av 6 mm i diameter var tätt placerad på den anteriora serosala ytan av den glandulära delen av magen 1 cm bort från den pyloric änden. 100% ättiksyra (0,06 ml /djur) instillerades i röret och tillåts stanna kvar i 60 sekunder på den gastriska väggen. Efter avlägsnande av den sura lösningen, var buken stängdes i två skikt och djuren caged och matades normalt. MSE (100 mg /kg, oralt), OMZ (2,0 mg /kg, oralt), INS (4U /kg, subkutant) och PTX (10 mg /kg, oralt) administrerades en gång om dagen, första dosen ges 4 timmar efter appliceringen av ättiksyra på dag 1 och fortsatte sedan upp till 10 dagar. Djuren sattes på fasta under 24 timmar efter den sista dosen av testläkemedel på 10 e dagen och avlivades genom dödshjälp på 11 e dagen av experiment för att bedöma magsårs storlek och läkning. Sårindex beräknades baserat på produkten av längd och bredd (mm 2 /råtta) av magsår [20].
TNF-α, IL-1 och TGF-a uppskattningar
TNF-α, IL -1β och TGF-α uppskattades i intakta gastrisk slemhinna och från magslemhinnan hos diabetiska råttor som exponerats till ättiksyra med eller utan olika läkemedelsbehandlingar. Mucosa från den glandulära delen av magen skrapades av från sårig /intakt område användning av steriliserade glasskivor och lagras vid -80 ° C fram till analys. Totalt RNA extraherades från mukosa prover genom metoden enligt Chomczynski och Sacchi (1987) [21] med hjälp av extraktion kit från Bangalore Genei, Indien. Isoleringen av RNA kvantifierades och 5

• Cisaprid minskar halten gastric aspiration i mekaniskt ventilerade patients
• Metodfrågor när man analyserar betydelsen av fysisk aktivitet i gastric cancerprevention: en kritisk review