Guérison effets de Musa sapientum var. paradisiaca chez les rats diabétiques avec ulcère gastrique concomitants: cytokines et facteur de croissance par PCR amplification

effets de Musa sapientum
var Healing. paradisiaca
chez les rats diabétiques avec concomitants ulcère gastrique: les cytokines et les facteurs de croissance par amplification PCR
Résumé de l'arrière-plan
La présente étude évalue les effets de l'extrait de Musa sapientum
fruits (MSE) l'indice de l'ulcère, le niveau de glucose dans le sang et les cytokines de la muqueuse gastrique, le TNF-α et d'IL-1β et le facteur de croissance, le TGF-α (affecté dans le diabète et l'ulcère chronique) dans de l'acide acétique (AA) induite par l'ulcère gastrique (GU) chez les diabétiques ( DR) rat.
Méthodes
MSE (100 mg /kg, par voie orale), l'oméprazole (OMZ, 2,0 mg /kg, par voie orale), l'insuline (INS, 4 U /kg, sc) ou pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg, par voie orale) ont été administrés une fois par jour pendant 10 jours en 14 jours post-streptozotocine (60 mg /kg, intrapéritonéale) induite par les rats diabétiques tout, les rats diabétiques /normaux ont reçu CMC pour la même période après l'induction de GU avec AA . indice de Ulcère a été calculé sur la base du produit de la longueur et de la largeur (mm 2 /rat) des ulcères alors, le TNF-α, IL-1β et le TGF-α ont été estimés dans l'homogénat la muqueuse gastrique de la région /de l'ulcère intact. Résultats de phytochimique dépistage et HPTLC analyse des MSE a été fait suivant des procédures standard.
Une augmentation de l'indice de l'ulcère, le TNF-α et de l'IL-1β ont été observées dans des conditions normales (NR) -AA rat par rapport à rat saline NR-normale , qui ont encore augmenté en DR-AA rat tandis que, les traitements de DR-AA rat avec MSE, OMZ, INS et PTX renversaient, plus avec MSE et PTX. Augmentation significative de la TGF-α a été trouvé dans NR-AA rat qui n'a pas augmenté davantage en RD-AA rat. MSE et PTX ont eu tendance à augmenter, tandis que, OMZ et INS ont montré peu ou pas d'effet sur le TGF-α chez les AA-DR rat. criblage phytochimique de MSE a montré la présence de saponines, des flavonoïdes, des glycosides, des stéroïdes et des alcaloïdes et l'analyse HPTLC indiquait la présence de huit composés actifs.
Conclusion
MSE a montré antidiabétiques et une meilleure guérison des ulcères effets par rapport à OMZ (antiulcéreux) ou SIN (antidiabétiques) chez le rat diabétique et pourrait être plus efficace dans le diabète avec l'ulcère gastrique simultané.
Mots-clés
Musa sapientum
diabète ulcère guérison TNF-α IL- 1β Contexte de TGF-α
recherches approfondies concernant activités anti-ulcérogène et la cicatrisation des ulcères de banane plantain ont été réalisées dans notre laboratoire pour les 30 dernières années. L'activité anti-ulcérogène de poudre sèche de plantain pulpe de banane (Musa sapientum
var. paradisiaca
, MS) contre divers expérimental gastro-duodénaux ont été rapportés de notre laboratoire et ailleurs. Ulcère effets protecteurs de la banane plantain a été signalé due à l'augmentation des facteurs défensifs à savoir. augmentation de la sécrétion de mucine, des glycoprotéines muqueuses, l'accumulation de prostaglandines E et I 2, la durée de vie et la prolifération cellulaire plutôt que affectant l'acide-sécrétion de pepsine offensive [1-6]. Récemment, nous avons signalé l'ulcère de protection, la banane plantain antioxydants améliorant, la superoxyde dismutase (SOD), catalase (CAT) et de la glutathion peroxydase (GSH) et en diminuant les radicaux libres, peroxydation lipidique (LPO) et d'oxyde nitrique (NO) les niveaux dans les homogénats de la muqueuse gastrique sans aucun anti-H. L'activité pylori in vitro de
[7]. Plusieurs rapports indiquent que le diabète sucré (DM) augmente la sensibilité des muqueuses à des stimuli ulcérogènes et une prédisposition à l'ulcération gastrique et altération de la cicatrisation [8, 9]. Notre travail a rapporté plus tôt sur le diabète induit par la streptozotocine avec ulcération gastrique concomitants fait indiquer la participation à la fois offensive la sécrétion d'acide-pepsine et génération de radicaux libres et les facteurs défensifs comme la sécrétion de mucus, glycoprotéines muqueuses, la durée de vie des cellules de la muqueuse et le statut antioxydant de l'estomac la muqueuse qui sont respectivement augmentée et diminuée [10, 11].
cytokines pro-inflammatoires comme le facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), l'interleukine-1β (IL-1β), interleukine-6 ​​(IL-6) et les facteurs de croissance, y compris l'insuline-like growth factor 1 (IGF-1) jouent un rôle important dans la pathogenèse des maladies chroniques telles que le diabète auto-immunes et des ulcères gastriques [12, 13]. Les facteurs de croissance tels que le facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF), le facteur de croissance des fibroblastes, le facteur de transformation-α de croissance (TGF-α) ont de rôle majeur dans les processus de cicatrisation des tissus, y compris celui des ulcères gastriques [9, 14]. Récemment, nous avons rapporté les effets de guérison de l'extrait éthanolique de pulpe de fruits secs de MS (MSE) sur l'acide acétique induite par l'ulcère gastrique dans la normale (NR) rat et avons trouvé le rôle des cytokines, le TNF-a, IL-1 et de facteurs de croissance, TGF -α dans la guérison de l'ulcère [15] L'activité hypoglycémiante de. a été rapporté de fruits verts de la banane plantain. En outre, leucocyanidine, un flavonoïde, a été isolé de la banane plantain et son dérivé diméthoxy leucocyanidine 3-O-bêta-D-galactosyl-cellobioside, a démontré l'effet hypoglycémique chez les animaux de laboratoire [16, 17]. Par conséquent, la présente étude a été étendue afin d'évaluer les effets de guérison de MSE (médicament de test) dans l'ulcère gastrique induite par l'acide acétique dans diabétique (RD-AA) rat et ses effets sur le TNF-α, IL-1β et de TGF-α. Les effets de l'EQM sur l'ulcère gastrique, le TNF-α, IL-1β et de TGF-α ont été comparés avec des médicaments anti-ulcéreux, l'oméprazole (OMZ, un inhibiteur de la pompe à protons), et pentoxyphylline (PTX, un inhibiteur du TNF-α , Animaux
consanguines Charles-Foster Méthodes des rats albinos d'un marqueur de premier plan inflammatoire) et de médicaments hypoglycémiants, insuline (contrôles positifs) et CMC-traités (contrôle négatif) dans le DR-AA rat. (200-250 g ) des deux sexes ont été obtenus à partir de la maison centrale des animaux de l'Institut des sciences médicales, Banaras Hindu University, Varanasi. Ils ont été gardés dans la maison des animaux du Ministère à 26 ± 2 ° C et une humidité relative de 44-56%, la lumière et les cycles sombres de 10 et 14 heures respectivement pour 1 semaine avant et pendant les expériences. Les animaux ont été fournis à la norme alimentation rongeur pellet (Pashu Aahar, Ramnagar). La nourriture a été retirée 18-24 heures avant l'expérience que l'eau a été autorisé ad libitum
. Les animaux ont été divisés en sept groupes contenant 6 animaux chacun. Les deux premiers groupes avaient des rats normaux tandis que 3 e à septième groupes avait des rats diabétiques. les ulcères gastriques ont été produites avec de l'acide acétique dans tous les groupes sauf 1 er groupe (NR + NS) où NS est appliqué sur la paroi de l'estomac plutôt que de l'acide acétique. 1 er au 3 ème groupes ont reçu CMC par voie orale, tandis que 4 e à 7 e groupes ont reçu l'extrait éthanolique de la pulpe de fruit de Musa sapientum
(MSE), oméprazole (OMZ), l'insuline (INS) et pentoxyphylline (PTX) pendant 10 jours respectivement après l'induction de GU avec l'acide acétique. «Principes de laboratoire soin des animaux» (publication NIH no. 82-23, révisé 1985) des lignes directrices ont été suivies. Approbation du Comité d'éthique institutionnel des animaux a été prise avant le travail expérimental (Dean 542/02 /ab /CPCSEA en date du 23.8.2002).
Collecte et préparation d'extrait
Big taille, immatures, plantain vert banane fruits ( Musa sapientum Linn
. var. paradisiaca,
MS) collectées au cours du mois de Novembre ont été obtenus sur le marché local et identifié par le professeur VK Joshi, Département de Dravyaguna, Faculté de l'Ayurveda, IMS, BHU. Un échantillon d'exemples (MS-09/231) a été conservé dans le département de Dravyaguna, IMS, BHU, Varanasi. La peau du fruit a été décollée et la pâte a été coupée en petits morceaux et on le sèche à la température ambiante. Après la poudre de séchage de l'ombre de la pâte a été préparée à partir des petits morceaux et utilisé pour l'extraction. L'extrait éthanolique (MSE) a été préparée en ajoutant 1 litre d'éthanol deux fois, à un intervalle de deux jours. L'éthanol contenant de l'extrait ainsi obtenu à chaque fois a été mélangé puis séché dans séchoir sous vide. MSE a été stocké à -20 ° C jusqu'à utilisation ultérieure. Le rendement de l'extrait était de 1,6% (p /p).
Étude phytochimique
constituants chimiques tels que des saponines, flovonoids, glycosides, des stéroïdes et des alcaloïdes ont été estimés dans le MSE suivant les procédures standard [18].
HPTLC doigt impression évaluation
MSE a été soumis à HPTLC (CAMAG système TLC) analyse de l'impression du doigt. Les extraits ont été dilués pour obtenir une concentration de 1 pg /pl et appliqués sur un gel de silice pré-revêtue G60 F 254 plaques (10x10, épaisseur 2 mm, E. Merck) à l'aide LINOMAT IV pareur. La plaque a ensuite été développée dans CAMAG chambre à fond plat dans des conditions de saturation partielle ou totale de l'atmosphère du réservoir avec des vapeurs de solvant. Le système de solvant utilisé était un mélange chloroforme: méthanol: acide formique (9: 1: 0,5). La plaque a été soigneusement séché et pulvérisé avec de l'acide sulfurique-anisaldéhyde suivie d'un chauffage à 110 ° C pendant 5 à 10 min. La détection des taches a été faite en utilisant la lampe Hg à 254 nm et les images ont été enregistrées en utilisant CAMAG Reprostar 3. La plaque a été balayée en utilisant CAMAG TLC scanner 3 avec le logiciel d'évaluation des WinCATS
drogues et de produits chimiques
streptozotocine. (St . Louis, MO, USA), oméprazole (Cipla, Mumbai, Inde) et pentoxyphylline (Abbott, Bangalore, Inde) ont été utilisés dans la présente étude.
induction du diabète de diabète a été induit chez des rats adultes (200- 250 g) en une seule injection intraperitoneale de streptozotocine (STZ, 60 mg /kg) dissous dans un tampon citrate (pH 4,5) et alimenté normalement par la suite [19] tandis que les rats témoins ont reçu seulement le tampon citrate. Des échantillons de sang ont été prélevés à partir du plexus rétro-orbital des rats et le sérum a été séparé par centrifugation à 3000 tours par minute pendant 3 minutes. Les niveaux de glucose dans le sang ont été estimés dans le sérum non hémolysé par la méthode glucose oxydase-peroxydase (GOD-POD) en utilisant le kit de diagnostic de glucose (Ranbaxy Laboratories Ltd, Inde). le niveau de glucose sanguin (BGL) a été évaluée au bout de 48 heures et deux semaines d'administration de streptozotocine et les rats présentant BGL au-dessus de 250 mg /dl à jeun non ont été sélectionnés pour l'étude de l'ulcère gastrique. changements de poids corporel ont été observés avant (0 jour), après les rats 14 jours après diabétiques ou normaux et le 10 e jour de GU induite AA-après les traitements CMC /MSE /OMZ /INS /PTX (24 e jour) chez des rats normaux et diabétiques.
ulcère gastrique aux acides acétique induite chez des rats diabétiques et de rats diabétiques protocole de traitement ont été anesthésiés au pentobarbital (35 mg /kg par voie intrapéritonéale). L'abdomen a été coupé ouvert avec une incision et l'estomac a été visualisée. Un tube de verre cylindrique de 6 mm de diamètre a été placé étroitement sur la surface séreuse antérieure de la partie glandulaire de l'estomac à 1 cm de l'extrémité pylorique. d'acide acétique à 100% (0,06 ml /animal) a été instillé dans le tube et on le laisse 60 secondes rester sur la paroi gastrique. Après élimination de la solution d'acide, l'abdomen a été fermé en deux couches et les animaux ont été mis en cage et nourris normalement. MSE (100 mg /kg, par voie orale), OMZ (2,0 mg /kg, par voie orale), SIN (4U /kg, sous-cutanée) et la PTX (10 mg /kg, par voie orale) ont été administrés une fois par jour, la première dose étant administrée 4 heures après l'application de l'acide acétique à 1 jour, puis poursuivi jusqu'à 10 jours. Les animaux ont été mis sur la restauration rapide pendant 24 heures après la dernière dose de médicaments d'essai sur 10 e jour et sacrifiés par l'euthanasie le 11 e jour de l'expérience pour évaluer la taille de l'ulcère gastrique et la guérison. indice d'ulcère a été calculé sur la base du produit de la longueur et de la largeur (mm 2 /rat) des ulcères. [20]
le TNF-α, le TNF-α de l'IL-1 ß et TGF-alpha estimations, IL -1β et TGF-α ont été estimés dans la muqueuse gastrique intacte et de la muqueuse gastrique de rats diabétiques exposés à l'acide acétique, avec ou sans différents traitements médicamenteux. Muqueuse de la portion glandulaire de l'estomac a été raclée de la zone ulcérée /intacte en utilisant des lames de verre stérilisés et conservés à -80 ° C jusqu'à l'analyse. L'ARN total a été extrait à partir d'échantillons de la muqueuse par la méthode de Chomczynski et Sacchi (1987) [21] en utilisant le kit d'extraction de Bangalore Genei, en Inde. L'isolement de l'ARN a été quantifié et 5 pg d'ARN total a été utilisé pour préparer des ADNc. Le mélange PCR a été amplifié dans un cycleur thermique d'ADN avec les spécifications décrites dans le matériel et les méthodes. Ainsi, β-actine, IL-1β, TNF-α et TGF-α ont été estimés. Les résultats ont été exprimés en rapport entre le facteur cytokines /de croissance à la ß-actine dans les différents groupes traités
. Isolement de l'ARN total à partir de la muqueuse gastrique
environ 100 mg de la muqueuse gastrique de déchirage de la région glandulaire (site de l'ulcère région) près de la zone ulcérée a été prise en DEPC traitées tube et homogénéisé avec 1 ml de solution dénaturant. A cette 1 ml d'eau saturée de phénol, suivi par 200 ul de chloroforme - Mélange d'alcool isoamylique (fraîchement préparé dans un rapport de 49: 1) ont été ajoutés et mélangés à fond. Le mélange a été mis en incubation dans la glace pendant 15 minutes et on centrifuge à 10 000 tpm pendant 20 minutes à 4 ° C. La couche supérieure a été retirée avec précaution dans un autre tube traité au DEPC et on a ajouté 1 ml d'isopropanol à 100% et on maintient à -20 ° C pendant 30 minutes pour précipiter l'ARN. Là encore, le mélange est centrifugé à 10 000 tpm pendant 20 minutes à 4 ° C et le surnageant a été jeté. Le culot a été remis en suspension dans 0,3 ml de solution dénaturante et précipité par addition de la même quantité de 100% d'isopropanol. Ce mélange a été maintenu à -20 ° C pendant 30 minutes et on centrifuge à 10 000 tpm pendant 20 minutes à 4 ° C. Le surnageant a été jeté et le culot a été lavé avec 75% d'éthanol pour éliminer toute quantité résiduelle de guanidine pendant 15 minutes. Là encore, le contenu a été centrifugé pendant 20 minutes à 4 ° C à 10000 tours par minute. Le surnageant a été jeté et le culot contenant l'ARN a été dissous dans 100 - 200 pi d'eau traitée au DEPC et on fait incuber à 55 ° C pendant 10-15 minutes. Cet ARN total a été stocké à -70 ° C jusqu'à utilisation ultérieure. L'ARN total a été quantifié en prenant l'absorbance à 260 nm ( 260) et en utilisant la formule à-dire la concentration suivante d'échantillon d'ARN = 40 × A 260 × facteur de dilution soit une absorbance de 1 unité à 260 correspond à 40 pg d'ARN par ml (Cette relation est valable uniquement pour les mesures dans l'eau).
synthèse d'ADNc premier brin
5 ug d'ARN total a été prélevé sur chaque échantillon dans un ARN stérile libre (DEPC traité) tube et l'eau stérile a été ajouté pour compenser le volume final à 9 pi. A cette 1 pi d'oligo (dT) 18 amorce a été ajouté et placé à 65 ° C pendant 10 minutes, puis à température ambiante pendant 2 minutes. Pour ce inhibiteur 1 pl d'ARN, 1 pl de 0,1 M DTT, 4 pi de tampon RT (5x), 2,0 pi de 30 mM dNTP mix, 0,5 pi de transcriptase inverse et 1 pi d'eau stérile ont été ajoutés et bien mélangé. Le mélange a été maintenu à 42 ° C pendant 1 heure et mis à incuber à 95 ° C pendant 2 minutes et conservée dans la glace rapidement. Ce produit d'ADNc peut être utilisé directement pour l'amplification par PCR ou par ailleurs de stocker à -20 ° C pour une utilisation ultérieure. Réactionnel
en chaîne par polymérase (PCR), l'amplification
L'ADNc résultant (2 pi) a été amplifié dans un volume réactionnel de 50 ul contenant 2 U de Taq polymérase, dNTP 1 pi (30 mM), 5 pi de 10 x amorces tampons et spécifiques de PCR (avant et arrière) ont été utilisés à une concentration finale de 1 mM. Le mélange de réaction en chaîne par polymerase a été amplifié dans un thermocycleur d'ADN thermique (MJ Research), et les conditions de cyclage incubation et thermiques étaient comme suit: dénaturation à 94 ° C pendant 2 minutes, recuit à 60, 66 et 62 ° C pour l'actine β, le TGF - α, IL - β et TNF - a, respectivement, et extension à 72 ° C pendant 50 secondes et une extension finale pendant 2 minutes. Le nombre de cycles est de 30 pour toutes les réactions. La séquence nucléotidique des amorces étaient comme suit: β actine, sens 5'- TTG TAA CCA ACT ATA GGG ACG TGG - 3 '; antisens 3 '- GAT CTT GAT GGT GCT AGG - 5' (764 pb); TGF - α sens 5 '- ATG GTC CCC GCG GCC GGA CA- 3'; antisens 3 '- GAC CAC TGT CTC AGA GTG GCA GCA AGG CAG TCC TTC TTT - 5' (476 pb); IL - 1β sens 5'GCT ACC TAT GTC TTG CCC GT-3 '; antisens 3 '- GAC CAT TGC TGT TTC CTA GG - 5' (543 pb); TNF - α sens 5 '- TAC TGA ACT TCG GGG TGA TTG GTC C - 3'; antisens 3 '- CAG CCT TGT CCC TTG AAG AGA ACC - 5' (295 pb). Les amorces ont été sélectionnées sur la base des séquences publiées dans l'étude antérieure [9] ont été synthétisés par Bangalore Genei, Bangalore, Inde.
Polymerase produits de réaction en chaîne ont été détectés par électrophorèse sur un gel d'agarose à 1,5% contenant du bromure d'éthidium. Emplacement du produit prévu a été confirmé à l'aide de 300 pb échelle d'ADN (Bangalore Genei, Inde) comme marqueur de taille standard. Le gel a ensuite été photographié par sous transillumination UV. La densité des produits de PCR a été mesurée en utilisant un logiciel d'imagerie alpha. Le signal pour les produits de PCR ont été standardisé par rapport à celle de la β-actine ARNm à partir de chaque échantillon et les résultats ont été exprimés en tant que produit de PCR /β actine rapport de l'ARNm.
Analyse statistique
essai non apparié Student't »a été utilisé pour la comparaison statistique entre les deux groupes. Les comparaisons impliquant plus de deux groupes ont été effectuées en utilisant analyse de la variance à un facteur (ANOVA) et pour les comparaisons multiples par rapport au groupe de contrôle a été effectué par le test de Dunnett.
Étude phytochimique de résultats
criblage phytochimique préliminaire de MSE a montré la présence des saponines, flovonoids, glycosides, des stéroïdes et des alcaloïdes par des tests chimiques. L'impression de doigt de haute performance chromatographie sur couche mince (HPTLC) chromatogramme a montré la présence d'au moins huit composés actifs (figure 1). L'analyse du facteur et les couleurs des bandes résolues à 254 nm retenue à la R f 0,71 MSE pourrait être un flavonoïde, leucocyanidine comme précédemment rapporté par Prabha et associés [17] où ils ont montré le résultat similaire avec l'extrait méthanolique
fruits de Musa. Figure 1 L'impression de doigt de HPTLC chromatogramme de MSE. Normale
glycémie étude (NR) + NS (98,7 ± 6,0 mg /dL) et NR + AA (106,3 ± 5,8 mg /dL) rats ont montré peu ou pas de changement dans le niveau de glucose sanguin (BGL). Une étude anti-hyperglycémique dose-dépendante a été entreprise avec 50, 100 et 200 mg /kg de MSE administrés pendant 10 jours à des rats diabétiques et une diminution de 11,0, 17,0 et 19,9% (P
< 0,3 à P
< 0,1, n = 6) en BGL a été observée (BGL- 297,6 ± 21,2 mg /dL). MSE (100 mg /kg) a tendance à diminuer (17,0% de baisse, P
< 0,1), mais INS a diminué la BGL (61,4% de baisse, P
< 0,05), tandis que, OMZ et PTX ont montré peu ou pas changer en BGL par rapport au groupe AA DR +. Cependant, la dose de 100 mg /kg a été sélectionné pour une étude plus approfondie que cette dose a été précédemment jugée efficace dans la guérison d'ulcère gastrique induite par l'acide acétique chez des rats normaux 15.
Poids corporel changements
La moyenne ± SE corps le poids des rats dans tous les 7 groupes étudiés à 0 jours ont montré une gamme de 201,3 ± 3,4 à 205,4 ± 2,9 g /rat au début de l'expérience. 1 er et 2 e étaient des groupes de rats normaux tandis que 3 e à 7 e était des groupes de rats diabétiques. Augmentation du poids corporel a été observée dans 1 er (8,9%, P < 0,05) et 2 ème (5,6%) des groupes tandis que les rats diabétiques de 3 e à 7 e groupe a montré diminution du poids corporel de 8,7 à 11,3% (P < 0,05 à P < 0,01), respectivement le 14 e jour après diabétique /normal par rapport à leur valeur 0 jour respective. Il y avait un gain de poids significatif après les traitements avec MSE (9,7%, P < 0,05) et SIN (15,3%, P < 0,01), tandis que, peu d'augmentation du poids corporel a été observée avec OMZ (3,4%) et PTX (4,7% ) traitements par rapport à leur valeur respective de 14 jours. Cependant, les rats témoins diabétiques ne montrent aucune augmentation de leur poids corporel de sa valeur de 14 jours.
La guérison de l'ulcère gastrique
NR + AA rat a montré augmentation de l'indice d'ulcère (IU-14,3 ± 2,3, P
<0,05) par rapport à NR + NS (Non ulcère) de tout rat, DR + AA rat a montré augmenter encore l'indice de l'ulcère (augmentation de 108,4%, p
< 0,05) par rapport à NR + AA rat indiquant propension accrue à l'ulcération et retard dans la cicatrisation des ulcères. rats DR + AA, traités avec OMZ, INS et PTX ont montré la diminution de l'indice de l'ulcère de 39,3, 38,6 et 43,3% respectivement (près de NR + de niveau AA), tandis que, MSE a montré la diminution de 63,8%, inférieure à la valeur de NR + AA rats indiquant une meilleure guérison par MSE par rapport à OMZ, INS ou PTX (Figure 2). Figure 2 Effets de l'extrait éthanolique de la pulpe de fruit de Musa sapientum (MSE, 100 mg /kg x 10 jours), l'oméprazole (OMZ, 2 mg /kg x 10 jours), l'insuline (INS, 4U /kg × 10 jours) et pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg × 10 jours) chez le rat indice d'ulcère gastrique et de la muqueuse gastrique des cytokines, facteur de nécrose tumorale α (TNF-α) et l'interleukine-1β (IL-1β) et transforming growth Factor α (TGF-α ) en tant que rapport à la ß actine dans de l'acide acétique (AA) induite par l'ulcère gastrique dans des conditions normales (NR) et DR), des rats diabétiques (. Les résultats sont la moyenne + SEM, 4 animaux dans l'étude des cytokines et des facteurs de croissance et les 6 animaux dans l'étude de l'ulcère gastrique. CMC, MSE, OMZ et PTX ont été administrés par voie orale tout; INS a été administrée par voie sous-cutanée. * P
< 0,05 par rapport à un groupe NS, aP
< 0,05 par rapport à NR + AA groupe et + P
< 0,05 par rapport à un groupe AA DR + (analyse statistique a été effectuée par un moyen ANOVA suivie d'un test de Dunnett pour des comparaisons multiples).
TNF-α, IL-1β et de TGF-α
les résultats de TNF-α, IL-1β et de TGF-α ont été exprimées en tant que rapport des cytokines /croissance facteur de ß-actine (figures 2 et 3). Figure 3: Effet de l'EQM, OMZ, l'INS et la PTX sur la muqueuse gastrique du TNF-α, IL-1β et les niveaux de TGF-α chez le rat diabétique (RD) (méthode RT-PCR). Lane M: Marqueur. Lane 1: NR + NS. Piste 2: NR + AA. Piste 3: DR + AA. Lane 5: DR + AA + MSE. Lane 6: DR + AA + OMZ. Lane 7: DR + AA + INS. Piste 8:. DR + AA + PTX
TNF-α et d'IL-1β
NR + AA rats ont montré augmentation de la muqueuse gastrique du TNF-α par 265,1% (P
< 0,05) et IL- 1β de 52,8% (P
< 0,05) par rapport à NR + NS (muqueuse intacte) rats. les rats DR + AA ont montré nouvelle augmentation du taux d'IL-1β et TNF-α par 345,0 et 102,5%, respectivement (P
< 0,05) par rapport aux rats NR + NS respectifs et 21.9 et 32,6% d'augmentation (p
< 0,05) par rapport aux rats NR + AA respectifs. Traitements de rats DR + AA avec le médicament hypoglycémiant, INS et anti médicaments contre les ulcères, MSE et OMZ et PTX inversés les niveaux d'IL-1β et TNF-α près du niveau de la NR + AA. Cependant, les deux MSE et PTX ont montré de meilleurs effets sur la diminution du TNF-α et d'IL-1β par rapport à OMZ ou SIN (figures 2 & 3).
TGF-α
NR + AA rats ont montré augmentation significative de la muqueuse gastrique TGF-α (augmentation de 165,1%, p
< 0,05) par rapport aux rats NR + NS. Cependant, le TGF-α n'a pas encore augmenté chez les rats DR + AA par rapport à un groupe AA + NR. Traitements de rats DR + AA avec OMZ et INS n'a pas augmenté le niveau de TGF-α autre temps, MSE et PTX ont tendance à augmenter le TGF-α (figures 2 & 3). Discussion des rats diabétiques
expérimental ont montré propension accrue à l'ulcération gastrique et une altération de la cicatrisation des lésions gastriques [8, 9] et cette aggravation de l'ulcère /retard de cicatrisation était inversée par les agents de correction du niveau de sucre dans le sang [22]. Diabète non insulino-dépendant (DNID) augmente la tendance à l'ulcération gastrique en améliorant offensante, l'acide sécrétion de pepsine et les radicaux libres de la muqueuse gastrique, la peroxydation lipidique (LPO), l'oxyde nitrique (NO) et la diminution de la glycoprotéine et les antioxydants des muqueuses, la superoxyde dismutase ( SOD) niveaux [10] de. streptozotocine (STZ) est largement utilisé pour induire le diabète expérimental chez l'animal et son action cytotoxique est médiée par les espèces réactives de l'oxygène. STZ semble être plus spécifique puisqu'il est l'absorption par GLUT2 spécifique des cellules bêta, mais pas par d'autres transporteurs de glucose et ont moins d'effets secondaires. Il provoque l'activation d'un poly ADP-ribosylation, ce qui conduit à la formation de radicaux superoxydes et, par conséquent, les cellules ß sont soumis à la destruction par une nécrose [23]. Le mécanisme sous-jacent à la sensibilité accrue de la muqueuse gastrique chez les animaux diabétiques à des lésions est multifactorielle et comprend l'atténuation de l'angiogenèse, ainsi que la production accrue de cytokines pro-inflammatoires TNF-a et l'IL-1 ß qui donnent lieu à une réaction inflammatoire prolongée et un processus de retarder la guérison chez la zone de l'ulcère [9]. Le principal mécanisme par lequel les cytokines exercent leurs influences délétères sur la cicatrisation des ulcères peut impliquer l'inhibition des facteurs responsables de la régénération des muqueuses et de la récupération des dommages [24] croissance. Il a également été rapporté que le TNF-α augmente la production d'IL-1β et d'autres cytokines, ce qui conduit à l'accumulation de neutrophiles [25] et une production accrue de ROS dans la muqueuse gastrique sont exposés à une ischémie-reperfusion. Pentoxifylline, un inhibiteur du TNF-α a été rapporté pour accélérer la cicatrisation des ulcères gastriques induits par l'acide acétique chez le rat éventuellement via l'inhibition de la production de TNF-α [13]. Il a été rapporté que l'amélioration de la prolifération cellulaire au cours de la cicatrisation des ulcères peut être médiée par une libération accrue de l'EGF et le TGF-α. Il a également été rapporté que, malgré l'augmentation du niveau de TGF-α chez les rats diabétiques avec ulcère gastrique concomitants la guérison a été retardée en raison de inconnue mécanisme /s. Il a été proposé que l'hyperglycémie chez les animaux diabétiques pourrait induire des modifications de la structure du TGF-α ou ses récepteurs dans la zone de l'ulcère, conduisant à un dysfonctionnement de ce facteur de croissance au cours du diabète sucré [9, 26].
Acide acétique (AA ) ulcère induite chez le rat ont été rapportés d'avoir ressemblance avec des ulcères cliniques dans l'emplacement, la chronicité et la gravité et sert le modèle le plus fiable pour étudier processus ulcère de guérison [20]. Dans la présente étude, nous avons observé des niveaux accrus de cytokines pro-inflammatoires TNF-α et de l'IL-1β dans la muqueuse gastrique des rats normaux traités avec de l'acide acétique. Les rats diabétiques présentaient une nouvelle augmentation de leur niveau par rapport aux rats normaux lorsqu'ils sont soumis à l'ulcération gastrique induite par l'acide acétique. L'observation ci-dessus a été en confirmation avec les œuvres rapporté plus tôt [13, 27, 28]. MSE a été signalé pour inverser l'augmentation de TNF-α et IL-1β dans GU induite par AA chez des rats normaux et de promouvoir la cicatrisation des ulcères par ses divers effets sur les facteurs de défense de la muqueuse gastrique, y compris augmentation de la prolifération des cellules et des antioxydants et des réducteurs libres des niveaux de radicaux [7, 15]. Le traitement avec l'insuline a renversé la guérison de l'ulcère avec facultés affaiblies chez les animaux diabétiques, principalement en raison de la normalisation de l'hyperglycémie, mais pas à l'effet direct de l'insuline sur la guérison de l'ulcère parce que l'insuline administrée à des rats non diabétiques n'a montré aucun effet sur la cicatrisation des ulcères [ ,,,0],27]. Cela a montré que les médicaments antidiabétiques étaient efficaces en corrigeant le taux de glucose a augmenté en réduisant ainsi les niveaux de ces cytokines alors que, médicament contre l'ulcère (oméprazole) a été l'amélioration de la cicatrisation des ulcères et de réduire leur niveau [15]. TNF-α a été rapporté pour stimuler la régulation des niveaux d'IL-1, de manière en contrôlant l'expression du TNF-α de l'expression de l'IL-1β pourrait être contrôlée. Cela peut être le mécanisme par lequel la pentoxifylline diminue à la fois les niveaux [29]. Cytokines
Le présent travail a montré augmentation du niveau de TGF-α chez les rats traités avec de l'acide acétique. Cependant, aucune augmentation du niveau de TGF-α a été trouvée chez les rats diabétiques et cette observation est cohérente avec les observations antérieures montrent l'importance de ce facteur de croissance dans le processus de cicatrisation des ulcères. Cependant, le fait qu'un retard de cicatrisation des ulcères gastriques chez l'état diabétique, malgré l'augmentation de l'expression de TGF-α, indique que les effets de guérison de ce facteur de croissance peuvent être atténués par un mécanisme inconnu. Ce milite contre le rôle majeur de ce facteur dans le retard observé dans la guérison des ulcères gastriques dans des conditions diabétiques. Une possibilité est que l'hyperglycémie chez les animaux diabétiques pourrait induire des modifications de la structure du TGF-α ou ses récepteurs ou diminuer la disponibilité des ingrédients essentiels requis pour la cicatrisation normale dans la région de l'ulcère, conduisant à un dysfonctionnement de ce facteur de croissance au cours du diabète sucré. D'autres études sont nécessaires pour répondre à la question de savoir pourquoi l'expression accrue de TGF-α ne contribue pas à la libération d'un facteur de croissance fonctionnellement actif [9]. Il a également été signalé que le niveau de TGF-α accrue pourrait augmenter la prolifération cellulaire [30]. MSE a montré une tendance à augmenter le niveau de TGF-α chez les rats diabétiques. Cela peut être mieux corrélée à la prolifération cellulaire comme MSE a été rapporté pour augmenter la prolifération cellulaire [4].
Activité hypoglycémique due à la stimulation de la production d'insuline et l'utilisation du glucose a été rapporté de fruits verts de banane plantain et de fibres de fruits ont été trouvés pour augmenter glucogenèse dans le foie et réduit la glycémie à jeun. Musa sapientum
a été rapporté pour contenir ß-sitostérol, leucocyanidine, sryngin, quercétine, sterylglycosides, acides aminés, etc. ß-sitostérol et dérivé diméthoxy de leucocyanidine, leucocyanidine 3-O-bêta-D-galactosyl cellobioside, ont démontré l'effet hypoglycémiant chez l'animal expérimental [16]. Les flavonoïdes sont le plus souvent connus pour leur activité anti-ulcéreux, hypolipémiants activité, l'activité anti-inflammatoire, l'activité antioxydante, activité antimicrobienne [31] et anti-hyperglycémiques [32] activités. HPTLC empreintes de MSE a démontré huit principes actifs dont l'un des constituants peut être leucocyanidine, tel que rapporté précédemment par Prabha et associés [17], qui ont comparé le constituant avec leucocyanidine norme authentifié. Les alcaloïdes ont été signalés à montrer, activité antioxydante anti-diabétique et anti-inflammatoire [33] tandis que les saponines ont montré des effets anti-diabétiques [34].
Conclusion
La présence de nombreux principes actifs tels que les flavonoïdes, des saponines, des glycosides et Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.

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