Helende effecten van Musa sapientum var. paradisiaca bij diabetische ratten met gelijktijdig optredende maagzweer: cytokines en groeifactoren door PCR amplificatie

Helende effecten van Musa sapientum
var. paradisiaca
bij diabetische ratten met co-voorkomende maagzweer: cytokines en groeifactoren door PCR-amplificatie
Abstracte achtergrond
De huidige studie evalueert de effecten van een extract van Musa sapientum
fruit (MSE) op zweer index bloedglucosespiegel en maagslijmvlies cytokines, TNF-α en IL-1β en groeifactor, TGF-α (betrokken bij diabetes en chronische zweer) in azijnzuur (AA) geïnduceerde maagzweer (GU) bij diabetische ( DR) rat.
Methods
MSE (100 mg /kg, oraal), omeprazol (OMZ, 2,0 mg /kg, oraal), insuline (INS, 4 U /kg, sc) of pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg, oraal) werden eenmaal daags gedurende 10 dagen 14 dagen na streptozotocine (60 mg /kg, intraperitoneaal) -geïnduceerde diabetische ratten terwijl ontving de normale /diabetesratten CMC dezelfde periode na inductie van AA met GU . Ulcus index werd berekend op basis van het product van lengte en breedte (mm 2 /rat) of zweren wanneer TNF-α, IL-1β en TGF-α geschat in het maagslijmvlies homogenaat uit de intacte /zweer regio. Fytochemische screening en HPTLC-analyse van MSE werd uitgevoerd volgens standaardprocedures.
Resultaten
Toename van ulcus index, TNF-α en IL-1β waargenomen in normale (NR) -AA rat vergeleken met NR-normale zoutoplossing rat , die verder in de DR-AA ratten terwijl werden verhoogd, behandelingen van DR-AA rat met MSE, OMZ, INS en PTX omgekeerd hen, meer nog met MSE en PTX. Aanzienlijke stijging van de TGF-α werd gevonden in NR-AA rat die niet verder in DR-AA rat niet verhoogde. MSE en PTX neiging om tijdens het verhogen OMZ Ins toonde weinig of geen effect op TGF-α in AA-DR rat. Fytochemische screening van MSE toonde de aanwezigheid van saponinen, flavonoïden, glycosiden, steroïden en alkaloïden en HPTLC-analyse de aanwezigheid van acht actieve verbindingen.
Conclusie
MSE toonde antidiabetische en betere ulcer heilzame werking tegen OMZ (tegen zweren) of INS (antidiabetica) bij diabetische ratten en effectiever diabetes met gelijktijdige maagzweer zou kunnen zijn.
Sleutelwoorden
Musa sapientum
diabetes genezing van ulcera TNF-α IL-1β TGF-α Achtergrond
Uitgebreid onderzoek met betrekking tot anti-ulcerogene en de genezing van ulcera activiteiten van kookbanaan hebben in ons laboratorium zijn uitgevoerd voor de afgelopen 30 jaar. Anti-ulcerogene activiteit van gedroogde poeder van kookbanaan vruchtvlees (Musa sapientum
var. Paradisiaca
, MS) tegen verschillende experimentele gastro-duodenale zijn gemeld uit ons laboratorium en elders. Zweer beschermende effecten van kookbanaan werd gemeld als gevolg van verhoging van de defensieve factoren nl. toenemen in mucine secretie, mucosale glycoproteïnen, ophoping van prostaglandines E en I 2, levensduur en celproliferatie in plaats van invloed zijn op het offensief zuur-pepsine secretie [1-6]. Meldde onlangs we zweer beschermende, kookbanaan verbeteren antioxidanten, superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) en glutathion peroxidase (GSH) en het verlagen van de vrije radicalen, lipide peroxidatie (LPO) en stikstofoxide (NO) niveaus in het maagslijmvlies homogenaten zonder anti-H. pylori
activiteit in vitro
[7]. Verschillende rapporten geven aan dat diabetes mellitus (DM) verhoogt de gevoeligheid voor mucosale ulcerogene stimuli en aanleg voor maagzweren en verminderde genezing [8, 9]. Ons eerder gemeld werk op door streptozotocine geïnduceerde diabetes met co-voorkomende maagzweren deden geven de betrokkenheid van zowel de offensieve zuur-pepsine secretie en van vrije radicalen en defensieve factoren zoals slijmafscheiding, mucosale glycoproteïnen, levensduur van mucosale cellen en anti-oxidant status van de maag mucosa die verhoogd respectievelijk verlaagd [10, 11].
pro-inflammatoire cytokines zoals tumor necrose factor-α (TNF-α), interleukine-1β (IL-1β), Interleukine-6 ​​(IL-6) en groeifactoren zoals insuline-achtige groeifactor-1 (IGF-1) een belangrijke rol bij de pathogenese van chronische ziekten zoals auto-immune diabetes en maagzweren [12, 13]. Groeifactoren zoals vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), basic fibroblast groeifactor, transformerende groeifactor-α (TGF-α) hebben belangrijke rol in het weefsel genezingsprocessen inbegrip van maagzweren [9, 14]. Recent rapporteerden we de helende werking ethanolische extract gedroogd fruit pulp MS (MSE) op azijnzuur opgewekte maagzweer normale (NR) rat en vond de rol van cytokines, TNF-α, IL-1β en groeifactor, TGF -α in het helen van zweer [15] Hypoglycemic activiteit.
is gemeld uit groene vrucht van weegbree banaan. Verder leucocyanidin, een flavonoïde, werd geïsoleerd uit kookbanaan en dimethoxy derivaat leucocyanidin 3-O-ß-D-galactosyl cellobioside, toonde hypoglycemisch effect bij proefdieren [16, 17]. Daarom werd deze studie uitgebreid tot de helende werking van MSE (testgeneesmiddel) in azijn- zuur-geïnduceerde maagzweren bij diabetische (DR-AA) ratten en effecten op TNF-α, IL-1β en TGF-α evalueren. De effecten van MSE op maagzweren, TNF-α, IL-1β en TGF-α vergeleken met anti-ulcer middelen, omeprazol (OMZ, protonpompremmer) en pentoxyphylline (PTX, een remmer van TNF-α , een prominente inflammatoire marker) en hypoglycemic drugs, insuline (positieve controles) en CMC-behandelde (negatieve controle) in DR-AA rat.
Methods
Dieren
Inbred Charles-Foster albino ratten (200-250 g ) van beide geslachten werden verkregen uit de centrale dier huis van Institute of Medical Sciences, Banaras Hindu University, Varanasi. Zij werden in de afdeling dierenverblijf gehouden bij 26 ± 2 ° C en relatieve vochtigheid 44-56%, licht en donker cycli van 10 en 14 uur respectievelijk 1 week voor en tijdens de experimenten. De dieren werden voorzien van standaard knaagdieren pellet voeding (Pashu Aahar, Ramnagar). Voedsel werd ingetrokken 18-24 uur voor het experiment al water mocht ad libitum
. De dieren werden verdeeld in zeven groepen met 6 dieren elk. Eerste twee groepen hadden normale ratten, terwijl 3 rd naar de zevende groepen hadden diabetische ratten. Maagzweren werden geproduceerd met azijnzuur in alle groepen behalve 1 e groep (NR + NS), waarbij NS werd op de maagwand in plaats van azijnzuur. 1 st tot 3 rd groepen kregen CMC mondeling, terwijl 4 e tot 7 e groepen ethanolextract van vruchtvlees van Musa sapientum
(MSE), omeprazol (OMZ) ontvangen, insuline (INS) en pentoxyphylline (PTX) gedurende 10 dagen, respectievelijk na inductie van GU met azijnzuur. 'Principles of proefdier zorg' (NIH publicatie nr. 82-23, herzien 1985) richtlijnen werden gevolgd. Goedkeuring van de Ethische Commissie Institutional Animal werd genomen voorafgaand aan het experimentele werk (Dean 542/02 /ab /CPCSEA dd 23.8.2002).
Collection en de voorbereiding van het extract
Groot formaat, onrijpe, groene weegbree banaan fruit ( Musa sapientum Linn
. var. paradisiaca,
MS) in de loop van de maand november verzameld werden verkregen van de lokale markt en geïdentificeerd door Prof. VK Joshi, Department of Dravyaguna, Faculteit van Ayurveda, IMS, BHU. Een proefstuk (MS-09/231) werd bewaard in het ministerie van Dravyaguna, IMS, BHU, Varanasi. De huid van de vrucht werd afgepeld en de pulp werd in kleine stukjes gesneden en gedroogd bij kamertemperatuur. Na droging poeder schaduw van de pulp werd bereid uit de kleine deeltjes en gebruikt voor de extractie. Het ethanolische extract (MSE) werd bereid door toevoeging van 1 liter ethanol tweemaal met een interval van twee dagen. De ethanol bevattende extract aldus verkregen telkens werd gemengd en vervolgens gedroogd onder vacuüm droger. MSE werd bewaard bij -20 ° C tot verder gebruik. De opbrengst van het extract was 1,6% (w /w).
Phytochemische studie
chemische bestanddelen zoals saponinen, flovonoids, glycosiden, steroïden en alkaloïden geschat in de MSE volgens de standaardprocedures [18].
HPTLC vinger afdrukken evaluatie
MSE werd onderworpen aan HPTLC (CAMAG TLC-systeem) vinger afdrukken analyse. De extracten werden verdund om een ​​concentratie van 1 ug /ul krijgen en toegepast op vooraf beklede silicagel G60 F 254 platen (10x10, 2 mm dik, E. Merck) met Linomat IV spotter. De plaat werd vervolgens ontwikkeld in CAMAG vlakke onderste kamer onder omstandigheden van gedeeltelijke of volledige verzadiging van de tankatmosfeer met oplosmiddeldampen. Het oplosmiddel dat gebruikt werd chloroform: methanol: mierezuur (9: 1: 0,5). De plaat werd zorgvuldig gedroogd en besproeid met anijsaldehyd-zwavelzuur gevolgd door verwarming bij 110 ° C gedurende 5-10 minuten. De detectie van vlekken werd gemaakt met behulp van Hg-lamp bij 254 nm en de beelden werden opgenomen met behulp van CAMAG Reprostar 3. De plaat werd gescand met behulp van CAMAG TLC scanner 3 met WinCATS evaluatie software.
Drugs en chemicaliën
Streptozotocin (St . Louis, MO, USA), omeprazol (Cipla, Mumbai, India) en pentoxyphylline (Abbott, Bangalore, India) werden gebruikt in de huidige studie.
Inductie van diabetes
diabetes werd bij volwassen ratten veroorzaakte (200- 250 g) met een enkele intraperitoneale injectie van streptozotocine (STZ, 60 mg /kg) opgelost in citraatbuffer (pH 4,5) en normaal gevoed daarna [19], terwijl de controle ratten kregen alleen citraatbuffer. Bloedmonsters werden uit de retro-orbitale plexus van de ratten verzameld en serum werd afgescheiden door centrifugeren bij 3000 rpm gedurende 3 minuten. De bloedglucosewaarden werden geschat in de unhemolysed serum door Glucose oxidase-peroxidase (GOD-POD) methode met behulp van glucose diagnostische kit (Ranbaxy Laboratories Ltd, India). Bloedsuikerspiegel (BGL) werd geschat na 48 uur en twee weken van streptozotocine administratie en ratten tonen BGL boven 250 mg /dL onder niet-nuchtere omstandigheden werden geselecteerd voor maagzweren studie. Veranderingen in het lichaamsgewicht zijn waargenomen vóór (0 dag), na 14 dagen na diabetische of normale ratten en op de 10 e dag van AA-geïnduceerde GU na CMC /MSE /OMZ /INS /PTX behandelingen (24 e dag) in normale en diabetische ratten.
Acetic acid opgewekte maagzweer bij diabetische ratten en behandelingsprotocol
diabetische ratten werden verdoofd met pentobarbiton (35 mg /kg, intraperitoneaal). De buik was opengesneden met een incisie en de maag werd gevisualiseerd. Een cilindrische glazen buis van 6 mm werd stevig geplaatst op het voorste oppervlak van het serosale glandulaire maag gedeelte van 1 cm van de pylorus einde. 100% azijnzuur (0,06 ml /dier) werd gedruppeld in de buis en liet men 60 seconden blijven de maagwand. Na verwijdering van de zure oplossing werd het abdomen gesloten in twee lagen en dieren werden gehuisvest en normaal gevoed. MSE (100 mg /kg, oraal) OMZ (2,0 mg /kg, oraal), INS (4U /kg, subcutaan) en PTX (10 mg /kg, oraal) toegediend, eenmaal daags, eerste dosis gegeven 4 uur na toepassing van azijnzuur op dag 1 en worden voortgezet tot 10 dagen. De dieren werden snel gebracht gedurende 24 uur na de laatste dosis testgeneesmiddelen op 10 e dag en gedood door euthanasie op 11 ste dag van het experiment maagzweer grootte en genezing beoordelen. Ulcus index werd berekend op basis van het product van lengte en breedte (mm 2 /rat) van zweren [20].
TNF-α, IL-1β en TGF-α schattingen
TNF-α, IL -1β en TGF-α werden geschat intacte maagslijmvlies en naar maagslijmvlies van diabetische ratten die tot azijnzuur, met of zonder andere behandelingen met geneesmiddelen. Slijmvlies van de glandulaire gedeelte van de maag werden afgeschraapt van de zweervorming /intact stippellijn behulp glasplaatjes gesteriliseerd en bewaard bij -80 ° C tot analyse. Totaal RNA werd uit mucosa monsters geëxtraheerd door de werkwijze van Chomczynski en Sacchi (1987) [21] met de extractie kit van genei Bangalore, India. De isolatie van RNA werd gekwantificeerd en 5 ug totaal RNA werd gebruikt om cDNA te bereiden. Het PCR mengsel werd geamplificeerd in een PCR-apparaat met de materialen en werkwijzen beschreven specificaties. Aldus β-actine, IL-1β, TNF-α en TGF-α geschat. De resultaten zijn uitgedrukt als verhouding van de cytokinen /groeifactoren aan P-actine in de verschillende behandelde groepen.
Totaal RNA isolatie van maagslijmvlies
ongeveer 100 mg maagslijmvlies sloop van de glandulaire regio (plaats van ulcus gebied) nabij de zweervorming gebied werd in DEPC behandeld buisje genomen en gehomogeniseerd met 1 ml denaturerende oplossing. Deze 1 ml water verzadigde fenol, gevolgd door 200 pl chloroform - isoamylalcohol mengsel (vers bereid in de verhouding 49: 1) werd toegevoegd en grondig gemengd. Het mengsel werd geïncubeerd op ijs gedurende 15 minuten en gecentrifugeerd bij 10.000 rpm gedurende 20 minuten bij 4 ° C. De bovenste laag werd zorgvuldig verwijderd om andere DEPC behandelde buis en 1 ml 100% isopropanol werd toegevoegd en gedurende 30 minuten bewaard bij -20 ° C om het RNA te precipiteren. Opnieuw wordt het mengsel gecentrifugeerd bij 10.000 rpm gedurende 20 minuten bij 4 ° C en de supernatant werd weggegooid. De pellet werd geresuspendeerd in 0,3 ml denaturerende oplossing en neergeslagen door toevoeging gelijke hoeveelheid 100% isopropanol. Dit mengsel werd bij -20 ° C gedurende 30 minuten gehouden en gecentrifugeerd bij 10.000 rpm gedurende 20 minuten bij 4 ° C. Het supernatant werd weggegooid en de pellet werd gewassen met 75% ethanol om resterende hoeveelheden guanidine verwijderen gedurende 15 minuten. Weer de inhoud werd gedurende 20 minuten bij 4 ° C bij 10.000 rpm. Het supernatant werd weggegooid en de pellet met RNA werd opgelost in 100-200 pi DEPC behandeld water en geïncubeerd bij 55 ° C gedurende 10-15 minuten. Het totale RNA werd opgeslagen bij -70 ° C tot verder gebruik. Het totale RNA werd gekwantificeerd door middel van de absorptie bij 260 nm (A 260) en met de volgende formule ie concentratie van RNA-monster = 40 x A 260 x verdunningsfactor namelijk een absorptie van 1 eenheid op A 260 overeenkomt met 40 ug RNA per ml (Deze relatie is geldig voor metingen in water).
eerste streng cDNA-synthese
5 ug totaal RNA werd van elk monster in een steriele RNA vrij (DEPC behandelde) buis en steriel water werd toegevoegd om het uiteindelijke volume op 9 pl. Deze 1 pl Oligo (dT) 18 primer toegevoegd en gedurende 10 minuten geplaatst bij 65 ° C en vervolgens bij kamertemperatuur gedurende 2 minuten. Deze 1 pl RNA remmer, 1 ui 0,1 M DTT, 4 ui RT buffer (5x), 2,0 ui 30 mM dNTP mengsel, 0,5 ui reverse transcriptase en 1 pl steriel water toegevoegd en goed gemengd. Het mengsel werd bij 42 ° C gedurende 1 uur gehouden en geïncubeerd bij 95 ° C gedurende 2 minuten en snel in ijs bewaard. Dit cDNA product kan direct worden gebruikt voor PCR-amplificatie of anders bij -20 ° C voor verder gebruik.
Polymerase kettingreactie (PCR) amplificatie
De resulterende cDNA (2 ui) werd geamplificeerd in een 50 pl reactievolume met 2 U Taq polymerase, dNTP 1 ui (30 mM), 5 ui 10 x PCR buffer en specifieke primers (voorwaarts en achterwaarts) werden gebruikt in een eindconcentratie van 1 mM. De polymerasekettingreactie werd geamplificeerd in een PCR-apparaat (MJ Research) en de incubatie en thermale cycli condities waren als volgt: denaturatie bij 94 ° C gedurende 2 minuten hybridisatie bij 60, 66 en 62 ° C gedurende β actine, TGF - α, IL - β en TNF - a respectievelijk en verlenging bij 72 ° C gedurende 50 sec en uiteindelijke extensie van 2 minuten. Het aantal cycli bedraagt ​​30 voor alle reacties. De nucleotide sequentie van de primers waren als volgt: β actine sense 5'-TTG TAA CCA ACT GGG ACG TGG ATA - 3 '; antisense 3 '- GAT GAT CTT GGT GCT AGG - 5' (764 bp); TGF - α sense 5 '- ATG GTC CCC GCG GCC GGA CA-3'; antisense 3 '- GAC CAC TGT CTC AGA GTG GCA GCA AGG CAG TCC TTC TTT - 5' (476 bp); IL - 1β sense 5'-GCT TAT ACC GTC TTG CCC GT -3 '; antisense 3 '- GAC CAT TGC TGT TTC CTA GG - 5' (543 bp); TNF - α sense 5 '- TAC TGA ACT TCG GGG TGA TTG GTC C - 3'; antisense 3 '- CAG CCT TGT CCC TTG AAG AGA ACC - 5' (295 bp). De primers werden geselecteerd op basis van de gepubliceerde eerdere studie [9] sequenties werden gesynthetiseerd door genei Bangalore, Bangalore, India.
Polymerase kettingreactie producten werden gedetecteerd door elektroforese op een 1,5% agarosegel bevattende ethidiumbromide. Locatie van de voorspelde product werd bevestigd door het gebruik van 300-bp DNA ladder (Bangalore genei, India) als een standaard formaat marker. De gel werd vervolgens gefotografeerd door onder UV-transilluminatie. De dichtheid van de PCR producten werd gemeten met behulp van alfa imager software. Het signaal voor PCR-producten werden gestandaardiseerd met die van β-actine mRNA van elk monster en de resultaten werden uitgedrukt als PCR product /β-actine mRNA verhouding.
Statistische analyse Electronics Test Unpaired Student't werd gebruikt voor statistische vergelijking tussen twee groepen. Vergelijkingen met meer dan twee groepen werden uitgevoerd via een variantieanalyse (ANOVA) en meervoudige vergelijkingen versus controlegroep werd uitgevoerd door Dunnett's.
Resultaten
Phytochemische studie
Voorlopige fytochemische screening van MSE toonde de aanwezigheid saponinen, flovonoids, glycosiden, steroïden en alkaloïden door chemische testen. De vingerafdrukken van Krachtige dunnelaagchromatografie (HPTLC) chromatogram toonde de aanwezigheid van ten minste acht actieve verbindingen (Figuur 1). De analyse van de retentie factor en de kleuren van de opgelost bands bij 254 nm bij R f 0,71 in MSE kan een flavonoïde zijn, leucocyanidin zoals eerder gemeld door Prabha en medewerkers [17], waar ze het vergelijkbaar resultaat met de methanol extract getoond van Musa sapientum
fruit. Figuur 1 De vinger drukken van HPTLC chromatogram van MSE.
bloedglucose studie
Normal (NR) + NS (98,7 ± 6,0 mg /dl) en NR + AA (106,3 ± 5,8 mg /dl) ratten toonde weinig of geen verandering in de bloedglucosespiegel (BGL). Dosisafhankelijke anti-hyperglycemische studie werd uitgevoerd met 50, 100 en 200 mg /kg MSE toegediend gedurende 10 dagen diabetische ratten en een afname van 11,0, 17,0 en 19,9% (P
<, 0,3 P
< 0,1, n = 6) in BGL werd waargenomen (BGL- 297,6 ± 21,2 mg /dl). MSE (100 mg /kg) de neiging af te nemen (17,0% afname, P
< 0,1), maar INS verlaagde de BGL (61,4% afname, P
< 0,05) terwijl OMZ PTX en vertoonden weinig of geen veranderen in BGL vergelijking met DR + AA-groep. Echter, dosis van 100 mg /kg werd geselecteerd voor verder onderzoek omdat deze dosis eerder effectief bleek bij de genezing azijn- zuur-geïnduceerde maagzweren in normale ratten 15.
Lichaamsgewicht veranderingen
gemiddelde ± SE lichaam gewicht van de ratten in alle groepen 7 studeerde 0 dag toonde diverse 201,3 ± 3,4-205,4 ± 2,9 g /rat bij aanvang van het experiment. 1 e en 2 nd waren normaal rat groepen terwijl 3 rd tot 7 e was diabetisch rat groepen. Toename van het lichaamsgewicht werd waargenomen bij 1 st (8,9%, P < 0,05) en 2 nd (5,6%) groepen, terwijl de diabetische ratten van 3 rd tot 7 e groep vertoonde afname in lichaamsgewicht met 8,7 tot 11,3% (P < 0,05 tot P < 0,01) respectievelijk op 14 e paal normale /diabetes dag in vergelijking met hun respectieve 0 dagwaarde. Er was significante gewichtstoename na behandeling met MSE (9,7%, P < 0,05) en INS (15,3%, P < 0,01) terwijl kleine toename van het lichaamsgewicht werd waargenomen bij OMZ (3,4%) en PTX (4,7% ) behandelingen in vergelijking met hun respectievelijke 14 dagen waarde. Echter, diabetes controle ratten geen toename van hun lichaamsgewicht van de 14-daagse waarde laten zien.
Maagulcus genezing
NR + AA rat toonde stijging van de ulcus index (UI-14.3 ± 2.3, P
<0,05) in vergelijking met nR + NS (No ulcus) rat, terwijl DR + AA ratten toonde verder uit te breiden in ulcus index (108,4% te verhogen, P Restaurant < 0,05) in vergelijking met nR + AA rat aangeeft verhoogde neiging om te zweren en vertraging in de genezing van ulcera. DR + AA ratten, behandeld met OMZ, INS en PTX toonde daling van ulcus index van 39,3, 38,6 en 43,3% respectievelijk (in de buurt van NR + AA-niveau), terwijl, MSE toonde daling met 63,8%, minder dan de waarde van NR + AA ratten aangeven betere genezing van MSE opzichte OMZ, INS of PTX (figuur 2). Figuur 2 Effecten van ethanolextract vruchtenpulp Musa sapientum (MSE, 100 mg /kg x 10 dagen), omeprazool (OMZ, 2 mg /kg x 10 dagen), insuline (INS, 4U /kg x 10 dagen) en pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg x 10 dagen) bij ratten maagzweren index en maagslijmvlies cytokinen, tumor necrosis factor-α (TNF-α) en interleukine-1β (IL-1β) en transformerende groeifactor α (TGF- α ) als verhouding actine in azijnzuur (AA P) geïnduceerde maagzweren bij normale (NR) en diabetische (DR) ratten. Resultaten zijn het gemiddelde + SEM, 4 dieren cytokines en groeifactoren studie en 6 dieren maagzweer studie. CMC, MSE, OMZ en PTX werden oraal toegediend terwijl; INS werd gegeven door subcutane route. * P Restaurant < 0,05 in vergelijking met NS groep, AP Restaurant < 0,05 in vergelijking met NR + AA-groep en + P Restaurant < 0,05 in vergelijking met DR + AA-groep (Statistische analyse werd uitgevoerd door een ANOVA gevolgd door Dunnett's test voor meerdere vergelijkingen).
TNF-α, IL-1β en TGF-α
de resultaten van TNF-α, hebben IL-1β en TGF-α uitgedrukt als verhouding van de cytokinen /groei factor aan P-actine (figuren 2 en 3). Figuur 3 Effect van MSE, OMZ, INS PTX op maagslijmvlies TNF-α, IL-1β en TGF-α bij diabetici ratten (DR) (RT-PCR-methode). Lane M: Marker. Laan 1: NR + NS. Laan 2: NR + AA. Laan 3: DR + AA. Laan 5: DR + AA + MSE. Laan 6: DR + AA + OMZ. Laan 7: DR + AA + INS. Laan 8:. DR + AA + PTX
TNF-α en IL-1β
NR + AA ratten toonde verhoging van het maagslijmvlies TNF-α met 265,1% (P
< 0,05) en IL 1β met 52,8% (P Restaurant < 0,05) in vergelijking met NR + NS (intact slijmvlies) ratten. DR + AA ratten vertoonden verdere verhoging van de niveaus van IL-1β en TNF-α bij 345,0 en 102,5% respectievelijk (P
< 0,05) in vergelijking met respectieve NR + NS ratten en 21,9 en 32,6% toename (P
< 0,05) in vergelijking met respectieve NR + AA ratten. Behandelingen van DR + AA ratten met hypoglycemische geneesmiddelen, INS en anti ulcer middelen, MSE en OMZ en PTX keerde de niveaus van IL-1β en TNF-α nabij de NR + AA-niveau. Zowel MSE en PTX toonde betere afnemende effecten op TNF-α en IL-1β opzichte OMZ of INS (figuren 2 & 3).
TGF-α
NR + AA ratten vertoonden significante toename maagslijmvlies TGF-α (165,1% te verhogen, P Restaurant < 0,05) in vergelijking met NR + NS ratten. Echter, TGF-α niet verder verhoogd DR + AA ratten vergeleken NR + AA groep. Behandelingen van de DR + AA ratten met OMZ en INS heeft de TGF-α niveau verder, terwijl, MSE niet verhogen en PTX neiging om TGF-α verhogen (figuren 2 & 3).
Discussie
Experimentele diabetische ratten hebben aangetoond verhoogde neiging tot maagzweren en verminderde genezing van maag-laesies [8, 9] en dit verergering van de zweer /vertraagde genezing werden teruggedraaid door agenten corrigeren bloedsuikerspiegel [22]. Niet-insuline afhankelijke diabetes mellitus (NIDDM) verhoogde de neiging om maagzweren door verbetering aanvallend, zuur-pepsine secretie en maagslijmvlies vrije radicalen lipide peroxidatie (LPO), stikstofoxide (NO) en dalende mucosale glycoproteïne en antioxidanten, superoxide dismutase ( SOD) niveau [10].
streptozotocine (STZ) wordt veel gebruikt voor experimentele diabetes bij dieren te induceren en de cytotoxische werking wordt bemiddeld door reactieve zuurstof species. STZ lijkt specifiek is opname door bèta celspecifieke GLUT2, maar niet door andere glucose transporters zijn en minder bijwerkingen. Het veroorzaakt activering van poly ADP-ribosylatie, hetgeen leidt tot de vorming van superoxide radicalen en daardoor β cellen ondergaan vernietiging door necrose [23]. Het mechanisme dat de verhoogde gevoeligheid van het maagslijmvlies bij diabetische dieren schade multifactorieel en omvat de verzwakking van angiogenese en de verhoogde productie van pro-inflammatoire cytokines, TNF-α en IL-1β die leiden tot aanhoudende ontstekingsreactie en latere genezingsproces op de zweer gebied [9]. Het belangrijkste mechanisme waardoor cytokinen oefenen hun nadelige invloeden op de genezing van maagzweren kan de remming van groeifactoren die verantwoordelijk zijn voor mucosale regeneratie en herstel van de schade [24] omvatten. Ook is gemeld dat TNF-α verhoogt de productie van IL-1β en andere cytokines, wat leidt tot accumulatie van neutrofielen [25] en verhoogde productie van ROS in het maagslijmvlies blootgesteld aan ischemie-reperfusie. Pentoxifylline is een remmer van TNF-α is gerapporteerd dat genezing van het azijn- zuur-geïnduceerde maagzweren bij ratten versnellen eventueel via remming van TNF-α productie [13]. Vermeld is dat de versterking van celproliferatie tijdens de genezing van maagzweren kan worden gemedieerd door verhoogde afgifte van EGF en TGF-α. Ook is gemeld dat ondanks de toename van TGF-α niveau in de ratten met diabetes gelijktijdig optredende maagzweer genezing is vertraagd door onbekende mechanisme /s. Voorgesteld werd de hyperglycemie in diabetische dieren een aantal structurele modificaties van TGF-α of zijn receptoren in de wond gebied zou kunnen induceren, wat leidt tot het disfunctioneren van deze groeifactor bij diabetes mellitus [9, 26].
Azijnzuur (AA ) geïnduceerde zweren bij ratten werden gemeld gelijkenis met klinische zweren in plaats chroniciteit en ernst hebben en dient als de meest betrouwbare model ulcera genezingsproces [20] bestuderen. In de onderhavige studie hebben we verhoogde niveaus van pro-inflammatoire cytokinen waargenomen TNF-α en IL-1β in het maagslijmvlies van normale ratten behandeld met azijnzuur. Diabetische ratten toonden een verdere toename van het niveau in vergelijking met normale ratten bij blootstelling aan azijn- zuur-geïnduceerde gastrische ulceratie. De bovenstaande waarneming is in de bevestiging met de eerder gerapporteerde werk [13, 27, 28]. MSE is gemeld aan de toename van TNF-α en IL-1β in GU geïnduceerd door AA in normale ratten keren en bevorderen de genezing van maagzweren door de verschillende effecten op maagslijmvlies defensieve factoren zoals verhoogde proliferatie en antioxidanten cellen en verminderen vrije radicalen niveaus [7, 15]. De behandeling met insuline omgekeerd de gestoorde genezing van de zweer bij diabetische dieren, voornamelijk als gevolg van de normalisering van hyperglycemie, maar niet aan het directe effect van insuline op de genezing van maagzweren omdat insuline toegediend aan niet-diabetische ratten geen effect bij de genezing van ulcera [vertoonden ,,,0],27]. Hieruit bleek dat antidiabetica effectief op door de verhoogde glucosespiegel waardoor de niveaus van deze cytokines dat anti zweerdrug (omeprazol) is het verbeteren van de genezing van ulcera en verminderen het niveau [15] verminderen waren. TNF-α is gerapporteerd aan de op regulatie van IL-1β niveaus stimuleren om door regeling van de TNF-α expressie van de IL-1β expressie kan worden gecontroleerd. Hierdoor kan het mechanisme waarmee pentoxifylline vermindert zowel de niveaus cytokinen [29]. Ondernemingen De onderhavige werk toonde verhoging van TGF-α niveau ratten behandeld met azijn- zuur. Echter geen verdere toename van TGF-α lager waren bij diabetische ratten en deze waarneming is consistent met eerdere waarnemingen die het belang van deze groeifactor in het proces van genezing van de zweer. Echter, het feit dat een vertraging van de genezing van maagzweren in de diabetische toestand, ondanks verhoogde expressie van TGF-α, geeft aan dat de helende effecten van deze groeifactor kan worden verzwakt door een onbekende mechanisme. Dit pleit tegen de belangrijke rol van deze factor in de waargenomen vertraging bij de genezing van maagzweren onder diabetische omstandigheden. Een mogelijkheid is dat de hyperglycemie in diabetische dieren een aantal structurele modificaties van TGF-α of zijn receptoren kan induceren of de beschikbaarheid van essentiële ingrediënten nodig voor normale genezingsproces in de zweer verklein, leidt tot het disfunctioneren van deze groeifactor bij diabetes mellitus. Verdere studies zijn nodig om de vraag waarom verhoogde expressie van TGF-α niet bijdraagt ​​aan de afgifte van een functioneel actieve groeifactor [9]. Ook werd gemeld dat de verhoogde TGF-α niveau celproliferatie [30] kan verhogen. MSE vertoonde een neiging tot TGF-α niveau bij diabetische ratten te verhogen. Dit kan beter gecorreleerd met celproliferatie als MSE is gemeld om celproliferatie te verhogen [4].
Hypoglykemische activiteit als gevolg van stimulatie van insulineproductie en glucose gebruik gerapporteerd van groene vruchten van kookbanaan en vezels uit fruit gevonden om glucogenesis in de lever en verlaagde nuchtere bloedglucose verhogen. Musa sapientum
is gemeld β-sitosterolen, leucocyanidin, sryngin, quercetine, sterylglycosides, aminozuren enz β-sitosterolen en dimethoxy derivaat leucocyanidin, leucocyanidin 3-O-ß-D-galactosyl cellobioside bevatten, hebben hypoglykemische effect aangetoond in proefdieren [16]. Flavonoïden zijn het meest bekend om hun activiteit tegen zweren, lipideverlagende activiteit, anti-ontstekingsactiviteit, antioxidant activiteit, antimicrobiële activiteit [31] en antihyperglykemische [32] activiteiten. HPTLC fingerprinting van MSE aangetoond acht actieve bestanddelen waarbij een van de componenten kunnen worden leucocyanidin, zoals eerder gerapporteerd door Prabha en medewerkers [17], die de samenstellende gewaarmerkte standaard leucocyanidin moeten vergelijken. Alkaloïden gemeld anti-diabetische en anti-inflammatoire, antioxidant activiteit vertonen [33] terwijl saponinen toonde anti-diabetische effecten [34].
Conclusie Ondernemingen De aanwezigheid van veel actieve bestanddelen, zoals flavonoiden, saponinen, glycosiden en Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Cisapride vermindert maaginhoud aspiratie in mechanisch geventileerde patients
• Methodologische vraagstukken bij de analyse van de rol van fysieke activiteit in de maag preventie van kanker: een kritische review