Helbredende virkninger af Musa sapientum var. paradisiaca i diabetiske rotter med co-forekommende mavesår: cytokiner og vækstfaktor ved PCR amplification

helbredende virkninger af Musa sapientum
var. paradisiaca
i diabetiske rotter med co-forekommende mavesår: cytokiner og vækstfaktor ved PCR-amplifikation
Abstract
Baggrund
Den foreliggende undersøgelse vurderer effekten af ​​ekstrakt af Musa sapientum
frugt (MSE) på ulcus-indeks, blodglucoseniveau og gastriske mucosale cytokiner, TNF-α og IL-1β og vækstfaktor, TGF-α (påvirkes i diabetes og kronisk ulcus) i eddikesyre (AA) -induceret mavesår (GU) i diabetiske ( DR) rotte. Salg Metoder
MSE (100 mg /kg, oral), omeprazol (OMZ, 2,0 mg /kg, oral), insulin (INS, 4 U /kg, sc) eller pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg, oral) blev givet en gang dagligt i 10 dage i 14 dage efter streptozotocin (60 mg /kg, intraperitonealt) -induceret diabetiske rotter, mens de normale /diabetiske rotter modtog CMC i samme periode efter induktion af GU med AA . Ulcus-indeks blev beregnet baseret på produktet af længde og bredde (mm 2 /rotte) af sår, mens TNF-α, IL-1β og TGF-α blev anslået i maveslimhinden homogenat fra det intakte /ulcus region. Fytokemiske screening og HPTLC-analyse af MSE blev udført ved at følge standardprocedurer.
Resultater
En stigning i ulcus-indeks, TNF-α og IL-1β blev observeret i normalt (NR) -AA rotte sammenlignet med NR-normal saltopløsning rotte , hvilket yderligere blev forøget i DR-AA rotte mens behandlinger af DR-AA rotte med MSE, OMZ, INS og PTX vendt dem, mere så med MSE og PTX. Betydelig stigning i TGF-α blev fundet i NR-AA rotte, som ikke stige yderligere i DR-AA rotte. MSE og PTX tendens til at stige, mens, OMZ og INS viste lidt eller ingen effekt på TGF-α i AA-DR rotte. Fytokemiske screening af MSE viste tilstedeværelsen af ​​saponiner, flavonoider, glycosider, steroider og alkaloider og HPTLC-analyse indikerede tilstedeværelsen af ​​otte aktive forbindelser.
Konklusion
MSE viste antidiabetika og bedre sårheling effekter sammenlignet med OMZ (antiulcus) eller INS (antidiabetisk) i diabetisk rotte og kunne være mere effektiv i diabetes med sideløbende mavesår.
Nøgleord
Musa sapientum
diabetes ulcusheling TNF-α IL 1β TGF-α Baggrund
Omfattende undersøgelser vedrørende anti-ulcerogene og sårheling aktiviteter af vejbred banan er udført i vores laboratorium for de sidste 30 år. Mavesårshæmmende aktivitet af tørrede pulver af vejbred banan pulp (Musa sapientum
var. Paradisiaca
, MS) mod forskellige eksperimentelle gastro-duodenale er blevet rapporteret fra vores laboratorium og andre steder. Mavesår beskyttende virkninger af vejbred banan blev rapporteret som følge af stigningen i de defensive faktorer nemlig. stigning i mucin sekretion, slimhinder glycoproteiner, ophobning af prostaglandiner E og I 2, levetid og celledeling i stedet at påvirke den offensive syre-pepsin sekretion [1-6]. Vi har for nylig rapporteret ulcus beskyttende, vejbred bananer øger antioxidanter, superoxiddismutase (SOD), catalase (CAT) og glutathionperoxidase (GSH) og reducere frie radikaler, lipidperoxidation (LPO) og nitrogenoxid (NO) niveauer i de gastriske mucosale homogenater uden nogen anti-H. pylori
aktivitet in vitro
[7]. Adskillige rapporter tyder på, at diabetes mellitus (DM) øger mucosal modtageligheden for ulcerogene stimuli og prædisposition for gastrisk ulceration og forringet heling [8, 9]. Vores tidligere rapporterede arbejde på streptozotocin-induceret diabetes med co-forekommende mavesår gjorde angive inddragelse af både offensive syre-pepsin sekretion og frie radikaler generation og defensive faktorer som slim sekretion, slimhinder glycoproteiner, levetiden af ​​slimhindeceller og antioxidant status af gastrisk slimhinde som blev forøget og formindsket henholdsvis [10, 11].
Pro-inflammatoriske cytokiner såsom tumornekrosefaktor-α (TNF-α), Interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) og vækstfaktorer, herunder insulin-lignende vækstfaktor-1 (IGF-1) spiller en vigtig rolle i patogenesen af ​​kroniske sygdomme som autoimmun diabetes og mavesår [12, 13]. Vækstfaktorer såsom vaskulær endotelvækstfaktor (VEGF), basisk fibroblastvækstfaktor, transformerende vækstfaktor-α (TGF-α) har stor rolle i vævsheling processer herunder at mavesår [9, 14]. Vi har for nylig rapporteret helbredende virkninger af ethanolekstrakt af tørret pulp af MS (MSE) på eddikesyre-induceret mavesår hos normale (NR) rotter og fandt rolle cytokiner, TNF-a, IL-1 og vækstfaktor, TGF -α i healing sår [15].
hypoglykæmisk aktivitet er blevet rapporteret fra grøn frugt vejbred banan. Yderligere, leucocyanidin, et flavonoid, blev isoleret fra plantain bananer og dens dimethoxyderivatet, leucocyanidin 3-O-p-D-galactosyl cellobiosid, demonstrerede hypoglykæmisk effekt i forsøgsdyr [16, 17]. Derfor blev den foreliggende undersøgelse udvides til at evaluere de helbredende virkninger af MSE (testlægemiddel) i eddikesyre-induceret mavesår i diabetiske (DR-AA) rotte og dens virkninger på TNF-α, IL-1β og TGF-α. Virkningerne af MSE på mavesår, TNF-α, IL-1β og TGF-α blev sammenlignet med anti-ulcus lægemidler, omeprazol (OMZ, protonpumpehæmmer) og pentoxyphylline (PTX, en inhibitor af TNF-α , en fremtrædende inflammatorisk markør) og hypoglykæmiske lægemidler, insulin (positive kontroller) og CMC-behandlede (negativ kontrol) i DR-AA rotte.
Metoder
Dyr
Inbred Charles-Foster albinorotter (200-250 g ) af begge køn blev opnået fra den centrale dyr hus Institute of Medical Sciences, Banaras Hindu University, Varanasi. De blev holdt i afdelinger dyr hus på 26 ± 2 ° C og relativ luftfugtighed 44-56%, lyse og mørke cyklusser af 10 og 14 timer henholdsvis 1 uge før og under forsøgene. Dyrene blev forsynet med standard gnavere pellet kost (Pashu Aahar, Ramnagar). Fødevarer blev trukket tilbage 18-24 timer før forsøget selvom vandet var tilladt ad libitum
. Dyr blev opdelt i syv grupper indeholdende 6 dyr i hver. Første to grupper havde normale rotter, mens 3 rd til syvende grupper havde diabetiske rotter. Gastriske ulcera blev fremstillet med eddikesyre i alle grupper undtagen 1 st gruppe (NR + NS), hvor IF blev påført mavevæggen stedet for eddikesyre. 1 st til 3 rd grupper fik CMC oralt, mens 4 th til 7 th grupper modtog ethanolekstrakt af pulp af Musa sapientum
(MSE), omeprazol (OMZ), insulin (INS) og pentoxyphylline (PTX) i 10 dage henholdsvis efter induktion af GU med eddikesyre. "Principper for laboratoriedyr pleje« (NIH publikation nr. 82-23, revideret 1985) retningslinjer blev fulgt. Godkendelse fra Institutional Animal Komité blev taget forud for den eksperimentelle arbejde (Dean 542/02 /ab /CPCSEA dateret 23.8.2002).
Indsamling og udarbejdelse af ekstrakt
Big størrelse, umodne, grønne vejbred banan frugter ( Musa sapientum Linn
. var. paradisiaca,
MS) indsamlet i november måned blev opnået fra det lokale marked og identificeret af professor VK Joshi, Institut for Dravyaguna, Faculty of Ayurveda, IMS, BHU. A Sample eksemplar (MS-09/231) blev bevaret i Department of Dravyaguna, IMS, BHU, Varanasi. Huden af ​​frugten blev skrællet af og pulpen blev skåret i små stykker og tørret ved stuetemperatur. Efter skygge tørring pulver af pulpen blev fremstillet ud fra de små stykker og anvendes til ekstraktion. Den ethanoliske ekstrakt (MSE) blev fremstillet ved tilsætning af 1 liter ethanol to gange, med et interval på to dage. Den ethanol indeholdende ekstrakt således opnåede hver gang blev blandet og senere tørret i vakuumtørrer. MSE blev opbevaret ved -20 ° C indtil yderligere anvendelse. Udbyttet af ekstrakten var 1,6% (vægt /vægt).
Phytochemical undersøgelse
kemiske bestanddele såsom saponiner, flovonoids, glycosider, steroider og alkaloider blev anslået i MSE følge standardprocedurer [18].
HPTLC fingeraftryk evaluering
MSE blev underkastet HPTLC (CAMAG TLC-system) fingeraftryk analyse. Ekstrakterne blev fortyndet for at få en koncentration på 1 pg /pl og anvendes præ- overtrukne silicagel G60 F 254 plader (10x10, mm tykkelse 2, E. Merck) ved anvendelse LINOMAT IV spotter. Pladen blev derefter fremkaldt i CAMAG fladbundet kammer under betingelser med partiel eller fuldstændig mætning af tanken atmosfære med opløsningsmiddeldampe. Det anvendte opløsningsmiddelsystem var chloroform: methanol: myresyre (9: 1: 0,5). Pladen blev forsigtigt tørret og sprøjtet med anisaldehyd-svovlsyre efterfulgt af opvarmning ved 110 ° C i 5-10 min. Påvisning af pletter blev lavet ved hjælp af Hg-lampe ved 254 nm og billederne blev optaget ved hjælp af CAMAG Reprostar 3. Pladen blev scannet ved hjælp CAMAG TLC scanner 3 med WinCATS evaluering software.
Narkotika og kemikalier
streptozotocin (St . Louis, MO, USA), omeprazol (Cipla, Mumbai, Indien) og pentoxyphylline (Abbott, Bangalore, Indien) blev anvendt i den foreliggende undersøgelse.
Induktion af diabetes Salg diabetes blev induceret i voksne rotter (200 250 g) ved en enkelt intraperitoneal injektion af streptozotocin (STZ, 60 mg /kg) opløst i citratbuffer (pH 4,5) og fodret normalt derefter [19], mens rotterne kontrol- kun modtog citratbuffer. Blodprøver blev opsamlet fra retro-orbital plexus af rotterne, og serum blev adskilt ved centrifugering ved 3000 rpm i 3 minutter. De blodsukkerniveauet blev estimeret i unhemolysed serum ved Glukoseoxidase-peroxidase (GUD-POD) metode bruger glukose diagnostisk kit (Ranbaxy Laboratories Ltd, Indien). Blodglucoseniveau (BGL) blev estimeret efter 48 timer og to uger af streptozotocin administration og rotter viser BGL over 250 mg /dl under ikke fastende betingelser blev udvalgt til mavesår undersøgelse. er observeret Kropsvægt ændringer, før (0 dage), efter 14 dage efter diabetiske eller normale rotter og den 10 th dag i AA-induceret GU efter CMC /MSE /OMZ /INS /PTX behandlinger (24 th dag) i normale og diabetiske rotter.
eddikesyre- induceret mavesår hos diabetiske rotter og behandlingsprotokol
diabetiske rotter blev bedøvet med pentobarbiton (35 mg /kg, intraperitonealt). Abdomen blev skåret åben med et indsnit og maven blev visualiseret. Et cylindrisk glasrør af 6 mm i diameter blev stramt placeret på den forreste serøse overflade af den glandulære del af maven 1 cm fra pylorus ende. 100% eddikesyre (0,06 ml /dyr) blev inddryppet ind i røret og fik lov til at forblive 60 sekunder på mavevæggen. Efter fjernelse af syreopløsningen, blev abdomen lukket i to lag, og dyrene blev anbragt i bur og fodret normalt. MSE (100 mg /kg, oral), OMZ (2,0 mg /kg, oral), INS (4U /kg, subkutant) og PTX (10 mg /kg, oral) blev administreret en gang dagligt, første dosis gives 4 timer efter anvendelse af eddikesyre på dag 1 og derefter fortsatte op til 10 dage. Dyrene blev sat på hurtigt i 24 timer efter den sidste dosis af testlægemidler på 10 th dag og aflives ved eutanasi på 11 th forsøgsdagen at vurdere mavesår størrelse og helbredelse. Ulcus-indeks blev beregnet baseret på produktet af længde og bredde (mm 2 /rotte) af sår [20].
TNF-α, IL-1 og TGF-a skøn
TNF-α, IL -1β og TGF-α blev estimeret i intakte maveslimhinden og fra maveslimhinden hos diabetiske rotter udsat for eddikesyre med eller uden forskellige lægemiddelbehandlinger. Slimhinde fra glandulære del af mavesækken blev skrabet fra sår /intakt område ved hjælp steriliserede objektglas og opbevaret ved -80 ° C indtil analyse. Totalt RNA blev ekstraheret fra mucosa prøver ved fremgangsmåden ifølge Chomczynski og Sacchi (1987) [21] ved hjælp af ekstraktion kit fra Bangalore Genei, Indien. Isoleringen af ​​RNA blev kvantificeret og 5 ug totalt RNA blev anvendt til at fremstille cDNA. PCR-blandingen blev amplificeret i en DNA thermal cycler med specifikationerne beskrevet i materialer og fremgangsmåder. Således β-actin, IL-1β, TNF-α og TGF-α blev estimeret. Resultaterne er blevet udtrykt som forholdet mellem den cytokiner /vækstfaktor til p-actin i de forskellige behandlede grupper.
Total RNA isolation fra maveslimhinden
Ca. 100 mg af maveslimhinden ophugning fra glandulær region (stedet for ulcus område) i nærheden af ​​sårområdet blev taget i DEPC behandlet rør og homogeniseret med 1 ml denaturerende opløsning. Til denne 1 ml vandmættet phenol efterfulgt af 200 pi chloroform - isoamylalkohol blanding (frisk fremstillet i forholdet 49: 1) blev tilsat og blandet grundigt. Blandingen blev inkuberet i is i 15 minutter og centrifugeret ved 10000 rpm i 20 minutter ved 4 ° C. Det øvre lag blev omhyggeligt fjernet i en anden DEPC behandlet rør og 1 ml 100% isopropanol blev tilsat og holdt ved -20 ° C i 30 minutter til udfældning af RNA'et. Igen blandingen centrifugeres ved 10000 rpm i 20 minutter ved 4 ° C, og supernatanten blev kasseret. Pelleten blev resuspenderet i 0,3 ml denaturerende opløsning og præcipiteret ved tilsætning af samme mængde af 100% isopropanol. Denne blanding blev holdt ved -20 ° C i 30 minutter og centrifugeret ved 10000 rpm i 20 minutter ved 4 ° C. Supernatanten blev kasseret, og pelleten blev vasket med 75% ethanol for at fjerne enhver resterende mængder af guanidin i 15 minutter. Igen indholdet blev centrifugeret i 20 minutter ved 4 ° C ved 10000 rpm. Supernatanten blev kasseret, og pelleten indeholdende RNA blev opløst i 100 - 200 pi DEPC behandlet vand og inkuberet ved 55 ° C i 10-15 minutter. Denne totalt RNA blev opbevaret ved -70 ° C indtil yderligere anvendelse. Den totale RNA blev kvantificeret ved at tage absorbansen ved 260 nm (A 260) og ved hjælp af følgende formel dvs. koncentration af RNA-prøve = 40 × A 260 × fortyndingsfaktor dvs. en absorbans på 1 enhed på A 260 svarer til 40 ug af RNA per ml (Denne relation er kun gyldig for målinger i vand).
Første streng cDNA syntese
5 pg total RNA blev taget fra hver prøve i et sterilt RNA gratis (DEPC behandlet) rør og sterilt vand blev tilsat til at udgøre den endelige volumen til 9 pi. Til denne 1 pi oligo (dT) 18 primer blev tilsat og anbragt ved 65 ° C i 10 minutter og derefter ved stuetemperatur i 2 minutter. Til denne 1 pi RNA'er inhibitor, 1 pi 0,1 M DTT, 4 pi RT puffer (5x), 2,0 pi 30 mM dNTP-blanding, 0,5 pi af revers transkriptase og 1 pi sterilt vand blev tilsat og blandet godt. Blandingen blev holdt ved 42 ° C i 1 time og inkuberet ved 95 ° C i 2 minutter og holdt i is hurtigt. Dette cDNA produkt kan anvendes direkte til PCR-amplifikation eller på anden måde opbevares ved -20 ° C til yderligere anvendelse.
Polymerase kædereaktion (PCR) amplifikation
resulterende cDNA (2 pi) blev amplificeret i en 50 pi reaktionsvolumen indeholdende 2 U Taq-polymerase, blev dNTP 1 pi (30 mM), 5 pi 10 x PCR-buffer og specifikke primere (fremad og tilbage) anvendt ved en slutkoncentration på 1 mM. polymerasekædereaktion blandingen blev amplificeret i en DNA thermal cycler (MJ Research) og inkubationen og termisk cykling betingelser var som følger: denaturering ved 94 ° C i 2 minutter, annealing ved 60, 66 og 62 ° C i β actin, TGF - α, IL - β og TNF - a henholdsvis og forlængelse ved 72 ° C i 50 sekunder og endelig forlængelse i 2 minutter. Antallet af cyklusser er 30 for alle reaktioner. Nukleotidsekvensen af ​​primerne var som følger: β-actin, fornemmer 5'-TTG TAA CCA ACT GGG ACG ATA TGG - 3 '; antisense 3 '- GAT CTT GAT GGT GCT AGG - 5' (764 bp); TGF - α sans 5 '- ATG GTC CCC GCG GCC GGA CA-3'; antisense 3 '- GAC CAC TGT CTC AGA GTG GCA GCA AGG CAG TCC TTC TTT - 5' (476 bp); IL - 1β fornuft 5'GCT ACC TAT GTC TTG CCC GT -3 « antisense 3 '- GAC CAT TGC TGT TTC CTA GG - 5' (543 bp); TNF - α sans 5 '- TAC TGA ACT TCG GGG TGA TTG GTC C - 3'; antisense 3 '- CAG FTT TGT CCC TTG AAG AGA ACC - 5' (295 bp). Primerne blev udvalgt baseret på sekvenserne, der er offentliggjort i tidligere studie [9] blev syntetiseret ved Bangalore Genei, Bangalore, Indien.
Polymerasekædereaktion produkter blev påvist ved elektroforese på en 1,5% agarosegel indeholdende ethidiumbromid. Placering af forudsagte produkt blev bekræftet ved anvendelse af 300-bp DNA-stige (Bangalore Genei, Indien) som en standard størrelse markør. Gelen blev derefter fotograferet af under UV-gennemlysning. Densiteten af ​​PCR-produkterne blev målt ved anvendelse af a billeddanner software. Signalet for PCR-produkter blev standardiseret over den for β-actin mRNA fra hver prøve, og resultaterne blev udtrykt som PCR-produkt /β actin mRNA ratio.
Statistisk analyse
-parret Student't 'test blev anvendt til statistisk sammenligning mellem to grupper. Sammenligninger involverer mere end to grupper blev udført ved anvendelse envejs variansanalyse (ANOVA) og for multiple sammenligninger i forhold til kontrolgruppen blev gjort ved Dunnetts test.
Resultater Salg phytochemical undersøgelse
Indledende fytokemiske screening af MSE viste tilstedeværelsen saponiner, flovonoids, glycosider, steroider og alkaloider ved kemisk prøvning. fingeraftryk af High-Performance tyndtlagskromatografi (HPTLC) kromatogram Den viste tilstedeværelsen af ​​mindst otte aktive forbindelser (Figur 1). Analysen af ​​Retentionsfaktoren og farver af de opløste bands på 254 nm ved R f 0,71 i MSE kunne være et flavonoid, leucocyanidin som tidligere rapporteret af Prabha og associerede virksomheder [17], hvor de har vist lignende resultat med methanoliske ekstrakt Musa sapientum
frugt. Figur 1 finger trykning af HPTLC kromatogram af MSE.
Blodsukker undersøgelse
Normal (NR) + NS (98,7 ± 6,0 mg /dl) og NR + AA (106,3 ± 5,8 mg /dl) rotter viste en lille eller ingen ændring i blodsukkerniveauet (BGL). En dosisafhængig anti-hyperglykæmiske undersøgelse blev gennemført med 50, 100 og 200 mg /kg af MSE administreret i 10 dage til diabetiske rotter og et fald på 11,0, 17,0 og 19,9% (P
< 0,3 til P
< 0,1, n = 6) i BGL blev observeret (BGL- 297,6 ± 21,2 mg /dl). MSE (100 mg /kg) havde en tendens til at falde (17,0% nedgang, P
< 0,1) men INS faldt BGL (61,4% nedgang, P
< 0,05), mens, OMZ og PTX viste lidt eller ingen ændring i BGL sammenlignet med DR + AA-gruppe. Imidlertid dosis på 100 mg /kg blev udvalgt til yderligere undersøgelse, da denne dosis blev tidligere fundet effektiv i healing eddikesyre-induceret mavesår hos normale rotter 15. Salg legemsvægtændringer
gennemsnit ± SE organ vægten af ​​rotter i alle de 7 undersøgte grupper ved 0 dag, sås en række 201.3 ± 3,4 til 205,4 ± 2,9 g /rotte ved starten af ​​eksperimentet. 1 st og 2 nd var normale rotte grupper, mens 3 rd til 7 th var diabetiske rotte grupper. Stigning i kropsvægt blev observeret i en st (8,9%, P < 0,05) og 2 nd (5,6%) grupper, mens de diabetiske rotter på 3 rd til 7 th gruppe viste fald i kropsvægt med 8,7 til 11,3% (P < 0,05 til P < 0,01) henholdsvis den 14. th indlæg normal /diabetisk dag sammenlignet med deres respektive 0 dage værdi. Der var betydelig gevinst i vægt efter behandlinger med MSE (9,7%, P < 0,05) og INS (15,3%, P < 0,01), mens, lille stigning i kropsvægt blev observeret med OMZ (3,4%) og PTX (4,7% ) behandlinger i forhold til deres respektive 14 dages værdi. Men rotterne diabetiske kontrol viser ikke nogen stigning i deres kropsvægt fra dens 14 dage værdi.
Mavesår healing
NR + AA rotte viste stigning i sår-indeks (UI-14,3 ± 2,3, P
<0,05) i forhold til nR + NS (Ingen mavesår) rotte mens viste DR + AA rotte stige yderligere i sår-indeks (108,4% stigning, P
< 0,05) sammenlignet med nR + AA rotte indikerer øget tilbøjelighed til sårdannelse og forsinkelse i ulcusheling. DR + AA-rotter, behandlet med OMZ, INS og PTX viste fald i sår-indeks med 39,3, 38,6 og 43,3% henholdsvis (nær til NR + AA-niveau), mens viste MSE falde med 63,8%, mindre end værdien af ​​NR + AA rotter indikerer bedre heling af MSE forhold til OMZ, INS eller PTX (Figur 2). Figur 2 Virkninger af ethanolekstrakt af pulp af Musa sapientum (MSE, 100 mg /kg × 10 dage), omeprazol (OMZ, 2 mg /kg × 10 dage), insulin (INS, 4U /kg x 10 dage) og pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg × 10 dage) på rotte gastrisk ulcus-indeks og gastriske mucosale cytokiner, tumornekrosefaktor-α (TNF-α) og interleukin-1β (IL-1β) og transformerende vækstfaktor-α (TGF-α ) som forholdet til p actin i eddikesyre (AA) -induceret mavesår hos normale (NR) og diabetiske (DR) rotter. Resultater er middeltal + SEM, 4 dyr i cytokiner og vækstfaktor undersøgelse og 6 dyr i mavesår undersøgelse. CMC, MSE, OMZ og PTX blev administreret oralt, mens; INS blev givet subkutant. * P
< 0,05 sammenlignet med NS-gruppe, aP
< 0,05 sammenlignet med NR + AA-gruppe og + P
< 0,05 sammenlignet med DR + AA-gruppe (Statistisk analyse blev udført af envejs-ANOVA efterfulgt af Dunnetts test for multiple sammenligninger).
TNF-α, IL-1β og TGF-α
resultaterne af TNF-α, er IL-1β og TGF-α blevet udtrykt som forholdet mellem den cytokiner /vækst faktor til p-actin (figur 2 og 3). Figur 3 Virkning af MSE, OMZ, INS og PTX på maveslimhinden TNF-α, IL-1β og TGF-α-niveauer hos diabetiske rotter (DR) (RT-PCR-metoden). Bane M: Marker. Bane 1: NR + NS. Bane 2: NR + AA. Bane 3: DR + AA. Bane 5: DR + AA + MSE. Bane 6: DR + AA + OMZ. Bane 7: DR + AA + INS. Bane 8:. DR + AA + PTX
TNF-α og IL-1β
NR + AA rotter viste stigning i maveslimhinden TNF-α med 265,1% (P
< 0,05) og IL- 1β med 52,8% (P
< 0,05) sammenlignet med NR + NS (intakt mucosa) rotter. DR + AA-rotter viste yderligere stigning i niveauerne af IL-1β og TNF-α ved 345,0 og 102,5% (p
< 0,05) sammenlignet med respektive NR + NS-rotter og ved 21,9 og 32,6% stigning (P
< 0,05) i forhold til de respektive NR + AA-rotter. Behandlinger af DR + AA rotter med hypoglykæmisk lægemiddel, INS og anti ulcus narkotika, MSE og OMZ og PTX vendt niveauerne af IL-1β og TNF-α nær til NR + AA niveau. Men både MSE og PTX viste, bedre faldende virkninger på TNF-α og IL-1β sammenlignet med OMZ eller INS (figur 2 & 3).
TGF-α
NR + AA rotter viste signifikant stigning i maveslimhinden TGF-α (165,1% stigning, P
< 0,05) sammenlignet med NR + NS rotter. Imidlertid blev TGF-α ikke yderligere forbedret i DR + AA-rotter sammenlignet med NR + AA-gruppe. Behandlinger af DR + AA-rotter med OMZ og INS ikke forøge TGF-α-niveau yderligere, mens, MSE og PTX tendens til at øge TGF-α (figur 2 & 3).
Diskussion
Eksperimentelle diabetiske rotter har vist øget tilbøjelighed til mavesår og forringet heling af gastriske læsioner [8, 9], og denne forværring af mavesår /forsinket heling blev vendt af agenter korrigere blodsukkeret [22]. Ikke-insulinafhængig diabetes mellitus (NIDDM) øgede tilbøjelighed til gastrisk ulceration ved at øge stødende, syre-pepsin- sekretion og gastriske mucosale frie radikaler, lipidperoxidation (LPO), nitrogenoxid (NO) og faldende mucosal glycoprotein og antioxidanter, superoxiddismutase ( SOD) niveauer [10].
streptozotocin (STZ) er almindeligt anvendt til at fremkalde eksperimentel diabetes hos dyr og dets cytotoksiske virkning medieres af reaktive ilt arter. STZ synes at være mere specifik, da der er optagelse af beta-celle specifik GLUT2, men ikke af andre glukosetransportører og har færre bivirkninger. Det forårsager aktivering af poly ADP-ribosylering, hvilket fører til dannelse af superoxidradikaler og som et resultat, p-celler undergår destruktion af nekrose [23]. Mekanismen bag den forøgede modtagelighed af maveslimhinden hos diabetiske dyr til skaden er multifaktoriel og omfatter dæmpningen af ​​angiogenese samt forøget produktion af proinflammatoriske cytokiner, TNF-a og IL-1, som resulterer i vedvarende inflammatorisk reaktion og forsinker helingsprocessen ved såret område [9]. Den største mekanisme, hvormed cytokiner udøver deres skadelige påvirkninger på sårheling kan involvere hæmning af vækstfaktorer, der er ansvarlige for slimhinde regenerering og genrejsning efter de skader [24]. Det er også blevet rapporteret, at TNF-α forøger produktionen af ​​IL-1β og andre cytokiner, hvilket fører til neutrofil akkumulering [25] og forøget produktion af ROS i maveslimhinden udsat for iskæmi-reperfusion. Pentoxifyllin, har en inhibitor af TNF-α er rapporteret at accelerere heling af eddikesyren-inducerede mavesår hos rotter eventuelt via hæmning af TNF-α produktion [13]. Det er blevet rapporteret, at forøgelsen af ​​celleproliferation under sårheling kan medieres af øget frigivelse af EGF og TGF-α. Det er også blevet rapporteret, at trods stigningen i TGF-α niveau i diabetes-rotter med co forekommende gastrisk ulceration helingen blev forsinket på grund ukendt mekanisme /s. Det blev foreslået, at hyperglykæmi i diabetiske dyr kunne fremkalde visse strukturelle modifikationer af TGF-α eller dets receptorer i såret område, der fører til dysfunktion af denne vækstfaktor i diabetes mellitus [9, 26].
Eddikesyre (AA ) -inducerede sår i rotter blev rapporteret til at have tæt lighed med kliniske sår i placering, kroniske og sværhedsgrad og tjener som den mest pålidelige model til at studere ulcusheling proces [20]. I den foreliggende undersøgelse har vi observeret forhøjede niveauer af proinflammatoriske cytokiner TNF-α og IL-1β i maveslimhinden af ​​normale rotter behandlet med eddikesyre. Diabetiske rotter viste en yderligere stigning i deres niveau sammenlignet med normale rotter når de udsættes for eddikesyre-induceret gastrisk ulceration. Ovenstående observation har været i bekræftelse med de tidligere rapporterede værker [13, 27, 28]. MSE blev rapporteret at vende stigningen af ​​TNF-α og IL-1β i GU induceret af AA i normale rotter og fremmes sårheling ved dens forskellige virkninger på gastriske mucosale defensive faktorer, herunder forøget celleproliferation og antioxidanter og reducerende frie radikaler niveauer [7, 15]. Behandlingen med insulin vendt forringet sårheling i diabetiske dyr, primært som følge af en normalisering af hyperglykæmi, men ikke til den direkte virkning af insulin på sårheling, fordi insulin indgivet til ikke-diabetiske rotter ikke viste nogen effekt i ulcusheling [ ,,,0],27]. Dette viste, at antidiabetika var effektive ved at korrigere det øgede glukose niveau og derved reducere niveauet af disse cytokiner mens, blev anti mavesår narkotika (omeprazol) øger sårheling og mindske deres niveau [15]. TNF-α blev rapporteret at stimulere opregulering af IL-1 p-niveauer, så ved at styre TNF-α ekspression af IL-1β-ekspression kunne kontrolleres. Dette kan være den mekanisme, hvorved pentoxifyllin nedsætter både cytokinerne niveauer [29].
Foreliggende arbejde viste stigning i TGF-α-niveau hos rotter behandlet med eddikesyre. Der blev imidlertid ikke yderligere stigning i TGF-α niveau fundet i diabetiske rotter, og denne observation er i overensstemmelse med tidligere observationer, der viser vigtigheden af ​​denne vækstfaktor i processen med sårheling. Den omstændighed, at en forsinkelse af heling af mavesår hos den diabetiske tilstand, trods forøget ekspression af TGF-α, indikerer, at helbredende virkninger af denne vækstfaktor kan dæmpes ved en ukendt mekanisme. Dette taler imod den store rolle for denne faktor i den observerede forsinkelse i heling af mavesår under diabetiske tilstande. En mulighed er, at hyperglykæmi i diabetiske dyr kunne fremkalde visse strukturelle modifikationer af TGF-α eller dens receptorer eller reducere tilgængeligheden af ​​essentielle ingredienser, der er nødvendige for normal heling i såret område, der fører til dysfunktion af denne vækstfaktor under diabetes mellitus. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at besvare spørgsmålet, hvorfor forøget ekspression af TGF-α ikke bidrager til frigivelsen af ​​en funktionelt aktiv vækstfaktor [9]. Det blev også rapporteret, at den forøgede TGF-α-niveau kan øge celleproliferation [30]. MSE viste en tendens til at øge TGF-α-niveau i diabetiske rotter. Dette kan være bedre korreleret med celleproliferation som MSE er blevet rapporteret at øge celleproliferation [4].
Hypoglykæmisk aktivitet som følge af stimulering af insulinproduktion og glucoseudnyttelse er blevet rapporteret fra grøn frugt af plantain bananer og fibre fra frugt blev fundet at øge glucogenese i leveren og sænkes fastende blodglucose. Musa sapientum
er blevet rapporteret at indeholde p-sitosteroler, leucocyanidin, sryngin, quercetin, sterylglycosides, aminosyrer etc. p-sitosteroler og dimethoxy derivat af leucocyanidin, leucocyanidin 3-O-p-D-galactosyl cellobiosid, har vist hypoglykæmisk virkning i forsøgsdyr [16]. Flavonoider er mest almindeligt kendt for deres aktivitet mod ulcerationer, lipidsænkende aktivitet, antiinflammatorisk aktivitet, antioxidantaktivitet, antimikrobiel aktivitet [31] og anti-hyperglykæmiske [32] aktiviteter. HPTLC fingeraftryk af MSE demonstrerede otte aktive bestanddele, hvor en af ​​bestanddelene kan leucocyanidin, som rapporteret tidligere af Prabha og associerede virksomheder [17], som har sammenlignet det konstituerende med godkendt standard leucocyanidin. Alkaloider er blevet rapporteret at vise anti-diabetiske og anti-inflammatoriske, antioxiderende aktivitet [33], mens saponiner viste antidiabetiske virkninger [34].
Konklusion
Tilstedeværelsen af ​​mange aktive bestanddele såsom flavonoider, saponiner, glycosider og Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Cisaprid nedsætter maveindholdet aspiration i mekanisk ventilerede patienter
• Metodologiske problemer, når analyserer rolle fysisk aktivitet i forebyggelse gastrisk cancer: en kritisk gennemgang