Healing effekter av Musa sapientum var. paradisiaca i diabetiske rotter med co-forekommende magesår: cytokiner og vekstfaktor ved PCR forsterkning

Healing effekter av Musa sapientum
var. paradisiaca
i diabetiske rotter med co-forekommende magesår: cytokiner og vekstfaktor ved PCR forsterkning
Abstract
Bakgrunn
Denne studien evaluerer effekten av ekstrakt av Musa sapientum
frukt (MSE) på sårindeks, blodglukosenivå og mageslimhinne cytokiner, TNF-α og IL-1β og vekstfaktor TGF-α (påvirket på diabetes og kronisk ulcus) i eddiksyre (AA) indusert magesår (GU) i diabetiske ( DR) rotte.
Metoder
MSE (100 mg /kg, oral), omeprazol (OMZ, 2,0 mg /kg, oral), insulin (INS, 4 U /kg, sc) eller pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg, oral) ble gitt en gang daglig i 10 dager i 14 dager efter streptozotocin (60 mg /kg, intraperitonealt) indusert diabetiske rotter stund, fått de normale /diabetiske rotter CMC for det samme tidsrom etter induksjon av GU med AA . Ulcer indeks ble beregnet basert på produktet av lengde og bredde (mm 2 /rotte) av verkesår, mens, TNF-α, IL-1β og TGF-α ble estimert i slimhinne gastriske homogenat fra det intakte /sår region. Fytokjemisk screening og HPTLC analyse av MSE ble gjort etter standard prosedyrer.
Resultater
En økning i sår indeks, TNF-α og IL-1β ble observert i normal (NR) -AA rotte i forhold til NR-fysiologisk saltvann rotte , som ble ytterligere økt i DR-AA rotte stund, behandlinger av DR-AA rotte med MSE, OMZ, INS og PTX snudd dem, mer så med MSE og PTX. Betydelig økning i TGF-α ble funnet i NR-AA rotte som ikke øke ytterligere i DR-AA rotte. MSE og PTX tendens til å øke, mens, OMZ og INS viste liten eller ingen effekt på TGF-α i AA-DR rotte. Fytokjemisk screening av MSE viste tilstedeværelse av saponiner, flavonoider, glykosider, steroider og alkaloider og HPTLC-analyse indikerte tilstedeværelse av åtte aktive forbindelser.
Konklusjon
MSE viste antidiabetiske og bedre sår helbredende effekter sammenlignet med OMZ (antiulcer) eller INS (antidiabetika) i diabetisk rotte og kan være mer effektiv i diabetes med samtidig magesår.
nøkkelord
Musa sapientum
diabetes sårtilheling TNF-α IL-1β TGF-α Bakgrunn
Omfattende undersøkelser vedrørende anti-ulcerogene og sår helbredende aktiviteter Banan banan er utført i vårt laboratorium for de siste 30 årene. Anti-ulcerogent aktivitet av tørket pulver av Banan banan fruktkjøtt (Musa sapientum
var. Paradisiaca
, MS) mot ulike eksperimentelle gastro-duodenal er rapportert fra vårt laboratorium og andre steder. Sår beskyttende effekten av Banan banan ble rapportert på grunn av økning i de defensive faktorer viz. økning i mucin sekret, slimhinne glykoproteiner, opphopning av prostaglandiner E og I 2, levetid og celledeling i stedet for å påvirke den offensive syre-pepsin sekresjon [1-6]. Nylig rapporterte sår beskyttende, smalkjempe banan forbedrende antioksidanter, superoksid dismutase (SOD), katalase (CAT) og glutation peroksidase (GSH) og redusere de frie radikaler, lipidperoksidasjonsreaksjoner (LPO) og nitrogenoksid (NO) nivåer i slimhinne gastriske homogenater uten anti-H. pylori
aktivitet in vitro product: [7]. Flere rapporter indikerer at diabetes mellitus (DM) øker mucosal mottakelighet for ulcerogene stimuli og predisposisjon for gastrisk sårdannelse og nedsatt helbredelse [8, 9]. Vår tidligere rapporterte arbeid med streptozotocin-indusert diabetes med co-forekommende magesår gjorde indikere involvering av både offensive syre-pepsin sekresjon og frie radikaler generasjon og defensive faktorer som slim, slimhinne glykoproteiner, levetid på slimhinneceller og antioksidantstatus av mage mucosa som ble økt og redusert henholdsvis [10, 11].
pro-inflammatoriske cytokiner som tumornekrosefaktor-α (TNF-α), interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) og vekstfaktorer inkludert insulinlignende vekstfaktor-1 (IGF-1) spiller en viktig rolle i patogenesen av kroniske sykdommer som autoimmun diabetes og magesår [12, 13]. Vekstfaktorer som vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF), basisk fibroblast vekstfaktor, transformerende vekstfaktor-α (TGF-α) har stor betydning i vev helbredende prosesser inkludert som magesår [9, 14]. Nylig rapporterte vi den helbredende effekten av etanol ekstrakt av tørket fruktkjøtt fra MS (MSE) på eddiksyre indusert magesår i normal (NR) rotte og fant rollen som cytokiner, TNF-a, IL-1 og vekstfaktor, TGF -α i healing sår [15].
Hypoglycemic aktivitet har blitt rapportert fra grønn frukt av Banan banan. Videre leucocyanidin, et flavonoid, ble isolert fra Koke banan og dens dimetoksy-derivat, leucocyanidin 3-O-beta-D-galaktosyl cellobioside viste hypoglykemisk virkning på eksperimentell dyre [16, 17]. Derfor ble denne undersøkelsen utvidet for å evaluere den helbredende effekten av MSE (testmedikament) i eddiksyre-induserte magesår i diabetisk (DR-AA) rotte og dens virkning på TNF-α, IL-1β og TGF-α. Effektene av MSE på magesår, TNF-α, IL-1β og TGF-α ble sammenlignet med anti-ulcer-midler, omeprazol (OMZ, protonpumpeinhibitor) og pentoxyphylline (PTX, en inhibitor av TNF-α , en fremtredende inflammatorisk markør) og hypoglycemic narkotika, insulin (positive kontroller) og CMC-behandlet (negativ kontroll) i DR-AA rotte.
Metoder
Dyr
Innavlede Charles-Foster albinorotter (200-250 g ) av begge kjønn ble hentet fra den sentrale dyre hus Institute of Medical Sciences, Banaras Hindu University, Varanasi. De ble holdt i avdelings dyret huset ved 26 ± 2 ° C og relativ fuktighet 44-56%, lyse og mørke sykluser på 10 og 14 timer henholdsvis for en uke før og under forsøkene. Dyrene ble utstyrt med standard gnager pellet diett (Pashu Aahar, Ramnagar). Maten ble trukket 18-24 timer før forsøket om vann fikk ad libitum
. Dyrene ble delt inn i syv grupper med 6 dyr hver. Først to gruppene hadde normale rotter mens 3 rd til syvende gruppene hadde diabetiske rotter. Magesår ble produsert med eddiksyre i alle grupper unntatt en st gruppe (NR + NS), hvor NS ble påført på veggen i magesekken i stedet for eddiksyre. 1 st 3 rd gruppene fikk CMC muntlig mens 4 th til 7 th gruppene fikk etanol ekstrakt av fruktkjøtt av Musa sapientum plakater (MSE), omeprazol (OMZ), insulin (INS) og pentoxyphylline (PTX) i 10 dager, henholdsvis etter induksjon av GU med eddiksyre. "Prinsipper for forsøksdyr omsorg" (NIH publikasjon nr. 82-23, revidert 1985) retningslinjer ble fulgt. Godkjenning fra Institutional Animal Etisk Komité ble tatt før det eksperimentelle arbeidet (Dean 542/02 /ab /CPCSEA datert 23.8.2002).
Innsamling og utarbeidelse av ekstrakt
Big store, umodne, grønne Kokebanan banan frukt ( Musa sapientum Linn
. var. paradisiaca, etter MS) samlet i løpet av november måned ble hentet fra det lokale markedet og identifisert av professor VK Joshi, Institutt for Dravyaguna, Fakultet for ayurveda, IMS, BHU. En prøve prøven (MS-09/231) ble bevart i Institutt for Dravyaguna, IMS, BHU, Varanasi. Huden på frukten ble skrelt av, og massen ble kuttet i små stykker og tørket ved romtemperatur. Etter tørking nyanse pulver av massen ble fremstilt fra de små stykker og anvendt for ekstraksjon. Det etanoliske ekstrakt (MSE) ble fremstilt ved tilsetning av 1 liter etanol to ganger, med et intervall på to dager. Den etanolholdige ekstraktet oppnådd på denne måten hver gang ble blandet og senere tørket i vakuumtørker. MSE ble lagret ved -20 ° C inntil videre anvendelse. Utbyttet av ekstraktet var 1,6% (vekt /vekt).
Phytochemical studie
kjemiske bestanddeler som saponiner, flovonoids, glykosider, steroider og alkaloider ble estimert i MSE å følge standardfremgangsmåter [18].
HPTLC finger utskrift evaluering
MSE ble utsatt for HPTLC (CAMAG TLC system) finger utskrift analyse. Ekstraktene ble fortynnet for å få en konsentrasjon på 1 pg /pl og påført på pre- belagte silikagel G60 F 254 plater (10x10, 2 mm tykkelse, E. Merck) ved å bruke LINOMAT IV observatør. Platen ble deretter fremkalt i CAMAG flat bunn kammer under forhold med delvis eller fullstendig metning av tankatmosfæren med løsemiddeldamp. Oppløsningsmiddelsystemet som ble anvendt var kloroform: metanol: maursyre (9: 1: 0,5). Platen ble forsiktig tørket og sprayet med anisaldehyd-svovelsyre, etterfulgt av oppvarming ved 110 ° C i 5-10 min. Påvisning av stedene ble gjort ved hjelp av Hg lampe ved 254 nm og bildene ble tatt opp ved hjelp CAMAG Reprostar 3. Platen ble skannet ved hjelp CAMAG TLC scanner tre med WinCATS evalueringsprogramvaren.
Narkotika og kjemikalier
Streptozotocin (St . Louis, MO, USA), omeprazol (Cipla, Mumbai, India) og pentoxyphylline (Abbott, Bangalore, India) ble brukt i denne studien.
Induksjon av diabetes
diabetes ble indusert hos voksne rotter (200- 250 g) ved en enkelt intraperitoneal injeksjon av streptozotocin (STZ, 60 mg /kg) oppløst i citrat-buffer (pH 4,5) og føres deretter normalt [19], mens de kontrollrotter mottok bare sitratbuffer. Blodprøver ble oppsamlet fra den retro-orbitale plexus av rottene, og serum ble separert ved sentrifugering ved 3000 opm i 3 minutter. De blodsukkernivåer ble anslått i unhemolysed serum ved Glukose oksidase-peroksidase (GOD-POD) metode med glukose diagnostisk sett (Ranbaxy Laboratories Ltd, India). Blodglukosenivået (BGL) ble bestemt etter 48 timer og to uker etter streptozotocin administrasjon og rotter viser BGL over 250 mg /dl under ikke fastende betingelser ble valgt for magesår studien. Kroppsvekt endringer har blitt observert før (0 per dag), etter 14 dager etter diabetiker eller normale rotter og på 10 th dag av AA-indusert GU etter CMC /MSE /OMZ /INS /PTX behandlinger (24 th dag) i normale og diabetiske rotter.
Acetic syre- indusert magesår hos diabetiske rotter og behandling protokoll
diabetiske rotter ble bedøvet med pentobarbiton (35 mg /kg, intraperitonealt). Buken ble skåret opp med et innsnitt og magen ble visualisert. Et sylindrisk glassrør av 6 mm i diameter var tett plassert på den fremre serosale overflate av kjertel parti av mage 1 cm borte fra den pyloriske ende. 100% eddiksyre (0,06 ml /dyr) ble dryppet inn i røret og tillates å forbli 60 sekunder på den gastriske vegg. Etter fjerning av syreoppløsningen, ble abdomen lukket i to lag, og dyrene ble bur og matet normalt. MSE (100 mg /kg, oral), OMZ (2,0 mg /kg, oral), INS (4U /kg, subkutant) og PTX (10 mg /kg, oral) ble administrert en gang daglig, første dose blir gitt 4 timer etter anvendelse av eddiksyre på dag 1, og deretter fortsatte opp til 10 dager. Dyrene ble satt på faste i 24 timer etter den siste dose av test-legemidler på 10 th dag og ofret ved avlivning på 11 th dag av eksperimentet for å vurdere magesår størrelse og helbredelse. Ulcer indeks ble beregnet basert på produktet av lengde og bredde (mm 2 /rotte) av sår [20].
TNF-α, IL-1 p og TGF-a beregninger
TNF-α, IL -1β og TGF-α ble estimert i intakt mageslimhinnen og fra mageslimhinnen av diabetiske rotter eksponert for eddiksyre med eller uten ulike medikamentelle behandlinger. Mucosa fra kjertel del av magesekken ble skrapet av fra sårdannelse /intakt område ved hjelp av sterilisert objektglass og lagret ved -80 ° C inntil analyse. Total RNA ble ekstrahert fra prøvene slimhinne ved fremgangsmåten til Chomczynski og Sacchi (1987) [21] ved hjelp av ekstraksjon kit fra Bangalore Genei, India. Isoleringen av RNA ble kvantifisert og 5 mikrogram av total RNA ble benyttet for å fremstille cDNA. PCR-blandingen ble amplifisert i en DNA thermal cycler med spesifikasjonene som er beskrevet i materialer og metoder. Således β-aktin, IL-1β, TNF-α og TGF-α ble estimert. Resultatene er uttrykt som forholdet av cytokiner /vekstfaktor p-aktin i de ulike behandlingsgruppene
. Total RNA isolert fra gastrisk mucosa
Ca 100 mg av gastrisk mucosal opphugging fra kjertelområdet (område av sår område) i nærheten av den sårdannelse området ble tatt i DEPC behandlet rør og homogenisert med 1 ml av denaturerende oppløsning. Til dette 1 ml vannmettet fenol, etterfulgt av 200 ul kloroform - isoamylalkohol blanding (tilberedes i et forhold på 49: 1) ble tilsatt og blandet grundig. Blandingen ble inkubert på is i 15 minutter og sentrifugert ved 10000 rpm i 20 minutter ved 4 ° C. Det øvre lag ble forsiktig fjernet i en annen DEPC behandlet rør og 1 ml av 100% isopropanol ble tilsatt og holdt ved -20 ° C i 30 minutter for å utfelle RNA. Igjen ble blandingen sentrifugert ved 10000 rpm i 20 minutter ved 4 ° C og supernatanten ble kastet. Pelleten ble resuspendert i 0,3 ml av denaturerende oppløsning og utfelles ved tilsetning av tilsvarende mengde 100% isopropanol. Denne blanding ble holdt ved -20 ° C i 30 minutter og sentrifugert ved 10000 rpm i 20 minutter ved 4 ° C. Supernatanten ble kastet, og pelleten ble vasket med 75% etanol for å fjerne eventuelle restmengder av guanidin i 15 minutter. Igjen innholdet ble sentrifugert i 20 minutter ved 4 ° C ved 10 000 rpm. Supernatanten ble kastet og pelleten inneholdende RNA ble oppløst i 100 - 200 ul DEPC behandlet vann og inkubert ved 55 ° C i 10-15 minutter. Dette totale RNA ble lagret ved -70 ° C inntil videre anvendelse. Det totale RNA ble kvantifisert ved å ta absorbans ved 260 nm (A 260) og ved hjelp av følgende formel dvs. konsentrasjon av RNA-prøve = 40 x A 260 x fortynningsfaktor dvs. en absorbans på en enhet på A 260 tilsvarer 40 mikrogram av RNA per ml (Dette forholdet er bare gyldig for målinger i vann).
Først cDNA syntese
5 mikrogram total RNA ble tatt fra hver prøve i et sterilt RNA gratis (DEPC behandlet) rør og sterilt vann ble tilsatt for å gjøre opp sluttvolumet til 9 pl. Til dette 1 ul Oligo (dT) 18 primer ble tilsatt, og plassert ved 65 ° C i 10 minutter og deretter ved romtemperatur i 2 minutter. Til denne 1 pl av RNA-hemmer, en pl 0,1 M DTT, 4 ul av RT-buffer (5x), 2,0 pl 30 mM dNTP-blanding, 0,5 ul av revers transkriptase og en ul sterilt vann ble tilsatt og blandet godt. Blandingen ble holdt ved 42 ° C i 1 time og inkubert ved 95 ° C i 2 minutter, og holdt på is raskt. Dette cDNA produktet kan brukes direkte for PCR-amplifikasjon eller på annen måte lagres ved -20 ° C for videre bruk.
Polymerase kjedereaksjon (PCR) amplifisering
resulterende cDNA (2 ul) ble amplifisert i en 50 ul reaksjonsvolum inneholdende 2 U Taq-polymerase, dNTP ble 1 pl (30 mM), 5 ul 10 x PCR-buffer og spesifikke primere (forover og revers) brukt ved en sluttkonsentrasjon på 1 mM. Polymerase-kjedereaksjonen Blandingen ble amplifisert i en DNA thermal cycler (MJ Research) og inkuberings og termiske betingelser var som følger: denaturering ved 94 ° C i 2 minutter, annealing ved 60, 66 og 62 ° C i β actin, TGF - α, IL - β og TNF - a henholdsvis og forlengelse ved 72 ° C i 50 sekunder, og endelig forlengelse i 2 minutter. Antallet sykluser er 30 for alle reaksjonene. Nukleotidsekvensen til primerne var som følger: β aktin, avføle 5'-TTG TAA CCA ACT GGG ACG ATA TGG - 3 '; anti 3 '- GAT CTT GAT GGT GCT AGG - 5' (764 bp); TGF - α sans 5 '- ATG GTC CCC GCG GCC GGA CA-3'; anti 3 '- GAC CAC TGT CTC AGA GTG GCA GCA AGG CAG TCC TTC TTT - 5' (476 bp); IL - 1β følelse 5'GCT ACC TAT GTC TTG CCC GT -3 '; anti 3 '- GAC CAT TGC TGT TTC CTA GG - 5' (543 bp); TNF - α sans 5 '- TAC TGA ACT TCG GGG TGA TTG GTC C - 3'; anti 3 '- CAG CCT TGT CCC TTG AAG AGA ACC - 5' (295 bp). Primerne ble valgt basert på sekvensene som er publisert i tidligere studie [9] ble syntetisert ved Bangalore Genei, Bangalore.
Polymerasekjedereaksjon produkter ble detektert ved elektroforese på en 1,5% agarosegel inneholdende etidiumbromid. Plassering av forventet produkt ble bekreftet ved hjelp av 300-bp DNA-stige (Bangalore Genei, India) som en standard størrelse markør. Gelen ble deretter fotografert av under UV transillumination. Tettheten av PCR-produktene ble målt ved hjelp av alfa-imager programvare. Signalet for PCR-produktene ble standardisert mot den av β-aktin mRNA fra hver prøve, og resultatene ble uttrykt som PCR-produkt /β aktin mRNA-forhold.
Statistisk analyse
Uparet Student't-test ble anvendt for statistisk sammenligning mellom to grupper. Sammenligninger med mer enn to grupper ble utført ved anvendelse av en enveis variansanalyse (ANOVA) og for multiple sammenligninger versus kontrollgruppen ble gjort av Dunnetts test.
Resultater
Phytochemical studie
Foreløpige fytokjemisk screening av MSE viste tilstedeværelse av saponiner, flovonoids, glykosider, steroider og alkaloider ved kjemisk testing. Fingeren utskrift av høy ytelse tynnsjiktskromatografi (HPTLC) kromatogrammet viste tilstedeværelse av minst åtte aktive forbindelser (figur 1). Analysen av oppbevaring faktor og farger av de oppløste band på 254 nm ved R f 0,71 i MSE kan være et flavonoid, leucocyanidin som tidligere rapportert av Prabha og medarbeidere [17] hvor de har vist lignende resultat med metanolholdig ekstrakt av Musa sapientum
frukt. Figur 1 finger utskrift av HPTLC kromatogram av MSE.
Blodsukker studie
Normal (NR) + NS (98,7 ± 6,0 mg /dL) og NR + AA (106,3 ± 5,8 mg /dL) rotter viste liten eller ingen endring i blodsukkernivået (BGL). En doseavhengig anti-hyperglykemisk undersøkelse ble foretatt med 50, 100 og 200 mg /kg av MSE administrert i 10 dager til diabetiske rotter og en nedgang på 11,0, 17,0 og 19,9% (P
< 0,3 til P
< 0,1, n = 6) i BGL ble observert (BGL- 297,6 ± 21,2 mg /dl). MSE (100 mg /kg) hadde en tendens til å avta (17,0% reduksjon, P
< 0,1), men INS redusert BGL (61,4% reduksjon, P
< 0,05), mens, OMZ og PTX viste liten eller ingen endring i BGL sammenlignet med DR + AA gruppe. Imidlertid dose på 100 mg /kg ble utvalgt for videre studier som denne dosen var tidligere funnet effektive i healing eddiksyre-induserte magesår hos normale rotter 15.
Kroppsvektendring
gjennomsnitt ± SE legeme vekter av rotter i alle de 7 gruppene studert ved 0 ° C ble det vist et område på 201,3 ± 3,4 til 205,4 ± 2,9 g /rotte ved starten av forsøket. 1 st og 2 nd var normale rottegruppene mens 3 rd til 7 th var diabetiker rottegruppene. Økning i kroppsvekt ble observert i en st (8,9%, P < 0,05) og 2 nd (5,6%) grupper mens de diabetiske rotter av rd 3 til 7 th gruppen viste reduksjon i kroppsvekt på 8,7 til 11,3% (P < 0,05 til P < 0,01) på henholdsvis 14 th stolpe normal /diabetiker dag sammenliknet med deres respektive 0-dag verdi. Det var signifikant vektøkning etter behandlinger med MSE (9,7%, P 0,05) og INS (15,3%, P < 0,01) samtidig, liten økning i kroppsvekt ble observert med OMZ (3,4%) og PTX (4,7% ) behandlinger sammenlignet med deres respektive 14 dager verdi. Men gjorde diabetiske kontrollrotter ikke viser noen økning i kroppsvekt fra sin 14 dagers verdi.
Magesår healing
NR + AA rotte viste økning i sår indeks (UI-14,3 ± 2,3, P
<0,05) sammenlignet med NR + NS (Ingen sår) rotte stund, viste DR + AA rotte ytterligere økning i sår indeks (108,4% økning, P
< 0,05) sammenlignet med NR + AA rotte indikerer økt tilbøyelighet til sårdannelse og forsinkelse i sårtilheling. DR + AA rotter behandlet med OMZ, INS og PTX viste nedgang i sår indeksen med henholdsvis 39,3, 38,6 og 43,3% (nær NR + AA-nivå) stund, MSE viste nedgang på 63,8%, mindre enn verdien av NR + AA rotter indikerer bedre helbredelse ved MSE i forhold til OMZ, INS eller PTX (figur 2). Figur 2 Effekt av etanolisk ekstrakt av fruktkjøtt fra Musa sapientum (MSE, 100 mg /kg x 10 dager), omeprazol (OMZ, 2 mg /kg x 10 dager), insulin (INS, 4U /kg x 10 dager) og pentoxyphylline (PTX, 10 mg /kg x 10 dager) av rotte magesår indeks og mageslimhinne cytokiner, tumor nekrose faktor-α (TNF-α) og interleukin-1β (IL-1β) og transformerende vekstfaktor α (TGF-α ) i forhold relativt p aktin i eddiksyre (AA) indusert magesår i normal (NR) og diabetiske rotter (DR). Resultatene er gjennomsnitt + SEM, 4 dyr i cytokiner og vekstfaktor studie og 6 dyr i magesår studien. CMC, MSE, OMZ og PTX ble administrert oralt stund; INS ble gitt subkutant. * P
< 0,05 sammenlignet med NS gruppe AP
< 0,05 sammenlignet med NR + AA gruppe og + P
< 0,05 sammenlignet med DR + AA gruppe (Statistisk analyse ble gjort av en vei ANOVA etterfulgt av Dunnetts test for multiple sammenligninger).
TNF-α, IL-1β og TGF-α
resultatene av TNF-α, har IL-1β og TGF-α er uttrykt som forholdet av cytokiner /vekst faktor til p-aktin (figurene 2 og 3). Figur 3 Effekt av MSE, OMZ, INS og PTX på mage mucosal TNF-α, IL-1β og TGF-α nivået hos pasienter med rotter (DR) (RT-PCR-metoden). Lane M: Marker. Felt 1: NR + NS. Lane 2: NR + AA. Lane 3: DR + AA. Lane 5: DR + AA + MSE. Lane 6: DR + AA + OMZ. Lane 7: DR + AA + INS. Lane. 8: DR + AA + PTX
TNF-α og IL-1β
NR + AA rotter viste økning i mage mucosal TNF-α med 265,1% (P
< 0,05) og IL- 1β med 52,8% (P
< 0,05) sammenlignet med NR + NS (intakt slimhinne) rotter. DR + AA rotter viste ytterligere økning i nivåene av IL-1β og TNF-α ved 345,0 og 102,5% henholdsvis (P
< 0,05) sammenlignet med de respektive NR + NS rotter og ved 21,9 og 32,6% økning (P
< 0,05) sammenlignet med respektive NR + AA rotter. Behandlinger av DR + AA rotter med hypoglycemic narkotika, INS og anti sår narkotika, MSE og OMZ og PTX reverseres nivåene av IL-1β og TNF-α nær NR + AA-nivå. Men både MSE og PTX viste bedre avtagende effekt på TNF-α og IL-1β forhold til OMZ eller INS (figur 2 & 3).
TGF-α
NR + AA rotter viste signifikant økning i mage mucosal TGF-α (165,1% økning, P
< 0,05) sammenlignet med NR + NS rotter. Men TGF-α ikke ytterligere forbedret i DR + AA rotter sammenlignet med NR + AA gruppe. Behandlinger av DR + AA-rotter med OMZ og INS økte ikke TGF-α nivå lenger tid, MSE og PTX tendens til å øke TGF-α (figurene 2 og & 3). Diskusjon
Eksperimentelle diabetiske rotter
har vist økt tilbøyelighet til magesår og svekket helbredelse av mage lesjoner [8, 9] og denne forverring av sår /forsinket tilheling ble reversert av agenter korrigere blodsukkeret [22]. Ikke-insulinavhengig diabetes mellitus (NIDDM) øket tilbøyelighet til gastrisk sårdannelse ved å forbedre støtende, syre-pepsin sekresjon og gastrisk mucosal frie radikaler, lipidperoksydasjon (LPO), nitrogenoksid (NO) og avtagende mucosal glykoprotein og antioksidanter, superoksid dismutase ( SOD) -nivåer [10].
Streptozotocin (STZ) er mye brukt til å indusere eksperimentell diabetes hos dyr og dets cytotoksiske virkning medieres av reaktive oksygenarter. STZ synes å være mer spesifikk som det er opptak av betacellespesifikk GLUT2, men ikke av andre glukosetransportører og har færre bivirkninger. Det fører til aktivering av poly ADP-ribosylering, noe som fører til dannelsen av superoksidradikaler og som et resultat av p-celler som gjennomgår ødeleggelse av nekrose [23]. Mekanismen som ligger til grunn av økt mottakelighet for gastrisk mucosa hos diabetiske dyr for å skade er multifaktoriell og omfatter dempningen av angiogenese, så vel som den økte produksjon av proinflammatoriske cytokiner, TNF-a og IL-1 som resulterer i vedvarende inflammatorisk reaksjon og forsinke helbredende prosess ved det sårområdet [9]. Den store mekanismen som cytokiner utøve sin skadelige påvirkninger på sårtilheling kan involvere inhibering av vekstfaktorer som er ansvarlige for mukosal regenerering og gjenvinning fra skade [24]. Det har også blitt rapportert at TNF-α forsterker produksjonen av IL-1β og andre cytokiner, som fører til neutrofil akkumulering [25] og forbedret produksjon av ROS i den gastriske slimhinne eksponert for ischemi-reperfusjon. Pentoksifyllin, er en inhibitor av TNF-α blitt rapportert å akselerere helingen av eddiksyreinduserte mavesår hos rotter muligens via hemming av TNF-produksjon α [13]. Det har blitt rapportert at den forbedring av celle-proliferasjon i løpet av sårtilheling kan være mediert ved økt frigivelse av EGF og TGF-α. Det har også blitt rapportert at til tross for økningen i TGF-α nivå i diabetes rotter med samtidig forekommende gastrisk ulcerasjon helbredelse ble forsinket på grunn av ukjent mekanisme /s. Det ble foreslått at hyperglykemi i diabetiske dyr kan indusere noen strukturelle modifiseringer av TGF-α eller dets reseptorer i sårområdet, som fører til dysfunksjon av denne vekstfaktor i løpet av diabetes mellitus [9, 26].
Eddiksyre (AA ) indusert ulcus hos rotte ble rapportert å ha nær likhet med kliniske sår i sted, kroniske karakter og alvorlighetsgrad, og fungerer som den mest pålitelige modell for å studere sårtilheling prosessen [20]. I denne studien har vi observert økte nivåer av proinflammatoriske cytokiner TNF-α og IL-1β i mageslimhinnen av normale rotter behandlet med eddiksyre. Diabetiske rotter viste en ytterligere økning i nivå i forhold til normale rotter når de utsettes for eddiksyre-indusert gastrisk ulcerasjon. Ovennevnte observasjon har vært i bekreftelse med de tidligere rapporterte verker [13, 27, 28]. MSE ble rapportert å reversere økningen av TNF-α og IL-1β i GU indusert av AA i normale rotter og fremmet sårtilheling ved dets forskjellige effekter på gastriske slimhinne defensive faktorer, inkludert forbedret celleproliferasjon og antioksydanter og reduksjons frie radikaler nivåer [7, 15]. Behandlingen med insulin snudd nedsatt sårtilheling i diabetiske dyr, hovedsakelig på grunn av normalisering av hyperglykemi, men ikke til den direkte effekten av insulin på sårtilheling fordi insulin administrert til ikke-diabetiske rotter viste ingen effekt på sårtilheling [ ,,,0],27]. Dette viste at antidiabetika var effektive ved å korrigere økt glukosenivået for derved å redusere nivåene av disse cytokinene, mens anti ulcer medikament (omeprazol) ble som forsterker sårtilheling og redusere graden [15]. TNF-α ble rapportert å stimulere oppregulering av IL-1 p nivåer, slik at ved regulering av TNF-α ekspresjon av IL-1β ekspresjon kunne kontrolleres. Dette kan være den mekanismen som pentoksyfyllin reduserer både de cytokiner nivåene [29].
Den foreliggende arbeid viste økning i TGF-α nivå i rotter behandlet med eddiksyre. Imidlertid ble ingen ytterligere økning i TGF-α nivå som finnes i diabetiske rotter og denne observasjonen er i overensstemmelse med tidligere observasjoner som viser viktigheten av denne vekstfaktor i prosessen med sårtilheling. Imidlertid, det faktum at en forsinkelse på helbredelse av magesår i den diabetiske tilstand, til tross for øket ekspresjon av TGF-α, indikerer at den helbredende effekten av denne vekstfaktor kan bli dempet av en ukjent mekanisme. Dette militates mot stor rolle i denne faktoren i den observerte forsinket tilheling av magesår henhold diabetic forhold. En mulighet er at den hyperglykemi i diabetiske dyr kan indusere noen strukturelle modifiseringer av TGF-α eller dets reseptorer eller redusere tilgjengeligheten av essensielle ingredienser som kreves for normal helbredelse i sårområdet, som fører til dysfunksjon av denne vekstfaktor i løpet av diabetes mellitus. Videre studier er nødvendig for å svare på spørsmålet hvorfor økt uttrykk av TGF-α ikke bidrar til utgivelsen av et funksjonelt aktiv vekstfaktor [9]. Det ble også rapportert at den økte TGF-α nivå kan øke celleformering [30]. MSE viste en tendens til å øke TGF-α nivå i diabetiske rotter. Dette kan være bedre korrelert med celleformering som MSE er blitt rapportert å øke celle proliferasjon [4].
Hypoglykemisk aktivitet på grunn av stimulering av insulinproduksjonen og glukose utnyttelse har vært rapportert fra grønn frukt av Koke banan og fibre fra frukt ble funnet for å øke glukogenese i leveren og senkes fastende blodglukose. Musa sapientum
har blitt rapportert å inneholde beta sitosterols, leucocyanidin, sryngin, quercetin, sterylglycosides, aminosyrer osv beta sitosterols og dimetoksy derivat av leucocyanidin, leucocyanidin 3-O-beta-D-galaktosyl cellobioside, har vist hypoglykemisk effekt i forsøksdyr [16]. Flavonoider er mest kjent for sin antiulceraktivitet, lipidsenkende aktivitet, anti-inflammatorisk aktivitet, antioksidanter, antimikrobiell aktivitet [31] og anti-hyperglykemiske [32] aktiviteter. HPTLC fingerprinting av MSE demonstrert åtte aktive bestanddeler der en av ingrediensene kan bli leucocyanidin, som rapportert tidligere av Prabha og medarbeidere [17], som har sammenlignet bestanddel med godkjent standard leucocyanidin. Alkaloider har blitt rapportert å vise anti-diabetiske og anti-inflammatorisk, antioksidant-aktivitet [33], mens saponiner viste anti-diabetiske virkninger [34].
Konklusjon
tilstedeværelsen av mange aktive bestanddeler som flavonoider, saponiner, glykosider og Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Cisaprid reduserer mageinnhold aspirasjon i mekanisk ventilerte pasienter
• Metodiske spørsmål når analysere rollen fysisk aktivitet i magekreftforebygging: en kritisk review