Die Heilwirkungen von Musa sapientum var. paradisiaca bei diabetischen Ratten mit Co-auftretende Magengeschwür: Zytokine und Wachstumsfaktor, der durch PCR amplification

Effekte von Musa sapientum
var Heilung. paradisiaca
bei diabetischen Ratten mit Co-auftretende Magengeschwür: Zytokine und Wachstumsfaktor durch PCR-Amplifikation
Zusammenfassung
Hintergrund
der vorliegenden Studie die Auswirkungen der Extrakt von Musa sapientum
Obst (MSE) auswertet auf Ulkus-Index, Blutzuckerspiegel und der Magenschleimhaut Zytokine, TNF-α und IL-1β und Wachstumsfaktor, TGF-α in Essigsäure (AA) -induzierten Magengeschwür (GU) bei diabetischen (bei Diabetes und chronischen Geschwür betroffen) ( DR) Ratte.
Methoden
MSE (100 mg /kg, oral), Omeprazol (OMZ, 2,0 mg /kg, oral), Insulin (INS, 4 U /kg, sc) oder Pentoxyphyllin (PTX, 10 mg /kg, wurden einmal täglich über 10 Tage in 14 Tagen gegeben oral) nach Streptozotocin (60 mg /kg, intraperitoneal) -induzierten diabetischen Ratten, während die normalen /diabetischen Ratten CMC für den gleichen Zeitraum nach der Induktion von GU mit AA erhalten . Geschwürindex wurde berechnet basierend auf dem Produkt von Länge und Breite (mm 2 /Ratte) von Geschwüren, während, TNF-α, IL-1β und TGF-α in der Magenschleimhaut Homogenat aus dem intakten /Ulcus Bereich geschätzt wurden. Phytochemischen Screening und HPTLC-Analyse von MSE wurde nach Standardverfahren durchgeführt.
Ergebnisse Du ein Anstieg der Ulcus-Index, TNF-α und IL-1β wurden in normalen (NR) -AA Ratte verglichen mit NR-normal saline Ratte beobachtet , die in DR-AA Ratte während erhöht wurden weitere Behandlungen von DR-AA Ratte mit MSE, OMZ, INS und PTX umgekehrt sie, um so mehr mit MSE und PTX. Deutlicher Anstieg der TGF-α wurde in NR-AA Ratte gefunden, die nicht weiter in DR-AA Ratte erhöhte. MSE und PTX neigten während zu erhöhen, und OMZ INS zeigten wenig oder keine Wirkung auf TGF-α in AA-DR Ratte. Phytochemical Screening von MSE zeigte die Anwesenheit von Saponine, Flavonoide, Glykoside, Steroide und Alkaloide und HPTLC-Analyse zeigte die Anwesenheit von acht Wirkstoffe.
Fazit
MSE zeigte Antidiabetikum und bessere Heilung von Geschwüren Wirkungen im Vergleich mit OMZ (antiulcer) oder INS (Antidiabetikum) bei diabetischen Ratten und könnte effektiver bei Diabetes bei gleichzeitiger Magengeschwür sein.
Schlüsselwörter Musa sapientum
Diabetes Abheilung TNF-α IL-1β TGF-α Hintergrund
Umfangreiche Untersuchungen in Bezug auf Anti-ulcerogene und Heilung von Geschwüren Aktivitäten von Wegerich Banane wurden in unserem Labor für den letzten 30 Jahren durchgeführt. Anti-ulcerogene Aktivität von getrockneten Pulver von Wegerich Bananenfruchtfleisch (Musa sapientum
var. Paradisiaca
, MS) gegen verschiedene experimentelle gastroduodenalen haben aus unserem Labor und an anderer Stelle berichtet. Ulcer schützende Wirkung von Wegerich Banane wurde wegen berichtet nämlich in den defensiven Faktoren zu erhöhen. Erhöhung der Mucin-Sekretion, Schleimhaut-Glykoproteine, die Akkumulation von Prostaglandinen E und I 2, Lebensdauer und Zellproliferation, statt die Offensive Säure-Pepsin-Sekretion beeinflussen [1-6]. Kürzlich berichteten wir Geschwür Schutz, Wegerich Banane Verbesserung Antioxidantien, Superoxid-Dismutase (SOD), Katalase (CAT) und Glutathion-Peroxidase (GSH) und die freien Radikale abnimmt, Lipidperoxidation (LPO) und Stickstoffmonoxid (NO) Niveaus in den Magen-Schleimhaut-Homogenate ohne anti-H. pylori
Aktivität in vitro
[7]. Mehrere Berichte zeigen, dass Diabetes mellitus (DM) auf ulcerogene Stimuli der Schleimhaut Suszeptibilität erhöht und Prädisposition für Magengeschwüren und beeinträchtigter Heilung [8, 9]. Unsere bereits berichtet Arbeit an Streptozotocin-induzierten Diabetes mit Co-auftretende Magengeschwürbildung hat die Beteiligung der offensiven Säure-Pepsin-Sekretion und die Erzeugung freier Radikale und defensiven Faktoren wie Schleimabsonderung, Schleimhaut Glykoproteine, Lebensdauer von Schleimhautzellen und antioxidativen Status von Magen zeigen mucosa welche wurden erhöht und verringert bzw. [10, 11].
Pro-inflammatorische Zytokine wie Tumor-Nekrose-Faktor-α (TNF-α), Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6) und Wachstumsfaktoren, einschließlich Insulin-like growth factor-1 (IGF-1) eine wichtige Rolle bei der Pathogenese von chronischen Krankheiten wie Autoimmundiabetes und Magengeschwüren spielen [12, 13]. Wachstumsfaktoren, wie den vaskulären endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF), basischer Fibroblasten-Wachstumsfaktor, transformierenden Wachstumsfaktor-α (TGF-α) haben wichtige Rolle bei der Gewebeheilungsprozesse einschließlich des Magengeschwüren [9, 14]. Vor kurzem berichteten wir über die heilende Wirkung von ethanolischen Extrakt aus getrockneten Fruchtfleisch von MS (MSE) auf Essigsäure Magengeschwür in normalen (NR) Ratte induziert und fand die Rolle der Zytokine, TNF-α, IL-1β und Wachstumsfaktor, TGF -α bei der Heilung von Geschwüren [15].
Hypoglycemic Tätigkeit hat sich von grünen Früchten von Wegerich Banane berichtet. Ferner Leucocyanidin, ein Flavonoid, von Wegerich Bananen- und seine dimethoxy-Derivat, Leucocyanidin 3-O-beta-D-Galactosyl-cellobiosid, gezeigt hypoglykämische Wirkung in Versuchstier [16, 17] isoliert. Aus diesem Grund wurde in der vorliegenden Studie die heilende Wirkung von MSE (Testmedikament) in Essigsäure-induzierten Magengeschwüren bei diabetischen (DR-AA) Ratte und seine Auswirkungen auf die TNF-α, IL-1β und TGF-α zu bewerten erweitert. Die Wirkungen von MSE auf die Magengeschwür, TNF-α, IL-1β und TGF-α wurden mit anti-Ulkus-Arzneimittel, Omeprazol (OMZ, Protonenpumpenhemmer) und Pentoxyphyllin (PTX, ein Inhibitor der TNF-α , ein prominentes Entzündungsmarker) und hypoglykämischen Medikament, Insulin (positive Kontrollen) und CMC-behandelten (Negativkontrolle) in DR-AA Ratte.
Methoden
Tiere
Inbred Charles-Foster Albino-Ratten (200-250 g ) beiderlei Geschlechts wurden aus dem zentralen Tierhaus des Instituts für Medizinische Wissenschaften, Benares Hindu University, Varanasi erhalten. Sie wurden in der Abteilungs-Tierhaus bei 26 ± 2 ° C und einer relativen Luftfeuchtigkeit von 44 bis 56%, Licht und Dunkel-Zyklen von 10 bzw. 14 Stunden für 1 Woche vor und während der Experimente gehalten. Die Tiere wurden mit Standardnagetier Pellet-Diät (Pashu Aahar, Ramnagar) zur Verfügung gestellt. Das Essen wurde 18-24 Stunden vor dem Experiment zurückgezogen, obwohl Wasser gelassen wurde ad libitum
. Die Tiere wurden in sieben Gruppen unterteilt, die 6 Tiere pro. Die ersten beiden Gruppen wurden mit normalen Ratten während 3 rd auf den siebten Gruppen diabetischen Ratten hatte. Magengeschwüren wurden mit Essigsäure in allen Gruppen außer 1 hergestellt st Gruppe (NR + NS), wobei NS an die Magenwand aufgebracht wurde anstelle von Essigsäure. 1 st bis 3 rd Gruppen erhielten CMC oral während 4 th bis 7 th Gruppen ethanolischer Extrakt aus Fruchtfleisch von Musa sapientum
(MSE) erhalten haben, Omeprazol (OMZ), Insulin (INS) und Pentoxyphyllin (PTX) für 10 Tage bzw. nach Induktion von GU mit Essigsäure. "Grundsätze der Labortierhaltung" (NIH Publikation Nr. 82-23, überarbeitet 1985) Richtlinien befolgt wurden. Zulassung von der Institutional Animal Ethikkommission wurde vor der experimentellen Arbeit genommen (Dean 542/02 /ab /CPCSEA 23.8.2002 datiert).
Sammlung und Vorbereitung der Extrakt
Big Größe, unreif, grün Wegerich Bananenfrüchte ( Musa sapientum Linn
. var. paradisiaca
MS) im Laufe des Monats November gesammelt wurden aus dem lokalen Markt erhalten und die von Prof. VK Joshi, Institut für Dravyaguna, Fakultät für Ayurveda, IMS, BHU. Eine Probe Probe (MS-09/231) wurde in der Abteilung für Dravyaguna, IMS, BHU, Varanasi erhalten. Die Haut der Frucht wurde abgezogen und die Pulpe wurde in kleine Stücke geschnitten und bei Raumtemperatur getrocknet. Nach dem Trocknen Schatten Pulver der Pulpe wurde für die Extraktion aus den kleinen Stücken hergestellt und verwendet. Der ethanolische Extrakt (MSE) wurde durch Zugabe von 1 Liter Ethanol hergestellt zweimal, im Abstand von zwei Tagen. Der Ethanol-Extrakt so erhalten jedes Mal wurde gemischt und später im Vakuumtrockner getrocknet. MSE wurde bei -20 ° C bis zur weiteren Verwendung gelagert. Die Ausbeute des Extrakts betrug 1,6% (w /w).
Phytochemical Studie
Chemische Bestandteile wie Saponine, flovonoids, Glykoside, Steroide und Alkaloide in der MSE nach den Standardverfahren ermittelt wurden [18].
HPTLC Fingerdruck Auswertung
MSE wurde auf HPTLC (CAMAG TLC-System) Fingerabdruck-Analyse unterzogen. Die Extrakte wurden verdünnt, um eine Konzentration von 1 ug /ul und aufgebracht auf die prä- beschichteten Kieselgel G60 F 254 Platten (10x10, 2 mm Dicke, E. Merck) unter Verwendung von Linomat IV Spotter zu bekommen. Die Platte wurde dann in CAMAG flachen unteren Kammer unter den Bedingungen einer teilweisen oder vollständigen Sättigung des Tankatmosphäre mit Lösungsmitteldämpfen entwickelt. Das Lösungsmittelsystem verwendet wurde, Chloroform: Methanol: Ameisensäure (9: 1: 0,5). Die Platte wurde sorgfältig getrocknet und mit Anisaldehyd-Schwefelsäure durch Erhitzen bei 110 ° C für 5-10 min, gefolgt besprüht. Die Detektion der Spots wurde unter Verwendung von Hg-Lampe bei 254 nm und Bilder mithilfe von CAMAG Reprostar 3. Die Platte gescannt wurde unter Verwendung von CAMAG TLC-Scanner 3 mit winCATS Auswertesoftware aufgenommen wurden.
Drogen und Chemikalien
Streptozotocin (St . Louis, MO, USA), Omeprazol (Cipla, Mumbai, Indien) und Pentoxyphyllin (Abbott, Bangalore, Indien) in der vorliegenden Studie verwendet wurden.
Induktion von Diabetes
Diabetes in erwachsenen Ratten induziert wurde (200- 250 g) durch eine einzelne intraperitoneale Injektion von Streptozotocin (STZ, 60 mg /kg) in Citrat-Puffer (pH 4,5) und in der Regel danach zugeführt [19], während erhielten die Kontrollratten Citratpuffer nur. Blutproben wurden aus dem retroorbitalen Plexus der Ratten gesammelt und das Serum durch Zentrifugation bei 3000 rpm für 3 Minuten wurde abgetrennt. Die Blutglucosespiegel wurden im unhemolysed Serum durch Glucose-Oxidase-Peroxidase (GOD-POD) Verfahren unter Verwendung von Glukose Diagnose-Kit (Ranbaxy Laboratories Ltd, Indien) geschätzt. Blutzuckerspiegel (BGL) wurde nach 48 Stunden und zwei Wochen nach der Streptozotocin Verwaltung und Ratten zeigen BGL über 250 mg /dl unter nicht nüchternen Zustand geschätzt wurden für Magengeschwür Studie ausgewählt. Das Körpergewicht Änderungen vor (Tag 0) beobachtet worden, nach 14 Tagen nach der diabetischen oder normalen Ratten und auf die 10 th Tag der AA-induzierten GU nach CMC /MSE /OMZ /INS /PTX-Behandlungen (24 th Tag) in normalen und diabetischen Ratten.
Essigsäure-induzierten Magengeschwüren in Ratten mit Diabetes und diabetischen Ratten
Behandlungsprotokoll wurden mit Pentobarbital (35 mg /kg, intraperitoneal) anästhesiert. Der Bauch wurde mit einem Einschnitt aufgeschnitten und der Magen sichtbar gemacht wurde. Ein zylindrisches Glasrohr von 6 mm Durchmesser wurde dicht an der vorderen Serosaoberfläche des glandulären Teil des Magens 1 cm entfernt vom Pylorus Ende platziert. 100% ige Essigsäure (0,06 ml /Tier) wurde in das Röhrchen eingeimpft und man ließ 60 Sekunden an der Magenwand zu bleiben. Nach Entfernen der Säurelösung wurde die Bauchraum in zwei Schichten geschlossen und die Tiere wurden in Käfigen gehalten und normal gefüttert. MSE (100 mg /kg, oral), OMZ (2,0 mg /kg, oral), INS (4U /kg, subkutan) und PTX (10 mg /kg, oral) verabreicht wurden, einmal täglich, wobei erste Dosis 4 Stunden angegeben nach dem Aufbringen der Essigsäure am Tag 1 und dann weiter bis zu 10 Tage. Die Tiere wurden schnell legte für 24 Stunden nach der letzten Dosis von Drogen-Test auf 10 th Tag und geopfert durch Euthanasie auf 11 th Tag des Experiments das Magengeschwür Größe und die Heilung zu bewerten. Geschwürindex wurde berechnet basierend auf dem Produkt von Länge und Breite (mm 2 /Ratte) von Geschwüren. [20]
TNF-α, IL-1β und TGF-α Abschätzungen
TNF-α, IL -1β und TGF-α wurden in intakten Magenschleimhaut und von Magenschleimhaut von diabetischen Ratten ausgesetzt zu Essigsäure mit oder ohne verschiedene medikamentöse Behandlungen geschätzt. Mucosa aus dem Drüsenteil des Magens wurden aus dem ulzeriert /intakten Bereich unter Verwendung sterilisierte Glasobjektträger und gelagert bei -80 ° C bis zur Analyse abgeschabt. Gesamt-RNA wurde aus Schleimhaut-Proben nach der Methode von Chomczynski und Sacchi (1987) [21] mit dem Extraktions-Kits aus Bangalore Genei, Indien extrahiert. Die Isolierung von RNA wurde quantifiziert und 5 ug Gesamt-RNA wurde verwendet, cDNA herzustellen. Das PCR-Gemisch wurde in einem DNA-Thermocycler mit den Spezifikationen in Materialien und Verfahren beschrieben, amplifiziert. Somit β-Actin, IL-1β, TNF-α und TGF-α wurden geschätzt. Die Ergebnisse wurden als Verhältnis der Cytokine /Wachstumsfaktor &bgr; -Actin in den verschiedenen behandelten Gruppen ausgedrückt.
Gesamt-RNA Isolierung aus Magenschleimhaut
Etwa 100 mg der Magenschleimhaut von der glandulären Region (Stelle des Ulcus Verschrottung area) in der Nähe des ulzeriert Gebiet wurde DEPC behandelten Rohr und homogenisiert mit 1 ml denaturierender Lösung aufgenommen in. Zu diesem 1 ml Wasser gesättigtem Phenol, gefolgt von 200 ul Chloroform - Isoamylalkohol-Mischung (frisch im Verhältnis von 49: 1 hergestellt) wurde zugegeben und gründlich gemischt. Das Gemisch wurde 15 Minuten in Eis inkubiert und bei 10.000 rpm für 20 Minuten bei 4ºC zentrifugiert. Die obere Schicht wurde in ein anderes zu DEPC behandelten Rohr und 1 ml 100% Isopropanol wurde zugegeben und bei -20 ° C 30 Minuten lang zur Ausfällung der RNA vorsichtig entfernt. Wiederum wird die Mischung bei 10000 Upm für 20 Minuten bei 4 ° C und der Überstand verworfen wurde zentrifugiert. Das Pellet wurde in 0,3 ml-Lösung und durch Zugabe von gleichen Menge von 100% Isopropanol präzipitiert denaturierenden resuspendiert. Diese Mischung wurde bei -20 ° C für 30 Minuten gehalten und für 20 Minuten bei 4 ° C bei 10000 rpm zentrifugiert. Der Überstand wurde verworfen und das Pellet wurde mit 75% Ethanol gewaschen, für 15 Minuten keine Restmengen an Guanidin zu entfernen. Wieder wurde der Inhalt für 20 Minuten bei 4 ° C bei 10000 rpm zentrifugiert. Der Überstand wurde verworfen und das Pellet, das RNA wurde in 100 gelöst - 200 ul DEPC behandeltes Wasser und inkubiert bei 55 ° C für 10-15 Minuten. Diese Gesamt-RNA wurde bei -70 ° C bis zur weiteren Verwendung gelagert. Die Gesamt-RNA wurde bestimmt, indem die Absorption bei 260 nm (A 260) und unter Verwendung der folgenden Formel dh Konzentration der RNA-Probe = 40 × A 260 × Verdünnungsfaktor, dh eine Absorption von 1 Einheit bei A quantifiziert 260 entspricht 40 ug RNA pro ml (Diese Beziehung gilt nur für Messungen in Wasser). der erste Strang der cDNA-Synthese bei
5 ug gesamt-RNA aus jeder Probe in einem sterilen RNA genommen wurde frei (DEPC behandelt) Rohr und steriles Wasser wurde zugegeben, um das Endvolumen auf 9 &mgr; l zu bilden. Zu diesem 1 ul Oligo (dT) 18 Primer wurde zugegeben und 10 Minuten bei 65 ° C gegeben und dann bei Raumtemperatur für 2 Minuten. Um dies zu 1 ul RNAs Inhibitor, 1 ul 0,1 M DTT, 4 ul RT-Puffer (5x), 2,0 ul 30 mM dNTP Mix, 0,5 &mgr; l reverse Transkriptase und 1 &mgr; l sterilem Wasser zugegeben und gut gemischt. Die Mischung wurde für 1 Stunde bei 42 ° C gehalten und für 2 Minuten bei 95 ° C inkubiert und rasch in Eis gehalten. Dieses Produkt kann cDNA zur PCR-Amplifikation oder anderweitig Lagerung bei -20 ° C für die weitere Verwendung.
Polymerase-Kettenreaktion (PCR) Amplifikation
Die sich ergebende cDNA (2 &mgr; l) direkt verwendet werden, wurde in einem 50 ul Reaktionsvolumen amplifiziert 2 U Taq-Polymerase, dNTP 1 &mgr; l (30 mM), 5 &mgr; l 10 × PCR-Puffer und spezifischen Primern, die (vorwärts und rückwärts) wurden bei einer Endkonzentration von 1 mM verwendet. Die Polymerase-Kettenreaktionsmischung wurde in einem DNA-Thermocycler (MJ Research) und die Inkubation und thermischen Zyklusbedingungen amplifiziert wurden, wie folgt: Denaturierung bei 94 ° C für 2 Minuten, Annealing bei 60, 66 und 62 ° C für β-Actin, TGF - α, IL - β und TNF - alpha jeweils und Verlängerung bei 72 ° C für 50 Sekunden und abschließende Extension für 2 Minuten. Die Anzahl der Zyklen beträgt 30 für alle Reaktionen. Die Nucleotidsequenz der Primer waren wie folgt: β-Actin, 5'-TTG TAA CCA ACT GGG ACG ATA TGG Sense - 3 '; Antisense-3 '- GAT CTT GAT GGT GCT AGG - 5' (764 bp); TGF - α Sinn 5 '- ATG GTC CCC GCG GCC GGA CA- 3'; Antisense-3 '- GAC CAC TGT CTC AGA GTG GCA GCA AGG CAG TCC TTC TTT - 5' (476 bp); IL - 1β Sinn 5 'GCT ACC TAT GTC TTG CCC GT-3'; Antisense-3 '- GAC CAT TGC TGT TTC CTA GG - 5' (543 bp); TNF - α Sinn 5 '- TAC TGA ACT TCG GGG TGA TTG GTC C - 3'; Antisense-3 '- CAG CCT TGT CCC TTG AAG AGA ACC - 5' (295 bp). Die Primer wurden basierend auf den Sequenzen veröffentlicht in früheren Studie [9] wurden synthetisiert durch Bangalore Genei, Bangalore, Indien.
Polymerase-Kettenreaktionsprodukte ausgewählt durch Elektrophorese auf einem 1,5% Agarosegel nachgewiesen wurden Ethidiumbromid enthält. Lage des vorhergesagten Produkt wurde unter Verwendung von 300-bp-DNA-Leiter (Bangalore Genei, Indien) als Standard-Größenmarker bestätigt. Das Gel wurde dann durch unter UV Durchleuchtung photographiert. Die Dichte der PCR-Produkte wurde unter Verwendung von alpha-Imager-Software gemessen. Das Signal für die PCR-Produkte wurden standardisiert gegen die von β-Actin-mRNA aus jeder Probe und die Ergebnisse wurden als PCR-Produkt /β-Actin-mRNA-Verhältnis ausgedrückt.
Statistische Analyse
Ungepaarte Student't 'Test für Statistischer Vergleich verwendet wurde, zwischen zwei Gruppen. Vergleiche mehr als zwei Gruppen beteiligt sind, wurden eine einfache Varianzanalyse (ANOVA) und für multiple Vergleiche durchgeführt unter Verwendung von im Vergleich zur Kontrollgruppe von Dunnett-Test durchgeführt wurde.
Ergebnisse | Phytochemical Studie
Preliminary phytochemical Screening von MSE zeigte die Anwesenheit von Saponinen, flovonoids, Glykoside, Steroide und Alkaloide durch chemische Tests. Der Fingerdruck von Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie (HPTLC) Chromatogramm zeigte die Anwesenheit von mindestens acht Wirkstoffe (Abbildung 1). Die Analyse der Retentionsfaktor und Farben der aufgelösten Banden bei 254 nm bei R f 0,71 in MSE könnte ein Flavonoid, sein Leucocyanidin wie früher von Prabha und Mitarbeiter [17] berichtet, wo sie die ähnliches Ergebnis mit der methanolischen Extrakt gezeigt haben, von Musa sapientum
Früchte. Abbildung 1 Der Fingerdruck von HPTLC Chromatogramm von MSE.
Blutzucker Studie
Normal (NR) + NS (98,7 ± 6,0 mg /dl) und NR + AA (106,3 ± 5,8 mg /dl) Ratten zeigten eine geringe oder keine Veränderung der Blutzuckerspiegel (BGL). 0,3 bis P verabreicht unternommen> < 0,1, n = 6) in BGL beobachtet (BGL- 297,6 ± 21,2 mg /dl) wurde. MSE (100 mg /kg) neigten (17,0% Abnahme, P
< 0,1) zu verringern, aber INS verringerte die BGL (61,4% Abnahme, P
< 0,05), während OMZ und PTX zeigte wenig oder keine ändern in BGL im Vergleich mit DR + AA-Gruppe. Jedoch Dosis von 100 mg /kg wurde für die weitere Untersuchung ausgewählt, da diese Dosis früher wirksam wurde Essigsäure-induzierten Magengeschwüren bei normalen Ratten in der Heilung 15.
Körpergewichtsveränderungen
Mittelwert ± SE Körper Gewichten der Ratten in allen Gruppen 7 bei 0 Tage untersucht zeigten einen Bereich von 201,3 ± 3,4 bis 205,4 ± 2,9 g /Ratte zu Beginn des Experiments. 1 st und 2 nd waren normalen Rattengruppen während 3 rd bis 7 th diabetischen Rattengruppen war. Zunahme des Körpergewichts wurde in 1 beobachtet st (8,9%, P < 0,05) und 2 nd (5,6%) Gruppen, während die diabetischen Ratten von 3 rd bis 7 th Gruppe zeigte Abnahme des Körpergewichts um 8,7 auf 11,3% (P < 0,05 bis P < 0,01), die jeweils auf 14 th Post normal /Diabetiker Tag im Vergleich mit ihren jeweiligen 0 Tage Wert. Es gab signifikante Gewichtszunahme nach der Behandlung mit MSE (9,7%, P < 0,05) und INS (15,3%, P < 0,01), während ein geringer Anstieg des Körpergewichts mit OMZ (3,4%) und PTX (4,7% beobachtet ) Behandlungen im Vergleich zu ihren jeweiligen 14 Tage Wert. Allerdings Ratten diabetische Kontrolle nicht zu einer Steigerung ihres Körpergewichts von seinen 14 Tageswert zeigte.
Magengeschwür Heilung
NR + AA Ratte zeigte Anstieg der Ulkus-Index (UI-14,3 ± 2,3, P <
; 0,05) im Vergleich zu NR + NS (kein Geschwür) Ratte, während AA Ratte DR + weiter in Ulkus-Index (108,4% Steigerung, P
<erhöhen zeigte; 0,05) im Vergleich zu NR + AA Ratten erhöhte Neigung zu Geschwüren anzeigt, und Verzögerung bei der Heilung von Geschwüren. DR + AA Ratten, behandelt mit OMZ, INS und PTX Abnahme der Ulkus-Index zeigte von 39,3, 38,6 und 43,3% bzw. (in der Nähe von NR + AA-Ebene), während zeigte MSE Rückgang um 63,8%, weniger als der Wert von NR + AA Ratten zeigt bessere Heilung von MSE im Vergleich zu OMZ, INS oder PTX (Abbildung 2). Figur 2 Wirkungen von ethanolischer Extrakt von Fruchtfleisch von Musa sapientum (MSE, 100 mg /kg × 10 Tage), Omeprazol (OMZ, 2 mg /kg × 10 Tage), Insulin (INS, 4U /kg × 10 Tage) und Pentoxyphyllin (PTX, 10 mg /kg × 10 Tage) auf Ratten-Magengeschwür-Index und der Magenschleimhaut Zytokine, Tumornekrosefaktor-α (TNF-α) und Interleukin-1β (IL-1β) und transformierenden Wachstumsfaktor α (TGF-α ) als Verhältnis Aktin in Essigsäure (AA) -induzierten Magengeschwüren in normal (NR) und diabetische (DR) -Ratten zu ß. Die Ergebnisse sind Mittelwert ± SEM, 4 Tiere in Zytokinen und Wachstumsfaktor-Studie und 6 Tiere in Magengeschwür-Studie. CMC, MSE, OMZ und PTX wurden oral verabreicht, während; INS wurde von subkutan verabreicht. * P
< 0,05 im Vergleich zu NS-Gruppe, aP
< 0,05 im Vergleich zu NR + AA-Gruppe und + P
< 0,05 im Vergleich zu DR + AA-Gruppe (Die statistische Analyse durch Einweg-ANOVA getan Dunnett-Test für multiple Vergleiche, gefolgt von).
TNF-α, IL-1β und TGF-α
die Ergebnisse von TNF-α, IL-1β und TGF-α wurden als Verhältnis der Cytokine /Wachstums ausgedrückt Faktor &bgr; -Actin (2 und 3). Figur 3 Wirkung von MSE, OMZ, INS und PTX auf der Magenschleimhaut TNF-α, IL-1β und TGF-α Spiegel in diabetischen Ratten (DR) (RT-PCR-Verfahren). Spur M: Marker. Spur 1: NR + NS. Spur 2: NR + AA. Spur 3: DR + AA. Bahn 5: DR + AA + MSE. Spur 6: DR + AA + OMZ. Spur 7: DR + AA + INS. Spur 8: DR. + AA + PTX
TNF-α und IL-1β
NR + AA Ratten Erhöhung der Magenschleimhaut TNF-α von 265,1% zeigte (P
< 0,05) und IL- 1β um 52,8% (P
< 0,05) im Vergleich zu NR + NS (intakte Schleimhaut) Ratten. DR + AA Ratten zeigten weitere Erhöhung der Konzentrationen von IL-1β und TNF-α von 345,0 und 102,5% bzw. (P
< 0,05) im Vergleich zu den jeweiligen NR + NS Ratten und von 21,9 und 32,6% Zunahme (P
< 0,05) im Vergleich zu den jeweiligen NR + AA Ratten. Behandlungen von DR + AA Ratten mit hypoglykämischen Medikament, INS und anti-Geschwür Drogen, MSE und OMZ und PTX umgekehrt die Konzentrationen von IL-1β und TNF-α in der Nähe der NR + AA-Ebene. Jedoch zeigten beide MSE und PTX besser Abnahme Auswirkungen auf die TNF-α und IL-1β im Vergleich zu OMZ oder INS (Abbildungen 2 & 3).
TGF-α
NR + AA Ratten zeigten eine signifikante Zunahme der Magenschleimhaut TGF-α (165,1% Steigerung, P
< 0,05) im Vergleich zu NR + NS Ratten. Jedoch wurde TGF-α nicht weiter erhöht in DR + AA Ratten im Vergleich zu NR + AA-Gruppe. Behandlungen von DR + AA Ratten mit OMZ und INS nicht die TGF-α-Ebene weiter, während erhöhen haben, MSE und PTX neigten TGF-α (Abbildungen 2 & 3) zu erhöhen.
Diskussion
Experimental diabetischen Ratten haben gezeigt, erhöhte Neigung zu Magengeschwüren und beeinträchtigt die Heilung von Magenläsionen [8, 9] und diese Verschärfung des Ulcus /verzögerte Heilung wurden von Agenten Korrektur Blutzuckerspiegel umgekehrt [22]. Nicht-insulinabhängigem Diabetes mellitus (NIDDM) erhöht, um die Neigung zur Magengeschwürbildung durch offensive Verbesserung, Säure-Pepsin-Sekretion und Magenschleimhaut freie Radikale, die Lipidperoxidation (LPO), Stickstoffmonoxid (NO) und abnehmende mukosale Glykoprotein und Antioxidantien, Superoxid-Dismutase ( SOD) -Spiegel [10].
Streptozotocin (STZ) ist allgemein zu induzieren experimentellen Diabetes in Tieren und seine cytotoxische Wirkung vermittelt wird durch reaktive Sauerstoffspezies verwendet. STZ scheint spezifisch zu sein, da die Aufnahme durch spezifische GLUT2 beta Zelle ist, aber nicht von anderen Glucose-Transporter und weniger Nebenwirkungen haben. Es bewirkt, dass die Aktivierung von Poly-ADP-Ribosylierung, die zur Bildung von Superoxid-Radikalen führt, und als Ergebnis, β-Zellen die Zerstörung durch Nekrose [23] zu unterziehen. Der Mechanismus, der die erhöhte Anfälligkeit der Magenschleimhaut in diabetischen Tieren zu Schäden zugrunde liegenden ist multifaktoriell und umfasst die Dämpfung von Angiogenese sowie die erhöhte Produktion von proinflammatorischen Cytokine, TNF-α und IL-1β, die zu einer anhaltenden Entzündungsreaktion führen und Verzögern Heilungsprozess bei das Geschwür Bereich [9]. Der Hauptmechanismus, durch den Zytokinen ihre schädlichen Einflüsse auf die Heilung von Geschwüren ausüben kann, die die Hemmung von Wachstumsfaktoren, die für Schleimhaut Regeneration und Erholung von den Schäden [24] beinhalten. Es wurde auch berichtet worden, dass TNF-α die Produktion von IL-1β und andere Zytokine verstärkt, was zu einer Akkumulation von Neutrophilen [25] und eine verbesserte Produktion von ROS in der Magen-Ischämie-Reperfusion ausgesetzt Schleimhaut. Pentoxifyllin, ein Inhibitor der TNF-α ist berichtet worden, möglicherweise über eine Hemmung der TNF-α Produktion [13] in Ratten Heilung der Essigsäure-induzierten Magengeschwüren zu beschleunigen. Es wurde berichtet, dass die Verstärkung der Zellproliferation während der Heilung von Geschwüren durch eine erhöhte Freisetzung von EGF und TGF-α vermittelt werden kann. Es hat sich auch, dass die Heilung aufgrund unbekannter Mechanismus /s verzögert wurde in den Diabetes-Ratten mit Co-auftretende Magengeschwürbildung trotz der Erhöhung der TGF-α-Ebene berichtet. Es wurde vorgeschlagen, dass die Hyperglykämie in diabetischen Tieren konnten einige strukturelle Modifikationen der TGF-α oder seine Rezeptoren im Ulcusfläche, was zu der Fehlfunktion dieses Wachstumsfaktors bei Diabetes mellitus [9, 26] zu induzieren.
Essigsäure (AA ) -induzierten Geschwüren in Ratten wurden in Lage, Chronifizierung und Schwere Ähnlichkeit haben mit klinischen Geschwüren berichtet und dient als das zuverlässigste Modell Geschwür Heilungsprozess [20] zu studieren. In der vorliegenden Studie haben wir erhöhte Spiegel proinflammatorischer Zytokine TNF-α und IL-1β in der Magenschleimhaut von normalen Ratten, die mit Essigsäure behandelt wurden, beobachtet. Diabetische Ratten zeigten eine weitere Erhöhung ihrer Ebene im Vergleich zu normalen Ratten, als zu Essigsäure-induzierten Magengeschwürbildung unterzogen. Die obige Beobachtung hat sich mit den bereits früher berichtet Werke in Bestätigung gewesen [13, 27, 28]. MSE wurde berichtet, von AA in normalen Ratten induziert die Zunahme von TNF-α und IL-1β in GU umkehren und förderte die Heilung von Geschwüren durch seine verschiedenen Auswirkungen auf die Magenschleimhaut defensiven Faktoren einschließlich einer verbesserten Zellproliferation und Antioxidantien und die Verringerung der freien Radikale Ebenen [7, 15]. Die Behandlung mit Insulin umgekehrt die beeinträchtigte Heilung von Geschwüren bei diabetischen Tieren, vor allem aufgrund der Normalisierung der Hyperglykämie, aber nicht beschränkt auf die unmittelbare Wirkung von Insulin auf die Heilung Geschwür, da Insulin nicht-diabetischen Ratten verabreicht hatte keine Auswirkungen auf die Heilung von Geschwüren zeigen [ ,,,0],27]. Dies zeigte, dass Antidiabetika durch Korrektur der erhöhten Glukosespiegel wirksam waren dabei die Werte dieser Zytokine reduziert, während, Anti-Geschwür Medikament (Omeprazol) wurde die Heilung von Geschwüren zu verbessern und die Verringerung ihrer Ebene [15]. TNF-α wurde berichtet, die Hochregulierung von IL-1β Ebenen zu stimulieren, so dass durch die TNF-α-Expression Steuerung der IL-1β-Expression kontrolliert werden konnte. Dies kann der Mechanismus, durch den pentoxifylline verringert sowohl die Cytokine Ebenen [29].
Die vorliegende Arbeit Anstieg zeigte in TGF-α-Ebene bei Ratten mit Essigsäure behandelt. Es wurde jedoch keine weitere Erhöhung der TGF-α Ebene in diabetischen Ratten gefunden und diese Beobachtung ist konsistent mit früheren Beobachtungen die Bedeutung dieses Wachstumsfaktors in den Prozess der Heilung von Geschwüren zeigt. Die Tatsache jedoch, dass eine Verzögerung der Heilung der Magengeschwüre in dem diabetischen Zustand trotz erhöhten Expression von TGF-α, zeigt an, dass die heilenden Wirkungen dieser Wachstumsfaktor kann durch einen unbekannten Mechanismus gedämpft werden. Dies spricht gegen die wichtige Rolle dieses Faktors in der beobachteten Verzögerung bei der Heilung von Magengeschwüren unter diabetischen Bedingungen. Eine Möglichkeit ist, dass die Hyperglykämie in diabetischen Tieren konnten einige strukturelle Modifikationen der TGF-α oder seine Rezeptoren zu induzieren, oder die Verfügbarkeit wesentliche Bestandteile verringern für normale Heilung im Ulcusfläche erforderlich, was zu der Fehlfunktion dieses Wachstumsfaktors bei Diabetes mellitus. Weitere Studien werden benötigt, um die Frage zu beantworten, warum erhöhte Expression von TGF-α nicht zu der Freisetzung einer funktionell aktiven Wachstumsfaktor beitragen [9]. Es wurde auch berichtet, dass die erhöhte TGF-α-Ebene könnte die Zellproliferation [30] erhöhen. MSE zeigten eine Tendenz TGF-α-Ebene bei diabetischen Ratten zu erhöhen. Dies kann besser korreliert mit der Zellproliferation als MSE wurde berichtet, dass die Zellproliferation zu erhöhen [4]. Aufgrund Hypoglycemic Aktivität
zur Stimulation der Insulinproduktion und der Glukoseverwertung wurde von grünen Früchten von Wegerich Banane und Fasern aus Obst berichtet wurden gefunden zu erhöhen glucogenesis in der Leber und senkte Nüchternblutzucker. Musa sapientum
wurde berichtet β-Sitosterole enthalten, Leucocyanidin, sryngin, Quercetin, Sterylglycosiden, Aminosäuren usw. β-Sitosterole und dimethoxy-Derivat der Leucocyanidin, Leucocyanidin 3-O-beta-D-Galactosyl-cellobiosid haben hypoglykämische Wirkung demonstriert in experimentellen Tier [16]. Flavonoide werden am häufigsten für ihre Aktivität gegen Geschwüre, lipidsenkende Wirkung bekannt, die entzündungshemmende Aktivität, antioxidative Aktivität, antimikrobielle Aktivität [31] und anti-hyperglykämische [32] Aktivitäten. HPTLC Fingerabdrücken von MSE demonstriert acht aktiven Bestandteile in denen einer der Bestandteile Leucocyanidin werden kann, wie zuvor von Prabha und Mitarbeiter [17] berichtet, die den Bestandteil mit authentifizierten Standard Leucocyanidin verglichen haben. Alkaloide sind berichtet worden anti-diabetischen zu zeigen und entzündungshemmende, antioxidative Aktivität [33], während Saponine zeigte antidiabetische Wirkung [34].
Fazit
Die Anwesenheit vieler Wirkstoffe wie Flavonoide, Saponine, Glykoside und Alle Autoren gelesen und genehmigt haben das endgültige Manuskript.

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