Liečivé účinky Musa sapientum var. paradisiaca u diabetických potkanov s co-nastávať žalúdočného vredu: cytokínov a rastových faktorov pomocou PCR amplifikácie

Liečivé účinky Musa sapientum
var. paradisiaca
u diabetických potkanov s co-nastávať žalúdočného vredu: cytokínov a rastových faktorov pomocou PCR amplifikácie
abstraktné
pozadia
tejto štúdie hodnotia účinky extraktu z Musa sapientum
ovocia (MSE) o indexe vredu, hladiny glukózy v krvi a žalúdočnej sliznice, cytokínov TNF-a a IL-1 a rastový faktor, TGF-alfa (ovplyvnený cukrovky a chronických vredov) v kyseline octovej (AA) indukovanej žalúdočný vred (GU) u diabetických ( DR) krýs.
Methods
MSE (100 mg /kg, perorálne), omeprazol (OMZ, 2,0 mg /kg, perorálne), inzulín (INS, 4 U /kg, sc) alebo pentoxyfyllin (PTX, 10 mg /kg, perorálne) sa podáva raz denne po dobu 10 dní do 14 dní po streptozotocínom (60 mg /kg, intraperitoneálne) indukovanej diabetických krýs, zatiaľ čo obvyklé /diabetických potkanov bola CMC za rovnaké obdobie po indukcii GU s AA , index vred bol vypočítaný na základe súčinu dĺžky a šírky (mm 2 /potkan) vredov, zatiaľ čo, TNF-α, IL-1β a TGF-α boli odhadnuté v žalúdočnej sliznice homogenátu z neporušené /vred oblasti. Fytochemikálie skríning a HPTLC analýzu MSE bolo vykonané podľa štandardných postupov.
Výsledky
An zvýšenie indexu vredu, TNF-a a IL-1 bola pozorovaná v normálnej (NR) -aa potkanov v porovnaní s NR-fyziologického krýs , ktoré boli v DR-AA potkania chvíli ešte zvýšiť, ošetrenie DR-AA potkana s MSE, OMZ, INS a PTX obrátil im viac tak s MSE a PTX. Výrazné zvýšenie TGF-a bola nájdená v NR-AA krýs, ktoré sa nezvyšuje ďalej v DR-AA krysy. MSE a PTX tendenciu k zvýšeniu chvíľu, OMZ a INS ukazoval malý alebo žiadny vplyv na TGF-alfa v AA-DR krysy. Fytochemické screening MSE preukázala prítomnosť saponíny, flavonoidy, glykozidy, steroidy a alkaloidy a HPTLC analýzy ukázali prítomnosť ôsmich aktívnych zlúčenín.
Záver
MSE ukázali, antidiabetické a lepšie hojenie vredov účinky v porovnaní s OMZ (vredu) alebo INS (antidiabetikum) v diabetickej krysy a mohlo by byť účinnejšie pri cukrovke so súčasným žalúdočný vred.
Kľúčové
Musa sapientum
diabetes vredov TNF-α IL-1β TGF-α pozadia
Rozsiahle vyšetrovanie týkajúce anti-ulcerogénne a vredov činnosť skorocelu banán boli vykonávané v našom laboratóriu za posledných 30 rokov. Anti-ulcerogénne aktivita suchého prášku z skorocelu banán ovocná dreň (Musa sapientum
var. Paradisiaca
, MS) proti rôznym experimentálnym gastroduodenálnej boli hlásené z našej laboratóriu aj inde. Vred ochranné účinky skorocelu banánov bol zaznamenaný v dôsledku zvýšenia obranných faktorov viď. zvýšenie sekrécie mucínu, sliznice glykoproteíny, hromadenie prostaglandínov E a I 2, životnosť a proliferáciu buniek, skôr než vplyv na útočnej acid-pepsín sekréciu [1-6]. Nedávno sme informovali vred ochranný, skorocel banán posilňujúce antioxidanty, superoxiddismutasu (SOD), katalázový (CAT) a glutathionperoxidázy (GSH) a klesajúci voľné radikály, lipoperoxidácie (LPO) a oxidu dusnatého (NO) úrovne v žalúdočnej sliznice Homogenát bez anti-H. pylori
aktivita in vitro
[7]. Niektoré správy naznačujú, že diabetes mellitus (DM), zvyšuje náchylnosť k slizničnej ulcerogénne podnety a predispozície k žalúdočných vredov a zhoršené hojenie [8, 9]. Náš minulosti hlásené reakcie práce na diabetes streptozotocínom indukovaný sa súčasne sa vyskytujúce žalúdočných vredov urobil ukazujú zapojenie oboch útočné sekréciu kyseliny-pepsínu a voľných radikálov a obrannými faktormi, ako je sekrécia hlienu, slizničných glykoproteíny, životnosti slizničných buniek a antioxidačné stav žalúdočných sliznice, ktoré boli zvýšené a znížilo [10, 11].
prozápalových cytokínov, ako je TNF-a (TNF-a), interleukín-1β (IL-1), interleukín-6 (IL-6) a rastové faktory, vrátane inzulínu podobného rastového faktora 1 (IGF-1), hrajú dôležitú úlohu v patogenéze chronických ochorení, ako je autoimunitné diabetes a žalúdočné vredy [12, 13]. majú rastové faktory, ako je vaskulárny endoteliálny rastový faktor (VEGF), základný fibroblastový rastový faktor, transformujúci rastový faktor-a (TGF-α) hlavnú úlohu v procesoch hojenia tkanív vrátane toho žalúdočných vredov [9, 14]. V poslednej dobe sme popísali liečivé účinky etanolového extraktu sušené ovocné drene MS (MSE) na kyselinu octovú indukované žalúdočný vred v normálnom (NR), krysy a zistil, že úloha cytokínov TNF-a, IL-1 a rastový faktor, TGF -α pri hojení vredov [15].
hypoglykemickú aktivitu bolo hlásené zo zelených plodov skorocelu banán. Ďalej, leucocyanidin, flavonoid, bol izolovaný z skorocelu banán a jeho dimetoxy derivátu, leucocyanidin 3-O-beta-D-galaktosyltransferasu cellobiosidu, ako je vidieť hypoglykemický účinok v pokusného zvieraťa [16, 17]. Preto sa táto štúdia bola rozšírená zhodnotiť liečivé účinky MSE (test na prítomnosť drog) v žalúdočnom vredom indukovanej kyselinou octovou u diabetikov (DR-AA) potkana a jeho účinkov na TNF-a, IL-1 a TGF-alfa. Účinky MSE na žalúdočný vred, TNF-α, IL-1β a TGF-α boli porovnané s anti-vredovej lieky, omeprazol (OMZ, inhibítory protónovej pumpy) a pentoxyfyllin (PTX, inhibítora TNF-a , prominentné markeru zápalu), a hypoglykemických drog, inzulín (pozitívne kontroly) a CMC ošetrené (negatívna kontrola) u DR-AA krysy.
metódy
Zvieratá
Inbred Charles Foster-bielych krýs (200-250 g ) oboch pohlaví boli získané z centrálneho zvieracieho domu Institute of Medical Sciences, Banaras Hindu University, Varanasi. Boli držaní v rezortnom zvierat dome na 26 ± 2 ° C a relatívna vlhkosť 44-56%, svetla a respektíve po dobu 1 týždňa tmavej cykly 10 až 14 hodín pred a počas experimentov. Zvieratá boli opatrená štandardným hlodavcov pelety stravy (Pasha Aahar, Ramnagar). Potrava bola stiahnutá 18-24 hodín pred experimentom aj keď voda bola ponechaná ad libitum
. Zvieratá boli rozdelené do siedmich skupín, obsahujúcich 6 zvieratách. Prvé dve skupiny boli s normálnou krysy, zatiaľ čo 3 rd až siedmej skupiny mali diabetických krýs. Žalúdočné vredy boli vyrobené s kyselinou octovou vo všetkých skupinách s výnimkou 1 st skupinu (NR + NS), kde bol aplikovaný na NS žalúdočnej steny namiesto kyseliny octovej. 1 st 3 rd skupinách dostávali CMC orálne, zatiaľ čo 4 th až 7 th skupiny dostali liehový extrakt ovocnej drene Musa sapientum
(MSE), omeprazol (OMZ), inzulín (INS) a pentoxyfyllin (PTX) po dobu 10 dní v tomto poradí po indukcii GU s kyselinou octovou. "Princípy laboratórnych starostlivosť o zvieratá" (NIH publikácia č. 82-23, revidované 1985) Pokyny boli nasledoval. Schválenie etickou komisiou Institutional Animal odfotil pred experimentálna práca (Dean 542/02 /ab /CPCSEA z 23.8.2002).
Zber a príprava extraktu
veľkých rozmerov, nezrelé, zelené banánu banán ovocia ( Musa sapientum Linn
. var. paradisiaca,
MS) získané v priebehu mesiaca november boli získané z miestneho trhu a identifikovať podľa Prof. VK Joshi, Katedra Dravyaguna, Fakulta Ayurveda, IMS, BHU. Vzorka exemplár (MS-09/231) bol udržiavaný v oddelení Dravyaguna, IMS, BHU, Varanasi. Koža na ovocie sa odlúpne a buničina bol rozrezaný na malé kúsky a suší sa pri teplote miestnosti. Po vysušení odtieň prášku buničiny bola pripravená z malé kúsky a používa na extrakciu. Etanolový extrakt (MSE) sa pripraví pridaním 1 litra etanolu dvakrát v intervale dvoch dní. Etanol obsahujúce extrakt takto získaný bol zakaždým zmieša a potom sa suší vo vákuovej sušiarni. MSE bol skladovaný pri -20 ° C až do ďalšieho použitia. Výťažok extraktu 1,6% (w /w).
Fytochemických štúdii
chemických zložiek, ako sú saponíny, flovonoids, glykozidy, steroidy a alkaloidov boli odhadnuté na MSE po štandardných postupov [18].
HPTLC prst tlač vyhodnotenie
MSE sa podrobí HPTLC (CAMAG TLC systém) prst tlač analýzy. Extrakty boli zriedené s cieľom získať koncentráciu 1 ug /ul a aplikuje na vopred potiahnuté silikagélu G60 F 254 dosky (10x10, 2 mm hrúbky, E. Merck) s použitím LINOMAT IV spotter. Doštička potom bola vyvinutá v CAMAG ploché dno komory v podmienkach čiastočného alebo úplného nasýtenia prostredie v nádrži s parami rozpúšťadiel. Systém rozpúšťadiel bol použitý chloroform: metanol: kyselina mravčia (9: 1: 0,5). Doštička bola starostlivo suší a postriekajú anisaldehydu sírovej kyseliny a potom sa zahrieva pri teplote 110 ° C počas 5-10 min. Detekcia spotov bol vyrobený s použitím Hg lampy pri 254 nm a boli zaznamenané obrazy pomocou CAMAG Reprostar 3. Doštička bola snímaná pomocou CAMAG TLC skenera 3 s WinCATS vyhodnocovací softvér.
Drogy a chemikálie
streptozotocínom (St . Louis, MO, USA), omeprazol (Cipla, Mumbai, India) a pentoxyfyllin (Abbott, Bangalore, India) boli použité v tejto štúdii.
Indukcia diabetu
diabetes sa indukuje u dospelých potkanov (200- 250 g), jedinou intraperitoneálnou injekciou streptozotocínom (STZ, 60 mg /kg), rozpusteného v citrátovom pufri (pH 4,5) a privádza zvyčajne potom [19], zatiaľ čo kontrolné krysy dostávali iba citrátu. Krvné vzorky boli odobraté z retroorbitálního plexu krýs a sérum sa oddelí odstredením pri 3000 otáčkach za minútu po dobu 3 minút. Hladiny glukózy v krvi boli odhadnuté na unhemolysed sére metódou glukózo-oxidačných-peroxidáza (GOD-POD) za použitia glukózy diagnostického kitu (Ranbaxy Laboratories Ltd, India). Hladina glukózy v krvi (BGL) bola odhadnutá po 48 hodinách a dvoch týždňov po podaní streptozotocínom a krýs ukazuje BGL nad 250 mg /dl za podmienok, ktoré nie sú lačno boli vybrané pre žalúdočný vred štúdie. zmeny telesnej hmotnosti telo bolo pozorované skôr (0 dní), po 14 dňoch po diabetických alebo normálnych potkanov a na strane 10 th deň AA-indukovanej GU po CMC /MSE /OMZ /INS /PTX procedúr (24 th deň) u normálnych a diabetických krýs.
octová kyselinami vyvolaných žalúdočný vred u diabetických krýs a liečebný protokol
diabetických krýs sa anestetizují pentobarbitonem (35 mg /kg, intraperitoneálne). Brucho bolo rozrezať s rezom a žalúdok sa vizualizovať. Valcovité sklenené trubice s priemerom 6 mm bola pevne umiestnená na prednej serózna povrch žliaz časti žalúdka 1 cm od konca pyloru. 100% kyseliny octovej (0,06 ml /zviera) sa instiluje do trubice a ponechané 60 sekúnd na žalúdočnej steny. Po odstránení kyslého roztoku, brucho bola uzavretá v dvoch vrstvách a zvieratá boli kŕmené v klietke a za normálnych okolností. MSE (100 mg /kg, perorálne), OMZ (2,0 mg /kg, perorálne), INS (4U /kg, subkutánne) a PTX (10 mg /kg, perorálne) boli podávané raz denne, prvá dávka podaná 4 hodiny po aplikácii kyseliny octovej v deň 1 a potom pokračovalo až do 10 dní. Zvieratá boli kladený na rýchlo po dobu 24 hodín po podaní poslednej dávky testovaných liečiv na 10 teho dňa a usmrtí eutanázii na 11 th deň experimentu vyhodnotiť žalúdočné veľkosti vredov a hojenie. index vred bol vypočítaný na základe súčinu dĺžky a šírky (mm 2 /potkan) vredov [20].
TNF-a, IL-1 a TGF-a odhady
TNF-a, IL -1β a TGF-α boli stanovené v neporušenej žalúdočnej sliznice a z žalúdočnej sliznice diabetických krýs vystavených na kyselinu octovú s alebo bez rôznych liekov. Sliznica zo žliaz časti žalúdka boli zoškrabnutie z vredy /neporušené oblasti použitia sterilizovaných sklenené sklíčka a skladované pri -80 ° C až do analýzy. Celková RNA bola extrahovaná zo vzoriek sliznice metódou Chomczynski a Sacchi (1987) [21] za použitia súpravy na extrakciu z Bangalore GENEI, India. Izolácia RNA bola kvantifikovaná a 5 ug celkovej RNA bola použitá pre prípravu cDNA. PCR zmes bola amplifikovaná v termocykléri DNA so špecifikáciami opísanými v materiáloch a metódach. Takto boli stanovené β-aktínu, IL-1β, TNF-α a TGF-α. Výsledky boli vyjadrené ako pomer cytokínov /rastových faktorov, aby beta-aktínu v rôznych liečených skupinách.
Úplné izoláciu RNA z žalúdočnej sliznice
Približne 100 mg žalúdočnej sliznice zošrotovanie z žľazového oblasti (miesto vredu oblasť), v blízkosti vredy oblasti bola vzatá v DEPC ošetrenej skúmavky a homogenizuje s 1 ml denaturačné roztok. Na tento 1 ml vody nasýteného fenolu a následne 200 ul chloroformu a isoamylalkoholu - zmesi (čerstvo pripravený v pomere 49: 1) bolo pridané a dôkladne sa premieša. Zmes bola inkubovaná na ľade po dobu 15 minút a centrifugována pri 10000 otáčkach za minútu počas 20 minút pri teplote 4 ° C. Horná vrstva sa opatrne odstráni na inú DEPC ošetrené skúmavky a pridá sa 1 ml 100% izopropanolu a udržiava sa pri teplote -20 ° C počas 30 minút za účelom vyzrážania RNA. Zmes sa znovu odstredí pri 10000 otáčkach za minútu počas 20 minút pri 4 ° C a supernatant bol odstránený. Peleta bola resuspendovaného v 0,3 ml denaturačného roztoku a vyzráža pridaním rovnakého množstva 100% izopropanolu. Táto zmes sa udržiava na teplote -20 ° C počas 30 minút a centrifugována pri 10000 otáčkach za minútu počas 20 minút pri teplote 4 ° C. Supernatant bol odstránený a peleta bola premytá 75% etanolom na odstránenie zvyškové množstvo Guanidine po dobu 15 minút. Opäť obsah sa odstreďuje počas 20 minút pri 4 ° C pri 10000 otáčkach za minútu. Supernatant bol odstránený a peleta obsahujúca RNA sa rozpustí v 100 - 200 ul DEPC upravenej vody a inkubuje sa pri teplote 55 ° C počas 10-15 minút. Táto celková RNA bola skladovaná pri -70 ° C až do ďalšieho použitia. Celková RNA bola kvantifikovaná tým, že sa absorbancia pri 260 nm (A 260) a pomocou nasledujúceho vzorca IE koncentrácia RNA vzorky = 40 x A 260 x faktor riedenia tj absorbancia 1 jednotku na A 260 zodpovedá 40 ug RNA na ml (Tento vzťah je platný len pre meranie vo vode).
cDNA syntézu prvého vlákna
5 ug celkovej RNA bol prevzatý z každej vzorky v sterilnej RNA bez (DEPC liečených) rúry a sterilné voda bola pridaná, aby sa konečný objem na 9 ul. Na tento 1 ul oligo (dT) sa pridá 18 primer a umiestni sa na 65 ° C počas 10 minút a potom pri teplote miestnosti po dobu 2 minút. K tomu 1 ul RNA inhibítor, bol pridaný 1 ul 0,1 M DTT, 4 ul RT pufra (5x), 2,0 ul 30 mM zmesi dNTP, 0,5 ul reverznej transkriptázy a 1 ul sterilnej vody a dobre sa premieša. Zmes sa udržiava pri 42 ° C po dobu 1 hodiny a inkubuje sa pri 95 ° C po dobu 2 minút a udržiava sa v ľade rýchlo. Táto cDNA produkt môže byť priamo použitý pre PCR amplifikáciu alebo inak skladovať pri -20 ° C na ďalšie použitie.
Polymerázová reťazová reakcia (PCR)
Výsledná cDNA (2 ul) bola amplifikovaná v reakčnom objeme 50 ul obsahujúce 2 u Taq polymerázy, dNTP 1 ul (30 mM), 5 ul 10 x PCR pufra a špecifickými primery (dopredu a dozadu) boli použité v konečnej koncentrácii 1 mM. Polymerázová reťazová reakcia zmes bola amplifikovaná v termocykléri DNA (MJ Research) a inkubácie a tepelného cyklovania podmienok boli nasledovne: denaturácia pri teplote 94 ° C po dobu 2 minúty, teplotná hybridizácia pri 60, 66 a 62 ° C počas beta aktínu, TGF - α, IL - β a TNF - alfa, respektíve a predĺženie pri 72 ° C počas 50 sekúnd a záverečná extenzie po dobu 2 minút. Počet cyklov je 30, u všetkých reakcií. Nukleotidová sekvencie primérov boli nasledovne: β aktínu, zmysel 5'-TTG CCA TAA ACT GGG ACG TGG ATA - 3 '; antisencie 3 '- GAT CTT GAT GGT GCT AGG - 5' (764 bp); TGF - α zmysel 5 '- ATG GTC CCC GCG GCC GGA CA-3'; nezmyselné 3 '- GAC CAC TGT CTC AGA GTG GCA GCA AGG CAG TCC TTC TTT - 5 "(476 bp); IL - 1β sense 5'GCT ACC TAT GTC TTG CCC GT -3 '; nezmyselné 3 '- GAC CAT TGC TGT TTC CTA GG - 5 "(543 bp); TNF - α zmysel 5 '- TAC TGA ACT TCG GGG TGA TTG GTC C - 3'; nezmyselné 3 '- CAG SCS TGT CCC TTG AAG AGA ACC - 5 "(295 bp). Primery boli vybrané na základe sekvencií publikovaných v predchádzajúcej štúdii [9] sa pripraví Bangalore GENEI, Bangalore, India.
PCR produkty boli detekované elektroforézou na 1,5% agarózovom géli obsahujúcom Ethidium bromid. Umiestnenie predpokladaného produktu bola potvrdená pomocou 300 bp DNA rebrík (Bangalore GENEI, India) ako štandardný ukazovateľ veľkosti. Gél sa potom vyfotografovaná pod UV svetlom. Hustota PCR produktov boli namerané za použitia alfa-Imager softvér. Signál pre PCR produktov bola štandardizovaná, že beta-aktínu mRNA z každej vzorky a výsledky boli vyjadrené ako pomer p /mRNA aktínu produktu PCR.
Štatistická analýza
nepárového Student't "test bol použitý pre štatistické porovnanie medzi dvoma skupinami. Porovnanie zahŕňajúce viac ako dve skupiny, boli vykonané za použitia jednosmernej analýzy rozptylu (ANOVA), a pre viacnásobné porovnávania oproti kontrolnej skupine bolo vykonané Dunnettovým testom.
Výsledky
Phytochemical štúdie
predbežný skríning fytochemických MSE ukázala prítomnosť saponíny, flovonoids, glykozidy, steroidy a alkaloidy chemickú testovanie. Tlač prst High-Performance tenkej vrstve (HPTLC) chromatogramu bola preukázaná prítomnosť najmenej osem účinných látok (obrázok 1). Analýza retenčný faktor a farby vyriešených pásom pri 254 nm pri R F 0,71 v MSE môže byť flavonoid, leucocyanidin ako predtým hlásené Prabha a spolupracovníkmi [17], kde sa ukázali podobný výsledok sa methanolického extraktu Musa sapientum
ovocie. Obrázok 1 prst tlač HPTLC chromatogramu MSE.
Blood štúdie glukóza
Normal (NR) + NS (98,7 ± 6,0 mg /dl) a NR + AA (106,3 ± 5,8 mg /dl) krysy vykazovali malú alebo žiadnu zmenu úrovne hladiny glukózy v krvi (BGL). O boji proti hyperglykemické štúdie závislá od dávky bola vykonaná s 50, 100 a 200 mg /kg podávaných MSE počas 10 dní do diabetických krýs a poklesu 11,0, 17,0 a 19,9% (P
< 0,3 až P
< 0,1, n = 6) v BGL bolo pozorované (BGL- 297,6 ± 21,2 mg /dl). MSE (100 mg /kg) tendenciu k poklesu (o 17,0% pokles, P Hotel < 0,1), ale INS znížil BGL (61,4% pokles, P Hotel < 0,05), zatiaľ čo OMZ a PTX ukázal malú alebo žiadnu Zmena v BGL v porovnaní s DR + AA skupiny. Avšak, dávka 100 mg /kg bol vybraný pre ďalšie skúmanie, pretože táto dávka bola už skôr zistené, účinný pri liečení žalúdočný vred indukovanej kyselinou octovou u normálnych krýs 15.
Zmeny hmotnosti tela
stredná hodnota ± SE tele hmotnosti krýs vo všetkých 7 skupín študovaných pri 0 deň ukázal rozsah 201,3 ± 3,4 do 205,4 ± 2,9 g /krysu na začiatku experimentu. 1 st a 2 nd boli normálne potkania skupiny, zatiaľ čo 3 rd 7 th bol diabetickej potkany skupiny. Zvýšenie telesnej hmotnosti bolo pozorované u 1 st (8,9%, P < 0,05) a 2 nd (5,6%) skupiny, zatiaľ čo diabetickej krysy 3 rd až 7 th skupinu ukázali zníženie telesnej hmotnosti o 8,7 na 11,3% (P menšia ako 0,05 P &0,01), respektíve na 14 th po normálny /diabetickej deň v porovnaní s ich príslušnou 0 denné hodnoty. Bolo významné zvýšenie telesnej hmotnosti po ošetrení s MSE (9,7%, P menšie ako 0,05) a INS (15,3%, P < 0,01), zatiaľ čo malý nárast bol pozorovaný s OMZ (3,4%) a PTX telesnej hmotnosti (4,7% ) ošetrenie v porovnaní s ich príslušnou hodnotu 14 dní. Avšak, diabetickej kontrolné krysy nevykazovali žiadne zvýšenie svojej telesnej hmotnosti od jeho 14 dennej hodnoty.
Žalúdočný vred hojenie
NR + AA potkanov ukázali nárast indexu vredu (UI-14,3 ± 2,3, P Hotel <0,05) v porovnaní s NR + (NS č vred) krýs chvíli, DR + AA krýs ukázali, ďalšie zvýšenie indexu vredu (nárast 108,4%, P Hotel &0,05) v porovnaní s NR + AA krýs indikuje zvýšený sklon k vredov a oneskorenie v procese hojenia vredov. DR + AA krysy, ošetrené OMZ, INS a PTX ukázali pokles indexu vredu tým, 39,3, 38,6 a 43,3%, v danom poradí (v blízkosti NR + úroveň AA), zatiaľ čo MSE poklesol o 63,8%, nižšia ako hodnota NR + AA krysy naznačujúce lepšie hojenie MSE v porovnaní s OMZ, INS alebo PTX (obrázok 2). Obrázok 2 Účinky etanolového extraktu ovocnej dužiny Musa sapientum (MSE, 100 mg /kg x 10 dní), omeprazol (OMZ, 2 mg /kg x 10 dní), inzulín (INS, 4U /kg x 10 dní) a pentoxyfyllin (PTX, 10 mg /kg x 10 dní) na potkaním žalúdka indexu vredu a žalúdočnej sliznice cytokínov, tumor nekrotizujúci faktor-a (TNF-alfa) a interleukínu-1β (IL-1) a transformáciu rastového faktora a (TGF-α ) ako pomer beta aktínu v kyseline octovej (AA) indukovanej žalúdočný vred v normálnom (NR) a diabetických krýs (DR). Výsledky sú priemery + SEM, 4 zvieratá v cytokínov a rastových faktorov štúdie a 6 zvierat v žalúdočný vred štúdie. CMC, MSE, OMZ a PTX boli podávané orálne, zatiaľ čo; INS dostal subkutánne. * P
menšie než 0,05 v porovnaní so skupinou NS, aP
menšie než 0,05 v porovnaní s NR + AA skupiny a + P
menšie než 0,05 v porovnaní s DR + skupiny AA (Štatistická analýza bola vykonaná pomocou jednofaktorové ANOVA nasledované Dunnettovým testom pre mnohonásobné porovnávanie).
TNF-a, IL-1 a TGF-a
výsledkov TNF-a, IL-1β a TGF-α boli vyjadrené ako pomer cytokínov /rastu faktor pre beta-aktínu (obrázky 2 a 3). Obrázok 3 Účinok MSE, OMZ, INS a PTX na žalúdočnej sliznice TNF-a, IL-1 a TGF-α hladiny u diabetických krýs (DR) (metóda RT-PCR). Lane M: Marker. Dráha 1: NR + NS. Dráha 2: NR + AA. Lane 3: DR + AA. Dráha 5: DR + AA + MSE. Dráha 6: DR + AA + OMZ. Dráha 7: DR + AA + INS. Dráha 8 :. DR + AA + PTX
TNF-α a IL-1β
NR + AA potkanov ukázali zvýšenie žalúdočnej sliznice TNF-o 265,1% (P
menšie ako 0,05) a IL 1β o 52,8% (P Hotel &0,05) v porovnaní s NR + (NS neporušené sliznice) krýs. DR + AA potkanov ukázali ďalšie zvýšenie hladín IL-1 a TNF-a od 345,0 a 102,5% (p
menšie ako 0,05) v porovnaní s príslušným NR + NS krýs a o 21,9 a 32,6% zvýšenie (P
< 0,05) v porovnaní s príslušným NR + AA krýs. Ošetrenie DR + AA potkanov s hypoglykemickej lieku, INS a anti-vredových liekov, MSE a OMZ a PTX obrátil hladiny IL-1 a TNF-alfa v blízkosti NR + AA úrovni. Avšak, ako MSE a PTX ukázal lepší znižujúci účinok na TNF-a a IL-1 v porovnaní s OMZ alebo INS (obr 2 &3).
TGF-α
NR + AA potkanov ukázali významné zvýšenie žalúdočnej sliznice TGF-α (nárast 165,1%, P Hotel &0,05) v porovnaní s NR + NS krýs. Avšak, TGF-α sa ďalej zvyšuje v DR + AA potkanov v porovnaní s NR + AA skupiny. Ošetrenie DR + AA potkanov s OMZ a INS nezvyšuje hladinu TGF-α ďalšie zatiaľ čo MSE a PTX tendenciu k zvýšeniu TGF-alfa (obrázky 2 &3).
Diskusia
Experimentálne diabetických krýs ukázali zvýšená náchylnosť k žalúdočných vredov a zhoršené hojenie žalúdočných lézií [8, 9], a to zhoršenie vred /spomalené hojenie boli obrátené agentmi korekčné hladinu cukru v krvi [22]. Non-insulin dependentný diabetes mellitus (NIDDM), zvýšená náchylnosť k žalúdočných vredov posilnením útočné, sekréciu kyseliny, pepsín a žalúdočnej sliznice voľné radikály, peroxidácii lipidov (LPO), oxidu dusnatého (NO) a klesajúci sliznice glykoproteín a antioxidanty, superoxiddismutázu ( ) hladiny SOD [10].
streptozotocínom (STZ) je široko používaný na vyvolanie experimentálnej diabetes u zvierat a ich cytotoxické pôsobenie je sprostredkované reaktívnych kyslíkových radikálov. STZ sa zdá byť viac konkrétny, ako je príjem prostredníctvom beta-buniek špecifickú GLUT2, ale nie iných transportérov glukózy a majú menej vedľajších účinkov. To spôsobuje aktiváciu poly ADP-ribosylace, čo vedie k vzniku peroxidových radikálov a ako výsledok, beta bunky podstúpi zničenie nekrózou [23]. Mechanizmus je základom zvýšenej náchylnosti žalúdočnej sliznice u diabetických zvierat s poškodením je multifaktoriálne a zahŕňa útlm angiogenézy, ako aj zvýšenú produkciu prozápalových cytokínov, TNF-a a IL-1, ktoré vedú k trvalej zápalovej reakcie a oneskorenie proces hojenia na vred oblasť [9]. Hlavným mechanizmom, ktorým cytokíny uplatňujú svoje škodlivé vplyvy na hojenie vredov môže zahŕňať inhibíciu rastových faktorov zodpovedných za slizničnej regeneráciu a zotavenie z poškodenia [24]. Bolo tiež zistené, že TNF-α zvyšuje produkciu IL-1 a ďalších cytokínov, čo vedie k akumulácii neutrofilov [25] a zvýšenej produkcie ROS v žalúdočnej sliznici vystavenej ischémie-reperfúziou. Pentoxifylín, inhibítor TNF-a bola označená na urýchlenie hojenia žalúdočných vredov vyvolaných kyselinou octovou u potkanov prípadne pomocou inhibície produkcie TNF-a [13]. Bolo oznámené, že zvýšenie bunkovej proliferácie pri hojení vredov môže byť sprostredkované zvýšenému uvoľňovaniu EGF a TGF-a. Bolo tiež zistené, že napriek zvýšeniu hladiny TGF-alfa v cukrovky u potkanov s co-nastávať žalúdočné vredy hojenie došlo k oneskoreniu kvôli neznámym mechanizmom /s. Bolo navrhnuté, že hyperglykémia u diabetických zvierat, by mohlo vyvolať určité štrukturálne úpravy TGF-a alebo jeho receptory v oblasti vredu, čo vedie k dysfunkcii tohto rastového faktora v priebehu diabetes mellitus [9, 26].
Kyseliny octovej (AA ) indukovaná vred u potkanov boli hlásené mať blízku podobnosť s klinickými vredy v umiestnení, chronicity a vážnosti a slúži ako najspoľahlivejšie model pre štúdium vred proces hojenia [20]. V tejto štúdii sme zistili zvýšené hladiny prozápalových cytokínov TNF-a a IL-1 v žalúdočnej sliznici normálnych krýs zmieša s kyselinou octovou. Diabetickej krysy vykazovali ďalšie zvýšenie svojej úrovni v porovnaní s normálnych krýs, keď sa podrobí žalúdočné vredy indukované kyselinou octovou. Vyššie uvedený pozorovanie je v potvrdení s predchádzajúcimi hlásených prácach [13, 27, 28]. MSE bolo hlásené zvrátiť zvýšenie TNF-a a IL-1 v GU indukovanú AA v normálnych krýs a podporovať hojenie vredu tým, jeho rôzne účinky na sliznice žalúdka obranných faktorov, vrátane zvýšenia proliferácie a antioxidanty buniek a zníženie voľných hladín radikály [7, 15]. Liečba inzulínom obrátil zhoršené hojenie vredu u diabetických zvierat, a to najmä vzhľadom k normalizácii hyperglykémia, ale nie do priameho účinku inzulínu na hojenie vredov, pretože inzulín podávaný nediabetických potkanov nepreukázali žiadny účinok pri hojení vredov [ ,,,0],27]. Ukázalo sa, že antidiabetiká sú účinné opravou zvýšenú hladinu glukózy čím sa zníži úroveň týchto cytokínov na to, že proti vredu liek (omeprazol) sa zvyšujúcich hojenie vredu a znižuje ich úroveň [15]. TNF-α bol zaznamenaný pre stimuláciu až reguláciu IL-1 úrovniach, tak tým, že riadi expresiu TNF-α IL-1β výraz by mohol byť riadený. To môže byť mechanizmus, ktorým sa znižuje pentoxifylín obe úrovne cytokíny [29].
Táto práca ukázala zvýšenie hladiny TGF-a u potkanov ošetrených s kyselinou octovou. Avšak, nebol nájdený žiadny ďalší nárast hladiny TGF-alfa u diabetických krýs a toto pozorovanie je v súlade s predchádzajúcimi poznatky ukazujú dôležitosť tohto rastového faktora v procese hojenia vredov. Avšak skutočnosť, že meškanie hojenie žalúdočných vredov na diabetickej stave, aj napriek zvýšenej expresiou TGF-a, ukazuje, že liečivé účinky tohto rastového faktora, môže byť zoslabený nejakým neznámym mechanizmom. To hovorí proti hlavnej role tohto faktora v sledovanom oneskorenie pri liečení žalúdočných vredov za diabetických podmienkach. Jednou z možností je, že hyperglykémia u diabetických zvierat, by mohlo vyvolať určité štrukturálne úpravy TGF-a alebo jeho receptory alebo znížiť dostupnosť esenciálnych zložiek potrebných pre normálne hojenie vredu v oblasti, čo vedie k dysfunkcii tohto rastového faktora pri diabetes mellitus. Ďalšie štúdie sú potrebné pre odpoveď na otázku, prečo sa zvýšenou expresiou TGF-a neprispieva k uvoľneniu funkčne aktívneho rastového faktora [9]. Bolo tiež oznámené, že zvýšená hladina TGF-α môže zvýšiť proliferáciu buniek [30]. MSE vykazovali tendenciu k zvýšeniu hladiny TGF-a u diabetických krýs. To môže byť lepšie korelácii s bunkovou proliferáciou, ako MSE bolo hlásené zvýšenie proliferácie buniek [4].
Hypoglykemický aktivitu vďaka stimulácii produkcie inzulínu a využitie glukózy bolo hlásené zo zeleného plodu skorocelu banán a vlákien z ovocia boli nájdené k zvýšeniu tvorby glukózy v pečeni a zníženie glykémie. Musa sapientum
bolo hlásené, že obsahuje beta-sitosterol, leucocyanidin, sryngin, quercetin, sterylglycosides, aminokyseliny atď beta-sitosterol a dimetoxy derivát leucocyanidin, leucocyanidin 3-O-beta-D-galaktosyltransferasu cellobiosidu, preukázali, hypoglykemický účinok v pokusného zvieraťa [16]. Flavonoidy sú najčastejšie známe pre ich protivredové aktivity, zníženie lipidov aktivitu, protizápalovú aktivitu, antioxidačnú aktivitu, antimikrobiálne aktivitu [31] a antidiabetického [32] činnosti. HPTLC odtlačkov prstov MSE preukázali osem aktívne zložky, kde jedna zložka môže byť leucocyanidin, ako je uvedené skôr Prabha a spolupracovníkmi [17], ktorí majú v porovnaní s zložku s overeným štandardné leucocyanidin. Alkaloidy boli hlásené ukázať anti-diabetický a protizápalový, antioxidačnú aktivitu [33], zatiaľ čo saponíny ukázal anti-diabetickej účinky [34].
Záver
prítomnosť mnohých aktívnych zložiek, ako sú flavonoidy, saponíny, glykozidy a Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Cisaprid znižuje obsah žalúdka ašpirácie vo ventilovaných patients
• Metodické otázky pri analýze úlohu fyzickej aktivity v oblasti prevencie rakoviny žalúdka: kritický review