Mekanism (er) av åtgärd ligger till grund för magskyddande effekten av etylacetat fraktionen erhållen från den råa metanolhaltiga lämnar extrakt av muntingia calabura calabura
Abstract
Bakgrund
muntingia calabura calabura
L. (familjen muntingiaceae), allmänt känd som jamaicansk körsbär eller kerukup siam
i Malaysia, används traditionellt för att behandla olika åkommor. Syftet med denna studie är att belysa eventuella underliggande gastro mekanismer etylacetat fraktion (EAF) i muntingia calabura calabura
metanol lämnar extrakt (MEMC).
Metoder
MEMC och fraktioner utsattes för HPLC-analys att identifiera och kvantifiera närvaron av dess fyto-beståndsdelar. Mekanismen för gastroptotection av EAF undersöktes vidare med användning av pylorus-ligering-inducerad gastrisk lesion råttmodellen (100, 250, och 500 mg /kg). Makroskopisk analys av magen, var utvärdering av maginnehållet parametrar såsom volym, pH, fri och total surhet, proteinuppskattning, och kvantifiering av slem genomförs. Deltagande av kväveoxid (NO) och sulfhydryl (SH) föreningar utvärderades och superoxiddismutas (SOD), glutation (GSH), katalas (CAT), malondialdehyd (MDA), prostaglandin E
2 (PGE 2) och NO nivån i etanolen inducerade magvävnad homogenatet bestämdes.
Resultat
HPLC-analys bekräftade närvaron av quercetin och gallussyra i EAF. I pylorus-ligering modell, EAF signifikant (p
< 0,001) förhindra gastrisk lesion formation. Volym av gastriskt innehåll och totala proteininnehållet minskat signifikant (p
< 0,01 och p
< 0,05, respektive), medan fri och total surhet minskas under de doser av 250 och 500 mg /kg (p
< 0,001 och p Hotel < 0,05, respektive). EAF augmented också slem innehållet signifikant (p
< 0,001). Förbehandling med N-nitro-L-arginin-metylester (L-NAME) eller N-etylmaleimid (NEM) vänt den magskyddande aktiviteten av EAF. EAF behandling markant lindras SOD, GSH och CAT-aktiviteten och PGE 2 och NO nivå medan slutsatser dämpning MDA nivå i förhållande till vehikelgruppen.
Sammanfattningsvis underliggande gastro mekanismerna för EAF kan associeras med antisekretoriska, deltagandet av slem, antiperoxidative, förbättring av antioxidantstatus, modulering av NO och SH föreningar, stimulering av PGE 2 samt närvaro av quercetin och gallussyra.
Nyckelord
muntingia calabura calabura
Fraktion magsår Antisekretorisk Antioxidant Kväveoxid sulfhydrylförening prostaglandin quercetin Gallussyra bakgrund
magsår är en av de stora gastrointestinala störningar som påverkar stort antal människor runt om i världen, samtidigt ökar i förekomst och utbredning globalt [1]. Vissa författare hänvisar till magsår som den nya "pesten" av 21-talet [2]. Det har beräknats att 14.500.000 av befolkningen i världen påverkas av magsår med en dödlighet på 4.080.000 [3]. Patofysiologin för magsår är associerad med den obalans mellan aggressiva och skyddsfaktorer i magen. Gastrointestinala skador uppstår när skadliga faktorer "överväldiga" en intakt slemhinna försvar, eller försvagning av slemhinnor försvarsmekanismer [4]. De skadliga faktorer i detta sammanhang inkluderar alkoholintag, syra och pepsin sekretion, dålig diet, stress, reaktiva syreradikaler (ROS), användning av icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel (NSAID) och Helicobacter pylori
infektion [5, 6]. Å andra sidan, de viktigaste försvarsfaktorer och mekanismer som har råd med mukosal försvar innehålla tillräckligt med slemsekretion och mukosal blodflöde, bikarbonat sekretion, intakt slembarriär, prostaglandiner, ytaktiva fosfolipider, ökade nivåer av antioxidanter, aktiviteten av antiinflammatoriska föreningar och tillräcklig nivåerna av kväveoxid (NO) [6-8].
närvarande har förebyggande och behandling av magsår fått massor av intresse och blev och viktig utmaning konfrontera medicin nuförtiden. Hittills finns det några metoder som används för att förhindra gastrisk ulceration, som inkluderar potentiering av den mukosala försvaret tillsammans med reduktion av syrasekretionen och dess neutralisering, stimulering av gastriskt mucin syntes, förstärkning av antioxidant nivåer i magen, och hämning av Helicobacter pylori
tillväxt [9]. Utsöndringen av magsyra tros vara den centrala delen av magsår trots närvaron av många orsaksfaktorer [7], och därför hämning av magsyrasekre tenderar att vara nyckeln terapeutiskt mål för magsårssjukdomar [10]. Å andra sidan, är en annan viktig faktor i patogenesen av magsår produktionen av reaktiva syreradikaler (ROS). Produktionen av ROS och en samtidig minskning av antioxidant kapacitet skadar viktiga cellbeståndsdelar, som är proteiner, lipider och nukleinsyror, vilket resulterar i bildandet av giftiga föreningar och orsakar celldöd grund av sin extrema reaktivitet [8, 11]. Därför styr ROS bildning och magsyrasekretion är viktig för behandling av dessa sjukdomar [12].
Nuvarande medicinsk behandling av magsår innefattar syra blockerare som minskar syrasekre, protonpumpshämmare, antibiotika för att utrota Helicobacter pylori
och vävnads foder skyddsmedel såsom sukralfat och vismut cholinergics [13, 14]. Eventhough dessa läkemedel har minskat de sjukligheten, men de är ofta förknippade med oönskade biverkningar, såsom hyperkänslighet, impotens, arytmi, hematopoetiska rubbningar, gynekomasti och antibiotikaresistens i längden [15, 16]. Dessutom är dessa tillgängliga läkemedel har också hög återfallsfrekvens, låg effekt i magsäcken sår behandling och är ofta kostsamma [5, 9, 10]. Det finns därför ett stort behov av att upptäcka ett mer effektiva och säkra alternativa terapier för behandling av magsår. I detta sammanhang har användningen av medicinalväxter vunnit intresse och fångat uppmärksamheten hos många forskare. Växtextrakt kan vara värdefull och fungera som en ny källa av läkemedel för behandling av magsår, varvid antisekretorisk, cellskyddande och antioxiderande aktiviteter, isolerade eller i kombination, är de tre huvudsakliga funktionerna i ett magskyddande medel, som spelar en nyckelroll i gastrointestinala skydd [17].
anläggningen muntingia calabura calabura
L. (familj muntingiaceae), allmänt känd som jamaicansk körsbär eller kerukup Siam
i Malaysia, distribueras i stor utsträckning de varma områdena Asien [18]. Flera medicinskt bruk har dokumenterats på olika delar av detta träd i östra och sydöstra Asien samt tropiska Amerika. Muntingia calabura calabura s
blad, blommor, bark och rötter har använts som en huskur för behandling av huvudvärk, feber och begynnande förkylning. Enligt peruansk folklore, är bladen som används för att ge befrielse från magsår och minska svullnad av prostatakörteln [19]. Dessutom är de också användas som antiseptiskt medel, kramplösande, och antidyspeptic agent [20, 21].
Å andra sidan, är muntingia calabura calabura
rapporterats besitta ett brett spektrum av farmakologiska aktiviteter, som har bevisats vetenskapligt. Detta inkluderar antitumör [20, 22], antibakteriell [23], antinociception [19, 24, 25], antiinflammatoriska, febernedsättande [25], antioxidanter och antiproliferativa [26] aktiviteter som uppvisas av bladen av muntingia calabura calabura
, medan flera typer av föreningar har isolerats och identifierats från blad, rötter och stam bark av muntingia calabura calabura
[20-22, 27, 28]. Olika fytokemikalier har upptäckts i bladen av muntingia calabura calabura
såsom flavonoider, saponiner, tanniner och triterpener [29].
I vår tidigare studie har vi rapporterat magskyddande aktiviteten hos flera fraktioner som erhållits från råmetanolextrakt av muntingia calabura calabura
(MEMC) lämnar mot etanol-inducerad gastrisk skada hos råttor [30]. Från vår studie har vi funnit att etylacetatfraktionen markant förbättra magsår och utövade det mest effektiva skyddet jämfört med de andra fraktionerna. Därför var den föreliggande studie syftade till att bestämma verkningsmekanismen som ligger bakom profylaktisk effekt av etylacetatet fraktionen härledd från MEMC mot gastriska skador hos råttor.
Pylorus-ligering modell som används i denna studie är ett av de mest använda modellerna för att studera effekten av läkemedel på magsyra och slemutsöndring. Sår som utvecklats av ligering pyloric änden av magen orsakas av ökning av gastrisk saltsyra (HCI) sekretion och /eller stas av syra, vilket leder till automatisk nedbrytning av magslemhinnan och nedbrytning av gastrointestinala barriären [31]. Därför medel som är i stånd att öka slemutsöndring (cytoprotektiv) och /eller minska utsöndring av gastriska aggressiva faktorer, såsom pepsin och syra är effektiva gastroprotektiva medel [32]. Å andra sidan, är den etanol-inducerad ulcus modell användbar för att studera effekten av potentiella läkemedel eller testa medel som har cytoprotektiva och /eller antioxiderande aktiviteter [33].
Metoder
Kemikalier
Kemikalierna som används i denna studie är av analytiska kvaliteter och hade beretts omedelbart före användning. Följande läkemedel användes: Ranitidin (Sigma-Aldrich, USA), absolut etanol (Fischer Scientific, USA), N-etylmaleimid (NEM) (Sigma-Aldrich, USA), N G-nitro-L-arginin metylestrar (L-NAME) (Sigma-Aldrich, USA), karbenoxolon (CBX) (Sigma-Aldrich, USA) och dietyleter (Fischer Scientific, USA).
Växtmaterial
muntingia calabura calabura
blad uppsamlades från deras naturliga livsmiljö i Shah Alam, Selangor, Malaysia, mellan maj och augusti 2010. anläggningen identifierades av en botanist från Institute of Bioscience (IBS), Universiti Putra Malaysia (UPM), Serdang, Selangor. En kupong prov, SK 2466/14, har deponerats vid UPM IBS Laboratory of Natural Products Herbarium.
Utvinning och fraktionering av muntingia calabura calabura
lämnar
metod som beskrivs av Zakaria et al. [26] och Sufian et al. [28] användes för att framställa råextraktet av muntingia calabura calabura
blad och dess fraktioner, respektive. Fem hundra gram mognat bladen lufttorkades vid rumstemperatur (27 ±
2 ° C) under 1-2 veckor och mals till fint pulver. Metanol (MeOH) användes som lösningsmedel för extraktion. Pulvret indränktes i MeOH i ett förhållande av 1:20 (vikt /volym) under 72 timmar. Blandningen filtrerades med användning av filtertratt, bomull och Whatman nr 1 filterpapper. Blötläggning och filtrering upprepades på återstoden för två gånger. Filtratet samlas in från varje extraktion poolades och indunstades i en rotationsindunstare vid 40 ° C under reducerat tryck för att erhålla metanolextrakt av muntingia calabura calabura
(MEMC). Det torkade råa extraktet suspenderades i MeOH och destillerat vatten (dH 2O) vatten i förhållandet 1: 2 för att ge en vattenhaltig MeOH-lösning. Blandningen sekventiellt lades med olika lösningsmedel, som var petroleumeter och etylacetat, vilket gav petroleumeter fraktion (PEF), etylacetat fraktion (EAF). Fraktionerna filtrerades och indunstades till torrhet under vakuum med användning av rotationsindunstare. MEMC, PEF och EAF utsattes för HPLC för att kvantifiera föreningen av intresse, vilket skulle kunna vara associerade med extraktet s magskyddande effekt.
Identifiering och kvantifiering av phytoconstituents närvarande i EAF med HPLC
metod som beskrivits av Zakaria et al. [34] med smärre ändringar anpassades för att utföra HPLC-analys av EAF. I korthet sattes 10 mg prov suspenderades i 1 ml metanol. Lösningarna filtrerades genom en filterpatron (porstorlek 0,45 ^ m) före användning. Provet analyserades med användning av ett HPLC-system (Waters Delta 600 med 600 Controller) med fotodiod-array-detektor (PDA) (Waters 996). A C 18-kolonn (4,6 mm innerdiameter x 250 mm) packad med partiklar med en diameter 5 pm användes. Den mobila fasen var vatten innehållande 0,1% myrsyra (A) och acetonitril (B). Begynnelsevillkor var 85% A och 15% B med en linjär gradient når 25% B vid t
= 12 min. Dessa betingelser upprätthölls i 10 min. B reducerades tillbaka till 15%, det ursprungliga villkoret, och bibehölls tills t
= 35 min. Vid t
= 25 min, återvände programmet till det initiala lösningsmedelskomposition. Flödeshastigheten var 1,0 ml /min, injektionsvolymen var 10