Združenje zmanjšano izražanje RASSF1A z promotorja metilacije v primarnim rakom želodca pri bolnikih s centralno China

Združenja zmanjšano izražanje RASSF1A z promotorja metilacije v primarnim rakom želodca pri bolnikih z Abstract
centralne Kitajske
Ozadje
Čeprav methylation- posredovano inaktivacijo izražanja RASSF1A, supresorski gen kandidat tumorja, so opazili v številnih oblikah raka, so podatki v zvezi s spremembo RASSF1A izražanja in metilacije v kitajski primarnim rakom želodca so redki. Poleg neposrednih dokazov kaže na povezavo med beljakovin izražanja RASSF1A in primarnih človeških raka ni. Cilj te raziskave je bil raziskati RASSF1A izraz v tkivu primarnega raka želodca (PK) na mRNA in beljakovin ravni ter vzpostaviti možno razmerje med stanjem DNA metilacije in beljakovin izražanja RASSF1A v kitajščini.
Metode
štiriinpetdeset bolniki s primarnim želodčnega raka bili vključeni v študijo RASSF1A mRNA izražanja in metilacije statusa med rakavo tkivo in ustrezno sosednjih zdravih tkivih. 20 od 54 bolnikov je bilo vključenih v raziskavo izražanja RASSF1A beljakovin. Izraz RASSF1A na mRNA in ravni beljakovin je bila določena z RT-PCR in zahodni odtisi, oz. RASSF1A promotor metilacija bila odkrita metilacije specifične PCR
Rezultati
RASSF1A mRNA in beljakovin izrazi v GC so se bistveno zmanjša s primerjavo z ustreznimi normalnih tkivih (OD vrednost. 0,2589 ± 0,2407 proti 0,5448 ± 0,2971, p
< 0,0001, 0,1874 ± 0,0737 proti 0,6654 ± 0,2201, P
< 0,0001, v tem zaporedju). Metilacija pogostost RASSF1A v primarnem GC je višja od tiste, ki v ustreznih normalnih tkivih (66,7% proti 14,8%, P
< 0,0001). Poleg tega je bila RASSF1A mRNA izraz v metilacije skupino GC dodatno zmanjšal v primerjavi s unmethylation skupino GC (0,1384 ± 0,1142 proti 0,5018 ± 0,2463, P
< 0,0001)
Zaključek
Izražanje RASSF1A. se je zmanjšal v tkivu GC na ravni mRNA in beljakovin. Zmanjšana ekspresija RASSF1A je bila povezana s promotorjem metilacije.
Ozadje
rak želodca (GC) je eden od najpogostejših malignih obolenj pri boleznih prebavil. Čeprav je pojavnost GC upada v razvitih okrožjih, je še vedno najpogostejši vzrok smrti zaradi raka v večini držav v razvoju. Oba sta bila obravnavana genetskih in okoljskih dejavnikov, vključno s H. pylori
okužbe prispevati k razvoju GC. Nedavno so številne študije pokazale, da je molk zaviralnih genov, ki jih epigensko modifikacijo temeljni mehanizem za inaktivacijo povezane z rakom genov v patogenezo raka človeškega [1]. Od Posebej je treba omeniti, je dejstvo, da ima predlagatelj hypermethylation bistveno vlogo pri izgubi funkcije tumorskih zaviralnih genov.
Izgube alelov na kromosomu 3p21.3 je ena izmed najpogostejših genetskih sprememb v različnih vrstah človeških raka [2 ]. V poznih 90-ih, Dammann [3] in Burbee [4] et al prepoznavanje RASSF1A, nov gen iz skupnega homozigotno izbris prostora na 3p21.3. Ta gen delnice homologijo z RAS efektorjev sesalcev. Obstaja sedem RASSF1 izooblike (A do G), ustvarjeni z alternativnim prepletene RASSF1A je bilo dokazano, da zmanjša tumorigenosti vivo in je pogosto inaktivirani v različnih primarnih človeških rakavih obolenj. Genetske mutacije v tem izo-oblike so redki. Znano je, da epigensko utišanje RASSF1A sodelavcev z CpG otokov metiliranjem promotorski regiji. Bisulfatna zaporedja DNK je pokazala, da hypermethylation promotorja regiji onesposobi RASSF1A izraz v velikih človeških rakavih obolenj. To je podprta z opazovanjem ponovnega izražanja RASSF1A v različnih linij rakavih celic, zdravljenih z demetiliranjem agenti [4-7]. Do danes so številne študije pokazale prisotnost odklonskega promotorja metilacije RASSF1A in izgube ali nenormalno nizko izražanje RASSF1A v primarnem GC, kar kaže, da je inaktivacija RASSF1A izraza tesno povezana s promotor metilacije [5, 8-10]. Po najboljšem znanju, ni podatkov o izražanje stanja RASSF1A in metilacije v GC v kitajskega prebivalstva so na voljo. V tej raziskavi smo ugotovili, izražanje RASSF1A tako na mRNA in beljakovin ravni, in njihova povezava z RASSF1A spodbujanje metilacijskega statusa v kitajski primarni GC v osrednji Kitajski.
Metode
pacientov
štiriinpetdeset bolnikov z so primarno GC je registrirano v Univerzitetni Zhongnan bolnišnice Wuhan in Cancer Hospital Hubei Provincial od decembra 2003 do junija 2005, in vsi bolniki opravili kurativno resekcijo s sistematičnim bezgavkah seciranje. GC tkiva in ustrezne sosednje normalne želodca tkiva so bili pridobljeni iz poslovanja pred kemoterapijo. Bolniki 35 samcev in 19 samic, povprečna starost 57,6 ± 13,7 let (razpon od 30 do 85 let). Diagnoza in razločevanja GC so bile določene z histopatoloških preiskav in klasifikaciji TNM. Demografski in clinicopathological podatki o bolnikih, ki so povzeti v Tabeli 1. Med 54 bolniki z GC, je bilo vključenih 20 primerov za preučevanje beljakovin izražanja RASSF1A. Protokol raziskave je odobrila etični odbor Wuhan University Zhongnan bolnišnici. Tumor in sosednjih normalne tkiva so bili pridobljeni v času kirurgije, zaskočno zamrznemo v tekočem N 2 in shranimo pri -80 ° C do uporabe. Vzorčne odseke smo barvali v H & E in je pregledala dva izkušena pathologists.Table 1 Združenje RASSF1A genov metilacije z demografijo in clinicopathological značilnosti primarnega raka želodca (n = 54)

metilacije

vrednosti P
OR (95% CI)

Da
Ne


Spol
moški
24
11
0,766
1,273 (0,393 ~ 4,117)
ženski
12
7
Starost
< 60
17
13
0,145
0,344 (0,101 ~ 1,167)
≥ 60
19
5
tumor mesta
antruma
14
7
telesa in srca
22
11
1.000
1,000 (0,313 ~ 3.192)
Prizorišča
zgodaj
1
2
0,255
0,229 (0,019 ~ 2,708)
napredno
35
16
limfnega vozla metastaze
da
22
7
0,154
2,469 (0,774 ~ 7.882 )
ne
14
11
Distant metastaze
da
5
1
0,651
2,742 (0,296 ~ 25,424)
ne
31
17
Razlikujemo
dobro in zmerno
18
12
0,384
0,500 (0,154 ~ 1,624)
slabo
18
6
Lauren
Črevesne tip
12
10
0,148
0,400 (0,125 ~ 1,275)
tip difuzna
24
8
DNA in RNA izvleček
DNK iz zamrznjenega tkiva smo očistili s fenolom /kloroformom in obarjanjem z etanolom in raztopimo v 50 ul destilirane vode in shranili pri -20 ° C do uporabe. Total RNA smo izolirali s pomočjo TRIzola kompleti (Molecular Research Center Inc., Cincinnati, ZDA) po navodilih proizvajalca.
Semi-kvantitativno RT-PCR
Tri mikrogramov celotne RNA bilo obratno prepisani z uporabo RevertAid ™ prvega sklopa sinteza cDNA kit (Fermentas Inc., Vilnius, Litva). Vse skupaj RNA smo obdelali z DNaze za preprečevanje kontaminacije genomske DNA. Primerji za RASSF1A in glyceraldehydes-3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) so bili oblikovani na podlagi RASSF1A genov (genske banke pristopu #: NM_007182) in GAPDH gena (genske banke pristopu #: NM_002046). Primerji za RASSF1A so 5'-CTT TTA SCT GCC CAA GGA TGC-3 'in 5' CAC CTC CCC AGA GTC ATT TTC C-3 ". Primerji za GAPDH (5'-CAT GAC AAC TTT GGT ATC GTG-3 'in 5' GTG TCG CTG TTG AAG TCG TCA GA-3 ') so bili uporabljeni kot notranji nadzor. Toplotne cikli so bili: 94 ° C za 5min, čemur sledi 35 ciklov 94 ° C za 30sec, 55 ° C za 45sec in 72 ° C za 60sec, in na koncu 72 ° C za 5min za podaljšanje. PCR produkt so bile ločene v 2% agaroznem gelu v elektroforezo in vizualizirali z etidijevim bromidom barvanja in količinsko, z uporabo sistema za analizo slike (UVP Bioimaing sistemi, ZDA). Ustvarjeni PCR produkti so bili 265bp za RASSF1A in 370 bp za GAPDH. gostote (OD) vrednost optičnega izraza mRNA smo izračunali.
bisulfat sprememba
DNK iz tumorskih tkiv in ustrezni sosednji normalne tkiva izpostavimo hidrogensulfata obdelavi po Herman et al [11]. Na kratko, 2 ug genomske DNK suspendiramo v 50 ul destilirane vode, denaturiranih z 0,2 M NaOH za 10 minut pri 37 ° C in dodamo 30 ml sveže pripravljenega 3 M natrijevega bisulfat (pH 5,0). Vzorci so bili več plasteh z mineralnim oljem za pokrivanje površine vodne faze, in inkubiramo pri 50 ° C 16 ~ 20 ur. Vzorec DNK smo razsolimo skozi kolono sistema Wizard DNA Clean-up (Promega, Wisconsin, ZDA) po navodilih proizvajalca. Vzorce smo obdelali z 0,3 M NaOH 5 minut pri sobni temperaturi in oborimo z etanolom. Genomsko DNA bisulfat modificiran smo ponovno suspendirali v 50 ul TE pufra (10 mM Tris · r, 1 mM EDTA, pH7.6) in shranimo pri -80 ° C za uporabo.
Metiliranje specifični PCR (PPN)
status metilacija RASSF1A bila določena s PPN. Bisulfatna zdravljenje genomske DNK pretvori citozin v uracil baz, vendar nima vpliva na metilcitozin. Poseben PCR smo nato uporabili za razlikovanje med metilni in nemetiliran zaporedij DNA v Hotstar TaqE PCR stroj (Takara Bio, Co., Ltd., Tokyo, Japonska). Primerji za metiliranega obliki so 5'-GGG TTT TGC GAG AGC GCG-3 'in 5'-GAT AAC AAA CGC GAA CCG-3 ", in primerji za nemetiliran obliki so 5'-GGG GTT TTG TGA GAG TGTG -3 "in 5'-ACT AAC AAA CAC AAA CCA AAC-3 '(Gene Bank pristop: AC002481). Pogoj PCR sestavljena iz ene inkubacija 15 minut pri 95 ° C, čemur sledi 40 ciklov 30 sec denaturacija pri 94 ° C, 50 sek pri žarilni temperaturi (64 ° C za metiliran in 59 ° C nemetiliran specifičnih primerjev) in razširitev 30 sekund pri 72 ° C, in končno podaljšanje pri 72 ° C za 10 minut. PCR produkti so bili ločeni v 8% poliakrilamidnih gelih v elektroforezo. Genomsko DNA, metiliramo in vitro, ki ga CpG metiltransferazo (Sss I) po navodilih proizvajalca (New England Biolabs, Inc., Beverly, MA) je bila uporabljena kot pozitivna kontrola. Voda prazno smo uporabili kot negativno kontrolo. Vsak primer niz nastane produkt 169 bp.
Western blotting
petdeset mg vzorci so bili homogeniziramo in centrifugiramo pri 12,000-15,000 g 10-15 min v ledeno mrzle 50 mM HEPES pufra (pH 7,4), ki vsebuje 150 mM NaCl , 50 mM Tris · Cl (pH 8,0), 1% Triton X-100, 2 mM EDTA, 2 mM PMSF, 5 ug /ml leupeptina, 1% NP-40, in 10% glicerola. Supernate zberemo in koncentracijo proteina je bila nato izmerjena z uporabo BSA kot standarda, ki ga je BCA Protein preizkusni reagent (Pierce Biotechnology., Inc., Rockford, ZDA). Enaka količina (100 mikrogramov) skupnih beljakovin iz tkiva so elektroforezo na SDS-poliakrilamid geli (10% gel) in prenese polyvinylidine difluorid (PVDF) filtra membrane za 30 min bysemi suho blot. Membrane so blokirani 2 h pri sobni temperaturi z raztopino blok zagotovljene v ECL komplet (Protein detektor LumiGLO Reserve ™ Western blot Kit, KPL, Maryland, ZDA), in nato inkubirali 45 minut z 1: 100 razredčino primarna protitelesa proti RASSF1A. Primarna protitelesa uporabijo za Western blot analizo bila afiniteta očistili koza poliklonsko protitelo za RASSF1A, C-12 (SC-18724, Santa Cruz Biotechnology Inc. Santa Cruz, CA., ZDA). Na PVDF membrane smo nato spirali 30 minut z raztopino za spiranje, čemur sledi 1 h inkubaciji z anti-kozjega protitelesom konjugirano na hrenovo peroksidazo v raztopini blok (Rabbit anti-kozjega IgG, Chemicon International, Inc., Temecula, Kalifornija, ZDA izvedeni ). ThePVDF membrane so spet oprane in imunološko trakovi so odkrili z okrepljenim kemiluminescence in vizualizira s sistemom za analizo slike (Bio-Rad Laboratories, Inc. Hercules, CA, ZDA). GAPDH (Abcam Biotechnology, Cambridge, Velika Britanija), smo uporabili kot kontrolo.
Statistična analiza
so Statistične analize opravi z uporabo SPSS11.5 programske opreme (SPSS, Inc., Chicago, IL). Razlike med spremenljivkami so bile ocenjene s testom hi-kvadrat ali t-testov v skladu s podatki. Statistična pomembnost razlik je bil določen kot P
< 0,05.
Rezultati
RASSF1A mRNA izraz na raka želodca
RASSF1A mRNA izraz v 54 GC tkivih je 50%, da je v sosednjih ustreznih normalnih tkiv, ki so razkrili mRNA izražanja v tumorjih je bistveno zmanjšana, v primerjavi z normalnih tkiv, kot je prikazano na sliki. 1. Slika 1 Izražanje RAASF1A mRNA v osnovnem raka želodca (T) in ustreza normalno tkivo (N). RT-PCR produkti za RASSF1A so ovrednoteni s densitometrične skeniranje v Etidijev bromidom obarvanih gelov v primerjavi z GAPDH.
RASSF1A protein izražanje pri raku želodca
Dosledno znižanja mRNA izražanja, slika 2 prikazuje, da je protein izraz v tumorji je le 21,4% tiste v normalnih tkivih, ki kažejo, da je stopnja protein RASSF1A izražanja zmanjša tudi primerjavo z ustreznimi normalnih tkivih. Slika 2 Protein izraz RASSF1A v primarnem raka želodca (T) in ustreza normalno tkivo (N). Raven beljakovin RASSF1A je količinsko jih Western-blot primerjavi z GAPDH.
RASSF1A mRNA in DNA metilacija v promotor RASSF1A gena v primarnem želodčnega raka
Kot je prikazano na sliki. 3, je metilacija pogostnost RASSF1A v GC 3,5-krat višja od tiste, ki v ustreznih normalnih tkivih (66,7% v primerjavi z 14,8%, P < 0,0001). RASSF1A mRNA izraz med metilacije in unmethylation skupin v GC so bili bistveno drugačni, nekdanji je 2,6-krat nižja od slednjega (0,1384 ± 0.1142 vs 0.5018 ± 0,2463, P
< 0,0001). Rezultati so pokazali, da je hypermethylation na otoku CpG v promotorja RASSF1A močno povezana z znatno zmanjšanim mRNA ekspresije RASSF1A. Slika 3 Metiliranie RASSFIA v primarnim rakom želodca in ustrezno normalnega tkiva s PPN. Proga 3, 4 in pasu 6, 7 kažejo reprezentativen rezultat iz tumorja in normalnega vzorca oz. U: pomnožili izdelek s primer, ki prepozna nemetilirane zaporedja; M: pomnožili izdelek s primer, ki prepozna metiliranih sekvence. Genomsko DNA, metiliramo in vitro, ki ga CpG methylase (Sss I) uporabimo kot pozitivno kontrolo. Voda prazno smo uporabili kot negativno kontrolo. PCR produkt, so bile odpravljene na 8% poliakrilamidnih gelih
pridružitvi med metilacije in clinicopathological parametrov raka želodca
povezovanja med promotorja metilacije in ustreznih demografskih in clinicopathological lastnosti vključno s spolom, starostjo, tumorja mestu, bezgavk metastaze, daleč metastaze, diferenciacija, stopnja in vrsta Lauren so prikazani v tabeli 1. ni bilo signifikantne povezave med promotorja metilacije in clinicopathological parametrov.
Razprava
v tej študiji smo predložili dokaze, da je bil RASSF1A izraz v GC zmanjša na mRNA in vsebnosti beljakovin in metiliranje v promotorski regiji gena RASSF1A je 3,5-krat pogostejše v osnovnem GC kot v ustreznih normalnih tkiv. Poleg tega je incidenca bolnikov GC z RASSF1A promotorjem metilira nad nemetiliran je 2-krat večja. Ti kažejo, da je bila RASSF1A izraz v GC zelo povezana s statusom promotor metilacije gena RASSF1A. Nadalje potrditev razmerje med ekspresijo RASSF1A in metilacije promotorja, smo primerjali RASSF1A mRNA ekspresije med metilacijo in unmethylation tkivih v GC, in ugotovili, da je zmotno metilacija s RASSF1A gena promotorski regiji odgovoren za zmanjšanje ali izgubo RASSF1A mRNA izraz v primarnem GC. Naša raziskava je bila v skladu z eno študijo, ki je pokazala, da je 45,6% primarne GC nič ali neobičajno nizko mRNA izraz RASSF1A [5]. Med 30 izravnanih sklopov iz istih bolnikov je bilo ugotovljeno, da imajo znižano RASSF1A ekspresijo 73,3% GC [5]. Po najboljšem znanju, so poročali nobena študija izražanja RASSF1A beljakovin v GC. Dodatno smo analizirali RASSF1A izražanje na ravni proteinov z Western blot pri 20 bolnikih GC in ugotovila, da je izraz beljakovina v tumorjih le 21,4% izraza v normalnih tkivih. Ta rezultat je pokazala, da je bil RASSF1A protein izraz v GC bistveno nižje kot v ustrezni sosednjih normalnih tkiv. To je v skladu z mRNA izražanja RASSF1A.
Mehanizem za zmanjševanje ali utišati izražanja RASSF1A bi jih promotorja metilacije in /ali mutacijo RASSF1A gena povzročil. Vendar pa so številne študije pokazale, da je mutacija RASSF1A gena zelo redka [4, 5, 7, 12, 13]. Tako je RASSF1A gen verjetno aktivira s mehanizmov methyltion. Byun et al [5], je pokazala, da je 41 primarnega GC z izgubo ali nenormalno zmanjšanje RASSF1A izražanja, 39 je bilo metiliramo, medtem ko so se metilira tako GC in normalne tkiva z normalno RASSF1A izražanja nič. Za et al [10] je pokazala, da je bila hypermethylation od RASSF1A promotorja najdemo v 25,8% za GC in pri 11,1% od želodca intestinalno metaplazijo (IM), oz. Naši podatki kažejo, da je pogostnost RASSF1A metilacije v PK višja od zgoraj opisane podatke. GC je zelo razširjena na Kitajskem in visoko metilacije RASSF1A lahko deloma pojasni razlog, zakaj je GC pojavnost višje v kitajščini. Zanimivo je, da lahko dejstvo, da je RASSF1A promotor hypermethylation v EBV pozitivno GC višja kot v EBV negativne karcinoma (66,7% proti 3,6%), kažejo na tesno povezavo med EBV in odklonskega metilacije v PK. Dejansko je prejšnje poročilo, so pokazale, da virusni onkogenezo vključuje zmotne metilacije, zaradi inaktivacije zaviralnih genov [9].
Ugotovili smo, da so bili metilacija pogostost RASSF1A v osnovni GC in iz ustreznih normalnih tkivih 66,7% in 14,8% oz. Naši podatki so pokazali, da je bilo od 54 bolnikov GC 36 methylated in 18 so bili nemetiliran, kar kaže metiliran GC je pogostejša, v dogovoru z drugimi poročili. Predhodna študija [14] predlagal, da je želodec ena od normalnih tkiv z visoko frekvenco povezanih staranja metilacije in rak želodca je eden izmed tumorjev z visoko frekvenco CpG otoka metilacije. [15] Kang et al raziskovali metilacijskega statusa 11 genov v nonneoplastic želodčne sluznice in so ugotovili, da odklonski CpG otok metilacije pogosto pojavili pri kronični gastritis, ki je pokazala staranja razmerje in da povezanih s staranjem metilacija bil gen tip specifične. RASSF1A gen je bil redko metiliramo, brez staranja razmerja. Poleg tega so drugi avtorji poročajo [3-5], ki v normalnih tkivih, ni bilo zaznati metilni RASSF1A alelov. Vendar, naši podatki so pokazali, da je bila v ustreznih normalnih tkivih RASSF1A metiliranje frenquency visok odstotek (14,8%). Razlika med našimi podatkov in drugih avtorjev ", je lahko posledica razlike vzorcev, ki smo jih preučevali so non-nesoplasia želodčnih tkiva pri bolnikih z rakom želodca in je zelo verjetno, da vključujejo kronične gastritis tkiv, zlasti intestinalno metaplazijo tkivih ustreza sosednjih normalnih tkiv. Prejšnji Študija je pokazala, da je več genov pogosto methylated v kronični gastritis, zlasti v intestinalno metaplazijo tkivih. S sodelavci [10] preučil stanje 8, povezane s tumorjem gen metilacijskega vključno RASSF1A v želodčnem črevesnem metaplazijo pri bolnikih z in brez raka želodca, in so ugotovili, da je pogostost metilacije v RASSF1A raka in intestinalno metaplazijo 25,8% in 11,1% oz. Rezultat je bil v skladu z našimi. Dejansko smo sekvencirali so PPN izdelkov za več vzorcev. Sekvenca je ujemal s sekvenco napovedano (podatki niso prikaz). Ugotovili smo, da nemetiliran trakovi vedno delujejo skupaj z metilnim pasovih v večini primarnih GC in ustrezne sosednje normalnega tkiva, kljub zmanjšanja ali izgube RASSF1A izražanja, ki je skladen s prejšnjimi poročili [4, 10]. To je najverjetneje ti odstranjenimi tumorji niso microdissected in so onesnaženi z stromalnih celicah. Poleg tega MSP je izredno občutljiva. Bai et al [16] mislil, da odkrivanje teh dveh pasov predstavlja bodisi znotraj alelov heterogenost otoku metilacije CpG ali metilacije otoka variira od alel za alel. Druga možnost bi bila naša rezultat kaže, da je delna metilacija promotorja RASSF1A gena dovolj za utišanje prepisovanje genov, saj je izguba ene same genske kopije dovolj za spodbujanje nastanek tumorjev [17, 18]. Tommasi et al [19] ugotovila, da so bili heteroze RASSF1A knockout miši precej tumor-nagnjeni, tako za spontano nastanka tumorjev in za kemijsko induciranih tumorjev. To lahko pomeni, da ima gen RASSF1A značilnosti podelitev haploinsufficiency, ko je samo en alel izgubljeno.
Tudi raziskati povezavo med promotorja hypermethylation in ustreznimi clinicopathologic parametrov, vključno starost in spol bolnikov, mestu karcinoma, histoloških razlik, Lauren je vrsta in metastaze GC. Ugotovili smo, da je pogostost metitiranjem RASSF1A gena je bila občutno višja v razvitih tumorjev v primerjavi z zgodnji fazi tumorjev (68,6% v primerjavi s 33,3%), in večja pri slabo diferenciranih tumorjih (75% proti 60%) v primerjavi z dobro in zmerno diferencirane tumorje . Vendar pa te razlike ne doseže statistične pomembnosti. Byun et al [5], so pokazale, da je bila inaktivacija RASSF1A korelaciji s stopnjo tumorja in razred, vendar ne s histoloških vrst tumorjev. Neskladje lahko razloži z omejenimi vzorcev za zgodnjo GC v naši raziskavi.
Transfekcija RASSF1A gen zmanjša rast rakave celice človeškega in vitro in in vivo [3, 4] podpirajo vlogo RASSF1A kot gena tumor supresorski. RASSF1A aktiviranje RAS lahko zahteva heterodimerizacijo za RASSF1A in novo Ras efektor (NORE1), in inducira apoptozo preko sodelovanja z Ras, NORE1, priključne ojačevalec KSR (CNK) in pro-apoptotično MST1 kinaze [20]. Več skupin so poročali, da je RASSF1A mikrotubulsko veže na beljakovine in ureja mitotićno napredovanje [21-25], in lahko deluje na prenos signalov poti, ki vključujejo RAS kot majhni GTPase beljakovin. Tommasi et al [19] je pokazala, da Rassf1a
- /- in Rassf1a +/-
miši so se povečalo število tumorjev in velikosti tumorja, nadalje kaže vlogo zatiranja tumorja RASSF1A, ki lahko pojasni svojo pogosto epigenetsko inaktivacijo človeških tumorjev.
Zaključek
Če povzamemo, je izraz RASSF1A znatno zmanjša nenormalno raven ali popolnoma izgubila v osnovnem GC primerjavi s sosednjim normalnim tkivom in je povezana z hypermethylation promotorja gena RASSF1A. Nadaljnje delo je potrebno pojasniti svojo natančno delovanje in sodelovanje z drugimi dejavniki za razvoj strategij za zgodnje diagnosticiranje, preprečevanje in zdravljenje raka želodca
deklaracij
Zahvala
To delo je bilo podprto z nepovratnimi sredstvi (št. 2004AA301C91 ) iz Hubei znanost in tehnologijo fundaciji Mei Ye in tovarištva iz raziskovalnega centra za bolezni prebavil v Wuhan University Zhongnan bolnišnici. Avtorji hvala prof Tan JINQUAN za nujne predloge in uslužbencev Key Laboratorij za alergijo in imunsko povezane bolezni v Wuhan University School of Medicine za tehnično pomoč. Originalne predložene datoteke
avtorjev za slike
Spodaj so povezave s prvotno predloženih spisov avtorjev za slike. "Izvirno datoteko na sliki 1 12885_2007_770_MOESM2_ESM.jpeg avtorjev 12885_2007_770_MOESM1_ESM.jpeg avtorjev prvotne datoteke za izvirno datoteko Slika 2 12885_2007_770_MOESM3_ESM.jpeg avtorjev za slika 3 nasprotujočimi si interesi
Avtor (y) ugotovi, da nimajo konkurenčnih interesov.

• Timidinovih fosforilazno /β-tubulin izrazi III napovedati odziv kitajskih bolnikih z napredovalim želodca z rakom, ki so prejemali prve izbire kapecitabin plus paclitaxel
• Ocenjevanju pomoči računalnika za ocenjevanje simptomov v trebuhu (ECASS): protokol študije za randomizirani nadzorovani študiji