Udruga smanjene ekspresije RASSF1A s promotora metilacije u osnovnoj raka želuca kod pacijenata središnjeg China

Udruge smanjene ekspresije RASSF1A s promotora metilacije u osnovnoj raka želuca kod pacijenata središnje Kine pregled Sažetak
Pozadina
Iako methylation- posredovana inaktivacija izražavanja RASSF1A, supresor gena tumora kandidat, uočen je u nekoliko ljudskih tumora, podaci koji se odnose promjenu izraza RASSF1A i metilacije u kineskoj primarnog raka želuca su rijetki. Osim toga, izravni dokazi koji pokazuju povezanost između ekspresije proteina RASSF1A i primarnih oblika raka kod ljudi nedostaje. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati ekspresiju RASSF1A u tkivu primarnog karcinoma želuca (GC) na mRNA i proteina razinama, te utvrditi moguću vezu između statusa metilacije DNA i proteina iz RASSF1A na kineskom.
Metode pregled pedeset i četiri pacijenata s primarnim karcinomima želuca uključeni su u studiju RASSF1A mRNA i metilacije stanja između tkivu karcinoma i odgovarajućeg susjedna normalnog tkiva. 20 od 54 bolesnika bilo je uključeno za proučavanje izraza RASSF1A proteina. Ekspresija RASSF1A na mRNA i proteina određena je pomoću RT-PCR i Western blotting-, respektivno. RASSF1A promotor metilacije je otkriven metilacije-specifičnog PCR pregled Rezultati
RASSF1A mRNA i proteina izrazi u GC znatno su smanjene s usporedbom s odgovarajućim normalnim tkivima (vrijednost OD:. 0,2589 ± 0,2407 vs 0,5448 ± 0,2971, P
< 0,0001; 0,1874 ± 0,0737 vs 0,6654 ± 0,2201, P izvoznici &0.0001, respektivno). Metiliranje učestalost RASSF1A u primarnoj GC je veći nego u odgovarajućem normalnom tkivu (66,7% prema 14,8%, P pregled i 0.0001). Nadalje, ekspresija mRNA RASSF1A u metilacije skupini GC se smanjuje u odnosu na unmethylation skupinu GC (0,1384 ± 0,1142 0,5018 vs. ± 0,2463, P pregled i 0.0001) pregled Zaključak pregled Ekspresija RASSF1A. je smanjen u tkivu GC u mRNA i proteina razinama. Smanjena ekspresija RASSF1A bio povezan s promotorskom metilacije.
Pozadina pregled Rak želuca (GC) je jedan od najčešćih malignih gastrointestinalnih bolesti. Iako je incidencija GC je u opadanju u razvijenim županijama, to je još uvijek vodeći uzrok smrti od raka u većini zemalja u razvoju. Oba genetski i okolišni čimbenici, uključujući H. pylori pregled infekcije su uzeti u obzir da doprinesu razvoju GC. Nedavno je nekoliko istraživanja su pokazala da tišina tumor supresor gena epigenetičke modifikacije je temeljni mehanizam inaktivacije gena rakom u patogenezi raka kod ljudi [1]. Od posebne napomena je činjenica da je promotor Hipermetilacija igra bitnu ulogu u gubitku funkcije gena za suzbijanje tumora.
Gubitak alelskih na kromosomu 3p21.3 je jedan od najčešćih genetskih promjena u različitim vrstama raka u čovjeka [2 ]. U kasnim 90-ima, Dammann [3] i Burbee [4] et al identificirati RASSF1A, roman gen iz zajedničke homozigotni brisanje području u 3p21.3. Ovaj gen dionice homologije sa RAS efektora sisavaca. Postoji sedam RASSF1 izoformi (A do G) generiraju se alternativnim povezivanjem RASSF1A je dokazano smanjuju tumorogenosti in vivo i često je deaktiviran u različitim primarnim karcinoma u ljudi. Genetske mutacije u ovom izoforme su rijetki. Poznato je da epigenetičke odsutnost RASSF1A suradnika s CpG otoke metilacije promotorske regije. Bisulfat sekvenciranje DNA je pokazala da Hipermetilacija od promotorske regije deaktivira izraz RASSF1A u glavnim karcinoma u ljudi. To je podržan od strane promatranja ponovnog izražavanja RASSF1A u različitim staničnim linijama karcinoma liječenih demethylating agenata [4-7]. Do sada, nekoliko studija pokazala prisutnost nenormalnom promotora metiliranjem RASSF1A i gubitka ili abnormalnom niskom ekspresijom RASSF1A u osnovnoj GC, sugerirajući da inaktivacija RASSF1A ekspresije je usko povezan s promotorom metilacije [5, 8-10]. Prema našem najboljem saznanju, nema podataka koji se odnose na izražavanje RASSF1A i metilacije status u GC na kineskog stanovništva su dostupni. U ovom istraživanju, utvrdili smo ekspresiju RASSF1A na oba mRNA i proteina razinama, a njihova povezanost s RASSF1A promicanje statusa metilacija u kineskoj osnovnoj GC u središnjoj Kini.
Metode
pacijenata
Pedeset i četiri pacijenta primarne GC registrirano u Wuhan University Zhongnan bolnice i Cancer Hospital Hubei Provincial od prosinca 2003. do lipnja 2005. godine, a svi pacijenti podvrgnuti ljekovito resekcija sa sustavnim limfnog čvora seciranje. GC tkiva i odgovarajuće susjedne normalne želučani tkiva dobiveni su iz poslovanja prije kemoterapije. Pacijenti uključeni 35 muškaraca i 19 žene, prosječna starost 57.6 ± 13.7 godina (raspon od 30 do 85 godina). Dijagnoza i diferencijacije GC određena je patohistološke preglede i klasifikaciji TNM. Demografske i kliničkopatološkim podaci pacijenata su sažeti u tablici 1. Od 54 bolesnika sa GC, 20 slučajeva su uključeni za proučavanje ekspresije proteina RASSF1A. Protokol istraživanja je odobren od strane etičkog povjerenstva Wuhan University Zhongnan bolnici. Tumora i normalnog tkiva susjedna dobiveno u vrijeme operacije, smrznuti u tekućem N 2 i pohranjeni na -80 ° C do upotrebe. Uzorak dijelovi su obojeni u H &E i ispitana su dva iskusna pathologists.Table 1 pridruživanju genske metilacije RASSF1A s demografije i kliničkopatološkim obilježja primarnog karcinoma želuca (n = 54) pregled pregled metilacije

P vrijednosti
ILI (95% CI)
pregled Da
Ne
pregled pregled Spol pregled muški pregled 24 pregled, 11 pregled 0,766 pregled 1.273 (0,393 ~ 4,117) pregled ženska pregled 12 pregled 7 pregled Age izvoznici < 60 pregled, 17 pregled, 13 pregled 0,145 pregled 0,344 (0,101 ~ 1,167)
≥ 60 pregled, 19 pregled 5
tumorske stranice pregled antruma pregled 14
7 pregled tijela i srčani pregled 22 pregled, 11 pregled 1,000 pregled 1.000 (0.313 ~ 3.192) pregled Faze pregled rano
1 pregled 2 pregled 0,255
0,229 (0,019 ~ 2,708) pregled, napredni pregled 35 pregled, 16 pregled limfnih čvorova metastaze pregled da
22 pregled 7 pregled 0,154 pregled 2,469 (0,774 ~ 7.882 ) pregled, nema pregled 14 pregled, 11 pregled, udaljene metastaze pregled da
5
1 pregled 0,651 pregled 2,742 (0,296 ~ 25,424) pregled, br pregled 31 pregled, 17 pregled diferencijacije
dobro i umjereno pregled 18 pregled, 12 pregled 0,384 pregled 0,500 (0,154 ~ 1,624) pregled slabe Netlogu 18 pregled 6
pregled crijeva tipa Lauren je pregled 12 pregled, 10 pregled 0,148 pregled 0,400 (0,125 ~ 1,275) pregled tipa difuznim pregled 24 pregled osam pregled DNA i RNA ekstrakt
DNA iz smrznutog tkiva je pročišćen kromatografijom na fenol /kloroformom i taloženjem etanolom i otopljena u 50 ul destilirane vode i pohrani na -20 ° C do upotrebe. Ukupna RNA je izolirana koristeći Trizol kitova (Molecular Research Center Inc., Cincinnati, USA) prema uputama proizvođača.
Polu kvantitativna RT-PCR
Tri mikrograma ukupne RNA obrnuto prepisana pomoću RevertAid ™ prvog lanca sinteza cDNA kit (Fermantas Inc., Vilnius, Litva). Sve ukupna RNA je tretirala DNase kako bi se izbjeglo onečišćenje genomske DNA. Početnice za RASSF1A i glyceraldehydes-3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) oblikovani su temeljem RASSF1A gena (GeneBank pristupni br: NM_007182) i GAPDH gena (GeneBank pristupni br: NM_002046). Početnice za RASSF1A su 5'-CTT TTA CCT GCC CAA GGA TGC-3 'i 5'-CAC CTC CCC AGA GTC ATT TTC C-3'. Početnice za GAPDH (5'-MAČKA GAC AAC TTT GGT ATC GTG-3 ', i 5'-GTG TCG CTG TTG AAG TCG TCA GA-3') korišteni su kao unutarnje kontrole. Toplinski ciklusa bili su: 94 ° C 5 minuta, zatim je slijedilo 35 ciklusa od 94 ° C za 30 SEC, 55 ° C kroz 45sec i 72 ° C tijekom 60sec i konačno 72 ° C tijekom 5 minuta za proširenje. PCR produkti su razdvojeni na 2% -tnom agaroznom gelu u elektroforezom i prikazan s etidijevim bromidom bojanjem, i kvantificiran korištenjem sustava za analizu slike (UVP Bioimaing sustava, USA). Generirana PCR produkti su 265bp za RASSF1A i 370 bp za GAPDH. je izračunata vrijednost optičke gustoće (OD) na mRNA ekspresije.
bisulfat modifikacija
DNK tumorskim tkivima i odgovarajuće susjedne normalna tkiva se podvrgne bisulfat liječenja prema Herman et al [11]. Ukratko, 2 ug genomne DNA suspendiran u 50 ul destilirane vode, denaturirani s 0,2 M NaOH tijekom 10 minuta pri 37 ° C, i dodano je 30 ul svježe pripravljenog 3 M natrijevog bisulfata (pH 5,0). Uzorci su tijekom nadslojena mineralno ulje za pokrivanje površine vodene faze, i inkubira na 50 ° C tijekom 16 ~ 20 sati. Uzorak DNA je oslobođena soli kroz kolonu Wizard DNA Clean-up sustava (Promega, Wisconsin, USA) u skladu s uputama proizvođača. Uzorci su tretirani s 0,3 M NaOH kroz 5 min na sobnoj temperaturi i taloži etanolom. Bisulfatna modificirani genomska DNA je ponovno suspendiran u 50 ul TE puferu (10 mM Tris · Cl, 1 mM EDTA, pH7.6) i pohranjeni na -80 ° C za upotrebu. Pregled Metilacija specifični PCR (MSP)
metilacije status RASSF1A je određena MSP. Bisulfat liječenje genomske DNA pretvara citozin za uracil bazama, ali nema učinka na metilcitozin. Specifični PCR je zatim koristi za razlikovanje metilnim i nemetiliranih DNA u Hotstar TaqE PCR rublja (Takara Bio, Co, Ltd, Tokyo, Japan). Početnice za metiliranog obliku su bili 5'-GGG TTT GAG AGC TGC GCG-3 'i 5'-GAT AAA AAC GAA CGC CCG-3', i primeri za unmethylated obliku su bili 5'-GGG GTT TTG GAG TGA TGTG -3 'i 5'-ACT AAC AAA CAC AAA CCA AAC-3' (Gene banka Pristupanje: AC002481). PCR uvjeti se sastoji od jedne inkubaciju od 15 minuta pri 95 ° C, a zatim 40 ciklusa od 30 sekundi denaturacije na na 94 ° C, 50 s na postizanje temperature (64 ° C za metilirani i 59 ° C za nemetiliranih specifičnih primera) i 30 sekundi ekstenzije na 72 ° C, i finalne ekstenzije na 72 ° C tijekom 10 min. PCR produkti su odvojeni na 8% poliakrilamidnim gelovima u elektroforezom. Genomska DNA, metiliran vitro CpG metiltransferaze (SSS I) slijedeći upute proizvođača (New England Biolabs, Inc., Beverly, MA), korišten je kao pozitivna kontrola. blank voda se koristi kao negativna kontrola. Svaki set primer proizvede 169 bp produkt. Pregled Western blot
Pedeset mg uzoraka su homogenizirane i centrifugirane na 12,000-15,000 g tijekom 10-15 min u ledeno hladnom 50 mM HEPES puferu (pH 7,4) koji sadrži 150 mM NaCl 50 mM Tris-Cl (pH 8,0), 1% Triton X-100, 2 mM EDTA, 2 mM PMSF, 5 ug /ml leupeptina, 1% NP-40 i 10% glicerol. Supernat je sakupljen i koncentracija proteina izmjerena je korištenjem BSA kao standarda do BCA reagens za ispitivanje proteina (Pierce Biotechnology., Inc., Rockford, SAD). Jednake količine (100 ug) ukupnih proteina iz tkiva su elektroforezom na SDS-poliakrilamidnim gelovima (10% gel) i prenese u polyvinylidine difluorid (PVDF) filtarskim membranama 30 min bysemi suha blot. Membrane su blokirane tijekom 2 sata na sobnoj temperaturi, s blok otopinom predviđen u ECL kita (Protein detektor LumiGLO Reserve ™ Western blot-Kit, KPL, Maryland, USA), a zatim su inkubirane 45 min s 1: 100 razrjeđenju od primarna antitijela RASSF1A. Primarni antitijelo se koristi za Western blot analizu bio srodno pročišćeno koza poliklonsko protutijelo RASSF1A, C-12 (SC-18.724, Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA., USA). PVDF membrane su zatim isprana kroz 30 minuta koristeći otopinu za ispiranje, a zatim je 1 h inkubacije s anti-kozjim protutijelo konjugirano na peroksidazu iz hrena u bloku otopini (zec anti-kozjim IgG, Chemicon International Srednjeeuropsko, Inc., Temecula, California, USA ). ThePVDF Membrane su ponovno isprane i Imunoreaktivni vrpce su detektirane pojačanom kemiluminescencijom i vizualizirani su sustav za analizu slika (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules CA, USA). GAPDH (Abcam Biotechnology, Cambridge, UK) je korišten kao kontrola.
Statistička analiza pregled, Statistička analiza je provedena pomoću SPSS11.5 softver (SPSS Inc., Chicago, IL). Razlike između varijabli su ocijenjeni od strane Hi-kvadrat test ili t-testova u skladu s podacima. Statistička značajnost razlika je postavljen kao P Netlogu < 0,05. | Rezultati
RASSF1A mRNA kod raka želuca pregled RASSF1A mRNA u 54 GC tkiva bila je 50% da je u susjednim odgovarajućim normalnim tkivima, koje su pokazale ekspresiju mRNA u tumorima bila je značajno smanjena u usporedbi s onom normalna tkiva kao što je prikazano na slici. 1. Slika 1 Ekspresija mRNA RAASF1A u primarni karcinom želuca (T), a odgovarajući normalno tkivo (N). RT-PCR produkti za RASSF1A kvantificirane su denzitometrijsku unosom u etidij bromid obojenih gelovi u usporedbi s GAPDH. Pregled RASSF1A protein ekspresije kod raka želuca pregled dosljedne do smanjenja ekspresije mRNA, slika 2 pokazuje da je ekspresija proteina u tumori bila samo 21.4% od koje se u normalnim tkivima, koji je predložio da razina proteina RASSF1A ekspresije također je smanjen s odnosu na odgovarajuće normalnog tkiva. Slika 2 ekspresija proteina u RASSF1A u primarni karcinom želuca (T), a odgovarajući normalno tkivo (N). Protein razina RASSF1A kvantificirano je Western blotting-odnosu GAPDH. Ekspresija pregled RASSF1A mRNA i DNA metilacije na promotor gena RASSF1A u osnovnoj rak želuca
Kao što je prikazano na slici. 3, metilacija učestalost RASSF1A u GC bila je 3,5 puta veći nego u odgovarajućem normalnom tkivu (66,7% prema 14,8%, P 0.0001). RASSF1A mRNA između metilacije i unmethylation grupa u GC bila značajno različita, bivši je 2,6 puta manja od potonje (0,1384 ± 0.1142 vs 0.5018 ± 0,2463, P Netlogu &0.0001). Rezultati su pokazali da Hipermetilacija na CpG otoku u RASSF1A promotor je čvrsto povezan sa značajno smanjenim mRNA ekspresije u RASSF1A. Slika 3 Metilacija RASSFIA u primarni karcinom želuca i odgovarajući normalnog tkiva MSP. Stupac 3, 4 i linija 6, 7 prikazuju reprezentativan rezultat od tumora i normalnog uzorka, respektivno. U: pojačan proizvod s primer prepoznaju nemetilirane sekvence; M: pojačan proizvod s primer prepoznavanje metilirani sekvence. Genomska DNA, metiliran vitro CpG metilazom (SSS I) je korišten kao pozitivna kontrola. blank voda se koristi kao negativna kontrola. PCR produkti su razdvojeni na 8% poliakrilamidnom gelu pregled povezanosti između metilacije i kliničkopatološkim parametara raka želuca
povezanost između promotora metilacije i relevantnih demografskih i kliničkopatološkim karakteristikama, uključujući spol, dob, sijelo tumora, limfnih čvorova metastaza, udaljena metastaza, diferencijacija, stupnju i tipu Lauren je bio prikazan u tablici 1. nije bilo značajne povezanosti između promotora metilacije i kliničkopatološkim parametrima. pregled Rasprava pregled u ovom istraživanju smo dali dokaze da RASSF1A izraz u GC je smanjena na mRNA i razina proteina i metilacija na promotorsku regiju gena RASSF1A je 3,5 puta češće u osnovnoj GC nego u odgovarajućim normalna tkiva. Osim toga, učestalost GC bolesnika s RASSF1A promotorom metilirani preko nemetilirani bio je 2 puta viši. To sugerira da RASSF1A izraz u GC je bio jako povezan sa statusom promotora metilacije gena RASSF1A. Kako bi se dodatno potvrđuju vezu između ekspresije RASSF1A i metilacije promotora, usporedili smo RASSF1A mRNA ekspresije između metilacije i unmethylation tkiva u GC, i utvrdili da je nenormalna metilacije od gena promotora RASSF1A regiji je odgovoran za smanjenje ili gubitak RASSF1A mRNA izraz u primarnoj GC. Naša studija je u skladu s jedne studije koja je pokazala da 45,6% primarne GC imao ništa ili abnormalno nisku ekspresiju mRNA RASSF1A [5]. Među 30 podudarne setovi iz istih pacijenata utvrđeno je 73.3% GC imati smanjenu ekspresiju RASSF1A [5]. Prema našem najboljem saznanju, nema studija izražavanja RASSF1A proteina u GC je bio prijavljen. Mi dodatno analizirati izraz RASSF1A na razini proteina pomoću Western blot u 20 GC pacijenata i otkrili da je ekspresija proteina u tumorima je samo 21,4% od izraza u normalnim tkivima. Ovaj rezultat pokazuje da izražavanje RASSF1A proteina u GC bio je znatno niži nego u odgovarajućim susjedna normalna tkiva. To je u skladu s mRNA ekspresije u RASSF1A.
Mehanizam smanjuje ili prigušivačem izražavanja RASSF1A može biti uzrokovan promotora metilacije i /ili mutacija RASSF1A gena. Međutim, veći broj studija pokazao kako mutacija RASSF1A gena je vrlo rijetka [4, 5, 7, 12, 13]. Dakle, RASSF1A gena vjerojatno inaktivirana mehanizama methyltion. Byuna sur [5] utvrdili da od 41 primarnog GC s gubitkom ili nenormalan smanjenje RASSF1A izražavanja, 39 su metilira, dok je u oba GC i normalno tkivo s normalnom RASSF1A ekspresije niti su metilirani. Za sur [10] pokazalo je da Hipermetilacija od RASSF1A promotor pronađen je u 25,8% GC i na 11,1% od želučane intestinalne metaplazije (IM), respektivno. Naši podaci su pokazala da je učestalost RASSF1A metilacije u GC bio je veći od navedenog izvijestio podatke. GC je vrlo rasprostranjen u Kini i visoke metilacije RASSF1A može djelomično objasniti razlog zašto GC Učestalost je veća u Kinezima. Zanimljivo je činjenica da RASSF1A promotor Hipermetilacija je veći u EBV pozitivne GC nego EBV negativne karcinoma (66,7% vs 3,6%) može predložiti blisku povezanost između EBV i abcrantnog metilacije u GC. Doista, prethodno izvješće je naznačeno da virusni onkogcnczom može uključivati ​​neprirodni metilacije, što je rezultiralo inaktivacije gena za suzbijanje tumora [9]. Pregled, otkrili smo da je metilacije učestalost RASSF1A u primarnoj GC i na odgovarajućim normalnim tkivima bile su 66,7%, a 14,8%, respektivno. Naši podaci su pokazali da je od 54 GC bolesnika 36 su metilirani i 18 su nemetilirani, sugerirajući metilirani GC je češći, u dogovoru s drugim izvješćima. Prethodna studija [14] sugerira da je želudac jednom od normalnog tkiva s visokom učestalošću starenja povezanih metilacija, te rak želuca je jedan od tumora s visokom učestalošću CpG otoka metilacije. Kang i sur [15] proučavao stanje metilacije 11 gena u neoplastičnom želučane sluznice, a otkrili su da je nenormalna CpG otok metilacije često se dogodila u kronični gastritis, koji je pokazao starenja odnos, te da se odnose na starenje-metilacije je tip-specifični gen. RASSF1A gen rijetko se metilira, bez starenja odnos. Nadalje, drugi autori objavili [3-5] koji je u normalnim tkivima, bez metilirani RASSF1A alela bile otkrivene. Međutim, naši podaci su pokazali da se u odgovarajućim normalnim tkiva, RASSF1A metilacije frenquency bio visok postotak (14,8%). Raskorak između naših podataka i drugih autora 'može biti zbog razlike u uzorcima koji smo proučavali su non-nesoplasia želučani tkiva u bolesnika s karcinomom želuca i to je vrlo vjerojatno da su kronični gastritis tkiva, posebno intestinalne metaplazije tkiva u odgovarajuća susjedna normalna tkiva. Prethodna studija je izvijestio da je nekoliko gena su često metilirani kod kroničnog gastritisa, posebno u intestinalne metaplazije tkiva. Za sur [10] ispitan 8 tumora povezanih genske metilacije status u uključujući RASSF1A u želučanom intestinalne metaplazije u bolesnika sa i bez karcinoma želuca, a otkrili su da je učestalost metilacije u RASSF1A raka i intestinalne metaplazije su 25,8% i 11,1% , respektivno. Rezultat je u skladu s našom. U stvari, sekvencionirao smo MSP proizvode za nekoliko uzoraka. Slijed je bio dosljedan slijed predvidio (podaci nisu pokazali). Otkrili smo da unmethylated bendovi uvijek postojati zajedno s metilnim bendova u većini primarnoj GC i odgovarajuća susjedna normalna tkiva, unatoč smanjenja ili gubitka RASSF1A izražavanja, u skladu s prethodnim izvješćima [4, 10]. To se najvjerojatnije ove resected tumori nisu microdissected te su kontaminirane s stanice strome. Osim toga, MSP je vrlo osjetljivo. Bai et al [16] mislio da je otkrivanje tih dvaju bendova predstavlja ili intra-alela heterogenost CpG otoku metilacije ili metilacije otoka varira od alela za alel. Alternativno, naši rezultati mogu ukazivati ​​da je djelomično metilacije promotora RASSF1A gena je dovoljno za utišavanje transkripciju gena, jer gubitak jednog gena kopiju dovoljna da potakne nastanak tumora [17, 18]. Tommasi sur [19] primijetio da heterozigotni RASSF1A knockout miševa značajno su tumorski skloni, kako za formiranje spontanog tumora i kemijski induciranih tumora u. To može predložiti da RASSF1A gen ima karakteristike prenose haploinsufficiency kada je samo jedan alel je izgubljen.
Smo istražiti povezanost između promotora Hipermetilacija i relevantnim kliničko parametrima, uključujući dob i spol bolesnika, mjesto karcinom, histološke diferencijacije, tip i metastaze GC Lauren je. Otkrili smo da je učestalost metilacije RASSF1A gena bila je značajno viša u uznapredovalih tumora u usporedbi s početnim stadijem tumora (68,6% vs 33,3%), a više u slabo diferenciranim tumorima (75% vs 60%) u usporedbi s dobro i umjereno diferenciranim tumorima , Međutim, te razlike ne statistički značajna. Byun sur [5] su pokazali da inaktivacija RASSF1A povezana sa fazi tumora i stupnja, ali ne i sa histoloških tipova tumora. Razlike mogu objasniti ograničenim uzoraka za rani GC u našem istraživanju.
Transfekcije RASSF1A gena smanjuje rast ljudskih stanica raka in vitro i in vivo [3, 4], koja podržava ulogu RASSF1A kao gen za suzbijanje tumora. RASSF1A aktivirajući RAS može zahtijevati heterodimerizaciju RASSF1A i novi Ras efektora, (NORE1) i inducira apoptozu kroz njegove interakcije s Ras, NORE1, priključak pojačivača ksr (CNK) i pro-apoptoze MST1 kinaze [20]. Nekoliko skupina su izvijestili da RASSF1A je mikrotubula vezujući protein i regulira napredovanje mitoze [21-25] i mogu funkcionirati na putevima prijenosa signala koji uključuju RAS poput malih GTP-aze proteina. Tommasi sur [19] pokazalo je da Rassf1a pregled - /- i Rassf1a +/-
miševi imaju povećan tumora mnogostrukost i veličinu tumora, što upućuje na daljnji ulogu suzbijanje tumora RASSF1A, što može objasniti njegovu čestu epigenetičku inaktivaciju u ljudskim tumorima. pregled Zaključak
Ukratko, izraz RASSF1A znatno je smanjen na nenormalne ili potpuno izgubio u primarnoj GC usporedbi sa susjednom normalnom tkivu, te je u korelaciji s Hipermetilacija promotora gena RASSF1A. Daljnji rad je potrebno rasvijetliti njegovu točnu funkciju i interakcija s drugim čimbenicima za razvoj strategija za rano otkrivanje, prevenciju i liječenje karcinoma želuca pregled deklaracija
Zahvale
Ovaj rad je podržan od strane grant (br. 2004AA301C91 ) iz Hubei znanosti i tehnologije temelja do Mei Ye i zajedništvo iz centra za istraživanje bolesti probavnog Wuhan University Zhongnan bolnici. Autori zahvaljuju prof Tan Jinquan za kritične prijedloge i djelatnika od ključnih Laboratorija za alergije i povezane sa imunitetom bolesti u Wuhan University School of Medicine za tehničku pomoć.
Autora originalne dostavljeni datoteke za slike
Ispod su linkovi na autora originalnih dostavljenih datoteka za slike. 12885_2007_770_MOESM1_ESM.jpeg autora izvorna datoteka za Slika 1 12885_2007_770_MOESM2_ESM.jpeg autorskim izvorne datoteke za sliku 2 12885_2007_770_MOESM3_ESM.jpeg autorskim izvorne datoteke na Slici 3 suprotstavljenih interesa
autor (i) izjavljuju da nemaju konkurentne interese.

• Timidin fosforilaza /β-tubulin III izrazi predvidjeti odgovor u kineskim pacijenata s uznapredovalim rakom želuca koji primaju prve linije kapecitabin plus paclitaxel
• Ocjenjivanje računalni potpore za procjenu simptoma sa želucem (ECASS): Studija protokol za randomizirana kontrolirana studija