Associazione di espressione diminuita RASSF1A con metilazione del promotore di cancro gastrico primarie da pazienti del centro di China

Associazione di espressione diminuita RASSF1A con metilazione del promotore di cancro gastrico primarie da pazienti della Cina centrale
Abstract
sfondo
Sebbene methylation- inattivazione mediata espressione di RASSF1A, un gene soppressore del tumore candidato, è stata osservata in diversi tumori umani, i dati riguardanti l'alterazione di espressione RASSF1A e metilazione nel cancro gastrico primario cinese sono scarse. Inoltre, la prova diretta che mostra l'associazione tra l'espressione della proteina di RASSF1A e tumori umani primari è carente. Lo scopo di questo studio era di valutare l'espressione RASSF1A nel tessuto del cancro gastrico primaria (GC) a livelli di mRNA e di proteine, e per stabilire la possibile relazione tra lo stato di metilazione del DNA e l'espressione della proteina di RASSF1A in cinese.
Metodi
cinquantaquattro pazienti con tumori gastrici primari sono stati inclusi nello studio di RASSF1A mRNA espressione e di metilazione status tra il tessuto del cancro e il corrispondente tessuto normale adiacente. 20 su 54 pazienti sono stati inclusi per lo studio dell'espressione della proteina RASSF1A. L'espressione di RASSF1A a mRNA e di proteina è stata determinata mediante RT-PCR e occidentale-blotting, rispettivamente. La metilazione RASSF1A promotore è stato rilevato dalla metilazione-specifica PCR
Risultati
RASSF1A mRNA e le espressioni di proteine ​​in GC sono stati ridotti in modo significativo con rispetto ai corrispondenti tessuti normali (valore OD:. 0,2589 ± 0,2407 vs 0,5448 ± 0,2971, P
< 0,0001; 0,1874 ± 0,0737 vs 0,6654 ± 0,2201, P
< 0,0001, rispettivamente). frequenza di metilazione di RASSF1A in GC primario è superiore a quello dei corrispondenti tessuti normali (66,7% vs 14,8%, P
< 0,0001). Inoltre, l'espressione di mRNA RASSF1A nel gruppo metilazione del GC è stato ulteriormente ridotto rispetto al gruppo unmethylation di GC (0,1384 ± 0,1142 contro 0,5018 ± 0,2463, P
< 0,0001)
Conclusione
Espressione di RASSF1A. è stato ridotto nel tessuto di GC a livelli di mRNA e di proteine. espressione diminuita RASSF1A è stato associato con la metilazione promotore.
Sfondo
cancro gastrico (GC) è una delle neoplasie più comuni malattie gastrointestinali. Sebbene l'incidenza di GC è in declino nelle contee sviluppati, è ancora una delle principali cause di morte per tumori nella maggior parte dei paesi in via di sviluppo. Entrambi i fattori genetici e ambientali, tra cui H. pylori
infezione sono stati considerati per contribuire allo sviluppo di GC. Recentemente, diversi studi hanno dimostrato che il silenzio dei geni oncosoppressori per modificazione epigenetica è un meccanismo fondamentale per l'inattivazione di geni legati al cancro nella patogenesi del cancro umano [1]. Della nota particolare è il fatto che ipermetilazione del promotore svolge un ruolo essenziale nella perdita di funzione di geni oncosoppressori.
Perdita allelica al cromosoma 3p21.3 è una delle più frequenti cambiamenti genetici in vari tipi di tumori umani [2 ]. Alla fine degli anni '90, Dammann [3] e Burbee [4] et al RASSF1A identificato, un nuovo gene della comune zona omozigote delezione in 3p21.3. Questo gene azioni omologia con effettori RAS mammiferi. Ci sono sette isoforme RASSF1 (da A a G) generati attraverso RASSF1A splicing alternativo ha dimostrato di ridurre la tumorigenicità in vivo ed è spesso inattivate in una varietà di tumori umani primari. Mutazioni genetiche in questa isoforma sono rare. È noto che silenziamento epigenetico di collegate RASSF1A con CpG isole metilazione del promotore. Bisulfate sequenziamento del DNA ha dimostrato che ipermetilazione della regione del promotore inattiva espressione RASSF1A nei principali tumori umani. Questo è supportato dall'osservazione di ri-espressione di RASSF1A in varie linee cellulari tumorali trattate con agenti demetilanti [4-7]. Fino ad oggi, diversi studi hanno dimostrato la presenza di aberrante metilazione del promotore di RASSF1A e la perdita o anormale bassa espressione di RASSF1A in GC primaria, il che suggerisce che l'inattivazione di espressione RASSF1A è strettamente associato con il promotore metilazione [5, 8-10]. Per la nostra migliore conoscenza, non ci sono dati riguardanti l'espressione di RASSF1A e metilazione stato in GC in popolazione cinese sono disponibili. Nel presente studio, abbiamo determinato espressione di RASSF1A sia a livello di mRNA e di proteine, e la loro associazione con RASSF1A promuovere lo stato di metilazione in GC primaria cinese nella Cina centrale.
Metodi
pazienti
Cinquantaquattro pazienti con GC primaria sono stati registrati nel Wuhan University Zhongnan Hospital e il Cancer Hospital Hubei Provincial dal dicembre 2003 al giugno 2005, e tutti i pazienti sono stati sottoposti a resezione curativa con sistematica dissezione linfonodale. tessuti GC e corrispondenti tessuti gastrici normali adiacenti sono stati ottenuti da operazioni prima della chemioterapia. I pazienti inclusi 35 maschi e 19 femmine, età media 57,6 ± 13,7 anni (range da 30 a 85 anni). Diagnosi e differenziazioni di GC sono stati determinati dagli esami istopatologici e la classificazione TNM. I dati demografici e clinicopatologiche dei pazienti sono riassunti nella Tabella 1. Tra i 54 pazienti con GC, 20 casi sono stati inclusi per lo studio dell'espressione proteica di RASSF1A. Il protocollo dello studio è stato approvato dal Comitato Etico dell'Università di Wuhan Zhongnan Hospital. Tumorali e tessuti normali adiacenti sono state ottenute al momento della chirurgia, a scatto congelati in un liquido N 2 e conservati a -80 ° C fino all'uso. sezioni campione sono state colorate in H & E e sono stati esaminati da due pathologists.Table esperienza 1 Associazione di RASSF1A gene metilazione con dati demografici e le caratteristiche clinico-patologiche di cancro gastrico primaria (n = 54)

metilazione
valore P
OR (95% CI)

Sì

No


genere
maschio
24
11
0.766 1.273
(0,393 ~ 4.117)
femminile
12 7
Età
< 60
17
13
0,145
0,344 (0,101 ~ 1.167)
≥ 60
19
5
siti tumorali
antro
14
7
corpo e
cardiaco 22
11
1.000
1.000 (0.313 ~ 3.192)
Palcoscenici
presto
1 2
0.255
0,229 (0,019 ~ 2.708)
avanzata
35
16
metastasi linfonodali
sì
22 7
0,154
2.469 (0,774 ~ 7,882 )
non
14
11
metastasi a distanza
sì
5
1 0.651
2.742 (0.296 ~ 25,424)
non
31
17
Differenziazioni
bene e moderati
18
12
0,384
0.500 (0.154 ~ 1.624)
poveri
18
6

tipo intestinale di Lauren
12 10
0.148
0.400 (0.125 ~ 1.275)
tipo diffuso
24 Pagina 8
DNA e RNA estratto
DNA da tessuti congelati è stato purificato mediante fenolo /cloroformio e precipitazione con etanolo e sciolto in 50 ml di acqua distillata e conservato a -20 ° C fino al momento dell'uso. L'RNA totale è stato isolato utilizzando i kit TRIzol (Molecular Research Center Inc., Cincinnati, USA) secondo le istruzioni del produttore.
Semi-RT-PCR quantitativa
Tre microgrammi di RNA totale sono stati inversamente trascritti utilizzando RevertAid ™ primo filone sintesi del DNA kit (Fermentas Inc., Vilnius, Lituania). Tutti RNA totale sono stati trattati da DNasi per evitare la contaminazione del DNA genomico. I primer per RASSF1A e glyceraldehydes-3-fosfato deidrogenasi (GAPDH) sono stati progettati sulla base di gene RASSF1A (GeneBank adesione #: NM_007182) e del gene GAPDH (GeneBank adesione #: NM_002046). I primer per RASSF1A erano 5'-CTT TTA CCT GCC CAA GGA TGC-3 'e 5'-CAC CTC CCC AGA GTC ATT TTC C-3'. I primer per GAPDH (5'-CAT GAC AAC TTT GGT ATC GTG-3 'e 5'-GTG TCG CTG TTG AAG TCG TCA GA-3') sono stati utilizzati come controllo interno. I cicli termici sono: 94 ° C per 5 minuti, seguito da 35 cicli di 94 ° C per 30 sec, 55 ° C per 45 sec e 72 ° C per 60 sec, e infine 72 ° C per 5 min per estensione. I prodotti di PCR sono stati separati in 2% gel di agarosio in elettroforesi e visualizzati con colorazione con etidio bromuro, e quantificati utilizzando un sistema di analisi dell'immagine (sistemi UVP Bioimaing, USA). I prodotti di PCR generati erano 265bp per RASSF1A e 370 bp per GAPDH. Optical valore di densità (OD) del espressione di mRNA è stato calcolato.
Bisulfate modifica
DNA da tessuti tumorali e corrispondenti tessuti normali adiacenti sono stati sottoposti ad un trattamento bisolfato Secondo Herman et al [11]. Brevemente, 2 ug di DNA genomico sospeso in 50 ml di acqua distillata, denaturati con 0,2 M NaOH per 10 min a 37 ° C, e aggiunti 30 ml di preparato fresco 3 bisolfato di sodio M (pH 5.0). I campioni erano oltre strati con olio minerale per coprire la superficie della fase acquosa, e incubate a 50 ° C per 16 ~ 20 h. Il campione di DNA è stato dissalato attraverso una colonna di Wizard DNA Pulizia del sistema (Promega, Wisconsin, USA) secondo le istruzioni del produttore. I campioni sono stati trattati con 0,3 M NaOH per 5 min a temperatura ambiente e precipitati con etanolo. Il DNA genomico bisolfato-modificato è stato risospeso in 50 microlitri tampone TE (10 mM Tris · Cl, 1 mM EDTA, pH7.6) e conservati a -80 ° C per l'uso.
Metilazione-specifica PCR (MSP)
La stato di metilazione di RASSF1A è stata determinata da MSP. trattamento bisolfato di DNA genomico converte citosina alle basi uracile ma non ha alcun effetto sulla methylcytosine. La specifica PCR è stato poi utilizzato per distinguere tra le sequenze di DNA metilato e non metilato in una macchina HotStar TaqE PCR (Takara Bio, Co., Ltd., Tokyo, Giappone). I primer per la forma metilata erano 5'-GGG TTT TGC GAG AGC GCG-3 'e 5'-GAT AAC AAA CGC GAA CCG-3', ed i primer per la forma non metilato sono stati 5'-GTT GGG TTG TGA GAG tgtg -3 'e 5'-ACT AAC AAA CAC AAA CCA AAC-3' (Gene Bank adesione: AC002481). La condizione PCR consisteva di una incubazione di 15 min a 95 ° C, seguita da 40 cicli di denaturazione 30 sec a 94 ° C, 50 sec a una temperatura di ricottura (64 ° C per metilato e 59 ° C per primers specifici non metilate) , ed un prolungamento 30 sec a 72 ° C, e una estensione finale a 72 ° C per 10 min. I prodotti di PCR sono stati separati a 8% gel di poliacrilammide in elettroforesi. Il DNA genomico, metilato in vitro da CpG metiltransferasi (Sss I) seguendo le indicazioni del produttore (New England Biolabs, Inc., Beverly, MA), è stato utilizzato come controllo positivo. blank acqua è stato utilizzato come controllo negativo. Ogni set di primer ha generato un prodotto 169 bp.
Western blotting
Cinquanta campioni mg erano omogeneizzato e centrifugato a 12.000-15.000 g per 10-15 minuti a 50 mM tampone HEPES ghiacciato (pH 7.4) contenente 150 mM NaCl , 50 mM Tris · Cl (pH 8,0), 1% Triton X-100, 2 mM EDTA, 2 mM PMSF, 5 mg /ml leupeptina, 1% NP-40, e 10% glicerolo. Sovrastante è stato raccolto e la concentrazione di proteine ​​è stata poi misurata utilizzando BSA come standard dal BCA Protein Assay reagente (Pierce Biotechnology., Inc., Rockford, Stati Uniti d'America). parti uguali (100 mcg) di proteine ​​totali di tessuti sono stati elettroforesi su SDS-poliacrilammide gel (10% gel) e trasferiti polyvinylidine membrane (PVDF) di filtro per 30 min blotting bysemi-asciutto. Le membrane sono state bloccate per 2 ore a temperatura ambiente con la soluzione blocco fornito nel kit ECL (Protein Detector LumiGLO Reserve ™ Western Blotting Kit, KPL, Maryland, USA), e poi incubate per 45 min con una diluizione 1: 100 del anticorpo primario per RASSF1A. L'anticorpo primario utilizzato per l'analisi Western Blot è stato un affinità purificato capra policlonale anticorpi per RASSF1A, C-12 (SC-18724, Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, California., USA). Le membrane di PVDF sono state poi lavate per 30 min con una soluzione di lavaggio, seguito da un 1 h di incubazione con anticorpo anti-capra coniugato con perossidasi di rafano in soluzione di blocco (Rabbit anti-IgG di capra, Chemicon Internation, Inc., Temecula, California, USA ). Le membrane sono state lavate ThePVDF di nuovo e le bande immunoreattive sono state rilevate da chemiluminescenza e visualizzati dal sistema di analisi di immagine (Bio-Rad Laboratories, Inc. Hercules, CA, USA). GAPDH (Abcam Biotechnology, Cambridge, UK) è stato utilizzato come controllo.
Analisi statistica
analisi statistiche sono state effettuate utilizzando il software SPSS11.5 (SPSS, Inc., Chicago, IL). Le differenze tra le variabili sono state valutate con il test del chi quadrato o t-test in base ai dati. La significatività statistica delle differenze è stato impostato come P
< 0.05
. Risultati
RASSF1A mRNA espressione nel carcinoma gastrico
espressione RASSF1A mRNA in 54 tessuti GC è stata del 50% di quella nelle adiacenti corrispondenti tessuti normali, che ha rivelato l'espressione di mRNA nei tumori è risultata significativamente ridotta rispetto a quella dei i tessuti normali come mostrato in Fig. 1. Figura 1 Espressione dei RAASF1A mRNA nel cancro gastrico primario (T) e la corrispondente tessuto normale (N). RT-PCR prodotti per RASSF1A sono stati quantificati mediante scansione densitometrica di etidio bromuro gel-macchiati rispetto al GAPDH. Espressione della proteina
RASSF1A nel carcinoma gastrico
costante alla diminuzione del mRNA, la figura 2 mostra che l'espressione della proteina in tumori è stato solo 21,4% di quello in tessuti normali, che suggerivano che il livello di espressione della proteina RASSF1A è stata ridotta con rispetto ai corrispondenti tessuti normali. Figura 2 Protein espressione di RASSF1A nel cancro gastrico primario (T) e la corrispondente tessuto normale (N). livello di proteina di RASSF1A è stata quantificata mediante Western-blotting rispetto al GAPDH. espressione
RASSF1A mRNA e metilazione del DNA in promotore del gene RASSF1A in primaria del cancro gastrico
Come mostrato in fig. 3, la frequenza di metilazione del RASSF1A in GC era 3,5 volte superiore a quello dei corrispondenti tessuti normali (66,7% vs 14,8%, P < 0,0001). espressione di mRNA RASSF1A tra metilazione e unmethylation gruppi in GC erano significativamente differenti, il primo è 2,6 volte inferiore rispetto al secondo (0,1384 ± 0,1142 vs 0,5018 ± 0,2463, P
< 0,0001). I risultati hanno mostrato che hypermethylation presso l'isola CpG nel promotore RASSF1A è fortemente associato con significativamente ridotta espressione di mRNA di RASSF1A. Figura 3 metilazione di RASSFIA nel carcinoma gastrico primario e tessuto normale corrispondente da MSP. Corsia 3, 4 e Lane 6, 7 mostrano un risultato rappresentativo di un campione tumorale e normale, rispettivamente. U: prodotto amplificato con primer riconoscere sequenze non metilato; M: prodotto amplificato con primer riconoscere sequenze metilate. DNA genomico, metilato in vitro da CpG metilasi (Sss I) è stato utilizzato come controllo positivo. blank acqua è stato utilizzato come controllo negativo. I prodotti di PCR sono stati risolti su un 8% gel di poliacrilammide
associazione tra metilazione e parametri clinico-patologici di cancro gastrico
L'associazione tra metilazione del promotore e le caratteristiche demografiche e clinico-patologici rilevanti tra cui sesso, età, sito del tumore, metastasi linfonodali, a distanza metastasi, la differenziazione, lo stadio e il tipo di Lauren sono stati mostrati in tabella 1. non c'era alcuna associazione significativa tra metilazione del promotore ed i parametri clinico-patologici.
Discussione
in questo studio abbiamo dimostrato che l'espressione RASSF1A in GC è stato ridotto a livello di mRNA e livelli di proteine ​​e la metilazione nella regione promoter del gene RASSF1A era 3,5 volte più frequenti in GC primaria che in corrispondenti tessuti normali. Inoltre, l'incidenza di pazienti con CG promotore RASSF1A metilato sopra non metilato era 2 volte superiore. Questi suggeriscono che l'espressione RASSF1A in GC è stato fortemente associato con lo status metilazione del promotore del gene RASSF1A. Per confermare ulteriormente il rapporto tra l'espressione del RASSF1A e la metilazione del promotore, abbiamo confrontato espressione dell'mRNA RASSF1A tra metilazione e unmethylation tessuti GC, e abbiamo trovato che la metilazione aberrante della regione RASSF1A gene promotore è responsabile della riduzione o perdita di RASSF1A mRNA espressione in GC primaria. Il nostro studio è coerente con uno studio che ha dimostrato che il 45,6% GC primaria non ne aveva o l'espressione di mRNA anormalmente basso di RASSF1A [5]. Tra 30 set accoppiati dagli stessi pazienti è stato trovato il 73,3% di GC ad avere una ridotta espressione RASSF1A [5]. Per la nostra migliore conoscenza, è stato riportato nessuno studio di espressione della proteina RASSF1A in GC. Abbiamo analizzato ulteriore espressione RASSF1A a livello di proteina mediante Western blotting in 20 pazienti GC e abbiamo trovato che l'espressione della proteina nei tumori è solo il 21,4% della espressione nei tessuti normali. Questo risultato ha indicato che l'espressione della proteina RASSF1A in GC era significativamente inferiore a quello del corrispondente tessuti normali adiacenti. Ciò è coerente con l'espressione di mRNA di RASSF1A.
Il meccanismo di espressione RASSF1A ridotto o tacere potrebbe essere causato da metilazione promotore e /o mutazione del gene RASSF1A. Tuttavia, numerosi studi hanno dimostrato che la mutazione del gene RASSF1A è molto raro [4, 5, 7, 12, 13]. Così, gene RASSF1A è probabilmente inattivato da meccanismi di methyltion. Byun et al [5] ha rilevato che su 41 GC primaria con perdita o riduzione anormale di espressione RASSF1A, 39 sono stati metilato, mentre in entrambi GC e tessuti normali con normale nessuno espressione RASSF1A stati denaturato. Per et al [10] ha mostrato che ipermetilazione di promotore RASSF1A stato trovato nel 25,8% di GC e 11,1% della metaplasia intestinale gastrica (IM), rispettivamente. I nostri dati ha mostrato che la frequenza di RASSF1A metilazione in GC era superiore sopra riportati dati. GC è molto diffusa in Cina e ad alta metilazione di RASSF1A può spiegare in parte la ragione per cui l'incidenza GC è più elevata in cinese. È interessante notare che il fatto che RASSF1A ipermetilazione del promotore è più alto in EBV GC positivo che in negativo EBV carcinoma (66,7% vs 3,6%) può suggerire una stretta associazione tra EBV e la metilazione aberrante in GC. In effetti, una precedente relazione ha indicato che oncogenesi virale potrebbe coinvolgere la metilazione aberrante, con conseguente inattivazione di geni oncosoppressori [9].
Abbiamo scoperto che la frequenza di metilazione di RASSF1A in GC primaria e nei corrispondenti tessuti normali sono stati 66,7% e 14,8% rispettivamente. I nostri dati hanno mostrato che su 54 pazienti CG 36 erano metilato e 18 erano non metilato, suggerendo GC metilato è più comune, in accordo con le altre relazioni. Lo studio precedente [14] ha suggerito che lo stomaco è uno dei tessuti normali con un'alta frequenza di metilazione invecchiamento legati, e cancro gastrico è uno dei tumori con un'alta frequenza di isole CpG metilazione. Kang et al [15] ha studiato lo stato di metilazione di 11 geni in mucosa gastrica non neoplastica e hanno trovato che aberrante metilazione CpG isola si è verificato spesso in gastrite cronica, che ha mostrato rapporto di invecchiamento, e che la metilazione di invecchiamento legati era gene tipo-specifica. gene RASSF1A era raramente metilato, senza alcuna relazione all'invecchiamento. Inoltre, altri autori hanno riportato [3-5] che nei tessuti normali, non sono stati rilevati alleli RASSF1A denaturato. Tuttavia, i nostri dati hanno mostrato che nelle corrispondenti tessuti normali, il frenquency RASSF1A metilazione era alta percentuale (14,8%). La discrepanza tra i nostri dati e di altri autori 'può essere dovuto alla differenza dei campioni, che abbiamo studiato sono stati i tessuti gastrici non nesoplasia in pazienti con cancro gastrico ed è molto probabile che includono tessuti gastrite cronica, tessuti metaplasia soprattutto intestinali nel corrispondenti tessuti normali adiacenti. Lo studio precedente riferito che diversi geni erano frequentemente metilato nella gastrite cronica, soprattutto nei tessuti metaplasia intestinale. Per et al [10] hanno esaminato lo stato 8 tumorale legati gene metilazione compreso RASSF1A in metaplasia intestinale gastrica in pazienti con e senza cancro gastrico, e hanno trovato che la frequenza di metilazione in RASSF1A nel cancro e metaplasia intestinale erano 25,8% e 11,1% rispettivamente. Il risultato è stato coerente con la nostra. In effetti, abbiamo sequenziato i prodotti MSP per diversi campioni. La sequenza è stato coerente alla sequenza previsto (dati non mostrano). Abbiamo trovato che le bande non metilate coesistono sempre con bande denaturato in più GC primaria e corrispondenti tessuti normali adiacenti nonostante riduzione o perdita di espressione RASSF1A, coerente con le precedenti relazioni [4, 10]. Questo è più probabile che questi tumori asportati non sono state microdissezione e sono stati contaminati con le cellule stromali. Inoltre, MSP è estremamente sensibile. Bai et al [16] hanno trovato che il rilevamento di queste due bande rappresenta o eterogeneità intra-allelico dell'isola metilazione CpG o metilazione dell'isola variabile da allele allele. In alternativa, il risultato potrebbe indicare che la metilazione parziale del gene promotore RASSF1A basta tacere trascrizione genica poiché la perdita di una copia singola gene è sufficiente a promuovere la formazione del tumore [17, 18]. Tommasi et al [19] ha osservato che topi knockout eterozigoti RASSF1A erano significativamente tumore a rischio, sia per la formazione del tumore spontaneo e per i tumori indotti chimicamente. Ciò potrebbe suggerire che il gene RASSF1A ha le caratteristiche di conferire aploinsufficienza quando un solo allele è perduto.
Indaghiamo anche l'associazione tra ipermetilazione del promotore e parametri clinico-patologici rilevanti tra cui l'età e il sesso dei pazienti, del sito del carcinoma, differenziazione istologica, tipo di Lauren e metastasi del GC. Abbiamo scoperto che la frequenza della metilazione del gene RASSF1A era nettamente superiore nei tumori avanzati rispetto ai tumori in stadio precoce (68,6% vs 33,3%), e la più alta nei tumori scarsamente differenziati (75% vs 60%) se confrontato con pozzo e tumori moderatamente differenziato . Tuttavia, queste differenze non raggiungono la significatività statistica. Byun et [5] al hanno dimostrato che l'inattivazione di RASSF1A è stata correlata con lo stadio del tumore e grado, ma non con tipi istologici di tumore. La discrepanza può spiegare da campioni limitati per GC presto nel nostro studio.
Trasfezione di geni RASSF1A riduce la crescita di cellule tumorali umane in vitro e in vivo [3, 4], sostenendo un ruolo per RASSF1A come un gene soppressore del tumore. RASSF1A attivazione di RAS può richiedere eterodimerizzazione di RASSF1A e il romanzo di Ras effettrici (NORE1), e di indurre apoptosi attraverso la sua interazione con Ras, NORE1, il connettore potenziatore di KSR (CNK) e la chinasi MST1-apoptotica pro [20]. Diversi gruppi hanno riportato che RASSF1A è una proteina microtubuli vincolante e regola la progressione mitotico [21-25], e può funzionare nelle vie di trasduzione del segnale che coinvolgono RAS come piccole proteine ​​GTPasi. Tommasi et al [19] ha dimostrato che RASSF1A
- /- e RASSF1A +/-
topi hanno aumentato la molteplicità del tumore e le dimensioni del tumore, suggerendo ulteriormente il ruolo di soppressione del tumore di RASSF1A, il che può spiegare la sua frequente inattivazione epigenetica in tumori umani.
Conclusione
in sintesi, l'espressione di RASSF1A era marcatamente ridotto ad un livello anormale o completamente perso in GC primario rispetto al tessuto normale adiacente, ed era correlata al ipermetilazione del promotore del gene RASSF1A. Ulteriore lavoro è necessario per chiarire la sua esatta funzione e l'interazione con altri fattori per sviluppare strategie per la diagnosi precoce, la prevenzione e il trattamento del cancro gastrico
Dichiarazioni
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto da una sovvenzione (No:. 2004AA301C91 ) da Hubei Science and Technology Foundation per Mei Ye e borsa di studio dal Centro di ricerca delle Malattie Digestive dell'Università di Wuhan Zhongnan Hospital. Gli autori ringraziano il Prof. Tan Jinquan per i suggerimenti critici e membri dello staff del Laboratorio chiave di allergie e malattie immuno-correlati a Wuhan University School of Medicine per l'assistenza tecnica. Fascicoli presentati originali
d'autore per le immagini
Di seguito sono elencate le i collegamenti ai file originali presentati degli autori per le immagini. 'file originale per la figura 1 12885_2007_770_MOESM2_ESM.jpeg Autori 12885_2007_770_MOESM1_ESM.jpeg autori file originale per il file originale figura 2 12885_2007_770_MOESM3_ESM.jpeg degli autori per la figura 3 interessi concorrenti
L'autore (s) dichiarano di non avere interessi in gioco.

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