Vereniging van verminderde expressie van RASSF1A met promotor methylatie in primaire maagkanker van patiënten van centraal China

Vereniging van verminderde expressie van RASSF1A met promotor methylatie in primaire maagkanker van patiënten van De abstracte centraal China achtergrond
Hoewel methylatie-gemedieerde inactivatie van de expressie van RASSF1A, een kandidaat tumor suppressor-gen, is waargenomen in verschillende menselijke kankers, de gegevens met betrekking tot wijziging van RASSF1A expressie en methylatie in Chineese lagere maagkanker zijn schaars. Bovendien, direct bewijs voor het verband tussen eiwitexpressie van RASSF1A en primaire menselijke kankers ontbreekt. Het doel van deze studie was het RASSF1A expressie in weefsel van primaire maagkanker (GC) en mRNA en eiwitniveaus onderzoeken en de mogelijke relatie tussen status DNA methylatie en eiwitexpressie van RASSF1A in Chinese vestigen.
Methods
vierenvijftig patiënten met primaire maagkanker werden opgenomen in de studie van RASSF1A mRNA expressie en methyleringsstatus tussen het kankerweefsel en de overeenkomstige aangrenzend normaal weefsel. 20 van de 54 patiënten werden opgenomen voor de studie van RASSF1A eiwitexpressie. De expressie van RASSF1A in mRNA en eiwitniveaus werd bepaald door RT-PCR en Western-blotting, respectievelijk. De RASSF1A promoter methylering werd gedetecteerd door methylatie-specifieke PCR
Resultaten
RASSF1A mRNA en eiwit uitdrukkingen in GC waren significant gereduceerd met vergelijking met de overeenkomstige normale weefsels (OD-waarde:. 0,2589 ± 0,2407 vs 0,5448 ± 0,2971, P
< 0,0001; 0,1874 ± 0,0737 vs 0,6654 ± 0,2201, P Restaurant < 0,0001, respectievelijk). Methylering frequentie van RASSF1A in primaire GC is hoger dan in de overeenkomstige normale weefsels (66,7% vs. 14,8%; p
< 0,0001). Verder werd mRNA expressie in RASSF1A methylering groep van GC verder verminderd in vergelijking met de groep unmethylation GC (0,1384 ± 0,1142 vs 0,5018 ± 0,2463, P
< 0,0001)
Conclusie
Expressie van RASSF1A. werd gereduceerd weefsel van GC mRNA en eiwitniveaus. Verminderde expressie van RASSF1A geassocieerd met de promoter methylatie. Achtergrond
Maagkanker (GC) is een van de meest voorkomende kwaadaardige tumoren van gastro-intestinale aandoeningen. Hoewel de incidentie van GC afneemt in de ontwikkelde provincies, het is nog steeds een belangrijke oorzaak van overlijden door kanker in de meeste ontwikkelingslanden. Zowel genetische als milieufactoren waaronder H. pylori infectie
zijn ook bijdragen tot de ontwikkeling van GC. Recent hebben verscheidene studies aangetoond dat stilte van tumorsuppressorgenen via epigenetische modificatie is een fundamenteel mechanisme voor inactivering kankergerelateerde genen in de pathogenese van menselijke kanker [1]. Van bijzonder belang is het feit dat promoter hypermethylering een essentiële rol bij het functieverlies van tumorsuppressorgenen speelt.
Allelen verlies op chromosoom 3p21.3 is een van de meest voorkomende genetische veranderingen in verschillende typen menselijke kankers [2 ]. In de late 90's, Dammann [3] en Burbee [4] et al geïdentificeerd RASSF1A, een nieuw gen van de gemeenschappelijke homozygote deletie gebied op 3p21.3. Dit gen deelt homologie met zoogdier RAS effectoren. Er zijn zeven RASSF1 isovormen (A tot G) gegenereerd door middel van alternatieve splicing RASSF1A is aangetoond dat tumorvorming verlagen in vivo en wordt vaak geïnactiveerd in diverse primaire humane kankers. Genetische mutaties in deze isovorm zijn zeldzaam. Het is bekend dat epigenetische inactivatie van RASSF1A associeert met CpG eilanden methylatie van het promotergebied. Bisulfaat DNA sequencing heeft aangetoond dat Hypermethylering van de promotorregio inactiveert RASSF1A uitdrukking in de grote menselijke kankers. Dit wordt ondersteund door de waarneming van re-expressie van RASSF1A in verscheidene kankercellijnen behandeld met demethylerende middelen [4-7]. Tot op heden hebben diverse studies aanwezigheid van afwijkende promoter methylatie van RASSF1A en verlies of abnormaal lage expressie van RASSF1A primaire GC aangetoond, wat suggereert dat inactivering van RASSF1A expressie nauw verbonden met de promotor methylatie [5, 8-10]. Naar ons beste weten, geen gegevens over de expressie van RASSF1A en methylatie status van GC in Chinese bevolking beschikbaar zijn. In de huidige studie, hebben we de expressie van RASSF1A bepaald bij zowel mRNA en eiwit niveaus, en hun associatie met RASSF1A bevorderen methylatie status van Chinese primaire GC in het Midden-China.
Methods
Patiënten
Fifty-vier patiënten met primaire GC in de Wuhan University Zhongnan Ziekenhuis en de Hubei Provincial kanker ziekenhuis werden geregistreerd van december 2003 tot juni 2005, en alle van de patiënten onderging curatieve resectie met een systematische lymfeklier dissectie. GC weefsels en bijbehorende aangrenzende normale maag weefsels werden verkregen uit operationele activiteiten voor de chemotherapie. De patiënten die 35 mannen en 19 vrouwen, gemiddelde leeftijd 57,6 ± 13,7 jaar (range 30-85 jaar). Diagnose en differentiaties van GC werden bepaald door histopathologische onderzoeken en de TNM classificatie. De demografische en klinische en pathologische gegevens van de patiënten worden samengevat in tabel 1. Van 54 patiënten met GC, werden 20 gevallen hierbij voor onderzoek van eiwitexpressie van RASSF1A. Het protocol van het onderzoek werd goedgekeurd door de ethische commissie van Wuhan University Zhongnan Hospital. Tumor en aangrenzend normaal weefsel verkregen op het moment van de operatie, snel bevroren in vloeibare N 2 en bewaard bij -80 ° C tot gebruik. Steekproef werden gekleurd in H & E en werden onderzocht door twee ervaren pathologists.Table 1 Vereniging van RASSF1A genmethylatie met demografie en klinisch-pathologische kenmerken van de primaire maagkanker (n = 54)

Methylering
P-waarde
OR (95% CI)

Ja
Nee


Gender
mannelijke
24
11
0,766
1.273 (0,393 ~ 4,117)
vrouwelijke
12
7
Age Restaurant < 60
17
13
0,145
0,344 (0,101 ~ 1,167)
≥ 60
19
5
Tumor plaatsen
antrum
14
7
lichaam en cardiale
22
11
1,000
1,000 (0,313 ~ 3,192)
Stages
vroege
1 2
0,255
0,229 (0,019 ~ 2,708)
geavanceerde
35
16
lymfekliermetastasen
ja
22
7
0,154
2,469 (0,774 ~ 7,882 )
geen
14
11
Distant metastase
ja
5 1
0,651
2,742 (0,296 ~ 25,424)
geen
31
17
Differentiaties
goed en gematigde
18
12
0,384
0.500 (0,154 ~ 1,624)
slechte
18
6
Lauren's
Intestinal soort
12
10

• Thymidinefosforylase /β-tubuline III uitdrukkingen voorspellen van de respons in het Chinees gevorderde maagkanker patiënten die eerste lijn capecitabine plus paclitaxel
• Het evalueren van een computer steun voor het beoordelen van de maag symptomen (ECASS): onderzoeksprotocol voor een gerandomiseerde gecontroleerde trial