Asociación de disminución de la expresión de RASSF1A con la metilación del promotor en el cáncer gástrico primario de pacientes del centro de China

Asociación de disminución de la expresión de RASSF1A con la metilación del promotor en el cáncer gástrico primario de pacientes de
Resumen Antecedentes centro de China

Aunque la inactivación metilación mediada por la expresión de RASSF1A, un gen supresor tumoral candidato, se ha observado en varios cánceres humanos, los datos relativos a la alteración de la expresión de RASSF1A metilación y en el cáncer gástrico primario chinos son escasos. Por otra parte, la evidencia directa que muestra la relación entre la expresión de la proteína de RASSF1A y cánceres primarios humanos es insuficiente. El objetivo de este estudio fue investigar la expresión RASSF1A en el tejido de cáncer gástrico primario (GC) en los niveles de ARNm y proteínas, y para establecer la posible relación entre el estado de metilación del ADN y la expresión de la proteína de RASSF1A en chino.
Métodos
Cincuenta y cuatro pacientes con cánceres gástricos primarios se incluyeron en el estudio de la expresión y la metilación estado RASSF1A mRNA entre el tejido de cáncer y el correspondiente tejido normal adyacente. 20 de los 54 pacientes se incluyeron para el estudio de la expresión de la proteína RASSF1A. La expresión de RASSF1A en ARNm y los niveles de proteína se determinó por RT-PCR y Western-Blot, respectivamente. El promotor de la metilación RASSF1A fue detectado por PCR metilación específica
Resultados
RASSF1A ARNm y proteína expresiones en GC se redujo significativamente con respecto a los tejidos normales correspondientes (valor de DO:. 0,2589 ± 0,2407 vs 0,5448 ± 0,2971, p
< 0,0001; 0,1874 ± 0,0737 vs 0,6654 ± 0,2201, P Hotel < 0,0001, respectivamente). la frecuencia de metilación de RASSF1A en GC primaria es mayor que en los tejidos normales correspondientes (66,7% vs. 14,8%, P
< 0,0001). Además, la expresión de ARNm en RASSF1A grupo metilación de GC se redujo aún más en comparación con el grupo de no metilación de GC (0,1384 ± 0,1142 0,5018 ± 0,2463 vs., P
< 0,0001)
Conclusión
Expresión de RASSF1A. se redujo en el tejido de GC en los niveles de ARNm y de proteínas. expresión disminuida de RASSF1A se asoció con la metilación del promotor.
Antecedentes
cáncer gástrico (GC) es una de las enfermedades malignas más comunes en enfermedades gastrointestinales. Aunque la incidencia de GC está disminuyendo en los países desarrollados, sigue siendo la principal causa de muerte por cáncer en la mayoría de los países en desarrollo. Tanto los factores genéticos y ambientales, incluyendo la infección por H. pylori
han sido considerados para contribuir al desarrollo de la GC. Recientemente, varios estudios han demostrado que el silencio de los genes supresores de tumores mediante la modificación epigenética es un mecanismo fundamental para la inactivación de los genes relacionados con el cáncer en la patogénesis del cáncer humano [1]. De la nota particular es el hecho de que la hipermetilación del promotor juega un papel esencial en la pérdida de la función de los genes supresores de tumores.
Pérdida alélica en el cromosoma 3p21.3 es uno de los cambios genéticos más frecuentes en varios tipos de cánceres humanos [2 ]. A finales de la década de los 90, Dammann [3] y Burbee [4] y col RASSF1A identificado un nuevo gen de la zona común homocigotos supresión en 3p21.3. Este gen comparte homología con efectores de mamíferos RAS. Hay siete isoformas RASSF1 (A a G) generados a través de RASSF1A corte y empalme alternativo se ha demostrado para reducir la tumorigenicidad in vivo y se inactiva con frecuencia en una variedad de cánceres humanos primarios. Las mutaciones genéticas en esta isoforma son raros. Se sabe que el silenciamiento epigenético de asociados RASSF1A con CpG islas de metilación de la región promotora. La secuenciación del ADN bisulfato ha demostrado que la hipermetilación de la región promotora inactiva la expresión RASSF1A en los principales cánceres humanos. Esto es apoyado por la observación de la re-expresión de RASSF1A en varias líneas celulares de cáncer tratados con agentes desmetilantes [4-7]. Hasta la fecha, varios estudios han demostrado la presencia de metilación aberrante promotor de RASSF1A y la pérdida o baja expresión anormal de RASSF1A en GC primaria, lo que sugiere que la inactivación de la expresión de RASSF1A está estrechamente asociado con la metilación del promotor [5, 8-10]. Para nuestro conocimiento, no hay datos relativos a la expresión de RASSF1A y metilación estado por GC de la población china están disponibles. En el presente estudio, hemos determinado la expresión de RASSF1A, tanto a nivel de ARNm y proteínas, y su asociación con RASSF1A promover el estado de metilación en GC primaria chino en China central.
Métodos Pacientes

Cincuenta y cuatro pacientes con GC primaria se registraron en la Universidad Zhongnan Wuhan hospital y el hospital Provincial de Hubei cáncer entre diciembre de 2003 junio de 2005, y todos los pacientes fueron sometidos a resección curativa con disección ganglionar sistemática. GC tejidos y tejidos gástricos normales adyacentes correspondientes se obtuvieron de las operaciones antes de la quimioterapia. Los pacientes incluidos 35 hombres y 19 mujeres, con una edad media de 57,6 ± 13,7 años (rango de 30 a 85 años). Diagnóstico y diferenciaciones de GC se determinaron mediante exámenes histopatológicos y la clasificación TNM. Los datos demográficos y clínico-patológicas de los pacientes se resumen en la Tabla 1. Entre los 54 pacientes con GC, se incluyeron 20 casos de estudio de la expresión de la proteína de RASSF1A. El protocolo del estudio fue aprobado por el comité de ética del Hospital de la Universidad de Wuhan Zhongnan. Tumor y los tejidos normales adyacentes se obtuvieron en el momento de la cirugía, se congelaron en N líquido 2 y se almacenaron a -80 ° C hasta su utilización. secciones de la muestra fueron teñidas en H & E y fueron examinados por dos experimentados pathologists.Table 1 Asociación de RASSF1A metilación del gen con la demografía y las características clínico-patológicas de cáncer gástrico primario (n = 54)

metilación
valor de p
OR (IC del 95%)

Sí No




Sexo masculino

24 página 11
0.766 1.273
(0.393 ~ 4.117) guía empresas hembra 12 página 7
Edad Hotel < 60
17 página 13
0,145
0.344 (0.101 ~ 1.167)
≥ 60 página 19 página 5
sitios tumorales
antro página 14
7
cuerpo y
cardiaca 22 página 11
1.000
1.000 (0.313 ~ 3.192) Francia stages
temprana
1
2 0,255
0.229 (0.019 ~ 2.708)
avanzó
35
16
metástasis de ganglios linfáticos
sí
22 página 7
0,154
2.469 (0.774 ~ 7.882 )
ninguna página 14 página 11
metástasis a distancia
sí
página 5 1

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