Clinicopathological lastnosti in prognostične vloge KRAS, BRAF, PIK3CA in nacionalni regulativni organi mutacij v napredovalem raku želodca

Clinicopathological lastnosti in prognostične vloge KRAS, BRAF, PIK3CA in nacionalni regulativni organi mutacij v napredovalem raku želodca
Abstract
Ozadje
RAS-RAF-MEK-ERK in PI3K-AKT poti predstavljajo pomemben kaskade za potencialne ciljne terapije molekularni v napredovalem raku. Klinični pomen mutacije v teh genov v napredovalega raka želodca (AGC) je negotova.
Metode
zbrani smo formalin-fiksno,-parafinske vgrajeni in sveže zamrznjene tumorja vzorce bolnikov AGC in analizirali na KRAS, NRO BRAF
in PIK3CA
mutacije z neposredno sekvenciranje. Mi naknadno raziskovale clinicopathological značilnosti teh mutacij pri bolnikih z AGC in izbranih bolnikov z metastatskim rakom želodca.
Rezultati
Med 167 bolniki AGC, mutacije Krasa
kodonoma 12/13 (N
= 8 /164, 4,9%), PIK3CA
(N
= 9/163, 5,5%) in slednji PODJETJA
kodonsko 12/13 (N
= 3/159, 1,9%) je bilo zaznano. Primerjava clinicopathological značilnosti mutirani KRAS, PIK3CA, nacionalni regulativni organi
genov s povsem divji tip teh genov je pokazala, da je bila pogostnost črevesne tipa bistveno višja pri bolnikih, pri katerih tumorsko tkivo vsebuje Kras
mutacije (P
= 0,014). Med 125 bolnikih z metastatskim rakom želodca,
kodon 12/13 mutacije v njihovih tumorjih so imeli bolniki z nacionalnimi regulativnimi organi krajše celokupno preživetje v primerjavi z nacionalnimi regulativnimi organi
bolnikov divjega tipa (MST: 14.7 vs 8,8 mesecev, P
= 0,011 ). Z analizami multivariatne, nacionalni regulativni organi
kodonsko 12/13 mutacija je bil kazalec za slabo prognozo pri bolnikih z metastatskim rakom želodca (prilagojeno HR 5,607, 95% CI: 1,637-19,203).
Sklepi
Naša raziskava je pokazala, da mutacije KRAS, PIK3CA
in NRO
bili redki v AGC. Nacionalni regulativni organi
mutacije bi bile povezati s slabo prognozo metastatskega stanja bolnikov, AGC, vendar je potrebna dodatna potrditev drugih raziskav.
Ozadje
raka želodca je drugi najpogostejši vzrok smrti zaradi raka na svetu s približno 989.600 novih primeri in 738,000 smrti na leto, kar predstavlja približno 8 odstotkov novih raka [1]. Najvišje stopnje pojavnosti v vzhodni Aziji, na Andov v Južni Ameriki in vzhodni Evropi, medtem ko je najnižja v Severni Ameriki, Severni Evropi, in večina držav v Afriki in jugovzhodni Aziji.
Zaradi razvoja sistemske kemoterapijo, se je v zadnjem desetletju izboljšala čas preživetja za napredovalega raka želodca (AGC). Fluoropirimidom in platina režim je standard v prvi liniji kemoterapije pri bolnikih HER2-negativna metastatskega raka želodca (MGC), in dodal, da XP trastuzumab je standardna kemoterapija pri bolnikih MGC HER2 pozitivnih na Japonskem [2-5]. Čeprav so nekateri bolniki AGC dobimo klinično korist sistemsko kemoterapijo, je večina bolnikov ni dosegla klinično zadovoljiv rezultat. je bila potrebna nova obdelava MGC z bolj učinkovitimi in manj strupenih shem kemoterapije.
preskušanjih faze III molekularno zdravljenja z mTOR inhibitor, anti-VEGF protitelesa za, so poročali o anti-EGFR protitelesa v AGC ali gastroezofagealne raka, vendar teh zdravil ni bilo mogoče dokazati, da so pomembne učinkovitosti [6, 7]. V zadnjem času, ramcirumab, anti-VEGFR ciljno monoklonsko protitelo, so poročali, da se izboljša preživetje pri bolnikih MGC kemoterapijo neodzivna. To bi bilo pomembno terapevtsko prednost, da se določijo učinkovite biomarkerjev, da se ujemajo z odzivnih rakave celice z ustrezno molekularno ciljno droge in razjasni nadaljnje mehanizme, povezane z odpornostjo na kemoterapijo.
Mitogeni aktivira protein kinazo The (MAPK) je del znatnega znotrajcelične signalne poti, ki ureja različne celične funkcije, vključno celične proliferacije, regulacija celičnega cikla, preživetje celic, angiogenezo in migracije celic [8]. V Ras proteini so bili prvotno opredeljeni kot sestavin preoblikovanju onkogenih virusi, medtem ko je bil nacionalni regulativni organi
opredeljena kot sestavni del preoblikovanje za nevroblastoma. Ras mutacije so na voljo v več kot 30% vseh rakov in so še posebej pogoste v trebušne slinavke in debelega črevesa raka. Raf zaposli na celično membrano z vezavo na Ras in se aktivira v zapletenem postopku, ki vključuje fosforilacije in več kofaktorjev. BRAF
mutacije imajo ozko porazdelitev, vendar prevladujejo v nekaj posebnih malignih bolezni, kot so melanom, papilarnega raka ščitnice, in nizke stopnje rakom jajčnikov [9-11]. Pomen fosfoinozitidnih 3-kinaze (PI3Ks) v raka je bila potrjena z odkritjem, da je v PIK3CA
gen, ki kodira PI3K katalitična podenoto p110α, pogosto mutiral v nekaterih najpogostejših človeških tumorjih [12]. Te genetske spremembe v PIK3CA
sestavljeni izključno iz somatskih missense mutacij združenih v dva "hotspot" regij v eksonov 9 in 20, ki ustrezajo spiralne in kinaznih domen p110α, oziroma [13].
Pred kratkim je uporaba KRAS
, BRAF
, PIK3CA
in nacionalni regulativni organi
kot je bilo biomarkerjev za molekularno ciljno zdravljenje pri solidnih tumorjev veliko razpravljalo. Več mali biomarker analize KRAS
, BRAF
in PIK3CA
mutacije so že poročali v AGC [14-16]. Klinični pomen teh mutacij pri bolnikih AGC še ni pojasnjena, in so potrebne nadaljnje preiskave teh znotrajceličnih molekularne spremembe.
V tej študiji smo opravili genomsko analizo KRAS
, BRAF
, PIK3CA
in nacionalni regulativni organi
mutacije, da bi raziskali clinicopathological značilnosti in napovedni pomen genskih mutacij pri bolnikih AGC.
Metode
pacientov in vzorčno zbirko
so vsi podatki, pridobljeni iz podatkovne baze naših oddelek, in grafikon pregled je bilo narejeno za vsakega bolnika, da bi dobili pomembne informacije. Zbrali smo vzorce tkiva za analizo stanja genske mutacije v KRAS, BRAF, PIK3CA
in NRO
. Vzorce tkiva sestavljena iz vzorcev, uporabljenih v prejšnjih raziskavah biomarkerjev v naši ustanovi [2, 17] in svežih vzorcev zamrznjenega tkiva, ki so bili pridobljeni iz prejšnjih kirurške resekcije v AGC v naši ustanovi. smo zbrali vzorce tumor tkiva za 173 bolnikov, AGC, vendar so bili izključeni dovolj vzorcev iz 6 bolnikov. Končno smo uporabili 167 vzorcev tkiv bolnikov, AGC in raziskovali genskih mutacij KRAS
, BRAF
, PIK3CA
in nacionalni regulativni organi
z metodo neposrednega-zaporedja (cela kohorta). Med 167 bolniki AGC, 42 bolnikov je doživel kirurško resekcijo brez sistemske kemoterapije (non-metastatskega kohorte kot skupine A) in 125 bolnikov z metastatskim rakom želodca prejeli sistemsko kemoterapijo (metastatskega kohorte kot skupine B). Diagram tej študiji je prikazano na sliki 1. obveščanju soglasju z uporabo pacientovih tumorske tkiva je bil potrjen od vseh bolnikov, ki so sodelovali v študiji, ki je bila izvedena z odobritvijo institucionalne etične presoje odbora National Cancer Center v v skladu s Helsinško deklaracijo iz leta 1975 (kot je bil spremenjen leta 1983). Slika 1 Diagram te študije.
Genomska analize KRAS, BRAF, PIK3CA in NRO
vzorce DNA so bili pridobljeni iz, sveže zamrznjene odsekov tumor tkiva, formalin določen parafina-vgrajeni (FFPE) in. Tumorske celice območja bogata v poglavju hematoksilinom in eozinom bile označene pod mikroskopom in tkiva smo opraskan iz območja drugega deparaffinized neobarvano odseku. DNK iz kosov na praske vzorca tkiva smo izolirali z QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (QIAGEN KK, Tokio, Japonska). Ekson 2 (kodona 12, 13), eksona 3 (kodona 61), ekson 4 (kodon 146) Krasa
gena in ekson 15 (kodona 600) z BRAF
gena in ekson 9 (kodon 542, 545) , ekson 20 (kodon 1047) z PIK3CA
gena in ekson 2 (kodona 12, 13), smo ekson 3 (kodon 61) NRO
gena pomnožili s PCR (v GeneAmp PCR sistem 9700 toplotno ciklerja). PCR produkt smo prikazali uporabo elektroforezo na agaroznem gelu z etidijevim bromidom obarvanje in se neposredno zaporedje uporabo ABI 3130x /Genetic Analyzer (Life Technologies Japonska (Applied Biosystems), Tokio, Japonska), v skladu z navodili proizvajalca.
Zdravljenje
skupno 125 bolnikov, v skupini B prejemalo sistemsko kemoterapijo. Režimi prvega izbora kemoterapijo sestavljali CP (n = 42, 33,6%), S-1 (n = 39, 31,2%), 5-FU (n = 10, 24,0%), kombinacija 5-FU in metotreksat (n = 10, 8,0%), paklitaksel (n = 3, 2,4%) in XP in /ali bevacizumab (n = 1, 0,8%). Ključni zdravila proti raku za AGC na Japonskem fluoropirimidina (5-FU, S-1, kapecitabin), cisplatina, irinotekan in taksan. V celotnem poteku sistemsko kemoterapijo v skupini B je bil delež bolnikov, ki prejemajo 5-FU, so cisplatin, irinotekan in taksan 85,6% (n = 107/125), 52,8% (n = 66/125), 60,8% (n = 76/125), 36,0% (n = 45/125) oz. Poleg tega je 22 bolnikov (17,6%) prejelo vseh ključnih zdravil proti raku, 37 bolnikov (29,6%) je prejela 3 ključnih zdravil, 30 bolnikov (24,0%) je prejela 2 ključnih zdravil, in 36 bolnikov (28,8%) prejela le eden od ključnih zdravil proti raku. Časovne načrte in odmerki CP, so S-1 in 5-FU, ki temelji na prejšnjih poročilih [17]. Paklitaksel v monoterapiji je ponovil trikrat na teden 4 tedne in docetaksela v monoterapiji je bila dana v obliki intravenske infuzije enkrat na 3 tedne.
Statistične analize
smo ocenili delež vsakega KRAS
, BRAF
, PIK3CA
in nacionalnim regulativnim organom
mutacija v celi skupini in napovednih vrednosti teh mutacij, ki so prilagojene spremenljivke značilnosti bolnikov z vidika skupnega preživetja (OS) v metastatskega skupini B. OS je bil definiran kot interval od začetka po kemoterapiji prvega izbora za smrt ali zadnji nadaljnje aktivnosti.
smo izvedli statistične analize, ki jih statistične programske opreme SPSS, verzija 19 (IBM, Tokio, Japonska). Razlike v porazdelitvi spremenljivk smo ovrednotili s pomočjo natančnega testa Fisher ali hi-kvadrat testa, kot je primerno. Mediana časa preživetja (MST), je bila ocenjena z metodo in preživetja krivulj Kaplan-Meier smo primerjali s testom log-ranga. Vsi testi so bili dvostranski in p vrednost < 0,05 bil definiran kot statistično značilne. Ocenili smo razmerje ogroženosti (HR) in ustreza 95% interval zaupanja (CI) za OS s pomočjo univariatne in multivariatne analize, ki jih modelov nevarnosti delež Cox. Spremenljivke v tej analizi vključeni starost (≥median /< mediana), spol (moški /ženski), ECOG PS (0 /1-2), histološka vrsta klasifikacije Lauren (intestinalni tip /difuzni tip), število metastatskih mest ( single /multiple).
Rezultati
Direct zaporedja vzorcev tkiv v skupini B določi delež vsakega od KRAS
, BRAF
, PIK3CA
in NRO
(tabela 1). Mutacije gena KRAS
kodon 12 (3,7%, n = 6/164) in KRAS
kodonskega 13 (1,2%, n = 2/164), PIK3CA
ekson 9 (4,9%, n = 8 /163), PIK3CA
ekson 20 (0,6%, n = 1/163) in nacionalni regulativni organi
mutacije (1,9%, n = 3/159) so bile odkrite. Po drugi strani pa mutacije gena KRAS
kodon 61, niso bili odkriti KRAS
kodon 146, BRAF
V600E in slednji
kodon 146. KRAS
kodon 12 mutacije sestavljalo G12D (35G > A, n = 4), G12S (34g > A; n = 1) in G12N (34 35GG > AA, n = 1) in kodonsko 13 mutacij sestavljalo G13S (37 g > A; n = 1) in G13V (38 39GC > TT, n = 1). PIK3CA
ekson 9 mutacije sestavljalo E542K (1624G > A; n = 2), E545K (1633G > A; n = 5) in E545D (1635G >C, n = 1) in ekson 20 mutacij sestavljalo H1047R (3140A > G, n = 1). NRO
mutacije sestavljalo G12S (34g > A; n = 1) in G13S (37 g > A; n = 1). Je bilo 70 bolnikov, pri katerih tumorsko tkivo vsebuje vse divje vrste Kras
(exon2, 3, 4), BRAF
(ekson 15), PIK3CA
(exon9, 20) in nacionalni regulativni organi
(exon2 , 3). Med bolniki AGC, katerih tumor tkiva vsebujejo genskih mutacij, večkratne mutacije KRAS
kodon 13, PIK3CA
kodon 545 in NRO
kodon 12 so odkrili pri samo enem case.Table 1 Rezultati genskih mutacij KRAS, BRAF, PIK3CA in nacionalni regulativni organi pri bolnikih AGC
genskih mutacij
Delež (%)
Nezadostna vzorce DNK
KRAS kodon 12
6/164 (3,7)
3/167
KRAS kodon 13
2/164 (1,2)
3/167
KRAS kodon 61
0/131 (0,0)
36/167
KRAS kodon 146
0/137 (0,0)
30/167
BRAF V600E
0/136 (0,0)
31/167
PIK3CA ekson 9
8 /163 (4.9)
4/167
PIK3CA eXON 20
1/163 (0,6)
4/167
NRO, kodon 12
1/159 (0,6)
8 /167
NRO, kodon 13
2/159 (1,3)
8/167
NRO, kodon 61
0/135 (0,0)
32/167
clinicopathological funkcijami vsake genske mutacije v primerjavi z all-divjega tipa so zbrani v tabeli 2. mediana starosti bolnikov, katerih tumorsko tkivo vsebuje mutacije gena KRAS
, PIK3CA
in NRO
(54.5, 58.0 in 56.0 let, v tem zaporedju) so bile nižje kot pri bolnikih, ki vsebujejo vse divje vrste KRAS, BRAF, PIK3CA
in NRO
(mediana starosti, 64.0 let).
ni bilo bistvene razlike, razen za histološki tip, med spremenljivke clinicopathological značilnosti, kot so spol, starost, ECOG PS in število metastatskih mest. V primerjavi z bolniki vse divjega tipa, so bili deleži črevesne vrste večje pri bolnikih z KRAS
kodon 12/13 mutacije (p = 0,014). Histološka vrsta tumorja pri vseh bolnikih, pri katerih tumorsko tkivo vsebuje nacionalni regulativni organi
mutacije je difuzna vrsta adenocarcinoma.Table 2 Primerjava clinocopathological funkcij, ki jih statusa genskih mutacij v primerjavi z s bolnikov AGC
vse-divji tip pri bolnikih vse wild-type
KRAS
kodon 12/13
PIK3CA
ekson 9/20
nacionalni regulativni organi
codon12 /13

KRAS, BRAF, nacionalni regulativni organi, PIK3CA
Mutant tip
P
-vrednost
Mutant tip
P
- vrednost
Mutant tip
P
-vrednost
Število bolnikov
70
8
9
3
Median starost
64,0
54,5
58,0
56,0
Spol (%)
Moški
49 (70,0)
7 (87,5)
0,429
8 (88,9)
0.432
2 (87,5)
1.000
Moški
21 (30,0)
1 (12,5)
1 (11.1)
1 (12,5)
ECOG PS (%)
0
38 (54,3)
3 (37,5)
0,466
4 (44,4)
0,727
1 (33,3)
0,476
1 ≦
32 (45,7)
5 (62,5)
5 (55,6)
2 (66,7)
histološki tip (%)
Črevesne tipa
20 (28,6)
6 (75,0)
0.014
4 (44,4)
0,443
0 (0.0)
0,556 tip
difuzna
50 (71,4)
2 (25,0)
5 (55,6)
3 (100,0)
Število metastatskega mestu (%)
1
54 (77,1)
8 (100,0)
0,195
8 (88,9)
0,675
3 (100,0)
1.000
2 ≦
16 (22,9)
0 (0.0)
1 ( 11.1)
0 (0.0)
metastatskega lezije (%)
bezgavko
41 (58,6)
3 (37,5)
0,348
6 (66,7)
0,717
2 (66,7)
0,851
jetra
14 (20,0)
3 (37,5)
3 (33,3)
1 (33,3)
Lung
2 (2.9)
1 (12,5)
0 (0.0)
0 (0.0)
peritonealni razširjanje
18 (25,7)
1 (12,5)
1 ( 11.1)
0 (0.0)
Drugo
3 (4.3)
0 (0.0)
0 (0.0)
0 (0.0)
Kratice
: ECOG Ps
stanje Eastern Cooperative Oncology Group uspešnosti. Opisali smo klinične podatke 90 bolnikov, in smo izločili bolnike, katerih tumor tkiva ni imel genskih mutacij, vendar vsaj en gen ni bilo mogoče oceniti.
Značilnosti ozadja pri bolnikih z metastatskim rakom želodca so prikazani v tabeli 3. Večina bolnikov (98,4%) je bilo ECOG PS 0/1, in le pri 2 bolnikih (1,6%) je bilo ECOG PS 2. skupno 71 bolnikov (60,0%) je imela histološko razpršeno vrsto tumorja, in 50 bolnikov (40,0%) je imela v črevesju tip adenokarcinoma. Kar zadeva število metastatskih mest, so imeli 30 bolnikov (24,0%) metastaze na več organov in 95 bolnikov (76,0%) so imeli metastaze na enem organu. Skupna metastatskih mest so bile bezgavke, peritonej in liver.Table 3 osnovne karakteristike bolnikov s celotne kohorte, skupine A in skupine B

Skupaj
skupina A (brez zasevkov skupina)
ABB Group B (metastatski skupina)
Število bolnikov
167
42
125
starost (mediana)
64,0
65,0
63.0
spol (%)
Moški
124 (74.3)
29 (69,0)
95 (76,0)
ženska
43 (15,7)
13 (31,0)
30 (24,0)
ECOG PS (%)
0
79 (47,3)
33 (78,6)
46 (36,8)
1
86 (51,5)
9 (21,4)
77 (61,6)
2
2 (1.2)
0 (0.0)
2 (1.6)
histološki tip (%)
črevesne tip
60 (35,9)
10 (23,8)
50 (40,0)
razpršenih vrsto
107 (64,1)
36 (76,2)
71 (60,0)
T-stopenjski
T1
9 (5.4)
7 (16,7)
2 (1.6)
T2
34 (20,4)
9 (21,4)
25 (20,0)
T3
101 (60,5)
22 (52,4)
79 (63,2)
T4
23 (13,8)
4 (9,5)
19 (15,2)
N-stage
Nx
4 (2.4)
2 (4.8)
2 (1.6)
N0
22 (13,2)
12 (28,6)
10 (8,0)
N1
56 (33,5)
16 (38,1)
40 (32,0)
N2
53 (31,7)
9 (21,4)
44 (35,2)
N3
32 (19,2)
3 (19,2)
29 (23,2)
metastatski poškodba (%)
≦ 1
135 * (80,8)
40 * (95,2)
95 (76,0)
2 ≦
32 (19,2)
2 (4.8)
30 (24,0)
zasevki (%)
limfnega vozla
92 * (55,1)
19 * (45,2)
73 (58,4)
jetra
34 (20,3)
2 * * (4.8)
32 (25,6)
Lung
8 (4.8)
0 (0.0)
8 (6.4)
peritonealni razširjanje
43 (25,7)
3 ** (7.1)
40 (32,0)
Drugo
6 (3,6)
0 (0.0)
6 (4.8)
Kratice
: ECOG PS
stanje Eastern Cooperative Oncology Group uspešnosti. Uprizoritev (klasifikacijo TNM) se diagnosticira japonski klasifikaciji želodca karcinomom (13. izdaja), *, vključno metastaze v regionalnih bezgavkah. . ** Resektabilne lezija
zdravljenja pri bolnikih z metastatskim GC was14.1 mesecev (95% IZ: 12.5-15.7 mesecev). Bolniki, katerih tumorsko tkivo vsebovali nacionalni regulativni organi
kodonsko 12/13 mutacija imela bistveno krajši OS v primerjavi s tistimi, ki opravljajo nacionalni regulativni organi
divji tip (8,8 meseca v primerjavi z 14,7 meseca, p = 0,011, log-rang test). Po drugi strani pa ni bilo bistvene razlike v OS med bolniki z (= 13,2 v primerjavi z 15,2 meseca, p 0,775) PIK3CA
EXON 9/20 divjega tipa ali mutirani tip KRAS
kodon 12/13 in ( 13.6 vs. 9,4 meseca, p = 0,286).
smo ocenili napovednih dejavnikov za OS, ki jih univariatne in multivariatne analize metastaze skupini B. ni bilo bistvene razlike med spremenljivkami značilnosti ozadja bolnikov, vendar pri bolnikih z ECOG PS 1 /2 (HR: 1.380, 95% IZ: 0,941-2,024) in več metastatskih mest (HR: 1.452, 95% CI: 0.956-2.206) so imeli tendenco, da imajo krajšo OS s univariatne analize. Z multivariatne analize, 2 ali več metastatskih mest (HR: 1,613, 95% IZ: 1,047-2,484) je bila neodvisna spremenljivka pri napovedovanju krajšem OS
HRS in 95% KI spremenljivk genskih mutacij (KRAS
. kodon 12/13, so PIK3CA
ekson 9/20 in NRO
kodon 12/13) prilagodi glede na starost, spol, ECOG PS, histološki tip in metastatskih mest. Med temi mutacij, NRO
kodonsko 12/13 mutacije bila samostojna vrednost pri napovedovanju krajšem OS, ki ga multivariatne analize (prilagojena HR: 5,607, 95% CI: 1,637-19,203).
Razpravo in sklepe
Naše analize kažejo, da mutacije Krasa
kodon 12/13 in PIK3CA
ekson 9/20 (kodoni 542, 545 in 1047), ki niso bile pogosto opazili pri bolnikih, AGC in BRAF
mutacije (V600E) ni bilo zaznal. Za naše znanje, clinicopathological značilnosti in prognostičnih vlog KRAS
kodon 61, KRAS
kodon 146, nacionalni regulativni organi PODJETJA
kodonsko 12/13 in NRO
kodon 61 niso poročali pri bolnikih AGC prej. Mutacije KRAS
kodon 61, KRAS
kodon 146 in NRO
kodon 61, niso bili odkriti, vendar morajo nacionalni regulativni organi PODJETJA
kodonsko 12/13 mutacijo v sedanjosti je bila odkrita pri 3 od 159 bolnikov (1,9%) študija. Zanimivo je, da je črevesna vrsta adenokarcinoma bolj pogosto najdemo pri bolnikih, katerih tumorsko tkivo vsebuje Kras
kodon opazili 12/13 mutacije in difuzni obliki v vseh 3 bolnikih, pri katerih tumorsko tkivo vsebovali nacionalni regulativni organi
kodonsko 12/13 mutacije . Poleg tega je bilo verjetno, da je povezana s krajšim OS pri bolnikih z metastatskim GC nacionalnih regulativnih organov
mutacije. Onkogenih mutacije pogosto kažejo na prisotnost terapevtskega cilja, ki bi lahko predmet usmerjenega terapevtski poseg. Molekularna ciljna terapija oznake in PI3K-Akt kaskad je privlačna strategija pri bolnikih AGC.
Pri napredovalem gastroezofagealne adenokarcinoma, je bila pogostnost KRAS
kodon 12/13 mutacij približno 3,4 do 9,4% glede na analize biomarkerjev kliničnih preskušanj majhne velikosti anti-EGFR protiteles zdravljenje [18-20]. Naša raziskava je pokazala, da so bile pri 4,9% bolnikov, AGC, ki je primerljivo z rezultati teh kliničnih študijah niso opazili Kras
mutacije. Več retrospektivne analize so poročali o pogostosti in clinicopathological značilnosti Krasa
mutacij pri bolnikih z rakom želodca [14-16]. Glede na ta poročila, je bil najpogostejši mutacije KRAS
kodonskega 12 G12D in vsi mutacije KRAS
kodon 13 so G13D. Naša študija je tudi pokazala, da so bili G12D mutacije najpogostejše mutacije, in smo našli v 4 od 6 vzorcev tumor tkiva vsebujejo KRAS
kodon 12 mutacij. Po drugi strani, v G13D Kras
mutacija ni bila odkrita v naši raziskavi (G13V in G13S), za razliko od ugotovitev v prejšnjih poročilih. V teh prejšnjih poročilih, večina tumorskih tkivih, ki vsebujejo Krasu
kodon 12/13 so bile črevesne histološki tip. Zhao W sod. Predlaga se, da so bile razlike v prisotnosti KRAS
mutacij po mestu tumorja (antruma vs non-antruma, p = 0,002) in status mikrosatelitno nestabilnost (MSI) (MSI-high vs. MSI-izgubo, str = 0,000076). Frekvenca črevesne tipa adenokarcinom je bila znatno višja od tiste od difuzni obliki v naši raziskavi. Ni bilo določen dokaz za vlogo Kras
mutacij v napovedi in napovedi uspeha molekularne ciljne terapije v AGC za. Pred kratkim je randomizirana, multicentrična, faza II /III REAL-3 preskušanje, ki je testiral dodajanje panitumumaba do spremenjenega epirubicin, oksaliplatin in kapecitabinom (EOC) režimu, so poročali, in multivariatna analiza biološkega označevalca 200 bolnikov, je pokazala, da KRAS
mutacija je napovedni dejavnik za OS [7]. V kliničnem preskušanju obsežno zdravljenje želodca, požiralnika raka z anti-EGFR protiteles, Kras
mutacije zdelo tudi, da ima pomembno napovedno vrednost, vendar moramo preveriti, ta pa z nadaljnjim biomarkerjev analize zdravljenje molekularne terapije v AGC.
Gene ojačanj, brisanjem in v zadnjem času, somatskih missense mutacij v PIK3CA
gena, so poročali v različnih malignih bolezni, vključno z rakom debelega črevesa, dojke, pljuč, možganov, jeter in želodca [21, 22 ]. Pri raku želodca, prejšnja poročila pokazala, da je pogostost PIK3CA
mutacij (eksonov 9 in 20) 2,5 do 10,6% [12, 14, 20]. Devet od 168 bolnikov AGC (4,5%) je bilo PIK3CA
mutacije v naši raziskavi, in ni bilo velike razlike v primerjavi s prejšnjimi poročili. Nekaj ​​prejšnjih poročilih predlagali boljšo prognozo pri bolnikih z rakom dojke s PIK3CA
mutacij, medtem ko drugi kažejo, da so bile PIK3CA
mutacije, povezane s slabšo prognozo v kolorektalnega raka, raka endometrija in pljučnega raka [23-26]. Multivariatna analiza sojenja REAL-3 je pokazala, da PIK3CA
mutacije navedeno slabo OS prognozo pri zdravljenju z anti-EGFR protiteles pri bolnikih z rakom gastroezofagealne. Naši podatki kažejo, da PIK3CA
mutacija ni bila povezana s prognozo pri bolnikih MGC zdravili s sistemsko kemoterapijo, čeprav je ta študija ni bila analiza obsežno. Klinična preskušanja molekularno terapijo, ki je usmerjena PI3K-AKT-mTOR poti so se začele pred kratkim, zato rezultati biomarker analize je treba te poti.
Nacionalni regulativni organi
mutacije so večinoma opisani v melanoma in levkemije [27, 28] , vendar je napovedni pomen teh malignih obolenj bila nejasna. Nekaj ​​prejšnjih poročilih so nakazujejo povezavo med slednjimi
mutacij in slabo prognozo na melanoma in slabega odziva na anti-EGFR protiteles pri raku debelega črevesa in [29]. Naša raziskava je pokazala, da je pogostost NRO
mutacij (kodonih 12 in 13), je bil v AGC 1,9% in je bil manjši kot v drugih malignih bolezni. Zanimivo je, multivariatne analize so pokazale, da je imela majhne skupine NRO
mutacij slabo prognozo pri bolnikih z metastatskim rakom želodca, ki so prejemali sistemsko kemoterapijo v tej študiji. Upoštevati moramo verjetnega pristranskost majhnosti vzorca NRO
mutacij. Na drugi strani pa so značilnosti bolnikov NRO
mutacij mlajše in manjše število metastaz mestu od vseh bolnikih z divjim tipom. Ni bilo bistvene razlike v kemoterapije in nekaterih ključnih zdravil med bolniki z nacionalnimi regulativnimi organi
mutacije in bolnike vse divjega tipa. Prej, nacionalni regulativni organi
mutacije niso raziskovali rutinsko kot prognostični biomarker pri kliničnih preskušanjih AGC. Poleg tega, da ima napovedni pomen, da nacionalni regulativni organi
mutacije kot tudi KRAS, BRAF
in PIK3CA
mutacije bi bilo bolje, da bi razpravljali kot potencialne tarče za molekularno zdravljenja pri bolnikih AGC.
Te študije ima nekaj omejitev. Najprej so bili kemoterapije v naši raziskavi prejšnje standardne sheme, v sredi letu 2000 na Japonskem. Drugič, ni mogla ugotoviti, zagotovo iz podatkov v samo naši raziskavi, da imajo nacionalni regulativni organi
mutacije napovedni pomen zaradi nizkih frekvencah NRO
mutacij in velikih intervalov zaupanja. Tretjič, je bilo nekaj dovolj vzorci in smo morali poenotiti boljše metode vzorca za konzerviranje.
In sklepih, naša študija je pokazala, da so frekvence mutacij genov za KRAS, BRAF
in PIK3CA
bili zelo podobni ki so jih opazili v prejšnjih poročilih. Nacionalni regulativni organi
mutacije so bile redke pri bolnikih, AGC, lahko pa ima napovedno vrednost pri bolnikih MGC, ki prejemajo sistemsko kemoterapijo. Upamo, da bodo naši rezultati prispevali k prihodnjemu molekularno zdravljenju bolnikov AGC
Kratice
AGC.
Napredovali rak želodca
MGC:
Metastaric rak želodca
EGFR:
epidermalni rastni faktor receptor
FFPE:
formalin-fiksno, parafin, vgrajeni

ECOG PS:
stanje zmogljivosti Eastern Cooperative Oncology Group
PFS:
preživetje brez napredovanja bolezni

OS:
Skupni preživetje
HR:
stopnja nevarnosti
CI:
interval zaupanja

MST:
Mediana časa preživetja
EOC.
Pirubicin, oksaliplatinske in kapecitabin

IZJAVE
Zahvala
Mi zelo cenimo sodelovanje bolnikov in njihovih družin v tej študiji, in se zahvaljujemo vsem sodelavkam in raziskovalce za njihove prispevke: H. Morita, E. Onishi (National Hospital Cancer Center) in laboratorij, delitev na korporacije v SRL (Analiza genskih mutacij).
Financiranje
Ta študija je bila podprta s strani zdravstvene in Labor vede raziskovalne štipendije za klinične raziskave raka, ki ga je ministrstvo za zdravje, delo in blaginjo Japonske (Grant št . H22- Clinical Cancer -019).
avtorjev originalnih predloženi datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev prvotna predloženih spisov za slike.

• Nizke odmerke aspirina povezano zgornje razjede želodca in dvanajstnika pri japonskih bolnikih brez anamnezo peptične razjede
• Ravni survivin genov v periferni krvi bolnikov z rakom želodca neodvisno napovedujejo survival