Klinisch-pathologischen Eigenschaften und prognostische Rolle von KRAS, BRAF, PIK3CA und die NRB Mutationen in fortgeschrittenem Magen cancer

klinisch-pathologischen Eigenschaften und prognostische Rolle von KRAS, BRAF, PIK3CA und die NRB Mutationen in fortgeschrittenem Magenkrebs
Zusammenfassung
Hintergrund
RAS-RAF -MEK-ERK und PI3K-AKT Wege bilden eine bedeutende Kaskade für mögliche molekulare Zieltherapie bei Krebs im fortgeschrittenen Stadium. Die klinische Bedeutung von Mutationen in diesen Genen in fortgeschrittenem Magenkrebs (AGC) ist ungewiss.
Methoden
Wir sammelten Formalin-fixierte, in Paraffin eingebettet und frisch gefrorenen Tumorproben von Patienten AGC und analysiert, um die KRAS, NRB, BRAF
und PIK3CA
Mutationen durch direkte-Sequenzierung. Wir retrospektiv die klinisch-pathologischen Eigenschaften dieser Mutationen in AGC-Patienten untersucht und ausgewählte Patienten mit metastasierendem Magenkrebs.
Ergebnis einschränken Unter 167 AGC-Patienten Mutationen des KRAS
Codons 12/13 (N = 8
/164, 4,9%), PIK3CA
(N
= 9/163, 5,5%) und NRAS
Codon 12/13 (N
= 3/159, 1,9%) festgestellt wurden. Vergleich der klinisch-pathologischen Eigenschaften der mutierten KRAS, PIK3CA NRB
Gene mit einem All-Wildtyp dieser Gene zeigte, dass die Häufigkeit des Darmtyp war signifikant höher bei Patienten, deren Tumorgewebe enthalten KRAS
Mutationen (P
= 0,014). Unter 125 Patienten mit metastasierendem Magenkrebs, Patienten mit den NRB
Codon 12/13 Mutationen in ihren Tumoren hatten kürzere Gesamtüberlebenszeit im Vergleich mit den NRB
Wildtyp-Patienten (MST: 14,7 vs 8,8 Monate, P = 0,011
). Durch multivariate Analysen,
NRB 13.12 Mutation Codon war ein Indikator für die schlechte Prognose bei Patienten mit metastasierendem Magenkrebs (bereinigtes HR 5,607, 95% CI: 1,637 bis 19,203).
Schlussfolgerungen
Unsere Studie zeigte, dass Mutationen von KRAS, PIK3CA
und die NRB
AGC selten waren. NRB
Mutationen waren wahrscheinlich mit einer schlechten Prognose bei metastasierendem Zustand der AGC-Patienten zu assoziieren, aber eine weitere Validierung anderer Forschung ist erforderlich.
Hintergrund
Magenkrebs ist die zweithäufigste Ursache für Krebstod weltweit mit rund 989.600 neu Fälle und 738.000 Todesfälle pro Jahr, etwa 8 Prozent der neuen Krebserkrankungen [1]. Die höchsten Inzidenzraten sind in Ost-Asien, den Andenregionen Südamerika und Osteuropa, die mit den niedrigsten Raten in Nordamerika, Nordeuropa sind, und die meisten Länder in Afrika und Süd-Ost-Asien.
Systemische Aufgrund Entwicklung Chemotherapie die Überlebenszeit für fortgeschrittenem Magenkrebs (AGC) wurde während der letzten zehn Jahre verbessert. Ein fluoropyrimidine und Platin-Therapie ist eine Standard-First-Line-Chemotherapie bei HER2-negativem metastasierendem Magenkrebs (MGC) Patienten und Trastuzumab hinzugefügt XP ist eine Standard-Chemotherapie bei HER2-positivem mGC Patienten in Japan [2-5]. Obwohl einige AGC Patienten klinische Nutzen von systemischer Chemotherapie erhalten, die meisten der Patienten erreicht hat keinen klinisch zufriedenstellende Ergebnisse. Neuartige Behandlung von mGC mit effektiver und weniger toxischen Chemotherapien erforderlich war.
Phase-III-Studien der molekularen Therapie mit mTOR-Inhibitor, Antikörper anti-VEGF, Anti-EGFR-Antikörper wurden in AGC oder Magen-Ösophagus-Krebs berichtet, aber diese Medikamente nicht nachgewiesen werden konnte eine signifikante Wirksamkeit [6, 7] zu haben. Vor kurzem wurde ramcirumab, Anti-VEGFR Ziel monoklonalen Antikörper, berichtet das Überleben in der Chemotherapie-resistentem mGC Patienten zu verbessern. Es wäre ein signifikanter therapeutischer Vorteil sein, wirksame Biomarker zu identifizieren, die als Reaktion Krebszellen mit dem entsprechenden molekularen Target Medikament zu entsprechen und weitere Mechanismen der Resistenz gegen Chemotherapie aufzuklären.
Die Mitogen-aktivierte Proteinkinase (MAPK) ist Teil eines signifikanten intrazellulären Signalwegs, die diverse zelluläre Funktionen wie die Zellproliferation, Zellzyklusregulation, Zellüberleben, Angiogenese und Zellmigration [8] reguliert. Die Ras-Proteine ​​wurden zunächst als Transformationskomponenten von onkogenen Viren identifiziert, während NRB
als Transformationskomponente eines Neuroblastoms identifiziert wurde. Ras-Mutationen in bis zu 30% aller Krebsarten und sind besonders häufig in Pankreas und Dickdarm-Krebs gefunden. Raf wird durch Bindung an Ras auf der Zellmembran rekrutiert wird und in einem komplexen Prozess, der Phosphorylierung und mehreren Cofaktoren aktiviert. BRAF
Mutationen haben eine enge Verteilung, aber sie sind weit verbreitet in einigen spezifischen bösartigen Tumoren wie Melanom, papillären Schilddrüsenkrebs, und low-grade Ovarialkarzinom [9-11]. Die Bedeutung von Phosphoinositid-3-Kinasen (PI3Ks) in Krebs wurde durch die Entdeckung bestätigt, dass das PIK3CA
Gen, codierend die katalytische Untereinheit p110α PI3K, wird häufig in einige der häufigsten menschlichen Tumoren mutiert [12]. Diese genetischen Veränderungen von PIK3CA
ausschließlich somatischer Missense-Mutationen bestehen geclustert in zwei "Hotspot" Regionen in den Exons 9 und 20, entsprechend den Stirn- und Kinasedomänen von p110α bzw. [13].
Kürzlich ist die Verwendung von KRAS
, BRAF
, PIK3CA
und die NRB
als Biomarker für die molekulare Ziel Therapie bei soliden Tumoren wurde breit diskutiert. Mehrere Biomarker Klein Analysen von KRAS
, BRAF
und PIK3CA
Mutationen wurden zuvor in AGC berichtet [14-16]. Die klinische Bedeutung dieser Mutationen in AGC Patienten nicht bereits geklärt und weitere Untersuchungen dieser intrazellulären molekularen Veränderungen erforderlich sind. In der vorliegenden Studie
führten wir eine Genomanalyse von KRAS
, BRAF
, PIK3CA
und die NRB
Mutationen, um die klinisch-pathologischen Eigenschaften und prognostische Bedeutung von Genmutationen in AGC-Patienten zu untersuchen.
Methoden
Patienten und Probensammlung
Alle Daten aus der Datenbank extrahiert wurden unserer Abteilung und Diagramm Überprüfung wurde für jeden Patienten zu tun, um wichtige Informationen zu erhalten. Wir sammelten Gewebeproben für die Analyse der Gen-Mutationsstatus des KRAS, BRAF, PIK3CA
und die NRB
. Gewebeproben bestand in früheren Biomarker-Forschung von Proben in unserer Einrichtung verwendet [2, 17] und von frischem gefrorenen Gewebeproben, die aus früheren chirurgischen Resektionen von AGC in unserer Einrichtung erhalten. Tumorgewebeproben von 173 AGC-Patienten wurden gesammelt, aber nicht genügend Proben von 6 Patienten wurden ausgeschlossen. Schließlich haben wir 167 Gewebeproben von AGC Patienten und untersucht Gen-Mutationen von KRAS
, BRAF
, PIK3CA
und die NRB und Videos der direkte Sequenzierungsmethode (ganze Kohorte). Unter 167 AGC-Patienten, unterzog sich 42 Patienten eine chirurgische Resektion ohne systemische Chemotherapie (nicht-metastasiertem Kohorte als Gruppe A) und 125 Patienten mit metastasierendem Magenkrebs erhielt eine systemische Chemotherapie (metastasierendem Kohorte als Gruppe B). Ein Diagramm der vorliegenden Studie ist in Abbildung 1 Einwilligungserklärung des Patienten Tumorgewebe mit Hilfe gezeigt wurde von allen Patienten bestätigt, die an der Studie teilgenommen, die mit Zustimmung des Institutional Ethical Review Board des National Cancer Center durchgeführt wurde, in Übereinstimmung mit der Deklaration von Helsinki von 1975 (wie 1983 überarbeitet). Abbildung 1 Schema dieser Studie.
Genomische Analysen von KRAS, BRAF, PIK3CA und die NRB
DNA-Proben wurden aus Formalin fixierten extrahiert, in Paraffin eingebettete (FFPE) und frischen Gefrierschnitten Tumorgewebe. Tumorzell-reichen Bereichen in dem Hämatoxylin und Eosin Abschnitt wurden unter einem Mikroskop markiert, und das Gewebe wurde aus der Fläche eines anderen entparaffinierten ungefärbten Abschnitt verkratzt. DNA aus Teilen der Gewebeprobe verkratzt wurde isoliert die QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (QIAGEN KK, Tokyo, Japan). Exon 2 (Codon 12, 13), Exon 3 (Codon 61), Exon 4 (Codon 146) von K-Ras
Gens und Exon 15 (Codon 600) von BRAF
Gens und Exon 9 (Codon 542, 545) Exon 20 (Codon 1047) von PIK3CA
Gens und Exon 2 (Codon 12, 13), Exon 3 (Codon 61) NRAS
Gens durch PCR (das GeneAmp PCR System 9700 Thermocycler) amplifiziert wurden. Die PCR-Produkte wurden unter Verwendung von Agarose-Gelelektrophorese mit Ethidiumbromidfärbung visualisiert und direkt sequenziert eines ABI 3130X /Genetic Analyzer (Life Technologies Japan (Applied Biosystems), Tokyo, Japan) unter Verwendung von nach den Anweisungen des Herstellers.
Behandlung
A insgesamt 125 Patienten in der Gruppe B erhielten eine systemische Chemotherapie. Regimen der Chemotherapie Erstlinientherapie bestand aus CP (n = 42, 33,6%), S-1 (n = 39, 31,2%), 5-FU (n = 10, 24,0%), eine Kombination von 5-FU und Methotrexat (n = 10, 8,0%), Paclitaxel (n = 3, 2.4%) und XP und /oder Bevacizumab (n = 1, 0,8%). Key Anti-Krebs-Medikamente für AGC in Japan sind fluoropyrimidine (5-FU, S-1, Capecitabin), Cisplatin, Irinotecan und Taxan. Im gesamten Verlauf der systemischen Chemotherapie in der Gruppe B, die Anteile der Patienten, die 5-FU, Cisplatin, Irinotecan und Taxan waren 85,6% (n = 107/125), 52,8% (n = 66/125), 60,8% (n = 76/125), 36,0% (n = 45/125), respectively. Darüber hinaus erhielten 22 Patienten (17,6%) alle wichtigen Anti-Krebs-Medikamente, 37 Patienten (29,6%) erhielten drei der wichtigsten Drogen, 30 Patienten (24,0%) erhielten zwei der wichtigsten Drogen, und 36 Patienten (28,8%) nur einer der wichtigsten Anti-Krebs-Medikamente erhalten. Die Zeitpläne und Dosen von CP, S-1 und 5-FU wurden auf den früheren Berichten basiert [17]. Paclitaxel als Monotherapie wurde wiederholt dreimal wöchentlich für 4 Wochen und die Docetaxel als Monotherapie wurde durch intravenöse Infusion einmal alle 3 Wochen.
Statistische Analysen
wir den Anteil der einzelnen KRAS
ausgewertet, BRAF
, PIK3CA
und die NRB
Mutation in ganze Kohorte und die prognostische Werte dieser Mutationen, die Variablen der Patienten Eigenschaften in Bezug auf das Gesamtüberleben (OS) bei metastasierendem Gruppe B. OS definiert als das Intervall wurde von der Initiierung eingestellt wurden von First-Line-Chemotherapie zum Tode oder letzten Follow-up.
Wir führten statistische Analysen von SPSS Statistik-Software, Version 19 (IBM, Tokyo, Japan). Unterschiede in der Verteilung von Variablen wurden unter Verwendung des Fisher-Exact-Test oder Chi-Quadrat-Test, als angemessen bewertet. Die mittlere Überlebenszeit (MST) wurde wurden von der Log-Rank-Test im Vergleich mit der Kaplan-Meier-Methode und das Überleben Kurven geschätzt. Alle Tests wurden zweiseitig und ein p-Wert < 0,05 wurde als statistisch signifikant definiert. Wir schätzten, Hazard Ratio (HR) und das entsprechende 95% Konfidenzintervall (CI) für OS mit uni- und multivariate Analysen von den Cox Anteil Gefahrenmodellen. Variablen in die Analyse eingeschlossen Alter (≥median /< Median), Geschlecht (männlich /weiblich), ECOG PS (0 /1-2), histologischen Typ von Lauren-Klassifikation (Darm-Typ /diffuse Typ), die Anzahl der Metastasen ( single /multiple).
Ergebnisse
Direkte Sequenzierung von Gewebeproben in der Gruppe B den Anteil der einzelnen KRAS
, BRAF
bestimmt, PIK3CA
und die NRB
(Tabelle 1). Mutationen von KRAS
Codon 12 (3,7%, n = 6/164) und KRAS
Codon 13 (1,2%, n = 2/164), PIK3CA
Exon 9 (4,9%, n = 8 /163), PIK3CA
Exon 20 (0,6%, n = 1/163) und NRAS
Mutationen (1,9%, n = 3/159) nachgewiesen wurden. Auf der anderen Seite, Mutationen in KRAS
Codon 61, KRAS
Codon 146, BRAF V600E
, und die NRB
Codon 146 wurden nicht nachgewiesen. KRAS
Codon 12 Mutationen bestanden aus G12D (35G > A, n = 4), G12S (34G > A; n = 1) und G12N (34 35GG > AA; n = 1) und Codon 13-Mutationen (; A; 37G >n = 1) bestand aus G13S und G13V (38 39GC > TT; n = 1). PIK3CA
Exon 9 Mutationen bestanden aus E542K (1624G > A; n = 2), E545K (1633G > A; n = 5), E545D (1635G > C; n = 1) und Exon 20 Mutationen bestand aus H1047R (3140A > G; n = 1). NRAS
Mutationen bestanden aus G12S (34G > A; n = 1) und G13S (37G > A; n = 1). Es gab 70 Patienten, deren Tumorgewebe enthalten all-Wildtypen von KRAS
(exon2, 3, 4), BRAF
(Exon 15), PIK3CA
(exon9, 20) und die NRB
(exon2 , 3). Unter den AGC-Patienten, deren Tumorgewebe enthalten Gen-Mutationen, mehrere Mutationen von KRAS
Codon 13, PIK3CA
Codon 545 und die NRB
Codon 12 wurden in nur einem case.Table 1: Ergebnisse der Gen-Mutationen von KRAS nachgewiesen, BRAF, PIK3CA und NRB bei AGC Patienten
Genmutationen
Anteil (%)
Unzureichende DNA-Proben
KRAS-Codon 12
6/164 (3,7)
3/167
KRAS-Codon 13
2/164 (1,2)
3/167
KRAS 61 Codon
0/131 (0,0)
36/167
KRAS-Codon 146
0/137 (0,0)
30/167
BRAF V600E
0/136 (0,0)
31/167
PIK3CA Exon 9
8 /163 (4.9)
4/167
PIK3CA Exon 20
1/163 (0,6)
4/167
NRB Codon 12
1/159 (0,6)
8 /167
NRB Codon 13
2/159 (1,3)
8/167
NRB-Codon 61
0/135 (0,0)
32/167
Die klinisch-pathologischen Eigenschaften jeder Mutation Gen mit dem all-Wildtyp-Vergleich sind in Tabelle 2 die mittlere Alter der Patienten, deren Tumorgewebe enthielt Mutationen von KRAS
, PIK3CA
und die NRB
(54,5, 58,0 und 56,0 Jahre zusammengefasst, jeweils waren), die niedriger als die der Patienten all-Wildtypen von KRAS, BRAF, PIK3CA
und die NRB
(Durchschnittsalter 64,0 Jahre).
Es gab keinen signifikanten Unterschied, mit Ausnahme von histologischen Typ enthält, unter Variablen von klinisch-pathologischen Eigenschaften wie Geschlecht, Alter, ECOG PS und die Zahl der Metastasen. Verglichen mit all-Wildtyp-Patienten waren die Anteile der intestinalen Typ höher als bei Patienten mit KRAS-
Codon 12/13 Mutation (p = 0,014). Die histologischen Typ Tumor bei allen Patienten, deren Tumorgewebe enthalten NRB
Mutationen die diffuse Art von adenocarcinoma.Table 2 Vergleich der clinocopathological Merkmale von Genmutationen Status war im Vergleich mit all-Wildtyp bei Patienten mit AGC Patienten
Alle Wildtyp-KRAS

Codon 12/13
PIK3CA
Exon 20.09
NRB
codon12 /13

KRAS, BRAF, NRB, PIK3CA
Mutant Typ
P
-Wertes
Mutant Typ
P
- Wert
Mutant Typ
P
-Wertes
Anzahl der Patienten
70
8 9
3
Median Alter
64,0
54,5
58,0
56,0
Geschlecht (%)
männlich
49 (70,0)
7 (87,5)
0.429
8 (88.9)
0.432
2 (87.5)
1.000
Weiblich
21 (30,0)
1 (12.5)
1 (11.1)
1 (12.5)
ECOG PS (%)
0
38 (54,3)
3 (37,5)
0.466
4 (44,4)
0.727
1 (33,3)

1 ≦
32 (45,7)
5 (62,5)
5 (55,6)
2 (66,7)
histologischen Typ (%)
intestinalen Typ
20 (28,6)
6 (75,0)
0,014
4 (44,4)
0.443
0 (0.0)
0.556
Diffuse Typ
50 (71,4)
2 (25.0)
5 (55,6)
3 (100,0)
Anzahl der metastatischen Website (%)
1 54 (77,1)
8 (100,0)
0.195
8 (88,9)
0.675
3 (100,0)
1.000
2 ≦
16 (22,9)
0 (0.0)
1 ( 11.1)
0 (0.0)
Metastasiertem Läsion (%)
Lymphknoten
41 (58,6)
3 (37,5)
0.348
6 (66,7)
0.717 of 2 (66,7)
0.851
Leber
14 (20,0)
3 (37,5)
3 (33,3)
1 (33,3)
Lung
2 (2.9)
1 (12.5)
0 (0.0)
0 (0.0)
Peritonealdialyse Verbreitung
18 (25,7)
1 (12.5)
1 ( 11.1)
0 (0.0) Sonstige
3 (4.3)
0 (0.0)
0 (0.0)
0 (0.0)
Abkürzungen
: ECOG PS
Eastern Cooperative Oncology Group Performance-Status. Wir beschrieben die klinischen Daten von 90 Patienten, und wir ausgeschlossen, die Patienten, deren Tumorgewebe hatten keine Genmutationen, aber mindestens ein Gen konnte nicht ausgewertet werden., Die Hintergrundmerkmale von Patienten mit metastasiertem Magenkrebs sind in Tabelle 3 Die meisten Patienten gezeigt (98,4%) waren ECOG PS 0/1, und nur 2 Patienten (1,6%) waren ECOG PS 2. insgesamt 71 Patienten (60,0%) hatte die histologisch diffuse Tumortyp, und 50 Patienten (40,0%) hatten die intestinale Art des Adenokarzinoms. Wie für die Anzahl der Metastasen, 30 Patienten (24,0%) hatten Metastasen in mehreren Organen und 95 Patienten (76,0%) hatten Metastasen in einem Organ. Gemeinsame Metastasen waren Lymphknoten, Bauchfell und liver.Table 3 Hintergrund Merkmale von Patienten mit Gesamtkohorte, Gruppe A und Gruppe B
Gesamt
Gruppe A (nicht-metastasiertem Gruppe)

Gruppe B (metastasierendem Gruppe)
Anzahl der Patienten
167
42
125
Alter (Median)
64,0
65,0
63,0
Geschlecht (%)
männlich
124 (74,3)
29 (69,0)
95 (76,0)
Weiblich
43 (15,7)
13 (31,0)
30 (24,0)
ECOG PS (%)
0
79 (47,3)
33 (78,6)
46 (36.8) seite 1 von 86 (51,5)
9 (21,4)
77 (61,6) 2
2 (1.2)
0 (0.0)
2 (1.6)
histologischen Typ (%)
Intestinale Typ
60 (35,9)
10 (23,8)
50 (40,0)
Diffuse Typ
107 (64,1)
36 (76,2)
71 (60,0)
T-stage
T1
9 (5.4)
7 (16,7)
2 (1.6)
T2
34 (20,4)
9 (21,4)
25 (20,0)
T3
101 (60,5)
22 (52,4) 79
(63,2)
T4
23 (13,8)
4 (9.5)
19 (15.2)
N-stage
Nx 4 (2.4)
2 (4.8)
2 (1.6)
N0
22 (13.2)
12 (28,6)
10 (8,0)
N1
56 (33,5)
16 (38,1)
40 (32,0)
N2
53 (31,7)
9 (21,4)
44 (35,2)
N3
32 (19,2)
3 (19.2)
29 (23,2)
Metastasiertem Läsion (%)
≦ 1
135 * (80,8)
40 * (95,2)
95 (76,0)
2 ≦
32 (19,2)
2 (4.8)
30 (24,0)
Metastasiertem Website (%)
Lymph Node
92 * (55,1) 19 *
(45,2)
73 (58,4)
Leber
34 (20.3)
2 * * (4.8)
32 (25,6)
Lung
8 (4.8)
0 (0.0)
8 (6.4)
Peritonealdialyse Verbreitung
43 (25,7)
3 ** (7.1)
40 (32,0) Sonstige
6 (3.6)
0 (0.0)
6 (4.8)
Abkürzungen
: ECOG PS
Eastern Cooperative Oncology Group Performance-Status. Staging (TNM-Klassifikation) ist in der japanischen Klassifikation von Magenkarzinom (Die 13. Auflage), * einschließlich Metastasen in regionalen Lymphknoten diagnostiziert. . ** Resectable Läsion
Die MST bei metastasierendem GC Patienten was14.1 Monate (95% CI: 12,5-15,7 Monate). Patienten, deren Tumorgewebe enthielt eine NRB
13.12 Mutation Codon hatten eine signifikant kürzere OS im Vergleich zu denen, die die NRB tragen
Wildtyp (8,8 Monate vs. 14,7 Monate, p = 0,011, Log-Rank-Test). Auf der anderen Seite gab es keinen signifikanten Unterschied in der OS zwischen Patienten mit Wildtyp oder mutierten KRAS
Codon 12/13 (13,2 vs. 15,2 Monate, p = 0,775) und PIK3CA
Exon 20.09 ( 13,6 vs. 9,4 Monate, p = 0,286).
Wir haben die prognostische Faktoren für OS durch univariate ausgewertet und multivariate Analysen bei metastasierendem Gruppe B. Es gibt keine signifikanten Unterschiede zwischen den Variablen der Patienten Hintergrundmerkmale, aber Patienten mit ECOG PS 1 /2 (HR: 1,380, 95% CI: 0,941-2,024) und mehrere Metastasen (HR: 1,452, 95% CI: 0,956-2,206) hatte eine Tendenz durch univariate Analysen kürzer OS zu haben. Durch die multivariate Analyse, 2 oder mehr Metastasen (HR: 1,613, 95% CI: 1,047-2,484) war eine unabhängige Variable in der Vorhersage von kürzeren OS
HRs und 95% CIs von Variablen von Genmutationen (KRAS
. PIK3CA
Exon 9/20 und die NRB
Codon 12/13) wurden nach Alter, Geschlecht, ECOG PS, histologischen Typ und Metastasen Codon 12/13 angepasst. Unter diesen Mutationen,
die NRB 13.12 Mutation Codon war ein unabhängiger Wert in der Vorhersage von kürzeren OS durch multivariate Analyse (bereinigtes HR: 5,607, 95% CI: 1,637 bis 19,203).
Diskussion und Schlussfolgerungen
Unsere Analyse vorgeschlagen, dass Mutationen von KRAS
Codon 12/13 und PIK3CA
Exon 20.09 (Codons 542, 545 und 1047) wurden in AGC Patienten nicht häufig beobachtet, und BRAF
Mutationen (V600E) nicht detektiert. Unseres Wissens nach klinisch-pathologischen Eigenschaften und prognostische Rolle von KRAS
Codon 61, KRAS
Codon 146,
NRB Codon 12/13 und die NRB
Codon 61 nicht in AGC Patienten, die zuvor berichtet worden. Mutationen im KRAS
Codon 61, KRAS
Codon 146 und die NRB
Codon 61 nicht erkannt wurden, aber NRB
Codon 12/13 Mutation wurde in 3 von 159 Patienten (1,9%) in der Gegenwart erkannt Studie. Interessanterweise wurde die intestinalen Typ des Adenokarzinoms häufiger bei Patienten, deren Tumorgewebe enthaltenen KRAS
Codon 12/13 Mutationen und diffuse Art von Adenokarzinom gefunden wurde in allen 3 Patienten beobachtet, deren Tumorgewebe enthielt NRAS
12/13 Mutationen Codon . Außerdem waren
NRAS Mutationen wahrscheinlich mit kürzeren OS in metastatic GC Patienten in Verbindung gebracht werden. Onkogenen Mutationen weisen häufig auf das Vorhandensein eines therapeutischen Ziels, die gerichtete therapeutische Intervention zugänglich sein könnten. Molekulare Ziel Therapie von MARK und PI3K-Akt-Kaskaden ist eine attraktive Strategie in AGC-Patienten.
In fortgeschrittenen Magen-Adenokarzinom des Ösophagus, die Häufigkeit von KRAS
Codon 12/13 Mutationen war etwa 3,4 bis 9,4% nach Biomarker Analysen von kleinformatigen klinischen Studien mit Anti-EGFR-Antikörper-Behandlung [18-20]. Unsere Studie zeigte, dass KRAS
Mutationen in 4,9% der AGC-Patienten beobachtet wurden, die auf die Ergebnisse dieser klinischen Prüfungen ähnlich ist. Mehrere retrospektive Analysen wurden auf Frequenzen und klinisch-pathologischen Eigenschaften von KRAS-Mutationen
bei Magenkrebs berichtet [14-16]. Nach diesen Berichten war die häufigste Mutation des KRAS
Codon 12 G12D, und alle Mutationen des KRAS
Codon 13 waren G13D. Unsere Studie zeigte auch, dass G12D Mutationen die häufigsten Mutationen waren, und wir in 4 von 6 Tumorgewebeproben gefunden, die KRAS
Codon 12 Mutationen enthalten. Auf der anderen Seite, die Mutation
G13D KRAS wurde in unserer Studie (G13V und G13S) nicht erkannt wird, im Gegensatz zu Beobachtungen in früheren Berichten. In diesen früheren Berichten waren die KRAS
Codon 12/13 enthält die meisten Tumorgewebe des intestinalen histologischen Typ. Zhao W et al. schlug vor, dass es erhebliche Unterschiede in der Gegenwart von KRAS-Mutationen
nach Tumorstelle (Antrum vs. nicht Antrum, p = 0,002) und den Status von Mikrosatelliteninstabilität (MSI) (MSI-high vs. MSI-Verlust, S. waren = 0,000076). Die Frequenz des intestinalen Typ des Adenokarzinoms war signifikant höher als die der diffusen Typ des Adenokarzinoms in unserer Studie. Es gab keinen eindeutigen Beweis für eine Rolle von KRAS
Mutationen in der Vorhersage und Prognose des Erfolgs der molekularen Zieltherapie bei AGC. Vor kurzem hat die randomisierte, multizentrische Phase-II /III-REAL-3-Studie, die den Zusatz von Panitumumab zu einer modifizierten Epirubicin, Oxaliplatin getestet und Capecitabin (EOC) Regime, wurde berichtet, und eine multivariate Biomarker-Analyse von 200 Patienten zeigte, dass KRAS
Mutation war ein prognostischer Faktor für OS [7]. In einer groß angelegten klinischen Studie zur Behandlung von Magen-Ösophagus-Krebs mit anti-EGFR-Antikörpern, KRAS
Mutationen zeigte sich auch signifikante prognostischen Wert haben, aber wir müssen dieses Ergebnis zu überprüfen, indem Sie weitere Biomarker für die Behandlung von molekularen Therapie analysiert in AGC.
Gene Amplifikationen, Deletionen und somatische Mutationen Missense mehr in jüngster Zeit haben die PIK3CA
Gen in mehreren malignen Erkrankungen, einschließlich Krebs des Dickdarms, der Brust, Lunge, Gehirn, Leber und Magen [21, 22 berichtet ]. In Magenkrebs, angegeben früheren Berichten, dass die Häufigkeit von PIK3CA
Mutationen (Exons 9 und 20) betrug 2,5 auf 10,6% [12, 14, 20]. Neun von 168 AGC-Patienten (4,5%) hatten PIK3CA
Mutationen in unserer Studie, und es gab keinen großen Unterschied im Vergleich zu früheren Berichten. Einige frühere Berichte vorgeschlagen, eine bessere Prognose für Brustkrebspatientinnen mit PIK3CA
Mutationen, während andere vorgeschlagen, dass PIK3CA
Mutationen mit einer schlechteren Prognose bei Darmkrebs assoziiert waren, Endometriumkarzinom und Lungenkrebs [23-26]. Multivariate Analysen der REAL-3-Studie zeigte, dass PIK3CA
Mutationen, die mit anti-EGFR-Antikörpern in Magen-Ösophagus-Krebs bei der Behandlung schlecht OS Prognose angegeben. Unsere Daten legen nahe, dass PIK3CA
Mutation nicht mit der Prognose in mGC behandelten Patienten mit systemischer Chemotherapie assoziiert war, obwohl diese Studie nicht eine groß angelegte Analyse war. Klinische Studien der molekularen Therapie, die PI3K-AKT-mTOR Wege Ziele wurden vor kurzem eingeleitet worden ist, ergibt sich somit von Biomarker-Analysen dieser Wege erforderlich sind.
NRB
Mutationen wurden in Melanom und Leukämie in erster Linie beschrieben [27, 28] , aber die prognostische Bedeutung in diesen Malignitäten war unklar. Einige frühere Berichte haben einen Zusammenhang zwischen den NRB
Mutationen und einer schlechten Prognose beim Melanom und eine schlechte Reaktion auf anti-EGFR-Antikörper bei Darmkrebs [29] vorgeschlagen. Unsere Studie zeigte, dass die Häufigkeit der NRB
Mutationen (Codons 12 und 13) betrug 1,9% in AGC und war niedriger als die in anderen bösartigen Erkrankungen gesehen. Interessanterweise zeigten multivariate Analysen, dass kleine Gruppen von NRB
Mutationen schlechte Prognose bei metastasierendem Magenkrebs-Patienten hatten, die eine systemische Chemotherapie in dieser Studie erhalten. Wir müssen eine wahrscheinliche Vorspannung der geringen Stichprobengröße von Mutationen
NRB berücksichtigen. Auf der anderen Seite, Patienten Merkmale der NRB
Mutationen waren jünger und kleinere Anzahl von Metastasen Website als alle Wildtyp-Patienten. Es gab keinen signifikanten Unterschied in der Chemotherapien und die Anzahl der Schlüssel Drogen zwischen Patienten mit NRB
Mutationen und all-Wildtyp-Patienten. Bisher haben NRB
Mutationen nicht routinemäßig als prognostischer Biomarker in klinischen Studien von AGC untersucht. Neben prognostische Bedeutung hat, dass die NRB Mutationen sowie KRAS, BRAF
und PIK3CA
Mutationen wäre besser
als potenzielles Ziel für molekulare Therapie bei AGC Patienten diskutiert werden.
Die vorliegende Studie hat einige Einschränkungen. Zunächst werden die Chemotherapien in unserer Studie waren bisherigen Standard-Schemata in der Mitte der 2000er Jahre in Japan. Zweitens konnten wir nicht schließen, auf jeden Fall aus den Daten in unserer Studie allein, dass die NRB
Mutationen prognostische Bedeutung haben wegen der niedrigen Frequenzen der NRB
Mutationen und den großen Vertrauensintervalle. Drittens gibt es einige unzureichende Proben waren und wir brauchten die besseren Methoden der Proben der Erhaltung.
In seinen Schlussfolgerungen zu vereinigen, unsere Studie zeigte, dass die Frequenzen von Genmutationen von KRAS, BRAF
und PIK3CA
sehr ähnlich waren diejenigen, die in früheren Berichten festgestellt. NRB
Mutationen waren selten in AGC Patienten, sondern einen prognostischen Wert in mGC Patienten haben kann, die eine systemische Chemotherapie erhalten. Wir hoffen, dass unsere Ergebnisse auf zukünftige molekulare Therapie von AGC Patienten beitragen
Abkürzungen
AGC:.
Fortgeschrittenem Magenkrebs
mGC:
Metastaric Magenkrebs
EGFR:
epidermal growth factor receptor
FFPE:
Formalin-fixierte, in Paraffin eingebettete

ECOG PS:
Eastern Cooperative Oncology Group Performance-Status
PFS:
progressionsfreie Überleben

OS:
Gesamt-Überleben
HR:
Hazard Rate
CI:
Konfidenzintervall

MST:
Die mittlere Überlebenszeit
EOC.
Pirubicin, Oxaliplatin und Capecitabin

Erklärungen
Danksagung kaufen wir freuen uns sehr über die Beteiligung von Patienten und ihren Familien in dieser Studie, und wir danken allen Co-Ermittler für ihre Beiträge: H. Morita, E. Onishi (National Cancer Center Hospital) und Laborsparte in Korporation SRL (Analysen von Genmutationen).
Finanzierung
Diese Studie wurde von der Gesundheit und Arbeitswissenschaften Forschung Zuschüsse aus dem Ministerium für Gesundheit, Arbeit und Wohlfahrt von Japan (Förder-Nr für Klinische Krebsforschung . H22- Clinical Cancer -019).
Autoren für Bilder eingereichten Originaldateien
Nachfolgend finden Sie die Links zu den Autoren ursprünglich eingereichten Dateien für Bilder.

• Niedrig dosiertes Aspirin-assoziierten oberen Magen-und Zwölffingerdarmgeschwüren bei japanischen Patienten ohne Vorgeschichte von Magen-Darm-ulcers
• Survivin-Gen-Spiegel im peripheren Blut von Patienten mit Magenkrebs vorherzusagen unabhängig Überleben