Clinicopathological funksjoner og prognostiske roller KRAS, BRAF, PIK3CA og NRAS mutasjoner i avansert magekreft

Clinicopathological funksjoner og prognostiske roller KRAS, BRAF, PIK3CA og NRAS mutasjoner i avansert magekreft
Abstract
Bakgrunn
RAS-RAF-MEK-ERK og PI3K-AKT veier utgjør en betydelig kaskade for potensielle molekylære mål terapi i fremskreden kreft. Den kliniske betydningen av mutasjoner i disse genene i avansert magekreft (AGC) er usikker.
Metoder
Vi samles formalinfiksert, parafininnstøpte og friske frosne tumorprøver fra AGC pasienter og analysert KRAS, NRAS, BRAF Hotell og PIK3CA
mutasjoner ved direkte-sekvensering. Vi retrospektivt undersøkt de clinicopathological funksjonene i disse mutasjoner i AGC pasienter og utvalgte pasienter med magekreft med spredning.
Resultater
Blant 167 AGC pasienter, mutasjoner av KRAS
kodon 12/13 (N
= 8 /164, 4,9%), PIK3CA product: (N
= 9/163, 5,5%), og NRAS
kodon 12/13 (N
= 3/159, 1,9%) ble oppdaget. Sammenligning av clinicopathological funksjonene i de muterte KRAS, PIK3CA, NRAS
gener med en helt vill type av disse genene viste at hyppigheten av tarm typen var signifikant høyere hos pasienter med svulstvev inneholdt KRAS
mutasjoner (P
= 0,014). Blant 125 pasienter med magekreft med spredning pasienter med NRAS
kodon 12/13 mutasjoner i sine svulster hadde kortere total overlevelse sammenlignet med NRAS
villtype pasienter (MST: 14,7 vs 8,8 måneder, P
= 0,011 ). Ved multivariate analyser, NRAS
kodon 12/13 mutasjon var en indikator for dårlig prognose hos pasienter med magekreft med spredning (justert HR 5,607, 95% KI: 1,637 til 19,203).
Konklusjoner
Vår studie viste at mutasjoner av KRAS, PIK3CA Hotell og NRAS
var sjelden i AGC. NRAS
mutasjoner var sannsynlig å assosiere med dårlig prognose ved metastaserende tilstand av AGC pasienter, men ytterligere validering av annen forskning er nødvendig.
Bakgrunn
Magekreft er den nest største årsaken til kreftdød på verdensbasis med ca 989 600 nye tilfeller og 738,000 dødsfall per år, sto for om lag 8 prosent av nye kreft [1]. Den høyeste forekomsten er i Øst-Asia, Andes regioner i Sør-Amerika og Øst-Europa, mens de laveste prisene er i Nord-Amerika, Nord-Europa, og de fleste land i Afrika og Sør-Øst Asia.
Grunn utvikling av systemisk kjemoterapi, har overlevelsestiden for avansert magekreft (AGC) er forbedret i løpet av det siste tiåret. En fluoropyrimidin og platina diett er en standard førstelinje kjemoterapi i HER2-negativ magekreft med spredning (MGC) pasienter, og trastuzumab lagt til XP er en standard kjemoterapi ved HER2-positiv MGC pasienter i Japan [2-5]. Selv om noen AGC pasienter oppnådde klinisk nytte av systemisk kjemoterapi, gjorde de fleste av pasientene ikke oppnå en klinisk tilfredsstillende resultat. Novel behandling av MGC med mer effektive og mindre giftige kjemoterapiregimer var nødvendig.
Fase III-studier av molekylære behandling med mTOR-hemmer, anti-VEGF-antistoff, ble anti-EGFR-antistoffer er rapportert i AGC eller gastro-esophageal kreft, men disse stoffene ble ikke vist å ha signifikant effekt [6, 7]. Nylig, ramcirumab, anti-VEGFR target monoklonalt antistoff, ble rapportert å forbedre overlevelsen i kjemoterapi-ildfast MGC pasienter. Det ville være en signifikant terapeutisk fordel for å identifisere effektive biomarkører for å samsvare med de følsomme kreftceller med den passende molekylære mål medikament og belyse ytterligere mekanismer er forbundet med resistens mot kjemoterapi.
Mitogen-aktivert proteinkinase (MAPK) er delvis av en betydelig intracellulære signalreaksjonsveien som regulerer diverse cellulære funksjoner inkludert celle proliferasjon, cellesyklusregulering, celleoverlevelse, angiogenese, og cellevandring [8]. Ras-proteinene ble først identifisert som transformere komponenter av onkogene virus, mens NRAS
ble identifisert som den transformerende komponent av en neuroblastom. Ras mutasjoner er funnet i opptil 30% av alle krefttilfeller og er særlig vanlig i bukspyttkjertel og tykktarm kreft. Raf rekrutteres til cellemembranen via binding til Ras og aktiveres i en kompleks prosess som involverer fosforylering og flere kofaktorer. BRAF
mutasjoner har en smal distribusjon, men er utbredt i noen få bestemte maligne lidelser som melanom, papillær skjoldbruskkjertelkreft, og lav grad av eggstokkreft [9-11]. Betydningen av fosfoinositid 3-kinase (PI3Ks) i kreft ble bekreftet ved den oppdagelse at PIK3CA
-genet, som koder for PI3K katalytiske subenhet p110α, ofte mutert i noen av de mest vanlige humane tumorer [12]. Disse genetiske endringer av PIK3CA
utelukkende består av somatiske missense mutasjoner gruppert i to "hotspot" regioner i exon 9 og 20, svarende til de skrueformede og kinase-domener av p110α, henholdsvis [13].
Nylig har anvendelse av KRAS
, BRAF
, PIK3CA Hotell og NRAS
som biomarkører for molekylære mål terapi i solide tumorer har vært mye diskutert. Flere små-skala biomarkør analyser av KRAS
, BRAF Hotell og PIK3CA
mutasjoner ble rapportert tidligere i AGC [14-16]. Den kliniske betydningen av disse mutasjonene i AGC pasienter ikke allerede er avklart, og videre undersøkelser av disse intracellulære molekylære endringer er nødvendig.
I denne studien gjennomførte vi en genomisk analyse av KRAS
, BRAF
, PIK3CA Hotell og NRAS
mutasjoner for å undersøke clinicopathological funksjoner og prognostisk rolle genmutasjoner i AGC pasienter.
Metoder
pasienter og prøvetaking
Alle data ble hentet fra databasen vår avdeling, og diagram anmeldelsen ble gjort for hver pasient for å få viktig informasjon. Vi samlet inn vevsprøver for analyse av genmutasjon status for KRAS, BRAF, PIK3CA Hotell og NRAS
. Vevsprøver besto av prøver som brukes i forrige biomarkør forskning i vår institusjon [2, 17] og av friske frosne vevsprøver, som ble hentet fra tidligere kirurgiske reseksjoner av AGC i vår institusjon. Tumor vevsprøver av 173 AGC pasienter ble samlet, men ikke nok prøver fra 6 pasienter ble ekskludert. Til slutt brukte vi 167 vevsprøver fra AGC pasienter og undersøkt genmutasjoner av KRAS
, BRAF
, PIK3CA Hotell og NRAS
ved direkte sekvenseringsmetode (hele kullet). Blant 167 AGC pasienter, 42 pasienter gjennomgikk kirurgisk reseksjon uten systemisk kjemoterapi (ikke-metastaserende kohort som gruppe A) og 125 pasienter med magekreft med spredning fått systemisk kjemoterapi (metastatisk kohort som gruppe B). Et diagram med denne studien er vist i figur 1. Informert samtykke til å bruke pasientens tumorvev ble bekreftet fra alle pasientene som deltok i studien, som ble gjennomført med godkjenning av Institutional Ethical Review Board of National Cancer Center i henhold til Helsinki deklarasjonen av 1975 (revidert i 1983). Figur 1 Skisse av denne studien.
Genomisk analyser av KRAS, BRAF, PIK3CA og NRAS
DNA-prøver ble ekstrahert fra formalinfiksert, parafininnstøpte (FFPE) og Dypfryst svulst vev seksjoner. Tumorcellerike områder i hematoxylin og eosin avsnitt ble markert under et mikroskop, og vev ble skrapet fra området for en annen deparaffinized unstained seksjon. DNA fra stykker av riper vevsprøve ble isolert ved hjelp av QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (Qiagen KK, Tokyo, Japan). Exon 2 (kodon 12, 13), ekson 3 (kodon 61), exon 4 (kodon 146) av KRAS
gen og ekson 15 (kodon 600) av BRAF genet
og ekson 9 (kodon 542, 545) , ekson 20 (kodon 1047) av PIK3CA
gen og exon 2 (kodon 12, 13), ble ekson 3 (kodon 61) av NRAS
genet amplifisert ved PCR (GeneAmp PCR System 9700 thermal cycler). PCR-produktene ble synliggjort ved hjelp av agarose-gelelektroforese med etidiumbromidfarging og direkte sekvensert ved anvendelse av et ABI 3130x /Genetic Analyzer (Life Technologies Japan (Applied Biosystems), Tokyo, Japan) i henhold til produsentens instruksjoner
. Behandling, En totalt 125 pasienter i gruppe B fikk systemisk kjemoterapi. Regimer med førstelinje kjemoterapi besto av CP (n = 42, 33,6%), S-1 (n = 39, 31,2%), 5-FU (n = 10, 24,0%), en kombinasjon av 5-FU og metotreksat (n = 10, 8,0%), paclitaxel (n = 3, 2,4%) og XP og /eller bevacizumab (n = 1, 0,8%). Nøkkel anti-kreft narkotika for AGC i Japan er fluorpyrimidin (5-FU, S-1, kapecitabin), cisplatin, irinotecan og taxan. Under hele forløpet av systemisk kjemoterapi i gruppe B var andelen pasienter som fikk 5-FU, cisplatin, irinotecan og taxan var 85,6% (n = 107/125), 52,8% (n = 66/125), 60,8% (n = 76/125), 36,0% (n = 45/125), henholdsvis. I tillegg 22 pasienter (17,6%) fikk alle viktige anti-kreft narkotika, 37 pasienter (29,6%) fikk tre av de viktigste legemidlene, 30 pasienter (24,0%) fikk to av de viktigste rusmidler, og 36 pasienter (28,8%) fikk bare en av de viktigste anti-kreft medikamenter. Tidsplaner og doser av CP, ble S-1 og 5-FU basert på tidligere rapporter [17]. Paclitaxel som monoterapi ble gjentatt tre ganger ukentlig i 4 uker og docetaxel som monoterapi ble gitt ved intravenøs infusjon hver 3. uke.
Statistiske analyser
Vi evaluerte andelen av hver KRAS
, BRAF
, PIK3CA Hotell og NRAS
mutasjon i hele kohorten og prognostiske verdiene av disse mutasjonene, som ble justert variabler av pasientenes egenskaper i form av total overlevelse (OS) i metastatisk gruppe B. OS ble definert som intervallet fra initiering av førstelinje kjemoterapi til død eller siste oppfølging.
Vi utførte statistiske analyser av SPSS statistisk programvare, versjon 19 (IBM, Tokyo, Japan). Forskjeller i fordelingen av variablene ble evaluert ved hjelp av nøyaktig Fisher test eller chi-kvadrat-test, som passer. Median overlevelsestid (MST) ble estimert av Kaplan-Meier metoden og overlevelseskurver ble sammenlignet med log-rank test. Alle testene var tosidig og en p-verdi < 0,05 ble definert som statistisk signifikant. Vi estimert hazard ratio (HR) og tilsvarende 95% konfidensintervall (KI) for OS bruker univariate og multivariate analyser av Cox andel fare modeller. Variabler i denne analysen inkluderte alder (≥median /< median), kjønn (mann /kvinne), ECOG PS (0 /1-2), histologisk type Lauren klassifisering (intestinal type /diffus type), antall metastaser ( enkeltrom /flere).
Resultater
direkte sekvensering av vevsprøver i gruppe B bestemmes andelen av hver av KRAS
, BRAF
, PIK3CA Hotell og NRAS product: (tabell 1). Mutasjoner av KRAS
kodon 12 (3,7%, n = 6/164) og KRAS
kodon 13 (1,2%, n = 2/164), PIK3CA
ekson 9 (4,9%, n = 8 /163), PIK3CA
ekson 20 (0,6%, n = 1/163) og NRAS
mutasjoner (1,9%, n = 3/159) ble oppdaget. På den annen side, mutasjoner i KRAS
kodon 61, KRAS
kodon 146, BRAF
V600E, og NRAS
kodon 146 ble ikke oppdaget. KRAS
kodon 12 mutasjoner besto av G12D (35G > A, n = 4), G12S (34g > A; n = 1) og G12N (34 35GG > AA; n = 1), og kodon 13 mutasjoner besto av G13S (37G > A; n = 1) og G13V (38 39GC > TT; n = 1). PIK3CA
ekson 9 mutasjoner besto av E542K (1624G > A; n = 2), E545K (1633G > A; n = 5), og E545D (1635G > C; n = 1), og exon 20 mutasjoner besto av H1047R (3140A > G; n = 1). NRAS
mutasjoner besto av G12S (34g > A; n = 1) og G13S (37G > A; n = 1). Det var 70 pasienter med svulstvev inneholdt all-wild typer KRAS plakater (exon2, 3, 4), BRAF plakater (ekson 15), PIK3CA plakater (exon9, 20) og NRAS plakater (exon2 , 3). Blant de AGC pasienter med tumor vev som finnes genmutasjoner, flere mutasjoner av KRAS
kodon 13, PIK3CA
kodon 545 og NRAS
kodon 12 ble påvist i bare ett case.Table 1 Resultater av genmutasjoner av KRAS, BRAF, PIK3CA og NRAS i AGC pasienter
Genmutasjoner
Andel (%)
Utilstrekkelig DNA-prøver
KRAS kodon 12
6/164 (3,7)
3/167
KRAS kodon 13
2/164 (1,2)
3/167
KRAS kodon 61
0/131 (0,0)
36/167
KRAS kodon 146
0/137 (0,0)
30/167
BRAF V600E
0/136 (0,0)
31/167
PIK3CA ekson 9
8 /163 (4,9)
4/167
PIK3CA ekson 20
1/163 (0,6)
4/167
NRAS kodon 12
1/159 (0,6)
8 /167
NRAS kodon 13
2/159 (1,3)
8/167
NRAS kodon 61
0/135 (0,0)
32/167 Bedrifter Den clinicopathological funksjoner av hvert gen mutasjon sammenlignet med all-villtype er oppsummert i tabell 2. median alder av pasienter med svulstvev inneholdt mutasjoner av KRAS
, PIK3CA Hotell og NRAS plakater (54,5, 58,0 og 56,0 år, henholdsvis) var lavere enn for pasienter som inneholder all-wild typer KRAS, BRAF, PIK3CA Hotell og NRAS product: (median alder 64,0 år).
Det var ingen signifikant forskjell, bortsett fra for histologisk type, blant variabler av clinicopathological funksjoner som kjønn, alder, ECOG PS og antall metastaser. Sammenlignet med all-villtype pasienter var andelen tarmtypen var høyere hos pasienter med KRAS
kodon 12/13 mutasjon (p = 0,014). Den histologiske tumortype i alle pasienter med svulstvev inneholdt NRAS
mutasjoner var den diffuse typen adenocarcinoma.Table 2 Sammenligning av clinocopathological funksjoner ved genmutasjoner status sammenlignet med all-villtype hos pasienter med AGC pasienter
all villtype
KRAS
kodon 12/13
PIK3CA
exon 9/20
NRAS
codon12 /13

KRAS, BRAF, NRAS, PIK3CA
Mutant typen
P
-verdi
Mutant typen
P
- verdi
Mutant typen
P
-verdi
Antall pasienter
70
8
9
3
Median alder
64,0
54,5
58,0
56,0
Kjønn (%)
Mann fra 49 (70,0)
7 (87,5)
0,429
8 (88,9)
0,432
2 (87.5)
1,000
Kvinne
21 (30,0)
1 (12,5)
1 (11,1)
1 (12,5)
ECOG PS (%)
0
38 (54,3)
3 (37,5)
0,466
fire (44,4)
0,727
1 (33,3)
0,476
en ≦
32 (45,7)
5 (62,5)
5 (55,6)
2 (66,7)
Histologisk type (%)
Tarm typen
20 (28,6)
6 (75,0)
0,014
fire (44,4)
0,443
0 (0,0)
0,556
Diffuse typen
50 (71,4)
2 (25,0)
5 (55,6)
3 (100,0)
Antall metastatisk nettstedet (%)
1 54 (77,1)
8 (100,0)
0,195
8 (88,9)
0,675
3 (100,0)
1,000
2 ≦
16 (22,9)
0 (0,0)
1 ( 11.1)
0 (0,0)
Metastatisk lesjon (%)
lymfeknute
41 (58,6)
3 (37,5)
0,348
6 (66,7)
0,717
2 (66,7)
0,851
Liver
14 (20,0)
3 (37,5)
3 (33,3)
1 (33,3)
Lung
2 (2,9)
1 (12,5)
0 (0,0)
0 (0,0)
Peritoneal formidling
18 (25,7)
1 (12,5)
1 ( 11.1)
0 (0,0)
Andre
3 (4,3)
0 (0,0)
0 (0,0)
0 (0,0)
Forkortelser
: ECOG PS
Eastern Cooperative Oncology Group funksjonstilstand. Vi beskrev de kliniske data fra 90 pasienter, og vi utelatt de pasienter som har tumor vev hadde ingen genmutasjoner men minst ett gen kunne ikke evalueres.
Bakgrunns egenskapene av magekreft-pasienter er vist i Tabell 3. De fleste pasientene (98,4%) var ECOG PS 0/1, og bare 2 pasienter (1,6%) var ECOG PS 2. totalt 71 pasienter (60,0%) hadde histologisk diffuse tumortype, og 50 pasienter (40,0%) hadde tarm type adenokarsinom. Som for antall metastaser, 30 pasienter (24,0%) hadde metastaser til flere organer, og 95 pasienter (76,0%) hadde metastaser til et organ. Vanlige metastaser var lymfeknuter, bukhinne og liver.Table 3 Bakgrunns karakteristikker av pasienter med total kohort, gruppe A og gruppe B
Total
Gruppe A (ikke-metastatisk gruppe)

Gruppe B (metastatisk gruppe)
Antall pasienter
167
42
125
Age (median)
64,0
65,0
63,0
Gender (%)
Mann fra 124 (74,3)
29 (69,0)
95 (76,0)
Kvinne
43 (15,7)
13 (31,0)
30 (24,0)
ECOG PS (%)
0
79 (47,3)
33 (78,6)
46 (36,8)
1 86 (51,5)
9 (21,4)
77 (61,6)
2
2 (1,2)
0 (0,0)
2 (1,6)
Histologisk type (%)
tarm~~POS=TRUNC typen
60 (35,9)
10 (23,8)
50 (40,0)
Diffus typen
107 (64,1)
36 (76,2)
71 (60,0)
T-trinns
T1
9 (5,4)
7 (16,7)
2 (1,6)
T2
34 (20,4)
9 (21,4)
25 (20,0)
T3
101 (60,5)
22 (52,4)
79 (63,2)
T4
23 (13,8)
4 (9,5)
19 (15,2)
N-stage
Nx
4 (2,4)
2 (4,8)
2 (1,6)
N0
22 (13,2)
12 (28,6)
10 (8,0)
N1
56 (33,5)
16 (38,1)
40 (32,0)
N2
53 (31,7)
9 (21,4)
44 (35,2)
N3
32 (19,2)
3 (19,2)
29 (23,2)
Metastatisk lesjon (%)
≦ en
135 * (80,8)
40 (95,2)
95 (76,0)
2 ≦
32 (19,2)
2 (4,8)
30 (24,0)
Metastatisk nettstedet (%)
lymfeknute
92 (55,1)
19 (45,2)
73 (58,4)
Liver
34 (20,3)
2 * (4.8)
32 (25,6)
Lung
8 (4.8)
0 (0,0)
8 (6,4)
Peritoneal formidling
43 (25,7)
3 ** (7,1)
40 (32,0)
Andre
6 (3,6)
0 (0,0)
6 (4,8)
Forkortelser
: ECOG PS
Eastern Cooperative Oncology Group funksjonstilstand. Staging (TNM klassifisering) er diagnostisert av japansk Klassifisering av magekarsinom (13. utgave), * inkludert metastaser til regionale lymfeknuter. . ** Resectable lesjon
MST i metastatisk GC pasienter was14.1 måneder (95% KI: 12.5-15.7 måneder). Pasienter som svulstvev inneholdt en NRAS
kodon 12/13 mutasjon hadde en vesentlig kortere OS sammenlignet med dem som bærer NRAS
villtype (8,8 måned vs. 14,7 måneder, p = 0,011, log-rank test). På den annen side var det ingen signifikant forskjell i OS mellom pasienter med villtype eller mutant type KRAS
kodon 12/13 (13,2 vs. 15,2 måneder, p = 0,775) og PIK3CA
ekson 9/20 ( 13,6 vs. 9,4 måneder, p = 0,286).
Vi evaluerte de prognostiske faktorer for OS ved univariate og multivariate analyser ved metastaserende gruppe B. Det var ingen signifikant forskjell mellom variabler av pasientbakgrunns egenskaper, men pasienter med ECOG PS 1 /2 (HR: 1.380, 95% KI: 0,941 til 2,024) og flere metastaser (HR: 1,452, 95% KI: 0.956-2.206) hadde en tendens til å ha kortere OS ved univariate analyser. Ved multivariat analyse, to eller flere metastaser (HR: 1,613, 95% KI: 1,047 til 2,484) var en uavhengig variabel i prediksjon av kortere OS
timer og 95% konfigurasjons av variabler av genmutasjoner (KRAS
. kodon 12/13, ble PIK3CA
ekson 9/20 og NRAS
kodon 12/13) justert etter alder, kjønn, ECOG PS, histologisk type og metastaser. Blant disse mutasjonene, den NRAS
kodon 12/13 mutasjon var en selvstendig verdi i prediksjon av kortere OS ved multivariat analyse (justert HR: 5,607, 95% KI: 1,637 til 19,203).
Diskusjon og konklusjoner
vår analyse antydet at mutasjoner av KRAS
kodon 12/13 og PIK3CA
ekson 9/20 (kodon 542, 545 og 1047) ikke ble observert ofte i AGC pasienter, og BRAF
mutasjoner (V600E) var ikke oppdaget. Så vidt vi vet, clinicopathological funksjoner og prognostiske roller KRAS
kodon 61, KRAS
kodon 146, NRAS
kodon 12/13 og NRAS
kodon 61 har ikke blitt rapportert i AGC pasienter som tidligere. Mutasjoner i KRAS
kodon 61, KRAS
kodon 146 og NRAS
kodon 61 ble ikke oppdaget, men NRAS
kodon 12/13 mutasjonen ble oppdaget i tre av 159 pasienter (1,9%) i nåtiden studere. Interessant nok var tarm typen adenokarsinom funnet oftere hos pasienter med svulstvev inneholdt KRAS
kodon 12/13 mutasjoner og diffuse typen adenokarsinom ble observert i alle 3 pasienter med svulstvev inneholdt NRAS
kodon 12/13 mutasjoner . I tillegg NRAS
mutasjoner var sannsynlig å bli assosiert med kortere OS med metastatisk GC pasienter. Onkogene mutasjoner ofte peke på nærværet av et terapeutisk mål som kan være mottakelig for rettet terapeutisk intervensjon. Molekylære mål terapi av MARK og PI3K-Akt kaskader er en attraktiv strategi i AGC pasienter.
I avansert gastro-esophageal adenokarsinom, hyppigheten av KRAS
kodon 12/13 mutasjoner var ca 3.4 til 9.4% i henhold til biomarkør analyser av liten størrelse kliniske studier med anti-EGFR antistoffer behandling [18-20]. Vår undersøkelse indikerte at KRAS
mutasjoner ble observert hos 4,9% av pasientene AGC, som er lik resultatene av disse kliniske forsøk. Flere retrospektive analyser har rapportert om frekvenser og clinicopathological funksjoner i KRAS
mutasjoner i magekreft [14-16]. Ifølge disse rapportene, den vanligste mutasjon av KRAS
kodon 12 var G12D, og ​​alle mutasjoner av KRAS
kodon 13 var G13D. Vår studie viste også at G12D mutasjoner var de mest vanlige mutasjoner, og vi fant i 4 av 6 svulst vevsprøver som inneholder KRAS
kodon 12 mutasjoner. På den annen side ble det G13D KRAS
mutasjon ikke påvist i vårt studium (G13V og G13S), i motsetning til observasjoner i tidligere rapporter. I disse tidligere rapporter, de fleste av tumorvev som inneholder KRAS
kodon 12/13 var av tarm histologisk type. Zhao W et al. antydet at det var signifikante forskjeller i nærvær av KRAS
mutasjoner i henhold til tumorstedet (antrum vs. non-antrum, p = 0,002) og status for mikro ustabilitet (MSI) (MSI-høy vs. MSI-tap, p = 0,000076). Frekvensen av tarmtypen adenokarsinom var signifikant høyere enn den til den diffuse type adenokarsinom i vårt studium. Det var ingen klare bevis for en rolle KRAS
mutasjoner i prediksjon og prognose for suksessen til molekylære mål terapi i AGC. Nylig, randomisert, multisenter, fase II /III REAL-3 rettssaken, som testet tillegg av panitumumab til en modifisert epirubicin, oksaliplatin, og kapecitabin (EOC) diett, ble rapportert, og en multivariat biomarkør analyse av 200 pasienter indikerte at KRAS
mutasjon var en prognostisk faktor for OS [7]. I en storstilt klinisk utprøving av behandling av mage-esophageal kreft med anti-EGFR antistoffer, KRAS
mutasjoner også ut til å ha betydelig prognostisk verdi, men vi må bekrefte dette resultatet ved ytterligere biomarkør analyser av behandling av molekylær terapi i AGC.
gene presiseringer, slettinger og mer nylig, somatiske missense mutasjoner i PIK3CA
genet har blitt rapportert i flere maligniteter, inkludert kreft i tykktarm, bryst, lunge, hjerne, lever og mage [21, 22 ]. I magekreft, tidligere rapporter tydet på at frekvensen av mutasjoner PIK3CA
(eksoner 9 og 20) var 2,5 til 10,6% [12, 14, 20]. Ni av 168 AGC pasienter (4,5%) hadde PIK3CA
mutasjoner i vår studie, og det var ingen stor forskjell sammenlignet med tidligere rapporter. Noen tidligere rapporter foreslo en bedre prognose for brystkreftpasienter med PIK3CA
mutasjoner, mens andre foreslått at PIK3CA
mutasjoner ble assosiert med en dårligere prognose i tykktarmskreft, livmorkreft og lungekreft [23-26]. Multivariate analyser av REAL-tre prøve indikerte at PIK3CA
mutasjoner indikerte dårlig OS prognose ved behandling med anti-EGFR-antistoffer i gastro-esophageal kreft. Våre data antydet at PIK3CA
mutasjonen ikke var assosiert med prognosen i MGC pasienter behandlet med systemisk kjemoterapi, selv om denne studien var ikke en storstilt analyse. Kliniske studier av molekylære terapi som er rettet mot PI3K-AKT-mTOR trasé er igangsatt nylig, og dermed resultatene av biomarkør analyser av disse banene er nødvendig.
NRAS
mutasjoner er i hovedsak beskrevet i melanom og leukemi [27, 28] , men prognostisk betydning i disse ondartede sykdommer har vært uklar. Noen tidligere rapporter har antydet en sammenheng mellom NRAS
mutasjoner og en dårlig prognose ved melanom og dårlig respons på anti-EGFR-antistoffer i kolorektal kreft [29]. Vår studie viste at hyppigheten av NRAS
mutasjoner (kodon 12 og 13) var 1,9% i AGC og var lavere enn det man ser i andre kreftformer. Interessant, multivariate analyser viste at små grupper av NRAS
mutasjoner hadde dårlig prognose i magekreft med spredning pasienter som fikk systemisk kjemoterapi i studien. Vi må vurdere en sannsynlig skjevhet av liten utvalgsstørrelse på NRAS
mutasjoner. På den annen side, pasientens karakteristika NRAS
mutasjoner var yngre og mindre antall metastaser område enn alle vill-type pasienter. Det var ingen signifikant forskjell i kjemoterapikurer og rekke viktige legemidler mellom pasienter med NRAS
mutasjoner og all-villtype pasienter. Tidligere har NRAS
mutasjoner ikke undersøkt rutinemessig som en prognostisk biomarkør i kliniske studier med AGC. I tillegg til å ha prognostisk betydning, at NRAS
mutasjoner samt KRAS, BRAF Hotell og PIK3CA
mutasjoner ville være bedre å bli diskutert som potensielt mål for molekylær terapi i AGC pasienter.
Studien har flere begrensninger. Først de kjemoterapeutiske regimer i vår studie var tidligere standardregimer på midten av 2000-tallet i Japan. For det andre, vi kunne ikke konkludere definitivt fra dataene i vår studie alene som NRAS
mutasjoner har prognostisk betydning på grunn av de lave frekvensene av NRAS
mutasjoner og de store konfidensintervall. Tredje, var det noen utilstrekkelige prøver og vi trengte å forene de bedre metoder for prøvens bevaring.
I konklusjoner, indikerte vår studie at frekvensene av genmutasjoner av KRAS, BRAF Hotell og PIK3CA
var svært lik som ble observert i tidligere rapporter. NRAS
mutasjoner var sjeldne i AGC pasienter, men kan ha en prognostisk verdi i MGC pasienter som får systemisk kjemoterapi. Vi håper at våre resultater vil bidra til fremtidig molekylær terapi av AGC pasienter
Forkortelser
AGC.
Avansert magekreft
MGC:
Metastaric magekreft
EGFR:
epidermal vekstfaktor reseptor
FFPE:
Formalin fiksert, parafininnebygd

ECOG PS:
Eastern Cooperative Oncology Group funksjonstilstand
PFS:
Progresjon overlevelse

OS:
Total overlevelse
HR:
Hazard sats
CI:
Konfidensintervall

MST:
Median overlevelse
EOC.
Pirubicin, oksaliplatin, og kapecitabin

Erklæringer
Takk
Vi setter pris på veldig mye deltakelse av pasienter og deres familier i denne studien, og vi takker alle co-etterforskere for deres bidrag: H. Morita, E. Onishi (National Cancer Center Hospital) og laboratorium divisjon i selskap av SRL (Analyser av genmutasjoner).
Funding
Denne studien ble støttet av Helse og Ap Sciences Stipend for klinisk kreftforskning fra Helsedepartementet, Arbeids- og velferds av Japan (Grant Nei . H22- Clinical Cancer -019).
forfatternes opprinnelige innsendte filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder.

• Low-dose aspirin-forbundet øvre mage og duodenalsår hos japanske pasienter uten tidligere historie med magesår ulcers
• Survivin genet nivåer i perifert blod hos pasienter med magekreft uavhengig forutsi survival