Clinicopathologische functies en prognostische rol van KRAS, BRAF, PIK3CA en de NRI's mutaties in geavanceerde maag cancer

clinicopathologische functies en prognostische rol van KRAS, BRAF, PIK3CA en de NRI's mutaties in gevorderde maagkanker
Abstracte achtergrond
RAS-RAF -MEK-ERK en PI3K-AKT paden vormen een belangrijk cascade voor potentieel doelwit therapie bij vergevorderde kanker. De klinische betekenis van mutaties in deze genen in gevorderde maagkanker (AGC) is onzeker.
Methods
We verzamelden formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde en vers ingevroren tumor monsters van AGC patiënten en analyseerde de KRAS NRI, BRAF Kopen en PIK3CA
mutaties door direct-sequencing. We retrospectief onderzoek gedaan naar de klinisch-pathologische kenmerken van deze mutaties in AGC patiënten en geselecteerde patiënten met gemetastaseerde maagkanker.
Resultaten
Onder 167 AGC patiënten, mutaties van KRAS
codons 12/13 (N = 8
/164, 4,9%), PIK3CA
(N
= 9/163, 5,5%), en de NRI
codon 12/13 (N
= 3/159, 1,9%) werden aangetroffen. Vergelijking van de klinische en pathologische kenmerken van de gemuteerde KRAS, PIK3CA, NRAS
genen met een all-wildtype van deze genen toonde aan dat de frequentie van de intestinale soort was significant hoger bij patiënten bij wie tumorweefsel opgenomen KRAS
mutaties (P
= 0,014). Onder de 125 patiënten met gemetastaseerde maagkanker, patiënten met NRAS
codon 12/13 mutaties in hun tumoren hadden kortere totale overleving in vergelijking met de NRI
wild-type patiënten (MST: 14,7 versus 8,8 maanden, p = 0,011
). Door multivariate analyses, NRAS
codon 12/13 mutatie was een indicator voor de slechte prognose bij patiënten met gemetastaseerde maagkanker (gecorrigeerde HR 5,607, 95% CI: 1,637-19,203).
Conclusies
Onze studie bleek dat mutaties van het KRAS, PIK3CA
en de NRI
zeldzaam waren in AGC. NRAS
mutaties waren waarschijnlijk te associëren met een slechte prognose in metastatische toestand van AGC patiënten, maar verdere validatie van andere onderzoek nodig. Achtergrond
Maagkanker is de tweede belangrijke oorzaak van kanker overlijden wereldwijd ongeveer 989.600 nieuwe gevallen en 738.000 sterfgevallen per jaar, goed voor ongeveer 8 procent van de nieuwe vormen van kanker [1]. De hoogste incidentiecijfers zijn in Oost-Azië, de Andes-regio van Zuid-Amerika en Oost-Europa, terwijl de laagste tarieven zijn in Noord-Amerika, Noord-Europa, en de meeste landen in Afrika en Zuid-Oost-Azië.
Door ontwikkeling van systemische chemotherapie, heeft de overlevingstijd voor gevorderde maagkanker (AGC) is verbeterd in de loop van het afgelopen decennium. Een fluoropyrimidine en platina regime is een standaard eerstelijns chemotherapie in HER2-negatieve gemetastaseerde maagkanker (MGC) patiënten en trastuzumab toegevoegd aan XP is een standaard chemotherapie bij HER2-positieve patiënten MGC in Japan [2-5]. Hoewel sommige patiënten AGC verkregen klinische voordeel van systemische chemotherapie, meeste patiënten geen klinisch bevredigend resultaat te bereiken. Nieuwe behandeling MGC met effectiever en minder toxisch chemotherapie nodig was.
Fase III studies van moleculaire therapie met mTOR remmer, anti-VEGF-antilichaam, werden anti-EGFR antilichamen gerapporteerd AGC of gastro-oesofageale kanker, maar deze medicijnen kon niet worden aangetoond significante werkzaamheid hebben [6, 7]. Onlangs ramcirumab, anti-VEGFR doel monoklonaal antilichaam, werd gemeld aan de overleving bij chemotherapie-refractaire MGC patiënten. Het zou een significant therapeutisch voordeel effectieve biomarkers identificeren om de reagerende kankercellen met het geschikte doelwit drug passen, verklaren verdere mechanismen van de resistentie tegen chemotherapie. Ondernemingen De mitogeen-geactiveerde proteïne kinase (MAPK) is onderdeel een belangrijke intracellulaire signaalroute die diverse cellulaire functies reguleert, waaronder celproliferatie, celcyclus regulatie, celoverleving, angiogenese en celmigratie [8]. De Ras-eiwitten werden aanvankelijk geïdentificeerd als transformerende componenten van oncogene virussen, terwijl NRAS
werd geïdentificeerd als transformerende component van een neuroblastoom. Ras mutaties zijn gevonden in maximaal 30% van alle kankers en zijn zeer gangbaar in pancreas en colonkanker. Raf is aangeworven om het celmembraan door binding aan Ras en is geactiveerd in een complex proces waarbij fosforylatie en meerdere cofactoren. BRAF
mutaties hebben een smalle, maar heersen in enkele specifieke tumoren, zoals melanoom, papillaire schildklierkanker, en low-grade eierstokkanker [9-11]. Het belang van fosfoinositide 3-kinase (PI3K) kanker werd bevestigd door de ontdekking dat de PIK3CA
gen codeert de PI3K katalytische subeenheid p110α, vaak gemuteerd in een aantal van de meest voorkomende menselijke tumoren [12]. Deze genetische veranderingen van PIK3CA
uitsluitend uit somatische missense mutaties geclusterd in twee "hotspot" regio exons 9 en 20, overeenkomend met de rechte en kinase domeinen van p110α respectievelijk [13].
Onlangs is het gebruik van KRAS
, BRAF
, PIK3CA
en de NRI
als biomarkers voor moleculaire doelwit therapie bij solide tumoren is op grote schaal besproken. Verschillende kleine schaal biomarker analyses van KRAS
, BRAF Kopen en PIK3CA
mutaties werden eerder gemeld in AGC [14-16]. De klinische betekenis van deze mutaties in AGC patiënten die nog niet is opgehelderd, en nader onderzoek van deze intracellulaire moleculaire veranderingen nodig zijn.
In de huidige studie, voerden we een genomische analyse van KRAS
, BRAF
, PIK3CA Kopen en NRAS
mutaties om de clinicopathologische functies en prognostische rol van genmutaties bij AGC patiënten te onderzoeken.
methoden
patiënten en monstername
Alle gegevens uit de database van werden geëxtraheerd onze afdeling, en grafiek beoordeling is gedaan voor elke patiënt om belangrijke informatie te verkrijgen. We verzamelden weefselmonsters voor de analyse van de genmutatie status van KRAS, BRAF, PIK3CA
en de NRI's
. Weefsel monsters bestonden uit monsters bij eerdere biomarker onderzoek in ons instituut [2, 17] en bevroren weefselmonsters, die werden verkregen uit eerdere chirurgische resectie van AGC in onze instelling. Tumorweefselmonsters van AGC 173 patiënten werden verzameld, maar onvoldoende monsters van 6 patiënten werden uitgesloten. Tot slot, gebruikten we 167 weefselmonsters van AGC patiënten en onderzochten genmutaties van KRAS
, BRAF
, PIK3CA
en de NRI
door de directe-sequencing methode (hele cohort). Onder de 167 AGC patiënten, 42 patiënten ondergingen chirurgische resectie zonder systemische chemotherapie (niet-uitgezaaide cohort groep A) en 125 patiënten met gemetastaseerde maagkanker ontving systemische chemotherapie (gemetastaseerd cohort als groep B). Een diagram van de huidige studie wordt weergegeven in figuur 1. Informed consent van het gebruik van de patiënt de tumor weefsel werd bevestigd van alle patiënten die deelnamen aan de studie, die werd uitgevoerd met de goedkeuring van de Institutional Ethische Review Board van het National Cancer Center in overeenkomstig de verklaring van Helsinki van 1975 (zoals herzien in 1983). Figuur 1 Schema van deze studie.
Genomic analyses van KRAS, BRAF, PIK3CA en de NRI
DNA-monsters werden geëxtraheerd uit in formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde (FFPE) en vers ingevroren tumorweefsel secties. Tumorcel-rijke gebieden in de hematoxyline en eosine afdeling werden gekenmerkt onder een microscoop, en weefsel werd gekrast uit het gebied van een andere gedeparaffineerde ongekleurde sectie. DNA uit stukken van de bekraste weefselmonster werd geïsoleerd met behulp van de QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (QIAGEN KK, Tokyo, Japan). Exon 2 (codon 12, 13), exon 3 (codon 61), exon 4 (codon 146) van KRAS
gen en exon 15 (codon 600) van
BRAF gen en exon 9 (codon 542, 545) , exon 20 (codon 1047) van PIK3CA
gen en exon 2 (codon 12, 13), exon 3 (codon 61) van NRAS
-gen werden geamplificeerd door PCR (de GeneAmp PCR System 9700 thermal cycler). De PCR-producten werden gevisualiseerd met behulp van agarose gelelektroforese met ethidiumbromide kleuring en direct gesequentieerd met behulp van een ABI 3130X /Genetic Analyzer (Life Technologies Japan (Applied Biosystems), Tokyo, Japan) volgens de instructies van de fabrikant.
Behandeling A
in totaal 125 patiënten in groep B kreeg systemische chemotherapie. Regimes van eerstelijns chemotherapie bestond uit CP (n = 42, 33,6%), S-1 (n = 39, 31,2%), 5-FU (n = 10, 24,0%), een combinatie van 5-FU en methotrexate (n = 10, 8,0%), paclitaxel (n = 3, 2,4%) en XP en /of bevacizumab (n = 1, 0,8%). Key anti-kanker medicijnen voor AGC in Japan zijn fluoropyrimidine (5-FU, S-1, capecitabine), cisplatine, irinotecan en taxaan. Gedurende het hele verloop van systemische chemotherapie in groep B, de verhoudingen van de patiënten die 5-FU, cisplatine, irinotecan en taxaan waren 85,6% (n = 107/125), 52,8% (n = 66/125), 60,8% (n = 76/125), 36,0% (n = 45/125), respectievelijk. Bovendien, 22 patiënten (17,6%) ontvingen alle belangrijke antikankergeneesmiddelen, 37 patiënten (29,6%) ontvingen 3 van de belangrijkste geneesmiddelen, 30 patiënten (24,0%) kreeg 2 van de belangrijkste geneesmiddelen, en 36 patiënten (28,8%) kreeg slechts één van de belangrijkste anti-kanker geneesmiddelen. De schema's en doseringen CP, S-1 en 5-FU waren gebaseerd op de eerdere rapporten [17]. Paclitaxel als monotherapie werd herhaald drie keer per week gedurende 4 weken en de docetaxel als monotherapie werd gegeven door een intraveneuze infusie eenmaal per 3 weken.
Statistische analyses
We evalueerden het aandeel van elk KRAS
, BRAF
, PIK3CA
en de NRI
mutatie in hele cohort en de voorspellende waarde van deze mutaties, die in termen van algemene overleving (OS) bij uitgezaaide groep B. OS variabelen van de kenmerken van de patiënten werden aangepast werd gedefinieerd als het interval van initiatie van eerstelijns chemotherapie tot de dood of de laatste follow-up.
We voerden statistische analyses door SPSS statistische software, versie 19 (IBM, Tokyo, Japan). Verschillen in de verdeling van variabelen werden beoordeeld volgens de Fisher exact test of chi-kwadraat test waar nodig. Mediane overlevingstijd (MST) werd geschat door de Kaplan-Meier-methode en overleving curves werden vergeleken met de log-rank test. Alle testen waren tweezijdig en een p-waarde < 0,05 werd gedefinieerd als statistisch significant. We schatten hazard ratio (HR) en de bijbehorende 95% betrouwbaarheidsinterval (BI) voor OS gebruik univariate en multivariate analyse door Cox risico verhouding modellen. Variabelen in deze analyse omvatte leeftijd (≥median /< mediaan), geslacht (man /vrouw), ECOG PS (0 /1-2), histologische type Lauren classificatie (intestinaal soort /diffuse type), het aantal van metastatische sites ( single /multiple).
Resultaten
Directe sequentiebepaling van weefselmonsters in groep B bepaald het aandeel van elk van KRAS
, BRAF
, PIK3CA
en de NRI
(tabel 1). Mutaties van KRAS
codon 12 (3,7%, n = 6/164) en KRAS
codon 13 (1,2%, n = 2/164), PIK3CA
exon 9 (4,9%, n = 8 /163), PIK3CA
exon 20 (0,6%, n = 1/163) en NRAS
mutaties (1,9%, n = 3/159) werden gedetecteerd. Aan de andere kant, mutaties in KRAS
codon 61, KRAS
codon 146, BRAF
V600E, en de NRI
codon 146 werden niet gedetecteerd. KRAS
codon 12 mutaties bestond uit G12D (35G > A, n = 4) G12S (34G > A; n = 1) en G12N (34 35GG > AA; n = 1), en codon 13 mutaties bestond uit G13S (37G > A; n = 1) en G13V (38 39GC > TT; n = 1). PIK3CA
exon 9 mutaties bestond uit E542K (1624G > A; n = 2), E545K (1633G > A; n = 5), en E545D (1635G > C; n = 1), en exon 20 mutatie bestond uit H1047R (3140A > G; n = 1). NRAS
mutaties bestond uit G12S (34G > A; n = 1) en G13S (37G > A; n = 1). Er waren 70 patiënten bij wie de tumor weefsel bevatte alle-wild type KRAS
(exon2, 3, 4), BRAF
(exon 15), PIK3CA
(exon9, 20) en de NRI
(exon2 , 3). Onder de AGC patiënten bij wie de tumor weefsel vervat genmutaties, meerdere mutaties van het KRAS
codon 13, PIK3CA
codon 545 en de NRI
codon 12 werden gedetecteerd in slechts één case.Table 1 Resultaten van genmutaties van KRAS, BRAF, PIK3CA en de NRI's bij AGC patiënten
Genmutaties
aandeel (%)
Onvoldoende DNA-monsters
KRAS codon 12
6/164 (3,7)
3/167
KRAS codon 13
2/164 (1.2)
3/167
KRAS codon 61
0/131 (0,0)
36/167
KRAS codon 146
0/137 (0,0)
30/167
BRAF V600E
0/136 (0,0)
31/167
PIK3CA exon 9
8 /163 (4.9)
4/167
PIK3CA exon 20
1/163 (0,6)
4/167
NRAS codon 12
1/159 (0,6)
8 /167
NRAS codon 13
2/159 (1.3)
8/167
NRAS codon 61
0/135 (0,0)
32/167
De klinische en pathologische kenmerken elke genmutatie in vergelijking met de volledig wildtype zijn samengevat in Tabel 2. de gemiddelde leeftijd van de patiënten bij wie tumorweefsel bevatte mutaties van KRAS
, PIK3CA Kopen en NRAS
(54,5, 58,0 en 56,0 jaar, respectievelijk) waren lager dan die van patiënten met alle-wild type KRAS, BRAF, PIK3CA
en de NRI
(mediane leeftijd 64,0 jaar).
Er was geen significant verschil, behalve voor histologische type, de onder variabelen van clinicopathologische functies, zoals geslacht, leeftijd, ECOG PS en de nummers van metastatische sites. In vergelijking met wildtype-patiënten was het aantal intestinale soort was hoger bij patiënten met KRAS
codon 12/13 mutatie (p = 0,014). De histologische tumor type alle patiënten bij wie de tumor weefsel vervat NRAS
mutaties was het diffuse type adenocarcinoma.Table 2 Vergelijking van clinocopathological kenmerken door genmutaties-status in vergelijking met al-wild-type bij patiënten met AGC patiënten
alle wild-type
KRAS
codon 12/13
PIK3CA
exon 9/20
NRAS
codon12 /13

KRAS, BRAF NRI, PIK3CA
Mutant soort
P
-waarde
Mutant soort
P
- waarde
Mutant soort
P
-waarde
Aantal patiënten
70
8
9
3
Median leeftijd
64,0
54,5
58,0
56,0
Geslacht (%)
Man
49 (70,0)
7 (87,5)
0,429
8 (88,9)
0,432 Pagina 2 (87.5)
1.000
Vrouw
21 (30,0)
1 (12.5)
1 (11,1)
1 (12.5)
ECOG PS (%)
0
38 (54,3)
3 (37,5)
0,466 verhuur 4 (44.4)
0,727
1 (33.3)
0,476
1 ≦
32 (45,7)
5 (62,5)
5 (55,6) Pagina 2 (66.7)
histologische type (%)
Intestinale soort
20 (28.6)
6 (75,0)
0,014 verhuur 4 (44.4)
0,443
0 (0,0)
0,556
Diffuse soort
50 (71,4) Pagina 2 (25.0)
5 (55.6)
3 (100.0)
Aantal metastatische website (%) 1
54 (77,1)
8 (100,0)
0,195
8 (88,9)
0,675
3 (100.0)
1.000 Pagina 2 ≦
16 (22,9)
0 (0,0)
1 ( 11.1)
0 (0,0)
uitgezaaide laesie (%)
Lymfeklier
41 (58,6)
3 (37,5)
0,348
6 (66,7)
0,717 Pagina 2 (66.7)
0,851
lever
14 (20,0)
3 (37,5)
3 (33,3)
1 (33.3)
Lung
2 (2.9)
1 (12.5)
0 (0,0)
0 (0,0)
peritoneale verspreiding
18 (25,7)
1 (12.5)
1 ( 11.1)
0 (0,0)
overig 3 (4.3)
0 (0,0)
0 (0,0)
0 (0,0)
Afkortingen Twitter: ECOG PS
Eastern Cooperative Oncology Group performance status. We beschreven de klinische gegevens van 90 patiënten, en we uitgesloten patiënten waarvan tumorweefsels had geen genmutaties maar ten minste één gen kon worden geëvalueerd. Ondernemingen De achtergrondkenmerken van uitgezaaide maagkanker patiënten worden weergegeven in Tabel 3. De meeste patiënten (98,4%) waren ECOG PS 0/1, en slechts 2 patiënten (1,6%) waren ECOG PS 2. In totaal 71 patiënten (60,0%) de diffuse histologisch tumortype en 50 patiënten (40,0%) had de darm type adenocarcinoom. Wat betreft het aantal metastasen, 30 patiënten (24,0%) had metastase meerdere organen, en 95 patiënten (76,0%) had metastase één orgaan. Common metastatische locaties waren lymfeklieren, buikvlies en liver.Table 3 Achtergrond kenmerken van patiënten met een totale cohort, groep A en groep B
Total
Groep A (niet-uitgezaaide groep)

groep B (gemetastaseerd groep)
Aantal patiënten
167
42
125
Age (mediaan)
64,0
65,0
63,0
Gender (%)
Man
124 (74,3)
29 (69,0)
95 (76,0)
Vrouw
43 (15,7)
13 (31,0)
30 (24,0)
ECOG PS (%)
0
79 (47,3)
33 (78,6)
46 (36,8) 1
86 (51,5)
9 (21,4)
77 (61,6) 2
2 (1.2)
0 (0.0) Pagina 2 (1.6)
histologische type (%)
intestinale soort
60 (35,9)
10 (23,8)
50 (40,0)
Diffuse soort
107 (64,1)
36 (76,2)
71 (60,0)
T-stadium
T1
9 (5.4)
7 (16,7) Pagina 2 (1.6)
T2
34 (20,4)
9 (21,4)
25 (20,0)
T3
101 (60,5)
22 (52,4)
79 (63,2)
T4
23 (13,8) verhuur 4 (9,5)
19 (15,2)
N-traps
Nx
4 (2.4) Pagina 2 (4.8) Pagina 2 (1.6)
N0
22 (13,2)
12 (28,6)
10 (8.0)
N1
56 (33,5)
16 (38,1)
40 (32,0)
N2
53 (31,7)
9 (21,4)
44 (35,2)
N3
32 (19,2)
3 (19,2)
29 (23,2)
uitgezaaide laesie (%)
≦ 1
135 * (80,8)
40 * (95,2)
95 (76,0) Pagina 2 ≦
32 (19,2) Pagina 2 (4.8)
30 (24,0)
Gemetastaseerd website (%)
Lymfeklier
92 * (55,1)
19 * (45,2)
73 (58,4)
lever
34 (20,3) Pagina 2 * * (4.8)
32 (25,6)
Lung
8 (4.8)
0 (0,0)
8 (6.4)
peritoneale verspreiding
43 (25,7)
3 ** (7.1)
40 (32,0)
overig 6 (3.6)
0 (0,0)
6 (4.8)
Afkortingen Twitter: ECOG PS
Eastern Cooperative Oncology Group performance status. Staging (TNM classificatie) wordt gediagnosticeerd door Japanse Classificatie van maagcarcinoom (The 13th Edition), * waaronder metastase aan de regionale lymfeklieren. . ** Resectable laesie Ondernemingen De MST in metastatische GC patiënten was14.1 maanden (95% CI: 12,5-15,7 maanden). Patiënten bij wie de tumor weefsel bevatte een NRAS
codon 12/13 mutatie hadden een significant kortere OS in vergelijking met degenen die de NRAS
wild-type (8,8 maanden versus 14,7 maanden, p = 0,011, log-rank test). Aan de andere kant was er geen significant verschil in OS tussen patiënten met wilde type of mutant type KRAS
codon 12/13 (13,2 vs. 15,2 maanden, p = 0,775) en PIK3CA
exon 9/20 ( 13,6 versus 9,4 maanden, p = 0,286).
Wij evalueerden de prognostische factoren voor OS door univariate en multivariate analyse bij uitgezaaide groep B. Er was geen significant verschil tussen de variabelen van de patiënt achtergrondkenmerken, maar patiënten met ECOG PS 1 /2 (HR: 1.380, 95% BI: 0,941-2,024) en meerdere metastatische sites (HR: 1,452, 95% BI: 0,956-2,206) had de neiging om kortere OS door univariate analyses hebben. Bij multivariate analyse, 2 of meer metastatische sites (HR: 1,613, 95% BI: 1,047-2,484) was een onafhankelijke variabele in de voorspelling van kortere OS
HRs en 95% CI variabelen van genmutaties (KRAS
. codon 12/13, PIK3CA
exon 9/20 en de NRI
codon 12/13) werden aangepast naar leeftijd, geslacht, ECOG PS, histologische type en metastatische sites. Onder deze mutaties, de NRAS
codon 12/13 mutatie was een zelfstandige waarde in de voorspelling van kortere OS door multivariate analyse (gecorrigeerde HR: 5,607, 95% CI: 1,637-19,203).
Discussie en conclusies
onze analyse suggereerde dat mutaties van het KRAS
codon 12/13 en PIK3CA
exon 20/09 (codons 542, 545 en 1047) niet vaak waargenomen bij AGC patiënten en BRAF
mutaties (V600E) waren niet gedetecteerd. Voor zover wij weten, clinicopathologische functies en prognostische rol van KRAS
codon 61, KRAS
codon 146 NRI
codon 12/13 en de NRI
codon 61 zijn niet gemeld bij AGC patiënten die eerder. Mutaties in KRAS
codon 61, KRAS
codon 146 en de NRI
codon 61 werden niet gedetecteerd, maar NRAS
codon 12/13 mutatie werd gedetecteerd in 3 van de 159 patiënten (1,9%) in de huidige studie. Interessant is dat de intestinale type adenocarcinoom voorkomen bij patiënten bij wie tumorweefsel opgenomen KRAS-
codon 12/13 mutaties en diffuse type adenocarcinoom werd waargenomen bij alle 3 patiënten waarbij tumorweefsel bevatte NRAS
codon 12/13 mutaties . Daarnaast NRI
mutaties waren waarschijnlijk geassocieerd te worden met een kortere OS in metastatische GC patiënten. Oncogene mutaties vaak wijzen op de aanwezigheid van een therapeutisch doelwit dat vatbaar is voor gerichte therapeutische interventie zouden kunnen zijn. Moleculaire target therapie MARK en PI3K-Akt cascades is een aantrekkelijke strategie AGC patiënten.
In advanced gastro-esophageal adenocarcinoom, de frequentie van KRAS
codon 12/13 mutaties was ongeveer 3,4 tot 9,4% volgens biomarker analyses van klein formaat klinische proeven van anti-EGFR antilichamen behandeling [18-20]. Ons onderzoek liet zien dat KRAS
mutaties in 4,9% van AGC patiënten, die vergelijkbaar is met de resultaten van deze klinische studies werden waargenomen. Verschillende retrospectieve analyses hebben gerapporteerd over frequenties en klinisch-pathologische kenmerken van KRAS
mutaties in maagkanker [14-16]. Volgens deze verslagen, de meest voorkomende mutatie van KRAS
codon 12 was G12D, en alle mutaties van het KRAS
codon 13 waren G13D. Onze studie toonde ook aan dat G12D mutaties waren de meest voorkomende mutaties, en we vonden in 4 van de 6 tumorweefsel monsters die het KRAS
codon 12 mutaties. Anderzijds, werd de G13D mutatie KRAS
niet gedetecteerd in onze studie (G13V en G13S), in tegenstelling opmerkingen in eerdere rapporten. In deze eerdere verslagen meeste tumor weefsel dat het KRAS
codon 12/13 waren van de intestinale weefseltype. Zhao W et al. gesuggereerd dat er aanzienlijke verschillen in de aanwezigheid van KRAS
mutaties volgens tumorplaats (antrum versus niet-antrum, p = 0,002) en de status van microsatelliet instabiliteit (MSI) (MSI-high vs. MSI-verlies, p = 0,000076). De frequentie van het intestinale type adenocarcinoom was significant hoger dan die van het diffuse type adenocarcinoom in onze studie. Er was geen duidelijk bewijs voor een rol van KRAS
mutaties in voorspelling prognose succes van moleculaire target therapie AGC. Onlangs heeft de gerandomiseerde, multicenter, fase II /III REAL-3 proef, die de toevoeging van panitumumab om een ​​gewijzigd epirubicine, oxaliplatin en capecitabine (EOC) regime getest, werd gemeld, en een multivariate biomarker analyse van 200 patiënten bleek dat KRAS
mutatie was een voorspellende factor voor [7] OS. In een grootschalige klinische studie voor de behandeling van maag-slokdarmkanker met anti-EGFR antilichamen, KRAS
mutaties verscheen ook om significante voorspellende waarde hebben, maar we moeten dit resultaat controleren door verdere biomarker analyses van de behandeling van moleculaire therapie AGC.
Gene amplificaties, deleties en recenter, somatische missense mutaties in het gen PIK3CA
gerapporteerd in verscheidene tumoren, waaronder kanker van de dikke darm, borst, long, hersenen, lever en maag [21, 22 ]. Bij maagkanker, eerdere verslagen dat de frequentie van PIK3CA
mutaties (exons 9 en 20) was 2,5-10,6% [12, 14, 20]. Negen van AGC 168 patiënten (4,5%) hadden PIK3CA
mutaties in onze studie, en er was geen groot verschil met de voorgaande rapporten. Sommige eerdere verslagen stelde een betere prognose voor borstkankerpatiënten met PIK3CA
mutaties, terwijl anderen gesuggereerd dat PIK3CA
mutaties werden geassocieerd met een slechtere prognose in colorectale kanker, endometriumkanker en longkanker [23-26]. Multivariate analyse van de REAL-3 trial aangegeven dat PIK3CA
mutaties aangegeven slechte OS prognose bij de behandeling met anti-EGFR antilichamen in gastro-slokdarmkanker. Onze data suggereerde dat PIK3CA
mutatie werd geassocieerd met de prognose bij MGC patiënten met systemische chemotherapie, hoewel deze studie geen grootschalige analyse. Klinische proeven van moleculaire therapie die PI3K-AKT-mTOR trajecten richt zijn onlangs gestart, waardoor de resultaten van biomarker analyse van deze routes zijn vereist.
NRAS
mutaties zijn voornamelijk beschreven in melanomen en leukemie [27, 28] maar de prognostische betekenis van deze aandoeningen is onduidelijk. Sommige eerdere verslagen hebben een verband tussen nationale regelgevende instanties
mutaties en een slechte prognose in melanoom en een slechte reactie op de anti-EGFR antilichamen in colorectale kanker [29] voorgesteld. Ons onderzoek liet zien dat de frequentie van NRAS
mutaties (codons 12 en 13) was 1,9% AGC en was lager dan die waargenomen bij andere maligniteiten. Interessant, multivariate analyse toonde aan dat kleine groepen van de NRI
mutaties hadden een slechte prognose bij uitgezaaide maagkanker patiënten die systemische chemotherapie in deze studie ontvangen. We moeten een waarschijnlijke vertekening van kleine steekproef van de NRI
mutaties overwegen. Anderzijds, kenmerken NRAS
mutaties patiënt jonger en kleiner aantal metastase plaats dan alle wildtype patiënten. Er was geen significant verschil in chemotherapeutische behandelingen en het aantal van de belangrijkste drugs tussen patiënten met de NRI
mutaties en al-wild-type patiënten. Voorheen NRAS
mutaties zijn niet routinematig onderzocht als een prognostische biomarker in klinische proeven van AGC. Naast het hebben prognostische betekenis, dat NRAS
mutaties en KRAS, BRAF Kopen en PIK3CA
mutaties beter te behandelen als potentieel doelwit voor moleculaire therapie bij AGC patiënten. Ondernemingen De onderhavige studie heeft verschillende beperkingen. Ten eerste, de chemotherapeutische regimes bij onze vorige studie waren standaardregimes in het midden van de jaren 2000 in Japan. Ten tweede, kunnen we niet met zekerheid concluderen uit de gegevens in onze studie alleen dat NRI
mutaties prognostische betekenis vanwege de lage frequenties van de NRI
mutaties en de grote betrouwbaarheidsintervallen. Ten derde is er waren enkele onvoldoende monsters en we moesten de betere methoden van bewaring.
Monster In conclusies te verenigen, onze studie blijkt dat de frequenties van genmutaties van KRAS, BRAF Kopen en PIK3CA
waren zeer vergelijkbaar met die waargenomen in eerdere verslagen. NRAS
mutaties waren zeldzaam in AGC patiënten, maar kan een voorspellende waarde in MGC patiënten die systemische chemotherapie ontvangen. Wij hopen dat onze resultaten zullen bijdragen aan de toekomstige moleculaire therapie van AGC patiënten
Afkortingen
AGC:.
Geavanceerd maagkanker
MGC:
Metastaric maagkanker
EGFR:
epidermale groeifactor receptor
FFPE:
formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde

ECOG PS:
Eastern Cooperative Oncology Group performance status
PFS:
progressievrije overleving

OS:
Totale overleving
HR:
Hazard rate
CI:
Betrouwbaarheidsinterval

MST:
De mediane overleving tijd
EOC.
Pirubicin, oxaliplatin en capecitabine

verklaringen
Dankwoord
we waarderen het zeer de deelname van patiënten en hun families in deze studie, en we danken alle co-onderzoekers voor hun bijdragen: H. Morita, E. Onishi (National Cancer Center Hospital) en laboratorium divisie corporatie van SRL (Analyses van genmutaties).
Financiering Inloggen Deze studie werd ondersteund door de Health and Labor Sciences Research Grants voor Clinical Cancer Research van het ministerie van Volksgezondheid, Arbeid en Welzijn van Japan (Grant No . H22- Clinical Cancer -019).
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar de auteurs oorspronkelijke ingediende dossiers voor afbeeldingen.

• Een lage dosis aspirine-geassocieerde bovenste maag- en duodenale ulcera in de Japanse patiënten zonder voorgeschiedenis van maagzweren
• Survivine gen niveaus in het perifere bloed van patiënten met maagkanker onafhankelijk voorspellen overleving