Klinisk-patologisk funktioner og prognostiske roller KRAS, BRAF, PIK3CA og de nationale tilsynsmyndigheder mutationer i fremskreden ventrikelkræft

Klinisk-patologisk funktioner og prognostiske roller KRAS, BRAF, PIK3CA og de nationale tilsynsmyndigheder mutationer i fremskreden mavekræft
Abstract
Baggrund
RAS-RAF-MEK-ERK og PI3K-AKT veje udgør en væsentlig kaskade til potentiel molekylære target terapi i fremskreden kræft. Den kliniske betydning af mutationer i disse gener i fremskreden gastrisk cancer (AGC) er usikker.
Metoder
Vi indsamlede formalin-fikseret, paraffinindlejrede og friske frosne tumorprøver fra AGC patienter og analyseret KRAS, nationale tilsynsmyndigheder, BRAF
PIK3CA
mutationer ved direkte-sekventering. Vi undersøgte retrospektivt de klinisk-patologiske funktioner i disse mutationer i AGC patienter og udvalgte patienter med metastatisk gastrisk kræft.
Resultater
Blandt 167 AGC patienter mutationer af KRAS
codon 12/13 (N
= 8 /164, 4,9%), PIK3CA
(N
= 9/163, 5,5%), og de nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13 (N
= 3/159, 1,9%) blev opdaget. Sammenligning af klinisk-patologiske træk ved de muterede KRAS, PIK3CA, de nationale tilsynsmyndigheder
gener med en all-vildtype af disse gener viste, at frekvensen af ​​den intestinale type var signifikant højere hos patienter, hvis tumorvæv indeholdt KRAS
mutationer (P
= 0,014). Blandt 125 patienter med metastatisk gastrisk kræft, patienter med nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13 mutationer i deres tumorer havde kortere samlet overlevelse sammenlignet med de nationale tilsynsmyndigheder
vildtype patienter (MST: 14,7 vs 8,8 måneder, P
= 0,011 ). Ved multivariate analyser, de nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13 mutation var en indikator for dårlig prognose hos patienter med metastatisk gastrisk kræft (justeret HR 5,607, 95% CI: 1,637 til 19,203).
Konklusioner
Vores undersøgelse viste, at mutationer af KRAS, PIK3CA
og de nationale tilsynsmyndigheder
var sjældne i AGC. Nationale tilsynsmyndigheder
mutationer var tilbøjelige til at associere med dårlig prognose i metastatisk tilstand af AGC patienter, men yderligere validering af anden forskning er påkrævet.
Baggrund
mavekræft er den anden hyppigste årsag til kræft død over hele verden med ca. 989.600 nye tilfælde og 738.000 dødsfald om året, der tegner sig for omkring 8 procent af nye kræfttilfælde [1]. De højeste incidensrater er i Østasien, Andes regioner i Sydamerika, og Østeuropa, mens de laveste priser er i Nordamerika, Nordeuropa, og de fleste lande i Afrika og Sydøsteuropa Asien.
Grund udvikling af systemisk kemoterapi, har overlevelsestiden for avanceret mavekræft (AGC) blevet forbedret i løbet af det seneste årti. En Fluorpyrimidin og platin regime er en standard first-line kemoterapi i HER2-negativ metastatisk mavekræft (MGC) patienter, og trastuzumab tilføjet til XP er en standard kemoterapi i HER2-positiv MGC patienter i Japan [2-5]. Selv om nogle AGC patienter opnåede klinisk fordel for systemisk kemoterapi, gjorde de fleste af patienterne ikke opnå en klinisk tilfredsstillende resultat. Ny behandling af MGC med mere effektive og mindre toksiske kemoterapi var påkrævet.
Fase III undersøgelser af molekylær terapi med mTOR inhibitor, anti-VEGF-antistof, blev rapporteret anti-EGFR-antistoffer i AGC eller gastro-esophageal cancer, men disse lægemidler kunne ikke påvises at have signifikant effekt [6, 7]. For nylig, ramcirumab, anti-VEGFR target monoklonalt antistof, blev rapporteret at forbedre overlevelsen i kemoterapi-refraktære MGC patienter. Det ville være en betydelig terapeutisk fordel at finde effektive biomarkører for at matche de reagerende kræftceller med den passende molekylære mål narkotika og belyse yderligere mekanismer forbundet med resistens mod kemoterapi.
Mitogenaktiveret proteinkinase (MAPK) er en del af en væsentlig intracellulær signalvej, der regulerer forskellige cellulære funktioner, herunder celleproliferation, cellecyklusregulering, celleoverlevelse, angiogenese, og cellevandring [8]. Ras proteiner blev oprindeligt identificeret som den transformerende komponenter af onkogene vira, hvorimod NTM
blev identificeret som den transformerende del af et neuroblastom. Ras-mutationer er fundet i op til 30% af alle cancere og er særligt udbredt i pancreas og tyktarmskræft. Raf rekrutteres til cellemembranen gennem binding til Ras og aktiveres i en kompleks proces, der involverer phosphorylering og flere cofaktorer. BRAF
mutationer har en smal fordeling, men er udbredt i nogle få specifikke maligniteter såsom melanom, papillær kræft i skjoldbruskkirtlen, og lav kvalitet æggestokkræft [9-11]. Betydningen af ​​phosphoinositid 3-kinase (PI3K'er) i cancer blev bekræftet ved opdagelsen af, at PIK3CA
gen, der koder for PI3K-katalytiske underenhed p110α, ofte muteret i nogle af de mest almindelige humane tumorer [12]. Disse genetiske ændringer af PIK3CA
udelukkende består af somatiske missense mutationer grupperet i to "hotspot" regioner i exon 9 og 20, svarende til de spiralformede og kinasedomæner af p110α, henholdsvis [13].
Nylig, anvendelse af KRAS
, BRAF
, PIK3CA
og de nationale tilsynsmyndigheder
som biomarkører for molekylære mål terapi i solide tumorer er blevet bredt diskuteret. Adskillige mindre målestok biomarkør analyser af KRAS
, BRAF
og PIK3CA
mutationer blev tidligere rapporteret i AGC [14-16]. Den kliniske betydning af disse mutationer i AGC patienter ikke allerede er afklaret, og der er behov for yderligere undersøgelser af disse intracellulære molekylære ændringer.
I den foreliggende undersøgelse, vi gennemførte en genomisk analyse af KRAS
, BRAF
, PIK3CA
og de nationale tilsynsmyndigheder
mutationer for at undersøge de klinisk-patologiske træk og prognostisk rolle genmutationer i AGC patienter.
Metoder
patienter og prøvetagning
Alle data blev udtrukket fra databasen over vores afdeling, og diagram Anmeldelsen er foretaget for hver patient for at få vigtige oplysninger. Vi indsamlede vævsprøver til analyse af genmutation status KRAS, BRAF, PIK3CA
og de nationale tilsynsmyndigheder
. Vævsprøver bestod af prøver, der anvendes i tidligere biomarkør forskning i vores institution [2, 17], og af friske frosne vævsprøver, som blev indhentet fra tidligere kirurgiske resektioner af AGC i vores institution. prøver af 173 AGC patienter tumorvæv var samlet, men utilstrækkelige prøver fra 6 patienter blev ekskluderet. Endelig har vi brugt 167 vævsprøver fra AGC patienter og undersøgt genmutationer af KRAS
, BRAF
, PIK3CA
og de nationale tilsynsmyndigheder
ved den direkte-sekventering metode (hele kohorten). Blandt 167 AGC patienter, 42 patienter gennemgik kirurgisk resektion uden systemisk kemoterapi (ikke-metastatisk kohorte som gruppe A) og 125 patienter med metastatisk gastrisk kræft modtaget systemisk kemoterapi (metastatisk kohorte som gruppe B). Et diagram af den foreliggende undersøgelse er vist i figur 1. Informeret samtykke for at bruge patientens tumorvæv blev bekræftet fra alle de patienter, der deltog i undersøgelsen, som blev gennemført med godkendelse af Institutional Etisk Review Board of National Cancer Center i overensstemmelse med Helsingfors-erklæringen fra 1975 (ajourført 1983). Figur 1 Diagram over denne undersøgelse.
Genomisk analyser af KRAS, BRAF, PIK3CA og de nationale tilsynsmyndigheder
DNA-prøver blev udvundet fra formalinfikserede, paraffinindlejrede (FFPE) og friske frosne tumor vævssnit. Tumorcelle-rige områder i afsnittet hematoxylin og eosin blev markeret under et mikroskop, og væv blev ridset fra området af en anden afparaffinerede ufarvet sektion. DNA fra stykker af ridset vævsprøve blev isoleret ved anvendelse af QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (QIAGEN KK, Tokyo, Japan). Exon 2 (kodon 12, 13), exon 3 (codon 61), exon 4 (codon 146) KRAS
gen og exon 15 (codon 600) af BRAF
gen og exon 9 (codon 542, 545) , exon 20 (codon 1047) af PIK3CA
gen og exon 2 (kodon 12, 13), blev exon 3 (codon 61) af NTM
genet amplificeret ved PCR (GeneAmp PCR System 9700 thermocycler). PCR-produkterne blev visualiseret under anvendelse af agarosegelelektroforese med ethidiumbromidfarvning og gælder sekventeret under anvendelse af en ABI 3130x /Genetic Analyzer (Life Technologies Japan (Applied Biosystems), Tokyo, Japan) ifølge producentens instruktioner.
Behandling
A i alt 125 patienter i gruppe B fik systemisk kemoterapi. Regimer af første-line kemoterapi bestod af CP (n = 42, 33,6%), S-1 (n = 39, 31,2%), 5-FU (n = 10, 24,0%), en kombination af 5-FU og methotrexat (n = 10, 8,0%), Paclitaxel (n = 3, 2,4%) og XP og /eller bevacizumab (n = 1, 0,8%). Vigtige anti-cancer medicin for AGC i Japan er fluoropyrimidin (5-FU, S-1, capecitabin), cisplatin, irinotecan og taxan. Under hele forløbet af systemisk kemoterapi i gruppe B, andelen af ​​patienter, der fik 5-FU, cisplatin, irinotecan og taxan var 85,6% (n = 107/125), 52,8% (n = 66/125), 60,8% (n = 76/125), 36,0% (n = 45/125), henholdsvis. Derudover, 22 patienter (17,6%) modtog alle centrale anticancerlægemidler, 37 patienter (29,6%) modtog 3 af de vigtigste stoffer, 30 patienter (24,0%) modtog 2 af de vigtigste stoffer, og 36 patienter (28,8%) modtog kun en af ​​de vigtigste anticancerlægemidler. De skemaer og doser af CP, blev S-1 og 5-FU baseret på de tidligere rapporter [17]. Paclitaxel som monoterapi blev gentaget tre gange om ugen i 4 uger, og docetaxel som monoterapi blev givet som intravenøs infusion hver 3. uge.
Statistiske analyser
Vi evaluerede andelen af ​​hver KRAS
, BRAF
, PIK3CA
og de nationale tilsynsmyndigheder
mutation i hele kohorten og prognostiske værdier disse mutationer, som blev justeret variabler af patienternes karakteristika med hensyn til samlet overlevelse (OS) i metastatisk gruppe B. OS blev defineret som intervallet fra start af første linje kemoterapi til døden eller sidste opfølgning.
Vi udførte statistiske analyser af SPSS statistisk software version 19 (IBM, Tokyo, Japan). Forskelle i fordelingen af ​​variabler blev vurderet ved anvendelse af Fisher eksakt test eller chi-kvadrat testen som passende. Median overlevelsestid (MST) blev estimeret ved Kaplan-Meier-metoden og overlevelseskurverne blev sammenlignet ved log-rank test. Alle tests var to-sidet og en p-værdi < 0,05 blev defineret som statistisk signifikant. Vi skønnede hazard ratio (HR) og den tilsvarende 95% konfidensinterval (CI) til OS bruger univariate og multivariate analyser af Cox andel hazard modeller. Variabler i denne analyse omfattede alder (≥median /< median), køn (mand /kvinde), ECOG PS (0 /1-2), histologisk type Lauren klassifikation (tarm type /diffus type), antal metastatiske steder ( single /multiple).
Resultater
Direkte sekventering af vævsprøver i gruppe B bestemmes andelen af ​​hver af KRAS
, BRAF
, PIK3CA
og de nationale tilsynsmyndigheder
(tabel 1). Mutationer af KRAS
kodon 12 (3,7%, n = 6/164) og KRAS
kodon 13 (1,2%, n = 2/164), PIK3CA
exon 9 (4,9%, n = 8 /163), PIK3CA
exon 20 (0,6%, n = 1/163) og de nationale tilsynsmyndigheder
mutationer (1,9%, n = 3/159) blev opdaget. På den anden side, mutationer i KRAS
codon 61, KRAS
codon 146, BRAF
V600E, og de nationale tilsynsmyndigheder
codon 146 blev ikke påvist. KRAS
codon 12 mutationer bestod af G12D (35G > A, n = 4), G12S (34G > A; n = 1) og G12N (34 35GG > AA, n = 1), og kodon 13-mutationer bestod af G13S (37G > A; n = 1) og G13V (38 39GC > TT n = 1). PIK3CA
exon 9 mutationer bestod af E542K (1624G > A; n = 2), E545K (1633G > A; n = 5), og E545D (1635G > C, n = 1), og exon 20 mutationer bestod af H1047R (3140A > G; n = 1). Nationale tilsynsmyndigheder
mutationer bestod af G12S (34G > A; n = 1) og G13S (37G > A; n = 1). Der var 70 patienter, hvis tumorvæv indeholdt alle-vilde typer af KRAS
(exon2, 3, 4), BRAF
(exon 15), PIK3CA
(exon9, 20) og de nationale tilsynsmyndigheder
(exon2 , 3). Blandt de AGC patienter, hvis tumor væv indeholdt genmutationer, flere mutationer af KRAS
codon 13, PIK3CA
codon 545 og de nationale tilsynsmyndigheder
codon 12 blev påvist i kun én case.Table 1 Resultater af genmutationer i KRAS, BRAF, PIK3CA og de nationale tilsynsmyndigheder i AGC patienter
Genmutationer
Andel (%)
Utilstrækkelige DNA-prøver
KRAS codon 12
6/164 (3,7)
3/167
KRAS codon 13
2/164 (1,2)
3/167
KRAS codon 61
0/131 (0,0)
36/167
KRAS codon 146
0/137 (0,0)
30/167
BRAF V600E
0/136 (0,0)
31/167
PIK3CA exon 9
8 /163 (4,9)
4/167
PIK3CA exon 20
1/163 (0,6)
4/167
nationale tilsynsmyndigheder codon 12
1/159 (0,6)
8 /167
nationale tilsynsmyndigheder codon 13
2/159 (1,3)
8/167
nationale tilsynsmyndigheder codon 61
0/135 (0,0)
32/167
Den klinisk-patologiske træk af hver genmutation sammenlignet med den alt-vildtype er sammenfattet i tabel 2. de mediane alder af patienter, hvis tumorvæv indeholdt mutationer af KRAS
, PIK3CA
og de nationale tilsynsmyndigheder
(54,5, 58,0 og 56,0 år, henholdsvis) var lavere end den for patienter, der indeholder all-vilde typer KRAS, BRAF, PIK3CA
og NTM
(median alder, 64,0 år).
der var ingen signifikant forskel, bortset histologisk type, blandt variabler af klinisk-patologiske funktioner såsom køn, alder, ECOG PS og antallet af metastatiske steder. Sammenlignet med patienter all-vildtype, andelene af intestinal type, var højere hos patienter med KRAS
codon 12/13 mutation (p = 0,014). Den histologiske tumortype i alle patienter, hvis tumorvæv indeholdt nationale tilsynsmyndigheder
mutationer var den diffuse type adenocarcinoma.Table 2 Sammenligning af clinocopathological funktioner ved at genmutationer status i forhold til alle-vildtype i patienter med AGC patienter
Alle vildtype
KRAS
codon 12/13
PIK3CA
exon 9/20
nationale tilsynsmyndigheder
codon12 /13

KRAS, BRAF, nationale tilsynsmyndigheder, PIK3CA
Mutant form
P
-værdi
Mutant form
P
- værdi
Mutant typen
P
-værdi
Antal patienter
70
8
9
3
Median alder
64,0
54,5
58,0
56,0
Køn (%)
Male
49 (70,0)
7 (87,5)
0,429
8 (88,9)
0,432
2 (87,5)
1,000
Female
21 (30,0)
1 (12,5)
1 (11.1)
1 (12,5)
ECOG PS (%)
0
38 (54,3)
3 (37,5)
0,466
4 (44,4)
0,727
1 (33,3)
0,476
1 ≦
32 (45,7)
5 (62,5)
5 (55,6)
2 (66,7)
Histologisk type (%)
Intestinal typen
20 (28,6)
6 (75,0)
0,014
4 (44,4)
0,443
0 (0,0)
0,556
Diffus typen
50 (71,4)
2 (25,0)
5 (55,6)
3 (100,0)
Antal metastatisk websted (%)
1
54 (77,1)
8 (100,0)
0,195
8 (88,9)
0,675
3 (100,0)
1,000
2 ≦
16 (22,9)
0 (0,0)
1 ( 11.1)
0 (0,0)
Metastatisk læsion (%)
Lymfeknude
41 (58,6)
3 (37,5)
0,348
6 (66,7)
0,717
2 (66,7)
0,851
Liver
14 (20,0)
3 (37,5)
3 (33,3)
1 (33,3)
Lung
2 (2.9)
1 (12,5)
0 (0,0)
0 (0,0)
Peritoneal formidling
18 (25,7)
1 (12,5)
1 ( 11.1)
0 (0,0)

i 3 (4.3)
0 (0,0)
0 (0,0)
0 (0,0)
Forkortelser
: ECOG PS
Eastern Cooperative Oncology Group performance status. Vi beskrev de kliniske data for 90 patienter, og vi udelukkede patienter, hvis tumor væv havde ingen genmutationer men mindst et gen kunne ikke vurderes.
Den baggrundsvariabler metastatiske mavecancerpatienter er vist i tabel 3. De fleste patienter (98,4%) var ECOG PS 0/1, og kun 2 patienter (1,6%) var ECOG PS 2. i alt 71 patienter (60,0%) havde histologisk diffuse tumortype, og 50 patienter (40,0%) havde den intestinale type adenocarcinom. Hvad angår antallet af metastatiske steder, 30 patienter (24,0%) havde metastase til flere organer, og 95 patienter (76,0%) havde metastase til et organ. Fælles metastatiske steder var lymfeknuder, bughinden og liver.Table 3 Baggrund karakteristika af patienter med total kohorte, gruppe A og gruppe B
Total
Gruppe A (ikke-metastatisk gruppe)

gruppe B (metastatisk gruppe)
Antal patienter
167
42
125
Alder (median)
64,0
65,0
63,0
Gender (%)
Male
124 (74,3)
29 (69,0)
95 (76,0)
Female
43 (15,7)
13 (31,0)
30 (24,0)
ECOG PS (%)
0
79 (47,3)
33 (78,6)
46 (36,8)
1
86 (51,5)
9 (21,4)
77 (61,6)
2
2 (1.2)
0 (0,0)
2 (1.6)
Histologisk type (%)
Intestinal typen
60 (35,9)
10 (23,8)
50 (40,0)
Diffuse typen
107 (64,1)
36 (76,2)
71 (60,0)
T-stadie
T1
9 (5.4)
7 (16,7)
2 (1.6)
T2
34 (20,4)
9 (21,4)
25 (20,0)
T3
101 (60,5)
22 (52,4)
79 (63,2)
T4
23 (13,8)
4 (9,5)
19 (15,2)
N-stadie
Nx
4 (2.4)
2 (4.8)
2 (1.6)
n0
22 (13,2)
12 (28,6)
10 (8,0)
N1
56 (33,5)
16 (38,1)
40 (32,0)
N2
53 (31,7)
9 (21,4)
44 (35,2)
N3
32 (19,2)
3 (19,2)
29 (23,2)
Metastatisk læsion (%)
≦ 1
135 * (80,8)
40 * (95,2)
95 (76,0)
2 ≦
32 (19,2)
2 (4.8)
30 (24,0)
Metastatisk websted (%)
Lymfeknude
92 * (55,1)
19 * (45,2)
73 (58,4)
Lever
34 (20,3)
2 * * (4.8)
32 (25,6)
Lung
8 (4.8)
0 (0,0)
8 (6.4)
Peritoneal formidling
43 (25,7)
3 ** (7.1)
40 (32,0)

i seks (3.6)
0 (0,0)
6 (4.8)
Forkortelser
: ECOG PS
Eastern Cooperative Oncology Group performance status. Iscenesættelse (TNM klassifikation) diagnosticeres ved japansk Klassifikation af Gastric Carcinoma (Det 13. udgave), * herunder metastaser til regionale lymfeknuder. . ** Resektabel læsion
MST i metastatiske GC patienter was14.1 måneder (95% CI: 12.5-15.7 måneder). Patienter, hvis tumorvæv indeholdt en nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13 mutation havde en signifikant kortere OS sammenlignet med dem, der bærer de nationale tilsynsmyndigheder
vildtype (8,8 måneder versus 14,7 måneder, p = 0,011, log-rank test). På den anden side var der ingen signifikant forskel i OS mellem patienter med vildtype eller mutant type KRAS
codon 12/13 (13,2 vs. 15,2 måneder, p = 0,775) og PIK3CA
exon 9/20 ( 13,6 vs. 9,4 måneder, p = 0,286).
Vi evaluerede de prognostiske faktorer for OS af univariate og multivariate analyser i metastatisk gruppe B. Der var ingen signifikant forskel mellem variabler af patientens baggrund egenskaber, men patienter med ECOG PS 1 /2 (HR: 1,380, 95% CI: 0,941-2,024) og flere metastatiske steder (HR: 1,452, 95% CI: 0.956-2.206) havde en tendens til at have kortere OS ved univariate analyser. Ved multivariat analyse, to eller flere metastatiske steder (HR: 1,613, 95% CI: 1,047-2,484) var en uafhængig variabel i forudsigelse af kortere OS
HRs og 95% CIs af variabler af genmutationer (KRAS
. codon 12/13, PIK3CA
exon 9/20 og de nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13) blev justeret efter alder, køn, ECOG PS, histologisk type og metastatiske steder. Blandt disse mutationer, de nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13 mutation var en selvstændig værdi i forudsigelse af kortere OS ved multivariat analyse (justeret HR: 5,607, 95% CI: 1,637 til 19,203).
Diskussion og konklusioner
Vores analyse foreslog, at mutationer af KRAS
codon 12/13 og PIK3CA
exon 9/20 (codon 542, 545 og 1047) ikke blev observeret hyppigt i AGC patienter, og BRAF
mutationer (V600E) var ikke opdaget. Til vores viden, klinisk-patologiske træk og prognostiske roller KRAS
codon 61, KRAS
codon 146, nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13 og de nationale tilsynsmyndigheder
codon 61 ikke er blevet indberettet i AGC patienter, der tidligere. Mutationer i KRAS
codon 61, KRAS
codon 146 og de nationale tilsynsmyndigheder
codon 61 blev ikke påvist, men de nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13 mutation blev påvist i 3 af 159 patienter (1,9%) i den nuværende studere. Interessant nok blev den intestinale type adenocarcinom fundet hyppigere hos patienter, hvis tumorvæv indeholdt KRAS
codon 12/13 mutationer og diffus type adenocarcinom blev observeret i alle 3 patienter, hvis tumorvæv indeholdt nationale tilsynsmyndigheder
codon 12/13 mutationer . Desuden nationale tilsynsmyndigheder
mutationer sandsynligvis ville være forbundet med kortere operativsystem i metastatiske GC patienter. Onkogene mutationer angiver ofte tilstedeværelsen af ​​et terapeutisk mål, der kan være modtagelige for rettet terapeutisk intervention. Molekylær target terapi af MARK og PI3K-Akt kaskader er en attraktiv strategi i AGC patienter.
Ved fremskreden gastro-esophageal adenocarcinom, hyppigheden af ​​KRAS
codon 12/13 mutationer var ca. 3,4 til 9,4% i henhold til biomarkør analyser af små størrelse kliniske forsøg med anti-EGFR-antistoffer behandling [18-20]. Vores undersøgelse viste, at KRAS
mutationer blev fundet i 4,9% af AGC patienter, som svarer til resultaterne af disse kliniske forsøg. Adskillige retrospektive analyser har rapporteret om frekvenser og klinisk-patologiske træk af KRAS
mutationer i gastrisk kræft [14-16]. Ifølge disse rapporter, den mest almindelige mutation af KRAS
codon 12 var G12D, og ​​alle mutationer af KRAS
codon 13 var G13D. Vores undersøgelse viste også, at G12D mutationer var de mest almindelige mutationer, og vi fandt i 4 af 6 tumor vævsprøver indeholder KRAS
codon 12 mutationer. På den anden side, blev G13D KRAS
mutation ikke påvist i vores undersøgelse (G13V og G13S), i modsætning til observationer i tidligere rapporter. I disse tidligere rapporter, de fleste af tumorvæv indeholdende KRAS
codon 12/13 var af den intestinale histologiske type. Zhao W et al. antydede, at der var væsentlige forskelle i nærvær af KRAS
mutationer ifølge tumorstedet (antrum vs. ikke-antrum, p = 0,002) og status mikrosatellit instabilitet (MSI) (MSI-høj vs. MSI-tab, p = 0,000076). Frekvensen af ​​den intestinale type adenocarcinom var signifikant højere end den for den diffuse type adenocarcinom i vores undersøgelse. Der var ingen bestemt evidens for en rolle KRAS
mutationer i forudsigelse og prognose for succes af molekylære target terapi i AGC. For nylig, den randomiserede, multicenter, fase II /III REAL-3 forsøg, som testede tilsætning af panitumumab til en modificeret epirubicin, oxaliplatin og capecitabin (EOC) regime, blev rapporteret, og en multivariat biomarkør analyse af 200 patienter viste, at KRAS
mutation var en prognostisk faktor til OS [7]. I en storstilet klinisk undersøgelse af behandling af gastrisk kræft i spiserøret med anti-EGFR-antistoffer, KRAS
mutationer syntes også at have en betydelig prognostisk værdi, men vi er nødt til at kontrollere dette resultat ved yderligere biomarkør analyser af behandlingen af ​​molekylær terapi i AGC.
Gene amplificeringer, sletninger og for nyligt somatiske missense mutationer i PIK3CA
genet er blevet rapporteret i flere maligniteter, herunder kræft i tyktarm, bryst, lunge, hjerne, lever og mave [21, 22 ]. I mavekræft, tidligere rapporter viste, at hyppigheden af ​​PIK3CA
mutationer (exons 9 og 20) var 2,5 til 10,6%, [12, 14, 20]. Ni af 168 AGC patienter (4,5%) havde PIK3CA
mutationer i vores undersøgelse, og der var ingen stor forskel i forhold til tidligere rapporter. Nogle tidligere rapporter foreslog en bedre prognose for brystkræftpatienter med PIK3CA
mutationer, mens andre foreslog, at PIK3CA
mutationer var forbundet med en dårligere prognose i kolorektal cancer, endometriecancer og lungekræft [23-26]. Multivariate analyser af REAL-3 forsøg viste, at PIK3CA
mutationer angivet dårlig OS prognose i behandling med anti-EGFR-antistoffer i gastro-esophageal cancer. Vore data antydede, at PIK3CA
mutation ikke var forbundet med prognosen hos MGC patienter behandlet med systemisk kemoterapi, skønt denne undersøgelse ikke var en storstilet analyse. Kliniske forsøg med molekylær terapi, der er rettet mod PI3K-AKT-mTOR tilgange er blevet indledt for nylig, således resultater af biomarkør analyser af disse veje er påkrævet.
Nationale tilsynsmyndigheder
mutationer er blevet hovedsageligt beskrevet i melanom og leukæmi [27, 28] , men den prognostiske betydning i disse maligniteter har været uklar. Nogle tidligere rapporter har antydet en sammenhæng mellem de nationale tilsynsmyndigheder
mutationer og en dårlig prognose i melanom og en dårlig reaktion på anti-EGFR-antistoffer i kolorektal cancer [29]. Vores undersøgelse viste, at hyppigheden af ​​nationale tilsynsmyndigheder
mutationer (codon 12 og 13) var 1,9% i AGC og var lavere end den, der ses i andre maligniteter. Interessant, viste multivariate analyser, små grupper af nationale tilsynsmyndigheder
mutationer havde dårlig prognose i metastatiske patienter gastrisk cancer, der fik systemisk kemoterapi i nærværende undersøgelse. Vi må overveje en sandsynlig bias lille stikprøve af de nationale tilsynsmyndigheder
mutationer. På den anden side, patientens karakteristika NTM
mutationer var yngre og mindre antal metastaser sted end alle patienter vildtype. Der var ingen signifikant forskel i kemoterapeutiske regimener og række centrale narkotika mellem patienter med NTM
mutationer og patienter all-vildtype. Tidligere har de nationale tilsynsmyndigheder
mutationer ikke undersøgt rutinemæssigt som en prognostisk biomarkør i kliniske forsøg med AGC. Ud over at have prognostisk betydning, at de nationale tilsynsmyndigheder
mutationer samt KRAS, BRAF
og PIK3CA
mutationer ville være bedre at blive drøftet som potentielt mål for molekylær terapi AGC patienter.
Den foreliggende undersøgelse har adskillige begrænsninger. Først de kemoterapeutiske regimer i vores undersøgelse var tidligere standard regimer i midten af ​​2000'erne i Japan. For det andet kunne vi ikke konkludere definitivt fra dataene i vores undersøgelse alene, at de nationale tilsynsmyndigheder
mutationer har prognostisk betydning på grund af de lave frekvenser af de nationale tilsynsmyndigheder
mutationer og de store konfidensintervaller. For det tredje var der nogle utilstrækkelige prøver, og vi havde brug for at forene de bedre metoder til prøvens konservering. Salg In konklusioner, vores undersøgelse viste, at frekvenserne af genmutationer i KRAS, BRAF
og PIK3CA
var meget lig dem, der observeres i tidligere rapporter. NTM
mutationer var sjældne i AGC patienter, men kan have en prognostisk værdi i MGC patienter, som modtager systemisk kemoterapi. Vi håber, at vores resultater vil bidrage til fremtidig molekylær terapi af AGC patienter
Forkortelser
AGC:.
Avanceret mavekræft
MGC:
Metastaric mavekræft
EGFR:
epidermal vækstfaktor receptor
FFPE:
Formalin-fikseret, paraffin-indstøbt

ECOG PS:
Eastern Cooperative Oncology Group performance status
PFS:
Progression overlevelse

OS:
Samlet overlevelse
HR:
Hazard rate
CI:
konfidensinterval

MST:
Median overlevelsestid
EOC:.
Pirubicin, oxaliplatin og capecitabin

erklæringer
Taksigelser
vi værdsætter meget deltagelse af patienter og deres familier i denne undersøgelse, og vi takker alle co-efterforskere for deres bidrag: H. Morita, E. Onishi (National Cancer center Hospital) og laboratorium division i selskab af SRL (Analyser af genmutationer).
Finansiering
Denne undersøgelse blev støttet af Sundhed og Labor Sciences Research Tilskud til Clinical Cancer Research fra Sundhedsministeriet, Labor og Velfærd Japan (Grant Ingen . H22- Klinisk Cancer -019).
forfattere 'originale indsendte filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder.

• Low-dosis aspirin-associeret øvre gastriske og duodenale ulcera hos japanske patienter med ingen tidligere peptisk ulcers
• Survivin gen niveauer i det perifere blod af patienter med gastrisk cancer uafhængigt forudsige survival