caratteristiche clinico-patologici e ruoli prognostici di KRAS, BRAF, PIK3CA e le ANR mutazioni nel cancro gastrico avanzato

caratteristiche clinico-patologici e ruoli prognostici di KRAS, BRAF, PIK3CA e le ANR mutazioni nel cancro gastrico avanzato
Abstract
sfondo
RAS-RAF-MEK-ERK e PI3K-AKT formano una cascata significativo per potenziale terapia bersaglio molecolare nel cancro avanzato. Il significato clinico di mutazioni in questi geni nel cancro gastrico avanzato (AGC) è incerta.
Metodi
abbiamo raccolto fissati in formalina, campioni di tumore congelato inclusi in paraffina e fresco da pazienti AGC ed analizzato il gene KRAS, NRAS, BRAF
e PIK3CA
mutazioni by-sequenziamento diretto. Abbiamo studiato retrospettivamente le caratteristiche clinico-patologici di queste mutazioni in pazienti AGC, e pazienti selezionati con carcinoma gastrico metastatico.
Risultati Con gli 167 pazienti AGC, le mutazioni di KRAS
codoni 12/13 (N = 8
/164, 4,9%), PIK3CA
(N
= 9/163, 5.5%), e le ANR
codone 12/13 (N
= 3/159, 1,9%) sono stati rilevati. Il confronto delle caratteristiche clinico-patologici dei mutati di KRAS, PIK3CA, le ANR
geni con un tipo tutto-selvaggio di questi geni ha mostrato che la frequenza del tipo intestinale era significativamente più alta nei pazienti in cui il tessuto tumorale contenute KRAS
mutazioni (P
= 0.014). Fra 125 pazienti con carcinoma gastrico metastatico, i pazienti con NRAS
codone 12/13 mutazioni nel loro tumori avevano più breve sopravvivenza globale rispetto ai NRAS
pazienti wild-type (MST: 14,7 vs 8,8 mesi, p = 0,011
). Con l'analisi multivariata, NRAS
codone 12/13 mutazione era un indicatore per la prognosi sfavorevole nei pazienti con carcinoma gastrico metastatico (HR aggiustato 5,607, 95% CI: 1,637-19,203).
Conclusioni
Il nostro studio ha indicato che mutazioni di KRAS, PIK3CA
e le ANR
erano rari in AGC. ANR
mutazioni erano probabilmente da associare a prognosi sfavorevole in stato metastatico dei pazienti AGC, ma sono necessari ulteriori convalida di altre ricerche.
Sfondo
cancro gastrico è la seconda causa di morte per cancro in tutto il mondo, con circa 989.600 nuovi casi e 738.000 morti l'anno, pari a circa l'8 per cento dei nuovi casi di tumore [1]. I tassi di incidenza più alti sono in Asia orientale, le regioni andine del Sud America, ed Europa orientale, mentre le tariffe più basse si trovano in Nord America, Europa del Nord, e la maggior parte dei paesi in Africa e Sud Asia Orientale.
Grazie allo sviluppo di sistemico la chemioterapia, il tempo di sopravvivenza per il cancro gastrico avanzato (AGC) è stata migliorata nel corso degli ultimi dieci anni. Un regime fluoropirimidina e il platino è un standard di prima linea di chemioterapia nel carcinoma gastrico metastatico (MGC) pazienti HER2-negativi, e trastuzumab aggiunto XP è una chemioterapia standard in pazienti MGC HER2 positivo in Giappone [2-5]. Anche se alcuni pazienti AGC ottenuti beneficio clinico di chemioterapia sistemica, la maggior parte dei pazienti non ha raggiunto un risultato clinicamente soddisfacente. è stato richiesto un trattamento romanzo di MGC con regimi chemioterapici più efficaci e meno tossici.
studi di Fase III della terapia molecolare con inibitore di mTOR, anticorpo anti-VEGF, gli anticorpi anti-EGFR sono stati riportati in AGC o il cancro gastro-esofageo, ma questi farmaci non poteva essere dimostrato di avere una significativa efficacia [6, 7]. Recentemente, ramcirumab, anti-VEGFR anticorpo monoclonale bersaglio, è stato segnalato per migliorare la sopravvivenza nei pazienti MGC chemioterapia refrattari. Sarebbe un vantaggio terapeutico significativo per identificare i biomarcatori efficaci al fine di corrispondere le cellule tumorali reattiva con la appropriata farmaci bersaglio molecolare e chiarire ulteriori meccanismi associati alla resistenza alla chemioterapia.
La proteina chinasi mitogeno-attivata (MAPK) fa parte di un significativo percorso intracellulare segnale che regola diverse funzioni cellulari tra cui la proliferazione cellulare, regolazione del ciclo cellulare, la sopravvivenza cellulare, l'angiogenesi, e la migrazione delle cellule [8]. Le proteine Ras sono stati inizialmente identificati come i componenti di trasformazione del virus oncogeni, mentre NRAS
è stato identificato come il componente di trasformazione di un neuroblastoma. mutazioni di RAS si trovano in fino al 30% di tutti i tumori e sono particolarmente comuni nei tumori pancreatici e del colon. Raf è reclutato alla membrana cellulare attraverso il legame di Ras e si attiva in un processo complesso che coinvolge la fosforilazione e più cofattori. BRAF
mutazioni hanno una distribuzione ristretta, ma sono prevalenti in alcuni tumori specifici come il melanoma, cancro alla tiroide papillare, e il cancro ovarico basso grado [9-11]. L'importanza di phosphoinositide 3-chinasi (PI3K) nel cancro è stata confermata dalla scoperta che la PIK3CA
gene, che codifica per la subunità catalitica PI3K p110α, è frequentemente mutato in alcuni tumori umani più comuni [12]. Queste alterazioni genetiche di PIK3CA
composti esclusivamente da mutazioni missense somatiche raggruppati in due "hotspot" regioni in esoni 9 e 20, corrispondenti ai domini elicoidali e chinasi di p110α rispettivamente [13].
Recentemente, l'uso di KRAS
, BRAF
, PIK3CA
e le ANR
come biomarcatori per la terapia bersaglio molecolare nei tumori solidi è stato ampiamente discusso. Diversi biomarcatore su piccola scala analisi di KRAS
, BRAF
e PIK3CA
mutazioni sono stati riportati in precedenza in AGC [14-16]. Il significato clinico di queste mutazioni in pazienti AGC non è già chiarito, e sono necessarie ulteriori indagini di questi cambiamenti molecolari intracellulari.
Nel presente studio, abbiamo condotto un'analisi genomica di KRAS
, BRAF
, PIK3CA
e NRAS
mutazioni al fine di indagare le caratteristiche clinico-patologici e ruolo prognostico di mutazioni del gene nei pazienti AGC.
Metodi
pazienti e campioni raccolta
Tutti i dati sono stati estratti dalla banca dati del nostro reparto, e il grafico commento è stato fatto per ogni paziente al fine di ottenere informazioni importanti. Abbiamo raccolto campioni di tessuto per l'analisi dello stato di mutazione genica di KRAS, BRAF, PIK3CA
e NRAS
. Campioni di tessuto consisteva di campioni utilizzati in precedenti ricerche biomarker nel nostro istituto [2, 17] e di campioni di tessuto fresco congelato, che sono stati ottenuti da precedenti resezioni chirurgiche di AGC nel nostro istituto. campioni di tessuto tumorale di 173 pazienti AGC sono stati raccolti, ma sono stati esclusi campioni insufficiente da 6 pazienti. Infine, abbiamo utilizzato 167 campioni di tessuto da pazienti AGC e studiato le mutazioni genetiche di KRAS
, BRAF
, PIK3CA
e le ANR
con il metodo-sequenziamento diretto (tutta la coorte). Tra 167 pazienti AGC, 42 pazienti sono stati sottoposti a resezione chirurgica senza chemioterapia sistemica (coorte non metastatico come gruppo A) e 125 pazienti con carcinoma gastrico metastatico sottoposti a chemioterapia sistemica (coorte metastatico come gruppo B). Uno schema di questo studio è mostrato in Figura 1. Il consenso informato di utilizzare tessuti tumorali del paziente è stata confermata da tutti i pazienti che hanno partecipato allo studio, che è stato condotto con l'approvazione del Istituzionale Etico Review Board del National Cancer Center di secondo la dichiarazione di Helsinki del 1975 (rivisto nella sostanza nel 1983). Figura 1 Diagramma di questo studio.
genomica analisi di KRAS, BRAF, PIK3CA e le ANR
campioni di DNA sono stati estratti da, sezioni di tessuto tumorale fissati in formalina e inclusi in paraffina (FFPE) e freschi congelati. aree ricche di cellule tumorali nella sezione ematossilina eosina sono stati segnati al microscopio, e il tessuto è stato graffiato dalla zona di un'altra sezione senza macchia deparaffinate. DNA dai pezzi del campione di tessuto graffiato è stato isolato usando il Kit Tissue QIAamp DNA FFPE (QIAGEN KK, Tokyo, Giappone). Exon 2 (codone 12, 13), esone 3 (codone 61), esone 4 (codone 146) di KRAS
gene e esone 15 (codone 600) di BRAF
gene e esone 9 (codone 542, 545) , esone 20 (codone 1047) di PIK3CA
gene e esone 2 (codone 12, 13), esone 3 (codone 61) di NRAS
gene sono stati amplificati mediante PCR (termociclatore GeneAmp PCR 9700). I prodotti di PCR sono state visualizzate mediante elettroforesi su gel di agarosio con bromuro di etidio colorazione e direttamente sequenziato utilizzando un ABI 3130x /Genetic Analyzer (Life Technologies Giappone (Applied Biosystems), Tokyo, Giappone) secondo le istruzioni del produttore
. Trattamento
A totale di 125 pazienti del gruppo B ha ricevuto chemioterapia sistemica. Regimi di chemioterapia di prima linea consistevano CP (n = 42, 33,6%), S-1 (n = 39, 31,2%), 5-FU (n = 10, 24,0%), una combinazione di 5-FU e metotrexato (n = 10, 8,0%), Paclitaxel (n = 3, 2,4%) e XP e /o bevacizumab (n = 1, 0,8%). Principali farmaci anti-cancro per AGC in Giappone sono fluoropirimidina (5-FU, S-1, capecitabina), cisplatino, irinotecan e taxani. Durante tutto il corso della chemioterapia sistemica nel gruppo B, le proporzioni di pazienti che hanno ricevuto 5-FU, cisplatino, irinotecan e taxani sono stati 85,6% (n = 107/125), il 52,8% (n = 66/125), 60,8% (n = 76/125), 36,0% (n = 45/125), rispettivamente. Inoltre, 22 pazienti (17,6%) hanno ricevuto tutti i farmaci chiave anti-cancro, 37 pazienti (29,6%) hanno ricevuto 3 dei farmaci chiave, 30 pazienti (24.0%) hanno ricevuto 2 dei farmaci chiave, e 36 pazienti (28,8%) ricevuto soltanto uno dei farmaci chiave anti-cancro. Gli orari e le dosi di CP, S-1 e 5-FU sono stati basati sulle precedenti relazioni [17]. Paclitaxel in monoterapia è stato ripetuto tre volte alla settimana per 4 settimane e il docetaxel in monoterapia è stato somministrato per infusione endovenosa analizza una volta ogni 3 settimane.
Statistica
Abbiamo valutato la proporzione di ciascun KRAS
, BRAF
, PIK3CA
e NRAS
mutazione in tutta la coorte e dei valori prognostici di queste mutazioni, che sono stati regolati variabili delle caratteristiche dei pazienti in termini di sopravvivenza globale (OS) nel gruppo B. metastatico OS è stato definito come l'intervallo di iniziazione di chemioterapia di prima linea a morte o all'ultimo follow-up.
Abbiamo eseguito analisi statistiche da un software statistico SPSS, versione 19 (IBM, Tokyo, Giappone). Le differenze nella distribuzione delle variabili sono state valutate con il test esatto di Fisher o il test chi-quadrato, a seconda dei casi. tempo mediano di sopravvivenza (MST) è stato stimato con il metodo e la sopravvivenza curve di Kaplan-Meier sono state confrontate con il log-rank test. Tutti i test sono stati due lati e un valore p < 0.05 è stato definito come statisticamente significativo. Abbiamo stimato hazard ratio (HR) e la corrispondente 95% intervallo di confidenza (CI) per l'OS utilizzando univariata e multivariata analisi dai modelli di rischio proporzionale di Cox. Le variabili in questa analisi includevano età (≥median /< mediana), il sesso (maschio /femmina), ECOG PS (0 /1-2), il tipo istologico di classificazione Lauren (tipo intestinale /tipo diffuso), il numero di siti metastatici ( singole /multiple).
Risultati
sequenziamento diretto di campioni di tessuto nel gruppo B determinato la proporzione di ciascuno di KRAS
, BRAF
, PIK3CA
e le ANR
(Tabella 1). Le mutazioni di KRAS
codone 12 (3,7%, n = 6/164) e KRAS
codone 13 (1,2%, n = 2/164), PIK3CA
esone 9 (4,9%, n = 8 /163), PIK3CA
esone 20 (0,6%, n = 1/163) e NRAS
mutazioni (1,9%, n = 3/159) sono stati rilevati. D'altra parte, le mutazioni nel gene KRAS
codone 61, KRAS
codone 146, BRAF V600E
, e le ANR
codone 146 non sono stati rilevati. KRAS
codone 12 mutazioni consisteva di G12D (35G > A, n = 4), G12S (34G > A; n = 1) e G12N (34 35GG > AA; n = 1), e codone 13 mutazioni consisteva di G13S (37G > A; n = 1) e G13V (38 39GC > TT; n = 1). PIK3CA
esone 9 mutazioni consisteva di E542K (1624G > A; n = 2), E545K (1633G > A; n = 5), e E545D (1635G > C; n = 1), e esone 20 mutazioni consisteva di H1047R (3140A > G; n = 1). ANR
mutazioni consistevano G12S (34G > A; n = 1) e G13S (37G > A; n = 1). Ci sono stati 70 i pazienti il cui tessuto tumorale contenuta tipi all-selvatiche di KRAS
(exon2, 3, 4), BRAF
(esone 15), PIK3CA
(exon9, 20) e le ANR
(exon2 , 3). Tra i pazienti AGC cui tumore dei tessuti contenute mutazioni geniche, mutazioni multiple di KRAS
codone 13, PIK3CA
codone 545 e NRAS
codone 12 sono stati rilevati in un solo case.Table 1 risultati di mutazioni genetiche di KRAS, BRAF, PIK3CA e le ANR in pazienti AGC
mutazioni del gene
Percentuale (%)
campioni di DNA insufficiente
KRAS codone 12
6/164 (3,7)
3/167
KRAS codone 13
2/164 (1,2)
3/167
KRAS codone 61
0/131 (0,0)
36/167
KRAS codone 146
0/137 (0,0)
30/167
BRAF V600E
0/136 (0,0)
31/167
PIK3CA esone 9 Pagina 8 /163 (4.9)
4/167
PIK3CA esone 20
1/163 (0,6)
4/167
NRAS codone 12
1/159 (0,6) Pagina 8 /167
NRAS codone 13
2/159 (1,3)
8/167
NRAS codone 61
0/135 (0,0)
32/167
Le caratteristiche clinico-patologiche di ogni mutazione del gene rispetto al tipo all-selvaggio sono riassunti nella tabella 2. l'età mediana dei pazienti il cui tessuto tumorale mutazioni di KRAS
, PIK3CA
e le ANR
(54.5, 58.0 e 56.0 anni contenuta, rispettivamente) sono stati inferiori rispetto a quella dei pazienti che contengono i tipi all-selvatiche di KRAS, BRAF, PIK3CA
e le ANR
(età media, 64.0 anni).
non c'era alcuna differenza significativa, fatta eccezione per il tipo istologico, tra le variabili di caratteristiche clinico-patologiche quali il sesso, l'età, ECOG PS e il numero dei siti metastatici. Rispetto ai pazienti di tipo all-selvatiche, le proporzioni di tipo intestinale erano più alti nei pazienti con KRAS
codone 12/13 mutazione (p = 0.014). Il tipo di tumore istologico in tutti i pazienti il cui tessuto tumorale conteneva ANR
mutazioni era il tipo diffuso di adenocarcinoma.Table 2 Confronto delle caratteristiche clinocopathological in base allo stato mutazioni del gene rispetto a tutto-wild tipo nei pazienti con i pazienti AGC
tutto wild-type
KRAS
codone 12/13
PIK3CA
esone 9/20
NRAS
codon12 /13

KRAS, BRAF, NRAS, PIK3CA
tipo Mutant
P
-value
tipo Mutant
P
- valore
tipo Mutant
P
-value
il numero delle camere pazienti 70 Pagina 8
9 3
mediana età
64,0
54,5
58,0
56,0
di genere (%)
Maschio
49 (70.0)
7 (87,5)
0,429 Pagina 8 (88,9)
0.432 Pagina 2 (87,5)
1.000
femminile
21 (30,0)
1 (12.5)
1 (11.1)
1 (12.5)
ECOG PS (%)
0
38 (54,3) Pagina 3 (37.5)
0,466 Pagina 4 (44,4)
0,727
1 (33.3)
0,476
1 ≦
32 (45,7)
5 (62,5)
5 (55,6) Pagina 2 (66,7)
tipo istologico (%)
tipo intestinale
20 (28,6)
6 (75,0)
0,014 Pagina 4 (44,4)
0,443
0 (0.0)
0,556 tipo
Diffuse
50 (71,4) Pagina 2 (25,0)
5 (55,6) Pagina 3 (100.0)
Numero sito metastatico (%)
1 54 (77,1) Pagina 8 (100,0)
0,195 Pagina 8 (88,9)
0.675
3 (100.0)
1.000 Pagina 2 ≦
16 (22,9)
0 (0.0)
1 ( 11.1)
0 (0.0)
metastatico lesione (%)
linfonodale
41 (58,6) Pagina 3 (37.5)
0,348
6 (66,7)
0.717 Pagina 2 (66,7)
0,851
Fegato
14 (20,0) Pagina 3 (37.5) Pagina 3 (33,3)
1 (33.3)
Lung
2 (2.9)
1 (12.5)
0 (0.0)
0 (0.0)
peritoneale diffusione
18 (25,7)
1 (12.5)
1 ( 11.1)
0 (0.0) Casa Other
3 (4.3)
0 (0.0)
0 (0.0)
0 (0.0)
Abbreviazioni
: ECOG PS
performance status Cooperative Oncology Group Orientale. Abbiamo descritto i dati clinici di 90 pazienti, e abbiamo escluso i pazienti il cui tumore tessuti non aveva mutazioni genetiche, ma almeno un gene non poteva essere valutato.
Le caratteristiche dei pazienti affetti da cancro gastrico metastatico sfondo sono riportati nella Tabella 3. La maggior parte dei pazienti (98,4%) erano ECOG PS 0/1, e solo 2 pazienti (1,6%) erano ECOG PS 2. Un totale di 71 pazienti (60,0%) ha avuto il tipo di tumore istologicamente diffuso, e 50 pazienti (40,0%) ha avuto il intestinale tipo di adenocarcinoma. Per quanto riguarda il numero di siti metastatici, 30 pazienti (24,0%) avevano metastasi organi multipli, e 95 pazienti (76,0%) avevano metastasi un organo. siti metastatici comuni erano linfonodi, peritoneo e liver.Table 3 caratteristiche di fondo di pazienti con coorte totale, gruppo gruppo B
A e totale
Gruppo A (gruppo non-metastatico)

gruppo B (gruppo metastatico)
il numero delle camere pazienti 167
42
125
Age (mediana)
64,0
65,0
63,0
di genere (%)
Maschio
124 (74,3)
29 (69,0)
95 (76,0)
femminile
43 (15,7)
13 (31,0)
30 (24,0)
ECOG PS (%)
0
79 (47,3)
33 (78,6)
46 (36.8)
1 86 (51,5)
9 (21,4)
77 (61.6) 2
2 (1.2)
0 (0.0) Pagina 2 (1.6)
tipo istologico (%)
tipo intestinale
60 (35,9)
10 (23,8)
50 (40,0)
diffusa tipo
107 (64,1)
36 (76,2)
71 (60,0)
T-stadio
T1
9 (5.4) Pagina 7 (16,7) Pagina 2 (1.6)
T2
34 (20,4)
9 (21,4)
25 (20,0)
T3
101 (60,5)
22 (52,4)
79 (63,2)
T4
23 (13,8) Pagina 4 (9.5)
19 (15.2)
N stadi
Nx
4 (2,4) Pagina 2 (4.8) Pagina 2 (1.6)
N0
22 (13.2)
12 (28.6)
10 (8.0)
N1
56 (33,5)
16 (38,1)
40 (32,0)
N2
53 (31,7)
9 (21.4)
44 (35,2)
N3
32 (19,2) Pagina 3 (19.2)
29 (23,2)
metastatico lesione (%)
≦ 1
135 * (80,8)
40 * (95,2)
95 (76,0) Pagina 2 ≦
32 (19,2) Pagina 2 (4.8)
30 (24,0)
sito metastatico (%)
linfonodale
92 * (55.1)
19 * (45,2)
73 (58,4)
Fegato
34 (20,3)
2 * * (4.8)
32 (25,6)
Lung
8 (4.8)
0 (0.0) Pagina 8 (6.4)
diffusione peritoneale
43 (25,7)
3 ** (7.1)
40 (32,0) Casa Other
6 (3,6)
0 (0.0) Pagina 6 (4.8)
Abbreviazioni
: ECOG PS
performance status Cooperative Oncology Group Orientale. Messa in scena (classificazione TNM) viene diagnosticata Classificazione giapponese di gastrico Carcinoma (13a edizione), * tra cui le metastasi ai linfonodi regionali. . ** Lesione resecabile
Il MST nei pazienti metastatici CG was14.1 mesi (95% CI: 12.5-15.7 mesi). I pazienti il cui tumore dei tessuti conteneva un NRAS
codone 12/13 mutazione aveva un sistema operativo significativamente più breve rispetto a quelli che trasportano le ANR
wild type (8,8 mesi rispetto a 14,7 mesi, p = 0,011, log-rank test). D'altra parte, non vi era alcuna differenza significativa nel sistema operativo tra i pazienti con il tipo selvatico o tipo mutante di KRAS
codone 12/13 (13.2 vs 15.2 mesi, p = 0.775) e PIK3CA
esone 9/20 ( 13,6 vs 9,4 mesi, p = 0,286).
Abbiamo valutato i fattori prognostici per OS da univariata e multivariata analisi in metastatico gruppo B. non vi era alcuna differenza significativa tra le variabili del paziente caratteristiche di fondo, ma i pazienti con ECOG PS 1 /2 (HR: 1.380, 95% CI: 0,941-2,024) e più siti metastatici (HR: 1.452, 95% CI: 0.956-2.206) hanno la tendenza ad avere più breve OS da analisi univariata. All'analisi multivariata, 2 o più siti metastatici (HR: 1.613, 95% CI: 1,047-2,484) era una variabile indipendente in previsione di OS più breve
HR e IC al 95% di variabili di mutazioni del gene KRAS (
. codone 12/13, PIK3CA
esone 9/20 e NRAS
codone 12/13) sono stati aggiustati per età, sesso, ECOG PS, tipo istologico e siti metastatici. Tra queste mutazioni, le ANR
codone 12/13 mutazione era un valore indipendente in previsione del sistema operativo più corto di analisi multivariata (HR aggiustato: 5,607, 95% CI: 1,637-19,203).
Discussione e conclusioni
La nostra analisi ha suggerito che le mutazioni di KRAS
codone 12/13 e PIK3CA
esone 9/20 (codoni 542, 545 e 1047), non sono state osservate frequentemente nei pazienti AGC, e BRAF
mutazioni (V600E) non erano rilevato. A nostra conoscenza, le caratteristiche clinico-patologici e prognostici ruoli di Kras
codone 61, KRAS
codone 146, NRAS
codone 12/13 e NRAS
codone 61 non sono stati riportati nei pazienti AGC in precedenza. Le mutazioni nel gene KRAS
codone 61, KRAS
codone 146 e NRAS
codone 61 non sono stati rilevati, ma NRAS
codone 12/13 mutazione è stato rilevato in 3 dei 159 pazienti (1,9%) nel presente studio. È interessante notare che il tipo intestinale di adenocarcinoma è stata trovata più frequentemente nei pazienti in cui il tessuto tumorale contenute KRAS
codone 12/13 mutazioni e tipo diffuso di adenocarcinoma è stata osservata in tutti e 3 i pazienti il cui tessuto tumorale conteneva NRAS
codone 12/13 mutazioni . Inoltre, le ANR
mutazioni erano suscettibili di essere associata a più breve OS nei pazienti metastatici GC. mutazioni oncogeniche spesso indicano la presenza di un obiettivo terapeutico che potrebbe essere suscettibili di intervento terapeutico diretto. La terapia bersaglio molecolare di Marco e cascate PI3K-Akt è una strategia attraente in pazienti AGC.
in avanzato adenocarcinoma gastro-esofageo, la frequenza di KRAS
codone 12/13 mutazioni è stato di circa 3,4-9,4% secondo le analisi biomarker di piccole dimensioni prove di clinici di trattamento anti-EGFR anticorpi [18-20]. Il nostro studio ha indicato che KRAS
mutazioni sono state osservate nel 4,9% dei pazienti AGC, che è simile ai risultati di questi studi clinici. Diverse analisi retrospettive hanno riferito sulle frequenze e le caratteristiche clinico-patologici di Kras
mutazioni nel cancro gastrico [14-16]. Secondo questi rapporti, la mutazione più comune di KRAS
codone 12 era G12D, e tutte le mutazioni di KRAS
codone 13 erano G13D. Il nostro studio ha anche indicato che G12D mutazioni erano le mutazioni più comuni, e abbiamo trovato in 4 su 6 campioni di tessuto tumorale contenenti il
KRAS codone 12 mutazioni. D'altra parte, la G13D KRAS
mutazione non è stato rilevato nel nostro studio (G13V e G13S), a differenza di osservazioni precedenti relazioni. In questi rapporti precedenti, la maggior parte dei tessuti tumorali che contengono il gene KRAS
codone 12/13 erano del tipo istologico intestinale. Zhao W et al. suggerito che ci sono state differenze significative nella presenza di KRAS
mutazioni secondo il sito del tumore (antro vs non-antro, p = 0,002) e lo stato di instabilità dei microsatelliti (MSI) (MSI-alta contro MSI-perdita, p = 0,000,076 mila). La frequenza del tipo intestinale di adenocarcinoma era significativamente più alta di quella del tipo diffuso di adenocarcinoma nel nostro studio. Non c'era alcuna prova definitiva per un ruolo di KRAS
mutazioni in previsione e la prognosi di successo della terapia bersaglio molecolare in AGC. Di recente, randomizzato, multicentrico, di fase II /III REALE 3 trial, che ha testato l'aggiunta di panitumumab a un epirubicina, oxaliplatino e capecitabina (EOC) regime modificato, è stato segnalato, e un multivariata analisi biomarker di 200 pazienti ha indicato che KRAS
mutazione era un fattore prognostico per OS [7]. In uno studio clinico su larga scala di trattamento del cancro gastrico-esofageo con anticorpi anti-EGFR, KRAS
mutazioni anche sembrava avere notevole valore prognostico, ma abbiamo bisogno di verificare questo risultato da un ulteriore biomarker analisi del trattamento di terapia molecolare in AGC.
amplificazioni gene, cancellazioni e, più recentemente, mutazioni missense somatiche nel gene PIK3CA
sono stati segnalati in diversi tumori maligni, tra cui i tumori del colon, della mammella, del polmone, cervello, fegato e stomaco [21, 22 ]. Nel cancro gastrico, relazioni precedenti hanno indicato che la frequenza di PIK3CA
mutazioni (esoni 9 e 20) è stata del 2,5 al 10,6% [12, 14, 20]. Nove dei 168 pazienti AGC (4,5%) hanno avuto PIK3CA
mutazioni nel nostro studio, e non c'era grande differenza rispetto ai precedenti relazioni. Alcuni rapporti precedenti hanno suggerito una prognosi migliore per i pazienti con cancro al seno PIK3CA
mutazioni, mentre altri hanno suggerito che PIK3CA
mutazioni erano associate ad una prognosi peggiore nel cancro del colon-retto, il cancro endometriale e cancro al polmone [23-26]. Multivariata analisi del processo REALE 3 indicavano che PIK3CA
mutazioni indicate prognosi infausta OS nel trattamento con anticorpi anti-EGFR nel cancro gastro-esofageo. I nostri dati suggeriscono che PIK3CA
mutazione non è stata associata con la prognosi nei pazienti MGC trattati con chemioterapia sistemica, anche se questo studio non era un'analisi su larga scala. Gli studi clinici di terapia molecolare che gli obiettivi vie PI3K-AKT-mTOR sono stati avviati di recente, in tal modo risultati di biomarker analisi di questi percorsi sono necessari.
ANR
mutazioni sono state descritte principalmente nel melanoma e la leucemia [27, 28] , ma il significato prognostico in queste neoplasie è stato poco chiaro. Alcuni rapporti precedenti hanno suggerito un'associazione tra le ANR
mutazioni e una prognosi sfavorevole nel melanoma e una scarsa risposta agli anticorpi anti-EGFR nel carcinoma del colon-retto [29]. Il nostro studio ha indicato che la frequenza delle ANR
mutazioni (codoni 12 e 13) è stato 1,9% nel AGC ed era inferiore a quello visto in altri tumori maligni. È interessante notare che le analisi multivariata ha mostrato che piccoli gruppi di ANR
mutazioni avevano scarsa prognosi nei pazienti con carcinoma metastatico gastrico che hanno ricevuto chemioterapia sistemica nel presente studio. Dobbiamo considerare una probabile distorsione di piccola dimensione del campione di ANR
mutazioni. D'altra parte, le caratteristiche del paziente di NRAS
mutazioni erano numero minore e più piccolo del sito metastasi di tutti i pazienti wild-type. Non vi era alcuna differenza significativa nei regimi chemioterapici e numero di farmaci chiave tra i pazienti con NRAS
mutazioni e pazienti di tipo all-selvatici. In precedenza, le ANR
mutazioni non sono state studiate abitualmente come un marcatore prognostico in studi clinici di AGC. Oltre ad avere significato prognostico, che le ANR
mutazioni così come KRAS, BRAF
e PIK3CA
mutazioni sarebbe meglio discutere come potenziale bersaglio per la terapia molecolare nei pazienti AGC.
Il presente studio ha diversi limiti. In primo luogo, i regimi chemioterapici nel nostro studio sono stati precedenti regimi standard a metà degli anni 2000 in Giappone. In secondo luogo, non siamo riusciti a concludere definitivamente dai dati nel solo nostro studio che le ANR
mutazioni hanno significato prognostico a causa delle basse frequenze delle ANR
mutazioni e le grandi intervalli di confidenza. In terzo luogo, ci sono stati alcuni campioni insufficienti e abbiamo bisogno di unificare i metodi migliori del campione conservazione.
In conclusione, il nostro studio ha indicato che le frequenze di mutazioni genetiche di KRAS, BRAF
e PIK3CA
erano molto simile a quelli osservati in precedenti relazioni. ANR
mutazioni erano rare nei pazienti AGC, ma possono avere un valore prognostico nei pazienti MGC che ricevono la chemioterapia sistemica. Speriamo che i nostri risultati contribuiranno alla futura terapia molecolare dei pazienti AGC
Abbreviazioni
AGC:.
Cancro gastrico avanzato
MGC:
cancro gastrico Metastaric
EGFR:
recettore del fattore di crescita dell'epidermide
FFPE:
fissati in formalina, incluso in paraffina

ECOG PS:
performance status Eastern Cooperative Oncology Group
PFS:
sopravvivenza libera da progressione

OS:
sopravvivenza globale
HR:
tasso di pericolo
CI:
intervallo di confidenza

MST:
tempo di sopravvivenza mediano
EOC:.
Pirubicin, oxaliplatino e capecitabina

Dichiarazione
Ringraziamenti
apprezziamo molto la partecipazione dei pazienti e le loro famiglie in questo studio, e ringraziamo tutti i co-ricercatori per il loro contributo: H. Morita, E. Onishi (National Cancer center Hospital) e divisione laboratorio a società di SRL (Analisi di mutazioni del gene).
Finanziamento
Questo studio è stato sostenuto dai Labor Sciences Research Grants Salute e per Clinical Cancer Research del Ministero della Salute, del Lavoro e del Welfare del Giappone (non rilasciano . H22- Cancer Clinical -019).
autori fascicoli presentati originali per
di seguito sono riportati i link ai file degli autori originali inviati per le immagini.

caratteristiche clinico-patologici e ruoli prognostici di KRAS, BRAF, PIK3CA e le ANR mutazioni nel cancro gastrico avanzato

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