Izražanje pojavom proteinov povezanih z odpornostjo proti in njihov odnos do pooperativne individualno kemoterapije pri raku želodca

Izražanje pojavom proteinov povezanih z odpornostjo proti in njihov odnos do pooperativne individualno kemoterapije pri raku želodca
Abstract
Ozadje
adjuvantno kemoterapijo lahko zmanjša preostale tumorske celice in prepreči ponovitev pa niso vsi bolniki so primerni za adjuvantno kemoterapijo. Presejalni primerne bolnike temeljijo na molekularnih markerjev za individualno adjuvantno kemoterapijo je potrebno.
Metode
med junijem 2002 in junijem 2004, je bilo 119 bolnikov, ki so šli skozi radikalno želodca naknadno analizirali. Nekateri bolniki so imeli adjuvantno kemoterapijo na osnovi platine in 5-FU za štiri do šest ciklov. Topoizomeraze II (topo II) negativen, rezistence na več beljakovin (MRP) pozitiven in glutation S-transferaza π (GST-π) pozitivni so bili šteti treh dejavnikov tveganja, ki so lahko povezane z rezistenco kemoterapije in slabo prognozo. Bolniki so bili razdeljeni v dve skupini. Skupino z visokim tveganjem (≥ 2 dejavniki tveganja) in skupino z nizkim tveganjem (< 2 dejavniki tveganja), in so bili analizirani tumor ponovitev in čas preživetja bolnika od teh dveh skupin
rezultatov
Povprečna ponovitev čas skupini z nizkim tveganjem je bistveno daljša kot pri skupini z visokim tveganjem (21,29 ± 11,10 primerjavi 15.16 ± 8.05 mesecih, P
< 0,01). Stopnje preživetja 3-letno in 5-letno v skupini z visokim tveganjem je bilo 57,4% in 42,6%, kljub temu, da ni pomembno razliko v primerjavi s 66,2% in 58,5% v skupini z nizkim tveganjem (P
> 0,05). V skupini z visokim tveganjem, so bile stopnje je 3-letno preživetje bolnikov z /brez kemoterapije 62,1% in 52,0% in stopnja preživetja za 5-letno bilo 44,8% in 40,0%, v tem zaporedju, vendar razlika ni bila statistično značilna (P
> 0,05). V skupini z nizkim tveganjem je znašal delež 3-letno preživetje bolnikov z /brez kemoterapije 81,2% in 51,5%, in stopnje preživetja za 5-letno bili 71,9% in 45,5%, v tem zaporedju, so te razlike statistično značilne (p
. < 0,05)
Sklepi PODJETJA
kombinaciji odkrivanje odpornosti proti več (MDR) -povezana beljakovine topo II, MRP in GST-π lahko naprej dragoceno za postoperativno individualno kemoterapijo in pri nadaljnjem napovedovanju izidov želodca bolnikov z rakom.
Ključne besede
želodec novotvorbe pojavom proteinov, povezanih z odpornostjo kemoterapijo prognoza Ozadje
še vedno obstaja velika nevarnost ponovitve in metastaz po radikalni operaciji želodca in adjuvans kemoterapija lahko zmanjša pooperativne preostala tumorske celice in prepreči ponovitev [1, 2]. V zadnjih letih so novi rezultati randomiziranih kontroliranih študij kažejo, da lahko postoperativni kemoterapija izboljša prognozo bolnikov [3, 4]. Ti rezultati so bili sprejeti v smernicah za klinično prakso NCCN želodca raka in se priporoča kot osnova programov postoperativne zdravljenja. Vendar pa je treba nekatera vprašanja še vedno je treba obravnavati: (1) analiza podskupin kaže, da nekateri bolniki (ženska, bezgavke negativna, pozno, starejši, tako dalje
) ne prejemajo adjuvantno terapijo in (2), pojavijo težave s kemoterapijo toksičnost in skladnost, ki povzroča nekaterim bolnikom, da odstopi od zdravljenja zaradi neželenih učinkov.
Torej, pooperativna adjuvantno kemoterapijo je koristno za nekatere bolnike, vendar pa lahko povečajo breme zdravljenja in zmanjšanje odpornosti drugih pacientov. Zato je še prezgodaj za določitev programa kot standardno adjuvantno kemoterapijo raka želodca. Še vedno je veliko vprašanj, ki potrebujejo visoko kakovostne raziskave odgovoriti pred individualizirano adjuvantno kemoterapijo postane standardna. Še posebej je vredno omeniti, je, da je študija Toga, je potrdila pomen Herceptin pri zdravljenju napredovalega raka želodca [5]. V zadnjem času, Deng in kolegi iz prvič podroben molekularno zemljevid genomskih sprememb pri bolnikih z rakom želodca, ki je razkrila nekaj obetavnih ciljev za podtip specifične terapije [6]. Presejalni primerne bolnike, ki temeljijo na molekularnih markerjev bo postala glavna raziskovalna smer individualizirano kemoterapijo [7].
Multidrug proteinov, povezanih z odpornostjo topoizomerazo II (topo II), rezistence na več beljakovin (MRP) in glutation S-transferaza π (GST- π) so temelj odpornosti proti več v malignih tumorjih [8, 9]. To je potrdil, da MRP in GST-Õ čezmerno in zmanjšano izražanje topo II so pomembni mehanizmi posredniške odpornost mnogovrstnimi [10]. Zato smo izvedli to študijo odpornosti proti več (MDR
) genov, povezanih proteinov v pooperativnem individualiziranega zdravljenja raka želodca.
Metode
Bolniki in vzorce tkiva Poslovni
med junijem 2002 in junijem 2004, je skupno 119 bolnikih, ki so radikalno želodca na oddelku za abdominalno kirurgijo, Zhejiang Cancer Hospital, so bili naknadno analizirali. Teh bolnikov je bilo 77 primerov moških in 42 primerih so bile samice, starih od 25 do 78 let (srednja vrednost 57.3 ± 6,7 let). Faza I /II, vključenih 39 primerov in faza III /IV, vključenih 80 primerov; lezije ≥ 5 cm so bile ugotovljene v 76 primerih in poškodb < 5 cm so bile ugotovljene v 43 primerih; in so bile ugotovljene pri bolnikih z /brez limfnih vozlov metastaz v 93 primerih, in 26 primerov, v tem zaporedju. Nobeden od bolnikov je prejelo preoperativno kemoterapijo ali drugo zdravljenje tumorja, in nekateri bolniki so imeli adjuvantno kemoterapijo na osnovi platine in 5-fluorouracil (5-FU) za štiri do šest ciklov. Pisna privolitev je bila pridobljena iz vseh udeležencev študijskih. Študija je odobril Odbor za etiko Zhe Jiang Cancer Hospital.
Imunohistokemijsko
so protitelesa, ki se uporabljajo v tej študiji, kupljene od GBI Company (Golden Bridge International, Inc., Mukilteo, WA, ZDA). Imunohistokemijsko je bila izvedena na, 4-mikrometrov debelih, vzorci s formalinom fiksni parafinskih vgrajeni tkiva. Trebušne slinavke, debelega črevesa in jajčnikov vzorci so bili uporabljeni kot pozitivne kontrole za Topo II, MRP in GST-Õ oz. Osebki so bili ocenjeni neodvisno dva patologi v slepi način. celice z rjavo obarvani madeži so bile obravnavane le kot pozitivne. Intenzivnost izražanja MDR
-povezana beljakovine je bil stratificiran v štiri skupine, ki so bili zadeti, kot sledi: 1) negativna (-) ni imela znatnega cytomembrane, jedrski ali citoplazemske obarvanje ali je obarvanje v < 10% neoplastične celice; 2) 1+ imela znatnega obarvanja pri 10 do 25% neoplastičnih celic; 3) 2+ imela znatnega obarvanja pri 25 do 75% neoplastičnih celic; in 4) 3+ imelo znaten obarvanje v >. 75% neoplastične celice
bolnika spremljanje
Bolniki so prejemali rutinsko spremljanje po radikalni želodca enkrat v vsakem četrtletju za dve leti in nato, enkrat na pol leta ( bolnikov, ki so prejemali kemoterapijo, so spremljali z ciklov kemoterapije). Topo II negativen, MRP pozitivno in GST-π pozitivni so bili šteti treh dejavnikov tveganja, ki so lahko povezane z rezistenco kemoterapije in slabo prognozo. Bolniki so bili razdeljeni v dve skupini: skupino z visokim tveganjem (≥ 2 dejavniki tveganja) in skupine, ki predstavljajo majhno tveganje (< 2 dejavniki tveganja), in so bili analizirani tumor ponovitev in čas preživetja bolnika od teh dveh skupin
. statistična analiza
Vsi podatki poskusa so bile vključene v celovit nabor podatkov. Številčni podatki zapisani neposredno in podatki meritev so bili opisani kot mediana in razpon. Statistična analiza je bilo izvedeno v različici SPSS programske 16.0 (SPSS Inc. Chicago, IL) in P
<. 0,05 je štela kot statistično značilne
Rezultati
pozitivno obarvanje topo II je bilo priznano, da se izrazi v celičnem jedru (slika 1A), medtem ko je MRP in GST-Õ so bili izraženi v citoplazmi malignih celic (Slika 1B in slika 1C). Slika 1 Imunohistokemijsko od pojavom proteinov povezanih z odpornostjo proti. Imunohistokemijsko za topo II je bil določen v celičnem jedru (original povečava × 400). B Imunohistokemijsko MRP je bilo priznano, da se izrazi v citoplazmi malignih celic (originalni povečavi × 400). C Imunohistokemijsko od GST-Õ je bilo priznano, da se izrazi v citoplazmi malignih celic (originalni povečavi × 400).
Stopnjo ekspresije topo II v normalnih tkivih (75,1%) je bila višja kot v tumorskih tkivih (73,9 %) (ni pomembna, P
> 0,05). Če primerjamo dobro, zmerno in slabo diferencirano stopnjo izražanja, je pokazala statistično značilna korelacija med topo II izražanja in stopnjo diferenciacije (86,3%, 64,5% in 64,9%, p
< 0,05). Kot je za MRP, pozitivna je bila stopnja v tumorskih tkivih 42,9%, medtem ko vsi normalni želodca tkiva se niso obarvajo. Ni velike razlike v MRP izražanja so bile ugotovljene v zvezi z clinicopathological dejavnikov. Pozitivna stopnja GST-Õ pri bolnikih z rakom želodca je bila višja kot pri normalnih tkivih (51,3% v primerjavi z 23,2%, P
< 0,05). Pomembne razlike v DDV-Õ izražanja so bile ugotovljene tudi glede na spol (moški v primerjavi z žensko, 59,7% v primerjavi z 35,7%, P
< 0,05) in diferenciacije (dobro, zmerno in slabo, 40,5%, 41,9% in 64,7 %, v tem zaporedju, P
< 0,05) (tabela 1) .table 1 izraz topo II, MRP in GST-Õ in njihovega odnosa z clinicopathological dejavnikov PODJETJA
Clinicopathologic Oprema v
zadevah

topo II
MRP
GST-π

+ (%)
χ2

P
+ (%)
χ2
P
+ (%)
χ2
P
seks
moški
77
54 (70,1%)
29 (37,7%)
46 (59,7%)
Female
42
34(81.0%)
1.65
0.198
22(52.4%)
2.40
0.121
15(35.7%)
6.27
0.012*
Age
≤50 y
33
24 (72,7%)
16 (48,5%)
14 (42,4%)
> 50 y
86
64(74.4%)
0.03
0.851
35(40.7%)
0.59
0.442
47(54.7%)
1.42
0.232
Tumor Velikost
≥5 cm
76
59 (77,6%)
35 (46,1%)
40 (52,6%)
< 5 cm
43
29(67.4%)
1.48
0.224
16(37.2%)
0.88
0.349
21(48.8%)
0.16
0.691
Differentiation
No
51
44 (86,3%)
20 (39,2%)
33 (40,5%)
Zmerno
31.
20 (64,5%)
13 ( 41,9%)
13 (41,9%)
Poorly
37
24(64.9%)
7.04
0.029*
18(48.6%)
0.79
0.672
15(64.7%)
6.47
0.039*
TNM staging
I /II
39
25 (64,1%)
17 (43,6%)
16 (41,0%)
III/IV
80
63(78.8%)
2.92
0.087
34(42.5%)
2.57
0.109
45(56.3%)
2.43
0.119
Lymph node
Pozitivna
93
71 (76,3%)
40 (43,0%)
47 (50,5%)
Negative
26
17(65.4%)
1.27
0.260
11(42.3%)
0.004
0.949
14(53.8%)
0.09
0.765
* P
< 0.05.
Stopnje preživetja 3- in 5-letno od 119 bolnikov je bilo 57,3% in 49,2%, v tem zaporedju. Statistično značilne razlike je opaziti med samim beljakovin (topo II, MRP ali GST-Õ) izražanja in ponovitve ali preživetja časa. Če so bili bolniki razdeljeni v dve skupini: skupino z visokim tveganjem (≥ 2 dejavniki tveganja) in skupine, ki predstavljajo majhno tveganje (< 2 dejavniki tveganja), je bil povprečni čas ponovitev skupini z nizkim tveganjem 21.29 ± 11.10 mesecev in je bil bistveno daljši od 15.16 ± 8.05 mesecih skupini z visokim tveganjem (P
< 0,01). 3-letno in 5-letno stopnja preživetja v skupini z visokim tveganjem je bila 57,4% in 42,6%; Vendar pa ni bilo bistvene razlike v primerjavi s 66,2% in 58,5% v skupini z nizkim tveganjem (P
> 0,05).
V skupini z visokim tveganjem, hitrost 3-letno preživetje bolnikov z kemoterapijo ter pri bolnikih brez kemoterapije je bilo 62,1% in 52,0%, in stopnja preživetja za 5-letno bilo 44,8% in 40,0%, vendar razlika ni bila statistično značilna (P
> 0,05) (slika 2). V skupini z nizkim tveganjem, hitrost 3-letno preživetje bolnikov s kemoterapijo in bolnikih brez kemoterapije je bilo 81,2% in 51,5%, je bila stopnja preživetja za 5-letno 71,9% in 45,5%, in razlika je bila statistično značilna (p
< 0,05) (slika 3). Slika 2 Skupna preživetje bolnikov z ali brez kemoterapije v skupini z visokim tveganjem.
Slika 3 Celokupno preživetje bolnikov z ali brez kemoterapije v skupini z nizkim tveganjem.
razpravo
adjuvantno kemoterapijo po operaciji je bila obravnavana, kot je potrebno za odpravo sistemskih micrometastases in preostalimi malignih celic v največji možni meri, na koncu izboljšanje preživetja [11, 12]. Žal doslej tovrstna strategije zdravljenja adjuvantno je razočaral zaradi odpornosti proti več zdravilom (MDR) malignih celic z različnimi kemoterapevtiki [13, 14]. Zato lahko odkrivanje in vrednotenje MDR
genov in proteinov, pomaga usmerjati adjuvantno kemoterapijo raka želodca in ugotoviti prognozo bolnikov.
MRP, eden izmed najbolj preučevanih mehanizmov MDR, deluje kot ATP-odvisne pasivnega transporta črpalke in zmanjšuje kopičenje znotrajcelično drog z zmanjšanjem mehanizem za sofinanciranje prevoza glutationa [15]. Več prejšnjih študijah so tudi navedli, da prekomerno MRP najpogosteje napoveduje MDR. MRP daje odpornost na alkilirajočimi zdravili, ciklofosfamidom in drugih drog [16]. GST-π je večnamenski encim, ki ima ključno vlogo pri celični razstrupljanja, ki katalizirajo konjugacijo zmanjšane glutation za hidrofobne in elektrofilne spojin [17]. GST-π, se šteje, da je povezana z iztok cis-diaminodichloroplatin (CDDP), fluorouracil in doksorubicinom (DOX) z ATP-vezavna kaseta prevoznikov [18]. Topo II je cilj več zdravili proti raku, kot doksorubicina, VM26, VP16 in mitoksantronom [19]. Zmanjšana izraz topo II in spremembe encimske dejavnosti se v disociacije cepljivi kompleksov in zmanjšati poškodbe DNK, in na koncu povzročijo odpornost na zdravila [20].
V naši raziskavi, statistična analiza kaže, da nobena od treh proteinov močno povezana s stopnjami ponovitve in preživetja, zato je določitev enega samega kazalnika učinkovitosti adjuvantno kemoterapijo, je težko. Ker topo II negativen, MRP pozitivno in GST-π pozitivni so bili šteti dejavnikov treh tveganja, ki bi lahko bile povezane z rezistenco kemoterapije in slabo prognozo, so bili ti bolniki razdeljeni v dve skupini: skupina z visokim tveganjem (≥ 2 dejavniki tveganja) in skupina z majhnim tveganjem (< 2 dejavniki tveganja). Čas ponovitev skupini z nizkim tveganjem je bistveno daljša kot pri skupini z visokim tveganjem, kar kaže, da se je zmanjšala izraz topo II in visoko izražanje MRP in GST-Õ povezano s tumorsko invazijo, ponovitve in slabo prognozo, in ta ugotovitev je bila potrjena z rakom jajčnikov [21]. V skupini z nizkim tveganjem, je 3-letno in 5-letno preživetje bolnikov z kemoterapijo višja kot pri bolnikih brez kemoterapije. Ta rezultat je pokazala, da lahko 5-Fu in na osnovi platine pooperativno kemoterapijo povečati koristi preživetja za bolnike v skupini z majhnim tveganjem. Odpornost na kemoterapijo je redka pri teh bolnikih, in v teoriji, lahko pooperativna kemoterapija treba storiti popolnoma fit in prognoza bolnika se bo bistveno izboljšala. V skupini z visokim tveganjem, je 3-letno in 5-letno preživetje bolnikov z kemoterapijo višja kot pri bolnikih brez kemoterapije, vendar razlika ni bila statistično značilna. Zato je 5-Fu in na osnovi platine adjuvantno kemoterapijo ni izboljšalo prognozo skupini z visokim tveganjem, in za take bolnike je treba skrbno obravnavali in izbran pooperativno kemoterapijo. Te ugotovitve so temeljile na majhnem številu primerov in so lahko nekatere omejitve. Velik vzorec bolnikih, ki se spremlja v našem centru, in podrobni rezultati, vključno z analizo podskupin (spol, bezgavkah metastaze počivanje, tako dalje
.), Se bo poročalo v bližnji prihodnosti.
Sklepi
Zato, kombinirana določitev MDR
-povezana beljakovine topo II, MRP in GST-π lahko naprej koristno za optimizacijo režimov kemoterapijo in nadalje napovedovanje rezultatov bolnikov. Nadaljnje raziskave bi se morala osredotočiti na kombinirani odkrivanje molekularnih markerjev (kot HER-2, MDR
-povezana beljakovine, RTK /Ras signalne molekule, in tako naprej.
) Za individualno kemoterapijo in izvesti multicentričnih kliničnih preskušanj, rezultati . lahko razburljivo
soglasje PODJETJA
Pisna privolitev je bila pridobljena iz pacienta za objavo tega poročila in vse spremljajoče slike
Kratice
CDDP.
CIS-diaminodichloroplatin

DOX:
doksorubicin
GST-π:
glutation S-transferaza π
MDR:
rezistenco
MRP:
rezistence na več beljakovin
topo II:
topoizomeraze

5-FU.
5-fluorouracil
deklaracij
Zahvala
Ta študija je bila podprta z Natural Science Foundation province Zhejiang Kitajske (No.LY14H160007). "prvotna predložiti datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev
Avtorji prvotna predloženih spisov za slike. "Izvirno datoteko na sliki 1 12957_2014_1778_MOESM2_ESM.pdf avtorjev 12957_2014_1778_MOESM1_ESM.tiff avtorjev prvotni datoteki številka 2 prvotne datoteke 12957_2014_1778_MOESM3_ESM.pdf avtorjev za sliko 3 Konkurenčni interesi
nima koristi v kakršni koli obliki, je prejela ali bo prejela od komercialne stranka, povezane neposredno ali posredno predmet tega članka. Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov. Prispevki
avtorjev
Yu PF, Du YA, Cheng XD, Yu QM, Huang L, Dong RZ oblikovan in izvedli študijo, analizirala podatke, in pomagala napisati rokopis. Yu PF je glavni raziskovalec in revidiran in uredil rokopis. Vsi avtorji prebrali in potrdil končni rokopis.

• Razlike v dejavnikih tveganja med vzorci ponovitve pri bolnikih po kurativne resekcijo za napredno zdravljenje želodčnih carcinoma
• Genomske spremembe in molekularne podvrste želodčnih raka v Asians