Uttrykk av multiresistensassosierte proteiner og deres relasjon til postoperativ individualisert kjemoterapi i mage cancer

uttrykk for multiresistens-assosierte proteiner og deres relasjon til postoperativ individualisert kjemoterapi i magekreft
Abstract
Bakgrunn
Adjuvant kjemoterapi kan redusere rest tumorceller og forhindre tilbakefall, men ikke alle pasienter er egnet for adjuvant kjemoterapi. Screening riktige pasienter basert på molekylære markører for individualisert adjuvant kjemoterapi er nødvendig.
Metoder
Mellom juni 2002 og juni 2004 ble 119 pasienter som gjennomgikk radikal gastrektomi retrospektivt analysert. Noen pasienter hadde adjuvant kjemoterapi basert på platina og 5-FU i fire til seks sykluser. Topoisomerase II (topo II) negativ, multiresistens protein (MRP) positiv og glutation S-transferase π (GST-π) positive ble ansett som tre risikofaktorer som kan være forbundet med kjemoterapi motstand og dårlig prognose. Pasientene ble delt inn i to grupper: a. Høyrisikogruppe (≥2 risikofaktorer) og en lav risikogruppe (mindre enn 2 risikofaktorer), og tumor tilbakefall og pasientens overlevelse av de to gruppene ble analysert
resultater
den gjennomsnittlige gjentakelse tiden av lav-risikogruppen var signifikant lengre enn for høyrisikogruppen (21,29 ± 11,10 versus 15.16 ± 8.05 måneder, P
< 0,01). Den 3-årige og 5-års overlevelse i høyrisikogruppen var 57,4% og 42,6%, men det hadde ingen signifikant forskjell sammenlignet med 66,2% og 58,5% av lav-risikogruppe (P
> 0,05). I høyrisikogruppen, de tre-års overlevelse av pasienter med /uten kjemoterapi var 62,1% og 52,0% og 5-års overlevelse var 44,8% og 40,0%, henholdsvis, men forskjellen var ikke statistisk signifikant (P
> 0,05). I lav-risikogruppen, de tre-års overlevelse av pasienter med /uten kjemoterapi var 81,2% og 51,5%, og 5-års overlevelse var 71,9% og 45,5%, henholdsvis disse forskjellene var statistisk signifikant (p
. < 0,05)
Konklusjoner
Kombinert påvisning av multiresistens (MDR) -relaterte proteiner topo II, MRP og GST-π kan være prospektivt verdifull for postoperativ individualisert kjemoterapi, og hos ytterligere forutsi utfallet av mage kreftpasienter.
nøkkelord
mage svulster multiresistens assosierte proteiner kjemoterapi prognose bakgrunns
Det er fortsatt en høy risiko for tilbakefall og metastase etter radikal gastrisk kirurgi, og adjuvant kjemoterapi kan redusere postoperative resttumorceller og hindre tilbakefall [1, 2]. I de senere år, nye resultater av randomiserte kontrollerte studier indikerer at postoperativ kjemoterapi kan forbedre prognose av pasientene [3, 4]. Disse resultatene har blitt akseptert i Guidelines NCCN magekreft Clinical Practice og er anbefalt som grunnlag for postoperative behandlingsprogrammer. Men noen saker må likevel tas opp: (1) subgruppe analyse indikerer at noen pasienter (kvinnelig, node-negative, sent stadium, eldre, etcetera
) ikke dra nytte av adjuvant terapi og (2) det oppstår problemer med kjemoterapi giftighet og compliance, som fører til at enkelte pasienter til å trekke seg fra behandlingen på grunn av bivirkninger.
Så, er postoperativ adjuvant kjemoterapi gunstig for noen pasienter, men kan det øke behandlingsbyrden og redusere immunitet for andre pasienter. Derfor er det for tidlig å fastslå et program som standard adjuvant kjemoterapi for magekreft. Det er fortsatt mange problemer som må forskning av høy kvalitet for å svare på før individualisert adjuvant kjemoterapi blir standard. Hva er spesielt verdt å nevne er at toga studie har bekreftet verdien av Herceptin i behandling av avansert magekreft [5]. Nylig, Deng og kolleger gitt for første gang en detaljert molekylær kart over genomisk endringer i magekreft, som avdekket flere lovende mål for subtype-spesifikke terapier [6]. Screening aktuelle pasienter basert på molekylære markører vil bli en stor forskningsretning for individualisert kjemoterapi [7] multiresistens-assosierte proteiner topoisomerase II (topo II), multiresistens protein (MRP) og glutation S-transferase π (GST.
π) er basis av multilegemiddelresistens i maligne tumorer [8, 9]. Det hadde blitt bekreftet at MRP og GST-π overekspresjon, og redusert ekspresjon av topo II er viktige mekanismer som formidler resistens mot flere legemidler [10]. Derfor gjennomførte vi denne studien av multiresistens (MDR
) gen-assosiert proteiner i postoperativ individualisert behandling for magekreft.
Metoder
Pasienter og vevsprøver
Mellom juni 2002 og juni 2004 en totalt 119 pasienter som gjennomgikk radikal gastrektomi ved Institutt for Abdominal kirurgi, Zhejiang Cancer Hospital, ble retrospektivt analysert. Av disse pasientene, 77 tilfeller var menn og 42 tilfeller var kvinner, i alderen 25 til 78 år (gjennomsnitt 57,3 ± 6,7 år). Fase I /II inkludert 39 tilfeller og fase III /IV inkludert 80 tilfeller; lesjoner ≥ 5 cm ble funnet i 76 tilfeller og lesjoner < 5 cm ble funnet i 43 tilfeller; og pasienter med /uten lymfeknuter metastaser ble identifisert for 93 tilfeller og 26 tilfeller, henholdsvis. Ingen av pasientene fikk preoperativ kjemoterapi eller annen behandling for tumoren, og noen pasienter hadde adjuvant kjemoterapi basert på platina og 5-flurouracil (5-FU) i fire til seks sykluser. Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle deltagerne. Studien ble godkjent av etikkomiteen av Zhe Jiang Cancer Hospital.
Immunhistokjemisk farging Bedrifter Den antistoffer som brukes i denne studien ble kjøpt fra GBI Company (Golden Bridge International, Inc., Mukilteo, WA, USA). Immunhistokjemisk farging ble utført på formalinfiksert, 4-mikrometer tykke, parafininnstøpte vevsprøver. Bukspyttkjertel, tykktarm og eggstokkprøver ble brukt som positive kontroller for Topo II, MRP, og GST-π, henholdsvis. Prøvene ble vurdert uavhengig av to patologer i en blind mote. Bare celler med brunfarget farging ble vurdert som positive. Intensiteten av uttrykk for MDR
-relaterte proteiner ble delt i fire kategorier som ble scoret som følger: 1) negative (-) hadde ingen merkbar cytomembrane, kjernekraft eller cytoplasma flekker eller hadde flekker i < 10% av neoplastiske celler; 2) 1+ hadde merkbar farging i 10 til 25% av neoplastiske celler; 3) 2+ hadde merkbar farging i 25 til 75% av neoplastiske celler; og 4) 3+ hadde merkbar flekker i >. 75% av neoplastiske celler
Pasient oppfølging
Pasientene fikk rutinemessig oppfølging etter radikal gastrektomi gang hvert kvartal for to år og deretter en gang hvert halvår ( pasienter som fikk kjemoterapi ble fulgt opp med kjemoterapi sykluser). Topo II negativ, MRP positive og GST-π positiv ble ansett som tre risikofaktorer som kan være forbundet med kjemoterapi motstand og dårlig prognose. Pasientene ble delt inn i to grupper: de høyrisikogruppen (≥2 risikofaktorer) og lav-risikogruppe (mindre enn 2 risikofaktorer), og svulsten tilbakefall og pasientens overlevelse av de to gruppene ble analysert
. statistisk analyse
Alle eksperimentdata ble integrert i en omfattende datasett. Numeriske data ble registrert direkte og måledata ble beskrevet som median og rekkevidde. ble utført statistisk analyse på SPSS programvareversjon 16.0 (SPSS Inc. Chicago, IL), og P
. < 0,05 ble ansett som statistisk signifikant
Resultater
positiv farging av topo II ble anerkjent for å bli uttrykt i cellekjernen (figur 1A), mens MRP og GST-π ble uttrykt i cytoplasma av maligne celler (figur 1B og Figur 1C). Figur 1 Immunohistokjemisk farging av multimedikament-resistens-assosierte proteiner. En Immunohistokjemisk farging av topo II ble identifisert i cellekjernen (opprinnelig forstørrelse x 400). B Immunohistokjemisk farging av MRP ble anerkjent for å bli uttrykt i cytoplasma av maligne celler (opprinnelig forstørrelse x 400). C Immunohistokjemisk farging av GST-π ble anerkjent for å bli uttrykt i cytoplasma av maligne celler (opprinnelig forstørrelse x 400).
Ekspresjon frekvensen av topo II i normale vev (75,1%) var høyere enn i tumorvev (73.9 %) (ikke signifikant, P
> 0,05). Når man sammenligner det godt, moderat og dårlig differensiert grad av uttrykk, ble en signifikant korrelasjon vist mellom topo II uttrykk og nivået av differensiering (86,3%, 64,5% og 64,9%, henholdsvis P
< 0,05). Som for MRP, den positive rente var 42,9% i tumorvev, mens alle de vanlige mage vev ikke var farget. Ingen signifikante forskjeller i MRP-ekspresjon ble funnet i forhold til clinicopathological faktorer. Den positive frekvensen av GST-π hos pasienter med magekreft var høyere enn den til normale vev (51,3% mot 23,2%, P
< 0,05). Signifikante forskjeller i GST-π uttrykk ble også funnet i forhold til kjønn (mannlig versus kvinnelig, 59,7% versus 35,7%, P
< 0,05) og differensiering (vel, moderat og dårlig, 40,5%, 41,9% og 64,7 %, henholdsvis P
< 0,05) (tabell 1) .table en uttrykket av topo II, MRP, og GST-π og deres forhold til clinicopathological faktorer
Clinicopathologic funksjoner
Cases <.no> topo II
MRP
GST-π
+ (%)
χ2

P product: + (%)
χ2
P product: + (%)
χ2
P
Sex
Mann fra 77
54 (70,1%)
29 (37,7%)
46 (59,7%)
Female
42
34(81.0%)
1.65
0.198
22(52.4%)
2.40
0.121
15(35.7%)
6.27
0.012*
Age
≤50 y
33
24 (72,7%)
16 (48,5%)
14 (42,4%)
> 50 y
86
64(74.4%)
0.03
0.851
35(40.7%)
0.59
0.442
47(54.7%)
1.42
0.232
Tumor størrelse
≥5 cm
76
59 (77,6%)
35 (46,1%)
40 (52,6%)
< 5 cm
43
29(67.4%)
1.48
0.224
16(37.2%)
0.88
0.349
21(48.8%)
0.16
0.691
Differentiation
Vel
51
44 (86,3%)
20 (39,2%)
33 (40,5%)
Moderat
31
20 (64,5%)
13 ( 41,9%)
13 (41,9%)
Poorly
37
24(64.9%)
7.04
0.029*
18(48.6%)
0.79
0.672
15(64.7%)
6.47
0.039*
TNM iscenesette
I /II
39
25 (64,1%)
17 (43,6%)
16 (41,0%)
III/IV
80
63(78.8%)
2.92
0.087
34(42.5%)
2.57
0.109
45(56.3%)
2.43
0.119
Lymph node
Positive
93
71 (76,3%)
40 (43,0%)
47 (50,5%)
Negative
26
17(65.4%)
1.27
0.260
11(42.3%)
0.004
0.949
14(53.8%)
0.09
0.765
* P
< 0.05.
3- og 5-års overlevelse av de 119 pasientene var 57,3% og 49,2%, henholdsvis. Det ble ikke observert noen statistisk forskjell mellom enkelt protein (topo II, MRP eller GST-π) uttrykk og gjentakelse eller overlevelse. Når pasientene ble delt inn i to grupper: de høyrisikogruppen (≥2 risikofaktorer) og lav-risikogruppe (mindre enn 2 risikofaktorer), gjennomsnittlig tilbakefall tiden av lav-risikogruppe var 21,29 ± 11,10 måneder og var betydelig lengre enn 15.16 ± 8.05 månedene i høyrisikogruppen (P
< 0,01). Den 3-årige og 5-års overlevelse av høyrisikogruppen var 57,4% og 42,6%; men det var ingen signifikant forskjell i forhold til 66,2% og 58,5% av lav-risikogruppe (P
> 0,05).
I høyrisikogruppen, de tre-års overlevelse av pasienter med kjemoterapi og pasienter uten kjemoterapi var 62,1% og 52,0%, og 5-års overlevelse var 44,8% og 40,0%, men forskjellen var ikke statistisk signifikant (P
> 0,05) (figur 2). I lav-risikogruppen, de tre-års overlevelse av pasienter med kjemoterapi og pasienter uten kjemoterapi var 81,2% og 51,5%, 5-års overlevelse var 71,9% og 45,5%, og forskjellen var statistisk signifikant (p
< 0,05) (figur 3). Figur 2 Samlet overlevelse for pasienter med eller uten kjemoterapi i høyrisikogruppen.
Figur 3 Total overlevelse av pasienter med eller uten kjemoterapi i lav-risikogruppe.
Diskusjon
Adjuvant kjemoterapi etter operasjonen har vært ansett som nødvendig for å eliminere systemiske mikrometastaser og rest ondartede celler i den utstrekning det er mulig, til slutt forbedre overlevelse [11, 12]. Dessverre så langt, denne type adjuvant behandling strategi har vært skuffende på grunn av multiresistens (MDR) av maligne celler til andre kjemoterapeutiske midler [13, 14]. Derfor kan påvisning og vurdering av MDR
gener eller proteiner hjelpe kjemoterapi ved magekreft og bestemme prognosen for pasienter.
MRP, en av de mest studerte mekanismer for MDR, virker som en ATP-avhengig utover transport pumpe og reduserer intracellulær akkumulering av narkotika ved å redusere co-transport mekanisme av glutation [15]. Flere tidligere studier har også indikert at overekspresjon av MRP oftest spår MDR. MRP gir resistens mot alkylerende midler, cyklofosfamid og andre stoffer [16]. GST-π er et multifunksjonelt enzym som spiller en kritisk rolle i cellulær avgiftning av katalysere konjugeringen av redusert glutation til hydrofobe og elektrofile forbindelser [17]. GST-π er ansett for å være assosiert med utstrømningen av cis-diaminodichloroplatin (CDDP), flurouracil og doxorubicin (DOX) ved ATP-bindende kassett transportører [18]. Topo II er målet for flere anticancermidler, for eksempel doksorubicin, VM26, VP16 og mitoksantron [19]. Den reduserte ekspresjon av topo II og endring i enzymaktivitet resultat i dissosiasjonen av spaltbare kompleksene og redusert DNA-skade, og til slutt føre til at medikamentresistens [20].
I vår studie statistisk analyse indikerer at ingen av de tre proteinene ble signifikant korrelert med tilbakefall og overlevelse, slik at bestemmelsen av en enkelt indikator på effektiviteten til adjuvant kjemoterapi er vanskelig. Fordi topo II negativ, MRP positive og GST-π positiv ble ansett som tre risikofaktorer som kan være forbundet med kjemoterapi motstand og dårlig prognose, disse pasientene ble delt inn i to grupper: de høyrisikogruppen (≥2 risikofaktorer) og lavrisikogruppen (< 2 risikofaktorer). Regelmessighet av lav-risikogruppen var signifikant lengre enn for høyrisikogruppen, noe som tyder på at redusert uttrykk for topo II og høy uttrykk for MRP og GST-π var assosiert med tumorinvasjon, tilbakefall og dårlig prognose, og denne konklusjonen hadde blitt bekreftet i eggstokkreft [21]. I lav-risikogruppe, 3-årig og 5-års overlevelse av pasienter med kjemoterapi var høyere enn for pasienter uten kjemoterapi. Dette resultatet viste at 5-Fu og platina-baserte postoperativ kjemoterapi kan øke overlevelse fordeler for pasienter i lav-risikogruppe. Kjemoterapi motstand var sjelden i disse pasientene, og i teorien kan postoperativ kjemoterapi gjøres helt passe, og prognosen til pasienten vil bli betydelig forbedret. I høy-risiko-gruppe, 3-årig og 5 års overlevelse av pasienter med kjemoterapi var høyere enn den til pasienter uten kjemoterapi, men forskjellen var ikke statistisk signifikant. Derfor gjorde 5-Fu og platina-basert adjuvant kjemoterapi ikke bedre prognose av høyrisikogruppen, og for slike pasienter, må postoperativ kjemoterapi være nøye diskutert og valgt. Disse konklusjonene er basert på et lite antall tilfeller, og kan ha noen begrensninger. Et stort utvalg av pasienter blir fulgt opp i vårt senter, og detaljerte resultater, inkludert subgruppeanalyse (kjønn, lymfeknutemetastase, iscenesettelse, etcetera
.), Vil bli rapportert i nær fremtid.
Konklusjoner
Derfor, kombinert fastsettelse av MDR
-relaterte proteiner Topo II, MRP og GST-π kan være prospektivt verdifullt for å optimalisere kjemoterapi regimer og videre forutsi utfallet av pasientene. Videre forskning bør fokusere på den kombinerte deteksjon av molekylære markører (for eksempel HER-2,
MDR -relaterte proteiner, RTK /RAS signalmolekyler, etcetera
.) For individualisert kjemoterapi og gjennomføre multisenter kliniske studier, resultatene . kan være spennende
samtykke
Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra pasienten for utgivelsen av denne rapporten og eventuelle medfølgende Images Forkortelser
CDDP.
CIS-diaminodichloroplatin

DOX:
doxorubicin
GST-π:
glutation S-transferase π
MDR:
multiresistens
MRP:
multiresistens protein
Topo II:
topoisomerase II

5-FU.
5-flurouracil
Erklæringer
Takk
Denne studien ble støttet av Science Foundation i Zhejiang-provinsen Natural of China (No.LY14H160007).
forfatter~~POS=TRUNC opprinnelige legges filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder. 12957_2014_1778_MOESM1_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 1 12957_2014_1778_MOESM2_ESM.pdf Forfatteroriginalfilen for figur 2 12957_2014_1778_MOESM3_ESM.pdf Forfatteroriginalfilen for figur 3 konkurrerende interesser
Ingen fordeler i enhver form er mottatt eller vil bli mottatt fra en kommersiell part direkte eller indirekte relatert til emnet i denne artikkelen. Forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende interesser.
Forfatternes bidrag
Yu PF, Du YA, Cheng XD, Yu QM, Huang L, Dong RZ utformet og gjennomført undersøkelsen, analysert data, og hjalp til med å skrive manuskriptet. Yu PF er rektor etterforsker, og revidert og redigert manuskriptet. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Forskjeller i risikofaktorer mellom mønstre av tilbakefall hos pasienter etter kurativ reseksjon for avansert magekreft
• Genomiske forandringer og molekylære undergrupper av mage kreft i asiater