L'expression des protéines associées à la résistance multirésistantes et leur relation avec la chimiothérapie post-opératoire individualisé dans l'estomac cancer

expression de protéines associées à la résistance multirésistantes et leur relation avec la chimiothérapie individualisée postopératoire dans le cancer gastrique
Résumé de l'arrière-plan
chimiothérapie adjuvante pourrait réduire résiduelle les cellules tumorales et prévenir les rechutes, cependant, tous les patients sont appropriés pour une chimiothérapie adjuvante. Le dépistage des patients appropriés en fonction des marqueurs moléculaires pour la chimiothérapie adjuvante individualisée est nécessaire.
Méthodes
Entre Juin 2002 et Juin 2004, 119 patients ayant subi une gastrectomie radicale ont été analysés rétrospectivement. Certains patients ont eu une chimiothérapie adjuvante à base de platine et le 5-FU pendant quatre à six cycles. Topoisomérase II (ToPo II) négatif, la protéine de résistance multidrogue (MRP) de π S-transférase positif et le glutathion (GST-π) positifs ont été considérés comme trois facteurs de risque qui peuvent être associés à la résistance à la chimiothérapie et de mauvais pronostic. Les patients ont été divisés en deux groupes:. Un groupe à risque élevé (≥ 2 facteurs de risque) et un groupe à faible risque (< 2 facteurs de risque), et la récurrence de la tumeur et le temps de survie des patients des deux groupes ont été analysés: Résultats
le temps de récurrence moyenne du groupe à faible risque était significativement plus longue que celle du groupe à haut risque (21,29 ± 11,10 contre 15,16 ± 8,05 mois, P
< 0,01). Les 3 ans et 5 ans taux du groupe à haut risque de survie étaient de 57,4% et 42,6%, cependant, il avait pas de différence significative par rapport à 66,2% et 58,5% du groupe à faible risque (P
> 0,05). Dans le groupe à haut risque, les taux de survie à 3 ans de patients avec /sans chimiothérapie étaient 62,1% et 52,0% et les taux de survie à 5 ans étaient de 44,8% et 40,0%, respectivement, mais la différence n'a pas été statistiquement significative (P
> 0,05). Dans le groupe à faible risque, les taux de survie à 3 ans de patients avec /sans chimiothérapie étaient 81,2% et 51,5%, et les taux de survie à 5 ans étaient de 71,9% et 45,5%, respectivement, ces différences étaient statistiquement significatives (P
<. Conclusions de 0,05)
Combiné détection de la multirésistance (MDR) protéines ToPo II concernant la PI, MRP et GST-π peut être prospectivement précieux pour la chimiothérapie postopératoire et individualisé pour prédire en outre les résultats de l'estomac patients atteints de cancer.
de Mots-clés
estomac néoplasmes protéines associées à la résistance multirésistantes chimiothérapie pronostic Contexte
Il y a toujours un risque élevé de récidive et de métastases après la chirurgie gastrique radicale, et la chimiothérapie adjuvante peut réduire les cellules tumorales résiduelles post-opératoires et prévenir les rechutes [1, 2]. Au cours des dernières années, de nouveaux résultats d'études randomisées contrôlées indiquent que la chimiothérapie post-opératoire peut améliorer le pronostic des patients [3, 4]. Ces résultats ont été acceptés dans les Lignes directrices de pratique clinique NCCN cancer gastrique et sont recommandés comme base des programmes de traitement post-opératoires. Cependant, certaines questions doivent encore être abordées: (1) l'analyse de sous-groupe indique que certains patients (femmes, ganglionnaire, stade tardif, plus vieux, etc.
) ne bénéficient pas d'un traitement adjuvant et (2) des problèmes surviennent avec la chimiothérapie la toxicité et de la conformité, ce qui provoque certains patients de se retirer du traitement en raison d'événements indésirables.
Ainsi, la chimiothérapie adjuvante post-opératoire est bénéfique pour certains patients, cependant, il peut augmenter la charge de traitement et de réduire l'immunité des autres patients. Par conséquent, il est trop tôt pour déterminer un programme de chimiothérapie adjuvante standard pour le cancer gastrique. Il y a encore de nombreuses questions qui ont besoin d'une recherche de haute qualité pour répondre avant la chimiothérapie adjuvante individualisée devient standard. Ce qui est particulièrement intéressant de mentionner est que l'étude ToGA a confirmé la valeur de Herceptin dans le traitement du cancer gastrique avancé [5]. Récemment, Deng et ses collègues prévus pour la première fois une carte moléculaire détaillée des altérations génomiques dans le cancer gastrique, qui a révélé plusieurs cibles prometteuses pour les thérapies spécifiques du sous-type [6]. Le dépistage des patients appropriés basés sur des marqueurs moléculaires deviendra une direction de recherche majeur pour la chimiothérapie individualisée [7]
. Polychimiothérapie protéines associées à la résistance de la topoisomérase II (ToPo II), la protéine de résistance multidrogue (MRP) et de la glutathion S-transférase π (GST π) sont la base de la multirésistance dans les tumeurs malignes [8, 9]. Il avait été confirmé que MRP et GST-π surexpression, et une diminution de l'expression de ToPo II sont des mécanismes importants médiateurs multirésistance [10]. Par conséquent, nous avons réalisé cette étude de la multirésistance (MDR
) des protéines de gènes associés à un traitement individualisé postopératoire du cancer gastrique.
Méthodes
Patients et échantillons de tissus
Le Entre Juin 2002 et Juin 2004, total de 119 patients ayant subi une gastrectomie radicale au Département de chirurgie abdominale, Hôpital Zhejiang cancer, ont été analysés rétrospectivement. Parmi ces patients, 77 cas étaient des hommes et 42 cas étaient des femmes, âgés de 25 à 78 ans (moyenne 57,3 ± 6,7 ans). Phase I /II inclus 39 cas et de phase III /IV inclus 80 cas; lésions ≥5 cm ont été trouvées dans 76 cas et des lésions < 5 cm ont été trouvées dans 43 cas; et les patients avec /sans métastases des ganglions lymphatiques ont été identifiés pour les 93 cas et 26 cas, respectivement. Aucun des patients n'a reçu une chimiothérapie pré-opératoire ou d'un autre traitement pour la tumeur et certains patients ont eu une chimiothérapie adjuvante à base de platine et le 5-fluorouracile (5-FU) pendant quatre à six cycles. Le consentement éclairé écrit a été obtenu à partir de tous les participants à l'étude. L'étude a été approuvée par le Comité d'éthique de l'hôpital du cancer Zhe Jiang.
Coloration immunohistochimique
Les anticorps utilisés dans cette étude ont été achetés auprès de GBI Company (Golden Bridge International, Inc., Mukilteo, WA, USA). La coloration immunohistochimique a été effectuée sur les, des échantillons de tissus fixés au formol à 4 um d'épaisseur paraffine. Du pancréas, du côlon, de l'ovaire et des échantillons ont été utilisés comme témoins positifs pour Topo II, MRP, et GST-π, respectivement. Les échantillons ont été évalués indépendamment par deux pathologistes de façon aveugle. Seules les cellules dont la coloration est de couleur brune ont été considérés comme positifs. L'intensité de l'expression de MDR
protéines a été stratifiée en la PI quatre catégories qui ont été marqués comme suit: 1) négatif (-) n'a eu aucun cytomembrane appréciable, coloration nucléaire ou cytoplasmique ou avaient la coloration dans < 10% des cellules néoplasiques; 2) 1+ avait une coloration sensible 10 à 25% des cellules néoplasiques; 3) 2+ avait une coloration appréciable de 25 à 75% des cellules néoplasiques; et 4) 3+ avait coloration sensible >. 75% des cellules néoplasiques
Le suivi des patients
Les patients ont reçu un suivi de routine après gastrectomie radicale une fois par trimestre pendant deux ans et ensuite, une fois tous les six mois ( les patients ayant reçu une chimiothérapie ont été suivis avec des cycles de chimiothérapie). ToPo II négatif, MRP positif et GST-π positifs ont été considérés comme trois facteurs de risque qui peuvent être associés à la résistance à la chimiothérapie et de mauvais pronostic. Les patients ont été divisés en deux groupes: le groupe à risque élevé (≥ 2 facteurs de risque) et le groupe à faible risque (< 2 facteurs de risque), et la récurrence de la tumeur et du patient le temps de survie des deux groupes ont été analysés
. l'analyse statistique
Toutes les données de l'expérience ont été intégrées dans un ensemble complet de données. Les données numériques ont été enregistrées directement et des données de mesure ont été décrits comme médiane et la fourchette. L'analyse statistique a été effectuée sur la version du logiciel SPSS 16.0 (SPSS Inc. Chicago, IL), et P
. < 0,05 a été considérée comme statistiquement significative: Résultats
La coloration positive de ToPo II a été reconnu pour être exprimé dans le noyau cellulaire (figure 1A), alors que MRP et GST-π ont été exprimées dans le cytoplasme des cellules malignes (figure 1B et figure 1C). La figure 1 coloration immunohistochimique de protéines associées à une résistance multidrogues. Une coloration immunohistochimique de ToPo II a été identifié dans le noyau de la cellule (grossissement x 400). B La coloration immunohistochimique du MRP a été reconnu pour être exprimé dans le cytoplasme des cellules malignes (grossissement initial x 400). C coloration immunohistochimique de GST-π est reconnu pour être exprimé dans le cytoplasme des cellules malignes (grossissement initial x 400).
Le taux d'expression de ToPo II dans les tissus normaux (75,1%) était supérieure à celle dans les tissus tumoraux (73,9 %) (non significatif, P
> 0,05). Lorsque l'on compare le bien-être, modérément et le degré peu différencié d'expression, une corrélation significative a été démontrée entre ToPo II expression et le niveau de différenciation (86,3%, 64,5% et 64,9%, respectivement, P
< 0,05). En ce qui concerne MRP, le taux positif était de 42,9% dans les tissus tumoraux tandis que tous les tissus gastriques normaux ne sont pas colorées. Aucune différence significative dans l'expression ont été trouvées dans PRM rapport aux éléments clinicopathological. Le taux positif de GST-π chez les patients atteints de cancer gastrique était supérieur à celui des tissus normaux (51,3% versus 23,2%, P
< 0,05). Des différences significatives dans l'expression GST-π ont également été trouvés en fonction du sexe (hommes contre femmes, 59,7% versus 35,7%, P
< 0,05) et la différenciation (bien, moyennement et faiblement, 40,5%, 41,9% et 64,7 %, respectivement, P
< 0,05) (tableau 1) .Table 1 L'expression de ToPo II, MRP, et GST-π et leur relation avec les facteurs clinicopathologiques
Caractéristiques anatomocliniques
Cases
ToPo II
MRP
GST-π
+ (%)
χ2

P
+ (%)
χ2
P
+ (%)
χ2
P
77
54 (70,1%) de Sexe Homme
29 (37,7%)
46 (59,7%)
Female
42
34(81.0%)
1.65
0.198
22(52.4%)
2.40
0.121
15(35.7%)
6.27
0.012*
Age
≤50 y
33
24 (72,7%)
16 (48,5%)
14 (42,4%)
> 50 y
86
64(74.4%)
0.03
0.851
35(40.7%)
0.59
0.442
47(54.7%)
1.42
0.232
Tumor Taille
≥5 cm
76
59 (77,6%)
35 (46,1%)
40 (52,6%)
< 5 cm
43
29(67.4%)
1.48
0.224
16(37.2%)
0.88
0.349
21(48.8%)
0.16
0.691
Differentiation
Eh bien
51
44 (86,3%)
20 (39,2%)
33 (40,5%)
Modérément
31
20 (64,5%)
13 ( 41,9%)
13 (41,9%)
Poorly
37
24(64.9%)
7.04
0.029*
18(48.6%)
0.79
0.672
15(64.7%)
6.47
0.039*
TNM mise en scène
I /II
39
25 (64,1%)
17 (43,6%)
16 (41,0%)
III/IV
80
63(78.8%)
2.92
0.087
34(42.5%)
2.57
0.109
45(56.3%)
2.43
0.119
Lymph noeud
positif
93
71 (76,3%)
40 (43,0%)
47 (50,5%)
Negative
26
17(65.4%)
1.27
0.260
11(42.3%)
0.004
0.949
14(53.8%)
0.09
0.765
* P
< 0.05.
Les taux de survie à 3 et 5 ans des 119 patients étaient de 57,3% et 49,2%, respectivement. Aucune différence statistique n'a été observée entre la protéine unique (ToPo II, MRP ou GST-π) l'expression et la récurrence ou le temps de survie. Lorsque les patients ont été divisés en deux groupes: le groupe à risque élevé (≥ 2 facteurs de risque) et le groupe à faible risque (< 2 facteurs de risque), le temps de récurrence moyenne du groupe à faible risque était 21.29 ± 11.10 mois et a été significativement plus longue que 15.16 ± 8.05 mois du groupe à haut risque (P
< 0,01). Le taux de survie à 3 ans et 5 ans du groupe à haut risque était de 57,4% et 42,6%; cependant, il n'y avait pas de différence significative par rapport au 66,2% et 58,5% du groupe à faible risque (P
> 0,05).
Dans le groupe à haut risque, les taux de survie à 3 ans des patients atteints de la chimiothérapie et les patients sans chimiothérapie étaient 62,1% et 52,0%, et les taux de survie à 5 ans étaient de 44,8% et 40,0%, mais la différence n'a pas été statistiquement significative (P
> 0,05) (Figure 2). Dans le groupe à faible risque, les taux de survie à 3 ans des patients atteints de la chimiothérapie et les patients sans chimiothérapie étaient 81,2% et 51,5%, les taux de survie à 5 ans étaient de 71,9% et 45,5%, et la différence était statistiquement significative (P
< 0,05) (Figure 3). Figure 2 La survie globale des patients avec ou sans chimiothérapie dans le groupe à haut risque.
Figure 3 la survie globale des patients avec ou sans chimiothérapie dans le groupe à faible risque.
Rapport de chimiothérapie adjuvante après l'opération a été considérée comme nécessaire pour éliminer les micrométastases systémiques et les cellules malignes résiduelles dans toute la mesure du possible, en fin de compte améliorer la survie [11, 12]. Malheureusement, jusqu'à présent, ce genre de stratégie de traitement adjuvant a été décevante en raison de la multirésistance (MDR) de cellules malignes à différents agents chimiothérapeutiques [13, 14]. Par conséquent, la détection et l'évaluation des gènes ou des protéines de MDR peuvent aider à guider la chimiothérapie adjuvante dans le cancer gastrique et de déterminer le pronostic des patients.
MRP, l'un des mécanismes les plus étudiés de MDR, agit comme un transport vers l'extérieur dépendant de l'ATP la pompe et diminue l'accumulation intracellulaire des médicaments en diminuant le mécanisme de co-transport du glutathion [15]. Plusieurs études antérieures ont également indiqué que la surexpression de MRP prédit le plus souvent MDR. MRP confère une résistance aux agents alkylants, cyclophosphamide et d'autres médicaments [16]. GST-π est une enzyme multifonctionnelle, qui joue un rôle essentiel dans la détoxification cellulaire en catalysant la conjugaison du glutathion réduit à des composés électrophiles hydrophobes et [17]. GST-π est considéré comme étant associé à l'efflux de cis-diaminodichloroplatin (CDDP), fluorouracile et la doxorubicine (DOX) par l'intermédiaire de liaison ATP des transporteurs de cassette [18]. ToPo II est la cible de plusieurs agents anti-cancéreux, tels que la doxorubicine, VM26, VP16 et la mitoxantrone [19]. La diminution de l'expression ToPo II et les changements dans le résultat de l'activité enzymatique de la dissociation des complexes clivables et dommages à l'ADN réduite, et enfin provoquer la résistance aux médicaments [20].
Dans notre étude, l'analyse statistique indique qu'aucun des trois protéines étaient une corrélation significative entre les taux de récurrence et la survie, de sorte que la détermination d'un indicateur de l'efficacité d'une chimiothérapie adjuvante est difficile. Parce que négatif, ToPo II MRP positif et GST-π positifs ont été considérés comme des facteurs de trois risques qui peuvent être associés à la résistance à la chimiothérapie et de mauvais pronostic, ces patients ont été divisés en deux groupes: le groupe à risque élevé (≥ 2 facteurs de risque) et la groupe à faible risque (< 2 facteurs de risque). Le temps de récurrence du groupe à faible risque était significativement plus longue que celle du groupe à haut risque, ce qui suggère que la diminution de l'expression ToPo II et une expression élevée de MRP et GST-π a été associée à l'invasion tumorale, la récurrence et de mauvais pronostic, et cette conclusion a été confirmée dans le cancer de l'ovaire [21]. Dans le groupe à faible risque, le taux de survie à 3 ans et 5 ans des patients avec une chimiothérapie était plus élevé que celui des patients sans chimiothérapie. Ce résultat indique que le 5-Fu et une chimiothérapie postopératoire à base de platine peuvent augmenter les prestations de survie pour les patients dans le groupe à faible risque. la résistance à la chimiothérapie était rare chez ces patients, et en théorie, une chimiothérapie postopératoire peut être fait en pleine forme, et le pronostic du patient sera nettement améliorée. Dans le groupe à risque élevé, le taux de survie à 3 ans et 5 ans des patients avec une chimiothérapie était plus élevé que celui des patients sans chimiothérapie, mais la différence était statistiquement non significatif. Par conséquent, le 5-Fu et la chimiothérapie adjuvante à base de platine n'a pas amélioré le pronostic du groupe à haut risque, et pour les patients, la chimiothérapie post-opératoire doit être soigneusement examiné et sélectionné. Ces conclusions sont fondées sur un petit nombre de cas, et peuvent avoir des limites. Un grand échantillon de patients est suivi dans notre centre, et les résultats détaillés, y compris l'analyse de sous-groupe (sexe, métastase ganglionnaire, mise en scène, etc.
.), Sera rapporté dans un proche avenir
. Conclusions
par conséquent, la détermination combinée de MDR
protéines ToPo II concernant la PI, MRP et GST-π peut être prospective précieux pour l'optimisation des régimes de chimiothérapie et de prédire en outre les résultats des patients. D'autres recherches devraient se concentrer sur la détection combinée des marqueurs moléculaires (tels que HER-2, MDR
protéines, la PI RTK /RAS molécules de signalisation, etc.
.) Pour la chimiothérapie individualisée et mener à bien des essais cliniques multicentriques, les résultats . peut être passionnant
consentement
consentement éclairé écrit a été obtenu à partir du patient pour la publication de ce rapport et les images ci-jointes
abréviations
CDDP:.
CIS-diaminodichloroplatin

DOX:
doxorubicine
GST-π:
glutathion S-transférase π
MDR:
multirésistance
MRP:
protéine de multirésistance
ToPo II:
topoisomérase II

5-FU:.
5-fluorouracile
Déclarations Remerciements
Cette étude a été soutenue par la Fondation des sciences naturelles de la province du Zhejiang de Chine (No.LY14H160007). »soumis d'origine des fichiers pour les images
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Aucun avantage, sous quelque forme ont été reçus ou seront reçus d'un commercial partie liée directement ou indirectement à l'objet de cet article. Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts. Les contributions de
Auteurs
Yu PF, Du YA, Cheng XD, Yu QM, Huang L, Dong RZ conçus et a mené l'étude, a analysé les données, et ont aidé à écrire le manuscrit. Yu PF est le chercheur principal, et révisé et édité le manuscrit. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.

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