Выражение множественной лекарственной устойчивости белков, ассоциированных и их отношение к послеоперационной индивидуализированной химиотерапии при раке желудка

Выражение множественной лекарственной устойчивости белков, ассоциированных и их отношение к послеоперационной индивидуализированной химиотерапии при раке желудка
Аннотация
Справочная информация
адъювантной химиотерапии может снизить остаточные опухолевые клетки и предотвратить рецидив, однако, не все пациенты подходят для адъювантной химиотерапии. Скрининг соответствующих пациентов на основе молекулярных маркеров для индивидуализированной адъювантной химиотерапии необходимо.
Методы
В период с июня 2002 года по июнь 2004 года, 119 пациентов, которые подверглись радикальной резекции желудка ретроспективный анализ. Некоторые пациенты имели адъювантной химиотерапии на основе платины и 5-ФУ в течение четырех-шести циклов. Топоизомеразы II (топо II) отрицательный, белок множественной лекарственной устойчивости (MRP) положительна и глутатион S-трансферазы π (GST-π) положительно рассматривались как три фактора риска, которые могут быть связаны с сопротивлением химиотерапии и плохим прогнозом. Пациенты были разделены на две группы:. Высокой группы риска (≥2 факторов риска) и группы с низким уровнем риска (&лт; 2 факторы риска), а также были проанализированы рецидива опухоли и пациента время выживания двух групп
Результаты
среднее время повторения группы низкого риска значительно больше, чем у группы высокого риска (0,01; 21,29 ± 11,10 против 15,16 ± 8,05 месяцев, P &
л) был. 3-летний и 5-летняя выживаемость группы высокого риска были 57,4% и 42,6%, однако, у него не было никаких существенных различий по сравнению с 66,2% и 58,5% в группе низкого риска (P
≫ 0,05). В группе высокого риска, показатели выживаемости 3-х лет у пациентов с /без химиотерапии были 62,1% и 52,0%, а выживаемость в течение 5 лет были 44,8% и 40,0%, соответственно, но различие не было статистически значимым (P
> 0,05). В группе с низким уровнем риска, показатели выживаемости 3-х лет у пациентов с /без химиотерапии были 81,2% и 51,5%, а уровень выживаемости в течение 5 лет были 71,9% и 45,5%, соответственно, эти различия были статистически значимыми (P <бр> &ЛТ;. 0.05)
Выводы
Комбинированный обнаружение множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) белки Topo о связанных II, MRP и GST-π может быть перспективно ценным для послеоперационной индивидуализированной химиотерапии и в дальнейшем прогнозировании результатов желудка больных раком.
Ключевые слова
желудок новообразованиями множественная лекарственная устойчивость белков, ассоциированных с химиотерапией прогноз Фоновые
Существует еще высокий риск рецидива и метастазов после радикальной операции желудка, и адъювантной химиотерапии может снизить послеоперационные остаточные опухолевые клетки и предотвратить рецидив [1, 2]. В последние годы новые результаты рандомизированных контролируемых исследований указывают на то, что послеоперационная химиотерапия может улучшить прогноз больных [3, 4]. Эти результаты были приняты в руководств по клинической практике NCCN рака желудка и рекомендуются в качестве основы послеоперационного программ лечения. Тем не менее, некоторые вопросы, которые еще необходимо решить: (1) анализ подгрупп указывает на то, что у некоторых пациентов (женщина, узел-отрицательный, поздняя стадия, старше, и так далее
) не выигрывают от адъювантной терапии и (2) возникают проблемы с химиотерапией токсичность и податливость, что вызывает у некоторых пациентов отказаться от лечения из-за побочных эффектов.
Так, послеоперационной адъювантной химиотерапии является полезным для некоторых пациентов, однако, это может увеличить нагрузку обработки и уменьшить иммунитет других пациентов. Поэтому слишком рано, чтобы определить программу в качестве стандартной адъювантной химиотерапии по поводу рака желудка. Есть еще много вопросов, которые нуждаются в высококачественных исследований, чтобы ответить перед индивидуализированной адъювантной химиотерапии становится стандартом. Что особенно стоит отметить, что исследование ToGA подтвердило значение Герцептин в лечении распространенного рака [5] желудка. В последнее время Дэн и его коллеги, предусмотренные впервые подробно молекулярная карта геномных изменений при раке желудка, которые выявили несколько перспективных целей для подтипа конкретных методов лечения [6]. Скрининг соответствующих пациентов на основе молекулярных маркеров станет основным направлением исследования для индивидуализированной химиотерапии [7].
Множественная лекарственная устойчивость белков, связанных с топоизомеразы II (топо II), белка множественной лекарственной устойчивости (MRP) и глутатион S-трансферазы π (GST- π) являются основой множественной лекарственной устойчивости при злокачественных опухолях [8, 9]. Это было подтверждено, что MRP и GST-П гиперэкспрессия и снижение экспрессии Topo II являются важными механизмами, опосредующие устойчивость ко многим лекарственным средствам [10]. Поэтому мы провели это исследование с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ)
геноассоциированным белков в послеоперационной индивидуализированного лечения рака желудка.
Методы
Пациенты и образцы тканей
В период с июня 2002 года по июнь 2004 года в общей сложности 119 пациентов, которые подверглись радикальной резекции желудка в отделении абдоминальной хирургии, онкологической больницы Чжэцзян, ретроспективный анализ. Из этих пациентов 77 случаев были мужчины и 42 случая были женщины, в возрасте от 25 до 78 лет (средний возраст 57,3 ± 6,7 лет). Фаза I /II включены 39 случаев и фазы III /IV включены 80 случаев; поражения ≥5 см были обнаружены в 76 случаях и поражениях &ЛТ; 5 см были обнаружены в 43 случаях; и пациенты с /без метастазов лимфатических узлов были определены 93 случаев заболевания и 26 случаев соответственно. Ни один из пациентов не получал предоперационной химиотерапии или иное лечение для опухоли, а у некоторых пациентов имели адъювантной химиотерапии на основе платины и 5-flurouracil (5-ФУ) в течение четырех-шести циклов. Письменное информированное согласие было получено от всех участников исследования. Исследование было одобрено Комитетом по этике Чжэ Цзян онкологической больницы по.
Иммуногистохимического окрашивания
Антитела, используемые в данном исследовании, были приобретены у компании GBI (Golden Bridge International, Inc., Mukilteo, штат Вашингтон, США). Иммуногистохимическое окрашивание проводили на фиксированных формалином, 4-мкм толщиной, залитых парафином образцов ткани. Поджелудочная железа, толстой кишки и яичников образцы использовали в качестве положительного контроля для Topo II, MRP и GST-я, соответственно. Образцы оценивали независимо друг от двух патологов в слепой моды. Только клетки с коричневого цвета окраски рассматривались как положительные. Интенсивность экспрессии MDR
белков о связанных расслаивается на четыре категории, которые были забиты следующим образом: 1) отрицательные (-) не имели заметного cytomembrane, ядерной или цитоплазматической окрашивания или окрашивания было в &л, 10% опухолевых клеток; 2) 1+ имели заметное окрашивание в 10 до 25% опухолевых клеток; 3) 2+ имела заметное окрашивание в 25 до 75% опухолевых клеток; и 4) 3+ имели заметное окрашивание в &Гт. 75% опухолевых клеток
пациента последующей
Пациенты получали регулярные осмотры после радикальной гастрэктомии один раз в квартал в течение двух лет и в дальнейшем один раз в полгода ( у пациентов, получавших химиотерапию прослежены с циклами химиотерапии). Topo II отрицательным, MRP положительным и GST-π положительно рассматривались как три фактора риска, которые могут быть связаны с сопротивлением химиотерапии и плохим прогнозом. Пациенты были разделены на две группы: группу высокого риска (≥2 факторов риска) и группы низкого риска (&лт; 2 факторы риска), а также были проанализированы рецидив опухоли и время выживаемость пациентов обеих групп
. Статистический анализ
всех данных эксперимента были включены в комплексный набор данных. Числовые данные были записаны непосредственно и данные измерений были описаны как медиана и дальности полета. Статистический анализ был проведен на SPSS версии программного обеспечения 16.0 (SPSS Inc. Чикаго, Иллинойс) и P &
ЛТ;. 0,05 рассматривалось как статистически значимые результаты

Положительное окрашивание Topo II была признана быть выражена в клеточном ядре (рис 1А), в то время как MRP и GST-П были выражены в цитоплазме злокачественных клеток (Фигура 1В и фиг.1С). Рисунок 1 Иммуногистохимическое окрашивание с множественной лекарственной устойчивости белков, ассоциированных с. Иммуногистохимическое окрашивание Topo II был идентифицирован в клеточном ядре (исходное увеличение × 400). В иммуногистохимическое окрашивание MRP было признано, экспрессируется в цитоплазме опухолевых клеток (исходное увеличение × 400). С иммуногистохимическое окрашивание GST-П было признано, экспрессируется в цитоплазме опухолевых клеток (исходное увеличение × 400).
Скорость экспрессии топо II в нормальных тканях (75,1%) был выше, чем в опухолевых тканях (73,9 %) (не имеет значения, Р
> 0,05). При сравнении хорошо, умеренно и слабо дифференцированный степень выраженности, значительная корреляция между экспрессией показано топо II и уровень дифференциации (86,3%, 64,5% и 64,9%, соответственно, P
&ЛТ; 0,05). Что касается MRP, положительный показатель был в опухолевых тканях 42,9%, тогда как все нормальные ткани желудка не были окрашены. Никаких существенных различий в экспрессии MRP не были найдены в связи с клинико-патологическими факторами. Положительная скорость GST-П у пациентов с раком желудка была выше, чем у нормальных тканей (51,3% против 23,2%, P &
ЛТ; 0,05). Значительные различия в GST-П экспрессии также были найдены по отношению к полу (мужчины по сравнению с женской, 59,7% против 35,7%, P &
ЛТ; 0,05) и дифференцировки (ну, умеренно и плохо, 40,5%, 41,9% и 64,7 % соответственно, P &
л; 0,05) (таблица 1) .table 1 выражение Topo II, MRP и GST-я и их взаимосвязи с клинико-патологическими факторами
клиникопатологическими Features

случаи

Topo II

MRP

GST-π:

+ (%)

χ2

P

+ (%)

χ2

P

+ (%)

χ2

P

Секс
Муж
77
54 (70,1%)
29 (37,7%)
46 (59,7%)
Female
42
34(81.0%)
1.65
0.198
22(52.4%)
2.40
0.121
15(35.7%)
6.27
0.012*
Age
≤50 у
33
24 (72,7%)
16 (48,5%)
14 (42,4%)
> 50 y
86
64(74.4%)
0.03
0.851
35(40.7%)
0.59
0.442
47(54.7%)
1.42
0.232
Tumor размер
≥5 см
76
59 (77,6%)
35 (46,1%)
40 (52,6%)
&л; 5 cm
43
29(67.4%)
1.48
0.224
16(37.2%)
0.88
0.349
21(48.8%)
0.16
0.691
Differentiation
Ну
51
44 (86,3%)
20 (39,2%)
33 (40,5%)
Умеренно
31
20 (64,5%)
13 ( 41,9%)
13 (41,9%)
Poorly
37
24(64.9%)
7.04
0.029*
18(48.6%)
0.79
0.672
15(64.7%)
6.47
0.039*
TNM постановка
I /II
39
25 (64,1%)
17 (43,6%)
16 (41,0%)
III/IV
80
63(78.8%)
2.92
0.087
34(42.5%)
2.57
0.109
45(56.3%)
2.43
0.119
Lymph узел
Положительный
93
71 (76,3%)
40 (43,0%)
47 (50,5%)
Negative
26
17(65.4%)
1.27
0.260
11(42.3%)
0.004
0.949
14(53.8%)
0.09
0.765
* P &
л; 0.05.
3- и 5-летняя выживаемость 119 пациентов были 57,3% и 49,2%, соответственно. Нет статистически значимых различий не наблюдалось между одного белка (Topo II, MRP или GST-я) выражение и повторяемости или выживания время. Когда пациенты были разделены на две группы: группу высокого риска (≥2 факторов риска) и группы низкого риска (&лт; 2 факторы риска), среднее время повторения группы низкого риска была 21.29 ± 11,10 месяцев и был значительно больше, чем 15,16 ± 8,05 месяцев в группе высокого риска (P &
л; 0,01). 3-летний и 5-летняя выживаемость в группе высокого риска была 57,4% и 42,6%; Тем не менее, не было никаких существенных различий по сравнению с 66,2% и 58,5% в группе низкого риска (P &
Gt; 0,05).
В группе высокого риска, уровень выживания 3 года больных с химиотерапия и пациенты без химиотерапии были 62,1% и 52,0%, а показатели выживаемости 5-летних были 44,8% и 40,0%, но разница не была статистически значимой (P &
GT; 0,05) (рисунок 2). В группе с низким уровнем риска, показатели выживаемости 3 года больных с химиотерапией и пациентов без химиотерапии были 81,2% и 51,5%, выживаемость в течение 5 лет были 71,9% и 45,5%, а разница была статистически значимой (P
&л; 0,05) (рисунок 3). Рисунок 2 Общая выживаемость пациентов с или без химиотерапии в группе высокого риска.
Рисунок 3 Общая выживаемость пациентов с или без химиотерапии в группе низкого риска.
Обсуждение
адъювантной химиотерапии после операции был рассмотрен по мере необходимости для устранения системных микрометастазов и остаточных злокачественных клеток в максимально возможной степени, в конечном счете, улучшение выживаемости [11, 12]. К сожалению, до сих пор, этот вид стратегии лечения адъювантной вызывает разочарование в результате множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) опухолевых клеток к различным химиотерапевтических агентов [13, 14]. Таким образом, выявление и оценка МЛУ
генов или белков может помочь вести адъювантной химиотерапии при раке желудка и определить прогноз больных.
MRP, один из наиболее изученных механизмов МЛУ, действует как АТФ-зависимый внешнего транспорта насос и снижает внутриклеточное накопление препаратов за счет снижения совместного транспортного механизма глутатиона [15]. Несколько предыдущих исследований также показали, что избыточная экспрессия MRP наиболее часто предсказывает МЛУ. MRP придает устойчивость к алкилирующие агенты, циклофосфамид и другие препараты [16]. GST-π представляет собой многофункциональный фермент, который играет важную роль в клеточной детоксикации путем катализировать конъюгацию восстановленного глутатиона к гидрофобных и электрофильных соединений [17]. GST-π считается ассоциироваться с оттоком цис-diaminodichloroplatin (CDDP), flurouracil и доксорубицина (DOX) с помощью АТФ-связывающего кассетного транспортеров [18]. Топо II является объектом нескольких противоопухолевых агентов, таких как доксорубицин, VM26, VP16 и митоксантрон [19]. Снижение экспрессии Topo II и изменения в результате ферментативной активности при диссоциации расщепляемых комплексов и снижение повреждения ДНК, и в конце концов привести к лекарственной устойчивости [20].
В нашем исследовании, статистический анализ указывает на то, что ни один из трех белков не было достоверно коррелирует с рекуррентным и выживаемости, поэтому определение одного показателя эффективности адъювантной химиотерапии трудно. Потому что негатив, MRP положительным и GST-π положительно рассматривались как факторы риска, три, которые могут быть связаны с сопротивлением химиотерапии и плохим прогнозом, эти пациенты были разделены на две группы Topo II: группа высокого риска (≥2 факторов риска) и группа низкого риска (&л; 2 факторов риска). Время повторения группы низкого риска была значительно больше, чем у группы высокого риска, предполагая, что снижение экспрессии Topo II и высокой экспрессии MRP и GST-П было связано с опухолевой инвазии, возвратности и плохим прогнозом, и этот вывод был подтвержден при раке яичников [21]. В группе с низким уровнем риска, 3-летний и 5-летняя выживаемость больных с химиотерапией была выше, чем у пациентов без химиотерапии. Этот результат показал, что 5-Фу и на основе платины послеоперационной химиотерапии может увеличить преимущества выживаемости пациентов в группе с низким уровнем риска. Сопротивление Химиотерапия редко у этих больных, так и в теории, послеоперационная химиотерапия может быть сделано полностью здоров, и прогноз пациента будет значительно улучшена. В группе высокого риска, 3-летний и 5-летняя выживаемость больных с химиотерапией была выше, чем у пациентов без химиотерапии, но разница не была статистически значимой. Таким образом, 5-Fu и на основе платины адъювантной химиотерапии не улучшает прогноз группы высокого риска, а также для таких пациентов, послеоперационная химиотерапия должна быть тщательно обсужден и выбран. Эти выводы были основаны на небольшом числе случаев и может иметь некоторые ограничения. Большая выборка пациентов отрабатывался в нашем центре, а также подробные результаты, включая анализ подгруппы (пол, метастазов в лимфатических узлах, постановка, Etcetera
.), Будет сообщено в ближайшее время.
Выводы
Таким образом, в сочетании определение MDR
белков Topo о связанных II, MRP и GST-π может быть перспективно ценным для оптимизации режимов химиотерапии и дальнейшего прогнозирования результатов пациентов. Дальнейшие исследования должны быть направлены на комбинированном обнаружения молекулярных маркеров (например, HER-2, MDR
белков, о связанных РТК /RAS сигнальные молекулы, и так далее
.) Для индивидуализированной химиотерапии и проводить многоцентровое клинические испытания, результаты . может быть захватывающим
согласия
Письменное информированное согласие было получено от пациента к публикации этого доклада и любых сопроводительных изображений
Сокращения
CDDP:.
CIS-diaminodichloroplatin <бр>

DOX:
доксорубицин

GST-π:
глутатион S-трансферазы π

MDR:
множественная лекарственная устойчивость

MRP:
белка множественной лекарственной устойчивости

Topo II:
топоизомеразы II

5-ФУ:.
5-flurouracil

декларациях
Благодарности
Данное исследование было поддержано фондом естественных наук провинции Чжэцзян Китая (No.LY14H160007).
Авторы "оригинал представлены файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинала, представленных файлов для изображений. 'Исходный файл для фигурного 1 12957_2014_1778_MOESM2_ESM.pdf Авторского 12957_2014_1778_MOESM1_ESM.tiff авторов исходного файла для фигурного 2 исходного файла 12957_2014_1778_MOESM3_ESM.pdf Авторского для фигурного 3 Конкурирующие интересы не
никаких преимуществ в любой форме, были получены или будут получены от коммерческих связанной стороной прямо или косвенно к теме данной статьи. Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов. Вклад
авторов
Ю. PF, Ду Ю.А., Cheng XD, Ю. QM, Хуан L, Dong RZ разработали и провели исследование, проанализировав данные, и помогли написать рукопись. Ю. ПФ является главным исследователем, а также пересмотрела и редактировала рукопись. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Исследования

Исследования

Other Languages