Lactobacillus acidophilus zlepšuje H. pylori indukovanej žalúdočnej zápal inaktiváciou Smad7 a NFkB dráhy

Lactobacillus acidophilus
zlepšuje H. pylori
indukovanej žalúdočnej zápal inaktiváciou Smad7 a NFkB dráhy
abstraktné
pozadia
H. pylori
infekcie môžu vyvolať Smad7 a NFkB výraz v žalúdku , vzhľadom k tomu, probiotík podporu zdravia gastrointestinálneho traktu a zlepšenie črevnej zápal spôsobený patogény. Táto štúdia skúma, či probiotiká môžu zlepšiť H. pylori
indukovanej žalúdočnej zápal inaktiváciou Smad7 a NFkB dráhy.
Výsledky
Challenge s H. pylori
zvyšuje IL-8 a TNF-α výrazy, ale nie je TGF-β1 v MKN45 bunkách. Úrovne RNA Smad7 v AGS bunkách vzrástli po infekcii H. pylori
v spôsobom závislým od dávky. Vyššie dávky (MOI 100) L. acidophilus
predpríprave zmiernila H. pylori
indukovanej IL-8 výrazy, ale nie TGF-β1. Ako protizápalový účinok bol sprostredkovaný cez zvýšenú cytoplazmatickú IκBα a vyčerpania jadrového NFkB. L. acidophilus
tiež inhibuje H. pylori
indukované Smad7 transkripciu inaktiváciou JAK1 a STAT1 cesty, ktoré by mohli aktivujú TGF-D1 /Smäd dráhu. L. acidophilus
predčistenia zlepšil IFN-γ-indukovanej hladiny Smad7 preklad a následne zníženej jadrovej výroby NF-kB, ako sú detekované westernovým prenosom.
Závery
H. pylori
infekcie vyvoláva Smad7, NFkB, IL-8 a TNF-α produkcie in vitro
. Vyššie dávky L. acidophilus
predúpravy zníženie H. pylori
indukovaný zápal prostredníctvom inaktiváciu dráh Smad7 a NFkB.
Pozadie
Helicobacter pylori infekcie
je považovaný za hlavný faktor indukciu chronickej gastritídy, peptický vred, a rakovina žalúdka, aj u ľudí [1-3]. Na myšiach a ľudských štúdiách, žalúdočnej sliznice H. pylori
-infected subjekty ukazujú, up-regulované NF-kB a dráha Th1 odozvy typu cytokínov [4-9], ktoré môžu narušiť integritu bariéry čreva epitelu [10 ]. V súlade s tým, inaktivácia dráhy NF-kB a jeho následné imunitný kaskády môžu byť užitočné pri prevencii závažných H. pylori
indukovanej komplikácie.
Probiotiká je známe, že inhibujú črevných patogénov rád Salmonella, Shigella
, a Citrobacter rodentium
v oboch in vitro stroje a zvieracích modeloch [11-13]. Ich potenciálny klinické výhody v prevencii či riešenie žalúdočných a črevných ochorení boli zdôraznené [14, 15]. Existuje niekoľko mechanizmov, prostredníctvom ktorých poskytujú ochranu čriev, vrátane zníženia pH luminální tým, že produkuje kyselinu mliečnu [16, 17], alebo tým, že súťaží s črevnými patogénmi pre hostiteľa povrchových receptorov [18].
Avšak, Coconnier et al. ukázali, že probiotiká môžu inhibovať H. pylori
rast nezávislý na pH a hladiny kyseliny mliečnej [19], zatiaľ čo Tien et al. hlásiť, že Lactobacillus casei
môže down-regulovať Shigella flexneri
indukované pre-zápalové cytokíny, chemokiny a dodržiavanie molekuly inhibíciou NF-kB dráhy [12]. Ďalším dôležitým mechanizmom zahŕňať probiotiká sa týka zmeny v hostiteľských imunitných reakcií na infekciu prostredníctvom zníženého TNF-a a IL-8, ale zvyšuje IL-10 [20, 21]. Pokiaľ ide o krátky kontakt medzi flóry probiotík a žalúdočného epitelu, čo je príjem probiotík H. pylori u pacientov -infected
má protizápalové výhody vyplývajúce zo zmeny v hostiteľských imunitných reakcií.
Transformujúci rastový faktor (TGF ) -β1 negatívne reguluje Th1 bunky tak, že TGF-D1 /u myší s deficitom spontánne vytvoriť gastritídu [22, 23]. Je dobre prijímané, že TGF-β1 signálne dráhy je pozitívne regulovaný Smäd spojené s receptorom, 2/3, ale negatívne Smad7 [24, 25]. H. pylori
infekcie je údajne spojená so zvýšenou expresiou Smad7 žalúdka, ale sporných výsledkov v TGF-β1 úrovniach [26, 27]. Tie ukazujú, že TGF-β1 /Smäd signálnej dráhy hrá dôležitú úlohu v črevnej zápaly. Presný mechanizmus probiotík redukčných H. pylori
indukovanej žalúdočnej zápal zostáva nejasný. Tak, táto štúdia bolo skúmať, či probiotiká mohla regulovať Smad- a NFkB sprostredkovaný signálnych dráh k zníženiu produkcie zápalových cytokínov down-stream po H. pylori
infekcie.
Metódy
Bunkové línie a kultivačné podmienky
Táto štúdia bola schválená etickou komisiou National Cheng Kung University Hospital (ER-98-208). Dve rakovina žalúdka epiteliálne bunkové línie (MKN45 a AGS) boli získané od Health Science Research Resources Bank v Japonsku a udržiavané v RPMI 1.640 médium (GIBCO BRL, Grand Island, NY) a F-12 médiu (GIBCO BRL, Grand Island, NY), obsahujúcim 10% FBS pri 37 ° C vo zvlhčenej atmosfére (95%) s 5% CO 2. Bunky boli sub-kultivovali každý druhý deň. Pred bakteriálne infekcie štúdie, boli bunky inkubované v antibiotiká bez RPMI 1640 média obsahujúceho 10% FBS cez noc pri 37 ° C v atmosfére 5% CO 2.
Baktérie a stav kultúry
bakteriálne kmeň (HP238 ) izolovaných z klinického pacienta bol použitý. HP238 vyjadril ČAGA, Vaca, a Baba proteínov v predchádzajúcich štúdiách [28, 29]. Baktérie boli udržiavané na Brucella agarom obsahujúcim 10% konského séra a inkubované v mikro-aerofilní podmienok (10% CO 2, 5% O 2 a 85% N 2), 24-48 hodín. Baktérie potom boli prenesené do PBS pred infikovanie buniek. Hustota rastu bola meraná spektrofotometricky pri vlnovej dĺžke 600 nm. Infekčná dávka baktérií bola 1 x 10 8 baktérií /ml pri optickej hustote 1.
MKN45 bunky boli infikované multiplicitě infekcie (MOI) 1 až 100 pre rôzne časové obdobia. Probiotický kmeň, jeden obsiahnutý v AB-jogurtu, Lactobacillus acidophilus
(LA5 ®, pochádzal z Chr. Hansen, Dánsko, poskytnutých prezident Corp., Tainan, Taiwan) bol použitý. Baktérie boli udržiavané na agare Brucella inkubovali v anaeróbnych podmienkach, a potom sa zožne a suspendujú vo fyziologickom roztoku pufrovanom fosfátmi (PBS) pred infekciou. Hustotu viabilních L. acidophilus
bolo 1 x 10 8 baktérií /ml pri optickej hustote 1.
MKN45 životaschopnosti buniek po vystavení H. pylori stroje a L. acidophilus

cytotoxicita vystavenie MKN45 buniek na H. pylori stroje a L. acidophilus
sa stanoví percento laktátdehydrogenázy (LDH) netesnosti (test cytotoxicity, Promega Co., Madison, WI, USA) a na základe posúdenia životaschopná bunka sa počíta s použitím non-zafarbený trypánovej modrej. Supernatant kultúry a zostávajúce MKN45 bunky boli odobraté po inkubácii s variabilnými dávkami (MOI 1 až 1000), L. acidophilus stroje a H. pylori
(MOI 100) po dobu 8 hodín a 4, v uvedenom poradí. Bunkové kultúry bez bakteriálne infekcie slúžil ako kontrola. Tieto postupy boli vykonané podľa návodu na použitie a po infekcii buniek s non-zafarbený trypánovej modrej sa priamo spočítané.
Enzyme-linked immuno-sorbent (ELISA) pre cytokíny
Pre stanovenie optimálnej dávky a inkubácie doba rôznych baktérií, baktérií (H. pylori stroje a L. acidophilus
) boli kultivované s MKN45 buniek (MOI 1-100) na antibiotiká bez RPMI 1.640 média (5 ml), obsahujúcim 10% FBS pri 35 ° C ° C v mikro-aerofilní podmienok po dobu až 8 hodín. V experimentálnej štúdii, L. acidophilus
boli pridané k bunkám a inkubované MKN45 po dobu 8 hodín za rovnakých podmienok. Po premytí PBS a odstránenie bacilov, rovnaký objem H. pylori bol pridaný stroje a bunky boli inkubované po ďalšie 4 hodiny. Finálny kultivačný supernatant sa odstreďuje pri 12000 otáčkach za minútu po dobu 5 minút, aby sa odstránili baktérie a bunkovej drviny. Koncentrácia TNF-a, IL-8 (R &D System, Minneapolis, MN) a TGF-D1 (eBioscience, San Diego, CA) boli merané metódou ELISA podľa inštrukcií výrobcu. Absorbancia každej stopové dosky bol čítaný na Spectro-fotometer s použitím 450 nm ako primárny vlnovej dĺžke 570 nm a ako referenčná vlnová dĺžka. Všetky testy boli vykonané trikrát.
Príprava cytoplazmatický a nukleárnej extrakty
bunky MKN45 a AGS boli vopred ošetrené L. acidophilus
po dobu 8 hodín a rôznymi dávkami H. pylori
pre 1 hodina; potom cytoplazmatickej a nukleárnej extrakty boli izolované jadrovej Extract Kit (Active Motif, Japonsko). V stručnosti, bunky boli premyté ľadovo chladného fyziologického roztoku, ktoré obsahujú inhibítory fosfatázy a granulované. Bunkové pelety potom boli resuspendované v hypotonická pufri a inkubované po dobu 15 minút na ľade. Boli lyžovanie pridaním detergentu a víri intenzívne po dobu 10 sekúnd. Po jadra boli peletovanie a resuspendované v kompletnom lyzačním pufri, skúmavka sa intenzívne trepe pri teplote 4 ° C počas 30 minút na trepačke. Jadrové extrakty sa potom odstredí a supernatanty boli rozdelené do alikvótnych častí a uložené v -80 ° C.
RT-PCR pre cytoplazmatickú Smad7
Celková RNA bola izolovaná z buniek MKN45 s použitím komerčné zostavy (ImProm-ll ™ Transcription System Reverse , Promega, USA) po H. pylori stroje a L. acidophilus
inkubácie. RNA bola kvantifikovaná stanovením absorbancie pri vlnovej dĺžke 260 nm. Jeden μ
g RNA bola prevedená na cDNA, ktorá bola uložená pri -72 ° C až do použitia. Ľudské Smad7 sekvencie primérov boli dopredu 5'-CATCACCTTAGCCGACTCTG-3 'a reverzné 5'GTCTTCTCCTCCCAGTATGC-3', generuje fragment 224 bp [30]. Pre JAK1 a STAT1, že sekvencie primérov boli dopredu 5'-GCAGCCAGCATGATGAGA-3 'a 5'-GTGGACGAGGTTTTGTAAGGA-3' a reverzné 5'-CTCGGAAGAAAGGCCTCTG-3 'a 5'-CAGACACAGAAATCAACTC-3', generovanie fragmenty 607 bp a 518 bp, v danom poradí [31, 32]. Stav PCR boli nasledujúce; 95 ° C po dobu 5 minút, nasleduje 25 cyklu 95 ° C po dobu 1 minúty, 56 ° C po dobu 1 minúty a 72 ° C po dobu 1 minúty, a nakoniec 72 ° C počas 7 minút. Primeru sekvencie pre ľudský beta-aktínu bol dopredu 5'-GTCTTCCCCTCCATCGTG-3 'a reverzné 5'-GTCATCTTCTCGCGGTTG-3', generuje fragment 272 bp. Podmienky amplifikácie boli nasledovné :. 95 ° C po dobu 5 minút, potom 20 cyklov 95 ° C počas 1 min, 50 ° C po dobu 1 minúty, 72 ° C po dobu 1 minúty a 72 ° C počas 7 minút
Western blotting pre NF-kB, IKB-a a Smad7
interferón gama (IFN-y) (PeproTech Inc., NJ, USA), 50 ul (100 ng /ml), bol pridaný do každej misky v experimentálnych štúdií. Cytoplazmatickej a nukleárnej extrakty sa premyjú ľadovo chladným PBS a lyžovanie v 0,5 ml /jamku lyzačného pufru (150 mmol /l NaCl, 20 mmol /l Tris, pH 7,5, 0,1% Triton X-100, 1 mmol /l fenylmethylsulfonyl fluorid [PMSF] a 10 ug /ml aprotonin) v znení zo správ Kim et al. a Moon et al. [33, 34]. Koncentrácia proteínov v lyzáty boli stanovené pomocou Pierce BCA Protein Assay Kit (Thermo Scientific, USA). Proteín /dráha 10 ug sa potom veľkosti frakcionované na denaturáciu, neredukujúci 10% polyakrylamidovom Minigel a elektroforeticky prenesené do polyvinylidénfluoridu (PVDF) (0,45-um veľkosť pórov) (Millpore Corparation, USA).
Špecifické proteíny boli detekovaná za použitia králičie protilidský NF-kB P65, králičie anti-ľudský IKB-α (1: 1000, Cell Signaling, Boston, MA, USA), a myšou anti-ľudskej Smad7 (1: 500, R &D System, USA, MN ) ako primárnej protilátky, a s peroxidázou konjugovaný králičie anti-IgG, anti-myší IgG (1: 10000) ako sekundárnej protilátky. Špecificky viaže peroxidasa bol detekovaný Chemoluminiscenčný HRP substrát (ECL systému, Millpore Corparation, USA) a potom vystavené röntgenu (GE Healthcare, UK) po dobu 10-30 sekúnd.
Štatistická analýza
študenta t
test a párový t
testu boli použité v prípade potreby pre parametrické rozdiely. Jednocestné analýzy rozptylu (ANOVA) s Bonferroniho korekciou bol k viacnásobnej testovanie dát. Mann-Whitney U test bol použitý
pre rozdiel medzi neparametrických dát pri Pearsonov χ
2 test bol použitý pre Neparametrické podiel rozdielu. Všetky testy boli dvojchvostý a P Hotel < 0,05 bola považovaná za štatisticky významné.
Výsledky
životaschopnosti buniek po inkubácii s H. pylori stroje a L. acidophilus
cytotoxicitu a životaschopnosť MKN45 buniek inkubovaných s H. pylori
( MOI 100) a L. acidophilus
(MOI 1-1000) boli stanovené na základe posúdenia percentuálne úniku LDH a non-zafarbený trypánovej modrej na 4 a 8. st hodín, respektíve (tabuľka 1 ). Plazmové poškodenie membrány hodnotená percento úniku LDH z MKN45 po H. pylori
inkubácie (18,1%) nebolo líši od kontrolných buniek (18,0%). Okrem toho, počet životaschopných buniek vypočíta ako non-farbené trypánovej modrej ani výrazne znížiť. Keď bol L. acidophilus
inkubovali s MKN45 bunkami po dobu 8 hodín, cytotoxicita a počet životaschopných buniek na MOI 1-100 neboli významne ovplyvnené. Avšak, LDH úniku a smrť bunky mierne vzrástla inkubáciou s MOI 1000 po dobu 8 hodín. Preto je optimálna dávka baktérií používaných pre experimentálne štúdie bola obmedzená na MOI 100.Table 1 bunkovej cytotoxicity a životaschopných buniek počtov MKN45 po ko-inkubácii s H. pylori stroje a L. acidophilus
daná percentom LDH úniku (trojmo) a non-postriekané trypánovej modrej (jedného)
Baktérie a MOI
Cytotoxicitya (% LDH)
životaschopných buniek počítať (x 106)
Cell iba 4 a 8 hodín
18,0, 18,0
1,36
H. pylori
počas 4 hodín
MOI 100
18,1
1,00
Lactobacillus
po dobu 8 hodín
MOI 1
18,4
1,00
MOI 10
18,0
1,11
MOI 100
18,7
1,24
MOI 1000
24.2
0,77
Aall údaje cytotoxické boli prezentované s priemernou hodnotou z troch skúšok
H . pylori
stimulované IL-8 a TNF-α, ale nie TGF-β1 in vitro produkciu
v MKN45 bunkách inkubovaných s H. pylori
(MOI 100) v rôznych časových období, IL 8 hladina zvýšila z 4 th do 8 th hodinu po ko-inkubácii, ako bolo stanovené pomocou ELISA (obrázok 1A). Pre TNF-a, úroveň po inkubácii sa zvýšil po 4 th hodinu a udržuje plošinu až do 8. st hodinu (Obrázok 1B). Avšak úroveň TGF-β1 sa po H. pylori
inkubácii počas 4 hodín nezvýši (dáta nie sú uvedené). Obrázok 1 (A) IL-8 a (B), TNF-a koncentrácia v supernatante kultúry buniek MKN45 po variabilný dobu trvania H. pylori a acidophilus infekcie L. (MOI = 100). Údaje boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka (SD) (tri kópie). Na rozdiel od
, L. acidophilus
nevyvolal IL-8, TNF-a a TGF-β1 vyjadrenie MKN45 aspoň v rámci 8 hodín ko-inkubačná doba.
Predúprava L. acidophilus
atenuovaný H. pylori indukovanej IL-8
Pretože IL-8 úroveň MKN45 buniek by mohla byť indukovaná H . pylori
úlohou po dobu 4 hodín, a časových a účinky závislé od dávky probiotík pri znižovaní pre-zápalové cytokíny a TGF-D1 na 4 st hodiny boli študované. Koncentrácia IL-8 a TGF-D1 boli uvedené pre MKCH bunky postihnuté H. pylori stroje a s variabilnými dávkami L. acidophilus
predspracovanie po dobu 8 hodín (obrázok 2). V porovnaní s kontrolnou skupinou, L. acidophilus
predbežné ošetrenie s väčším počtu baktérií kolónií (MOI 100) zníži H. pylori
indukovanej IL-8 výrazy v bunkách MKN45 (P
menšie ako 0,05). Hladina TGF-β1 nezmenil (P Hotel &0,05). Obrázok 2 Koncentrácia IL-8 (prázdny stĺpec) a TGF-D1 (čierny stĺpec) v supernatante MKN45 buniek vopred ošetrených s rôznymi MOI (0: kontrola; 1: 1 × 10 6 cfu; 10: 1 × 10 7 cfu; 100: 1 x 10 8 CFU) L. acidophilus. Bunky boli premyté trikrát s PBS na odstránenie L. acidophilus stroje a potom infikované H. pylori
(MOI = 100) po dobu 4 hodín. Dáta sú vyjadrené ako priemer ± SD (v triplikátech). Štatistická analýza bola vykonaná na každé meranie sa porovnaní s kontrolami (bunky ošetrené H. pylori
iba IL-8 2034 ± 865 pg /ml a TGF-D1 587,2 ± 39,8 pg /ml) (* P Hotel <0,05)
L. acidophilus
znížená H. pylori indukovanej
NF-kB prostredníctvom zvýšenia IκBα
štúdia zistila, že MKN45 bunky (MOI 100) inkubované s H. pylori
viedol. k zvýšeniu píku jadrovej výroby NF-kB v priebehu jednej hodiny. Tak, úrovne jadrovej NF-kB v bunkách MKN45 spoločne inkubované s H. pylori
, po predchádzajúcej predúpravy rôznymi MOI (1-100), L. acidophilus
boli testované na anti-zápalové účinky probiotík , Predúprava L. acidophilus
zvyšuje cytoplazmatickú IκBα ale znížila nukleárnej hladiny NF-kB indukovanú H. pylori v
spôsobom závislým od dávky (obrázok 3). Vzhľadom k tomu, hladiny IκBα by mohol byť sprostredkovaný aktiváciou TGF-β1 /Smäd signálne dráhy, role Smad7 hrá v L. acidophilus
obnovenie TGF-D1 /Smäd činnosť po H. pylori
výzva bola testovaná. Obrázok 3 IκBα a NFkB výrazy po rôznych dávok L. acidophilus predúpravy po dobu 8 hodín a H. pylori ko-inkubácie po dobu 1 hodiny. N, iba MKN45 bunka; P, H. pylori
, 1 x 108 c.f.u. liečba po dobu 1 hodiny; MOI 1, pre-liečba L. acidophilus
1 x 106 c.f.u. po dobu 8 hodín, nasledované H. pylori
liečbe po dobu 1 hodiny; MOI 10, L. acidophilus
1 × 107 c.f.u. nasleduje H. pylori
liečbe po dobu 1 hodiny; MOI 100, L. acidophilus
1 x 108 c.f.u. nasleduje H. pylori
liečenie po dobu 1 hodiny (* P
menšie ako 0,05).
L. acidophilus
inhibuje H. pylori- stroje a IFN-y-indukovanej expresie Smad7
The Obrázok 4A ukazuje, že predbežné ošetrenie s vysokými dávkami L. acidophilus
(MOI 100) po dobu 8 hodín zabránené H. pylori
indukovaná produkcia Smad7 semikvantitatívny RT-PCT. V porovnaní s pozitívnymi kontrolami (AGS bunky spoločne inkubovali s H. pylori
pri MOI 100), L. acidophilus
predbežné spracovanie tak vysoko, ako MOI 100 významne znížil H. pylori
indukovaná produkcia Smad7 na RNA level (P Hotel < 0,05) cez deaktivácia JAK1 a STAT1 prepisy. L. acidophilus
predbežné ošetrenie tiež inhibuje expresiu IFN-gama indukovanej Smad7 proteín (P Hotel &0,05) in vitro
, s následným zvýšením cytoplazmatickej IκBα (P
< 0,01) a pokles v nukleárnej NF-kB (P Hotel &0,01) (Obrázok 4B). Obrázok 4 Predúprava L. acidophilus výrazne znižuje JAK1 (MV 1-100), STAT1 (MOI 10-100) a Smad7, a následnú výrobu NFkB po (A) H. pylori, a (B), IFN-γ liečby. N, iba AGS bunka; P, H. pylori
, MOI = 100 (A, čierny stĺpec) a 100 ng /ml IFN-γ (B, čierny stĺpec) ošetrenie po dobu 0,5 hodiny; MOI 1, 10 a 100 znamenal predpríprave L. acidophilus
1 x 106, 1 x 107, 1 x 108 c.f.u. po dobu 8 hodín, v danom poradí, a následne H. pylori
liečenie po dobu 0,5 hodiny (* P Hotel &0,05; ** P
< 0,01).
Diskusia
imunity ľudského hrá významnú úlohu v rozvoji viac závažných klinických ochorení po infekcii H. pylori
kvôli zvýšeným prozápalových cytokínov prejavov na žalúdočnú sliznicu pacienta [6, 8]. H. pylori
infekcie môže aktivovať NF-kB v žalúdočných buniek epitelu a následne až regulovať IL-8 génovej transkripcie [4]. V súlade s predchádzajúcimi klinických štúdiách [6-9], táto štúdia ukazuje, že H. pylori
infekcia môže vyvolať TNF-a a IL-8 pre-zápalový cytokín výrazy in vitro
. Po dohode s štúdie na zvieratách hlásené McCarthy et al. [35], táto štúdia ukazuje, že probiotiká jogurt s obsahom L. acidophilus
nestimuluje pre-zápalové cytokíny po 8 hodinách inkubácie sa bunky MKN45. To naznačuje, že probiotiká môžu vyvíjať protizápalové účinky in vitro
. V súlade s tým bude zaujímavé vyskúšať, ako môžu byť zápalové kaskády pôsobiť probiotiká.
Antimikrobiálny aktivitu Lactobacillus
proti črevných patogénov je, čiastočne v dôsledku nahromadenia kyseliny mliečnej [17, 21]. Schopnosť produkcie kyseliny mliečnej sa pohybuje v Lactobacillus spp
. a L. acidophilus
kyseliny a výrobné kmeň s nízkou mliečna [34]. Experimentálne, L. acidophilus
znižuje životaschopnosť H. pylori in vitro
nezávisle od hodnoty pH a hladiny mliečneho kvasenia [19]. Hodnota pH každého suspenzie v tejto štúdii sa pohybuje okolo 6,8 až 7,0 (dáta nie sú uvedené). Iné mechanizmy, ako imunomodulačných by preto do značnej miery prispievajú k protizápalovým účinkom L. acidophilus
.
Súčasná štúdia ukazuje, že L. acidophilus
pre-liečba môže znížiť H. pylori
indukovanú nukleárnej expresie NF-kB v 1 st hodinu a IL-8 v polohe 4 th hodinu, po súčasné kultiváciu s H. pylori stroje a MKN45 buniek. Ďalej sa úroveň TNF-α sa tiež znížil, aj keď jeho hodnota je pomerne nízka (dáta nie sú uvedené). Táto štúdia potvrdzuje, že ďalej ako potlačenie dochádza spôsobom závislým od dávky a je sprostredkovaná stabilizáciu IκBα. Nález je v súlade s výsledkami Tien et al. čo ukazuje, že protizápalové účinky možno dosiahnuť len v dostatočnej baktérie počítať v probiotík [12]. Dáta z tejto štúdie ukazujú, že L. acidophilus
môže pôsobiť proti H. pylori v žalúdku
indukovanej zápaly konkrétne sprostredkovanie cez dráhy IκBα /NF-kB v spôsobom závislým od dávky.
V normálnej črevnej sliznice bunky sa TGF-β1 signál môže negatívne regulujú aktiváciu NF-kB stimuláciou negatívny regulátor, IκBα [36]. H. pylori infekcie
údajne môže inhibovať signálnej dráhy TGF-D1 prostredníctvom aktivácie žalúdočnej Smad7 výrazu [26]. Táto štúdia ďalej prehlasuje, že obaja H. pylori stroje a L. acidophilus
nemajú vplyv na produkciu TGF-D1 žalúdočných epitelové bunky, ktoré opäť potvrdzujú, že L. acidophilus
reguluje TGFβ1 /Smad3 následné aktivity obnovením Smad7. Táto štúdia je prvou, ktorá ukazujú, že L. acidophilus
môžu down-reguláciu výroby Smad7 obnoviť TGFβ1 /Smäd aktivity a ku zlepšeniu na H. pylori
indukovanej žalúdočnej zápal in vitro
(obrázok 5 ). Obrázok 5 Schéma zapojenia pre ilustráciu možných ciest k acidophilus inhibícia L. H. pylori indukované zápaly na žalúdočné epitel prostredníctvom TGF-p /Smad3, IFN-y /signály Smad7, a NFkB.
Smad7 môže byť tiež indukovaná v normálnom žalúdočné vzorky od IFN-y prostredníctvom závislé dráhy STAT1 [26]. V skutočnosti, žalúdočné epitel nie je tajný IFN-y. Preto H. pylori
(up-regulácia) a L. acidophilus
(down-reguláciu) obaja výrazne reguluje Smad7 do buniek epitelu cez sprostredkovanie STAT1 závislé Smad7 dráhy. Inhibícia Smad7 môže obnoviť TGF-D1 /Smad3 signalizáciu a viesť k potlačeniu zápalových produkcie cytokínov u pacientov so zápalovými črevnými [37, 38]. Tunajšie Dáta ukazujú, že probiotiká obsiahnutá v jogurte môže inhibovať Smad7 znížiť H. pylori
súvisiace žalúdočné zápal. Tieto probiotiká môže byť veľmi sľubné pre zlepšenie H. pylori
kontrolu infekcie.
Závery
jogurt s obsahom L. acidophilus
môže zlepšiť H. pylori
indukovanej žalúdočnej zápal prostredníctvom inaktiváciu z Smad7 a NF-kB sprostredkovanej dráh. Príjem L. acidophilus-
obsahujúci jogurt môže zvýšiť žalúdočnej zápal H. pylori u pacientov -infected
.
Vyhlásenie
Poďakovanie
Táto štúdia bola podporená dotácií z National Cheng Kung University Hospital, Tainan, Taiwan (NCKUH-9701013 a NCKUH-9904011), pre vedu Národná rada, Taiwan (NSC97-2314-B-006-032), a ministerstvo zdravotníctva, Taiwan (DOH99-TD-C-111 až 003). Autori prehlasujú, že neexistuje žiadny finančný vzťah s akoukoľvek spoločnosťou zapojených do tejto štúdie, a že neexistuje žiadny konflikt záujmov.
Autorov pôvodné predloženej súbory obrazov
Nižšie sú uvedené odkazy na autorov pôvodnej predložených súborov pre obrazov. "Pôvodný súbor pre Obrázok 1 12866_2011_1606_MOESM2_ESM.jpeg autorského 12866_2011_1606_MOESM1_ESM.jpeg autorov pôvodného súboru na obrázku 2 12866_2011_1606_MOESM3_ESM.jpeg autorského pôvodného súboru pre Obrázok 3 12866_2011_1606_MOESM4_ESM.jpeg autorského pôvodného súboru originálneho súboru Obrázok 4 12866_2011_1606_MOESM5_ESM.jpeg autorského na obrázku 5 pôvodný súbor 12866_2011_1606_MOESM6_ESM.jpeg autorov na obrázku 6

• Anti-ulcerogénne aktivita koreňovej kôry extrakt z afrického Laburnum "Cassia sieberiana" a jeho vplyv na systém antioxidačné obrany v rats
• Gastroparézy spojená s gastroptosis prejavujúce sa ako spodnej časti brucha zmesový hmoty u dieťaťa: prípad report