Lactobacillus acidophilus Pagerina Helicobacter pylori sukelta skrandžio uždegimą nukenksminti Smad7 ir NFκB pathways

Lactobacillus acidophilus
Pagerina H. pylori
indukuotų skrandžio uždegimą neutralizuojant Smad7 ir NFκB kelius
tezės
Background
H. pylori
infekcija gali sukelti Smad7 ir NFκB išraišką į skrandį, o probiotikai skatina virškinimo sveikatą ir pagerinti žarnyno uždegimą, kurį sukelia patogenai. Šis tyrimas nagrinėja jei probiotikai gali pagerinti H. pylori
indukuotų skrandžio uždegimą neutralizuojant Smad7 ir NFκB kelius.
Rezultatai
iššūkis H. pylori
padidėjo IL-8 ir TNF-α išraiška, bet ne TGF-β1 į MKN45 ląsteles. RNR lygis Smad7 į AGS ląstelių padidėjo po H. pylori
infekcijos dozės priklausomu būdu. Didesnė dozė (VRM 100) L. acidophilus
paruošiamojo apdorojimo metu silpnos H. pylori
indukuotų IL-8 išraiškas, bet ne TGF-β1. Toks priešuždegiminis poveikis buvo tarpininkaujant per padidėjusios citoplazmos IκBα ir išeikvojimo branduolinės NFκB. L. acidophilus
slopina H. pylori
indukuotų Smad7 transkripciją neutralizuojant JAK1 ir Stat1 kelius, kurie gali aktyvuoti TGF-β1 /SMAD kelią. L. Acidophilus
paruošiamasis apdorojimas, pagerės IFN-γ-sukeltas Smad7 vertimo lygį ir vėliau sumažinti branduolinę NF-κB gamybą, kaip aptikti Imunoblotingo.
Išvados
H. pylori
infekcijos sukelia Smad7, NFκB, IL-8, ir TNF-α gamybos in vitro
. Didesnės dozės L. acidophilus
paruošiamojo apdorojimo metu sumažinti H. pylori
indukuotų uždegimą per iš Smad7 ir NFκB kelius nukenksminimą.
Faktai
Helicobacter pylori
infekcija yra laikoma pagrindiniu veiksniu skatinančius lėtinis gastritas, pepsinė opa, ir net skrandžio vėžį žmonėms [1-3]. Pelėms ir žmogaus studijų, skrandžio gleivinės H. pylori
-infected dalykai rodomi reguliuojama NF-κB kelią ir Th1 tipas citokino atsakymai [4-9], kuris gali sutrikdyti žarnyno epitelio barjeras vientisumą [10 ]. Todėl NF-κB keliu ir jos paskesnių imuninės kaskadomis inaktyvacijai gali būti naudinga užkertant kelią H. pylori
indukuotų komplikacijų.
Probiotikų kurie slopina žarnyno patogenų patinka Salmonella Shigella
ir štamai Citrobacter rodentium
tiek in vitro parsisiųsti ir gyvūnų modelių [11-13]. Jų potencialūs klinikinės naudos prevencijai arba spręsti virškinimo trakto ligų buvo pabrėžta [14, 15]. Yra keletas mechanizmų, per kurį jie teikia žarnų apsauga, įskaitant mažėja luminal pH vertę gaminant pieno rūgšties [16, 17], arba konkuruoja su žarnyno patogenų host paviršiaus receptorių [18].
Nepaisant to, Coconnier et al., parodė, kad probiotikai gali slopinti Helicobacter pylori
augimo nepriklausomai nuo pH ir pieno rūgšties koncentracija [19], o Tian ir kt. pranešti, kad Lactobacillus casei
gali žemyn reguliuoti Shigella flexneri
indukuotų PRO-uždegiminių citokinų, chemokinus ir jų laikymąsi molekules slopina NF-κB kelią [12]. Kitas svarbus mechanizmas susijęs probiotikai yra susijęs su pokyčiais šeimininko imuninis atsakas į infekciją per sumažintą TNF-alfa ir IL-8, tačiau padidėjo IL-10 [20, 21]. Dėl trumpo sąlyčio tarp probiotikų floros ir skrandžio epitelį, baseinas probiotikų vartojimas H. pylori
-infected pacientų turi anti-uždegiminius naudą iš priimančiose imuninio atsako kaita.
Transformuojantis augimo faktorius (TGF ) -β1 neigiamai reguliuoja Th1 ląstelę, pavyzdžiui, kad TGF-β1 /netobuli pelės spontaniškai kurti gastritas [22, 23]. Ji yra gerai priimtas, kad TGF-β1 signalinio kelio yra teigiamai reguliuoja receptorių-susijęs SMAD 2/3, bet neigiamai Smad7 [24, 25]. H.pylori
infekcija Pranešama susijęs su padidėjusia išraiškos skrandžio Smad7, bet prieštaringų rezultatų TGF-β1 lygiais [26, 27]. Tai rodo, kad TGF-β1 /SMAD signalizacijos kelią vaidina svarbų vaidmenį žarnų uždegimas. Tačiau tikslus mechanizmas Probiotikų mažinančių H. pylori
indukuotų skrandžio uždegimą lieka neaiškus. Taigi, šis tyrimas buvo siekiama išsiaiškinti, ar probiotikai gali reguliuoti Smad- ir NFκB tarpininkaujant signalizacijos būdus sumažinti žemyn srautas uždegiminių citokinų gamybą po H. pylori
infekcijos.
Metodai
Mobilaus ryšio linijų ir kultūra būklė
Šis tyrimas patvirtino etikos komiteto Krašto Cheng Kung universitetinė ligoninė (ER-98-208). Dvi žmogaus skrandžio epitelio vėžio ląstelių linijas (MKN45 ir AGS) buvo gauti iš Sveikatos mokslų mokslinių tyrimų išteklius banko Japonijoje ir prižiūrimi RPMI 1,640 Medium (GIBCO BRL, Grand Island, NY), o F-12 terpėje (GIBCO BRL, Grand Island, NY), kurių sudėtyje yra 10% FBS 37 ° C temperatūroje drėgnoje atmosferoje (95%) su 5% CO 2. Ląstelės buvo subrangos kultūringas kas antrą dieną. Prieš bakterinė infekcija tyrimo, ląstelės buvo inkubuojami be antibiotikų RPMI 1640 terpėje, turinčioje 10% FBS per naktį 37 ° C temperatūroje 5% CO 2.
Bakterijos ir kultūra sąlyga
Bakterijų padermės (HP238 ), išskirtas iš klinikinio pacientui buvo naudojamas. HP238 išreiškė CagA, Vaca, ir baba baltymus ankstesniuose tyrimuose [28, 29]. Bakterijos buvo išlaikyta Brucella agaro, esančio lėkštelėje su 10% arklio serumo ir inkubuojami pagal mikro-aerophilic sąlygomis (10% CO 2, 5% O 2 ir 85% N 2) 24-48 valandos. tada bakterijos buvo perkelti į PBS prieš užkrėsti ląsteles. Augimas tankis buvo matuojamas spektrofotometru prie 600 nm bangos ilgiui. Infekcinė dozė bakterijų buvo 1 × 10 8 bakterijos /ml yra iš 1. Viesbutis The MKN45 ląstelių OT buvo užsikrėtę infekcijos gausos (MOI) 1-100 įvairių laikotarpių. Probiotikas padermė, vienas esančius AB-jogurtas, Lactobacillus acidophilus
(LA5 ®, kilęs iš Chr. Hansen, Danijos, pateikta prezidentui Corp., Tainan, Taivanas) buvo naudojamas. Bakterijos buvo išlaikyta Brucella agaro, inkubuojami anaerobinėmis sąlygomis, ir surenkami ir suspenduotos fosfato-buferio druskų tirpalo (PBS) prieš infekcijos. Aktyvų tankis L. acidophilus
buvo 1 × 10 8 bakterijos /ml kurio 1.
MKN45 ląstelių gyvybingumo OT po kontakto su Helicobacter pylori parsisiųsti ir L. acidophilus

iš MKN45 ląstelių sąlyčio su H. pylori
ir L. acidophilus
citotoksiškumo buvo nustatomas procentais laktato dehidrogenazės (LDH) nuotėkio (citotoksiškumo tyrime, Promega Co, Madison, WI, JAV) ir įvertinant perspektyvi ląstelių kiekis naudojant ne tamsintas Trypan mėlyna. Kultūra paviršinis ir likę MKN45 ląstelės buvo renkami po inkubacijos su kintamos dozes (MOI 1-1000) L. acidophilus
ir H. pylori pervežimas (VRM 100) 8 ir 4 valandas, atitinkamai. Ląstelių kultūros be bakterinė infekcija tarnavo kaip kontrolės. Šios procedūros buvo atliekamos pagal instrukcijose ir po infekcijos ląstelių su ne tamsintas Trypan mėlyna dažymo tiesiogiai skaičiuojami.
Fermentais susijęs imuninės sorbentas analizė (ELISA), už citokinų
nustatyti optimalią dozę ir inkubavimas laikas iš įvairių bakterijų, bakterijų (H. pylori parsisiųsti ir L. acidophilus pervežimas) buvo auginamos su MKN45 ląstelių (VRM 1-100) į antibiotikų be RPMI 1,640 terpę (5 ml), kurių sudėtyje yra 10% FBS ne 35 ° C mikro-aerophilic sąlygų iki 8 valandų. Į eksperimentinių tyrimų, L. acidophilus
buvo įtraukta į MKN45 ląstelių ir inkubuojami 8 valandas tokiomis pačiomis sąlygomis. Po to, kai PBS plovimo ir pašalinus bakterijų, tokį patį tūrį H. pylori
buvo įtraukta ir ląstelės buvo inkubuojamos dar 4 valandas. Galutinis kultūra supernatantas buvo centrifuguojamas 12000 apsisukimų per minutę 5 min pašalinti bakterijas ir ląstelių nuolaužų. Koncentracijos TNF-alfa, IL-8 (R & D sistema, Minneapolis, MN) ir TGF-β1 (eBioscience, San Diegas, CA) buvo matuojamas ELISA pagal gamintojo instrukcijas. Kiekvieno mikro plokštės absorbcija buvo skaityti apie spektrofotometru-fotometrą naudojant 450 nm kaip pirminės bangos ilgio ir 570 nm, kaip atskaitos bangos ilgio. Visi bandymai buvo atliekami tris kartus.
Rengimo citoplazmos ir branduolinių ekstraktai Viesbutis The MKN45 ir AGS ląstelės buvo apdorojamas su L. acidophilus
8 valandas, po įvairių dozių H. pylori
už 1 valandą; tada citoplazmos ir branduolinių ekstraktai izoliuotas branduolinę Extract Kit (Aktyvus Motif, Japonija). Trumpai, ląstelės buvo išplauti su ledinio fiziologinio tirpalo, kurių sudėtyje yra fosfatazės inhibitorių ir granuliuotus. Ląstelių granulės buvo tada iš naujo supilti į hipotoninį buferio ir inkubuojami 15 min ant ledo. Jie buvo lizuojamos naudojant detergentą to ir pavartomas energingai 10 s. Po to, kai branduoliai buvo žirnelius ir iš naujo-sustabdytas visiškai lizės buferiniame tirpale, mėgintuvėlis buvo stipriai sukratoma, esant 4 ° C temperatūroje 30 min dėl kratymo platforma. tada branduolinės ekstraktai buvo centrifuguojamas ir supernatantų, buvo padalinamas alikvotinėmis dalimis ir saugomi -80 ° C temperatūroje.
RT-PGR metodu dėl citoplazminio Smad7
Bendras RNR buvo išskirta iš MKN45 ląstelių naudojant komercinę komplektas (ImProm-LL ™ atvirkštinės transkripcijos sistema , Promega, JAV) po H. pylori
ir L. acidophilus
inkubacijos. RNR buvo įvertintas, nustatant absorbciją prie 260 nm bangos ilgiui. Vienas μ
g RNR buvo konvertuojami į cDNR, kuris buvo saugomi ne -72 ° C temperatūroje, kol naudojimo. Žmogaus Smad7 gruntas sekos buvo pirmyn-5'-CATCACCTTAGCCGACTCTG-3 "ir atvirkštinės 5'GTCTTCTCCTCCCAGTATGC-3 ', generuoti 224 bp fragmentas [30]. Už JAK1 ir Stat1, pradmenys sekos buvo į priekį 5'-GCAGCCAGCATGATGAGA-3 'ir 5'-GTGGACGAGGTTTTGTAAGGA-3' ir atbulinės eigos 5'-CTCGGAAGAAAGGCCTCTG-3 'ir 5'-CAGACACAGAAATCAACTC-3', sukuriantys fragmentai 607 bp ir 518 bp, atitinkamai [31, 32]. PGR sąlyga buvo taip; 95 ° C temperatūroje 5 min, o po to 25 ciklo 95 ° C temperatūroje 1 min, 56 ° C temperatūroje 1 min, ir 72 ° C temperatūroje 1 min, ir galiausiai 72 ° C temperatūroje 7 min. Grunto sekas žmonių beta-aktino stengiausi 5'-GTCTTCCCCTCCATCGTG-3 "ir pakeisti 5'-GTCATCTTCTCGCGGTTG-3", generuoti 272 bp fragmentas. Amplifikacija sąlygos buvo taip:. 95 ° C temperatūroje 5 min, tada 20 ciklo 95 ° C temperatūroje 1 min, 50 ° C temperatūroje 1 min, 72 ° C temperatūroje 1 min, ir 72 ° C 7 min
imunoblotingu už NF-κB, IκB-alfa ir Smad7
interferono gama (IFN-gama) (PeproTech Inc, NJ, JAV) 50 mikrol (100 ng /ml) buvo įtraukta į kiekvieną patiekalą į eksperimentinius tyrimus. Citoplazmos ir branduolinių ekstraktai plaunami ledinio PBS ir lizuojamos į 0,5 ml /duobutėje lizės buferiniame tirpale (150 mmol /l NaCl, 20 mmol /l Tris, pH 7,5, 0,1% Triton X-100, 1 mmol /l fenilmetilsulfonilfluoridą fluorido [PMSF] ir 10 mikrogramai /ml aprotonin), kaip pakeistas iš Kim et al ataskaitas. ir Mėnulis ir kt. [33, 34]. Baltymų koncentracija Lizatai nustatoma naudojant Pierce BCA Baltymai Analizės rinkinį (Thermo Scientific, JAV). Baltymai /Lane 10 mikrogramų buvo tada dydis-frakcionuotas į denatūravimo, ne mažinant 10% poliakrilamido minigel ir elektroforezės perduota polivinilideno fluoridą (PVDF) (0,45-mkm porų dydis) (Millpore Corparation, JAV).
Specifinių baltymų buvo nustatyta naudojant triušio antihuman NF-κB 65 psl, triušių anti-žmogaus IκB-α (1: 1000, Mobilusis signalizacijos, Bostonas, MA, JAV) ir pelės anti-žmogaus Smad7 (1: 500, R & D sistema, JAV, MN ) kaip pirminių antikūnų, ir peroksidazės-konjuguoto anti-triušio IgG, anti-pelės IgG (1: 10000), kaip antriniu antikūnu. Tiksliau privalo peroksidazės buvo aptikta cheminės liuminescencijos HRP substrato (ECL sistemos, Millpore Corparation, JAV) ir po to paveikiami x-ray "(GE Healthcare, Didžioji Britanija) 10-30 s.
Statistinė analizė Viesbutis The Stjudento t
buvo naudojamas testas ir suporuotas T
testus, atitinkamais atvejais, parametrinių skirtumus. buvo taikomas į vieną pusę dispersinė analizė (ANOVA) su Bonferroni korekcijos už kelių bandymų duomenis. Mann-Whitney U testas
buvo naudojamas skirtumo ne parametrinių duomenų, o Pearson χ
2 bandymas buvo naudojami neparametriniai proporcingai skirtumui. Visi bandymai buvo du-tailed ir P
< 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas.
Rezultatai
ląstelių gyvybingumas po inkubacijos su H. pylori pervežimas ir L. acidophilus

toksiškumą ir gyvybingumą MKN45 ląstelių inkubuojamų su H. pylori pervežimas ( MOI 100) ir L. acidophilus
(VRM 1-1000) buvo nustatomas įvertinant procentinę nutekėjimo LDH ir ne tamsintas Trypan mėlynas 4 -ąją ir 8 -osios valandos, 1 (atitinkamai lentelė ). Citoplazmos membrana žala vertinama pagal LDH nutekėjimo procentas nuo MKN45 po H. pylori
inkubacijos (18,1%) buvo ne skiriasi nuo tų kontrolinių ląstelių (18,0%). Be to, gyvų ląstelių skaičius apskaičiuojamas ne tamsintas Trypan mėlyna nebuvo ženkliai sumažės. Kai L. acidophilus
buvo inkubuojami su MKN45 ląstelių 8 valandas, citotoksiškumo ir gyvų ląstelių skaičius ne MOI 1-100 reikšmingai nepakito. Tačiau, LDH nuotėkio ir ląstelių mirtis šiek tiek padidėjo, kaip inkubacijos su MOI 1000 8 valandas. Todėl optimali dozė bakterijų, naudojamų eksperimentiniais tyrimo apsiribojo VRM 100.Table 1 ląstelių citotoksiškumo ir gyvybingų ląstelių skaičius MKN45 po bendradarbiavimo inkubacijos su H. pylori pervežimas ir L. acidophilus
nustato procentais iš LDH nutekėjimo (trimis egzemplioriais) ir ne tamsintas Trypan mėlyna (Single)
Bakterijos ir VRM
Cytotoxicitya (% LDH)
Matomų ląstelių skaičiuoti (× 106)
Mobilusis tik 4 ir 8 valandų
18.0, 18.0
1,36
H. pylori
4 valandas
MOI 100
18,1
1.00
Lactobacillus
8 valandas
MOI 1
18,4
1.00
MOI 10
18,0
1.11
MOI 100
18,7
1.24
VRM 1000
24,2
0,77
Aall citotoksiškumo tyrimo duomenis buvo pateikti su vidutiniu vertės trijų bandymų
H . pylori
skatino IL-8 ir TNF-α, tačiau ne TGF-β1 gamyba in vitro
Be MKN45 ląstelių inkubuojamų H. pylori
(MOI 100) įvairių laikotarpių, IL- 8 lygis padidėjo nuo 4 -osios į 8 -osios valandos po bendradarbiavimo inkubacijos nustatytas ELISA (1a pav.) Dėl TNF-alfa, post-inkubacinis lygis pakilo po 4 -osios valandos ir prižiūrimi plato iki 8 -osios valandos (1b pav.) Tačiau TGF-β1 lygis nepadidėjo po H. pylori pervežimas inkubacijos 4 valandas (duomenys neparodyti). 1 pav (A), IL-8 ir (B) TNF- koncentracijoms MKN45 ląstelių kultūros supernatanto po kintamojo trukmės H. pylori ir L. acidophilus infekcijos (MOI = 100). buvo išreikštas duomenys, kaip tai ± standartinis nuokrypis (SD) (trimis egzemplioriais).
Priešingai, L. acidophilus
nesukėlė IL-8, TNF-alfa, ir TGF-β1 pareikšti MKN45 bent per 8 valandų bendros inkubacinis periodas.
Paruošiamasis L. acidophilus
susilpnintas Helicobacter pylori sukelta
IL-8
Kadangi IL-8 lygis MKN45 ląstelių gali būti sukeltas H . pylori
iššūkis 4 valandas, laiko ir dozės priklausomas poveikis probiotikų mažinant PRO-uždegiminių citokinų ir TGF-β1 ant 4 -osios valandos buvo tiriama. IL-8 ir TGF-β1 koncentracija buvo rodomas MKN ląstelių patikrino H. pylori parsisiųsti ir su kintama dozių L. acidophilus
apdorojimo 8 valandas (2 paveikslas). Palyginti su kontroline grupe, L. acidophilus
prieš gydymą su aukštuoju bakterijų kolonijas sudarančių vienetų skaičius (VRM 100) sumažintas H. pylori
indukuotų IL-8 išraiškas MKN45 ląstelių (p
< 0,05). TGF-β1 lygis nepakito (p
> 0,05). 2 pav IL-8 (tuščias stulpelis) ir TGF-β1 (juoda skiltis) koncentracija į MKN45 ląstelių nuopilo anksto paveiktų skirtingų MOI (0: kontrolės; 1: 1 × 10 6 ksv; 10: 1 × 10 7 KSV; 100: 1 × 10 8 KSV) L. acidophilus. Ląstelės buvo plaunamos tris kartus su PBS, kad pašalinti L. acidophilus
ir tada užkrėstas H. pylori
(MOI = 100) 4 valandas. Duomenys išreikštas reiškia ± SD (trimis egzemplioriais). Statistinė analizė atlikta kiekvienam matavimui su palyginimais su kontrolės (valytas, H. ląstelės pylori
tik; IL-8 2034 ± 865 pg /ml ir TGF-β1 587,2 ± 39,8 pg /ml) (* p
< 0,05)
L. acidophilus
sumažėjo H. pylori sukeltos
NF-κB didinant IκBα Viesbutis The tyrimas nustatė, kad MKN45 ląstelių (MOI 100) inkubuojami su H. pylori pervežimas vedami. maksimumo padidinti branduolinės NF-κB gamybos per vieną valandą. Taigi, branduolinės NF-κB lygiai MKN45 ląstelių bendrai inkubuojami su H. pylori
po ankstesnių paruošiamasis apdorojimas įvairiais Mõis (1-100) L. acidophilus
buvo analizuotos priešuždegiminio poveikio probiotikų , Paruošiamasis L. acidophilus
padidėjo citoplazmos IκBα bet sumažėjo branduolinių NF-κB lygius, kuriuos sukelia Helicobacter pylori pervežimas nuo dozės priklausomu būdu (3 pav.) Kadangi IκBα lygis galėtų būti tarpininkaujant aktyvuojant TGF-β1 /SMAD signalinio kelio, vaidmuo Smad7 grojo L. acidophilus
atkurti TGF-β1 /SMAD veiklą po H.pylori
iššūkis buvo išbandytas. 3 paveikslas IκBα ir NFκB išraiškos po įvairių dozių L. acidophilus išankstinio apdorojimo 8 valandas, po to H. pylori bendro inkubuojant 1 valandą. N tik MKN45 ląstelių; P H.pylori
, 1 × 108 c.f.u. gydymas 1 valandą; MOI 1, taikant paruošiamąjį apdorojimą L. acidophilus
1 × 106 c.f.u. 8 valandas, po to H. pylori
gydymo už 1 valandą; MOI 10 L. acidophilus
1 × 107 c.f.u. po to H. pylori
gydymo už 1 valandą; MOI 100 L. acidophilus
1 × 108 c.f.u. Po H. pylori pervežimas gydymo 1 valandą (* p
< 0,05).
L. acidophilus
slopina H. pylori- parsisiųsti ir IFN-gama sukeltos Smad7 išraišką
Apie 4A paveiksle matyti, kad prieš gydymą su didelės dozės L. acidophilus
(MOI 100) 8 h neleido H. pylori
indukuotų Smad7 gamybą pusiau kiekybiniam RT-PCT. Palyginti su teigiamos kontrolės (AGS ląstelės bendrai inkubuojami su H. pylori pervežimas ne MOI 100), L. acidophilus
išankstinis apdorojimas, kaip aukštas, kaip MOI 100 žymiai sumažino H. pylori
indukuotų Smad7 gamybą RNR lygis (P
< 0,05) per nukenksminimo JAK1 ir Stat1 transkripcijos. L. acidophilus
iš anksto apdoroti taip pat slopina IFN-gama-sukeltas Smad7 baltymo ekspresiją (P
< 0,05) in vitro
, su vėlesnis padidėjimas citoplazminio IκBα (P
< 0,01) ir branduolinės NF-κB sumažėjimas (P
< 0,01) (4B pav). 4 pav Paruošiamasis L. acidophilus žymiai sumažino JAK1 (MOI 1-100), STAT1 (VRM 10-100), ir Smad7, ir vėliau NFκB gamybą po (A) H.pylori ir (B) IFN-γ gydymą. N, tik AGS ląstelių; P, H. pylori
, MOI = 100 (A, juoda stulpelis) ir 100 ng /ml IFN-γ (B, juoda stulpelis) gydymas 0,5 val; MOI 1, 10 ir 100 reiškė paruošiamąjį apdorojimą L. acidophilus
1 × 106, 1 × 107, 1 × 108 c.f.u. 8 valandas, atitinkamai, o po to H. pylori
gydymo 0,5 val (* P
< 0,05; ** p
< 0,01).
Aptarimas
žmogaus imunitetą vaidina svarbus vaidmuo daugiau rimtų klinikinių ligų vystymuisi po H. pylori
infekcijos, nes padidėjo PRO-uždegiminių citokinų išraiškos dėl pacientų skrandžio gleivinės [6, 8]. H. pylori
infekcija gali aktyvuoti NF-κB skrandžio epitelio ląstelių, o vėliau iki reguliuoti IL-8 genų transkripciją [4]. Suderinamas su ankstesnėmis žmogaus tyrimų [6-9], dabartinis tyrimas atskleidžia, kad H. pylori
infekcija gali sukelti TNF-alfa ir IL-8 Pro-uždegiminių citokinų išraiškas in vitro
. Pagal susitarimą su gyvūnų tyrimo praneštą McCarthy et al. [35], dabartinis tyrimas rodo, kad jogurtas, kurių sudėtyje yra probiotikų, L. acidophilus
neskatina PRO-uždegiminių citokinų po 8 valandų inkubacijos su MKN45 ląsteles. Tai rodo, kad probiotikai gali daryti anti-uždegiminių poveikį in vitro
. Todėl, tai bus įdomu išbandyti kaip uždegimo kaskadomis gali neutralizuoti probiotikų.
Antimikrobinį aktyvumą Lactobacillus
prieš žarnyno patogenų yra iš dalies dėl to, kad pieno rūgšties [17, 21] kaupimosi. Pieno rūgšties gamybos gebėjimas kinta Lactobacillus spp
. ir L. acidophilus
yra pieno rūgštis gamybos padermės mažas [34]. Eksperimentiškai L. acidophilus
sumažina H. pylori in vitro
nepriklauso nuo pH ir pieno rūgšties koncentracija [19] gyvybingumą. PH vertė kiekvienoje ląstelių suspensijoje šiame tyrime yra aplink 6,8-7,0 (duomenys neparodyta). Todėl kiti mechanizmai, kaip imuniteto moduliavimo, turėtų labai prisidėti prie priešuždegiminio poveikio L. acidophilus
.
Dabartinė tyrimas rodo, kad L. acidophilus
anksto gydymas gali sumažinti H. pylori
sukeltas branduolinis NF-κB raiška 1 st valandą ir IL-8 į 4 dalis -osios valandos po to, kai bendradarbiavimo kultūros H. pylori parsisiųsti ir MKN45 ląsteles. Be to, TNF-α lygis yra taip pat sumažėjo nors jos vertė yra gana žemas (duomenys neparodyta). Šis tyrimas taip pat patvirtina, kad toks slopinimas pasireiškia nuo dozės priklausomu būdu ir yra sąlygojamas per IκBα stabilizavimo. Šis atradimas yra suderinama su Tian et al rezultatus. rodo, kad priešuždegiminiai poveikis gali būti pasiektas tik tinkamą bakterijų skaičiuoti probiotikų [12]. Duomenys iš šio tyrimo rezultatai parodė, kad L. acidophilus
gali neutralizuoti H. pylori
indukuotų skrandžio uždegimą konkrečiai tarpininkavimo per IκBα /NF-κB keliu nuo dozės priklausomu būdu.
Esant normaliai žarnyno gleivinės ląstelių, TGF-β1 signalas gali neigiamai reguliuoti NF-κB aktyvacijos stimuliuoja neigiamą reguliatorius, IκBα [36]. H.pylori
infekcija Pranešama gali slopinti TGF-β1 signalo kelią per aktyvavimo skrandžio Smad7 išraiška [26]. Šis tyrimas taip pat pareiškia, kad tiek H.pylori
ir L. acidophilus
neturi įtakos TGF-β1 gamybą skrandžio epitelio ląstelių, o tai vėlgi patvirtina, kad L. acidophilus
reguliuoja TGFβ1 /Smad3 pasroviui veiklą atkuriant Smad7. Šis tyrimas yra pirmasis įrodyti, kad L. acidophilus
gali žemyn reguliuoti Smad7 gamybą atkurti TGFβ1 /SMAD veiklą ir susilpninti H. pylori
indukuotų skrandžio uždegimas in vitro pervežimas (5 pav ). 5 pav schema iliustruoja galimus kelius L. acidophilus slopinimu H. pylori indukuotų uždegimą skrandžio epitelio per TGF- /Smad3, IFN-gama /Smad7 ir NFκB signalus.
Smad7 taip pat gali būti sukeltas normalu skrandžio pavyzdžiai pagal IFN-gama per tam STAT1 priklausomu keliu [26]. Tiesą sakant, skrandžio epitelio ne paslaptis IFN-gama. Todėl H. pylori
(iki reguliavimą) ir L. acidophilus
(down-regulation) tiek daug reguliuoja Smad7 epitelyje ląstelių per iš STAT1 priklausoma Smad7 keliu tarpininkavimo. Slopina Smad7 gali atkurti TGF-β1 /Smad3 signalizacijos ir sukelti uždegiminę citokinų gamybą slopinimo pacientams, sergantiems uždegiminėmis žarnų ligomis [37, 38]. čia Duomenys atskleidžia, kad probiotikai esančios jogurte gali slopinti Smad7 sumažinti H. pylori
priklausoma skrandžio uždegimą. Tokie probiotikai gali būti gana perspektyvus dėl H. pylori pervežimas infekcijų kontrolės tobulinimo.
Išvadas
Jogurtas turinti L. acidophilus
gali pagerinti H. pylori
indukuotų skrandžio uždegimą per nukenksminti iš Smad7 ir NF-κB tarpininkaujant kelius. Įsiurbimo L. acidophilus- pervežimas, kuriame jogurtas gali pagerinti skrandžio uždegimą H. pylori
-infected pacientams.
Deklaracijos
Padėka
Šis tyrimas parėmė dotacijas iš Nacionalinio Cheng Kung universitetinė ligoninė, Tainan, Taivanas (NCKUH-9.701.013 ir NCKUH-9.904.011), Nacionalinė mokslo taryba, Taivanas (NSC97-2314-B-006-032), o sveikatos apsaugos, Taivanas (DOH99-TD-C-111-003) departamentas. Autoriai deklaruoja, kad nėra finansinių santykių su bet kokia kompanija dalyvauja šiame tyrime ir kad nėra jokio interesų konflikto.
Autorių originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalus pateiktų failų vaizdai. 12866_2011_1606_MOESM1_ESM.jpeg Autorių originalus failas 1 pav 12866_2011_1606_MOESM2_ESM.jpeg Autorių originalaus failo 2 pav 12866_2011_1606_MOESM3_ESM.jpeg Autorių originalios 3 pav 12866_2011_1606_MOESM4_ESM.jpeg Autorių originalaus failo 4 pav 12866_2011_1606_MOESM5_ESM.jpeg Autorių originalaus failo 5 paveiksle 12866_2011_1606_MOESM6_ESM.jpeg Autorių originalus failas 6 pav

• Anti-opas veikla šaknų žievės ekstraktas Afrikos Laburnum "cinamonas sieberiana" ir jos poveikio antioksidantas gynybos sistemos žiurkių
• Gastroparezę susijęs su gastroptosis Pristatydamas kaip apatinės pilvo sumaišymo masės vaikas: atvejo ataskaitą