Lactobacillus acidophilus ameliorates H. pylori aiheuttaman mahalaukun tulehdusta inaktivoimalla Smad7 ja NFKB reittejä

Lactobacillus acidophilus
ameliorates helikobakteeri
indusoimaan mahalaukun tulehdusta inaktivoimalla Smad7 ja NFKB polkuja
tiivistelmä
tausta
helikobakteeri
infektio voi laukaista Smad7 ja NFKB ilmaisun vatsassa , kun taas probiootit edistää suoliston terveyttä ja parantaa suoliston tulehdusta taudinaiheuttajia. Tässä tutkimuksessa tarkastellaan, jos probiootit voivat parantaa helikobakteerin
indusoimaan mahalaukun tulehdusta inaktivoimalla Smad7 ja NFKB polkuja.
Tulokset
Challenge helikobakteeri
lisääntynyt IL-8 ja TNF-α ilmaisuja, mutta ei TGF-β1 in MKN45 soluissa. RNA tasot Smad7 vuonna AGS-solujen määrä nousi, kun helikobakteeri
infektion annosriippuvaisesti. Korkeampi annos (MOI 100) L. acidophilus
esikäsittelyn heikennetty helikobakteerin
n aiheuttamaa IL-8 ilmaisuja, mutta ei TGF-β1. Tällaisia ​​tulehdusta vaikutus välittyy lisääntynyt soluliman IκBα ehtyminen ja ydinvoiman NFKB. L. acidophilus
esti myös helikobakteeri
indusoimaan Smad7 transkriptio inaktivoimalla Jak1 ja STAT1 polkuja, jotka saattavat aktivoida TGF-β1 /Smad reitin. L. acidophilus
esikäsittelyn lievittää IFN-γ-indusoidun Smad7 käännös tasolla ja sen jälkeen pienentää ydin- NF-KB: n tuotantoa, kuten havaitaan western blottauksella.
Päätelmät
H. pylori
-infektio indusoi Smad7, NFKB, IL-8 ja TNF-α tuotanto in vitro
. Suuremmat annokset L. acidophilus
esikäsittelyä vähentää helikobakteeri
indusoima tulehdus kautta inaktivoinnin Smad7 ja NFKB polkuja.
Tausta
Helicobacter pylori
infektiota pidetään merkittävä tekijä asiakkuutta krooninen gastriitti, mahahaava, ja jopa mahasyövän ihmisellä [1-3]. Hiirillä ja ihmisen tutkimukset, mahalaukun limakalvo Helikobakteeri
infektoiduista aiheita näy säädelty NF-KB-reitin ja Th1-tyypin sytokiinivasteita [4-9], mikä voi häiritä eheys suolen epiteelisolujen este [10 ]. Näin ollen inaktivaatio NF-KB-reitin ja sen loppupään immuuni laskeutuu voivat olla hyödyllisiä estää vakavan helikobakteeri
indusoiman komplikaatioita.
Probiootit tiedetään estävän enteerisen taudinaiheuttajia haluaa Salmonella, Shigella
, ja Citrobacter rodentium
sekä in vitro
ja eläinmalleissa [11-13]. Niiden mahdollinen kliininen hyöty ehkäisemisessä tai ratkaisemaan ruoansulatuskanavan sairaudet on korostettu [14, 15]. On olemassa useita mekanismeja, joiden kautta ne tarjoavat gut suoja sekä vähentämällä luumenin pH-arvon tuottamalla maitohappoa [16, 17] tai kilpailemalla suolen patogeenit isännän pinnan reseptoreihin [18].
Kuitenkin Coconnier et al. ovat osoittaneet, että probiootit voivat estää helikobakteeri
kasvua riippumaton pH ja maitohapon tasot [19], kun Tien et al. raportoivat, että Lactobacillus casei
voi alas-säädellä Shigella flexneri
indusoimaan proinflammatoristen sytokiinien, kemokiinien, ja kiinnittyminen molekyylit estämällä NF-KB-reitin [12]. Toinen kriittinen järjestelyihin, probiootteja liittyy muutoksia isännän immuunivasteita infektion kautta vähentää TNF-α: n ja IL-8, mutta lisääntyi IL-10 [20, 21]. Mitä tulee lyhyt kosketus kasvi- probioottien ja mahalaukun epiteelin saanti probioottien helikobakteerin
infektoiduista potilaista on anti-tulehdus hyödyt johtuvat muutoksesta isännän immuunivasteita.
Transforming kasvutekijä (TGF ) -β1 säätelee negatiivisesti Th1 solun siten, että TGF-β1 /hiirillä spontaanisti kehittää gastriitti [22, 23]. On yleisesti hyväksytty, että TGF-β1 signalointireitin säätää positiivisesti reseptoriin liittyvän Smad 2/3, mutta negatiivisesti Smad7 [24, 25]. Helikobakteeri
infektio on tiettävästi liittyy lisääntynyt ilmentyminen mahalaukun Smad7, mutta kiistelty tulokset TGF-β1 tasolla [26, 27]. Nämä viittaavat siihen, että TGF-β1 /Smad-signalointireitin on tärkeä rooli suolen tulehdusta. Kuitenkin tarkka mekanismi probioottien vähentää helikobakteeri
indusoima mahan tulehdus jää epäselväksi. Siten tämän tutkimuksen tavoitteena oli tutkia, probiootit voivat säädellä Smad- ja NFKB-välitteisen signalointireittien vähentää alas-stream inflammatoristen sytokiinien tuotannon jälkeen helikobakteeri
infektio. Tool Menetelmät
Solulinjat ja viljelyolosuhteissa
hyväksyi tutkimuksen eettinen komitea National Cheng Kung yliopistollisen sairaalan (ER-98-208). Kaksi ihmisen mahalaukun epiteelin syövän solulinjoissa (MKN45 ja AGS) saatiin Health Science Research Resources Bank Japanissa ja ylläpidettiin RPMI 1640 väliaineessa (GIBCO BRL, Grand Island, NY) ja F-12 väliaine (GIBCO BRL, Grand Island, NY), joka sisälsi 10% FBS: ää 37 ° C: ssa kostutetussa ilmakehässä, (95%), jossa oli 5% CO 2. Soluja aliviljeltiin joka toinen päivä. Ennen bakteeri-infektio tutkimuksessa, soluja inkuboitiin antibioottia RPMI 1640 elatusaineessa, joka sisälsi 10% FBS: ää yön yli 37 ° C: ssa, 5% CO 2.
Bakteerit ja viljelyolosuhteissa
Bakteerikanta (HP238 ) eristetty kliinisestä potilaan on käytetty. HP238 ilmaisi CagA, VacA, ja Baba proteiinit aiemmissa tutkimuksissa [28, 29]. Bakteerit ylläpidetään Brucella-agar levyn sisältää 10% hevosen seerumia ja inkuboitiin mikro-aerophilic olosuhteissa (10% CO 2, 5% O 2 ja 85% N 2) 24-48 tuntia. Bakteerit siirrettiin sitten PBS: llä, ennen kuin infektoimaan soluja. Kasvua tiheys mitattiin spektrofotometrisesti 600 nm: ssä. Tarttuvan annos bakteereita oli 1 x 10 8 bakteeria /ml OD 1.
MKN45 solut infektoitiin infektiokertoimella (MOI) 1-100 eri ajanjaksoina. Probiootti kanta, joka sisältyy AB-jogurtti, Lactobacillus acidophilus
(LA5 ®, peräisin Chr. Hansen, Tanska, mikäli presidentti Corp., Tainan, Taiwan) käytettiin. Bakteerit ylläpidetään Brucella-agar, inkuboitiin anaerobisissa olosuhteissa, ja sen jälkeen talteen ja suspendoidaan fosfaattipuskuroituun suolaliuokseen (PBS) ennen infektiota. Elinkelpoiset tiheys L. acidophilus
oli 1 x 10 8 bakteeria /ml OD 1.
MKN45 solujen elinkelpoisuutta altistumisen jälkeen helikobakteeri
ja L. acidophilus

sytotoksisuus MKN45 solun altistumisen helikobakteeri
ja L. acidophilus
määritettiin prosenttiosuutena (LDH) vuodon (sytotoksisuusmääritys, Promega Co., Madison, WI, USA) ja arvioimalla Elävien solujen laskenta käyttämällä ei-värjättyä trypansininen. Viljelmän supernatantista ja loput MKN45 solut kerättiin sen jälkeen, kun oli inkuboitu vaihtelevalla annoksilla (MOI 1-1000) L. acidophilus
ja H. pylori
(MOI 100) 8, ja 4 tuntia. Soluviljelmät ilman bakteeritartunta toimivat vertailuryhmänä. Menettelyt suoritettiin mukaan ohjekirjoja ja post-infektion solujen ei-värjättiin trypaanisinisellä värjäystä laskettiin suoraan.
Entsyymisidottuja immunologiseen sorbentin (ELISA) ja sytokiinien
määrittää optimaalisen annoksen ja inkubointia aika eri bakteereja, bakteerit (H. pylori
ja L. acidophilus
) viljeltiin MKN45 soluja (MOI 1-100) in antibioottia RPMI 1640 väliainetta (5 ml), joka sisälsi 10% FBS: ää 35 ° C mikro-aerophilic olosuhteissa jopa 8 tuntia. Kokeellisessa tutkimuksessa, L. acidophilus
lisättiin MKN45 soluihin ja inkuboitiin 8 tuntia samoissa olosuhteissa. Sen jälkeen, kun PBS pesu ja poistamisen basilleja, yhtä suuri tilavuus H. pylori
lisättiin ja soluja inkuboitiin vielä 4 tunnin ajan. Lopullinen viljelmän supernatantti sentrifugoitiin 12000 rpm 5 minuutin ajan bakteerien poistamiseksi ja solujäte. Pitoisuuksia TNF-α, IL-8 (R &D System, Minneapolis, MN), ja TGF-β1 (eBioscience, San Diego, CA) mitattiin ELISA: lla mukaisesti valmistajan ohjeiden mukaisesti. Absorbanssi Kunkin mikro-levy luettiin Spectro-fotometrin avulla 450 nm: n ensisijaisena aallonpituus 570 nm ohjearvon aallonpituus. Kaikki kokeet tehtiin kolminkertaisina.
Valmistaminen soluliman ja tumauutteiden
MKN45 ja AGS soluja esikäsiteltiin L. acidophilus
8 tuntia, minkä jälkeen eri annoksilla H. pylori
varten 1 tunti; Sitten soluliman ja ydin- uutteet eristetään Nuclear Extract Kit (Active motiivi, Japani). Lyhyesti, solut pestiin jääkylmällä suolaliuoksella, joka sisälsi fosfataasiestäjät ja pelletöityä. Solupelletit sitten uudelleen suspendoitiin hypotoniseen puskuriin ja inkuboitiin 15 minuutin ajan jäillä. Ne lyysattiin lisäämällä detergenttiä ja vorteksoitiin voimakkaasti 10 s. Jälkeen tumat pelletoitiin ja suspendoitiin uudelleen täydelliseen lyysipuskuria, putki ravisteltiin voimakkaasti 4 ° C: ssa 30 minuuttia ravistelijassa. Ydin- uutteet sentrifugoitiin ja supernatantit jaettiin eriin ja säilytettiin -80 ° C: ssa.
RT-PCR sytoplasmisen Smad7
Kokonais-RNA eristettiin MKN45 soluista käyttäen kaupallista pakkausta (IMPROM-ll ™ Reverse Transcription System , Promega, USA) jälkeen helikobakteeri
ja L. acidophilus
inkubointi. RNA kvantitoitiin määrittämällä absorbanssi 260 nm: ssä. Yksi μ
g RNA: ta muutettiin cDNA: ksi, joka säilytettiin -72 ° C: ssa käyttöön asti. Ihmisen Smad7-alukesekvenssit olivat eteenpäin 5'-CATCACCTTAGCCGACTCTG-3 'ja reverse 5'GTCTTCTCCTCCCAGTATGC-3', tuottaa 224 bp: n fragmentti [30]. Sillä Jak1 ja STAT1, alukesekvensseissä olivat eteenpäin 5'-GCAGCCAGCATGATGAGA-3 'ja 5'-GTGGACGAGGTTTTGTAAGGA-3' ja reverse 5'- CTCGGAAGAAAGGCCTCTG-3 'ja 5'-CAGACACAGAAATCAACTC-3', tuottaa fragmentit 607 emäsparin ja 518 bp, vastaavasti [31, 32]. PCR ehto oli seuraava; 95 ° C: ssa 5 min, jota seurasi 25 syklin 95 ° C 1 min, 56 ° C 1 min, ja 72 ° C 1 min, ja lopuksi 72 ° C: ssa 7 min. Alukesekvenssejä ihmisen β-aktiini ahkeroinut 5'-GTCTTCCCCTCCATCGTG-3 'ja reverse 5'- GTCATCTTCTCGCGGTTG-3', tuottaa 272 ep: n fragmentti. Monistusolosuhteet olivat seuraavat: 95 ° C 5 min, sitten 20 syklin 95 ° C: ssa 1 min, 50 ° C 1 min, 72 ° C 1 min, ja 72 ° C: ssa 7 min.
Western blotting NF-KB: n, IKB-α ja Smad7
interferoni gamma (IFN-γ) (PeproTech Inc., NJ, USA) 50 ui (100 ng /ml) lisättiin kuhunkin maljaan kokeelliset tutkimukset. Sytoplasmisen ja ydin- uutteet pestiin jääkylmällä PBS: llä ja lyysattiin 0,5 ml /kuoppa lyysipuskuria (150 mmol /l NaCI: a, 20 mmol /l Tris, pH 7,5, 0,1% Triton X-100, 1 mmol /l fenyylimetyylisulfonyylifluoridia [PMSF] ja 10 ug /ml aprotiniinia) muutetun raporteista Kim et al. ja Moon et al. [33, 34]. Proteiinikonsentraatiot lysaateissa määritettiin käyttäen Pierce BCA Protein Assay Kit (Thermo tieteellinen, USA). Proteiinia /kaista 10 ug sitten koko-fraktioidaan denaturointia, ei-pelkistävä 10% polyakryyliamidia minigeelillä ja siirrettiin elektroforeettisesti polyvinylideenifluoridia (PVDF) (0,45 um huokoskoko) (Millpore Corparation, USA).
Erityiset proteiinit olivat havaitaan käyttämällä kanin antihumaani NF-KB: n p65: n, kaniinin anti-ihmis-IKB-α (1: 1000, Cell Signaling, Boston, MA, USA), ja hiiren anti-ihmisen Smad7 (1: 500, R &D System, USA, MN ) kuten ensisijainen vasta-aineita, ja peroksidaasi-konjugoitua anti-kani-IgG, anti-hiiri-IgG: tä (1: 10000) toissijaisena vasta-aineena. Erityisesti sitoutunut peroksidaasi havaittiin Chemiluminescent HRP Substrate (ECL-järjestelmää, Millpore Corparation, USA), ja sitten altistettiin röntgen- (GE Healthcare, UK) ja 10-30 s.
Tilastollinen analyysi
Studentin t
testi ja pariksi t
testiä käytettiin tarvittaessa parametriselle eroja. Yksisuuntainen varianssianalyysi (ANOVA), jossa Bonferronin korjausta sovellettiin useita testaus tietoa. Mann-Whitneyn U
testiä käytettiin eroa ei-parametriset tietoja, kun Pearsonin χ
2 testiä käytettiin epäparametrinen suhteessa eroa. Kaikki testit kaksisuuntaisia ​​ja P
< 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
Solujen elävyys inkubaation jälkeen helikobakteeri
ja L. acidophilus
sytotoksisuus ja elinkelpoisuus MKN45 soluja inkuboitiin helikobakteeri
( MOI 100) ja L. acidophilus
(MOI 1-1000) määritettiin arvioimalla prosenttiosuus vuoto LDH ja ei-värjättiin trypaanisinisellä on 4 th ja 8 th tuntia, vastaavasti (taulukko 1 ). Solukalvon vaurioita arvioitiin prosentteina LDH vuotoja MKN45 jälkeen H. pylori
inkuboinnin (18,1%) ei ollut erilainen kuin valvonta-solujen (18,0%). Lisäksi elävien solujen määrä laskettiin ei-värjättyä trypansininen eivät merkittävästi vähennä. Kun L. acidophilus
inkuboitiin MKN45 solujen 8 tuntia, sytotoksisuus ja elävien solujen määrä MOI 1-100 ei vaikuta merkittävästi. Kuitenkin LDH vuoto ja solukuolemaa hieman lisääntyi inkubaation MOI 1000 8 tuntia. Siksi optimaalinen annos bakteerien käytetty kokeellinen tutkimus rajoittui MOI 100.Table 1 Cell Sytotoksisuus ja elinkelpoisten solujen määrä on MKN45 jälkeen koinkubaation kanssa H. pylori
ja L. acidophilus
suoritetaan prosentteina LDH vuoto (kolmena kappaleena) ja ei-värjätään trypaanisinisen (single) B Bakteerit ja MOI
Cytotoxicitya (% LDH)
elävien solujen luku count (x 106)
Cell vain 4 ja 8 tuntia
18,0, 18,0
1,36
H. pylori
4 tuntia
MOI 100
18,1
1,00
Lactobacillus
8 tuntia
MOI 1
18,4
1,00
MOI 10
18,0
1,11
MOI 100
18,7
1,24
MOI 1000
24,2
0,77
kKaikki sytotoksisuustiedot esitettiin keskiarvon kolmen testin
H . pylori
stimuloidaan IL-8 ja TNF-α mutta ei TGF-β1 tuotanto in vitro
in MKN45 soluja inkuboitiin helikobakteeri
(MOI 100) eri ajankohdat, IL 8 taso kasvoi 4 nnestä 8 th tunnin kuluttua koinkubaation, määritettynä ELISA: lla (kuvio 1A). TNF-α, jälkeisen inkubaation tason nousi jälkeen 4 th tunti ja pidettiin tasanne, kunnes 8 th tunti (kuvio 1 B). Kuitenkin, TGF-β1 tasolla ei lisätä sen jälkeen, kun H. pylori
inkuboitu 4 tuntia (dataa ei esitetty). Kuvio 1 (A) IL-8 ja (B) TNF-α pitoisuudet supernatantissa MKN45 solujen viljelmän pituus vaihtelee H. pylori ja L. acidophilus infektion (MOI = 100). Data ilmaistiin keskiarvoina ± keskihajonta (SD) (kolmena kappaleena).
Sen sijaan, L. acidophilus
ei indusoinut IL-8, TNF-α, ja TGF-β1 ilmauksia MKN45 ainakin sisällä 8 tunnin co-inkubointijakson aikana.
esikäsittely L. acidophilus
heikennettyjä H. pylori aiheuttaman
IL-8
Koska IL-8 tason MKN45 soluja voidaan indusoida H . pylori
haaste 4 tuntia, ajasta ja annoksesta riippuvaa probioottien vähentämisessä proinflammatoristen sytokiinien ja TGF-β1 on 4 th tunti tutkittiin. IL-8 ja TGF-β1 pitoisuuksia esitetään MKN jotka altistettiin helikobakteerin
ja erisuuruisia L. acidophilus
esikäsittely 8 tuntia (kuvio 2). Verrattuna kontrolliryhmään, L. acidophilus
esikäsittely suurempi bakteerien pesäkelukua (MOI 100) alennetaan helikobakteeri
n aiheuttamaa IL-8 ilmaisuja MKN45 soluissa (P
< 0,05). TGF-β1 tason ei muuttunut (P
> 0,05). Kuvio 2 pitoisuudet IL-8 (tyhjä sarake) ja TGF-β1 (musta pylväs) supernatantissa MKN45 solujen esikäsiteltiin eri MOI (0: kontrolli, 1: 1 x 10 6 cfu; 10: 1 x 10 7 pmy; 100: 1 x 10 8 cfu) L. acidophilus. Solut pestiin kolmesti PBS: llä poistamaan L. acidophilus
ja infektoitiin sitten H. pylori
(MOI = 100) 4 tuntia. Tiedot ilmaistaan ​​keskiarvoina ± SD (kolmena kappaleena). Tilastollinen analyysi suoritettiin jokaisessa mittauksessa vertailuja säätimet (solut käsitellään helikobakteeri
vain, IL-8 2034 ± 865 pg /ml ja TGF-β1 587,2 ± 39,8 pg /ml) (* P
<0,05).
L. acidophilus
vähennetään H. pylori aiheuttaman
NF-KB lisäämällä IκBα
tutkimuksessa määritettiin, että MKN45 solut (MOI 100) inkuboitiin helikobakteeri
johtanut huippuunsa lisäys ydin- NF-KB tuotanto tunnin kuluessa. Näin ollen ydin- NF-KB: n tasot MKN45 solujen yhteistyötä inkuboitiin H. pylori
, kun ennen esikäsittely eri MÕIS (1-100) L. acidophilus
testattiin anti-inflammatorisia vaikutuksia probioottien . Esikäsittely L. acidophilus
lisääntynyt soluliman IκBα mutta pienensi ydin- NF-KB tasot aiheuttama helikobakteerin
annoksesta riippuvalla tavalla (kuva 3). Koska IκBα tasolla voitaisiin välittää aktivoimalla TGF-β1 /Smad signalointireitin, rooli Smad7 pelataan L. acidophilus
palauttamiseksi TGF-β1 /Smad toimintaa sen jälkeen Helikobakteeri
haaste testattiin. Kuvio 3 IκBα ja NFKB ilmaisuja jälkeen erilaisten annosten L. acidophilus esikäsittelyn 8 tuntia ja sen jälkeen H. pylori inkuboimalla 1 tunnin ajan. N, MKN45 solu vain; P, H. pylori
, 1 x 108 c.f.u. käsittely 1 tunti; MOI 1, esikäsittely L. acidophilus
1 x 106 c.f.u. 8 tuntia, jonka jälkeen helikobakteerin
hoito 1 tunti; MOI 10, L. acidophilus
1 × 107 c.f.u. jonka jälkeen Helikobakteeri
hoito 1 tunti; MOI 100, L. acidophilus
1 × 108 c.f.u. minkä jälkeen H. pylorin
hoito 1 tunti (* P
< 0,05).
L. acidophilus
esti H. pylori
ja IFN-γ-indusoidun Smad7-ekspression
Kuvio 4A osoittaa, että esikäsittely suuriannoksista L. acidophilus
(MOI 100) 8 h estänyt helikobakteeri
indusoimaan Smad7 tuotannon semikvantitatiivinen RT-PCT. Verrattuna positiiviset kontrollit (AGS soluja co-inkuboitiin helikobakteeri
MOI 100), L. acidophilus
esikäsittely peräti MOI 100 vähensi helikobakteerin
indusoimaan Smad7 tuotannon RNA tason (P
< 0,05) kautta inaktivoinnin Jak1 ja STAT1 transkriptioiden. L. acidophilus
esikäsittely esti myös ilmentymisen IFN-γ-indusoidun Smad7-proteiini (P
< 0,05) in vitro
, jossa lisääntyminen myöhemmin sytoplasman IκBα (P
< 0.01) ja lasku ydin- NF-KB (P
< 0,01) (kuvio 4B). Kuva 4 esikäsittely L. acidophilus vähensi merkitsevästi JAK1 (MOI 1-100), STAT1 (MOI 10-100), ja Smad7, ja myöhemmät NFKB tuotannon jälkeen (A) helikobakteeri ja (B) IFN-γ hoitoa. N, AGS solu vain; P, H. pylori
, MOI = 100 (A, musta pylväs) ja 100 ng /ml IFN-γ (B, musta pylväs) käsittely 0,5 tuntia; MOI 1, 10, ja 100 tarkoitti esikäsittelyä L. acidophilus
1 x 106, 1 x 107, 1 x 108 c.f.u. 8 tuntia, vastaavasti, jonka jälkeen helikobakteerin
hoitoa 0,5 tuntia (* P
< 0,05; ** P
< 0,01).
Keskustelu
Ihmisen koskemattomuus näyttelee tärkeä rooli kehitettäessä entistä vakavia kliinisiä sairauksia jälkeen helikobakteeri
infektion vuoksi lisääntynyt proinflammatoristen sytokiinien ilmeet potilaiden mahalaukun limakalvon [6, 8]. Helikobakteeri
infektio voi aktivoida NF-KB mahalaukun epiteelin soluja ja myöhemmin säätää ylös IL-8-geenin transkriptio [4]. Yhdenmukaisia ​​aiempien ihmisen tutkimuksissa [6-9], esillä oleva tutkimus osoittaa, että H. pylori
infektio voi aiheuttaa TNF-α ja IL-8 proinflammatoristen sytokiinien ilmaisuja in vitro
. Yhteisymmärryksessä eläimen tutkimuksessa raportoitiin McCarthyn et al. [35] Esillä oleva tutkimus osoittaa, että jogurtti-probiootteja sisältävien, L. acidophilus
ei stimuloi proinflammatoristen sytokiinien jälkeen 8 tunnin inkubaation MKN45 soluja. Tämä viittaa siihen, että probiootit voidaan käyttää anti-inflammatorisia vaikutuksia in vitro
. Niinpä on mielenkiintoista testata, miten lehdustapahtumasarjojen voidaan torjua probiootteja.
Antimikrobinen Lactobacillus
suolistopa taudinaiheuttajia on osittain johtuu kertyminen maitohappo [17, 21]. Kyky maitohapon tuotanto vaihtelee Lactobacillus spp
. ja L. acidophilus
on alhainen maitohappo-tuotanto kannasta [34]. Kokeellisesti L. acidophilus
vähentää elinkelpoisuus helikobakteerin in vitro
riippumaton pH ja maitohapon tasot [19]. PH-arvo kunkin suspension tässä tutkimuksessa on noin 6,8-7,0 (tuloksia ei ole esitetty). Muut mekanismit, kuten immuno-modulaatio olisi siis osaltaan pitkälti tulehdusta vaikutuksia L. acidophilus
.
Nykyinen tutkimus osoittaa, että L. acidophilus
esikäsittely voi pienentää helikobakteerin
aiheuttama ydinaseiden NF-KB ilmentymisen 1 st tunti ja IL-8: 4 th tunti, kun rinnakkaisviljelemällä helikobakteeri
ja MKN45 soluja. Lisäksi TNF-α taso on myös vähentynyt, vaikka sen arvo on melko alhainen (tuloksia ei ole esitetty). Tämä tutkimus lisäksi vahvistaa, että tällaiset suppressio tapahtuu annoksesta riippuvaisella tavalla, ja välittyy vakauttamiseen IκBα. Havainto on sopusoinnussa tulosten Tien et al. osoittaa, että anti-inflammatoriset vaikutukset voidaan saavuttaa riittävä bakteereja lasketa probiootteja [12]. Tiedot Tässä tutkimuksessa osoittavat, että L. acidophilus
voidaan torjua H. pylori
indusoima mahan tulehdusta nimenomaan sovittelun kautta IκBα /NF-KB-reitin annoksesta riippuvalla tavalla.
Normaalissa suolen limakalvon solut, TGF-β1 signaali voi säädellä negatiivisesti NF-KB: n aktivoitumisen stimuloimalla negatiivinen säätelijä, IκBα [36]. H. pylori
infektion tiettävästi voi inhiboida TGF-β1 signaalireitin kautta aktivoinnin mahalaukun Smad7-ekspression [26]. Tutkimuksessa todetaan myös, että molemmat H. pylori
ja L. acidophilus
eivät vaikuta TGF-β1 tuotanto mahalaukun epiteelisolujen, mikä jälleen vahvistaa, että L. acidophilus
säätelee TGFp 1 /Smad3 loppupään toimintaa palauttamalla Smad7. Tämä tutkimus on ensimmäinen, joka osoittaa, että L. acidophilus
voi alas-säädellä Smad7 tuotannon palauttamiseksi TGFp 1 /Smad aktiivisuutta ja lieventämiseksi helikobakteerin
indusoimaan mahalaukun tulehdus in vitro
(kuva 5 ). Kuva 5 Kaaviokuva havainnollistaa mahdollisia polkuja L. acidophilus eston helikobakteeri indusoima tulehdus mahalaukun epiteelin läpi TGF-β /Smad3, IFN-γ /Smad7, ja NFKB signaaleja.
Smad7 voidaan myös indusoida normaalissa mahalaukun näytteistä IFN-γ kautta STAT1 riippuvaisen reitin [26]. Itse asiassa, mahalaukun epiteelin ei ole salaisia ​​IFN-γ. Siksi helikobakteeri
(up-asetus) ja L. acidophilus
(alassäätöä) sekä merkittävästi säätelee Smad7 epiteelissä soluihin sovittelu STAT1 riippuvan Smad7 reitin. Inhiboivaa Smad7 voi palauttaa TGF-β1 /Smad3 signalointi ja johtaa tukahduttaminen tulehduksellisten sytokiinien tuotanto potilailla, joilla on tulehduksellinen suolistosairaus [37, 38]. Tiedot tässä paljastaa, että probiootit sisältämä jogurtti voivat ehkäistä Smad7 vähentämiseksi helikobakteeri
liittyvä mahalaukun tulehdus. Tällaiset probiootit voivat olla varsin lupaava parantamiseen helikobakteeri
infektioiden hallintaan.
Johtopäätökset
Jogurtti sisältävän L. acidophilus
voi parantaa helikobakteerin
indusoima mahan tulehdus läpi inaktivaatiota Smad7 ja NF-KB: n välittämää reittejä. Saanti L. acidophilus-
sisältävä jogurtti voi parantaa maha- tulehdusta helikobakteeri
infektoiduista potilaista.
Julistukset
Kiitokset
tutkimuksessa tukivat avustuksia National Cheng Kung yliopistollinen sairaala, Tainan, Taiwan (NCKUH-9701013 ja NCKUH-9904011), National Science neuvosto, Taiwan (NSC97-2314-B-006-032), ja Department of Health, Taiwan (DOH99-TD-C-111-003). Kirjoittajat julistaa, että ei ole taloudellista suhdetta tahansa yhtiö, tässä tutkimuksessa, ja että ei ole eturistiriitoja.
Kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitettu tiedostot kuvat. 12866_2011_1606_MOESM1_ESM.jpeg Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 12866_2011_1606_MOESM2_ESM.jpeg Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 12866_2011_1606_MOESM3_ESM.jpeg Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 3 12866_2011_1606_MOESM4_ESM.jpeg Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 4 12866_2011_1606_MOESM5_ESM.jpeg Kirjoittajien alkuperäisen tiedoston luku 5 12866_2011_1606_MOESM6_ESM.jpeg Kirjoittajien alkuperäisen tiedoston luku 6

• Anti-ulcerogenic aktiivisuus juuri kuori ote Afrikkalainen kultasade "Cassia sieberiana" ja sen vaikutus antioksidantti puolustusjärjestelmää in rats
• Gastroparesis liittyvät gastroptosis esittää kuin alavatsan täyteaineena massa lapsi: tapaus report