Vyhodnotenie akútnej toxicity a žalúdočným činnosti kurkumy purpurascens BI. podzemok proti etanolom indukované zmeny žalúdočnej sliznice u potkanov

Vyhodnotenie akútnej toxicity a žalúdočným aktivity kurkuma purpurascens
BI. podzemok proti etanolom indukované zmeny žalúdočnej sliznice u potkanov
abstraktné
pozadia
Curcuma purpurascens
BI. je liečivá rastlina z čeľade Zingiberaceae, ktorý je široko používaný ako korenie a ako ľudovom liečiteľstve. Cieľom tejto štúdie je zistiť, pred žalúdočným prostredím aktivita C purpurascens
podzemok hexán extrakt (CPRHE) proti etanol vyvolanej žalúdočné vredy u potkanov.
Metódy
sa Skúška akútnej toxicity na 36 potkanoch (18 mužov a 18 žien) s nízkou dávkou CPRHE (1 g /kg), vysokou dávkou CPRHE (2 g /kg) a vozidlá (5% Tween 20). Ak chcete zistiť pred žalúdočným účinok CPRHE, žalúdočnej šťavy kyslosti, hrubý a histologických žalúdočných lézií obsah hlienu a index vred boli hodnotené v vredu etanolom vyvolaného u krýs. Okrem toho boli skúmané superoxiddismutáza činnosť, dusičná hladina oxidu a imunohistochemické vyhodnotenie Bax a HSP70 proteínov.
Výsledky
testu CPRHE akútnej toxicity na potkanoch neukázali žiadne známky toxicity úmrtnosti a až 2 g /kg , Orálne podávanie CPRHE v dávkach 200 mg /kg a 400 mg /kg a omeprazolom (pozitívna kontrola) v dávke 20 mg /kg potkanom pozoruhodne oslabenej žalúdočné lézie vyvolané etanolom. Predúprava potkanov s CPRHE významne doplniť vyčerpania obsahu hlienu spôsobené podaním etanolu a zníženie kyslosti žalúdočného stien. Ďalšie skúmanie žalúdočnej sliznice homogenátu vyplynulo, že zvýšenie aktivity superoxiddismutázy a oxidu dusnatého a zníženie hladiny malondialdehydu vo CPRHE-liečenej skupiny v porovnaní s kontrolnou skupinou lézie. Histologické zhodnotenie žalúdočných stien získaných z potkanov liečeným CPRHE demonštroval pozoruhodnú pokles hemoragickej slizničných lézií. Imunohistochemické farbenie ukázalo, down-regulácia Bax proteínu a up-regulácia Hsp70 bielkovín.
Záver
vzaté, tieto zistenia potvrdila žalúdočným účinok kurkuma purpurascens
podzemok proti poškodeniu žalúdočnej.
Kľúčové slová
Curcuma purpurascens
Zingiberaceae Akútna toxicita Žalúdočné etanol Omeprazol pozadie
vred je lézie alebo opar, ktorý všeobecne týka sliznice alebo kože tela. V tráviacom systéme, peptický vred v sliznici žalúdka alebo dvanástnika je dráždivý ochorenie, ktorá postihla znateľný časť svetovej populácie [1]. Narušenie v ochranný účinok na žalúdočnú sliznicu proti žalúdočnej kyseliny je častou príčinou vredovej choroby [2]. Štúdie ukázali, že etiológie tohto ochorenia súvisí s fajčením cigariet, stresu, infekcií, výživové nedostatky a konzumácia alkoholu [3]. Helicobacter pylori infekcie
najmä prispieva k vzniku 90% dvanástnikových vredov a 80% žalúdočných vredov [4]. Okrem toho, podávanie nesteroidných protizápalových liečiv zostáva ako jedna z príčin súvisiacich s drogami vredovej choroby [5]. V posledných rokoch sa expozície človeka na rôznych škodlivých chemických látok a činidiel významne zvýšené riziko žalúdočných útokov [6]. Početné protivredové látky, ktoré sú v súčasnej dobe používajú v na trhu, majú obmedzenú účinnosť a značné závažné vedľajšie účinky na ľudský organizmus [7]. Z tohto dôvodu, skríning nových činidiel schopných liečenie peptických vredov musí pokračovať s cieľom nájsť zlúčeniny, so zníženými vedľajšími účinkami pri zachovaní vysokej terapeutickej účinnosti.
Vývoj farmaceutických výrobkov závisí v podstate na nutraceutík, vrátane rozsiahlej série kategórií, ako sú korenie, bylinné produkty, doplnky stravy a funkčných potravín [8]. Početné rastliny z rôznych taxonomických rodiny boli študované pre ich anti-vredovej aktivity [5, 9-11]. Jeden taký taxonomické rodina s rozsiahlymi liečivými použitie proti žalúdočným slizničných lézií je Zingiberaceae. Početné druhy rastlín v tejto rodine, ako je Boesenbergia rotunda
[9], Curcuma longa
[12], Zingiber officinale
[7], Alpinia galanga
[13] a Elettaria cardamomum
[14] boli objasnené ich gastroprotektívnymi vlastnosti.
Curcuma purpurascens
BI. Je členom rodiny Zingiberaceae. Táto rastlina pôvodne rástol v Indonézii a jeho podzemok sa používa ako korenie [15]. C. purpurascens
rastlina bežne známy tiež ako "Temu tis" a "Koneng tinggang" Bolo hlásené, že majú rozsiahle tradičné využitie vo vidieckych komunitách, podobne ako ďalšie kurkuma
druhov [15, 16]. Podzemok tejto rastliny sa používa v ľudovej medicíne pre ošetrovanie rán, svrab, svrbenie, horúčka, kašeľ a varí. Zmes z podzemkov s Alyxia stellata
sa používa ako obklad po pôrode [15]. Napriek týmto tradičných aplikácií, nie je tam žiadny vedecký prieskum pre potenciálnych bioactivities tejto rastliny. Vzhľadom k tomu, prírodné produkty s dlhou históriou ľudovej aplikácia môže poskytnúť nové terapeutické prístupy k liečbe rôznych ochorení a ochorení [17], súčasná štúdia sa vykonáva pre vyhodnotenie akútnu toxicitu a gastroprotektívnymi aktivitu C. purpurascens
podzemok proti ulcerácia u potkanov etanolom indukovanej.
Metódy
Chemical a drogy
v tejto štúdii omeprazol ako referenčné anti-vredu liek bol získaný z University of Malaya Medical Center a rozpustí sa v 10% Tween 20 (Merck , Nemecko). Zriedenie Tween 20 (5% v /v) bol použitý ako vo vozidle.
Odber
C. purpurascens
podzemok sa oddelí od Yogyakarta. Botanická identifikácia bola vykonaná pán Teo Leong Eng., Prírodovedecká fakulta Univerzity Malajska. Poukážka vzorka KL 5793 bol uložený v herbári Katedry chémie Prírodovedeckej fakulty Univerzity Malajska, Kuala Lumpur, Malajzia.
Príprava extraktu
pri sušení na vzduchu a práškových odnoží (1,0 kg) boli macerované n-hexánu pri teplote miestnosti po dobu troch dní. Výsledný filtrát z podzemku sa odparí na rotačnej odparke pri teplote 40 ° C a skladované pri -20 ° C až do použitia. C. purpurascens
podzemok hexán extrakt (CPRHE) sa rozpustí v karboxymetylcelulózy pre in vivo štúdie
zvierat.
Plynová chromatografia CPRHE
Analýza extraktu hexánu bola vykonaná za použitia Agilent a LECO Restek , RXI-5ms kapilárna kolóna (30 m, 0,25 mm vnútorný priemer, 0,25 um hrúbka filmu) a hmotnostný spektrometer Pengasus HT vysokú priepustnosť TOFMS, ako bolo opísané skôr [18]. Zlúčeniny boli identifikované na ich hmotnostný spektra porovnaním retenčných časov vrcholov s výkladom MS fragmentácii vzorov z knižnice dát.
Zvieratá a etické otázky
zdravá žena a muž Sprague Dawley
krýs (150-180 g, 6-8 týždňov staré) boli získané zo zvierat experimentálne oddelenia lekárskej fakulty univerzity Malajska, Kuala Lumpur, Malajzia. Zvieratá bola umiestnená v izolovanej kabíne v kontrolovaných podmienkach teploty (~ 24 ° C), vlhkosťou (~ 50%) a ľahký (denný pomer 1: 1). Boli zvieratá prístup k štandardnej potkania peliet a RO vodou. Všetky experimenty zvieracie vykonávali v súlade s National Institutes of Health Guide pre starostlivosť a využitie laboratórnych zvierat a s predchádzajúcim súhlasom príslušného výboru Domu zvierat, Lekárska fakulta Univerzity Malajska (etika č 2014-03 -05 /PHAR /R /ER).
štúdie akútnej toxicity
pre stanovenie bezpečného rozsahu dávok pre CPRHE, vyhodnotenie toxicita CPRHE bola vykonaná ako bolo opísané skôr [19]. V stručnosti, 36 krýs, z toho 18 mužov a 18 žien bolo rozdelených do troch skupín, označené ako vozidlo (5% Tween 20), nízkou dávkou CPRHE (1 g /kg) a vysokou dávkou CPRHE (2 g /kg). Potkany boli kŕmené 16 hodín pred podaním (voda bola dostupná s výnimkou posledného 2 h). V nadväznosti na dávkovanie, jedlo bolo zamedzí prístupu k ďalšej 1 až 3 hodiny. Akékoľvek iné známky toxicity a úmrtnosti boli ďalej zaznamenané v období dvoch týždňov. 15. deň boli zvieratá usmrtené pre hematologických a histologickú analýzu.
Etanol indukovanej žalúdočné vredy
Preventívne potenciál CPRHE proti povrchovým hemoragickej slizničných lézií boli sledované u normálnych krýs. Pred experimentom, Sprague Dawley krysí samci
hladovali počas 24 hodín (voda bola dostupná s výnimkou posledného 2 h). Tridsať potkany boli náhodne rozdelené do 5 skupín po 6 krysách každý a vopred ošetrené spôsobom (tabuľka 1). Po 1 h predúpravy, všetky krysy gavaged 5% Tween 20 (5 ml /kg) alebo absolútnom etanole (5 ml /kg) na základe zvieracieho experimentálny dizajn. Krysy boli usmrtené 1 h neskôr sa cez-dávky xylazínu a ketamínu a ich žalúdky boli okamžite excised.Table 1 Experimentálne dizajn a špecifikácie zvieraťa študijných skupín
Popis

Predúprava
Treatment
spoločnosťou Group systémom
normálne kontroly
5% Tween 20 (5 ml /kg)
5% Tween 20
Skupina B
Riadenie lézie
5% Tween 20 (5 ml /kg)
absolútny etanol
skupina C
s kontrolnou skupinou
Omeprazol (20 mg /kg)
absolútny etanol
skupina D
Experimentálne group1
CPRHE (200 mg /kg)
absolútny etanol
skupina E
Experimentálne group2
CPRHE (400 mg /kg)
absolútny etanol
stanovenie straty slizničnej obsahu a žalúdočnej šťavy kyslosti
žalúdka každej krysy bola vyrezané pozdĺž veľkého zakrivenia, a pH-meter titráciou s 0,1 N NaOH bol použitý pre analýzu koncentrácie vodíkových iónov v žalúdočných obsahu vyjadrený v mEq /cením. Potom, sklíčko sa nanesie na jemne škrípanie žalúdočnej sliznici potkanov s následnou váženie získaných hlienu s elektronickým Presné váhy.
Makroskopická analýza lézií
V súlade s niekoľkých štúdiách, vredy etanolom indukovanej na žalúdočnú sliznicu boli charakterizované ako pretiahnuté pásy hemoragických lézií paralelných k pozdĺžnej osi žalúdka [11, 20]. Poškodenie hemoragickej žalúdka bola stanovená hodnotením luminální povrch. Ochranný potenciál (P%) každého predpríprave sa vypočítal pomocou planimeter (10 x 10 mm 2) a mikroskopu (1,8 ×), kde UC a UT bol vred plocha kontrolnú a liečenú skupinu, v uvedenom poradí , Merania vredu plochy bola vykonaná ako bolo popísané v detaile Abdelwahab et al. [9]. P
%
=
U
C
-
U
T
U
C
×
100
Histologické hodnotenie žalúdočných lézií
Histologická analýza vzoriek žalúdočnej steny bola vykonaná za použitia 10% pufrovaného formalínu na fixáciu. Vzorky boli vložené do parafínu a následne 5 um rezy a farbenie hematoxylínom a eosínu.
Stanovenie peroxidácie lipidov aktivity pomocou kyseliny thiobarbiturové reagujúca látka testu
Pre meranie malondialdehydu (MDA) koncentrácia, vykonali sme kyseliny thiobarbiturové reagujúca látka (TBARS) test, ako je opísané skôr [21]. Stručne povedané, homogenizuje žalúdka (10% w /v) v 0,1 mol /l PBS sa odstredí pri teplote 4 ° C počas 10 minút. Potom sa supernatant (3 ml) sa zmieša s 20% roztokom kyseliny trichlóroctovej a 0,67% 2-thiobarbiturové kyseliny s následným zahrievaním vo vodnom kúpeli (95 ° C) po dobu 30 minút. Ďalej je koncentrácia MDA získaného supernatantu bola stanovená spektrofotometricky pri 532 nm. Koncentrácie proteínov boli vyjadrené ako MDA umol /g proteínu metódou Lowry [22].
Stanovenie superoxiddismutázy (SOD) aktivity
Aktivita SOD enzýmu bola stanovená stanovením jeho potenciálu pre potlačenie fotochemické reakcie NBT (nitroblue tetrazolium), ako bolo opísané skôr Sun et al [23]. V tomto teste sa homogenizuje tkaniva boli dvakrát centrifúguje pri teplote 4 ° C počas 10 a 20 minút. V tmavej komore, reakčné činidlo (1 ml, 50 mM fosfátový pufor, 100 nM EDTA a 13 mM L-metionín, pH 7,8) sa zmieša s Výsledný supernatant (30 ul), NBT (150 ul, 75 uM) a riboflavínu (300 ul, 2 uM). Výsledný roztok bol vystavený žiarivky (15 W) po dobu 15 min a absorbancia bola stanovená pri 560 nm pomocou spektrofotometra.
Dusičnej úroveň oxidu
Pre vyhodnotenie účinku CPRHE na oxidu dusnatého (NO) generácie v gastrointestinálnom trakte, Griessova reakcia bola použitá pre stanovenie celkovej hladiny dusitan /dusičnan, ako bolo opísané skôr Tsikas et al [24]. Stručne povedané, supernatant (50 ul) v žalúdku homogenizuje sa zmieša s činidlom Griess. Po 10 minútach, následná kolorimetrická analýza bola vykonaná pri 540 nm s použitím Tecan nekonečný 200 Pre mikrodesek (Tecan, Mannedorf, Švajčiarsko). Generované NO v živnej supernatante bola stanovená za použitia štandardnej krivky dusitanu sodného a výsledky boli vyjadrené ako umol dusitanov /dusičnanov na gram proteínu.
Imunohistochemické vyhodnotenie
imunohistochemické analýzu Bax a HSP70 proteínov bola vykonaná, ako bolo predtým popísané s určitými modifikáciami [25]. V stručnosti, boli tkanivá paraffinized v xyléne a rehydratované pomocou klasifikovaného alkoholu. Vriacej citrát sodný (10 mM) bol použitý pre sprístupnenie antigénu procesu s následným Imunohistochemické farbenie podľa výrobe je inštrukcie (DakoCytomation, USA). Po blokovanie endogénnej peroxidázy s peroxidáze blokom, Bax (1: 200), alebo Hsp70 (1: 500), boli použité biotinylizované primárne protilátky a boli rezy inkubované po dobu 15 minút. Ďalej boli rezy inkubované s príslušným množstvom streptavidín-HRP po dobu 15 minút. Ďalej boli rezy vystavené Diaminobenzidine substratechromagen po dobu 5 sekúnd, potom sa ponorí do slabej amoniaku (0,037 mol /l) pre desaťkrát. Hnedé škvrny na snímkach je uvedené pozitívne výsledky imunohistochemické farbenie ako pozorované pod svetelným mikroskopom.
Štatistická analýza
Všetky hodnoty boli uvádzané ako priemer ± SD. Štatistické signifikantné rozdiely medzi skupinami boli stanovené pomocou jednocestnej ANOVA nasledovanej viacnásobného porovnávacieho testu post hoc Tukeyho. Hodnota p
menšia ako 0,05 bola považovaná za významnú
Výsledky
Plynová chromatografia profil CPRHE
Ako je znázornené na obrázku 1, extrakt hexán bol charakterizovaný pomocou GC-MS-TOF .. Chromatogram ukázal, že hlavné zlúčeniny v CPRHE sú c-elemen (1), benzofuran, 6-vinyl-4,5,6,7-tetrahydro-3,6-dimetyl-5-isopropenyl (2), 3,7- cyclodecadien-1-on, 3,7-dimetyl-10- (1-methylethyliden) (3), turmerone (4) a curlone (5) (tabuľka 2). Obrázok 1 Typický plynový chromatogram. Chromatogram ukázal chemické zložky z C. purpurascens
hexán extrakt.
Tabuľka 2 Hlavnými bioaktívne zlúčeniny C purpurascens hexán výpis ako charakterizovaný pomocou GC-MS-TOF
Peak č

Name zlúčenín
retenčný čas (y)
omšu
1
c-elemen
1812.55
189
2
benzofuran, 6-ethenyl-4,5,6,7-tetrahydro-3,6-dimethyl-5-isopropenyl
1931.3
216
3
3,7-cyclodecadien-1-one,3,7-dimethyl-10-(1-methylethylidene)
2123.3
218
4
turmerone
2254.45
218
5
curlone
2326.55
218
Štúdie akútnej toxicity
V štúdie akútnej toxicity, všetky krysy prežil a neukázalo žiadne známky toxicity a abnormality v 1 a 2 g /kg dávky. Po dobu 14 dní, došlo neboli pozorované žiadne zmeny správania alebo zmeny telesnej hmotnosti a žiadne neobvyklé znaky. Ako je uvedené v tabuľke 3, sa sérové ​​biochemické parametre boli hlásené ako normálne. Hematologické analýza obličiek a pečene nevyvolal žiadne pozoruhodné zmeny v liečenej skupine v porovnaní s kontrolnou skupinou (obrázok 2). 50% orálny letálna dávka (LD 50) pre samcov a samíc potkanov bola vyššia ako 2 g /kg telesnej weight.Table 3 sérum biochemická analýza krýs. Vplyv CPRHE na (a) pre test funkcie obličiek, (b) hodnoty pečeňových testov a (c) hematológia analýza hlodavcov
skupiny na ochranu zvierat
Serum biochemickú analýzu
( a) obličiek biochemické parametre
sodný (mM /L)
draselný (mM /L)
chlorid (mM /L)
CO2 (mM /L)
aniónov (mM /L)
močovina (mmol /l)
kreatinínu (μ M /L)

zariadenia pre automobily
142,23 ± 0,45
4,85 ± 0,06
104,59 ± 0,45
23,89 ± 0,64
19,36 ± 0,48
5,28 ± 0,58
30,75 ± 1,87
CPRHE ( 1 g /kg)
143,54 ± 0,37
5,12 ± 0,72
106,24 ± 0,54
21,49 ± 0,73
19,58 ± 0,75
5,93 ± 0,43
29,81 ± 2,27
CPRHE (2 g /kg)
143,85 ± 0,82
4,91 ± 0,034
105,27 ± 0,56
22,85 ± 0,48
19,95 ± 0,39
5,68 ± 0,37
31.46 ± 2.19
skupiny zvierat
(B) Pečeňové biochemické parametre
celková bielkovina (g /l)
albumín (g /l)
globulín (g /l)
TB (μ mol /l )
CB (μ mol /l)
AP (IU /L)
ALT (IU /L)
AST (IU /L)
GMT (IU /L)
vozidlo
60,76 ± 0,94
9,56 ± 0,39
51,07 ± 1,28
2,19 ± 0,13
0,87 ± 0,17
154,45 ± 5,37
50,49 ± 1,34
173,82 ± 5,38
3,45 ± 0,27
CPRHE (1 g /kg)
58,37 ± 0,57
8,35 ± 0,53
50,68 ± 1,32
2,14 ± 0,16
0,91 ± 0,14
153,23 ± 5,87
45,65 ± 1,74
175,48 ± 6,49
3,37 ± 0,53
CPRHE (2 g /kg)
59,67 ± 1,29
8,87 ± 0,19
50,25 ± 1,45
2,15 ± 0,14
0,84 ± 0,16
155,73 ± 6,82
46,76 ± 1,48
176,27 ± 6,52
3,57 ± 0,43
skupiny zvierat
(c) Hematologické parametre
HGB (g /dl)
HCT (%)
RBC (10 6 /ul)
MCV (fL)
MCH (str)
MCHC (g /dl)
RDW ( %)
WBC (10 3 /ul)
krvných doštičiek (10 3 /ul)
Vehicle
15,03 ± 0,13
46 ± 0,00
9,38 ± 0,13
59,12 ± 0,65
19,25 ± 0,31
34,22 ± 0,19
17,03 ± 0,44
6,12 ± 0,47
986,75 ± 23,65
CPRHE (1 g /kg)
15,47 ± 0,13
46 ± 0,00
9,64 ± 0,18
58,54 ± 0,63
18,89 ± 0,36
34,04 ± 0,33
18,23 ± 0,58
6,23 ± 0,34
995,36 ± 25,32
CPRHE (2 g /kg)
15,98 ± 0,12
46 ± 0,00
9,83 ± 0,16
57,78 ± 0,76
18,59 ± 0,29
33,93 ± 0,28
18,77 ± 0,34
6,31 ± 0,39
1011,52 ± 23,18
hodnoty vyjadrené ako priemer ± SEM. ALT, alanínaminotransferázy; AST, aspartátaminotransferázy; AP, alkalická fosfatáza; CB, konjugovaný bilirubín; GGT: G-glutamyl transferáza; HCT, hematokritu; HGB, hemoglobín; MCH, zlý korpuskulárne hemoglobín; MCHC, zlý korpuskulárne koncentrácia hemoglobínu; MCV, stredný objem erytrocytov; RBC, počet červených krviniek; RDW, červená šírka distribúcie bunka; TB: celkový bilirubín; WBC, bielych krviniek.
Výsledky neukázali žiadny významný rozdiel medzi skupinami.
Obrázok 2 histologických rezov. Histopatologické vyšetrenie obličiek (prvý riadok) a pečene (druhý riadok) v štúdie akútnej toxicity zastupujúci krýs ošetrených vehikulom (5% Tween 20), CPRHE (1 g /kg) a CPRHE (2 g /kg). Výsledok nevykazovali významné rozdiely v štruktúrach obličiek a pečene medzi experimentálnej a kontrolnej skupiny (20 x zväčšenie).
PH žalúdočného obsahu a stanovenie produkcie hlienu
kyslosti žalúdočného obsahu u hlodavcov podávaná perorálne s etanol bol významne vyšší v porovnaní s normálnou kontrolnej skupiny, ako je uvedené v tabuľke. 4. Po ošetrení s omeprazolom (pozitívna kontrola), kyslosť výrazne oslabenej (P <
0.
05) a zvieratá liečeným CPRHE pri vysokej dávke a nízkou dávkou vyvolalo významný (P <
0.
05) zvýšeniu pH. Žalúdočný obsah hlienu bola významne ochudobnený zvierat vopred ošetrených s etanolom. Medzitým, omeprazol a liečba CPRHE významne doplnil stratu v obsahu slizničnej P <
0.
05, tabuľka 4). Závery oboch parametrov navrhol Antiulcerózum účinok CPRHE.Table 4 žalúdočným účinku CPRHE proti žalúdočným zraneniu etanolom vyvolaného
skupiny na ochranu zvierat
skupiny zvierat
pH žalúdočnej tkaniva
Hlien Hmotnosť (g)
vred plocha (mm) 2
inhibície (%)
MDA (pmol /g proteínu)

SOD (U /g bielkovín)
oxid dusnatý (pmol /g proteínu)
a Bežná kontrola
7,02 ± .004
0,89 ± 0,03
- -
10 ± 1,1
528 ± 16,51
10 ± 1,3
B
ovládanie lézie
2,99 ± 0,17
0,41 ± 0,01
880 ± 16,23 -
28 ± 2,98
333 ± 9,98
5,9 ± 0,47
C
Liečba ovládanie
6,14 ± 0,24 *
0,79 ± 0,03 *
195 ± 8,97 *
77
13 ± 0,71 *
481 ± 12,22 *
9,1 ± 1,4 *
D
CPRHE (200 mg /kg)
4,47 ± 0,09 *
0,68 ± 0,02 *
455 ± 12,24 *
48
21 ± 0,22 *
393 ± 7,67 *
7,6 ± 0,8 *
E
CPRHE (400 mg /kg )
5,82 ± 0,41 *
0,72 ± 0,02 *
325 ± 10,67 *
63
17 ± 0,41 *
459 ± 10,73 *
8,4 ± 0,9 *
všetky hodnoty sú vyjadrené ako priemer ± SD. * Označuje (P
menšie ako 0,05) v porovnaní s kontrolnou skupinou (B) lézie. CPRHE: C. purpurascens
podzemok hexán extrakt
makroskopické vyšetrenia žalúdočné lézie
podávanie etanolu na potkany indukované nápadné čiernej hemoragické lézie v žalúdočnej steny (obrázok 3B) s vredu ploche 880 ± 16,23. (mm) 2 (tabuľka 4). Ako je znázornené na obrázku 3, hlodavce premedikáciou CPRHE (obrázok 3D a E) a omeprazolom (obrázok 3C) sa výrazne znižuje oblasti tvorby žalúdočných vredov v porovnaní s kontrolnou skupinou lézie (obrázok 3B). Predúprava potkanov s CPRHE v dávkach 200 mg /kg a 400 mg /kg potlačil vznik vredu oblasti na 455 ± 12,24 (mm) 2 a 325 ± 10,67 (mm) 2, čo bolo porovnateľné na tlmivý účinok omeprazolu 195 ± 8,97 (mm) 2. Výskyt vredov bola znížená o 48% a 63% po ošetrení CPRHE v dávkach 200 mg /kg a 400 mg /kg, v danom poradí (tabuľka 4). Stojí si uvedomiť, že liečba CPRHE pomohla vyrovnať sa žalúdočnej sliznice záhyby u hlodavcov (Obrázok 3D a E). Obrázok 3 Hrubá vyhodnotenie. Výsledky ukázali, že hlodavce liečeným (C) omeprazolu a CPRHE v dávkach (D) 200 mg /kg, a (E) 400 mg /kg sa znížil viditeľne oblasti tvorby žalúdočných vredov v porovnaní s kontrolou (B) vredov. (A) Normálna kontrolná skupina nepreukázali žalúdočné tvorbu lézií.
Histologické hodnotenie žalúdočných lézií
Mikroskopický rozbor žalúdočných lézií v kontrolnej skupine vredy vyvolané rozsiahle poškodenie žalúdočnej sliznice z hlodavcov, vyznačujúci sa tým narušenie povrchu epitelu a hlboko prenikol nekrotické lézie, do sliznice spojené s výraznými leukocytov infiltráciou a ťažké opuchy submukóznu vrstvy (Obrázok 4B). Predbežné ošetrenie CPRHE (Obrázok 4D a E) a omeprazolom (Obrázok 4C) odhalila ochranný účinok redukciou vo leukocytov infiltráciu a submukóznu edém. Doplňovanie straty v obsahu mucus CPRHE bol potvrdený Stumpy množstvo purpurovou farbou na histologickú analýzu v porovnaní s kontrolnou skupinou (obr 4D a E). Výsledky ukázali, že CPRHE predbežné spracovanie pri vysokej dávke a nízkou dávkou výrazne narušený zničenie etanolu vyvolané žalúdočnej sliznice. Obrázok 4 Histologické vyšetrenie. Histopatológie hlodavcov dopredu reagovať s (C) omeprazolu alebo CPRHE v dávkach (D) 200 mg /kg, a (e) 400 mg /kg v porovnaní s kontrolnou skupinou (B) lézie. (A) Normálna kontrolná skupina preukázala normálnu histologickú štruktúru. (H a E stain10 ×).
Posúdenie žalúdka malondialdehydu a superoxiddismutasy
na stanovenie účinkov na peroxidáciu lipidov a oxidatívny stres, sme stanovili hladiny MDA v žalúdku tkanivového homogenátu. Po ošetrení sa etanolom, hladina MDA (28 ± 2,98 mmol /g) bolo významne (P <
0.
05) zvýšené v porovnaní s normálnou kontrolnej skupiny (10 ± 1,1 umol /g). Výsledky ukázali, že podávanie CPRHE a omeprazol, ako etanol významne (P <
0.
05) sa znížila úroveň MDA v porovnaní s kontrolnou skupinou lézie (tabuľka 4). Etanol ošetrené hlodavce vyvolal významne nižšiu aktivitu SOD v porovnaní s normálnou kontrolnej skupiny (P <
0.
05), ktoré boli zvýšenie po spracovaní s CPRHE (tabuľka 4)
Posúdenie dusnatého úrovne oxidu.
odchýlka v hladiny oxidu dusnatého v žalúdku bola skúmaná pomocou Griessova činidla, ako je uvedené v tabuľke 4. v žalúdočnej tkaniva homogenátu, dusnatého hladina oxidu v kontrolnej skupine lézie bol výrazne (P <
0.
05) nižšia (5,9 ± 0,47 pmol /g proteínu) v porovnaní s normálnou kontrolnej skupiny (10 ± 1,3 umol /g proteínu). Podávanie CPRHE štatisticky významne (P lt;
0.
05). Zvýšené hladiny oxidu dusnatého, čo bolo porovnateľné s oxid dusnatý generácie účinkom omeprazolu
Imunohistochémia
imunohistochemická analýza odhalila, žalúdočných zranenia že predbežné ošetrenie s CPRHE v dávkach 200 mg /kg a 400 mg /kg spôsobila nápadné up-regulácia Hsp70 proteínu, v porovnaní s kontrolnou skupinou vred (obrázok 5). Okrem toho, expresia Hsp70 v normálnej kontrolnej skupine bol relatívne vyšší ako expresia v kontrolnej skupine vred. Imunohistochemické vyšetrenie Bax proteínu ukázala down-reguláciu tohto proteínu po podaní CPRHE a omeprazolu. Medzitým expresia Bax bola up-regulované v kontrolnej skupine vredov v porovnaní s normálnou kontrolnou skupinou. Obrázok 5 Imunohistochemické vyšetrenie Hsp70 (prvý riadok) a Bax (druhý riadok). Z výsledkov znázornených na down-reguláciu Bax a up-regulácia Hsp70 proteínov u potkanov premedikovaní (C) omeprazolu a CPRHE v dávkach (D) 200 mg /kg, a (e) 400 mg /kg v porovnaní s kontrolná skupina (B) lézie. (A) Normálna kontrolná skupina preukázala normálnu imunohistochemickým štruktúru.
Diskusia
početné druhy Zingiberaceae rodina, ako je kurkuma phaeocaulis, Curcuma longa
Amomum villosum, Zingiber officinale, Alpinia oxyphylla stroje a Alpinia officinarum
sú používané ako ľudovom liečiteľstve domorodci z rôznych krajín. Tradičné použitie a vedecké kontroly týchto rastlín potvrdili bezpečnosť týchto rastlín ako alternatívnu medicínu [26-29]. V tejto štúdii, akútna toxicita C purpurascens
bola hodnotená u potkanov. Naše výsledky nepreukázali žiadne známky toxicity obličiek alebo pečene, ako vyšetrovaný biochemickú a histologickú analýzou.
Jedna z faktorov, ktoré prispievajú k tvorbe žalúdočných vredov je etanol. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Žalúdka progresie rakoviny spojené s miestnymi humorálnej imunitnej odpovede
• Ťažká žalúdočných varixov krvácanie v dôsledku trombózy sleziny tepny a následnej arteriálnej bypass