Evaluering av akutt giftighet og magesekk aktivitet av Curcuma purpurascens BI. rhizome mot etanol-indusert mage mucosal skade i rats

Evaluering av akutt giftighet og magesekk aktivitet av Curcuma purpurascens
BI. rhizome mot etanol-indusert mage mucosal skade hos rotter
Abstract
Bakgrunn
Curcuma purpurascens
BI. er en medisinsk plante fra Zingiberaceae familien, som er mye brukt som krydder og som folkemedisin. Målet med denne studien er å undersøke den mage aktivitet av C. purpurascens
rhizome heksan ekstrakt (CPRHE) mot etanol-induserte magesår hos rotter.
Metoder
Akutt toksisitet Testen ble utført på 36 rotter (18 hanner og 18 hunner) med lav dose av CPRHE (1 g /kg), høy dose av CPRHE (2 g /kg) og bærer (5% Tween 20). For å bestemme den mage effekten av CPRHE, gastric juice surhet, brutto og histologiske helsefare, ble slim innhold og sår indeksen evaluert i etanol-indusert ulcus hos rotter. I tillegg ble superoksid dismutase aktivitet, nitrogenoksid nivå og immunhistokjemisk evaluering av Bax og HSP70 proteiner undersøkt.
Resultater
CPRHE akutt toksisitetstest på rotter viste ingen tegn på dødelighet og toksisitet opp til 2 g /kg . Den orale administrering av CPRHE ved doser på 200 mg /kg og 400 mg /kg og omeprazol (positiv kontroll) ved en dose på 20 mg /kg til rotter bemerkelsesverdig svekkede gastriske lesjoner indusert ved etanol. Forbehandling av rotter med CPRHE betydelig etterfylles uttømming av slim innhold forårsaket av etanol administrering og nedsatt surheten av mageveggene. Videre undersøkelse av gastrisk mucosal homogenatet viste signifikant økning av superoksyd-dismutase og nitrogenoksid-aktiviteter, og reduksjon i malondialdehyd nivå i CPRHE-behandlede gruppe, sammenlignet med lesjonen kontrollgruppen. Histologisk vurdering av mage veggene innhentet fra rotter forbehandlet med CPRHE vist en bemerkelsesverdig nedgang i hemoragisk slimhinnelesjoner. Immunhistokjemisk farging viste nedregulering av Bax protein og oppregulering av Hsp70 protein.
Konklusjon
Tatt sammen, bekreftet disse funnene den mage effekten av Curcuma purpurascens
rhizome mot mage skade.
Nøkkelord
Curcuma purpurascens
Zingiberaceae Akutt giftighet magesår etanol Omeprazol Bakgrunn
sår er en lesjon eller åpent sår som generelt gjelder slimhinnen eller huden av kroppen. I fordøyelsessystemet, magesår i slimhinnen i tolvfingertarmen eller magen er en irriterende sykdom som har rammet en merkbar andel av verdens befolkning [1]. Den avbrudd i den beskyttende effekt av mageslimhinnen mot mavesyre er en vanlig årsak til magesår [2]. Studier har vist at etiologien av denne lidelsen er relatert til røyking, stress, infeksjoner, ernæringsmessige mangler og alkoholforbruk [3]. Helicobacter pylori-infeksjon
særlig bidrar til forekomst av 90% av duodenalsår og 80% av magesår [4]. I tillegg er administrasjon av ikke-steroide antiinflammatoriske legemidler gjenstår som en av de legemiddelrelaterte årsaker til mavesår [5]. I de senere år har eksponering av menneske til en rekke skadelige kjemikalier og midler betydelig forhøyet risiko for mage-angrep [6]. En rekke anti-ulcer-midler, som for tiden blir brukt i markedet, oppviser begrenset effekt og en betydelig alvorlige bivirkninger på det menneskelige legeme [7]. Derfor screening for nye agenter i stand til å behandle magesår må fortsette for å finne forbindelser med reduserte bivirkninger og samtidig opprettholde høy terapeutisk effekt.
Utvikling av farmasøytiske produkter er avhengig vesentlig på kosttilskudd, inkludert et omfattende utvalg av kategorier som krydder, urteprodukter, kosttilskudd og funksjonell mat [8]. Mange planter fra forskjellige taksonomiske familier har blitt studert for sine anti-sår aktiviteter [5, 9-11]. En slik taksonomisk familie med omfattende medisinsk bruk mot mage slimhinnelesjoner er Zingiberaceae. Mange plantearter i denne familien, for eksempel Boesenbergia rotunden product: [9], Curcuma longa product: [12], Zingiber officinale product: [7], Alpinia galanga product: [13] og Elettaria cardamomum
[14] har blitt belyst for sine gastroprotective egenskaper.
Curcuma purpurascens
BI. er medlem av Zingiberaceae familien. Dette anlegget opprinnelig vokste i Indonesia og dens rhizome brukes som et krydder [15]. Den C. purpurascens
plante som vanligvis også kjent som "Temu tis" og "Koneng tinggang" har blitt rapportert å ha omfattende tradisjonell bruk i bygdene, i likhet med andre Curcuma
arter [15, 16]. Jordstengler av dette anlegget har vært brukt i folkemedisinen for behandling av sår, skabb, kløe, feber, hoste og koker. Blandingen av rotstokker med Alyxia lata
brukes som omslag etter fødsel [15]. Til tross for disse tradisjonelle programmene, er det ingen vitenskapelig undersøkelse for potensielle bioaktivitet av dette anlegget. Siden naturlige produkter med en lang historie med folk søknad kan gi nye terapeutiske tilnærminger for behandling av forskjellige sykdommer og plager [17], er denne studien gjennomført for å vurdere akutt giftighet og magesekk aktivitet av C. purpurascens
rhizome mot etanol-indusert sårdannelse hos rotter.
Metoder
Kjemisk og narkotika
i denne studien, omeprazol som referanse anti-sår medisiner ble hentet fra University of Malaya Medical Center og oppløst i 10% Tween 20 (Merck , Tyskland). En fortynning av Tween 20 (5% v /v) ble brukt som redskap.
Prøvetaking
C. purpurascens
rhizome ble samlet inn fra Yogyakarta, Indonesia. Den botaniske identifikasjon ble gjort av Mr. Teo Leong Eng., Matematisk-naturvitenskapelige fakultet, Universitetet i Malaya. En kupong eksemplar KL 5793 ble avsatt i herbariet ved Institutt for kjemi, Fakultet for naturvitenskap, Universitetet i Malaya, Kuala Lumpur, Malaysia.
Utarbeidelse av ekstraktet Bedrifter Den lufttørket og pulverisert jordstengler (1,0 kg) ble oppmalt med n-heksan ved romtemperatur i tre dager. Det resulterende filtrat av jordstengler ble konsentrert ved en rotasjonsfordamper ved 40 ° C og lagret ved -20 ° C inntil bruk. C. purpurascens
rotstokk heksan ekstrakt (CPRHE) ble oppløst i karboksymetylcellulose for in vivo
dyrestudie.
Gasskromatografi av CPRHE
Analysen av heksan ekstrakt ble utført ved anvendelse av en Agilent og LECO Restek , RXi-5MS kapillærkolonne (30 m, 0,25 mm id, 0,25 mikrometer filmtykkelse) og et massespektrometer Pengasus HT høy gjennomstrømning TOFMS, som tidligere beskrevet [18]. Forbindelser ble identifisert fra deres massespektra, ved sammenligning av retensjonstiden av topper med tolkning av MS fragmentering mønstre fra databibliotek for Dyr og etiske problemstillinger
Sunn kvinnelige og mannlige Sprague Dawley
rotter. (150-180 g, 6-8 uker gamle) ble hentet fra Animal Experimental Unit, det medisinske fakultet, Universitetet i Malaya, Kuala Lumpur, Malaysia. Dyrene ble plassert i et isolert kabinen under kontrollerte betingelser av temperatur (~ 24 ° C), fuktighet (~ 50%) og lys (en daglig forhold på 1: 1). Dyrene fikk adgang til standard rotte pellets og RO vann. Alle dyreforsøk ble utført i samsvar med National Institutes of Health Guide for omsorg og bruk av forsøksdyr og med forhåndsgodkjenning fra komiteen av Animal House, Det medisinske fakultet, Universitetet i Malaya (Ethics No. 2014-03 -05 /PHAR /R /eR).
Akutt toksisitetsstudie
å finne et trygt rekke doser for CPRHE, ble toksisitet evaluering av CPRHE utført som beskrevet tidligere [19]. I korte trekk ble 36 rotter, hvorav 18 hanner og 18 hunner delt i tre grupper som er merket som kjøretøyet (5% Tween 20), lav dose av CPRHE (1 g /kg) og høy dose av CPRHE (2 g /kg). Rottene ble fastet i 16 timer før dosering (vann var tilgjengelig med unntak av den siste 2 timer). Etter doserings, mat ble holdt tilbake for ytterligere 1 til 3 timer. Noen andre tegn på toksisitet og dødelighet ble videre registrert i løpet av to uker. På dag 15, ble dyrene ofret for hematologisk og histologisk analyse.
Etanol-indusert magesår
forebyggende potensialet i CPRHE mot overfladiske hemoragisk slimhinnere ble undersøkt i normale rotter. Før eksperimentet, ble Sprague Dawley
hannrotter som hadde fastet i 24 timer (vann var tilgjengelig med unntak av den siste 2 timer). Tredve rotter ble tilfeldig fordelt i 5 grupper på 6 rotter hver og forbehandlede tilsvarende (tabell 1). Etter 1 time for forbehandling, ble alle rottene gavaged med 5% Tween 20 (5 ml /kg) eller absolutt etanol (5 ml /kg) basert på dyret eksperimentell design. Rottene ble avlivet 1 time senere med en over-dose xylazine og ketamin og magen ble umiddelbart excised.Table 1 eksperimentell design og spesifikasjoner for dyrestudie
Grupper
Beskrivelse

Forbehandling
behandling
Gruppe A
Normal kontroll
5% Tween 20 (5 ml /kg)
5% Tween 20
B gruppe
lesjon kontroll
5% Tween (ml /kg 5)
absolutt etanol
Gruppe C
Behandling kontroll
omeprazol (20 mg /kg)
absolutt etanol
20 Gruppe D
Experimental group1
CPRHE (200 mg /kg)
absolutt etanol
Gruppe E
Experimental gruppe 2
CPRHE (400 mg /kg)
absolutt etanol
bestemmelse av tap i mucosal innhold og magesaft surhet
magen hos hver rotte ble dissekert langs den store kurvatur, og pH-meter titrering med 0,1 N NaOH ble anvendt for å analysere hydrogenionekonsentrasjonen i mageinnholdet uttrykt i mEq /jeg verds. Deretter ble en glassplate påført forsiktig skrape gastrisk mucosa av rottene etterfulgt av veiing av de oppnådde slim med en presisjon elektronisk balanse.
Makroskopisk undersøkelse av lesjoner
I henhold til flere studier, etanol-indusert ulcus på mageslimhinnen ble karakterisert som langstrakte bånd av hemoragisk lesjoner er parallelle med lengdeaksen av magen [11, 20]. Den hemoragisk skader i magesekken ble bestemt ved vurdering av luminal overflate. Den beskyttende potensial (P%) for hver før behandling ble beregnet ved hjelp av et planimeter (10 x 10 mm 2) og dissekere mikroskop (1,8 x) hvor UC og UT var såret område av kontroll- og behandlede gruppe, respektivt . Målingen av sår-området ble utført som tidligere beskrevet i detalj av Abdelwahab et al. [9]. P
%
=
U
C
-
U
T
U
C
×
100
Histologisk evaluering av gastriske lesjoner
Histologisk analyse av prøvene av mageveggene ble utført ved anvendelse av 10% bufret formalin for fiksering. Prøvene ble dyppet i parafin etterfulgt av fem mikrometer seksjonering og farging med hematoxylin og eosin.
Bestemmelse av lipidperoksidasjon aktivitet bruker tiobarbitursyrereaktive stoffet analysen
å måle konsentrasjonen malondialdehyde (MDA), gjennomførte vi tiobarbitursyre reaktiv substans (TBARS) analyse som beskrevet tidligere [21]. I korte trekk, den homogeniseres magesekken (10% w /v) i 0,1 mol /l PBS ble sentrifugert ved 4 ° C i 10 min. Deretter ble den overliggende væske (3 ml) blandet med 20% trikloreddiksyre-oppløsning og 0,67% 2-tiobarbitursyre, etterfulgt av oppvarming i et vannbad (95 ° C) i 30 min. Deretter ble MDA konsentrasjonen av den oppnådde supernatant bestemt spektrofotometrisk ved 532 nm. Proteinkonsentrasjonene ble uttrykt som umol MDA /g protein ved hjelp av Lowry-metoden [22].
Bestemmelse av superoksid dismutase (SOD) aktivitet
Aktiviteten av SOD-enzym ble estimert ved å bestemme dens potensial for å undertrykke den fotokjemiske reaksjon NBT (nitro tetrazolium), som tidligere beskrevet av Sun og kolleger [23]. I denne analysen, ble homogenisert vev sentrifugert to ganger ved 4 ° C i 10 og 20 min. I et mørkt kammer, ble reaksjonskomponent (1 ml, 50 mM fosfatbuffer, 100 nM EDTA og 13 mM L-metionin, pH 7,8) blandet med den resulterende supernatant (30 pl), NBT (150 ul, 75 pM) og riboflavin (300 gl, 2 mm). Den resulterende løsning ble utsatt for fluorescerende lyspærer (15 W) i 15 minutter, og absorbansen ble bestemt ved 560 nm bølgelengde ved hjelp av et spektrofotometer.
Nitrogenoksid nivå
For å evaluere virkningen av CPRHE på nitrogenoksid (NO) generasjon i mage-tarmkanalen, ble Griess reaksjon benyttet for å bestemme de totale nitritt /nitratinnholdet, som tidligere beskrevet av Tsikas og medarbeidere [24]. I korte trekk, ble supernatanten (50 ul) av den homogenisert magen blandet med Griess reagens. Etter 10 minutter ble den etterfølgende kolorimetrisk analyse utført ved 540 nm ved å bruke en Tecan Infinite 200 Pro mikroplateleser (Tecan, Männedorf, Sveits). Den genererte NO i kultursupernatanten ble bestemt ved anvendelse av en standardkurve av natriumnitritt, og resultatene ble uttrykt som umol nitritt /nitrat per gram protein.
Immunhistokjemisk evaluering
Immunhistokjemisk analyse av Bax og HSP70 proteinene ble utført som tidligere beskrevet i forbindelse med noen endringer [25]. I korte trekk, ble vev paraffinized i xylen og rehydrert bruker gradert alkohol. Den kokende natriumcitrat-buffer (10 mM) ble anvendt for antigen gjenfinningsprosessfulgt av immunohistokjemisk merking i henhold til framstillingen instruksjon (Dakocytomation, USA). Etter blokkering av endogen peroksidase med peroksidase blokk, Bax (1: 200) eller Hsp70 (1: 500) biotinylerte primære antistoffer ble påført og delene ble inkubert i 15 min. Deretter seksjoner ble inkubert med den passende mengde av streptavidin-HRP i 15 min. Deretter ble seksjonene utsettes for diaminobenzidin substratechromagen i 5 s, og deretter dyppet i svak ammoniakk (0,037 mol /l) til ti ganger. Brune flekker på lysbildene indikerte positive funn av immunhistokjemisk farging observert under et lysmikroskop.
Statistisk analyse
Alle verdier ble rapportert som gjennomsnitt ± SD. De statistiske signifikante forskjeller mellom gruppene ble bestemt med enveis ANOVA etterfulgt av post hoc Tukey multippel sammenligningstest. En verdi på p
< 0,05 ble ansett som signifikant Search Results
gass-kromatografi profil av CPRHE
Som vist i figur 1, ble heksan-ekstrakt, karakterisert ved bruk av GC-MS-TOF.. Kromatogrammet viste at de store forbindelsene i CPRHE er c-elemene (1), benzofuran, 6-etenyl-4,5,6,7-tetrahydro-3,6-dimetyl-5-isopropenyl (2), 3,7- cyclodecadien-1-on, 3,7-dimetyl-10- (1-metyletyliden) (3), turmeron (4) og curlon (5) (tabell 2). Figur 1 En typisk gass-kromatogram. Kromatogrammet viste de kjemiske bestanddeler av C. purpurascens
heksan ekstrakt.
Tabell 2 De viktigste bioaktive forbindelser av C. purpurascens heksan ekstrakt som karakteriseres ved hjelp av GC-MS-TOF analyse
Peak No.

Navn av forbindelser
Retention Tid (s)
Mass

1 c-elemene
1812,55
189
2
benzofuran, 6-ethenyl-4,5,6,7-tetrahydro-3,6-dimethyl-5-isopropenyl
1931.3
216
3
3,7-cyclodecadien-1-one,3,7-dimethyl-10-(1-methylethylidene)
2123.3
218
4
turmerone
2254.45
218
5
curlone
2326.55
218
Akutt toksisitetsstudie
I den akutte toksisitetsstudie, alle rotter overlevde og ikke manifest noen tegn til toksisitet og unormalt på 1 og 2 g /kg dosering. For en varighet på 14 dager, det var ble det ikke observert atferds eller kroppsvektendringer og ingen unormale tegn. Som vist i tabell 3, ble serum biokjemiske parametere rapportert å være normal. Hematologisk analyse av nyre og lever førte ikke til noen nevneverdig endring i den behandlede gruppen sammenlignet med kontrollgruppen (figur 2). Den 50% oral dødelig dose (LD 50) for hann- og hunnrotter var større enn 2 g /kg kropps weight.Table 3 Serum biokjemisk analyse av rotter. Effekt av CPRHE på (a) nyrefunksjon test, (b) leverfunksjonstester og (c) hematologi analyse av gnagere
Animal grupper
Serum biokjemisk analyse
( a) nyre biokjemiske parametere
Natrium (mm /L)
Kalium (mm /L)
klorid (mm /L)
Co2 (mm /L)
Anion (mm /L)
Urea (mm /L)
Kreatinin (μ M /L)

Kjøretøy
142,23 ± 0,45
4,85 ± 0,06
104,59 ± 0,45
23,89 ± 0,64
19,36 ± 0,48
5,28 ± 0,58
30.75 ± 1.87
CPRHE ( 1 g /kg)
143,54 ± 0,37
5,12 ± 0,72
106,24 ± 0,54
21,49 ± 0,73
19,58 ± 0,75
5,93 ± 0,43
29.81 ± 2.27
CPRHE (2 g /kg)
143,85 ± 0,82
4,91 ± 0,034
105,27 ± 0,56
22,85 ± 0,48
19,95 ± 0,39
5,68 ± 0,37
31,46 ± 2,19
dyregrupper
(b) leveren biokjemiske parametere
Total protein (g /L)
Albumin (g /L)
globulin (g /L)
TB (u mol /L )
CB (u mol /L)
AP (IU /L)
ALT (IU /L)
AST (IU /L)
GGT (IU /L)
Vehicle
60,76 ± 0,94
9,56 ± 0,39
51.07 ± 1.28
2,19 ± 0,13
0,87 ± 0,17
154,45 ± 5.37
50.49 ± 1.34
173,82 ± 5,38
3,45 ± 0,27
CPRHE (1 g /kg)
58.37 ± 0.57
8,35 ± 0,53
50.68 ± 1.32
2,14 ± 0,16
0,91 ± 0,14
153,23 ± 5.87
45.65 ± 1.74
175,48 ± 6,49
3,37 ± 0,53
CPRHE (2 g /kg)
59,67 ± 1,29
8,87 ± 0,19
50.25 ± 1.45
2,15 ± 0,14
0,84 ± 0,16
155,73 ± 6,82
46.76 ± 1.48
176,27 ± 6,52
3,57 ± 0,43
dyregrupper
(c) Hematologiske parametere
HGB (g /dl)
HCT (%)
RBC (10 6 /mL)
MCV (fL)
MCH (s)
MCHC (g /dl)
RDW ( %)
WBC (10 3 /mL)
Blodplate (10 3 /mL)
Vehicle
15,03 ± 0,13
46 ± 0.00
9,38 ± 0,13
59.12 ± 0.65
19,25 ± 0,31
34,22 ± 0,19
17,03 ± 0,44
6,12 ± 0,47
986,75 ± 23,65
CPRHE (1 g /kg)
15,47 ± 0,13
46 ± 0,00
9,64 ± 0,18
58.54 ± 0.63
18,89 ± 0,36
34,04 ± 0,33
18,23 ± 0,58
6,23 ± 0,34
995,36 ± 25,32
CPRHE (2 g /kg)
15.98 ± 0.12
46 ± 0.00
9,83 ± 0,16
57,78 ± 0,76
18,59 ± 0,29
33,93 ± 0,28
18,77 ± 0,34
6,31 ± 0,39
1011,52 ± 23,18
Verdier uttrykt som gjennomsnitt ± SEM. ALT, alaninaminotransferase; AST, aspartataminotransferase; AP, alkalisk fosfatase; CB, konjugert bilirubin; GGT: G-glutamyl transferase; HCT, hematokrit; HGB, hemoglobin; MCH, mener korpuskulært hemoglobin; MCHC, mener korpuskulært hemoglobinkonsentrasjon; MCV, mener cellevolum; RBC, røde blodceller; RDW, røde blod distribusjon bredde; TB: total bilirubin; WBC, hvite blodceller.
Resultatene viste ingen signifikant forskjell mellom gruppene.
Figur 2 Histologiske snitt. Histopatologi av nyre (første rad) og lever (andre rad) i akutt toksisitetsstudie som representerer de rottene som ble behandlet med bærer (5% Tween 20), CPRHE (1 g /kg) og CPRHE (2 g /kg). Resultatet viste ikke signifikante forskjeller i strukturene i nyre og lever mellom behandlede og kontrollgruppene (20 × forstørrelse).
PH av mageinnhold og bestemmelse av slimproduksjon
surhet av mageinnhold hos gnagere oralt med Etanolen ble betydelig økt sammenlignet med normal kontrollgruppe, som vist i tabell. 4. Etter behandling med omeprazol (positiv kontroll), surhet ble betydelig svekket (P <
0.
05) og dyrene forbehandlet med CPRHE ved høye doser og lav dose fremkalte signifikante (P <
0.
05) heving av pH. Den gastriske slimet innholdet ble signifikant mangel hos dyr forbehandlet med ethanol. I mellomtiden, omeprazol og CPRHE behandling betydelig fylles tapet i slimhinnene innhold P <
0.
05, tabell 4). Funnene i begge parametrene foreslo anti-sår effekten av CPRHE.Table 4 magesekk effekten av CPRHE mot etanol gastrisk skade
dyregrupper
dyregrupper
pH Gastric vev <.no> Slim Vekt (g)
Sår område (mm) 2
Hemming (%)
MDA (mikromol /g protein)

SOD (U /g protein)
Nitrogenoksid (mikromol /g protein)
A
Normal kontroll
7,02 ± 0,004
0,89 ± 0,03
- -
10 ± 1.1
528 ± 16,51
10 ± 1,3
B
lesjon kontroll
2,99 ± 0,17
0,41 ± 0,01
880 ± 16,23 -
28 ± 2.98
333 ± 9.98
5,9 ± 0,47
C
Behandling kontroll
6,14 ± 0,24 *
0,79 ± 0,03 *
195 ± 8.97 *
77
13 ± 0,71 *
481 ± 12,22 *
9,1 ± 1,4 *
D
CPRHE (200 mg /kg)
4,47 ± 0,09 *
0,68 ± 0,02 *
455 ± 12,24 *
48
21 ± 0,22 *
393 ± 7,67 *
7,6 ± 0,8 *
E
CPRHE (400 mg /kg )
5,82 ± 0,41 *
0,72 ± 0,02 *
325 ± 10,67 *
63
17 ± 0,41 *
459 ± 10,73 *
8,4 ± 0,9 *
alle verdier er uttrykt som gjennomsnitt ± SD. * Angir (P
< 0,05) sammenlignet med (B) lesjon kontrollgruppe. CPRHE: C. purpurascens
rhizome heksanekstrakten
Makroskopisk vurdering av helsefare
administrasjon av etanol til rottene indusert merk svart hemoragisk lesjoner i mage veggene (figur 3B) med sår areal på 880 ± 16,23. (mm) 2 (tabell 4). Som vist i figur 3, gnagere forbehandlet med CPRHE (figur 3D og E) og omeprazol (figur 3C) hadde betydelig redusert områder av magesår dannelse i sammenligning med lesjon kontrollgruppen (figur 3B). Forbehandling av rotter med CPRHE ved doser på 200 mg /kg og 400 mg /kg undertrykket i sårområdet formasjonen til 455 ± 12,24 (mm) 2 og 325 ± 10,67 (mm) 2, som var sammenlignbare til den undertrykkende virkning av omeprazol 195 ± 8.97 (mm) 2. Forekomsten av sår ble redusert med 48% og 63% etter behandling med CPRHE ved doser på 200 mg /kg og 400 mg /kg, henholdsvis (tabell 4). Det er verd å merke seg at CPRHE behandling bidro til å flate ut slimhinne mage folder i gnagere (Figur 3D og E). Figur 3 Brutto evaluering. Resultatene viste at gnagere forbehandlet med (C) omeprazol og CPRHE ved doser på (D) 200 mg /kg og (E) 400 mg /kg hadde tydelig redusert område av magesår dannelse sammenlignet med (B) sår kontroll. (A) Normal kontrollgruppe viste ingen gastrisk lesjon formasjonen.
Histologisk vurdering av helsefare
Mikroskopisk analyse av mage lesjoner i sår kontrollgruppen utløst omfattende skader på mageslimhinnen av gnagere preget av forstyrret overflaten epitel og dypt penetrert nekrotiske lesjoner inn i mucosa forbundet med tydelige leukocytter infiltrasjon og alvorlig ødem av submucosal lag (figur 4B). Forbehandling med CPRHE (figur 4D og E) og omeprazol (figur 4C) viste en beskyttende effekt ved reduksjon av leukocytter infiltrasjon og submucosal ødem. Etterfylling av tapet i slimet innhold av CPRHE ble dokumentert av stumpy mengden magenta farger i histologiske analyser sammenlignet med kontrollgruppen (Figur 4D og E). Resultatene viste at CPRHE forbehandling ved høy dose og lav dose markert påvirket etanol-indusert ødeleggelse av mageslimhinnen. Figur 4 Histologisk evaluering. Histopatologi av gnagere forhåndsbehandlet med (C) omeprazol eller CPRHE i doser på (D) 200 mg /kg og (E) 400 mg /kg sammenlignet med (B) lesjon kontrollgruppe. (A) normal kontrollgruppe viste normal histologisk struktur. (H og E stain10 ×).
Vurdering av magen malondialdehyde og superoksid dismutase
å bestemme effekter på lipidperoksidasjon og oksidativt stress, vi fast bestemt på nivået av MDA i mage vevhomogenatet. Etter behandling med etanol smelter MDA-nivå (28 ± 2,98 umol /g) var signifikant (P <
0.
05) hevet i forhold til den normale kontrollgruppen (10 ± 1,1 umol /g). Resultatene viste at administrering av CPRHE og omeprazol før etanol signifikant (P <
0.
05) reduserte MDA nivå i forhold til lesjonen kontrollgruppen (tabell 4). Etanol behandlet gnagere utløst en betydelig lavere SOD aktivitet i forhold til normal kontrollgruppen (P <
0.
05), som ble forhøyet ved behandling med CPRHE (tabell 4)
Vurdering av nitrogenoksid nivå.
forstyrrelse i nitrogenoksid nivåer av magesekken ble undersøkt ved anvendelse av Griess-reagens, slik som vist i tabell 4. i gastrisk vev homogenat, nitrogenoksid nivået i lesjonen kontrollgruppen var markert (P <
0.
05) lavere (5,9 ± 0,47 pmol /g protein) sammenlignet med normal kontrollgruppe (10 ± 1,3 umol /g protein). Administrasjon av CPRHE signifikant (P <
0.
05). Forhøyet nitrogenoksid nivå, som var sammenlignbare med nitrogenoksid-generasjonen effekten av omeprazol
Immunohistochemistry
Immunhistokjemisk analyse av mage skader avslørt at forbehandling med CPRHE i doser på 200 mg /kg og 400 mg /kg forårsaket iøynefallende oppregulering av Hsp70-protein sammenlignet med sår kontrollgruppen (figur 5). I tillegg, ekspresjon av Hsp70 i normal kontrollgruppe var forholdsvis høyere enn ekspresjon i sår kontrollgruppen. Immunhistokjemisk undersøkelse av Bax protein indikerte en nedregulering av dette proteinet etter administrering av CPRHE og omeprazol. Samtidig ekspresjon av Bax ble oppregulert i sår kontrollgruppen sammenlignet med normal kontrollgruppe. Figur 5 Immunhistokjemisk undersøkelse av Hsp70 (første rad) og Bax (andre rad). Resultatene er vist i nedregulering av Bax og oppregulering av HSP70 proteinene i rotter forbehandlet med (C) omeprazol og CPRHE i doser på (D) 200 mg /kg og (E) 400 mg /kg sammenlignet med (B) lesjon kontrollgruppe. (A) Normal kontrollgruppe viste normal Immunhistokjemisk struktur.
Diskusjon
Mange arter av Zingiberaceae familie, som Curcuma phaeocaulis, Curcuma longa
, Amomum villosum, Zingiber officinale, Alpinia oxyphylla Hotell og Alpinia officinarum
er brukt som folkemedisin av de innfødte fra ulike land. Tradisjonell bruk og vitenskapelige inspeksjoner av disse plantene har bekreftet sikkerheten av disse plantene som komplementær medisin [26-29]. I denne studien, den akutte giftigheten av C. purpurascens
ble evaluert i rotter. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Magekreft progresjon i forbindelse med lokale humorale immunresponser
• Alvorlige mage variceal blødning på grunn av miltarterien blodpropp og påfølgende arteriell bypass