Evaluatie van de acute toxiciteit en gastrobeschermende activiteit van curcuma purpurascens
BI. wortelstok tegen-ethanol geïnduceerde beschadiging van het maagslijmvlies bij ratten
Abstracte achtergrond
Curcuma purpurascens
BI. een medicinale plant uit de familie Zingiberaceae, die op grote schaal wordt gebruikt als specerij en als volksgeneeskunde. Het doel van deze studie is het onderzoeken van de gastrobeschermende activiteit van C. purpurascens
wortelstok hexaan extract (CPRHE) tegen ethanol- geïnduceerde maagzweren bij ratten.
Methods
acute toxiciteit op 36 ratten werd uitgevoerd (18 mannen en 18 vrouwen) met lage dosis CPRHE (1 g /kg), hoge dosis CPRHE (2 g /kg) en vehikel (5% Tween 20). Om het effect van gastrobeschermende CPRHE, maagsap zuurgraad, grove en histologische maaglesies bepalen, slijm inhoud en ulcus index werden geëvalueerd in-ethanol geïnduceerde ulcera bij ratten. Bovendien, superoxidedismutase activiteit, stikstofmonoxide niveau en de immunohistochemische evaluatie van Bax en HSP70 eiwitten werden onderzocht.
Resultaten
De CPRHE acute toxiciteit op ratten leverde geen tekenen van sterfte en toxiciteit te openbaren tot 2 g /kg . De orale toediening van CPRHE in doses van 200 mg /kg en 400 mg /kg en omeprazol (positieve controle) in een dosis van 20 mg /kg aan ratten opmerkelijk verzwakte gastrische lesies geïnduceerd door ethanol. Voorbehandeling van ratten met CPRHE aanzienlijk bijgevuld de uitputting van slijm inhoud door alcohol veroorzaakte toediening en verminderde zuurgraad van de maag muren. Verder onderzoek van maagslijmvlies homogenaat bleek significant verhoogde superoxide dismutase en stikstofoxide activiteiten en vermindering van malondialdehyde niveau CPRHE behandelde groep, vergeleken met de controlegroep laesie. Histologische evaluatie van maag muren verkregen bij ratten voorbehandeld met CPRHE vertoonden een opmerkelijke daling van hemorragische mucosale laesies. Immunohistochemische kleuring toonde down-regulatie van Bax eiwit en up-regulatie van Hsp70 eiwit.
Conclusie
Tezamen bieden deze bevindingen bevestigd de gastrobeschermende effect van Curcuma purpurascens
wortelstok tegen maagschade.
Trefwoorden
Curcuma purpurascens
Zingiberaceae Acute toxiciteit Maagulcus Ethanol Omeprazol Achtergrond
zweer is een laesie of een open wond die over het algemeen betrekking heeft op het slijmvlies of de huid van het lichaam. In het spijsverteringsstelsel, maagzweer in het slijmvlies van de maag of twaalfvingerige darm is een irritante ziekte die een aanzienlijke deel van de wereldbevolking [1] teistert. De verstoring van het beschermende effect van het maagslijmvlies tegen maagzuur is een veel voorkomende oorzaak van maagzweer [2]. Studies hebben aangetoond dat de etiologie van deze aandoening is gerelateerd aan het roken van sigaretten, stress, infecties, voedingstekorten en alcoholconsumptie [3]. Helicobacter pylori infectie
name bij aan het voorkomen van 90% van ulcus duodeni en 80% van maagzweren [4]. Daarnaast is de toediening van niet-steroïdale anti-inflammatoire geneesmiddelen blijft een van de geneesmiddel gerelateerde oorzaken van maagzweren [5]. De laatste jaren heeft de blootstelling van personen aan een verscheidenheid van schadelijke chemicaliën en middelen significant verhoogd risico van maag- aanvallen [6]. Talrijke anti-ulcer middelen, die momenteel worden gebruikt in de markt, vertonen beperkte werkzaamheid en aanzienlijke ernstige bijwerkingen op het menselijk lichaam [7]. Daarom is het screenen van nieuwe middelen die in staat de behandeling van maagzweren moet blijven om verbindingen te vinden met een verminderde bijwerkingen met behoud van hoge-therapeutische werkzaamheid.
Ontwikkeling van farmaceutische producten berust in hoofdzaak op nutraceuticals, met inbegrip van een uitgebreid assortiment van categorieën, zoals specerijen, kruiden-producten, voedingssupplementen en functionele voedingsmiddelen [8]. Talrijke planten uit verschillende taxonomische familie zijn onderzocht op hun anti-ulcer activiteiten [5, 9-11]. Eén zo'n taxonomische familie met uitgebreide medicinale toepassingen tegen maagslijmvlies letsels is Zingiberaceae. Talrijke plantensoorten in deze familie, zoals Boesenbergia rotonde
[9], Curcuma longa
[12], Zingiber officinale
[7], Alpinia galanga
[13] en Elettaria cardamomum
[14] zijn opgehelderd voor hun gastrobeschermende eigenschappen.
Curcuma purpurascens
BI. is een lid van de familie Zingiberaceae. Deze plant die oorspronkelijk groeide in Indonesië en de wortelstok wordt gebruikt als specerij [15]. De C. purpurascens
installatie algemeen ook wel bekend als 'Temu tis "en" Koneng tinggang "is gemeld dat het uitgebreide traditionele toepassingen in rurale gemeenschappen, vergelijkbaar met andere curcuma
soorten hebben [15, 16]. Wortelstok van deze plant wordt gebruikt in de volksgeneeskunde voor de behandeling van wonden, schurft, jeuk, koorts, hoesten en kookt. Het mengsel van de wortelstokken met alyxia stellata
wordt gebruikt als een kompres na bevalling [15]. Ondanks deze traditionele toepassingen, is er geen wetenschappelijk onderzoek voor de potentiële biologische activiteiten van deze plant. Aangezien natuurlijke producten met een lange geschiedenis van mensen applicatie kan nieuwe therapeutische benaderingen voor de behandeling van verschillende ziekten en aandoeningen [17] verschaffen, wordt de huidige studie uitgevoerd om de acute toxiciteit en maagbeschermende activiteit van C. purpurascens evalueren
wortelstok tegen -ethanol geïnduceerde ulcera bij ratten.
methoden
Chemical en drugs
in deze studie, omeprazol als referentie tegen maagzweren geneeskunde werd verkregen van de Universiteit van Malaya medisch Centrum en opgelost in 10% Tween 20 (Merck , Duitsland). Een verdunning van Tween 20 (5% v /v) werd gebruikt als het voertuig.
Sample collectie
C. purpurascens
wortelstok werd verzameld uit Yogyakarta, Indonesië. De botanische identificatie werd gemaakt door de heer Teo Leong Eng., Faculteit der Natuurwetenschappen, Universiteit van Malaya. Een voucher specimen KL 5793 werd afgezet in het herbarium van de afdeling Chemie, Faculteit der Natuurwetenschappen, Universiteit van Malaya, Kuala Lumpur, Maleisië.
Bereiding van het extract
De lucht gedroogd en gemalen wortelstokken (1,0 kg) werden gemacereerd met n-hexaan bij kamertemperatuur gedurende drie dagen. Het verkregen filtraat van de wortelstok werd geconcentreerd met een rotatieverdamper bij 40 ° C en bewaard bij -20 ° C tot gebruik. C. purpurascens
wortelstok hexaan extract (CPRHE) werd opgelost in carboxymethylcellulose in vivo
dierstudie.
Gaschromatografisch CPRHE
de analyse van het hexaan extract werd uitgevoerd met een Agilent en LECO RESTEK , RXi-5MS capillaire kolom (30 m, 0,25 mm id, 0,25 urn filmdikte) en een massaspectrometer Pengasus HT High Throughput TOFMS, zoals eerder beschreven [18]. De verbindingen werden geïdentificeerd uit hun massa spectra, door vergelijking van de retentietijden van de pieken met de interpretatie van MS fragmentatie patronen uit data bibliotheek.
Dieren en ethische kwesties
gezonde vrouwelijke en mannelijke Sprague Dawley
ratten (150-180 g, 6-8 weken oud) werden verkregen van de Animal Experimental Unit, Faculteit der Geneeskunde van de Universiteit van Malaya, Kuala Lumpur, Maleisië. De dieren werden ondergebracht in een geïsoleerde cabine onder gecontroleerde omstandigheden van temperatuur (~ 24 ° C), vochtigheid (~ 50%) en lichte (dagelijks verhouding 1: 1). De dieren kregen toegang tot standaard rat pellets en RO water toegestaan. Alle dierproeven werden uitgevoerd in overeenstemming met de National Institutes of Health Guide voor de verzorging en het gebruik van proefdieren en met de voorafgaande goedkeuring van de commissie van Animal House, Faculteit der Geneeskunde van de Universiteit van Malaya (Ethics No. 2014-03 uitgevoerd -05 /FAR /R /ER).
Acute toxiciteitsstudie Belgique Om een veilige bereik van doses voor CPRHE bepalen, toxiciteit evaluatie van CPRHE werd uitgevoerd zoals eerder beschreven [19]. Kortom, 36 ratten, waarvan 18 mannen en 18 vrouwen werden verdeeld in drie groepen aangeduid als vehikel (5% Tween 20), lage dosis CPRHE (1 g /kg) en hoge dosis CPRHE (2 g /kg). De ratten werden gevast gedurende 16 uur vóór de dosering (water was toegankelijk behalve voor de laatste 2 uur). Na de dosering werd voedsel onthouden nog eens 1-3 uur. Andere tekenen van toxiciteit en sterfte werden verder over de periode van twee weken. Op dag 15 werden de dieren opgeofferd hematologische en histologische analyse.
-Ethanol geïnduceerde gastrische ulceratie
preventief potentieel van CPRHE van oppervlakkige hemorrhagic mucosale laesies onderzocht bij normale ratten. Voorafgaand aan het experiment werden Sprague Dawley mannetjesratten
gevast gedurende 24 uur (water was toegankelijk behalve voor de laatste 2 uur). Dertig ratten werden willekeurig verdeeld in 5 groepen van 6 ratten elk en voorbehandeld dienovereenkomstig (tabel 1). Na 1 uur van voorbehandeling werden alle ratten gavaged met 5% Tween 20 (5 ml /kg) of absolute ethanol (5 ml /kg) op basis van het dier proefopzet. De ratten werden 1 uur later opgeofferd met een over-dosis van xylazine en ketamine en hun magen waren onmiddellijk excised.Table 1 De experimentele ontwerp en de specificaties van het dier studie
Groepen
Beschrijving
Pre-behandeling
behandeling
Groep A
Normal controle
5% Tween 20 (5 ml /kg)
5% Tween 20
Groep B
Laesie controle
5% Tween 20 (5 ml /kg)
absolute ethanol
Groep C
Behandelingsbediening
Omeprazol (20 mg /kg)
absolute ethanol
groep D
Experimentele group1
CPRHE (200 mg /kg)
absolute ethanol
groep E
Experimentele group2
CPRHE (400 mg /kg)
absolute ethanol
bepaling van het verlies aan mucosale inhoud en maagsap zuurgraad
maag van elke rat werd ontleed langs de grotere kromming en pH-meter titratie met 0,1 N NaOH werd gebruikt om de waterstof ionenconcentratie analyseren de maaginhoud uitgedrukt in mEq /Ik waardeer. Vervolgens werd een glasplaatje aangebracht om voorzichtig schrapen het maagslijmvlies van de ratten, gevolgd door het wegen van de verkregen slijm met een precisie elektronische weegschaal.
Macroscopische analyse van letsels
Volgens verschillende studies, ethanol-geïnduceerde ulcera op het maagslijmvlies zijn aangemerkt als langwerpige banden van hemorrhagische laesies evenwijdig aan de lange as van de maag [11, 20]. De hemorragische schade aan de maag werd vastgesteld door beoordeling van luminale oppervlak. De beschermende potentiaal (P%) van elk voorbehandeling werd berekend met een planimeter (10 x 10 mm
2) en dissectiemicroscoop (1,8 x) wanneer UC en UT waren de ulcus gebied van de controle en de behandelde groep, respectievelijk . De meting van ulcus gebied werd uitgevoerd zoals eerder in detail beschreven door Abdelwahab et al. [9]. P
%
=
U
C
-
U
T Shirts U
C
×
100
histologische evaluatie van maaglesies
Histologische analyse van de monsters van de maag muren werd met behulp van 10% gebufferde formaline voor de fixatie uitgevoerd. De monsters werden ingebed in paraffine, gevolgd door de 5 micrometer snijden en kleuring met hematoxyline en eosine.
Bepaling van lipideperoxidatie activiteit met behulp van de thiobarbituurzuur reactieve stof assay Belgique Om malondialdehyde (MDA) concentratie te meten, voerden we thiobarbituurzuur reactieve stoffen (TBARS) test zoals eerder beschreven [21]. Kortom, de maag gehomogeniseerd (10% w /v) in 0,1 mol /l PBS werd gecentrifugeerd bij 4 ° C gedurende 10 minuten. Vervolgens werd de supernatant (3 ml) werd met 20% trichloorazijnzuur-oplossing en 0,67% 2-thiobarbituurzuur gevolgd door verwarmen in een waterbad (95 ° C) gedurende 30 min. Vervolgens werd de MDA-concentratie van de verkregen supernatant spectrofotometrisch bepaald bij 532 nm. De eiwitconcentraties werden uitgedrukt als MDA umol /g eiwit met de Lowry methode [22].
Bepaling van superoxide dismutase (SOD)
activiteit De activiteit van SOD enzym werd geschat door het bepalen van het potentieel om de fotochemische reactie van onderdrukken NBT (nitroblauwtetrazolium), zoals eerder beschreven door Sun en collega's [23]. In deze test werden de weefsels gehomogeniseerd tweemaal gecentrifugeerd bij 4 ° C gedurende 10 en 20 minuten. In een donkere kamer, het reagens (1 ml, 50 mM fosfaatbuffer, 100 nM EDTA en 13 mM L-methionine, pH 7,8) werd gemengd met de verkregen supernatant (30 pl), NBT (150 pl, 75 uM) en riboflavine (300 pl, 2 uM). De verkregen oplossing werd blootgesteld aan fluorescerende lampen (15 W) gedurende 15 min en de absorptie werd bepaald bij 560 nm met een spectrofotometer.
Stikstofmonoxide niveau Belgique Om het effect van CPRHE op stikstofoxide evalueren (NO) opwekking in het maagdarmkanaal werd Griess reactie gebruikt aan totale nitriet /nitraat te bepalen, zoals eerder beschreven door Tsikas en collega's [24]. Kortom, de bovenstaande vloeistof (50 ui) van de maag werd gehomogeniseerd gemengd met het Griess reagens. Na 10 minuten werd de daaropvolgende colorimetrische analyse bij 540 nm onder toepassing van een Tecan Infinite Pro 200 microplaat lezer (Tecan, Männedorf, Zwitserland) uitgevoerd. De gegenereerde NO in het kweeksupernatant werd bepaald met een standaard curve van natriumnitriet en de resultaten werden uitgedrukt als umol nitriet /nitraat per gram eiwit.
Immunohistochemische evaluatie
Immunohistochemische analyse van Bax en HSP70 eiwitten werd zoals hiervoor uitgevoerd beschreven met enkele modificaties [25]. In het kort werden de weefsels paraffinized in xyleen en gehydrateerd met behulp van Graded alcohol. Kokend natriumcitraat buffer (10 mM) werd gebruikt voor antigen retrieval procedure die door immunohistochemische kleuring volgens de vervaardiging instructie (DakoCytomation, USA). Na het blokkeren van de endogene peroxidase met peroxidase block, Bax (1: 200) of Hsp70 (1: 500) werden gebiotinyleerde primaire antilichamen toegepast en de secties werden gedurende 15 minuten. Vervolgens werden secties geïncubeerd met de geschikte hoeveelheid streptavidine-HRP gedurende 15 minuten. Vervolgens werden de plakjes blootgesteld aan diaminobenzidine substratechromagen 5 seconden, vervolgens ondergedompeld in zwakke ammoniak (0,037 mol /l) gedurende tien keer. Bruine vlekken op de glijbaan aangegeven positieve bevindingen van de immunohistochemische kleuring zoals waargenomen onder een lichtmicroscoop.
Statistische analyse Leer Alle waarden werden gerapporteerd als gemiddelde ± SD. De statistische significante verschillen tussen de groepen werden bepaald met ANOVA gevolgd door post hoc multiple vergelijkingstest Tukey. Een waarde van p
< 0,05 werd significant geacht
Resultaten
gaschromatografisch profiel van CPRHE
Zoals getoond in Figuur 1, werd het hexaan extract gekenmerkt door het gebruik van GC-MS-TOF.. Het chromatogram liet zien dat de hoofdcomponenten in CPRHE zijn c-elemeen (1), benzofuran, 6-ethenyl-4,5,6,7-tetrahydro-3,6-dimethyl-5-isopropenyl (2), 3,7- cyclodecadien-1-on, 3,7-dimethyl-10- (1-methylethylideen) (3), turmeron (4) en curlone (5) (Tabel 2). Figuur 1 Een typisch gas chromatogram. Het chromatogram toonde de chemische bestanddelen van C. purpurascens
hexaan extract.
Tabel 2 De belangrijkste bioactieve stoffen van C. purpurascens hexaan extract zoals gekarakteriseerd met behulp van GC-MS-TOF analyse
Peak No.
Naam van verbindingen
Retention Time (s)
Mass
1
c-elemeen
1.812,55
189 Pagina 2
benzofuran, 6-ethenyl-4,5,6,7-tetrahydro-3,6-dimethyl-5-isopropenyl
1931.3
216
3
3,7-cyclodecadien-1-one,3,7-dimethyl-10-(1-methylethylidene)
2123.3
218
4
turmerone
2254.45
218
5
curlone
2326.55
218
Acute toxiciteitsstudie
In de acute toxiciteit studie, alle ratten overleefden en geen teken van toxiciteit en abnormaliteit niet manifesteren op 1 en 2 g /kg dosering. Voor een periode van 14 dagen was er geen gedrags- of verandering in lichaamsgewicht en geen abnormale symptomen waargenomen. Zoals getoond in Tabel 3, werd het serum biochemische parameters gerapporteerd normaal. Hematologische analyses van nieren en lever geen noemenswaardige veranderingen in de behandelde groep in vergelijking met de controlegroep (Figuur 2) opwekken. De 50% orale letale dosis (LD 50) van de mannelijke en vrouwelijke ratten groter dan 2 g /kg lichaamsgewicht weight.Table 3 serum biochemische analyse van ratten. Effect van CPRHE op (a) de nierfunctie test, (b) de leverfunctie-test en (c), hematologie analyse van de knaagdieren
Animal groepen
Serum biochemische analyse
( a) Nier biochemische parameters
Natrium (mmol /L)
Kalium (mmol /L)
Chloride (mmol /L)
Co2 (mmol /L)
Anion (mmol /L)
Ureum (mmol /L)
creatinine (μ M /L)
voertuig
142,23 ± 0.45
4.85 ± 0.06
104,59 ± 0.45
23.89 ± 0.64
19.36 ± 0.48
5.28 ± 0.58
30.75 ± 1.87
CPRHE ( 1 g /kg)
143,54 ± 0.37
5.12 ± 0.72
106,24 ± 0,54
21.49 ± 0.73
19.58 ± 0.75
5.93 ± 0.43
29.81 ± 2.27
CPRHE (2 g /kg)
143,85 ± 0,82
4,91 ± 0.034
105,27 ± 0,56
22.85 ± 0.48
19.95 ± 0.39
5.68 ± 0.37
31.46 ± 2.19
Animal groepen
(b) lever biochemische parameters
Totaal eiwit (g /L)
albumine (g /L)
globuline (g /L)
TB (p mol /l )
CB (p mol /L)
AP (IU /L)
ALT (IU /L)
AST (IU /L)
GGT (IU /L)
voertuig
60,76 ± 0.94
9.56 ± 0.39
51.07 ± 1.28
2.19 ± 0.13
0,87 ± 0,17
154,45 ± 5,37
50.49 ± 1.34
173,82 ± 5,38
3.45 ± 0.27
CPRHE (1 g /kg)
58,37 ± 0.57
8.35 ± 0.53
50.68 ± 1.32
2.14 ± 0.16
0,91 ± 0,14
153,23 ± 5.87
45.65 ± 1.74
175,48 ± 6.49
3,37 ± 0,53
CPRHE (2 g /kg)
59.67 ± 1.29
8.87 ± 0.19
50.25 ± 1.45
2.15 ± 0.14
0.84 ± 0.16
155,73 ± 6,82
46.76 ± 1.48
176,27 ± 6,52
3,57 ± 0,43
Animal groepen
(c) Hematological parameters
HGB (g /dl)
HCT (%)
RBC (10 6 /ul)
MCV (fL)
MCH (pg)
MCHC (g /dl)
RDW ( %)
WBC (10 3 /ul)
bloedplaatjes (10 3 /ul)
Vehicle
15.03 ± 0.13
46 ± 0.00
9.38 ± 0.13
59.12 ± 0.65
19.25 ± 0.31
34.22 ± 0.19
17.03 ± 0.44
6.12 ± 0.47
986,75 ± 23,65
CPRHE (1 g /kg)
15.47 ± 0.13
46 ± 0.00
9.64 ± 0.18
58.54 ± 0.63
18.89 ± 0.36
34,04 ± 0,33
18.23 ± 0.58
6.23 ± 0.34
995,36 ± 25,32
CPRHE (2 g /kg)
15.98 ± 0.12
46 ± 0.00
9.83 ± 0.16
57.78 ± 0.76
18.59 ± 0.29
33.93 ± 0.28
18.77 ± 0.34
6.31 ± 0.39
1011,52 ± 23.18
Waarden uitgedrukt als gemiddelde ± SEM. ALT, alanine aminotransferase; AST, aspartaataminotransferase; AP, alkalische fosfatase; CB, geconjugeerd bilirubine; GGT: G-glutamyl transferase; HCT, hematocriet; HGB, hemoglobine; MCH, bedoel corpusculaire hemoglobine; MCHC, bedoel corpusculaire hemoglobineconcentratie; MCV, bedoel celvolume; RBC, rode bloedcellen te tellen; RDW, rode bloedcellen distributie breedte; TB: totaal bilirubine; WBC, witte bloedcellen. Ondernemingen De resultaten had geen significant verschil tussen de groepen niet te laten zien.
Figuur 2 Histologische secties. Histopathologie van nier (eerste rij) en de lever (tweede rij) acute toxiciteit die de ratten behandeld met vehiculum (5% Tween 20), CPRHE (1 g /kg) en CPRHE (2 g /kg). Het resultaat geen significante verschillen in de structuur van nieren en lever tonen tussen behandelde en controlegroepen (20 x vergroting).
PH van maaginhoud en bepaling van slijmproductie
de zuurgraad van maaginhoud in knaagdieren oraal toegediend ethanol was significant verhoogd vergeleken met de normale controlegroep, zoals weergegeven in tabel. 4. Na behandeling met omeprazol (positieve controle), de zuurgraad was significant verzwakt (P <
0.
05) en dieren voorbehandeld met CPRHE bij hoge dosis en lage dosis opgewekt significant (P <
0.
05) verhoging van de pH. Het maagslijmvlies gehalte significant verarmd bij dieren voorbehandeld met ethanol. Ondertussen, omeprazol en behandeling CPRHE aanzienlijk aangevuld het verlies in mucosale inhoud P <
0.
05, tabel 4). De resultaten van beide parameters stelde de anti-zweer effect van CPRHE.Table 4 gastrobeschermende effect van CPRHE tegen-ethanol geïnduceerde maag letsel
diergroepen
diergroepen
pH van de maag weefsel
Slijm Gewicht (g)
Zweer gebied (mm) 2
Remming (%)
MDA (umol /g eiwit)
SOD (U /g eiwit)
Stikstofmonoxide (umol /g eiwit)
Een
normale controle
7,02 ± 0,004
0.89 ± 0.03
-
- 10 ± 1,1
528 ± 16.51
10 ± 1,3
B
Laesie controle
2.99 ± 0.17
0,41 ± 0.01
880 ± 16.23
- 28 ± 2.98
333 ± 9.98
5,9 ± 0,47
C
Behandelingsbediening
6.14 ± 0.24 *
0,79 ± 0.03 *
195 ± 8.97 *
77
13 ± 0.71 *
481 ± 12.22 *
9,1 ± 1,4 *
D
CPRHE (200 mg /kg)
4,47 ± 0,09 *
0,68 ± 0,02 *
455 ± 12.24 *
48
21 ± 0.22 *
393 ± 7.67 *
7,6 ± 0,8 *
E
CPRHE (400 mg /kg )
5.82 ± 0.41 *
0,72 ± 0,02 *
325 ± 10.67 *
63
17 ± 0,41 *
459 ± 10.73 *
8,4 ± 0,9 *
alle waarden worden uitgedrukt als gemiddelde ± SD. * Geeft (P
< 0,05) vergeleken met (B) laesie controlegroep. CPRHE: C. purpurascens
wortelstok hexaan extract
Macroscopische evaluatie van maaglesies Ondernemingen De toediening van ethanol aan de ratten veroorzaakte opvallende zwarte hemorragische laesies in de maag muren (Figuur 3B) met ulcus oppervlakte van 880 ± 16.23. (mm) 2 (Tabel 4). Zoals getoond in figuur 3, knaagdieren voorbehandeld met CPRHE (Figuur 3D en E) en omeprazol (figuur 3C) was duidelijk verminderde gebieden van maagzweren formatie vergeleken met laesie controlegroep (figuur 3B). Voorbehandeling van ratten met CPRHE in doses van 200 mg /kg en 400 mg /kg onderdrukte de ulcus gebied formatie 455 ± 12,24 (mm) 2 en 325 ± 10,67 (mm) 2, die vergelijkbaar was het onderdrukkende effect van omeprazol 195 ± 8,97 (mm) 2. De incidentie van ulceratie werd verlaagd met 48% en 63% na behandeling met CPRHE bij doses van 200 mg /kg en 400 mg /kg (tabel 4). Het is het waard om op te merken dat CPRHE behandeling geholpen om de maagslijmvlies plooien bij knaagdieren (figuur 3D en E) plat. Figuur 3 Gross evalueren. Resultaten toonden dat de knaagdieren voorbehandeld met (C) omeprazol en CPRHE bij doses (D) 200 mg /kg en (E) 400 mg /kg was opvallend verlaagd gebied van maagzweren vorming vergeleken met (B) ulcus controle. (A) normale controle groep toonde geen maag laesie vorming.
Histologische beoordeling van maaglesies
microscopische analyse van het maag-laesies in de zweer controlegroep ontlokte grote schade aan het maagslijmvlies van de knaagdieren gekenmerkt door verstoord oppervlakte-epitheel en diep doorgedrongen necrotische laesies in slijmvlies geassocieerd met opvallende leukocyten infiltratie en ernstig oedeem van submucosale laag (Figuur 4B). Voorbehandeling met CPRHE (figuur 4D en E) en omeprazol (figuur 4C) bleek een beschermend effect door reductie van leukocyten infiltratie en submucosale oedeem. De aanvulling van het verlies van slijm gehalte CPRHE bleek uit het stompe hoeveelheid magenta kleur in de histologische analyse in vergelijking met de controlegroep (figuur 4D en E). De resultaten toonden aan dat CPRHE voorbehandeling bij hoge dosis en lage dosis aanzienlijk verstoord-ethanol geïnduceerde vernietiging van het maagslijmvlies. Figuur 4 histologische evaluatie. Histopathologie van knaagdieren voorbehandeld met (C) omeprazol of CPRHE de doses (D) 200 mg /kg en (E) 400 mg /kg vergeleken met (B) laesie controlegroep. (A) Normaal controlegroep aangetoond normale histologische structuur. (H en E stain10 ×).
Beoordeling van de maag malondialdehyde en superoxidedismutase Belgique Om de effecten op lipideperoxidatie en oxidatieve stress te bepalen, bepaalden we het niveau van de MDA in de maag weefsel homogenaat. Na behandeling met ethanol, de MDA niveau (28 ± 2,98 umol /g) was significant (P <
0.
05) verhoogd in vergelijking met de normale controlegroep (10 ± 1,1 umol /g). De resultaten toonden aan dat toediening van omeprazol en CPRHE voor ethanol significant (P <
0.
05) deed de MDA niveau vergeleken met de laesie controlegroep (Tabel 4). Ethanol behandelde knaagdieren veroorzaakte een significant lagere SOD activiteit vergeleken met de normale controlegroep (P <
0.
05), die werd verhoogd na behandeling met CPRHE (Tabel 4)
Evaluatie van stikstofoxide niveau. Ondernemingen de perturbatie in stikstofmonoxide niveaus van de maag werd onderzocht met Griess reagens, zoals getoond in Tabel 4. in maag weefselhomogenaat, de stikstofmonoxide niveau laesie controlegroep duidelijk (P <
0.
05) lager (5,9 ± 0,47 umol /g eiwit) vergeleken met de normale controlegroep (10 ± 1,3 pmol /g eiwit). Toediening van CPRHE significant (P <
0.
05). Stikstofoxide niveau, dat vergelijkbaar is met de stikstofoxide-generatie-effect van omeprazol
Immunohistochemie
Immunohistochemische analyse van de gastrische letsels geopenbaard dat voorbehandeling met CPRHE bij doses van 200 mg /kg en 400 mg /kg veroorzaakte opvallende opwaartse regulatie van Hsp70 eiwit in vergelijking met de zweer controlegroep (figuur 5). Daarnaast is de expressie van Hsp70 in normale controlegroep relatief hoger dan de uitdrukking in ulcus controlegroep. Immunohistochemische onderzoek van Bax eiwit aangegeven een down-regulatie van dit eiwit na toediening van CPRHE en omeprazol. Intussen is de expressie van Bax werd opgereguleerd in ulcus controlegroep vergeleken met een normale controlegroep. Figuur 5 Immunohistochemische onderzoek van Hsp70 (eerste rij) en Bax (tweede rij). De resultaten afgebeeld de neerwaartse regulatie van Bax en up-regulatie van Hsp70 eiwitten bij ratten voorbehandeld met (C) omeprazol en CPRHE bij de doses (D) 200 mg /kg en (E) 400 mg /kg vergeleken met de (B) laesie controlegroep. (A) Normaal controlegroep aangetoond normale Immunohistochemische structuur.
Discussie
talrijke soorten Zingiberaceae familie, zoals Curcuma phaeocaulis, Curcuma longa
, Amomum villosum, Zingiber officinale, Alpinia oxyphylla Kopen en Alpinia officinarum
worden gebruikt als volksgeneeskunde door de inwoners uit verschillende landen. Traditionele toepassingen en wetenschappelijke inspecties van deze planten hebben de veiligheid van deze planten als complementaire geneeskunde [26-29] bevestigd. In deze studie, de acute toxiciteit van C. purpurascens
werd onderzocht bij ratten. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.