Evaluering af akut toksicitet og gastrobeskyttende aktivitet af gurkemeje purpurascens BI. rhizom mod ethanol-induceret gastrisk mucosa skade i rotter

Evaluering af akut toksicitet og gastrobeskyttende aktivitet af gurkemeje purpurascens
BI. rhizom mod ethanol-induceret maveslimhinden skade i rotter
Abstrakt
Baggrund
Curcuma purpurascens
BI. er en medicinsk plante fra Zingiberaceae-familien, der er almindeligt anvendt som et krydderi og som folkemedicin. Formålet med den foreliggende undersøgelse er at undersøge den gastrobeskyttende aktivitet af C. purpurascens
rhizom hexan ekstrakt (CPRHE) mod ethanol-inducerede mavesår hos rotter.
Metoder
Akut toksicitetstest blev udført på 36 rotter (18 hanner og 18 hunner) med lav dosis af CPRHE (1 g /kg), høj dosis af CPRHE (2 g /kg) og vehikel (5% Tween 20). For at bestemme den gastrobeskyttende virkning af CPRHE, mavesaft surhedsgrad, brutto og histologiske gastriske læsioner blev slim indhold og ulcus-indeks evalueret i ethanol-induceret ulcus hos rotter. Desuden blev superoxiddismutase aktivitet, nitrogenoxid-niveau og immunhistokemisk evaluering af Bax og HSP70 proteiner undersøgte.
Resultater
CPRHE akut toksicitet for rotter viste ingen tegn på dødelighed og toksicitet op til 2 g /kg . Den orale indgivelse af CPRHE ved doser på 200 mg /kg og 400 mg /kg og omeprazol (positiv kontrol) i en dosis på 20 mg /kg til rotter bemærkelsesværdigt svækkede gastriske læsioner induceret af ethanol. Forbehandling af rotter med CPRHE betydeligt genopfyldes udtømning af slim indhold forårsaget af ethanol administration og faldt surhedsgrad mavens vægge. Yderligere undersøgelse af maveslimhinden homogenatet viste betydelig forhøjelse af superoxiddismutase og nitrogenoxid aktiviteter og reduktion i malondialdehyd niveau i CPRHE-behandlede gruppe, sammenlignet med læsion kontrolgruppen. Histologisk vurdering af gastriske vægge opnået fra rotter forbehandlet med CPRHE demonstreret en bemærkelsesværdig nedgang i hæmoragisk slimhindelæsioner. Immunohistokemisk farvning viste nedregulering af Bax protein og opregulering af Hsp70 protein.
Konklusion
Tilsammen disse resultater bekræftede gastrobeskyttende effekt af Curcuma purpurascens
rhizom mod gastrisk skade.
Nøgleord
Curcuma purpurascens Salg Zingiberaceae Akut toksicitet mavesår Ethanol Omeprazole Baggrund
sår er en læsion eller åbent sår, som generelt vedrører den slimhinde eller hud af kroppen. I fordøjelsessystemet, mavesår i slimhinden i duodenum eller mavesækken er en irriterende sygdom, som har ramt en mærkbar andel af verdens befolkning [1]. Forstyrrelsen i den beskyttende virkning af maveslimhinden mod mavesyre er en almindelig årsag til mavesår [2]. Undersøgelser har vist, at ætiologien af ​​denne lidelse er relateret til cigaretrygning, stress, infektioner, ernæringsmæssige mangler og alkoholforbrug [3]. Helicobacter pylori
infektion især bidrager til forekomsten af ​​90% af duodenale ulcera og 80% af mavesår [4]. Derudover indgivelse af ikke-steroide anti-inflammatoriske lægemidler forbliver som en af ​​de lægemiddelrelaterede årsager til peptisk ulcussygdom [5]. I de senere år har eksponering af menneske til en række skadelige kemikalier og agenter signifikant forhøjede risikoen for gastriske angreb [6]. Talrige antiulcusmidler, som i øjeblikket bliver brugt på markedet, udviser begrænset effekt og betydelige alvorlige bivirkninger på den menneskelige krop [7]. Derfor screening for nye agenter i stand til at behandle mavesår skal fortsætte for at finde forbindelser med reducerede bivirkninger og samtidig opretholde høj terapeutisk effekt.
Udvikling af farmaceutiske produkter afhænger væsentligt på nutraceuticals, herunder en lang række kategorier som krydderier, naturmedicin, kosttilskud og funktionelle fødevarer [8]. Talrige planter fra en række forskellige taksonomiske familier er blevet undersøgt for deres anti-ulcus aktiviteter [5, 9-11]. En sådan taksonomiske familie med omfattende medicinske anvendelser mod maveslimhindelæsioner er Zingiberaceae. Talrige plantearter i denne familie, såsom Boesenbergia rotunde
[9], Curcuma longa
[12], Zingiber officinale
[7], Alpinia galanga
[13] og Elettaria cardamomum
[14] er blevet belyst for deres gastroprotektive egenskaber.
Curcuma purpurascens
BI. er et medlem af Zingiberaceae-familien. Denne plante oprindeligt voksede i Indonesien og dens rhizome anvendes som et krydderi [15]. Den C. purpurascens
plante almindeligt kendt også som "Temu tis" og "Koneng tinggang" er blevet rapporteret at have omfattende traditionelle anvendelser i landdistrikter, der ligner andre gurkemeje
arter [15, 16]. Rhizom af denne plante er blevet brugt i folkemedicin til behandling af sår, fnat, kløe, feber, hoste og koger. Blandingen af ​​rhizomer med Alyxia stellata
anvendes som grødomslag efter fødslen [15]. På trods af disse traditionelle applikationer, er der ingen videnskabelig undersøgelse for de potentielle bioaktiviteter af denne plante. Da naturlige produkter med en lang historie af folkemusik ansøgning kan give nye terapeutiske metoder til behandling af forskellige sygdomme og lidelser [17], er den aktuelle undersøgelse udført for at evaluere den akutte toksicitet og gastrobeskyttende aktivitet af C. purpurascens
rhizom mod ethanol-induceret ulceration i rotter.
Metoder
Kemisk og narkotika
i denne undersøgelse omeprazol som reference anti-ulcus medicin blev opnået fra University of Malaya Medical center og opløst i 10% Tween 20 (Merck , Tyskland). En fortynding af Tween 20 (5% v /v) blev anvendt som vehikel.
Prøvetagning
C. purpurascens
rhizom blev opsamlet fra Yogyakarta, Indonesien. Den botaniske identifikation blev foretaget af Mr. Teo Leong Eng., Det Naturvidenskabelige Fakultet, Universitetet i Malaya. En kupon eksemplar KL 5793 blev deponeret i herbarium af Kemisk Institut, Det Naturvidenskabelige Fakultet, Universitetet i Malaya, Kuala Lumpur, Malaysia.
Forberedelse af ekstraktet
Den lufttørrede og pulveriserede jordstængler (1,0 kg) blev udblødt med n-hexan ved stuetemperatur i tre dage. Det resulterende filtrat af rhizomet blev koncentreret ved en rotationsfordamper ved 40 ° C og opbevaret ved -20 ° C indtil anvendelse. C. purpurascens
rhizom hexan ekstrakt (CPRHE) blev opløst i carboxymethylcellulose til in vivo
dyr undersøgelse.
Gaskromatografi af CPRHE
Analysen af ​​hexan ekstrakt blev udført under anvendelse af en Agilent og LECO Restek , RXI-5MS kapillarsøjle (30 m, 0,25 mm ID, 0,25 um filmtykkelse) og et massespektrometer Pengasus HT High Throughput TOFMS, som tidligere beskrevet [18]. Forbindelserne blev identificeret fra deres massespektre, ved sammenligning af retentionstiderne for toppe med tolkning af MS fragmenteringsmønstre fra data bibliotek.
Dyr og etiske spørgsmål
Sund kvindelige og Sprague Dawley
rotter (150-180 g, 6-8 uger gamle) blev opnået fra Animal Experimental Unit, Faculty of Medicine, University of Malaya, Kuala Lumpur, Malaysia. Dyrene blev huset i en isoleret kabine under kontrollerede betingelser for temperatur (~ 24 ° C), fugtighed (~ 50%) og lys (en daglig forhold på 1: 1). Dyrene fik lov adgang til standard rotte pellets og RO vand. Alle forsøgene dyr blev udført i overensstemmelse med National Institutes of Health Guide til pleje og anvendelse af forsøgsdyr og med forudgående godkendelse fra udvalget om Animal House, Faculty of Medicine, University of Malaya (Ethics No. 2014-03 -05 /PHAR /R /eR).
Akut toksicitetsundersøgelse
at bestemme en sikker række doser til CPRHE blev toksicitet evaluering af CPRHE udført som tidligere beskrevet [19]. Kort fortalt blev 36 rotter, herunder 18 hanner og 18 hunner opdelt i tre grupper mærket som køretøjet (5% Tween 20), lav dosis af CPRHE (1 g /kg) og høj dosis af CPRHE (2 g /kg). Rotterne blev fastet i 16 timer forud for dosering (vand var tilgængelige, undtagen i de sidste 2 timer). Efter doseringen var fødevarer tilbageholdt i endnu 1 til 3 h. Alle andre tegn på toksicitet og dødelighed blev yderligere registreret i løbet af to uger. På dag 15 blev dyrene aflivet for hæmatologiske og histologisk analyse.
Ethanol-induceret gastrisk ulceration
forebyggende potentiale CPRHE mod overfladiske hæmoragisk slimhindelæsioner blev undersøgt hos de normale rotter. Forud for eksperimentet blev Sprague Dawley
hanrotter fastede i 24 timer (vand var tilgængelige, undtagen i de sidste 2 timer). Tredive rotter blev inddelt vilkårligt i 5 grupper med 6 rotter i hver og forbehandlede tilsvarende (tabel 1). Efter 1 time af præ-behandling blev alle rotterne tvangsfodret med 5% Tween 20 (5 ml /kg) eller absolut ethanol (5 ml /kg) baseret på dyret eksperimentelle design. Rotterne blev aflivet 1 time senere med en over-dosis af xylazin og ketamin og deres maver var umiddelbart excised.Table 1 Det eksperimentelle design og specifikationer af dyret undersøgelse
Grupper
beskrivelse

Forbehandling
behandling
Group A
Normal kontrol
5% Tween 20 (5 ml /kg)
5% Tween 20 B
Gruppen
Læsion kontrol
5% Tween 20 (5 ml /kg)
absolut ethanol
gruppe C
Behandlingskontrol
omeprazol (20 mg /kg)
absolut ethanol
Gruppe D
Eksperimentel GROUP1
CPRHE (200 mg /kg)
absolut ethanol
Gruppe E
Eksperimentel GROUP2
CPRHE (400 mg /kg)
absolut ethanol
bestemmelse af tabet i mucosale indhold og mavesaft surhedsgrad
maven af ​​hver rotte blev dissekeret langs den største krumning, og pH-meter titrering med 0,1 N NaOH blev anvendt til at analysere brintionkoncentrationen i maveindholdet udtrykt i mEq /jeg værdsætter. Derefter blev et objektglas anvendes til forsigtigt at skrabe maveslimhinden af ​​rotterne efterfulgt af vejning af de opnåede slim med en præcision elektronisk balance.
Makroskopisk analyse af læsioner
I overensstemmelse med flere undersøgelser, ethanol-inducerede sår på maveslimhinden blev karakteriseret som langstrakte bånd af hæmorrhagiske læsioner parallelt med den lange akse af maven [11, 20]. Den hæmoragisk beskadigelse af maven blev bestemt ved vurdering af luminale overflade. Den beskyttende potentiale (P%) af hvert forbehandling blev beregnet under anvendelse af en planimeter (10 × 10 mm 2) og dissektionsmikroskop (1,8 ×) hvor UC og UT var såret område af kontrol og behandlede gruppe, henholdsvis . Målingen af ​​ulcus område blev udført som tidligere beskrevet detaljeret af Abdelwahab et al. [9]. P
%
=
U
C
-
U
T
U
C
×
100
Histologisk evaluering af gastriske læsioner
Histologisk analyse af prøver af mavens vægge blev udført ved hjælp af 10% bufferet formalin til fiksering. Prøverne blev indlejret i paraffin efterfulgt af 5 um sektionering og farvning med hæmatoxylin og eosin.
Bestemmelse af lipidperoxidation aktivitet ved hjælp af thiobarbitursyre reaktivt stof assay
at måle koncentrationen malondialdehyd (MDA), gennemførte vi thiobarbitursyre reaktivt stof (TBARS) assay som tidligere beskrevet [21]. Kort fortalt homogeniseret mave (10% vægt /volumen) i 0,1 mol /l PBS blev centrifugeret ved 4 ° C i 10 minutter. Derefter blev supernatanten (3 ml) blandet med 20% trichloreddikesyre-opløsning og 0,67% 2-thiobarbitursyre efterfulgt af opvarmning i et vandbad (95 ° C) i 30 min. Dernæst blev MDA koncentrationen af ​​den opnåede supernatant bestemt spektrofotometrisk ved 532 nm. Proteinkoncentrationerne blev udtrykt som MDA mol /g protein ved anvendelse af Lowry-metoden [22].
Bestemmelse af superoxiddismutase (SOD) aktivitet
Aktiviteten af ​​SOD-enzym blev estimeret ved at bestemme dens potentiale til at undertrykke den fotokemiske reaktion af NBT (nitroblue tetrazolium), som tidligere beskrevet af Sun og kolleger [23]. I dette assay blev homogeniseret væv centrifugeret to gange ved 4 ° C i 10 og 20 min. I et mørkt kammer, blev reaktanten (1 ml, 50 mM phosphatpuffer, 100 nM EDTA og 13 mM L-methionin, pH 7,8) blandet med den resulterende supernatant (30 pi), NBT (150 pi, 75 uM) og riboflavin (300 pi, 2 uM). Den resulterende opløsning blev udsat for fluorescerende pærer (15 W) i 15 min, og absorbansen blev bestemt ved 560 nm bølgelængde under anvendelse af et spektrofotometer.
Nitrogenoxid niveau
at evaluere effekten af ​​CPRHE på nitrogenoxid (NO) generation i mavetarmkanalen, blev Griess reaktion anvendes til bestemmelse af samlet nitrit /nitrat niveauer, som beskrevet tidligere af Tsikas og kolleger [24]. Kort fortalt blev supernatanten (50 pi) af den homogeniseredes mave blandes med Griess reagens. Efter 10 minutter blev efterfølgende kolorimetrisk analyse ved 540 nm under anvendelse af en Tecan Infinite 200 Pro mikropladelæser (Tecan, Männedorf, Schweiz). Den genererede NO i kultursupernatanten blev bestemt ved anvendelse af en standardkurve af natriumnitrit og resultater blev udtrykt som pmol nitrit /nitrat per gram protein.
Immunhistokemisk evaluering
immunhistokemisk analyse af Bax og HSP70-proteiner blev udført som tidligere beskrevet med visse ændringer [25]. Kort fortalt blev væv paraffinized i xylen og rehydreret under anvendelse gradueret alkohol. Den kogende natriumcitratpuffer (10 mM) blev anvendt til antigen hentning proces efterfulgt af immunhistokemisk farvning ifølge producentens instruktion (DakoCytomation, USA). Efter blokering af den endogene peroxidase med peroxidase blok, Bax (1: 200) eller Hsp70 (1: 500) biotinylerede primære antistoffer blev anvendt, og sektionerne blev inkuberet i 15 min. Dernæst blev snit inkuberet med den passende mængde streptavidin-HRP i 15 minutter. Derefter blev snittene eksponeret for diaminobenzidin substratechromagen i 5 sek, derefter dyppet i svag ammoniak (0,037 mol /l) i ti gange. Brune pletter på objektglas angivne positive resultater af den immunhistokemisk farvning som observeret under et lysmikroskop.
Statistisk analyse
Alle værdier blev rapporteret som middelværdi ± SD. De statistiske signifikante forskelle mellem grupperne blev bestemt ved hjælp af en-vejs ANOVA efterfulgt af post hoc Tukeys multiple sammenligningstest. En værdi på p
< 0,05 blev betragtet som signifikant Search Results Salg Gaskromatografi profil CPRHE
Som vist i figur 1 blev hexan ekstrakt karakteriseret ved anvendelse af GC-MS-TOF.. Kromatogrammet viste, at de vigtigste forbindelser i CPRHE er c-elemene (1), benzofuran, 6-ethenyl-4,5,6,7-tetrahydro-3,6-dimethyl-5-isopropenyl (2), 3,7- cyclodecadien-1-on, 3,7-dimethyl-10- (1-methylethyliden) (3), turmeron (4) og curlone (5) (tabel 2). Figur 1 En typisk gaskromatogrammet. Kromatogrammet viste de kemiske bestanddele af C. purpurascens
hexan ekstrakt.
Tabel 2 De store bioaktive forbindelser C. purpurascens hexan ekstrakt som karakteriseres ved hjælp af GC-MS-TOF analyse
Peak No.

Navn på forbindelser
Retention Time (r)
Mass
1
c-elemen
1812,55
189
2
benzofuran, 6-ethenyl-4,5,6,7-tetrahydro-3,6-dimethyl-5-isopropenyl
1931.3
216
3
3,7-cyclodecadien-1-one,3,7-dimethyl-10-(1-methylethylidene)
2123.3
218
4
turmerone
2254.45
218
5
curlone
2326.55
218
Akut toksicitet
I den akutte toksicitet, alle rotter overlevede og ikke manifestere nogen tegn på toksicitet og abnormitet ved 1 og 2 g /kg dosis. For en varighed på 14 dage, der ikke var nogen adfærdsmæssige eller kropsvægt ændringer og ingen unormale tegn blev observeret. Som vist i tabel 3 blev de serum biokemiske parametre rapporteret at være normal. Hæmatologisk analyse af nyre og lever fremkaldte ikke nogen bemærkelsesværdige ændringer i den behandlede gruppe sammenlignet med kontrolgruppen (figur 2). De 50% orale letale dosis (LD 50) til rotterne mandlige og kvindelige var større end 2 g /kg krop weight.Table 3 Serum biokemisk analyse af rotter. Effekt af CPRHE på (a) nyrefunktion test, (b) leverfunktionstest og (c) hæmatologi analyse af gnavere
Animal grupper
Serum biokemisk analyse
( a) Nyre biokemiske parametre
Natrium (mM /L)
Kalium (mM /L)
Chloride (mM /L)
co2 (mM /L)
Anion (mM /L)
Urea (mM /L)
Kreatinin (μ M /L)

Vehicle
142,23 ± 0,45
4,85 ± 0,06
104,59 ± 0,45
23,89 ± 0,64
19,36 ± 0,48
5.28 ± 0,58
30,75 ± 1,87
CPRHE ( 1 g /kg)
143,54 ± 0,37
5.12 ± 0,72
106,24 ± 0,54
21,49 ± 0,73
19,58 ± 0,75
5.93 ± 0,43
29,81 ± 2,27
CPRHE (2 g /kg)
143,85 ± 0,82
4,91 ± 0,034
105,27 ± 0,56
22,85 ± 0,48
19.95 ± 0,39
5,68 ± 0,37
31,46 ± 2,19
dyregrupper Salg (b) Lever biokemiske parametre
Total protein (g /L)
Albumin (g /L)
globulin (g /L)
TB (pmol /L )
CB (pmol /L)
AP (IU /L)
ALT (IU /L)
AST (IU /L)
GGT (IU /L)
Vehicle
60,76 ± 0,94
9,56 ± 0,39
51,07 ± 1,28
2.19 ± 0,13
0,87 ± 0,17
154,45 ± 5,37
50,49 ± 1,34
173,82 ± 5,38
3,45 ± 0,27
CPRHE (1 g /kg)
58,37 ± 0,57
8,35 ± 0,53
50,68 ± 1,32
2,14 ± 0,16
0,91 ± 0,14
153,23 ± 5.87
45,65 ± 1,74
175,48 ± 6,49
3,37 ± 0,53
CPRHE (2 g /kg)
59,67 ± 1,29
8,87 ± 0,19
50,25 ± 1,45
2,15 ± 0,14
0,84 ± 0,16
155,73 ± 6,82
46,76 ± 1,48
176,27 ± 6,52
3,57 ± 0,43
Animal grupper
(c) Hæmatologiske parametre
HGB (g /dl)
HCT (%)
RBC (10 6 /uL)
MCV (fL)
MCH (pg)
MCHC (g /dl)
RDW ( %)
WBC (10 3 /uL)
Trombocyt (10 3 /uL)
Vehicle
15.03 ± 0,13
46 ± 0,00
9.38 ± 0,13
59,12 ± 0,65
19,25 ± 0,31
34,22 ± 0,19
17,03 ± 0,44
6.12 ± 0,47
986,75 ± 23,65
CPRHE (1 g /kg)
15,47 ± 0,13
46 ± 0,00
9,64 ± 0,18
58,54 ± 0,63
18,89 ± 0,36
34,04 ± 0,33
18,23 ± 0,58
6.23 ± 0,34
995,36 ± 25,32
CPRHE (2 g /kg)
15.98 ± 0,12
46 ± 0,00
9,83 ± 0,16
57,78 ± 0,76
18,59 ± 0,29
33,93 ± 0,28
18,77 ± 0,34
6.31 ± 0,39
1011,52 ± 23,18
Værdier udtrykt som middelværdi ± SEM. ALT, alaninaminotransferase; AST, aspartataminotransferase; AP, alkalisk phosphatase; CB, konjugeret bilirubin; GGT: G-glutamyltransferase; HCT, hæmatokrit; HGB, hæmoglobin; MCH, betyde corpuscular hæmoglobin; MCHC, betyde korpuskulær hæmoglobinkoncentration; MCV, betyde corpuscular volumen; RBC, røde celletal RDW, røde blodlegemer fordeling bredde; TB: total bilirubin; WBC, hvide blodlegemer.
Resultaterne viste ingen signifikant forskel mellem grupperne.
Figur 2 Histologiske sektioner. Histopatologi af nyre (første række) og lever (anden række) i akut toksicitet repræsenterer rotterne behandlet med vehikel (5% Tween 20), CPRHE (1 g /kg) og CPRHE (2 g /kg). Resultatet viste ikke signifikante forskelle i strukturerne i nyre og lever mellem behandlede og kontrolgrupper (20 × forstørrelser).
PH af gastrisk indhold og bestemmelse af slim produktion
surhedsgrad af gastrisk indhold i gnavere oralt med ethanol blev signifikant forøget sammenlignet med den normale kontrolgruppe, som vist i tabel. 4. Efter behandling med omeprazol (positiv kontrol), surhedsgraden var væsentligt svækket (P <
0.
05) og dyr forbehandlet med CPRHE ved høj dosis og lav dosis fremkaldte signifikant (P <
0.
05) forøgelse af pH. Den gastriske slim indhold blev signifikant formindsket indhold af dyr forbehandlet med ethanol. I mellemtiden, omeprazol og CPRHE behandling signifikant genopfyldes tab i mucosale indhold P <
0.
05, tabel 4). Resultaterne af begge parametre foreslog anti-mavesår effekt af CPRHE.Table 4 gastrobeskyttende effekt af CPRHE mod ethanol-induceret gastrisk skade
dyregrupper
dyregrupper
pH i gastrisk væv

slim Vægt (g)
ulcus-området (mm) 2
Inhibition (%)
MDA (pmol /g protein)

SOD (U /g protein)
Nitrogenoxid (pmol /g protein)
A
Normal kontrol
7,02 ± 0,004
0,89 ± 0,03
- -
10 ± 1,1
528 ± 16,51
10 ± 1,3
B
Læsion kontrol
2,99 ± 0,17
0,41 ± 0,01
880 ± 16,23 -
28 ± 2,98
333 ± 9,98
5,9 ± 0,47
C
Behandlingskontrol
6,14 ± 0,24 *
0,79 ± 0,03 *
195 ± 8.97 *
77
13 ± 0,71 *
481 ± 12,22 *
9,1 ± 1,4 *
D
CPRHE (200 mg /kg)
4,47 ± 0,09 *
0,68 ± 0,02 *
455 ± 12,24 *
48
21 ± 0,22 *
393 ± 7,67 *
7,6 ± 0,8 *
E
CPRHE (400 mg /kg )
5,82 ± 0,41 *
0,72 ± 0,02 *
325 ± 10,67 *
63
17 ± 0,41 *
459 ± 10.73 *
8,4 ± 0,9 *
alle værdier er udtrykt som middelværdi ± SD. * Angiver (P
< 0,05) sammenlignet med (B) læsion kontrolgruppen. CPRHE: C. purpurascens
rhizom hexanekstrakt
Makroskopisk evaluering af gastriske læsioner
administration af ethanol til rotterne inducerede mærkbar sort hæmorrhagiske læsioner i mavens vægge (figur 3B) med ulcus areal på 880 ± 16,23. (mm) 2 (tabel 4). Som vist i figur 3, gnavere forbehandlede med CPRHE (figur 3D og E) og omeprazol (figur 3C) havde markant reduceret områder af mavesår dannelse i sammenligning med læsion kontrolgruppen (figur 3B). Forbehandling af rotter med CPRHE ved doser på 200 mg /kg og 400 mg /kg undertrykte dannelsen såret område til 455 ± 12,24 (mm) 2 og 325 ± 10,67 (mm) 2, som var sammenlignelig til den undertrykkende virkning af omeprazol 195 ± 8,97 (mm) 2. Forekomsten af ​​ulcus blev reduceret med 48% og 63% efter behandling med CPRHE ved doser på 200 mg /kg og 400 mg /kg (tabel 4). Det er værd at bemærke, at CPRHE behandling hjalp at flade mavens slimhinder folder i gnavere (figur 3D og E). Figur 3 Gross evaluering. Resultater viste, at de gnavere forbehandlet med (C) omeprazol og CPRHE ved doser på (D) 200 mg /kg og (E) 400 mg /kg havde påfaldende reduktion af arealet af gastrisk sårdannelse sammenlignet med (B) ulcus kontrol. (A) Normal kontrolgruppe viste ingen gastrisk læsion dannelse.
Histologisk vurdering af gastriske læsioner
Mikroskopisk analyse af gastriske læsioner i såret kontrolgruppen fremkaldte omfattende skader på maveslimhinden af ​​gnavere kendetegnet ved forstyrret overflade epitel og trængt dybt ind nekrotiske læsioner i slimhinder forbundet med iøjnefaldende leukocytter infiltration og svær ødem submukøst lag (figur 4B). Forbehandling med CPRHE (figur 4D og E) og omeprazol (figur 4C) afslørede en beskyttende virkning ved reduktion i leukocytter infiltration og submukøs ødem. Genopfyldning af tabet i slim indhold ved CPRHE fremgik af Stumpy mængde magenta farve i histologisk analyse sammenlignet med kontrolgruppen (figur 4D og E). Resultaterne viste, at CPRHE forbehandling ved høj dosis og lavdosis markant forstyrret ethanol-induceret ødelæggelse af gastrisk slimhinde. Figur 4 Histologisk evaluering. Histopatologi af gnavere forbehandlede med (C) omeprazol eller CPRHE i doser på (D) 200 mg /kg og (E) 400 mg /kg sammenlignet med (B) læsion kontrolgruppen. (A) Normal kontrolgruppe viste normal histologiske struktur. (H og E stain10 ×).
Vurdering af mave malondialdehyd og superoxiddismutase
at bestemme virkningerne på lipidperoxidation og oxidativ stress, bestemte vi niveauet af MDA i gastrisk vævshomogenat. Efter behandling med ethanol, MDA niveau (28 ± 2,98 pmol /g) var signifikant (P <
0.
05) forhøjet sammenlignet med den normale kontrolgruppe (10 ± 1,1 pmol /g). Resultaterne viste, at indgivelse af CPRHE og omeprazol før ethanol signifikant (P <
0.
05) nedsatte MDA niveau i forhold til læsionen kontrolgruppen (tabel 4). Ethanol behandlede gnavere fremkaldte en signifikant lavere SOD-aktivitet sammenlignet med den normale kontrolgruppe (P <
0.
05), der var forhøjet ved behandling med CPRHE (tabel 4)
Vurdering af nitrogenoxid niveau.
perturbation i nitrogenoxid niveauer af maven blev undersøgt ved anvendelse af Griess-reagens, som vist i tabel 4. i gastrisk væv homogenatet, nitrogenoxid niveau læsion kontrolgruppen var markant (P <
0.
05) lavere (5,9 ± 0,47 pmol /g protein) sammenlignet med den normale kontrolgruppe (10 ± 1,3 pmol /g protein). Administration af CPRHE signifikant (P <
0.
05). Forhøjet nitrogenoxid niveau, som var sammenlignelig med den nitrogenoxid-generation virkning af omeprazol
Immunhistokemi
Immunohistokemisk analyse af gastriske skader afsløret at forbehandling med CPRHE i doser på 200 mg /kg og 400 mg /kg forårsagede iøjnefaldende opregulering af Hsp70-protein sammenlignet med ulcus kontrolgruppen (figur 5). Derudover er ekspressionen af ​​Hsp70 i normal kontrolgruppe var relativt højere end ekspression i ulcus kontrolgruppen. Immunhistokemisk undersøgelse af Bax-protein indikerede en nedregulering af dette protein efter administration af CPRHE og omeprazol. I mellemtiden ekspressionen af ​​Bax blev opreguleret i ulcus kontrolgruppen i sammenligning med normal kontrolgruppe. Figur 5 Immunhistokemisk undersøgelse af Hsp70 (første række) og Bax (anden række). Resultaterne afbildet nedreguleringen af ​​Bax og opregulering af Hsp70-proteiner i rotter forbehandlet med (C) omeprazol og CPRHE i doser på (D) 200 mg /kg og (E) 400 mg /kg i forhold til den (B) læsion kontrolgruppen. (A) Normal kontrolgruppe viste normal immunhistokemisk struktur.
Diskussion
Talrige arter af Zingiberaceae familie, såsom Curcuma phaeocaulis, Curcuma longa
, Amomum villosum, Zingiber officinale, Alpinia oxyphylla
og Alpinia officinarum
anvendes som folkemedicin af de indfødte fra forskellige lande. Traditionelle anvendelser og videnskabelige inspektioner af disse planter har bekræftet sikkerheden af ​​disse planter som komplementær medicin [26-29]. I den foreliggende undersøgelse, den akutte toksicitet af C. purpurascens
blev evalueret i rotter. Vores resultater viste ingen tegn på renal eller hepatisk toksicitet som undersøgt af biokemiske og histologiske analyse.
En af de medvirkende faktorer i mavesår dannelse er ethanol. Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Gastrisk cancer progression forbundet med lokale humorale immunforsvar responses
• Alvorlig gastrisk variceal blødning på grund af milt-arterie trombose og konsekutiv arteriel bypass