Valutazione della tossicità acuta e l'attività gastroprotettiva di curcuma purpurascens BI. rizoma contro le lesioni della mucosa gastrica etanolo-indotta nei ratti

Valutazione della tossicità acuta e l'attività gastroprotettiva di curcuma purpurascens
BI. rizoma contro le lesioni della mucosa gastrica etanolo-indotta nei ratti
Abstract
sfondo
Curcuma purpurascens
BI. è una pianta medicinale della famiglia delle Zingiberaceae, che è ampiamente utilizzato come spezia e come medicina popolare. Lo scopo di questo studio è quello di indagare l'attività gastroprotettiva di C. purpurascens
estratto di rizoma esano (CPRHE) contro etanolo indotta ulcere gastriche nei ratti.
Metodi
Test di tossicità acuta è stata effettuata su 36 ratti (18 maschi e 18 femmine) con basse dosi di CPRHE (1 g /kg), dose elevata di CPRHE (2 g /kg) e il veicolo (5% Tween 20). Per determinare l'effetto gastroprotettivo di CPRHE, acidità succo gastrico, lordo e lesioni gastriche istologiche, contenuti muco e l'indice di ulcera sono stati valutati in ulcera etanolo-indotta nei ratti. Inoltre, l'attività superossido dismutasi, il livello di ossido nitrico e la valutazione immunoistochimica di proteine ​​Bax e HSP70 sono stati esaminati.
Risultati
Il CPRHE test di tossicità acuta su ratti non hanno rivelato segni di mortalità e la tossicità fino a 2 g /kg . La somministrazione orale di CPRHE a dosi di 200 mg /kg e 400 mg /kg e omeprazolo (controllo positivo) alla dose di 20 mg /kg in ratti notevolmente attenuati lesioni gastriche indotte da etanolo. Il pre-trattamento dei ratti con CPRHE significativamente rifornito l'esaurimento del contenuto muco causata dalla somministrazione di etanolo e diminuisce l'acidità di pareti gastriche. Ulteriore esame dei gastrica omogenato mucosa rivelato significativo aumento della superossido dismutasi e attività di ossido nitrico e riduzione del livello di malondialdeide nel gruppo CPRHE trattato, rispetto al gruppo di controllo lesione. la valutazione istologica delle pareti gastriche ottenute da topi pre-trattati con CPRHE dimostrato una diminuzione notevole nelle lesioni emorragiche della mucosa. La colorazione immunoistochimica ha mostrato down-regulation di proteine ​​Bax e up-regulation di proteine ​​Hsp70.
Conclusione
Presi insieme, questi risultati hanno confermato l'effetto gastroprotettori di Curcuma purpurascens
rizoma contro i danni gastrici.
parole chiave
Curcuma purpurascens
Zingiberaceae tossicità acuta ulcera gastrica Etanolo Omeprazolo Sfondo
ulcera è una lesione o ferita aperta che appartiene in generale alla mucosa o la pelle del corpo. Nel sistema digestivo, ulcera peptica nel rivestimento del duodeno o di stomaco è una malattia irritante che affligge una parte notevole della popolazione mondiale [1]. L'interruzione della effetto protettivo della mucosa dello stomaco contro acido gastrico è una causa comune di ulcera peptica [2]. Studi hanno dimostrato che l'eziologia di questo disturbo è correlato al fumo di sigaretta, stress, infezioni, carenze nutrizionali e consumo di alcol [3]. Helicobacter pylori
infezione in particolare, contribuisce alla comparsa del 90% delle ulcere duodenali e l'80% delle ulcere gastriche [4]. Inoltre, la somministrazione di farmaci anti-infiammatori non steroidei rimane come una delle cause droga di ulcera peptica [5]. Negli ultimi anni, l'esposizione di umana ad una varietà di sostanze chimiche nocive e agenti ha notevolmente elevato il rischio di attacchi gastrici [6]. Numerosi agenti anti-ulcera, che sono attualmente in uso nel mercato, mostrano l'efficacia limitata e notevoli effetti collaterali gravi sul corpo umano [7]. Pertanto, lo screening di nuovi agenti in grado di trattare le ulcere peptiche deve continuare al fine di trovare composti con effetti collaterali ridotti, pur mantenendo alta terapeutico efficacia.
Sviluppo di prodotti farmaceutici si basa sostanzialmente su nutraceutici, tra cui una vasta gamma di categorie come spezie, prodotti erboristici, integratori alimentari e alimenti funzionali [8]. Numerose piante provenienti da una varietà di famiglie tassonomiche sono stati studiati per la loro attività anti-ulcera [5, 9-11]. Uno di questi famiglia tassonomica con ampi usi medicinali contro le lesioni della mucosa gastrica è Zingiberaceae. Numerose specie vegetali in questa famiglia, come ad esempio Boesenbergia rotunda
[9], Curcuma longa
[12], Zingiber officinale
[7], Alpinia galanga
[13] e Elettaria cardamomum
[14] sono stati chiariti per le loro proprietà gastroprotettori.
Curcuma purpurascens
BI. è un membro della famiglia Zingiberaceae. Questa pianta originaria è cresciuto in Indonesia e il suo rizoma è usato come spezia [15]. Il C. purpurascens
pianta comunemente nota anche come "Temu tis" e "Koneng tinggang" è stato segnalato per avere ampi usi tradizionali delle comunità rurali, in modo simile ad altre specie curcuma
[15, 16]. Rizoma di questa pianta è stata usata nella medicina popolare per il trattamento di ferite, scabbia, prurito, febbre, tosse e bolle. La miscela dei rizomi con Alyxia stellata
è usato come un impiastro dopo il parto [15]. Nonostante queste applicazioni tradizionali, non vi è alcuna ricerca scientifica per i potenziali bioattività di questa pianta. Poiché i prodotti naturali con una lunga storia di applicazione piega possono fornire nuovi approcci terapeutici per il trattamento di varie malattie e disturbi [17], l'attuale studio è condotto per valutare la tossicità acuta e l'attività gastroprotettiva del C. purpurascens
rizoma contro ulcerazioni etanolo-indotta nei ratti.
Metodi
chimica e droga
in questo studio, l'omeprazolo del medicinale di riferimento anti-ulcera è stato ottenuto presso l'Università di Malaya Medical center e sciolto in 10% di Tween 20 (Merck , Germania). Una diluizione di Tween 20 (5% v /v) è stato utilizzato come veicolo. Collezione
Esempio
Il C. purpurascens
rizoma è stato raccolto da Yogyakarta, Indonesia. L'identificazione botanica è stata fatta da Mr. Teo Leong Eng., Facoltà di Scienze, Università della Malaysia. Un buono esemplare KL 5793 è stato depositato nel erbario del Dipartimento di Chimica, Facoltà di Scienze, Università di Malaya, Kuala Lumpur, Malesia.
Preparazione dell'estratto
I rizomi aria-essiccato e in polvere (1,0 kg) sono stati macerati con n-esano a temperatura ambiente per tre giorni. Il filtrato risultante del rizoma stata concentrata mediante evaporatore rotante a 40 ° C e conservato a -20 ° C fino al momento dell'uso. Il C. purpurascens
estratto di rizoma esano (CPRHE) è stato sciolto in carbossimetilcellulosa per in vivo
studio su animali
. Cromatografia gas di CPRHE
L'analisi dell'estratto esano è stata effettuata utilizzando un Agilent e LECO RESTEK colonna Rxi-5MS capillare (30 m, 0,25 mm di diametro, 0,25 micron spessore del film) e uno spettrometro di massa Pengasus HT High Throughput TOFMS, come precedentemente descritto [18]. I composti sono stati identificati dal loro spettri di massa, al confronto dei tempi di ritenzione dei picchi con l'interpretazione dei modelli di frammentazione MS dalla biblioteca dei dati
Animali e questioni etiche
femmina in buona salute e maschile Sprague Dawley
ratti. (150-180 g, 6-8 settimane di età) sono stati ottenuti dall'unità di animali Sperimentale, Facoltà di Medicina, Università di Malaya, Kuala Lumpur, Malesia. Gli animali sono stati alloggiati in una cabina isolata in condizioni controllate di temperatura (~ 24 ° C), umidità (~ 50%) e la luce (rapporto giornaliero di 1: 1). Gli animali hanno potuto accedere al pellet di ratto standard e acqua RO. Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in conformità con il National Institutes of Health Guide per la cura e l'uso di animali da laboratorio e con la preventiva approvazione da parte del Comitato di Animal House, Facoltà di Medicina, Università della Malaysia (Etica n ° 2014-03 -05 /PHAR /R /ER).
acuta studio di tossicità
per determinare un range di sicurezza di dosi per CPRHE, la valutazione della tossicità di CPRHE è stata effettuata come descritto in precedenza [19]. In breve, 36 ratti, di cui 18 maschi e 18 femmine sono stati divisi in tre gruppi etichettati come veicolo (5% Tween 20), bassa dose di CPRHE (1 g /kg) e la dose elevata di CPRHE (2 g /kg). I ratti sono stati tenuti a digiuno per 16 ore prima della somministrazione (acqua era accessibile ad eccezione dell'ultimo 2 h). Dopo il dosaggio, il cibo è stato trattenuto per un altro 1 a 3 ore. Eventuali altri segni di tossicità e la mortalità sono stati ulteriormente registrati durante il periodo di due settimane. Il giorno 15, gli animali sono stati sacrificati per ematologica e l'analisi istologica.
Ulcera gastrica etanolo-indotta
Il potenziale di prevenzione di CPRHE contro le lesioni emorragiche mucose superficiali sono stati studiati nei ratti normali. Prima dell'esperimento, Sprague Dawley
ratti maschi sono stati tenuti a digiuno per 24 h (acqua era accessibile ad eccezione dell'ultimo 2 h). Trenta ratti sono stati divisi casualmente in 5 gruppi di 6 ratti ciascuno e pre-trattato di conseguenza (Tabella 1). Dopo 1 h di pre-trattamento, tutti i ratti sono stati gavaged con 5% Tween 20 (5 ml /kg) o etanolo assoluto (5 ml /kg) sulla base del disegno sperimentale animale. I ratti sono stati sacrificati 1 h più tardi con un over-dose di xilazina e ketamina e il loro stomaco sono stati immediatamente excised.Table 1 Il disegno sperimentale e le specifiche dello studio animale
Gruppi
Descrizione

Il pre-trattamento
trattamento
Gruppo A
controllo normale
5% di Tween 20 (5 ml /kg)
5% di Tween 20
Gruppo B
controllo lesione
5% di Tween 20 (5 ml /kg)
assoluta etanolo
Gruppo C
controllo Trattamento
omeprazolo (20 mg /kg)
assoluta etanolo
Gruppo D
Gruppo1 Sperimentale
CPRHE (200 mg /kg)
etanolo assoluto
Gruppo E
group2 Sperimentale
CPRHE (400 mg /kg)
assoluta etanolo
Determinazione della perdita di contenuti mucosale e succo gastrico acidità
lo stomaco di ciascun ratto è stato sezionato lungo la grande curvatura, e titolazione pH-metro con 0,1 N NaOH è stata utilizzata per analizzare la concentrazione di ioni idrogeno nei contenuti gastrici espresso in mEq /ho valore. Poi, un vetrino è stato applicato per raschiare delicatamente la mucosa gastrica dei ratti seguita dalla pesata del muco ottenuti con una bilancia elettronica di precisione.
Analisi macroscopica delle lesioni
Conformemente diversi studi, ulcere etanolo-indotta sulla mucosa gastrica sono stati caratterizzati come bande allungate di lesioni emorragiche parallele all'asse lungo dello stomaco [11, 20]. Il danno emorragica dello stomaco è stata determinata dalla valutazione della superficie luminale. Il potenziale di protezione (P%) di ciascuna pre-trattamento è stato calcolato utilizzando un planimetro (10 × 10 mm 2) e microscopio per dissezione (1,8 ×) dove UC e UT erano l'area dell'ulcera del controllo e gruppo trattato rispettivamente . La misurazione della superficie dell'ulcera è stata eseguita come precedentemente descritto in dettaglio da Abdelwahab et al. [9]. P
%
=
U
C
-
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T
U
C
×
100

• la progressione del cancro gastrico associati con responses
• Grave emorragia da varici gastriche a causa di una trombosi dell'arteria splenica e arteriosa consecutivo bypass