PLoS ONE: изоцитратдегидрогеназа хеликобактерной инфекции Потенциально Индуцирует гуморального иммунного ответа у пациентов с язвенной болезнью и гастрите

Абстрактный

Фон

H. пилори
вызывает гастрит и пептической язвы и является фактором риска для развития рака желудка. Многие из белков, таких как уреазы, поринов, flagellins и токсинов, таких как липопротеины полисахаридами были идентифицированы в качестве потенциальных факторов вирулентности, которые индуцируют провоспалительного реакции. Мы сообщаем иммуногенные потенциалы изоцитратдегидрогеназы (ICD), что является важным белком ведению домашнего хозяйства из H. пилори
.

Методология /Основные выводы
<р> аминокислотные последовательности H. пилори
МКБ были подвергнуты в силикомарганца
анализа для регионов с предсказуемо высокой антигенной индексов. Кроме того, численное моделирование в H. пилори
ICD, в сопоставлении с E. палочка
ICD была проведена для определения уровней структуры сходства и наличие поверхностных мотивов подвергаются, если таковые имеются. <ЕМ> ИКД
ген клонируют, экспрессируют и очищают до очень высокой однородности. Гуморальный ответ, направленный против H. пилори
ICD был обнаружен через иммуноферментный анализ (ИФА) в 82 человека предметов, состоящий из 58 пациентов с H. пилори
ассоциированным гастритом или язвенной болезни и 24 бессимптомных здоровых лиц. H. пилори
ICD вызвал потенциально высокий гуморальный иммунный ответ и показал высокие титры антител в сыворотке крови, соответствующие эндоскопически подтвержденным гастрит и язву предметы болезни. Тем не менее, мочевино-дыхание-теста отрицательные образцы здорового управления и образцы бессимптомные контроля не выявили каких-либо обнаруживаемых иммунных реакций. ELISA для провоспалительного цитокина IL-8 не проявляют каких-либо значительных провоспалительных активность МКБ.

Выводы /Значение
<р> ICD из H. пилори
является иммуноген, который взаимодействует с иммунной системой хозяина последующего к возможному аутолитической высвобождения и тем самым значительно вызывает гуморальные реакции у лиц с инвазивным H. пилори
инфекции. Однако, ICD не может существенно стимулировать IL8 индукции в культивируемых макрофагальной клеточной линии (Thp1) и, следовательно, не может быть заметным провоспалительных агентом
<р> Образец цитирования:. Хуссейн М.А., Навид С.А., сечи Л.А., Ranjan S, Альви А, Ахмед I, и др. (2008) изоцитратдегидрогеназа из хеликобактер пилори
Потенциально Стимулирует гуморальный иммунный ответ у пациентов с язвенной болезнью и гастрит. PLoS ONE 3 (1): e1481. DOI: 10.1371 /journal.pone.0001481
<р> Академический редактор: Keertan Dheda, University College London, Великобритания
<р> Поступило: 29 августа 2007 года; Принято: 24 декабря 2007 года; Опубликовано: 23 января 2008
<р> Copyright: © 2008 Хуссейн и др. Это статья с открытым доступом распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются
<р> Финансирование:. Финансирование по линии CDFD Основные гранты (кафедра биотехнологии, правительство Индии)
<р> конкурирующие интересы:. авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов

Введение

хеликобактерной
является грамотрицательные, изогнутая бактерия, которая устанавливает хронические инфекции в желудке человека. Это является важным патогеном, который, как полагают, совместно эволюционировали с людьми [1], [2]. Обитает около половины населения земного шара, и рассматривается как потенциальный фактор риска развития аденокарциномы желудка [3]. H. пилори
является признанным причиной хронического гастрита, язвенной болезни, рака желудка и слизистой оболочке-ассоциированной лимфоидной ткани (MALT) лимфома. Несколько механизмов было предложено объяснить свою роль в патогенезе кишечнике. Несмотря на высокие темпы колонизации лишь небольшая часть инфицированных людей испытывают H. Pylori
-associated заболевания [2]. Ассоциации H. пилори с услугой конкретные болезни факторы оставались более или менее загадочным, даже если последовательности генома были расшифрованы почти десять лет назад [2].
<р> Одна из самых отличительных черт H. пилори
является генетическое разнообразие между клиническими изолятов, полученных из разных групп пациентов [3]. Перестройка генома является нормой с этой бактерии, создавая тем самым много аллельных и изменения фазы [3], что создает трудности в разработке диагностических средств и вакцин.
<Р> После приобретения, инфекция сохраняется в течение многих лет и, вызывает выявляемых иммунных реакций у инфицированных лиц [4], [5] характеризуется повышенным уровнем специфического IgG и IgA в сыворотке крови и увеличению секреторной IgA и IgM в желудке [6]. Поэтому, неинвазивные серологические тесты были рекомендованы и разработаны для диагностики H. пилори
инфекции. Среди них, твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), является одним из наиболее широко используемый метод, поскольку это является относительно недорогим, быстрым, простым для выполнения, и могут быть легко приняты для скрининга большого количества образцов [7]. Исследование для анти H. Pylori
антитела часто прописывают перед тем эндоскопии или перед началом лечения. Хотя из-за иммунологической памяти, серодиагностика не может быть предпочтительным, чтобы проверить успех или результат лечения эрадикации, остается выбор в качестве чувствительного метода, вероятно, из-за его неинвазивный характер [8].
<Р> В настоящее время существует не было никакого единого "золотой стандарт" антиген, который однозначно может быть использован во всех популяциях. Одной из важных причин этого может быть Необычайное разнообразие присутствует в H. пилори
[9] - [13], а также его специфическая адаптация в различных хостов [12], [13]. Несмотря на то, белки, такие как каталаза, Gro
ЭЛ, и флагеллином сильно иммуногенной, они дают неспецифические перекрестные реакции с другими грамотрицательными бактериями и, более конкретно, Campylobacter jejuni
[14], [15]. В противоположность этому, вирулентные связаны антигены, такие как CagA или Вака, показывают довольно высокую степень изменчивости последовательности, поскольку существуют H. Pylori
штаммы, которые являются генетически разнообразны и фенотипически переменная для одного или обоих антигенов [16] - [18]. Несмотря на это, удовлетворительные ассоциации между сывороточных антител и инвазивное заболевание было описано [19].
<Р> Уборка номеров гены H. пилори
использовались в последнее время для отслеживания миграции населения и были признаны стабильными в геноме через века [20]. Однако домашнее хозяйство белки, не были протестированы по большому счету для их использования в диагностике или вакцин. Метаболические ферменты, как представляется, является хорошим кандидатом для включения в тестовый набор иммуно-диагностики, так как они часто не перекрестно реагируют с сыворотками от здоровых [21]. Кроме того, в силу своей функции домашнего хозяйства, они высоко консервативны среди различных H. Pylori
штаммы, независимо от их генотипов и, таким образом, могут служить идеальными иммуно-диагностики кандидатов.

Белки, которые выделяются из бактерий во время поздней логарифмической фазы роста, такие как супероксиддисмутаза и изоцитратдегидрогеназы (ICD), являются описаны в качестве маркеров автолиза [22] - [24] и некоторые из них были оказались отличные диагностические антигены. Например, МКБ из М. туберкулез
был описан как потенциальный антиген для различения больных туберкулезом легких от здоровых [24]. Тем не менее, предыдущие сравнения антигенных образцов H. Pylori
белки (в том числе некоторые из белков домашнего хозяйства), распознаваемые сывороток пациентов не было выявлено никакой связи специфического H. Pylori
антигены со случаями конкретной гастродуоденальной патологией [21].
<р> Это исследование демонстрирует взаимодействие иммунной системы хозяина с H. пилори
ICD в виде значительных гуморальных ответов видели у субъектов заболевания. Кроме того, мы опишем H. пилори
ICD антиген отличить болезнь желудка и гастрит пациентов из неинфицированных здоровых людей.

Результаты

При моделировании силикомарганца, экспрессии и очистки белка H. Pylori ICD
<р> последовательность белка МКБ из H. пилори
анализировали, чтобы предсказать его иммуногенности на основе антигенного индекса, гидрофильности и вероятности поверхности. Рисунок 1А показывает в силикомарганца
антигенных профилей ICD генерируется с использованием программного обеспечения PROTEAN (DNASTAR Inc. USA). Если коротко, то было выявлено несколько следов, соответствующих иммунореактивных аминокислотных мотивов с предсказуемо высокими антигенных индексами (~3.4). H. Таким образом, пилори
ICD отображаются основные антигенные участки (рис 1А) побуждая нас смотреть на него как предполагаемо иммуногенным белком. Антигенность показатели МКБ были сопоставимы с теми, ранее сообщалось, на средства индивидуальной защиты антигена Rv2430c микобактериального происхождения, который в дальнейшем оказался иммунодоминантная антиген [25]. E. палочка
ICD также анализировали таким же образом, и, казалось, предполагаемо иммуногенной; существует четкое различие обнаружено по сравнению с H. пилори
ICD, относительно численности и положения антигенных остатков. Позже мы построили гомологический модель H. пилори
ICD основан на кристаллической структуре E. палочка
ICD (PDB код 1AI2) и были в состоянии изобразить магистральную организацию H. Pylori
(26695) ICD вместе с тем E. палочки
. Были найдены два ИКД быть существенно сходный (СКО 0,45) еще различались по отношению к 3 важным экспонированных на поверхность областей петли, которые, вероятно, представляют собой участки структурных различий, соответствующих предполагаемому антигенных эпитопов, возможно придание ответов дифференциальной антител (Фигура 1В )
<р> сверхвыражен N-концевую His-меченый МКБ был очищен до &Гт. 95% гомогенность на колонке с никелем сродства (рисунок 2). Молекулярная масса рекомбинантного МКБ была определена 47 кД. Очистку белка проводили в нативных условиях с выходом 2,0 мг белка на 500 мл начальной культуры.

Взаимодействие хеликобактерной ICD с иммунной системой человека
иммунные реакции

Гуморальные направлены против H. пилори
МКБ сравнивали у больных с H. пилори
инфекции (гастрит, Nud, DU и GC) и здоровых лиц (рисунок 3). Данные иммунореактивности были статистически проанализированы и сравнены с подключением к обоим инфицированной и здоровой сывороток. Эти данные показали, что сывороток всех инфицированных пациентов, принадлежащих к гастриту и язвенной болезни двенадцатиперстной кишки (DU) Категории проводится статистически значимое ( P
&л; 0,0001) анти уровни ICD антител по сравнению с таковыми из здоровых людей. Белок МКБ, который имеет, по-видимому важную метаболическую роль, была, таким образом, оказывается в состоянии вызвать сильную гуморального ответа у пациентов с гастритом и DU. Тем не менее, в случаях неязвенной диспепсии (NUD) и рака желудка (GC), снижение гуморальный ответ был замечен. Учитывая эти наблюдения, вполне вероятно, что выделение белка ICD связано с активным, H. пилори
инфекции. В отличие от наблюдаемых гуморальных реакций, рекомбинантный, H . пилори
ICD не вызывает каких-либо существенных клеточных иммунных реакций, о чем свидетельствует из-за отсутствия секреции IL-8 из человеческих макрофагов, индуцированных с рекомбинантным, H. пилори
ICD в пробирке
(Рисунок 4). Поэтому мы, предполагают, что МКБ возбуждает только гуморальный отсек и может не способствовать желудочной патологии или цитокинами индуцированных изменений в физиологии желудка.

Обсуждение
<р> Идентификация и характеристика высокой иммуногенной H. Pylori
белки является обязательным требованием для развития серологических тестов на основе рекомбинантных очищенных антигенов. В сочетании с испытанием дыхания мочевины, серологические является неинвазивным подход для обнаружения H. пилори
инфекции, а также несколько серологических наборов тест, основанный на многих различных H. пилори
антигены являются коммерчески доступными. Несмотря на то, гуморальный иммунный ответ на H. пилори
кажется довольно переменной, комбинации часто признанных антигенов могут оказаться полезными для диагностических целей [21]. Метаболические ферменты, такие как МКБ кажутся хорошими кандидатами для быть использованы для серологического развития тест набора в основном потому, что они не перекрестно реагируют с сыворотками от неинфицированных или здоровых людей [24].
<Р> Значение многих иммуногенные белки H. пилори
включая некоторые метаболические ферменты не были оценены много в клинических образцах в исследовании на основе предыдущих протеомики [21]. Наше исследование было направлено, однако оценить очищенный рекомбинантный, H. пилори
ICD для своих иммунологических свойств в различных классах H. пилори
инфицированных кислот больных язвенной болезни. Мы попытались систематически исследовать наличие и полезность иммунных ответов, вызываемых белка ICD в H. пилори
инфицированных пациентов.
<р> Наш анализ с использованием рекомбинантного ICD из H. пилори
показали значительно высокие титры антител среди язвенной болезнью и гастритом больных язвенной, по сравнению с NUD и онкологических больных (рисунок 3). Мы полагаем, что иммунный ответ видели в пептической случаях язвы и гастрита, возможно, может быть из-за высоких нагрузок бактерий, связанных с инвазивной патологии и тем самым более высоким числом autolysed патогенов или патогенных микроорганизмов, представляющих ИКД на поверхности. Это, возможно, объясняется сравнительно высоким антитела ответ у пациентов с инвазивными категории.

H. Pylori
антигены описаны быть выпущенным в межклеточное пространство через множество механизмов, таких как конкретные пути секреции, автолиза и формирования мембранных везикул [23] и свойств поверхностных H. пилори
было предложено быть уникальным в разрешении локализации адсорбции /поверхности таких белков [26]. ИКД традиционно известны как маркеры автолиза [22], [24], [27], выпущенный во время поздней логарифмической фазы. Внеклеточного высвобождения белков может быть потенциально происходя только во время в пробирке
роста H. пилори
. Тем не менее, В естественных условиях
существование таких механизмов, если продемонстрировано, может быть в состоянии объяснить роль различных секретируемых белков в молекулярной патологии язвенной болезни. Ввод H. Pylori
белки в желудочную подслизистую пространство может иметь важные функциональные последствия, такие как поощрение провоспалительных и хемотактильными ответов через высвобождение цитокинов из активированных макрофагов. Кроме того, внеклеточный высвобождения и или адсорбции или поверхностной локализации [26] потенциально иммуногенные белки могут поддерживать бактериальную стратегию для отведения эффективного местного иммунного ответа [23]. Учитывая эти несколько механизмов в виду, мы проверили провоспалительных потенциалы МКБ с помощью ИЛ-8 ELISA анализа. В нашем наблюдении, МКБ существенно не индуцируют секрецию IL-8 в дифференцированных, культивируемых макрофагов. Однако, поскольку мы не анализировали роль МКБ как относительно индукции других провоспалительных цитокинов, таких как TNF-alpha и IL1-бета, это будет преждевременно справедливо исключает свое участие в воспалении желудка.
<Р> Показав что H. пилори
ICD вызывает гуморальный ответ, мы исследовали основы иммунной специфичности этого белка, как это отражается на основе моделирования структуры. Наша последовательность анализа и молекулярное моделирование H. пилори
и E. палочка
ИКД не выявили полных структурных перекрытий между двумя (рисунок 1); несколько регионов структурных несходства были выделены, которые, возможно, соответствуют предполагаемым антигенных эпитопов в H. пилори
ICD. Помимо вопросов, связанных с сохранением структурного или разнообразия, мы предполагаем, что более высокая реакционная способность H. пилори
ICD по сравнению с МКБ части (синантропных) E. палочка
с принимающей иммунной системы в естественных условиях
может быть связан с 1) отличается инвазивности H. пилори
и E. палочки
2) разные величины бактериальной нагрузки, оборота и автолиза 3) различных репертуара антиген-представляющих клеток (макрофагов против дендритных клеток), участвующих и их относительное обилие 4) наличие поверхностных эпитопов выставленных в H. пилори
ICD (как те, выделены на рисунке 1В), и 5) наличие активных очагов хронического воспаления, повреждения слизистой оболочки и хемотактильными эффектов другой H. Pylori
белки в MILIEU
.
<р> При рассмотрении возможных перекрестной реактивности от других инвазивных бактерий, таких как C. jejuni
, мы тестировали H. пилори
ICD против 8 образцов C. jejuni
энтерит сывороток пациентов и обнаружили, что он существенно не перекрестно реагируют (данные не показаны). H. пилори
свободный статус нашего C. jejuni
положительных пациентов была определена на основании отсутствия симптомов расстройства желудка, боли в желудке и изжога и т.д. Однако, так как мы использовали только ограниченные образцы сыворотки от C. jejuni
пациентов, мы не склонны к бренду H. пилори
ICD в качестве отдельного диагностического антигена. Тем не менее, C. jejuni
не всегда может содержать много конкурентоспособную фон, если C. jejuni
сами пациенты клинически колонизирована H. пилори
или наоборот.
<р> Наконец, обнадеживающие результаты были получены с точки зрения значимых гуморальных ответов H. пилори
ICD не может быть истолковано как непосредственно применимо для диагностики уровня поля. Тем не менее, вполне возможно, что наши результаты обеспечивают прочную основу для развития испытания серологического-диагностики для H. пилори
ассоциированных гастродуоденальных патологий. Мы полагаем, потенциал этого антигена и его эпитопом специфические пептиды, могут быть дополнительно проанализированы с помощью большого батарею образцов сывороток, представляющих различные предметы болезни. Аналогичным образом, статус и значимость перекрестно реагирующими антител в сыворотке крови, соответствующих болезней, вызванных бактериями, такими как сальмонелла., Shigella SPP. и другие инвазивные энтеропатогенов также могут быть определены. Это будет целесообразно изучить углубленного участия в МКБ сигнализации деятельность в подслизистом пространстве, особенно его взаимодействие с активированными макрофагами и лимфоцитами. Кроме того, учитывая его важную роль в цикле трикарбоновых кислот и отсутствие глиоксилатным шунта в H. пилори
[27], оценка МКБ в качестве возможной цели интервенционной представляет захватывающее предложение.

Материалы и методы

В силикомарганца антигенных предсказанного хеликобактерной ICD (HP0023)
<р> нуклеотидная последовательность H. пилори ИКД
(ORF HP0023) и соответствующая аминокислотная последовательность была получена из базы данных Pylorigene (http://genolist.pasteur.fr) и подвергали анализу с помощью пакета DNASTAR (DNASTAR Inc. Мэдисон, США). Аминокислотная последовательность МКБ подверглась тщательному анализу для любых антигенных детерминант с использованием Протееподобным программы в рамках пакета DNASTAR. Такие параметры, как гидрофильность, вероятность поверхностной и антигенного индекса были рассчитаны для всего белка с использованием данного программного обеспечения. Антигенные индексы, показывающие более 2-х пиков при > 3,0 шкалы рассматривались как значительно более антигенной

Численное моделирование структуры ICD
<р> Использование Моделист-6, программа молекулярного моделирования, которая реализует автоматизированный подход. для сравнительного моделирования структуры белка путем удовлетворения пространственных ограничений [28] был использован для определения трехмерной модели H. пилори
ICD. МКБ модель H. пилори
была генерироваться на основе E. палочка
ICD шаблон 1A12, который разделяет общую 68% идентичность последовательности с H. пилори
ICD.

Получение рекомбинантного H. Pylori ICD

ORF, соответствующий H. пилори ИКД
(HP0023, 1,275 кб) амплифицировали с помощью ПЦР из геномной ДНК в H. Pylori
пациента изолировать MS8. Рекомбинантный белок МКБ был более выражен в E. палочка
и очищали до гомогенности (рисунок 2) в соответствии с методами, описанными ранее Banerjee и др
[24]. Урожай очищенного белка был стандартизирован до 2,0 мг очищенного белка на 500 мл начала культивирования рекомбинантного E. палочки
. Очищенный рекомбинантный белок подвергали диализу против 20 мМ Трис-HCl, рН 7,5, 100 мМ NaCl и 3% глицерина. Кроме того, очищенный белок обрабатывали полимиксина B, чтобы исключить эффекты любого загрязнения LPS. Очищенный рекомбинантный ICD лиофилизировали и немедленно хранят в замороженном виде для дальнейшего использования в клинической диагностике.

Пациенты и образцы сыворотки крови человека
<р> исследуемая популяция ( п
= 82) составили 58 H. пилори
инфицированных образцов пациентов (Подробную информацию о количестве случаев, анализируемых в каждой категории, пожалуйста, смотрите рисунок 3), полученные из случаев отчетности в основном в Декан Колледжа медицинских наук и смежных Больницы, (DCMS), Хайдарабад, и 24 клинически здоровы доноров. Здоровый контрольная группа состояла из 18 проверенных H. Pylori
отрицательные случаи испытания с мочевиной дыхания анализа (UBA) и 6 бессимптомных лиц, которые были подтверждены H. пилори
отрицательный как проверено коммерчески доступного ELISA набора (Pyloriset EIA-GIII, Orion, Espoo, Finland). Во всех группах пациентов, диагноз язвенной болезни или гастрита была подтверждена или исключена эндоскопически лечащим гастроэнтерологу. Присутствие H. пилори
в пораженных субъектов, включенных в это исследование было ранее подтверждено окрашивания по Граму, тест быстрое уреаза (БУТ), 16S рРНК и CAG
Ген на основе ПЦР и культуры [29]. В исследовании не было никакого смещения пола и возраста. Письменное информированное согласие было получено от всех пациентов и здоровых людей в соответствующих центрах.

ELISA для гуморального ответа
<р> ELISA анализ проводили для проверки гуморального иммунного ответа у людей против рекомбинантного МКБ. Вкратце, 96-луночные микротитровальные планшеты покрывали ~ 500 нг рекомбинантного белка МКБ. Пластины с покрытием инкубировали в течение ночи при температуре 4 ° С, промывали три раза PBS-T (0,05% Tween 20 в 1 × PBS) и дважды PBS. Затем планшеты блокировали 100 мкл блокирующего буфера (2% BSA в 1X PBS) при 37 ° С в течение 2 часов. Планшеты три раза промывали буфером для промывки PBS-T и дважды PBS. H. пилори
-infected сывороток человека, принадлежащих к различным клиническим группам серийно разводили (1:50, 1:100, 1:200 и 1:400) в блокирующем буфере (1% BSA в PBS), чтобы получить оптимальные титрам. Разбавленных сывороток [50 мкл разведенной сыворотки 1:200] были добавлены к покрытым антигеном лунки и инкубировали в течение 1 ч при 37 ° С. Планшеты промывали трижды PBS-T и два раза с PBS и затем инкубировали с анти-человеческим IgG-пероксидаза хрена (Sigma) при 37 ° С в течение 1 часа. активность пероксидазы хрена была обнаружена с использованием хромогенного вещества, о
-phenylenediamine тетрагидрохлорид (Сигма) в цитрат-фосфатном буфере (рН 5,4) и Н <суб> 2O <суб> 2 в 1 мкл /мл. Реакции были остановлены с помощью 0,5 М H <суб> 2sO <суб> 4, а значения оптической плотности измеряли при 492 нм в ELISA считывателем (Bio-Rad). Каждый ИФА был повторен по крайней мере в два раза со всех клинических изолятов сывороток. Студенческая т
тест был проведен для расчета значения р
основанные на средства титра антител сыворотки, соответствующих здоровых и инфицированных классов при помощи функции онлайн-научного калькулятора GraphPad (www.graphpad.com_quickcalcs_ttest1 .cfm). P
значения менее 0,05 считались статистически значимыми.

ELISA для провоспалительного цитокина IL-8
<р> ТНР-1 клеток (моноцитов человек, АТСС TIB 202) выращивали и поддерживается в среде RPMI 1640 (Invitrogen) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глутамина и 1% антибактериальным и анти-грибкового раствора (Gibco). Для макрофага, как стадии, приблизительно 1 × 10 -6 клеток /лунку дифференцировали с использованием 5 нг /мл форболовыми-12-миристат-13C ацетат (РМА, Sigma). Через 24 часа клетки промывают один раз средой RPMI 1640 и стимулировали с помощью 10 мкг /мл рекомбинантного МКБ. Провоспалительного белок, HP940, из H. пилори
[30], очищенный в аналогичных условиях, использовали в качестве положительного контроля (1 мкг /мл). Клетки инкубировали в течение 24 ч в увлажненной атмосфере при 37 ° С. Клетки без обработки белка (нестимулированных клеток) служил в качестве отрицательного контроля. Культуральный супернатант собирали через 24 часа была использована для оценки IL-8 с использованием коммерчески доступных optEIA ELISA Kit (BD Biosciences). Анализ проводили в соответствии с инструкцией изготовителя и уровни цитокинов были рассчитаны с использованием рекомбинантного стандарта, входящего в комплект. Чувствительность IL-8 было 3,1 пг /мл. Значения выражены как среднее ± стандартное отклонение.

Выражение признательности
<р> Мы благодарны Сейед Е. Хаснайн и Шармиста Банерджи для дискуссий. Мы благодарим наших соавторов СМ Хабибулла и Barik Салих для справки по материалу и информации о пациентах. Спасибо также Фрэнсис Megraud для предоставления различных образцов контрольных сывороток. NA является соответствующим членом Европейского Helicobacter-й Исследовательской комиссии (EHSG).

• PLoS ONE: Бактериальный Микробиота профилирование в Гастрит без инфекции Helicobacter пилори или нестероидные противо…
• PLoS ONE: Факторы, ассоциированные с атрофического гастрита диагностируется с двойным контрастированием верхни…