PLoS ONE: Epstein Barr Virus og Helicobacter pylori-infeksjon er positivt forbundet med alvorlig gastritt hos barn

Abstract

Bakgrunn

H. pylori
infeksjon er ervervet i løpet av barndommen og fører til en kronisk betennelsesreaksjon i mageslimhinnen, som regnes som den viktigste risikofaktoren for å skaffe magekreft (GC) senere i livet. Mer nylig infeksjon med Epstein-Barr virus (EBV) har også vært forbundet med GC. Rollen til EBV i tidlige betennelsesreaksjoner og dens forhold til H. pylori
infeksjon forblir dårlig undersøkt. Her har vi vurdert om EBV infeksjon hos barn korrelerte med den fasen av gastritt og om co-infeksjon med H. pylori
påvirket graden av betennelse.

metodikk /hovedfunnene

333 pediatriske pasienter med kronisk magesmerter ble studert. Fra dem ble mage biopsier tatt og betennelse gradert i henhold til Sydney system; perifert blod ble trukket og antistoffer mot EBV (IgG og IgM anti-VCA), og H. pylori
(IgG anti-hele bakterier og anti-CagA) ble målt i sera. Vi fant at barn som er smittet bare ved EBV presenteres mild mononukleære (MN) og ingen polymorfonukleære (PMN) celle infiltrasjon, mens de som er smittet av H. pylori
presenteres moderat MN og mild PMN. I motsetning til pasienter som er infisert med både patogener var signifikant assosiert med alvorlig gastritt. Viktigere, co-infeksjon av H. pylori
CagA + /EBV + hadde en sterkere tilknytning til alvorlig MN (PR 3.0) og PMN (PR 7.2) celler enn saker med enkelt H. pylori
CagA + infeksjon.

Konklusjon /Betydning

Samtidig infeksjon med EBV og H. pylori
hos pediatriske pasienter er assosiert med alvorlig gastritt. Selv enkle infeksjoner med H. pylori
CagA + stammene er forbundet med mild til moderat infiltrasjon argumentere for et samvirke effekt av H. pylori Hotell og EBV i mageslimhinnen og avslører en avgjørende rolle for EBV tidligere un-verdsatt. Denne studien peker på behovet for å studere både patogener å forstå mekanismen bak alvorlige skader i mageslimhinnen, som kan identifiseres barn med økt risiko for å presentere mer alvorlige skader senere i livet

Citation. Cárdenas-Mondragón MG , Carreón-Talavera R, Camorlinga-Ponce M, Gomez-Delgado A, Torres J, Fuentes-Panana eM (2013) Epstein Barr Virus og Helicobacter pylori
Co-infeksjon er positivt forbundet med alvorlig gastritt hos barn . PLoS ONE 8 (4): e62850. doi: 10,1371 /journal.pone.0062850

Redaktør: Yoshio Yamaoka, Veterans Affairs Medical Center (111D), USA

mottatt: 26. desember 2012; Godkjent: 26 mars 2013; Publisert: 24 april 2013

Copyright: © 2013 Cárdenas-Mondragón et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres

Finansiering:. Denne studien ble delvis støttet av tilskuddet FIS /IMSS /Prot /G2011 /941 (MG Cárdenas-Mondragón) fra Fondo de INVESTIGACION en Salud (FIS) -IMSS, og tilskudd 178 199 (til MGC-M) og 69450 (J. Torres ) fra CONACYT. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer

Innledning

Vedvarende infeksjoner ofte føre til kronisk betennelse, en godt dokumentert kreftrisiko faktor. Magekreft (GC) starter vanligvis med en betennelsesprosess i hovedsak knyttet til infeksjon med Helicobacter pylori product: ( H. Pylori
) [1]. GC er den fjerde vanligste krefttypen og den andre dødsårsaken av kreft på verdensbasis, og rammer særlig asiatiske og latinamerikanske land [2]. Mer nylig GC har også vært forbundet med Epstein-Barr-virus (EBV), men rollen som virusinfeksjon i begynnelsen av inflammatoriske mage responser forblir lite studert.

H. pylori
smitter over 50% av verdens befolkning, med en høyere forekomst i utviklingsland. Infeksjon er vanligvis ervervet tidlig i livet; i Mexico, er ca 50% av barn smittet av en alder av 10 [3]. Betennelse etter infeksjon hos barn er vanligvis forbundet med et lavt nivå av polymorfonukleære (PMN) og mononukleære (MN) celler infiltrerer den gastriske slimhinne [4]. Det har blitt foreslått enn den tidligere infeksjon, jo større er risikoen for å presentere GC senere i livet, kan tenkes på grunn av en langvarig (flere tiår) kronisk inflammatorisk reaksjon på infeksjon [5].

Bare en brøkdel av H. pylori
infiserte individer utvikler gastroduodenal sykdom: < 15% magesår, < 3% GC og < 1% MALT lymfom [6]. Utfallet av H. pylori
infeksjon avhenger også av miljømessige, vert og bakterielle faktorer. Blant de viktigste bakterielle virulensfaktorer er patogenitet øya (CagPAI), som koder for en type IV sekresjon system (T4SS) som translocates effektoren proteinet CagA inn i epitelceller [7]. CagA aktiverer flere signalveier utløser cellulære fenotyper assosiert med onkogene transformasjon [7]. Videre transgene mus som uttrykker CagA utvikle adenokarsinomer i fordøyelseskanalen. Basert på disse dataene, har CagA blitt anerkjent som den første kjente bakterie oncoprotein [8], [9].

EBV-infeksjon har vært konsekvent assosiert med flere typer lymfom, nasofaryngeale karsinom (NPC) [10], [11], og mer nylig for å GC [12], [13], [14]. EBV-infeksjon forekommer tidlig i barndom, og vedvarer vanligvis i B-celler, med de fleste infiserte individer som bærer viruset asymptomatically i en latent fase i disse cellene. Det er ikke klart når EBV infiserer mageslimhinnen og om infeksjon induserer en betennelsesreaksjon, som observert med H. pylori
. EBV reaktivering fra infiserte B-celler har vært foreslått for å lette infeksjon av epiteliale basolateral ansiktet [15]. I den situasjon, har den titer av anti-antistoffer mot EBV-strukturelle proteiner vært foreslått å korrelere med nivået av reaktivering av virus og som en prognostisk markør i NPC [10], [16], [17].

Så vidt vi vet, har ingen studier tidligere adressert om EBV infeksjon hos barn er forbundet med betennelse i mageslimhinnen eller om det eksisterer et samarbeidseffekt mellom EBV og H. pylori
å korrelere med graden av den inflammatoriske reaksjon. I denne studien analyserte vi antistoffer mot EBV og H. pylori
i sera av pediatriske pasienter med kronisk magesmerter. Våre resultater antyder sterkt at én infeksjon ved enten EBV eller H. pylori
er forbundet med en mild til moderat inflammatorisk respons i mageslimhinnen; men er samtidig infeksjon med både patogener signifikant assosiert med alvorlig gastritt. Selv infeksjon med H. pylori
CagA + stammer er ikke forbundet med alvorlige inflammatoriske responser i fravær av EBV. Disse data argumentere for en tidligere ukjent kritisk rolle EBV infeksjon i induksjon av en betennelsesreaksjon i mageslimhinnen for barn.

Materialer og metoder

Etikk erklæringen

IMSS nasjonale forskningsetiske komité godkjent dette prosjektet. Foreldre eller foresatte til pasientene ble informert om innholdet i studiet og de som er villige til å delta, undertegnet en skriftlig informert samtykke før prøvetaking.

Oversikt

Study befolkningen.

studien inkluderte 333 pediatriske pasienter (0-17 år) deltok på grunn av tilbakevendende magesmerter ved Gastroenterology enhet, Pediatric Hospital i Centro Medico Nacional SXXI, Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS), i Mexico by, mellom september 1994 og oktober 2001. Barna ble utsatt for endoskopi og mage biopsier ble tatt fra antrum og corpus for histopatologisk diagnose. Perifert blod ble også trukket og sera ble lagret ved -80 ° C inntil testet for antistoffer.

Data som samles inn.

Sosio demografiske data og kliniske opplysninger ble registrert i spørre på tidspunktet for inkludering. Den innsamlede informasjonen inkludert alder, kjønn, kliniske symptomer og klinisk diagnose basert på endoskopi, histologi og klinisk presentasjon. Pasienter med antibiotika, protonpumpehemmere eller antiacid behandlinger tre uker tidligere prøvetakingen ble ekskludert fra studien.

Laboratoriemetoder

Histopatologisk undersøkelse.

To biopsiprøver ble innhentet fra de antrum og to fra mage corpus. En biopsi ble brukt for H. pylori
kultur og den andre ble brukt til histologisk undersøkelse. En biopsi fra antrum og en fra corpus ble fiksert i formalin, parafin-embedded og farget med hematoxylin og eosin (HE). Den inflammatoriske respons ble gradert i henhold til den Sydney system [18] av et enkelt erfaren patolog. Parametrene evaluert var H. pylori
positivitet, polymorfonukleære og mononukleær celle infiltrasjon, som ble gradert sammenligne med publiserte diagrammer (analoge skalaer). Infiltrasjon av polymorfonukleære og mononukleære celler ble gradert fra fraværende til alvorlig både i corpus og antrum, og området med høyere infiltrasjon ble ansett som sluttresultatet.

Innsamling av blod.

En prøve av venøst ​​blod (4 ml) ble trukket fra alle pasienter. Lagrede serumprøver ble brukt til å analysere IgG- og IgM-antistoffer mot EBV viralt kapsid protein (VCA), så vel som IgG-antistoffer mot H. pylori
hel-celle-ekstrakter og mot CagA protein ved hjelp av enzymbundet immunosorbent analyse (ELISA).

Bestemmelse av anti-EBV-VCA-antistoffer.

Anti-EBV-VCA-antistoffer ble bestemt ved å bruke ELISA-kommersielle kits (HUMAN, Wiesbaden, Tyskland), for IgG anti-VCA (katalog 51204) og for IgM anti-VCA (Katalog 51 104) etter produsentens instruksjoner. I korthet ble 100 ul av den passende pasientserum fortynning: ble (1 100 for IgM og 1:20 for IgG) avsatt på den tilsvarende godt med VCA antigen allerede er festet, og inkubert i 1 time (IgG) eller 30 min (IgM ) ved 25 ° C. Deretter ble brønnene vasket fire ganger med vaskebuffer, og 100 ul peroksydase-konjugert anti-human IgG eller IgM-kanin-antistoff ble tilsatt og inkubert i 30 minutter ved 25 ° C. Platene ble deretter vasket fem ganger, og 100 ul substrat-reagens (3,3 ', 5,5' tetramethylbenzidin (TMB) - hydrogenperoksid) ble tilsatt og inkubert i 15 min på 25 ° C i mørket. Reaksjonen ble deretter stanset med 100 ul stoppløsning (svovelsyre, 0,5 mol /L), og platene ble avlest i en ELISA-leser (Thermoscientific, Multiskan stigning) til en absorbans på 450 nm. Den rapporterte verdi er gjennomsnittet av to uavhengige analyser. En undergruppe av prøvene ble utført i fire ved hjelp av forskjellige partier av ELISA-sett for å kontrollere for reproduserbarhet. Beregninger for antistofftitre ble gjort i henhold til produsentens instruksjoner og verdiene er rapportert som HU enheter /ml. En pasient ble ansett EBV seropositive når sera testet positivt for enten IgG og /eller IgM-antistoffer.

Fastsettelse av antistoffer mot hele H. pylori
ekstrakter og anti-CagA.

IgG antistoffer mot H. pylori Hotell og CagA ble bestemt ved hjelp av ELISA tester tidligere validert i en meksikansk befolkningen [19]. Brønner ble belagt enten med et ultralydbehandlet ekstrakt av en blanding av tre H. pylori
-stammer isolert fra meksikansk pasienter (0,5 ug /brønn i 100 pl karbonatbuffer pH 9,6) eller med rekombinant CagA (0,1 ug /brønn i samme buffer som ovenfor) og inkubert ved 4 ° over natten. Deretter ble platene blokkert med 200 ul PBS-gelatin (0,1%) for H. pylori
hel-ekstrakt og med PBS-melk (2,5%) for CagA og inkubert ved 4 ° over natten. Den sera ble fortynnet 1: 1000 til H. pylori
og 1: 200 for CagA og 100 ul ble tilsatt per brønn og inkubert i en time ved 37 ° C. Ett hundre ul av en 1: 1000 fortynning av anti-humant IgG-antistoff konjugert til alkalisk fosfatase ble tilsatt og platene ble inkubert i 30 minutter ved romtemperatur, etterfulgt av 100 ul p-nitrofenylfosfat substrat (Sigma, St. Louis MO USA. nr 2770) i ​​glysin-MgCl2-ZnCl buffer. Platene ble avlest i en ELISA-avleser ved en absorbans på 405 nm. Alle prøver ble analysert i duplikat, og hver plate inkludert fire positive og fire negative seraprøver. Pasientene ble vurdert positivt for H. pylori
antistoffer når ELISA-enheter var ≥1.0, og for CagA når ELISA-enheter var ≥1.5, i henhold til de godkjente cut-offs [19].

Statistical Analysis

De statistiske forskjeller av kontinuerlige variabler mellom pasientens grupper ble bestemt med studentens t
test eller med Mann-Whitney U test for variabler som ikke er normalfordelte. Forskjellene mellom tre eller flere kontinuerlige variabler ble sammenlignet med en-veis ANOVA, etterfulgt av Bonferroni-test, eller ved Kruskal-Wallis enveis test, etterfulgt av Mann-Whitney U-test. Forskjellene mellom kategoriske variabler ble estimert ved hjelp av Chi square ( X ^{2
) test med Yate kontinuitet retting eller Fishers eksakte test for små prøver. Variabler med mer enn to kategorier ble analysert ved hjelp av Mantel-Haenszel X 2
med lineær tendens. Statistisk signifikans ble satt til p≤0.05. Styrken assosiasjoner mellom betennelse karakteren sin grupper og IgG anti-VCA ble estimert ved hjelp prevalens forhold (PRS) og 95% konfidensintervall (CIS).}

Resultater

Kjennetegn på pasientene i studien

333 mageprøver fra pediatriske pasienter med kronisk magesmerter ble studert, 197 (59,2%) var kvinner og 136 (40,8%) menn med en gjennomsnitts og median alder 10,1 ± 3,7 (gjennomsnitt ± SD) og 10 år henholdsvis ( Tabell
en
). Alle pasientene ble diagnostisert med ikke atrofisk gastritt (NAG) gjennom histologisk undersøkelse; morfologien av epitelcellene var ikke atypisk og ingen kjertel atrofi ble funnet. Frekvensen av infeksjon med EBV var 64,3% og av H. pylori
53,4%, mens 33,9% presenteres antistoffer mot CagA. I de fleste barn gastrisk mucosa presentert med en mild infiltrasjon av MN (78%) og ingen infiltrering av PMN (75%); bare 7,5% presentert en alvorlig infiltrasjon av MN og 4,5% av PMN-celler ( Tabell
en
). På grunn av det lave antall sampler med alvorlig aktivitet, ble prøver med en diagnostisk av moderat og alvorlig gastritis kombinert for resten av analysen. Den seroprevalence til H. pylori Hotell og EBV i de undersøkte barna etter alder er beskrevet i Tabell
S1
.

Grad av inflammasjon og infeksjon med enten EBV eller H . pylori

Vi identifiserte 214 barn med EBV infeksjon [179 var IgG og 35 var IgM positive (7 bare IgM og 28 IgM og IgG)], 9.8% av disse tilfellene viste en alvorlig MN infiltrasjon, og 13,1% moderat-alvorlig PMN infiltrasjon ( Tabell
2
). Alle de 35 barna (28 + 7) som var positive for IgM ble vurdert i primær infeksjon og presentert mild betennelse og ingen aktivitet. På den annen side ble 178 barn infisert med H. pylori Hotell og av disse 14% viste alvorlig MN infiltrasjon og 16,9% moderat-alvorlig PMN infiltrasjon. Blant de 112 barn smittet med H. pylori CagA
+ stammer 18,8% hadde alvorlige MN infiltrasjon og 24,1% moderat-alvorlig PMN infiltrasjon. Mens ingen av de 66 barna uten infeksjon presentert alvorlig MN eller PMN-infiltrering.

Vesentlig høyere titere av anti-EBV-antistoffer ble funnet bare ved mild PMN-infiltrering, noe som tyder på at høyere anti-EBV-antistofftitere er ikke resultatet av mer alvorlig betennelse i pediatrisk gastritt ( Tabell
S2
). På den annen side, en positiv korrelasjon av H. pylori
antistofftiter og gastritt alvorlighetsgrad ble observert som det har vært tidligere rapportert [20], [21].

Grad av inflammasjon relatert til samspillet mellom infeksjon med EBV og H. pylori

neste adressert om det var noen interaksjon mellom infeksjon med både H. pylori Hotell og EBV, og denne analysen er presentert i Tabell
3 plakater (se også figur 1). Vi fant at de fleste av barna uten infeksjon ( HP Anmeldelser - /EBV-) og barn med bare EBV-infeksjon ( HP Anmeldelser - /EBV +) hadde en mild MN infiltrasjon og ingen PMN i gastrisk mucosa. Tilfeller med moderat MN og milde PMN celler var hyppigere hos pasienter med bare H. pylori
infeksjon ( HP
+ /EBV-) og med både H. pylori Hotell og EBV infeksjon ( HP
+ /EBV +). I motsetning til over 80% av tilfellene med alvorlig MN og moderat-alvorlig PMN infiltrasjon forekommet hos pasienter med samtidig infeksjon ( HP
+ /EBV +).

Positive interaksjoner mellom H. pylori
CagA og EBV i henhold til graden av betennelse ble også analysert og et lignende resultat ble observert ( Tabell
3
), bare H. pylori
CagA + /EBV + dobbel-positive pasienter var signifikant assosiert med alvorlig betennelse for både MN og PMN infiltrat (figur 2). Disse resultatene hevder at H. pylori
infeksjon alene er ikke tilstrekkelig for å utvikle alvorlig gastritt.

For ytterligere å bekrefte den kombinerte effekten av blandet EBV og H. pylori
infeksjon, bestemt vi betydningen av foreningen av co-infeksjon med sakene viser en alvorlig MN eller moderat alvorlig PMN infiltrasjon ( Tabell
4
). I denne analysen for å vurdere om den observerte assosiasjon av EBV og H. pylori
infeksjon med alvorlig gastritt kan bli påvirket av alder, ble pasientene delt inn i to aldersgrupper ifølge medianen: ≤10 (gruppe 1) og > 10 (gruppe 2), og prevalens forholdstall (PR) ble justert av disse aldersgruppene. Når pasienter med samtidig infeksjon ( HP
+ /EBV +) ble sammenlignet mot pasienter uten infeksjon ( HP Anmeldelser - /EBV-) PR verdier for alvorlig MN og PMN infiltrasjon var udefinert fordi ingen av de infiserte barn ( HP Anmeldelser - /EBV-) hadde alvorlig MN eller PMN infiltrasjon. Når pasienter med samtidig infeksjon ( HP
+ /EBV +) ble sammenlignet mot pasienter med enkelt H. pylori
infeksjon ( HP
+ /EBV-) PR er for alvorlig infiltrasjon var 2.2 for MN og 4,1 for PMN; Dette sistnevnte med statistisk signifikans (p = 0,01).

Når saker med co-infeksjon (CagA + /EBV +) ble sammenlignet mot tilfeller av bare H. pylori
infeksjon ( HP
CagA- /EBV-) PR-tallet var 5.4 for MN og 8,5 for PMN. Tilsvarende når pasienter med samtidig infeksjon (CagA + /EBV +) ble sammenlignet mot saker med enkelt H. pylori
CagA + infeksjon (CagA + /EBV-PR-tallet var 3.0 for MN og 7,2 for PMN ( Tabell
4
). Nivået på PMN infiltrasjon viste også statistisk signifikans støtte som co- infeksjon er nødvendig for å utvikle alvorlig gastritt hos barn, og dermed peke ut for en avgjørende rolle for EBV som ikke kan gis selv ved CagA virulens faktor (p = 0,003).

Diskusjoner

H. pylori-infeksjon
er ervervet tidlig i livet i barndommen, og tilstedeværelsen av bakterier induserer en inflammatorisk reaksjon i den gastriske slimhinne, som i de fleste tilfeller forårsaker ingen sykdom. Men i noen individer de kroniske inflammasjonslangvarige utløsere alvorlige skader på mage epitel øker risikoen for å utvikle forstadier til kreft, som igjen øker risikoen for å ende opp med en livstruende GC.

Noen av co-faktorer som fremmer en mer alvorlig betennelsesreaksjon kan presentere tidlig i barndommen. Den inflammatoriske natur GC betegner en kritisk rolle for et immunogent middel, og i samsvar med dette, er en GC kreft hovedsakelig av infeksiøs etiologi. Mens foreningen av H. pylori
med GC og tidlige inflammatoriske lesjoner er godt dokumentert, bare noen få studier har analysert deltakelse av EBV infeksjon hos pasienter med gastritt, tre av dem hos voksne over 40 år gammel [22], [23], [24] og to kasuistikker hos unge kvinner over 18 [25] og 17 år gammel [26]. Så vidt vi vet, er det sistnevnte det eneste tilfellet av EBV og gastritt rapportert hittil i en pediatrisk pasient hvor høye serumnivåer av anti-VCA-antistoffer (IgG og IgM) ble funnet. Andre studier har undersøkt tilstedeværelse av EBV-sekvenser i gastritt prøver. En fersk rapport funnet EBV sekvenser av kvantitativ PCR i 15/50 og 5/6 av barn og voksne gastritt, henholdsvis [27]. En annen fersk studie hos voksne fant at omtrent 90% (12/13) av kronisk atrofisk gastritt stede EBV sekvenser [28]. Tatt sammen støtter disse dataene en viktig rolle for EBV i tidlige betennelsesreaksjoner i mageslimhinnen.

Studier hos voksne med NPC har funnet ut at sykdomsprogresjon korrelerer med økt antistoffer mot EBV reaktive antigener [10], [16] , [17]. Vi antok at et lignende fenomen kan forekomme i GC, og at studiet av barn med EBV-infeksjon kan bidra til å identifisere pasienter med alvorlig betennelse i den gastriske slimhinne, og potensielt større risiko for å utvikle forstadier til kreft. Antistoffer mot proteiner av EBV-lytiske syklus kan reflektere høyere nivå av infeksjon i øvre fordøyelseskanal epitel og således tjene som en markør for progresjon lesjon. Men når vi analyserte EBV infeksjon hos barn, vi ikke observere forventet korrelasjon med alvorlig gastritt, og høyere nivåer av anti-EBV-antistoffer enten IgG eller IgM, reflekterer akutte eller kroniske infeksjoner, ble funnet fortrinnsvis i tilfeller med mild gastritt. Dermed gjør EBV enkelt infeksjonen ikke forklare tilfeller av alvorlig gastritt.

Til nå studier har vært begrenset til H. pylori-infeksjon og
har vist at hos barn er det vanligvis forbundet med en mild til moderat inflammasjon (MN celleinfiltrasjon), og en mild til fraværende aktivitet (PMN celleinfiltrasjon), selv om en alvorlig betennelse og aktivitet er observert i noen få tilfeller . Når vi analyserte samtidig infeksjon med både H. pylori
og EBV vi funnet at barn som er infisert med begge patogener hadde den sterkeste forbindelse med alvorlig gastritt, målt ved alvorlig infiltrasjon av MN (inflammasjon) og PMN-celler (aktivitet) i mageslimhinnen. I motsetning til pasienter HP Anmeldelser - /EBV + fortrinnsvis present mild betennelse (MN celle infiltrasjon) og ingen aktivitet (fravær av PMN-celler); mens de HP
+ /EBV- presenteres moderat betennelse og mild aktivitet. Våre resultater tyder på at samtidig infeksjon med EBV og H. pyori
er nødvendig for å forårsake alvorlig gastritis, som støtter en viktig rolle for EBV, i det minste hos pediatriske pasienter. Denne økte effekten var også tilfelle for pasienter infisert med H. pylori
CagA + stammer, som allerede er kjent for å være assosiert med økt virulens og økt risiko for GC. I våre analyser, barn som er infisert med CagA + /EBV + viste en betydelig sterkere forbindelse med alvorlig gastritt enn infisert med CagA + /EBV-, ytterligere støtte behovet for EBV å forårsake alvorlig gastritt selv i nærvær av høypatogen H. pylori
CagA + stammer. Interessant, co-infeksjon med EBV og H. pylori
CagA negative stammer ikke utløse alvorlige stadier av gastritt, argumenterer mot EBV utfyller patogenesen av mindre virulente CagA negativ H. pylori
stammer og således fortsatt støtte betydningen av CagA.

Det er postulert at for å infisere epitelceller, må EBV gå ut først fra B-celle ventetid, et skritt utløses ved ekspresjon av transkripsjonen faktor ZTA, som er den viktigste orchestrator av den lytiske syklus. Men de ekstracellulære signaler i den øvre fordøyelseskanal som utløser ZTA uttrykk er ukjent. CagA er et oncoprotein at blant mange dokumenterte funksjoner induserer tap av polaritet i epitelceller, slik at transport av basolaterale proteiner mot apikale ansiktet [29]. Det kan være mulig at CagA signalering kan fungere som utløser av EBV lytiske syklus, og CagA indusert tap av celle polaritet kan også favorisere EBV tropisme for epitelceller. Argumentere mot sistnevnte, observerte vi flere pediatriske pasienter infisert med EBV (214 tilfeller) enn med H. pylori
(178 tilfeller), noe som kan tyde på at infeksjon med bakterier ikke nødvendigvis inntreffe først.

Det er viktig å ta opp hvordan EBV og H. pylori
samhandle i mageslimhinnen i fremtidige studier. To mulige mekanismer er tenkt: Den ene er rett og slett gjennom additive inflammatoriske responser forårsaker økt skade på vev. En annen mekanisme er gjennom mer intime samspillet mellom EBV og H. pylori
gener, f.eks.
ovennevnte antatte CagA og ZTA samarbeid. H. pylori
infeksjon har også vært positivt knyttet til Malt gastrisk lymfom [30] støtter økt aktivering /signalisering av B-celler i transitt gjennom mageslimhinnen. I dette tilfellet er en av de viktigste induktorer av ZTA ekspresjon og EBV-lytiske syklus i B-cellekulturer protein kinase C (PKC) [31], [32], og CagA er en kjent aktivator for denne kinase [33]. Ektopisk ekspresjon av CagA i transgene mus støtter at dette proteinet er den første beskrevne bakterie oncoprotein, og som sådan er det oppfører seg på samme måte som virale oncoproteiner [8], [9]. Interessant, CagA og EBV onkogener LMP1 og LMP2A trigger aktivering av NFkB og MAP-kinaser, viktige signalveier for økt celle overlevelse og spredning i løpet av onkogene transformasjon [34], [35]. Den vanlige aktivering av signalveier av begge patogener antyder en felles mekanisme for infeksjon /transformasjon av gastrisk epitel.

Selv om vår data støtter at co-infeksjon av EBV med H. pylori
er nødvendig for å forårsake alvorlige mage betennelse og aktivitet, synes EBV kravet til å være større for induksjon av alvorlige aktivitet i mageslimhinnen. Alvorlig aktivitet er gitt ved en stor infiltrat av polymorfonukleære celler gjennomtrengende lamina propria og de gastriske kjertler, som i sin tur aktiverer og utskiller mer pro-inflammatoriske mediatorer, og dermed forsterke og videreføre den lokale betennelsesreaksjon og øker risikoen for alvorlige og varige skader på gastrisk mucosa. I H. pylori
infeksjon, IL-8 synes å være det viktigste nøytrofile tiltrekker cytokin [4], [36], [37]. IL-1β har blitt funnet overuttrykt i NPC tumorprøver, en viktig cytokin for PMN rekruttere [38]. Det er mulig at den kombinerte rollen til IL-8 og IL-1 resulterer i økt aktivitet observert i EBV og H. pylori
co-infiserte pasienter.

I konklusjonen, våre resultater tyder sterkt på at EBV er involvert i patofysiologien av alvorlig helsefare hos barn smittet med H. pylori
. Våre resultater tyder også på at i fravær av EBV-infeksjon, H. pylori
er ikke tilstrekkelig til å utløse alvorlig gastritt hos barn. Denne studien peker på behovet for å studere både patogener i fellesskap å forstå mekanismen bak alvorlige skader i mageslimhinnen tidlig i livet, noe som kan ha betydning for korrekt sykdom diagnose og behandling; også, kan det bidra til å identifisere barn med økt risiko for å presentere mer alvorlige skader senere i livet.

Hjelpemiddel Informasjon
Tabell S1.
Kumulative prosenter av saker og H. pylori Hotell og EBV seroprevalens
doi:. 10,1371 /journal.pone.0062850.s001 plakater (docx)
Tabell S2.
korrelasjon mellom antistoffmengde og gastritt alvorlighetsgrad
doi:. 10,1371 /journal.pone.0062850.s002 plakater (docx)

• PLoS ONE: Målrettet Sletting av Kcne2 årsaker Gastritt Cystica Profunda og Gastric Neoplasia
• PLoS ONE: Gene Expression Profilering i mageslimhinnen fra Helicobacter pylori-infisert og ikke-infiserte pasienter som gjennomgår Kronisk overfladisk gastritt