PLoS ONE: Epstein Barr Virus en Helicobacter pylori co-infectie zijn positief geassocieerd met ernstige gastritis in Pediatric Patients

De abstracte

Achtergrond

H.
pylori infectie wordt verworven tijdens de kindertijd en veroorzaakt een chronische ontstekingsreactie in het maagslijmvlies, die wordt beschouwd als de voornaamste risicofactor voor maagkanker (GC) verwerven latere leeftijd. Recenter infectie met Epstein-Barr virus (EBV) zijn ook geassocieerd met GC. De rol van EBV in het begin van ontstekingsreacties en de relatie met H. pylori
infectie blijft slecht bestudeerd. Hier hebben we onderzocht of EBV-infectie bij kinderen gecorreleerd met de fase van gastritis en of co-infectie met H. pylori
invloed op de ernst van de ontsteking.

Methodologie /voornaamste bevindingen

333 pediatrische patiënten met chronische buikpijn werden bestudeerd. Van hen werden maag biopten genomen en ontsteking ingedeeld volgens de Sydney-systeem; perifere bloed werd getrokken en antilichamen tegen EBV (IgG en IgM anti-VCA) en H. pylori
(IgG anti- hele bacteriën en anti-CagA) werden gemeten in sera. We vonden dat kinderen die besmet zijn alleen EBV gepresenteerd mild mononucleaire (MN) en geen polymorfonucleaire (PMN) cel infiltratie, terwijl die besmet zijn met H. pylori
gepresenteerd matige MN en milde PMN. In tegenstelling tot patiënten die geïnfecteerd zijn met zowel pathogenen waren significant geassocieerd met ernstige gastritis. Belangrijk is dat co-infectie van H. pylori
CagA + /EBV + had een sterkere associatie met ernstige MN (PR 3.0) en PMN (PR 7.2) cellen dan gevallen met een enkele H. pylori
CagA + infectie.

Conclusies /Belang

Co-infectie met EBV en H. pylori
bij pediatrische patiënten gepaard gaat met ernstige gastritis. Zelfs enkele infecties met H. pylori
CagA + stammen worden geassocieerd met milde tot matige infiltratie pleiten voor een coöperatieve effect van H. pylori Kopen en EBV in het maagslijmvlies en het onthullen van een cruciale rol voor EBV eerder un-gewaardeerd. Deze studie wijst op de noodzaak om zowel pathogenen bestuderen om het mechanisme achter ernstige beschadiging van het maagslijmvlies, die zouden kunnen geïdentificeerd kinderen met een verhoogd risico op ernstige letsels op latere leeftijd presenteren begrijpen

Visum:. Cárdenas-Mondragón MG , Carreón-Talavera R, Camorlinga-Ponce M, Gomez-Delgado A, Torres J, Fuentes-Pananá eM (2013) Epstein Barr-virus en Helicobacter pylori
co-infectie zijn positief geassocieerd met ernstige Gastritis bij pediatrische patiënten . PLoS ONE 8 (4): e62850. doi: 10.1371 /journal.pone.0062850

Editor: Yoshio Yamaoka, Veterans Affairs Medical Center (111D), de Verenigde Staten van Amerika

Ontvangen: 26 december 2012; Aanvaard: 26 maart 2013; Gepubliceerd: 24 april 2013 |

Copyright: © 2013 Cárdenas-Mondragón et al. Dit is een open-access artikel gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution License, die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie maakt in elk medium, op voorwaarde dat de oorspronkelijke auteur en de bron worden gecrediteerd

Financiering:. Deze studie werd gedeeltelijk ondersteund door subsidie ​​FIS /IMSS /PROT /G2011 /941 (MG Cárdenas-Mondragón) van het Fondo de Investigación en Salud (FIS) -IMSS, en subsidies 178.199 (naar MGC-M) en 69.450 (J. Torres ) uit CONACYT. De financiers hadden geen rol in de studie design, het verzamelen van gegevens en analyse, besluit te publiceren, of de voorbereiding van het manuscript

Competing belangen:.. De auteurs hebben verklaard dat er geen tegenstrijdige belangen bestaan ​​

Introductie

Aanhoudende infecties leiden vaak tot chronische ontsteking, een goed gedocumenteerde kanker risicofactor. Maagkanker (GC) begint meestal met een ontstekingsproces vooral geassocieerd met infectie door Helicobacter pylori
( H. Pylori
) [1]. GC is de vierde meest voorkomende vorm van kanker en de tweede doodsoorzaak door kanker wereldwijd, waardoor landen met name in Azië en Latijns-Amerika [2]. Meer recent is GC ook geassocieerd met Epstein-Barr virus (EBV), maar de rol van de virale infectie begin inflammatoire responsen maag blijft onvoldoende bestudeerd.

H. pylori
infecteert meer dan 50% van de wereldbevolking, met een hogere prevalentie in ontwikkelingslanden. Infectie wordt meestal vroeg in het leven verworven; in Mexico, ongeveer 50% van de kinderen zijn besmet met de leeftijd van 10 [3]. Ontsteking na infectie bij kinderen wordt meestal geassocieerd met een lage polymorfonucleaire (PMN) en mononucléaire (MN) cellen infiltreren het maagslijmvlies [4]. Gesuggereerd is dan de eerdere infectie, hoe groter het risico GC presenteren latere leeftijd denkbaar vanwege een langdurige (decennia) chronische ontstekingsreactie op de infectie [5].

Slechts een fractie van H. pylori
geïnfecteerde individuen ontwikkelen gastroduodenale ziekte: < 15% maagzweer, < 3% GC en < 1% MALT lymfoom [6]. De uitkomst van de H. pylori
infectie is ook afhankelijk van het milieu, de gastheer en bacteriële factoren. Een van de belangrijkste bacteriële virulentiefactoren is de pathogeniciteit eiland (CagPAI), die een type IV secretie systeem (T4SS) codeert dat de effector eiwit CagA translocatie in epitheelcellen [7]. CagA activeert meerdere signaalroutes activeren cellulaire fenotypes geassocieerd met oncogene transformatie [7]. Bovendien, transgene muizen ontwikkelen CagA adenocarcinomen van het spijsverteringskanaal. Op basis van deze gegevens heeft CagA erkend als de eerste bekende bacteriële oncoprotein [8], [9].

EBV-infectie is consequent geassocieerd met verschillende types van lymfoom, nasofarynxcarcinoom (NPC) [10], [11] en meer recent GC [12], [13], [14]. EBV infectie komt ook vroeg in de kindertijd en meestal blijft in B-cellen, met de meeste geïnfecteerde individuen die asymptomatisch het virus in een latente fase in deze cellen. Het is niet duidelijk wanneer EBV infecteert het maagslijmvlies en of infectie induceert een ontstekingsreactie, zoals waargenomen bij H. pylori
. EBV reactivatie van geïnfecteerde B-cellen is voorgesteld om infectie van de epitheliale basolaterale gezicht [15] vergemakkelijken. In dat scenario is de titer van anti-EBV antilichamen tegen structurele proteïnen voorgesteld correleert met het niveau van virale reactivering en als prognostische marker in NPC [10], [16], [17].

voor zover wij weten zijn geen studies eerder gericht of EBV-infectie bij kinderen geassocieerd met ontsteking in het maagslijmvlies of dat er een coöperatieve werking tussen EBV en H. pylori
correleren met de ernst van de ontstekingsreactie. In deze studie hebben we geanalyseerd antilichamen tegen EBV en H. pylori
in sera van pediatrische patiënten met chronische buikpijn. Onze resultaten suggereren sterk dat enkele infectie door hetzij EBV of H.
pylori is geassocieerd met een lichte tot matige ontstekingsreactie in het maagslijmvlies; echter co-infectie met beide pathogenen significant geassocieerd met ernstige gastritis. Zelfs infectie met H. pylori
cagA + stammen wordt niet geassocieerd met ernstige ontstekingsreacties in afwezigheid van EBV. Deze gegevens pleiten voor een onbekende kritische rol van EBV infectie in de inductie van een ontstekingsreactie in het maagslijmvlies kinderen.

Materialen en Werkwijzen

Ethics statement

De IMSS National Research Ethics Committee keurt dit project. Ouders of verzorgers van de patiënten werden geïnformeerd over de aard van de studie en die willen deelnemen tekenden een schriftelijk toestemming voor het verzamelen specimen.

Overzicht

Study bevolking.

de studie omvatte 333 pediatrische patiënten (0-17 jaar) bijgewoond door terugkerende buikpijn in het gastro-enterologie eenheid, Pediatric Hospital van het Centro Medico Nacional SXXI, Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS), in Mexico-stad, tussen september 1994 en oktober 2001. Kinderen werden onderworpen aan endoscopie en maag biopten werden genomen van antrum en corpus voor histopathologische diagnose. Perifere bloed werd ook opgesteld en sera werden opgeslagen bij -80 ° C tot getest op antistoffen.

De verzamelde gegevens.

Socio-demografische gegevens en klinische informatie werd in de vragenlijsten geregistreerd op het moment van opname. De verzamelde informatie opgenomen leeftijd, geslacht, klinische symptomen en klinische diagnose op basis van endoscopie, histologie en klinische presentatie. Patiënten met een antibioticum, protonpompremmer of antiacid behandelingen drie weken voorafgaand aan verzameling proeven werden uitgesloten van de studie.

Methods Laboratory

Histopathologisch onderzoek.

Twee biopsie monsters werden verkregen van de antrum en twee uit de maag corpus. Een biopsie werd gebruikt H. pylori
cultuur en de tweede werd gebruikt voor histologisch onderzoek. Een biopsie van het antrum en een uit het corpus werden gefixeerd in formaline, ingebed in paraffine en gekleurd met hematoxyline en eosine (HE). De ontstekingsreactie werd gegradeerd volgens de Sydney systeem [18] door een ervaren patholoog. De parameters geëvalueerd waren H. pylori
positiviteit, polymorfonucleaire en mononucleaire cel infiltratie, die werden ingedeeld te vergelijken met gepubliceerde schema's (analoge schalen). Infiltratie door polymorfonucleaire en mononucleaire cellen werd gerangschikt van afwezig tot ernstig in zowel corpus en antrum, en de site met de hogere infiltratie werd beschouwd als het eindresultaat.

Het verzamelen van bloed.

Een monster veneus bloed (4 ml) werd uit alle patiënten. Opgeslagen serummonsters werden gebruikt voor IgG en IgM-antilichamen tegen EBV virale capside eiwitten (VCA), en IgG antilichamen tegen H analyseren. pylori
hele-celextracten en tegen CagA eiwit door enzymgekoppelde immunosorbent assay (ELISA).

Bepaling van anti-EBV-VCA antilichamen.

anti-EBV-VCA antilichamen werden bepaald onder toepassing van ELISA commerciële kits (HUMAN, Wiesbaden, Duitsland), voor IgG anti-VCA (catalogus 51204) en voor IgM anti-VCA (catalogus 51.104) volgens instructies van de fabrikant. Kort samengevat, 100 ul van de juiste patiënt serumverdunning (1: 100 tot 1:20 IgM en IgG) werden op de overeenkomstige goed met de VCA antigeen reeds bevestigd, en gedurende 1 uur (IgG) of 30 min (IgM ) bij 25 ° C. Vervolgens werden de putjes vier maal met wasbuffer en 100 gl peroxidase geconjugeerd anti-humaan IgG of IgM antilichaam van konijn werden toegevoegd en gedurende 30 minuten bij 25 ° C gewassen. Platen werden vervolgens vijf keer gewassen en 100 ui substraat reagens (3,3 ', 5,5' tetramethylbenzidin (TMB) - waterstofperoxide) werden toegevoegd en gedurende 15 min op 25 ° C in het donker. De reactie werd vervolgens gestopt met 100 gl stopoplossing (zwavelzuur 0,5 mol /l) en de platen werden afgelezen in een ELISA-lezer (Thermoscientific, Multiskan stijging) tot een absorptie van 450 nm. De vermelde waarde is het gemiddelde van twee onafhankelijke assays. Een subgroep van monsters werd uitgevoerd in viervoud met verschillende partijen van de ELISA kit controleren reproduceerbaarheid. Berekeningen voor antilichaamtiters werden uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant en de waarden worden vermeld als HU eenheden /ml. Een patiënt werd beschouwd als EBV seropositieve wanneer sera positief voor zowel IgG en /of IgM antilichamen getest.

Bepaling van antistoffen anti-geheel H. pylori
extracten en anti-CagA.

IgG antistoffen tegen H. pylori Kopen en CagA werden bepaald met behulp van ELISA-tests die eerder gevalideerd in een Mexicaanse bevolking [19]. Wells werden gecoat met ofwel een gesoniceerd extract van een mengsel van drie H.
pylori stammen afkomstig Mexican patiënten (0,5 ug /putje in 100 pl carbonaatbuffer pH 9,6) of met recombinant CagA (0,1 ug /putje in dezelfde buffer als hierboven) en geïncubeerd bij 4 ° een nacht. Vervolgens werden de platen geblokkeerd met 200 gl PBS-gelatine (0,1%) voor H. pylori
hele-extract en met PBS-melk (2,5%) voor CagA en geïncubeerd bij 4 ° een nacht. De sera werden verdund 1: 1000 voor de H. pylori Kopen en 1: 200 voor CagA en 100 gl werd per putje toegevoegd en gedurende één uur bij 37 ° C. Honderd pl van een 1: 1000 verdunning van anti-humaan IgG-antilichaam geconjugeerd met alkalische fosfatase toegevoegd en platen werden gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, waarna 100 pl p-nitrofenylfosfaat substraat (Sigma, St. Louis MO USA. No. 2770) in glycine-MgCl2-buffer ZnCl. Platen werden gelezen in een ELISA lezer bij een absorptie van 405 nm. Alle monsters werden geanalyseerd in duplo en elke plaat opgenomen vier positieve en vier negatieve sera monsters. Patiënten werden beschouwd als positief voor de H. pylori
antilichamen als ELISA eenheden waren ≥1.0, en voor CagA als ELISA eenheden waren ≥1.5, volgens de gevalideerde cut-offs [19].

Statistische analyse

De statistische verschillen van continue variabelen tussen groepen patiënten werden bepaald met t Electronics test van de Student of met de Mann-Whitney U test voor niet-normaal verdeelde variabelen. Verschillen tussen drie of meer continue variabelen werden vergeleken door one-way ANOVA gevolgd door Bonferroni test of de Kruskal-Wallis eendimensionale test, gevolgd door Mann-Whitney U test. De verschillen tussen de categorische variabelen werden geschat met behulp van de Chi-kwadraat ( X ^{2
) proef met Yate's continuïteitscorrectie of exact test de Fisher voor kleine steekproeven. Variabelen met meer dan twee categorieën werden geanalyseerd met behulp van Mantel-Haenszel X 2 hotels met lineaire tendens. Statistische significantie werd vastgesteld op p ≤ 0,05. De sterkte van associaties tussen groepen van de ontsteking rang en IgG anti-VCA werden geschat met behulp van de prevalentie ratio's (PR's) en 95% betrouwbaarheidsintervallen (CI's).}

Resultaten

Kenmerken van de onderzochte patiënten

333 gastric monsters van pediatrische patiënten met chronische buikpijn werden bestudeerd, 197 (59,2%) waren vrouwen en 136 (40,8%) mannen met een gemiddelde en de mediane leeftijd van 10,1 ± 3,7 (gemiddelde ± SD) en 10 jaar respectievelijk ( Table
1
). Alle patiënten werden gediagnosticeerd met niet-atrofische gastritis (NAG) door middel van histologisch onderzoek; de morfologie van de epitheelcellen niet atypisch en geen glandular atrofie gevonden. De frequentie van infectie door EBV was 64,3% en H. pylori
53,4%, terwijl 33,9% antistoffen gepresenteerd tegen CagA. Bij de meeste kinderen het maagslijmvlies gepresenteerd met een milde infiltratie van MN (78%) en geen infiltratie van PMN (75%); slechts 7,5% presenteerde een ernstige infiltratie van MN en 4,5% van de PMN cellen ( Table
1
). Vanwege het geringe aantal monsters met ernstige activiteit monsters met een diagnose van matige en ernstige gastritis werden gecombineerd voor de rest van de analyse. De seroprevalentie naar H. pylori Kopen en EBV in de bestudeerde kinderen naar leeftijd wordt beschreven in Table
S1
.

Mate van ontsteking en infectie met ofwel EBV of H . pylori

We identificeerden 214 kinderen met EBV-infectie [179 waren 35 IgG en IgM positief waren (7 alleen IgM en 28 IgM en IgG)], 9,8% van deze gevallen vertoonden een ernstige MN infiltratie en 13,1% een matig ernstige PMN infiltratie ( Table
2
). Alle van de 35 kinderen (28 + 7) positief voor IgM werden in primaire infectie beschouwd en gepresenteerd lichte ontsteking en geen activiteit. Anderzijds werden 178 kinderen besmet met H. pylori Kopen en van die 14% vertoonden ernstige MN infiltratie en 16,9% matig-ernstige PMN infiltratie. Van de 112 kinderen die besmet zijn met H. pylori cagA
+ stammen 18,8% had ernstige MN infiltratie en 24,1% matig-ernstige PMN infiltratie. Dat geen van de 66 kinderen zonder infectie gepresenteerd ernstige MN noch PMN infiltratie.

Significant hogere titers van anti-EBV-antilichamen bleken slechts mild PMN infiltratie, wat suggereert dat hogere anti-EBV antilichaam titers zijn niet indicatief meer ernstige ontsteking bij pediatrische gastritis ( Table
S2
). Anderzijds, een positieve correlatie van H. pylori
antilichaamtiters en de ernst gastritis waargenomen zoals eerder gerapporteerd [20], [21].

Mate van ontsteking van de interactie tussen infectie met EBV en H. pylori

We komende aangepakt of er een interactie tussen de besmetting met beide H. pylori Kopen en EBV, en deze analyse wordt gepresenteerd in Table
3
(zie ook figuur 1). We vonden dat het merendeel van de kinderen zonder infectie ( HP
- /EBV) en kinderen met slechts EBV-infectie ( HP
- /EBV +) had een milde MN infiltratie en geen PMN in het maagslijmvlies. Gevallen met matige MN en milde PMN cellen kwamen vaker voor bij patiënten met alleen H. pylori
infectie ( HP
+ /EBV) en met beide H. pylori Kopen en EBV-infectie ( HP
+ /+ EBV). In tegenstelling tot meer dan 80% van de gevallen met ernstige MN en matig-ernstige PMN infiltratie traden op bij patiënten met een co-infectie ( HP
+ /+ EBV).

Positieve interacties tussen H. pylori
CagA en EBV afhankelijk van de mate van ontsteking werden ook geanalyseerd en een soortgelijk resultaat werd waargenomen ( Tabel
3
), alleen H. pylori
CagA + /EBV + dubbele positieve patiënten significant geassocieerd met ernstige ontsteking zowel MN en PMN infiltraat (figuur 2). Deze resultaten beweren dat H. pylori
infectie alleen is niet voldoende om ernstige gastritis ontwikkelen.

Om het gecombineerde effect van gemengde EBV en H verder te bevestigen. pylori
infectie bepaalden wij het belang van de vereniging van mede-infectie met de gevallen waarin een ernstige MN of matig-ernstige PMN infiltratie ( Table
4
). In deze analyse, om te beoordelen of de waargenomen associatie van EBV en H.
pylori infectie met ernstige gastritis kan worden beïnvloed door leeftijd werden patiënten verdeeld in twee groepen van leeftijd overeenkomstig de mediaan: ≤10 (groep 1) en > 10 (groep 2) en prevalentie ratio (PR) werden gecorrigeerd door deze leeftijdsgroepen. Bij patiënten met een co-infectie ( HP
+ /+ EBV) werden vergeleken met patiënten zonder infectie ( HP
- /EBV) PR waarden voor ernstige MN en PMN infiltratie waren undefined omdat geen van de niet-geïnfecteerde kinderen ( HP
- /EBV) had ernstige MN of PMN infiltratie. Bij patiënten met een co-infectie ( HP
+ /+ EBV) werden vergeleken met patiënten met een enkele H. pylori
infectie ( HP
+ /EBV) PR voor ernstige infiltratie waren 2.2 voor MN en 4.1 voor PMN; dit laatste met statistische significantie (p = 0,01).

Bij de gevallen met co-infectie (CagA + /+ EBV) werden vergeleken met gevallen van slechts H. pylori
infectie ( HP
CagA- /EBV) PR waren 5.4 voor MN en 8,5 voor PMN. Ook wanneer patiënten met een co-infectie (CagA + /+ EBV) werden vergeleken met gevallen met een enkele H. pylori
CagA + infectie (CagA + /EBV-PR waren 3.0 voor MN en 7,2 voor PMN ( Table
4
). Het niveau van PMN infiltratie toonden ook statistisch significant ondersteunen dat co- infectie is noodzakelijk om ernstige gastritis ontwikkelen bij kinderen, en dus wijzen op een cruciale rol voor EBV, dat kan ook niet door de CagA virulentie factor (p = 0,003) worden verstrekt.

Discussie

H. pylori
infectie vroeg in het leven verworven tijdens de kindertijd en de aanwezigheid van de bacteriën induceert een ontstekingsreactie in het maagslijmvlies die meestal veroorzaakt geen ziekte. in sommige individuen chronische langdurige ontsteking triggers ernstige schade aan de maag epitheel waardoor het risico op precancereuze letsels, waardoor het risico verhogen om te eindigen met een levensbedreigende GC ontwikkelen.

voor de co-factoren die een ernstige inflammatoire reactie te bevorderen kan opleveren vroeg tijdens de kindertijd. De inflammatoire aard van GC geeft een cruciale rol voor een immunogeen middel en in overeenstemming hiermee GC is een kanker voornamelijk infectieuze etiologie. Hoewel de associatie van H. pylori
met GC en vroege ontstekingshaarden is goed gedocumenteerd, maar enkele studies hebben de deelname van EBV-infectie bij patiënten met gastritis, analyseerde drie van hen bij volwassenen ouder dan 40 jaar [22], [23], [24] en twee case reports bij jonge vrouwen van 18 [25] en 17 jaar [26]. Voor zover wij weten, de laatste is het enige geval van EBV en gastritis tot op heden in een pediatrische patiënt die een hoge serumspiegels van anti-VCA-antilichamen (IgG en IgM) werden gevonden. Andere studies hebben de aanwezigheid van EBV sequenties in monsters gastritis onderzocht. Een recent rapport gevonden EBV sequenties door middel van kwantitatieve PCR in 15/50 en 5/6 van de kinderen en volwassenen gastritis, respectievelijk [27]. Een andere recente studie bij volwassenen bleek dat ongeveer 90% (12/13) van chronische atrofische gastritis onderhavige EBV sequenties [28]. Tezamen ondersteunen deze gegevens een belangrijke rol voor EBV begin ontstekingsreacties van het maagslijmvlies.

Studies bij volwassenen met NPC hebben gevonden dat ziekteprogressie correleert met verhoogde antilichamen tegen EBV reactivatie antigenen [10], [16] , [17]. Onze hypothese was dat een soortgelijk verschijnsel kan optreden in GC en dat de studie van kinderen met EBV infectie kan helpen identificeren van patiënten met ernstige ontsteking in het maagslijmvlies, mogelijk een hoger risico precancereuze laesies. Antilichamen tegen eiwitten van de EBV lytische cyclus kunnen weerspiegelen hogere infectie van de bovenste spijsverteringskanaal epitheel en dus dienen als een marker voor de laesie progressie. Echter, toen we EBV-infectie geanalyseerd bij kinderen, hebben we niet de verwachte correlatie met ernstige gastritis observeren, en hogere niveaus van anti-EBV-antilichamen ofwel IgG of IgM, als gevolg van acute of chronische infecties, werden bij voorkeur in de gevallen met milde gastritis gevonden. Zo EBV enkele infectie niet de gevallen van ernstige gastritis uit te leggen.

Tot nu toe studies zijn beperkt tot H.
pylori infectie en hebben aangetoond dat bij kinderen wordt meestal geassocieerd met een lichte tot matige ontsteking (MN celinfiltratie) en een lichte tot afwezige activiteit (PMN infiltratie), hoewel een ernstige ontsteking en de activiteit wordt waargenomen in enkele gevallen . Toen we geanalyseerd co-infectie met zowel H. pylori Kopen en EBV we vonden dat kinderen besmet met pathogenen zowel de sterkste associatie met ernstige gastritis, zoals gemeten door ernstige infiltratie van MN (ontsteking) en PMN cellen (activiteit) in het maagslijmvlies. In tegenstelling tot patiënten HP
- /+ EBV bij voorkeur gepresenteerd lichte ontsteking (MN cel infiltratie) en geen activiteit (afwezigheid van PMN cellen); terwijl die HP
+ /EBV gepresenteerd matige ontsteking en milde activiteit. Onze resultaten suggereren dat co-infectie met EBV en H. pyori
noodzakelijk is om ernstige gastritis, ondersteunen een belangrijke rol voor EBV, althans bij kinderen. Dit verhoogde effect was ook het geval voor patiënten die geïnfecteerd zijn met H. pylori
CagA + stammen, reeds bekend zijn geassocieerd met een grotere virulentie en verhoogd risico op GC. In onze analyses kinderen geïnfecteerd zijn met CagA + /EBV + vertoonden een significant sterker met ernstige gastritis dan geïnfecteerd met CagA + /EBV voorts waaruit de noodzaak van EBV tot ernstige gastritis veroorzaken, zelfs in aanwezigheid van sterk pathogene H. pylori
CagA + stammen. Interessant is dat co-infectie door EBV en H. pylori
CagA negatieve stammen niet leiden tot ernstige stadia van gastritis, met het argument tegen EBV als aanvulling op de pathogenese van minder virulent CagA negatief H.
pylori stammen en dus nog ondersteunen het belang van CagA.

Er wordt gepostuleerd dat om epitheelcellen infecteren, moet eerst EBV verlaten B cel latentie stap veroorzaakt door expressie van transcriptionele factor ZTA, dat is de belangrijkste regisseur van de lytische cyclus. De extracellulaire signalen in het bovenste spijsverteringskanaal dat ZTA expressie veroorzaken zijn onbekend. CagA een oncoproteïne dat tussen talrijke gedocumenteerde functies veroorzaakt verlies van polariteit epitheelcellen, waardoor het transport van eiwitten basolaterale richting apicale gezicht [29]. Het kan zijn dat CagA signalering zou kunnen functioneren als trekker van het EBV lytische cyclus, en CagA geïnduceerd verlies van cel polariteit kan ook voorstander EBV tropisme voor epitheelcellen. Als argument tegen de laatste, zagen we meer pediatrische patiënten die geïnfecteerd zijn met EBV (214 gevallen) dan bij H. pylori
(178 gevallen), waarbij die infectie kunnen wijzen met de bacteriën niet noodzakelijkerwijs eerst optreden.

Het is belangrijk te bepalen hoe EBV en H. pylori
interactie in het maagslijmvlies in toekomstige studies. Twee mogelijke mechanismen voor ogen: de ene is eenvoudig door middel van additieve ontstekingsreacties veroorzaken toegenomen schade aan het weefsel. Een tweede mechanisme is door middel van meer intieme interactie tussen EBV en H. pylori
genen, bijv.
de bovengenoemde vermeende CagA en ZTA samenwerking. H. pylori
infectie is ook positief gekoppeld aan maag-lymfoom [30] ondersteunen verhoogde activering /signalering van B-cellen op doorreis in het maagslijmvlies mout. In dit scenario, een van de belangrijkste inductoren van ZTA expressie en de EBV lytische cyclus B celkweken is proteïnekinase C (PKC) [31], [32] en CagA is een bekende activator van dit kinase [33]. Ectopische expressie van CagA in transgene muizen ondersteunt dat dit eiwit het eerst beschreven bacteriële onco-eiwit en als zodanig gedraagt ​​zich zoals virale onco-eiwitten [8], [9]. Interessant, CagA en EBV oncogenen LMP1 en LMP2A trekker activering van NFKB en MAP kinasen belangrijke signaalwegen voor verhoogde overleving en celproliferatie tijdens oncogene transformatie [34], [35]. De gemeenschappelijke activatie van signaalwegen door zowel pathogenen suggereert een gemeenschappelijk mechanisme van infectie /transformatie van de maag epitheel.

Hoewel onze gegevens ondersteunen dat co-infectie van EBV met H. pylori
moet ernstige maagontsteking en activiteit veroorzaken, EBV eis lijkt groter te zijn voor inductie van ernstige activiteit in de gastrische mucosa. Ernstige activiteit wordt gegeven door een grote infiltratie van polymorfonucleaire cellen doordringt de lamina propria en de maagklieren, die op hun beurt activeren en scheiden pro-inflammatoire mediatoren, waardoor het verbeteren en in stand lokale ontstekingsreactie en het risico op ernstige en permanente schade aan het maagslijmvlies. In H.
pylori infectie, IL-8 lijkt de belangrijkste neutrofielen aantrekken van cytokinen [4], [36], [37] zijn. IL-1β gevonden overexpressie in NPC tumormonsters, een belangrijk cytokine PMN werven [38]. Het is mogelijk dat het gecombineerde rol van IL-8 en IL-1β resulteert in toegenomen activiteit waargenomen in EBV en H. pylori
co-geïnfecteerde patiënten.

Tot slot, onze resultaten suggereren sterk dat EBV is betrokken bij de pathofysiologie van ernstige maag-letsels bij kinderen die besmet zijn met H. pylori
. Onze resultaten suggereren ook dat bij afwezigheid van EBV infectie H. pylori
onvoldoende ernstige gastritis veroorzaken bij kinderen. Deze studie wijst op de noodzaak om gezamenlijk zowel pathogenen bestuderen om het mechanisme achter ernstige beschadiging van het maagslijmvlies vroeg in het leven, wat gevolgen heeft voor de juiste diagnose van de ziekte en de behandeling zou kunnen hebben begrepen; Ook kan het helpen om kinderen met een verhoogd risico op te sporen tot meer ernstige letsels op latere leeftijd presenteren.

Ondersteunende informatie
Tabel S1.
cumulatieve percentages van de gevallen en H. pylori Kopen en EBV seroprevalentie
doi:. 10.1371 /journal.pone.0062850.s001
(docx)
tabel S2.
Correlatie tussen antilichaamtiters en de gastritis ernst
doi:. 10.1371 /journal.pone.0062850.s002
(DOCX)

• PLoS ONE: Gerichte Schrapping van KCNE2 Oorzaken Gastritis cystica Profunda en Gastric neoplasie
• PLoS ONE: profilering van genexpressie in maagslijmvlies van Helicobacter pylori-geïnfecteerde en geïnfecteerde patiënten die chronische Oppervlakkige Gastritis